ESTUDIO MICROSCOPICO DE BACTERIAS

1. Objetivo:

El objetivo de esta prctica es resaltar la estructura de la bacteria con la

ayuda del microscopio que generalmente son necesarios de 400 a 1000
aumentos y tcnicas de coloracin para resaltar algunas estructuras de
su clula y contrastarles con el medio.

2. Materiales:

Microscopio
Portaobjetos
Cubreobjetos
Mechero
Aguja de kolle
Cepa
Vaselina o parafina
Agua y colorantes.

3. Marco Terico:

Tcnicas Para Resaltar la Estructura de las Bacterias

Preparacin en Fresco: la forma ms simple de preparar un

especmen para su examen microscpico es hacer una preparacin en
fresco. Existen dos tcnicas, una preparacin en fresco simple (entre
porta y cubre objeto), que consiste en preparar una gota de lquido con

los microorganismos sobre un portaobjeto y acontinuacin cubrirla

con un cubreobjetos. Una preparacin con gota pendiente se realiza
colocando una gota del material en un cubreobjetos y cubriendolo con
un portaobjetos (invertido) con una excavacin central (portaobjetos
excavado).

Tincin

Negativa:

Algunas

bacterias

estan

rodeadas

por

una

estructura protectora denominada cpsula. Para ponar de manifiesto

la presencia de una cpsula se untiliza una tcnica denominada
tincin negativa, esta tcnica revela la presencia de cpsulas; para ello
se utiliza tinta china o nigrosina para teir una preparacin en fresco
del especimen, la partcula del colorante no puede penetrar en la
cpsula, que se observa como una regin clara alrededor de la clula.

Coloracin Gram: La tcnica de la tincin gram fue desarrolloda por el

bacterilogo dans Christian Gram en 1884, esta tincin clasifica las
bacterias en dos grupos: Gram positiva y gram negativa, latcnica
incluye tincin primaria, de coloracin y tincin de contraste.

Microscopa ptica: Otras formas de lograr el contraste

El microscopio de campo claro el el ms utilizado en los laboratorios de

clnica y las tinciones son los mejores mtodos para aumentar en este tipo
de microscopios. Pero con los aos, se han perfeccionado microscopios
pticos compuestos que son capaces de aumentar el contraste sin
necesidad de teir el espcimen. Estos microscopios son de contraste de
fases, campo oscuro, fluoroscencia y Normarsky.

Microscopa de Contraste de Fases

El microscopio de contraste de fases proporciona una imagen clara y

detallada de clulas vivas sin teir. En un microscopio ptico ordinario, el
contraste se debe a que los materiales distintos absorben diferentes
cantidades de luz. Sin embargo, en el microscopio de contraste de fases se
debe a los distintos ndices de refraccin entre las partes de los
microorganismos y el fondo. Las nicas diferencias estructurales entre un
microscopio ptico ordinario y uno de contraste de fases son los sistemas
de las lentes del objetivo y del condensador, que en el segundo estn
dotados de unos anillos opacos especiales.
El microscopio de contraste de fases se fundamenta en el hecho conocido
de que las ondas de luz viajan a distintas velocidades en los materiales
que poseen ndices de refraccin diferentes. Por especies que existen en la
naturaleza, pueden cultivarse en el laboratorio.
Se

pueden

tomar

muestras

de

suelo

contar

el

nmero

de

microorganismos con la ayuda de un microscopio. Si posteriormente se

cultivan esas muestras, crecern menos de la mitad de los organismos
observados, independientemente de la tcnica que se utilice.

4. Procedimiento:

a) Para preparacin en fresco (gota pendiente)

Colocar una gota de la suspencin bacteriana en un cubreobjetos
previamente hacer un crculo alrededor con vaselina, que actua como
sellador.

Sobre el cubreobjetos se coloca un portaobjetos con una excavacin

central que queda adherido gracias a la vaselina.
Luego se observa en el microscopio.

b) Para Tincin negativa

En un portaobjeto se coloca una gota de agua y el microorganismo
sobre esta se le agrega lla nigrosina.
Posteriormente con otro portaobjeto inclinado con un ngulo de 45
arrastrar.
Dejar secar y posteriormente observar en el microscopio.

c) Para coloracin Gram

En un portaobjeto colocar una gota de agua y el microorganismo,
dejar que se secar el agua.
Luego agregar cristal violeta dejar reposar por 1 min, lavar
Agregar el lugol, reposar por 1min y lavar
Agregar el alcohol, reposar por 30 seg, y lavar
Agregar la saprafina, reposar por 30 seg, y lavar
Llevar al microscopio y observar.

BIBLIOGRAFIA:

Introduccin a la Microbiologa

John L Ingrahan

Catherine A Ingrahan
Cdigo

576 I 53 1997

UNIVERSIDAD NACIONAL
FEDERICO VILLARREAL
Facultad
Oceanografa Pesquera y CC.AA.

Escuela
Ingeniera Pesquera
Integrantes
Lizana Marcas Ruben
Valencia Ramn Jinno Ivanof
Nieves Valle Jesus
Tern Arru Jos Luis
Dextre Chinchayan Ricardo
Caicho Bustamante Luis
Curso
Microbiologa

LIMA PERU
UNFV AMIGAS
Carla L. C. H.
4646062 7204515
Emma
3890052
Marisol
3923075
Yahayra
5369608
Miriam (Pro)
5511290
Carola-Rosa
7322440
Myela
3927111
Sra: Doris
4451995 - 8573235
Milagros (Estrella)
9735168
Miriam (Quivarachi)
4931618

Mirenia Guadalupe Bigueras 3885009

Betsy (Gracilazo-Odontologia) 3870779
Vernica (VMT)
2913153
Ana Colina
9864960-4874330
Rosly
4239278-4319428
Jacqueline(San Martn)
8567604
Roxana Mendoza
4248434
Mnica Isla
2766597
Rosario Martnez
4771743
Blenny Arones
5341257

Sonia
5366097
Masiel
4575351
Xiomara Lezama
4582338
Leydi
5431781
Pamela
5440415
Gina
5373607
Mariela,Sindy
9289696
Lizet Crdenas
4941028
Dayanne
9014609
Sara
8615869
Sharo Fernndez P.
5571736
Milagros Vasquez Gil
5365761
Lizet (Cantante)
4353508
Ana Melva
5784488
Laura Monroy
8945284
Sandra
2517567
Miriam (Rimac)
4824974
Pilar
2511241
Gisela Loly Huapalla
5486013
Guiliana Hermosa
5362271
ngela
9677205 - 3888846
Tania
2937300
Brenda Infante
4822087
Susana (Sta Luzmila)
5368685
Lecenia
3871015
Evelyn Huaman
5361825
Alexandra
5855777
Karina
7442374
Marisol (okey)
4665857
Sonia (Tia Maruja)
2835893
Rene (EPIA)
4858266
Yessica (Odontologa)
5369284
Graciela
8089471
Yaqueline (ing. Ambiental) 7452695
Karen
9123094
Mery 18 Radio Moda
9425809
Rosa (primas)
8824977
Wendy
8763447

Patricia Ramrez
5214407
Jessica
5581276
Gusela
5645363
Daysi
8079701
Farah
4595569
Cristina Castro Mora
4497982
Patricia Checya
5747550
Nicole
5364738
Silvia
9119186
Doris
5367621
Cintia
5583410 - 5580138
Claudia Susanibar P.
4206927
Mayra
5365047
Irene
5583354
Vilma Romero
5412407
Edith
5461032
Maribel Cuellar
5674844
Lizet Sandoval
5410790
Maria Elena 074-305357 - 074-309097
Sandra (9-6:30pm)
7512538
Giovanna (Contadora)
9307551
Ana
5851508
Yasmn Alba
4951569
Maribel Velarde
9666170
Mariela Zanetti
9872733
Katia Jimnez
5571915
Roxana
2871998
Rosa (4 COLLIQUE)
5582818
Yanet (Torres)
8522232
Sandra (Tia Nelly)
2741012
Susana (Sta. Luzmila)
5368685
Edelmira (Odontologa)
5501971
Scarly
5580208
Daysi (VMT)
9125461
Sara Aparicio
525203 - 8691084
Nathaly ( Moda )
4418241
Yanet ( HONEY)
5233364
Yanet (Jasn)
5361550

UNI - AMIGOS - AMIGAS

Rubn Arias Rojas
9272160
Erica
5412327-7335924
Osvaldo Aparicio
5583386
Omar, Milton Mor
5431079
Willian Cama
5250852
Abel Cadillo
5364309 - 5368161
Jimmy
5422788
Luis
4274855
Richard Carvajal
5369539
Elvis
5688816
Roly
2580833
Erick (Jordi)
5400020
Guillermo
3627705

Willy
9238958 3878559
Augusto Vera
5432302
Gustavo Valverde
5402740
Hernn
5431913
Jefersoon
5216885 9008245
Javier
7222612 - 5260080
Carlos Loyola
3272613
Luis Acevedo
2831558
Prof. Torres
4811806
Zea
7320706 - 9958707
Erick Pacheco
7335924
David Coaguila (Fisica)
4706614
Cesar
8522388 2781364

U.N.F.V AMIGOS
Pedro ngeles
Jos Zapana
Freddy Tintaya
Agustn
Pavel
Carlos Vsquez
Carlos Herrera

5402871-7255294
3540174-9891389
4597159
5412438
3486621
4368807
5443208

Gerardo Villegas
Romel Sarmiento
Jos Maza
Edwin Guerra
Alex Quijano
Moiss Amarillo
Roberto Miranda

9870926
5333253
3281342
4582053 - 8811515
5367776
3480540
5572236

Aracelio
3813398
Ralph
3871025
Alexis Preciado
4448149
Flix Zubieta
3327815
Gabriel
5368520
Emilio Contreras
2766963
Walter Llanos
3304390
Felio Huamani
5363328
Flix Cusicahua
2875050
Ivn Paredes
3515351
Martn Cornejo
2471585
Arturo Aviar
9633851
Akira
3628229
Eduardo Vsquez
8913050 - 9733049
Jose Guzmn
5521000
Jos Tern
5362582
Richard
5584163
Ricardo(UPC)
4856709
Jhon Chinchay
5752192
Emilio Silva
074-641449
Jorge Ortega
9329869
Victor Farromeque
5622878
Henry (Kukin)
2920817
Poll (Viejo)
2924227
Fernando (Bartman)
5364169
Sergio
5854153
Raul Pareja
7430589 5336186
Omar Malma
3750198
Olger Chirinos
3771118
Eddy Granda
9732667
Juan Macazana
9678963
Ronald (Koby)
8641107 - 4931063
Edi Arrivasplata
4606978
Pierrs
5470830
Robert (Bam-Bam)
9017650
Edwin Reyes (unfv-civil)
5370627
Atilio (unfv-civil)
4272164
Ral Santos (chalo)
5226099
Carlos Vega
4890141
Tcnico Manolo (isla pachacamac) 7288219
Laboratorio Artes de Pesca
4443474
Willy
5364847
Jordan
5374248
Leonel (Telefnica)
8949607
Fernando (Raza)
7424622
Marco Villegas (Ing. Industrial)
9751816
Jose Cepero
5580354
Carlos (Odontologa)
5333493
Javier Neyra
5685285
Jorge(Encuesta)
9343689
Jose Bedoya (OF:Marina)
7390956
Gustavo (Auxiliar)
9146679
Cesar Barrera (CIVIL)
4648065
Gustavo Valverde (CIVIL)
7410772
Percy Llanto (CIVIL)
8773107
Felipe (UNAC-INGRESO)
8862472
AUSTRAL GROUP S.A.A
OF. De Flotas: 4655051 4293628 Fax 4656668
Planta: Paita 611281 Fax 611476
Pisco
533124 533126
Fax 533122
Coishco 690329 Fax 690340
Chancay
771890 771702
Fax 771632
Huarmey 600009 Fax 600305
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791415 791034 791479 Fax 791169
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Ing. Manuel Seminario
Ing Jorge Angeles

834*2590
8411331
2646320
5782889
9177284-4282465
4591036 - 4452087
(074) 933783
5825130