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REPBLICA BOLIVARIANA DE VENEZUELA

UNIVERSIDAD DEL ZULIA


FACULTAD DE MEDICINA
ESCUELA DE MEDICINA
UNIDAD CURRICULAR: BACTERIOLOGA Y VIROLOGA

Tema 9:
Otras bacterias de importancia clnica
Lic. Liliana Gmez Gamboa (M.Sc.)

MARACAIBO, JULIO 2014

Corynebacterium
Gardnerella
Listeria
Bacillus

Bacilos
Gram
positivo

Bacterias
singulares

Tema 9: Otras
bacterias de
importancia
clnica

Bacilos
curvos o
espirales

Micobacterias

Bacterias
Anaerobias
estrictas

Corynebacterium

Familia
Corynebacteriaceae

Bacterionema
Caseobacter
Corynebacterium
Turicella

Gnero Corynebacterium

Del griego korine, mazo


108 especies
11 subespecies

Corynebacterium
diphtheriae
Produjo grandes epidemias en los siglos XVI y XVII,
pero en esta poca no se diferenciaba con claridad
la difteria de otras enfermedades respiratorias altas
denominadas comnmente "catarro".
1821 Pierre Bretonneau (antomo patlogo)
describi las caractersticas clnicas particulares de
la difteria para poderla diferenciar de otras
enfermedades respiratorias.

En 1883 Klebs descubri cocos y bacilos en


cadenas en los cortes microscpicos de membranas
diftricas.

Corynebacterium diphtheriae

Aisl por primera vez el bacilo diftrico en


cultivo puro, con la ayuda de un medio de cultivo
de su propia creacin que todava se usa en la
actualidad.
Demostr que el microorganismo poda
reproducir
la
enfermedad
en
cobayos
(postulados de Koch) y que se trataba del agente
etiolgico de la difteria.

Corynebacterium diphtheriae

Estableci que el estado de portador era un fenmeno importante


en el mantenimiento y diseminacin de la enfermedad utilizando
su medio de cultivo, demostr que los individuos sanos podan
transportar los microorganismos en su garganta de forma
asintomtica.
Demostr que el microorganismo permaneca en la membrana sin
invadir los tejidos adyacentes o sitios ms lejanos y postul que las
manifestaciones neurolgicas y cardacas de la enfermedad eran
causadas por una sustancia txica elaborada por el germen.

Corynebacterium diphtheriae
En 1888 Roux y Yersin (Institutito Pasteur) confirmaron
el postulado de Leffler al demostrar que filtrados libres
de bacterias de los cultivos de bacilos diftricos eran
capaces de matar a los cobayos.

En 1890 Von Berhing (Laboratorio de Koch) demostr


que luego de la infeccin, el antisuero contra la toxina
poda proteger a los animales infectados de la muerte.
En 1894 Roux demostr que la administracin de
antitoxina haba reducido la mortalidad por difteria entre
los hurfanos de Paris del 51% al 24%.

Corynebacterium diphtheriae
En 1913 Teobald Smith y Von Berhing vacunaron
exitosamente a nios con una mezcla de toxina y
antitoxina.
En 1923 el instituto Pasteur comprob que la
exposicin de la toxina a la formalina y su
calentamiento la volvan atxica para los
receptores, sin que por ello perdiera su capacidad
para inducir respuesta de anticuerpos.

Corynebacterium diphtheriae
En 1924 trabajos clnicos demostraron que la
inyeccin de este toxoide induca un nivel
elevado de proteccin entre los receptores.
Durante la dcada de 1950 Freeman, Groman,
Barksale, Pappenheimer y otros demostraron
que
la
produccin
de
toxina
por
Corynebacterium diphtheriae dependa de la
presencia de un fago -lisognico y durante la
dcada siguiente qued esclarecido el
mecanismo por el cual la toxina inhiba la
sntesis proteica.

Gnero Corynebacterium

La pared celular contiene cido meso-diaminopimlico como


diaminocido y cadenas cortas de cidos miclicos de 22 a 36
tomos de carbono.

El contenido G+C varia de 46 a 76 mol%.

Al colorearse con Gram, se observan como bacilos Gram positivo


ligeramente curvos, sus lados no son paralelos y sus extremos
pueden ser ligeramente ms anchos, dndoles en ocasiones forma
de raqueta, esta morfologa se observa en los verdaderos
Corynebacterium.

En medios lquidos se pueden


observar como clulas aisladas, en
pares, en forma de V, formando
empalizadas o en grupos formado
letras chinas.

Son catalasa positiva y las especies


mdicamente relevantes son no
motiles

Hbitat Natural

La mayora de las especies de Corynebacterium forman


parte de la flora normal de piel y mucosas de humanos
y mamferos.

C. diphtheriae puede aislarse de la nasofaringe y de


lesiones en piel, lo que actualmente representa el
principal reservorio para la diseminacin de la difteria.

Las bacterias corineformes que predominan en la


orofaringe son C. durum y Rothia dentocariosa.

C. auris y Turicella otitidis poseen una preferencia casi


exclusiva por el conducto auditivo externo.

C. glucuronolyticum se asla casi exclusivamente de


muestras genitourinarias de humanos.

La importancia clnica de las bacterias corineformes


aisladas de muestras clnicas frecuentemente es confusa,
debido principalmente al hbitat natural de estos
microorganismos, que puede conducir a su aislamiento
en muestras mal tomadas.

Los corineformes aislados deben ser identificados hasta


el nivel de especie :
De sitios anatmicos normalmente estriles.
De muestras clnicas tomadas adecuadamente si son el
microorganismo predominante.

De muestras de orina en cultivo puro con un contaje > 104


UFC/ml, o como microorganismo predominante con un
contaje > 105 UFC/ml.

Importancia Clnica

El significado clnico de los corineformes est fuertemente


relacionado a los siguientes hallazgos:
Mltiples muestras positivas para el mismo corineforme.
En el examen directo con Gram de la muestra se observa el
corineforme y tambin est presente una fuerte respuesta
leucocitaria.
Los otros microorganismos aislados de la muestra son de baja
patogenicidad.

Corynebacterium diphtheriae
Es un bacilo pleomorfo (0,3 a 0,8 x 1 a 8 m) que se tie
de manera irregular (grnulos metacromticos).
Esta especie se subdivide en cuatro biotipos en funcin de
la morfologa de sus colonias y sus propiedades
bioqumicas.
Diferentes cepas pueden o no producir la toxina diftrica
/DT)

C. diphtheriae es un modelo clsico de


virulencia bacteriana. La toxicidad que se
observa es atribuida directamente a una
exotoxina secretada por las bacterias en el
foco de la infeccin. El microorganismo no
necesita penetrar en la sangre para producir
los sntomas sistmicos de la enfermedad.

Corynebacterium diphtheriae
El gen tox que codifica la exotoxina, se introduce en las cepas
mediante un bacterifago lisognico.
Son necesarios dos pasos para que se secrete el producto
activo del gen: 1) escisin proteoltica de la secuencia
adelantada de la protena tox durante la secrecin desde la
pared bacteriana, y 2) escisin de la molcula de la toxina en
dos polipptidos (A y B) que permanecen unidos mediante un
enlace disulfuro. Esta protena de 58.300 Da es un ejemplo de
la clsica exotoxina A-B.

Factor de crecimiento
epidrmico de unin a la
heparina

Tomado de: Ryan y col. Sherris Microbiologa Mdica. 5ta ed. 2011. McGrawHill.

Corynebacterium diphtheriae
Existen tres regiones funcionales en la molcula de
toxina, una regin de unin al receptor, una regin de
translocacin en la subunidad B y una regin
cataltica en la subunidad A. El receptor de la toxina
es el factor de crecimiento epidrmico de unin a la
heparina, que est presente en la superficie de
muchas clulas eucariotas, fundamentalmente en el
corazn y en las clulas nerviosas; su presencia
explica los sntomas cardacos y neurolgicos que se
observan en los pacientes con difteria grave.

Corynebacterium diphtheriae
Ambas subunidades ingresan en la clula dentro de la vacuola endoctica.
En el bajo pH de la vacuola, la toxina se desenvuelve, exponiendo los sitios
que facilitan la translocacin de la subunidad A del fagosoma al citosol.
La subunidad A finaliza la sntesis de protenas de dicha clula al inactivar el
factor de elongacin 2 (EF-2), que transfiere el ARN t del polipeptidil de sitios
aceptores a donadores en el ribosoma de la clula hospedadora (factor
necesario para el movimiento de las nuevas cadenas peptdicas que se estn
formando en los ribosomas). La accin especfica de la subunidad A es
desactivar el EF-2 mediante la ribosilacin de ADP (ADPR), que apaga la
sntesis de protenas.

Corynebacterium diphtheriae
Debido a que el recambio de EF-2 es muy lento y a que slo existe
alrededor de una molcula por ribosoma en cada clula, se ha
estimado que una nica molcula de exotoxina puede inactivar todo
el contenido de EF-2 en una clula para interrumpir por completo la
sntesis de protenas en la clula del organismo anfitrin.

Corynebacterium diphtheriae
La sntesis de la toxina est regulada por un elemento
codificado en un cromosoma, el represor de la toxina
diftrica (DTxR). Esta protena, que se activa en presencia
de concentraciones elevadas de hierro, se puede unir al
operador del gen de la toxina y evitar la produccin de la
misma.

Epidemiologa de C. diphtheriae
La difteria es una enfermedad de distribucin universal,
fundamentalmente en las zonas urbanas desfavorecidas
donde existen condiciones de hacinamiento y el nivel de
inmunidad inducido por la vacuna es bajo.
C. diphtheriae se mantiene en la poblacin como
consecuencia del estado de portador asintomtico en la
orofaringe o en la piel de las personas inmunizadas (por la
exposicin a C. diphtheriae o vacunacin). Se transmite de
una persona a otra a travs de gotitas respiratorias o
mediante contacto cutneo. El ser humano representa el
nico reservorio conocido de este microorganismo.

Enfermedades clnicas de

C. diphtheriae

La presentacin clnica de la difteria


determinada por:
1) el lugar de la infeccin;
2) el estado inmunitario del paciente y
3) la virulencia del microorganismo.

viene

La exposicin a C. diphtheriae puede originar colonizacin


asintomtica de las personas con inmunidad completa,
enfermedad
respiratoria
leve
en
las
personas
parcialmente inmunizadas o enfermedad fulminante, y
algunas veces mortal, en los pacientes no inmunizados.

DIFTERIA RESPIRATORIA
DIFTERIA CUTNEA

Enfermedades clnicas de

C. diphtheriae

Enfermedades clnicas de

C. diphtheriae

DIAGNSTICO DE LABORATORIO

DIAGNSTICO DE LABORATORIO

DIAGNSTICO DE LABORATORIO

Microscopa

Cultivo

Pruebas de
toxigenicidad

DIAGNSTICO DE LABORATORIO

Cultivo

Muestras: nasofaringe y garganta.

Pruebas para la Identificacin de Gnero:

Catalasa
Metabolismo Fermentativo/Oxidativo
Reduccin de Nitratos
Ureasa
Hidrlisis de la Esculina
Lipofilismo
Pirazinamidasa
Reaccin de CAMP
Produccin de cido a partir de:

Glucosa
Maltosa
Sucrosa
Manitol
Xilosa

PRUEBAS DE TOXIGENICIDAD
Prueba de Elek anlisis de inmunodifusin in vitro.
Ensayo de neutralizacin de cultivo tisular que emplea una
antitoxina especfica.
Ensayo de neutralizacin in vivo (cobayos).
Prueba de amplificacin de cidos nucleicos (deteccin del
gen tox en cepas y muestras clnicas).

No se deben pasar por alto las cepas no toxignicas de


C. diphtheriae, ya que se pueden asociar a diversas enfermedades
con significacin clnica, como septicemia, endocarditis, artritis
sptica, osteomielitis y la formacin de abscesos.

Pruebas de Susceptibilidad

La susceptibilidad a los antimicrobianos en los corineformes


no es predecible, por lo que deben realizarse pruebas de
susceptibilidad nicamente a los aislados clnicamente
significantes.

Debido a la emergencia de la resistencia a vancomicina en


Gram positivos, se hace inapropiado recomendar
glicopptidos como drogas de primera lnea para el
tratamiento de infecciones causadas por corineformes.

Algunos corineformes poseen resistencia


vancomicina (Microbacterium resistens).

El CLSI no posee lineamientos para la realizacin de pruebas


de susceptibilidad para este grupo de microorganismos.

intrnseca

Tratamiento, prevencin y control


ASPECTO MS IMPORTANTE DEL TRATAMIENTO DE LA DIFTERIA
administracin precoz de la antitoxina diftrica con el fin de
neutralizar de forma especfica la exotoxina antes de que esta se
una a la clula del organismo anfitrin. La muerte celular es
inevitable tras la internalizacin de la toxina.

TRATAMIENTO ANTIBITICO penicilina o eritromicina para


destruir las clulas de C. diphtherae e inhibir la produccin de
exotoxina.
TAMBIN ES IMPORTANTE: reposo en cama, el aislamiento para
evitar una diseminacin secundaria y, en los pacientes con difteria
respiratoria, el mantenimiento de la permeabilidad de la va area.

Tratamiento, prevencin y control


La vacunacin con el toxoide es necesaria tras la recuperacin del
paciente, ya que un gran nmero de sujetos no logra fabricar anticuerpos
protectores con posterioridad a una infeccin natural.

La difteria sintomtica se puede prevenir mediante la vacunacin


activa de las personas con toxoide diftrico.
El toxoide, no txico e inmunognico, se prepara tratando la toxina con
formalina. Inicialmente, los nios reciben cinco inyecciones de esta
preparacin con antgenos del ttanos y de la tos ferina (vacuna DPT) a los
2, 4, 6,15 y 18 meses de vida, as como a las 4 y 6 aos. Despus de esta
edad, se recomienda la administracin de vacunaciones de recuerdo con el
toxoide diftrico combinado con el toxoide tetnico cada 10 aos. Se puede
determinar la concentracin de anticuerpos antitoxina srica por medio de
una prueba de neutralizacin de piel de conejo o clula Vero.

No est relacionada genticamente con ninguno de los gneros de


Bacilos Gram positivos; esta remotamente relacionada con
Bifidobacterium.
Es la nica especie perteneciente al gnero Gardnerella.
Posee una capa de peptidoglicano similar a la de los Gram positivo,
pero esta capa es mucho ms delgada.
Lisina es el diaminocido de la pared celular y su contenido G+C es de
42-44 mol%.
A la coloracin de Gram se muestran como bacilos o cocobacilos Gram
variable.
Son catalasa negativa, no motiles y un metabolismo fermentativo lento.

Gardnerella vaginalis

Gardnerella vaginalis forma parte de la flora anorectal de


individuos sanos de ambos sexos; tambin forma parte de la
flora vaginal endgena de la mujer en edad reproductiva.

El pH ptimo de crecimiento est entre 6 y 7.

Este microorganismo puede ser recuperado de la uretra de


hombres pareja de mujeres con vaginosis bacteriana.

Est asociada con vaginosis bacteriana y su rol en esta


entidad clnica es controversial.

En mujeres embarazadas la vaginosis bacteriana puede


conducir a parto pretermino, ruptura prematura de
membranas y corioamnionitis.

Tambin se ha recuperado de sangre de pacientes con fiebre


postparto o postabortal y puede ocasionar infecciones en el
recin nacido.

Gardnerella vaginalis

Infecciones serias en otras localizaciones diferentes al


tracto genital y complicaciones obsttricas son raras,
pero se han reportado.

Muestras clnicas

Aislamiento e identificacin:
Directo de secreciones vaginales
Presencia de clulas clave
Presencia de flora mixta, predominantemente Gram negativos
pequeos (Prevotella y Porphyromonas)
Bacilos y cocobacilos Gram variable (G. vaginalis)
Lactobacillus spp. ausentes o muy escasos.

Test de aminas (KOH 10%)


Identificacin de biotipos (8)

Pruebas de Susceptibilidad
El metronidazol es la droga de eleccin.

Las infecciones sistmicas producidas por


Gardnerella vaginalis nicamente, pueden
tratarse con ampicilina o amoxicilina ya que la
produccin de betalactamasas no se ha
observado hasta el momento.
No se recomienda la realizacin de pruebas de
susceptibilidad y no existen lineamientos para
su realizacin e interpretacin.

Listeria

Pertenece a la Familia Listeriaceae (Brochothrix y Listeria).

Especies:
L. monocytogenes (hombre)
Listeria ivanovii (animales)
Listeria ivanovii subsp. ivanovii
Listeria ivanovii subsp. londoniensis

L. innocua
L. seeligeri
L. welshimeri
L. grayi

Bacilos Gram positivo cortos, regulares, no ramificados


dispuestos solos o en cadenas.

Mviles a 28 C por la presencia de 1 a 5 flagelos peritricos,


pero son muy poco motiles a 37C

Listeria

Temperatura ptima de crecimiento: entre 30 y 37 C; pueden


crecer a 4 C.

Son anaerbicos facultativos, generalmente catalasa positiva


y oxidasa negativa, producen cido a partir de D-glucosa y
otros carbohidratos.

Son Voges-Proskauer, rojo de metilo y esculina positiva.

Son urea, gelatina, indol y H2S negativo.

Su pared celular posee m-DAP y cido lipoteicoico, pero no


cido miclico.

Contenido G+C 36-42 mol%.

Hbitat Natural

Las especies de Listeria estn ampliamente distribuidas en la


naturaleza, se ha aislado de suelo, materia vegetal en
descomposicin, granos, aguas, aguas servidas, animales y
alimentos (pollos y gallinas frescos y congelados, carnes
frescas y procesadas, leche cruda, queso), desechos de
mataderos y portadores animales humanos y asintomticos.

L. monocytogenes ha sido aislada de numerosas especies


de mamferos, aves, peces, crustceos e insectos.

Debido a su amplia diseminacin, L. monocytogenes posee


muchas oportunidades de entrar en los ambientes de
produccin y procesamiento de alimentos, y su habilidad de
crecer a 4 C, le permite producir enfermedad en personas
que ingieren alimentos colonizados.

FACTORES DE VIRULENCIA
Toxina (Listeriolisina O)
Hemolisinas
Fosfolipasas
ActA
Internalinas
Otros factores de virulencia: p60, factores
antioxidantes,
consumo de iones metales,
mediadores de respuesta al stress.

Patogenia e inmunidad

L. monocytogenes es un patgeno facultativo


intracelular que puede crecer en los macrfagos, las
clulas epiteliales y los fibroblastos en cultivo.
Los estudios con modelos animales han puesto de
manifiesto que esta infeccin se inicia en los
enterocitos o en las clulas M de las placas de Peyer.

Patogenia e inmunidad
Su entrada en las clulas no fagocticas est mediada por
seis o ms protenas ricas en leucina, las internalinas (p. ej.,
InlA, InlB, InlC), que interaccionan con los receptores
glucoproteicos de la superficie de las clulas del organismo
anfitrin.

Despus de penetrar en las clulas, el pH cido del


fagolisosoma que rodea a las bacterias activa una toxina
bacteriana (Iisteriolisina O) y dos enzimas diferentes de
fosfolipasa C, lo que conlleva la liberacin de las bacterias en el
citosol de la clula.

Patogenia e inmunidad

Las bacterias se replican y posteriormente se mueven a


travs de la clula hasta la membrana celular. Este
movimiento est mediado por una protena bacteriana, ActA,
la cual se localiza en la superficie celular en un extremo de la
bacteria y coordina el ensamblaje de la actina. Por tanto, la
bacteria es empujada hacia la membrana celular, donde se
forma una protrusin (filpodo) que obliga a la bacteria a
pasar a la clula adyacente.

Patogenia e inmunidad
Una vez que la bacteria es ingerida por la clula
adyacente, se repite el proceso de lisis fagolisosmica,
replicacin bacteriana y movimiento direccional. La
entrada en los macrfagos despus de haber atravesado
las clulas que recubren el intestino conduce a las
bacterias hasta el hgado y el bazo, lo que produce la
diseminacin de la enfermedad.

Invasin

LISTERIOSIS. VISTA CELULAR

Tomado de: Ryan y col. Sherris Microbiologa Mdica. 5ta ed. 2011. McGrawHill.

Patogenia e inmunidad
La inmunidad humoral es poco importante en el desarrollo de las
infecciones por L. monocytogenes. La bacteria se replica en los
macrfagos y se mueve en el interior de las clulas, evitando as la
eliminacin mediada por anticuerpos.
Por este motivo, pacientes con deficiencias de la inmunidad celular,
pero no de la humoral, son especialmente susceptibles a las infecciones
graves.

Importancia Clnica
En adultos no embarazados, L. monocytogenes
produce principalmente meningitis, encefalitis y
septicemia.

Individuos ancianos o personas con respuesta


inmunitaria celular disminuida son especialmente
susceptibles.
L. monocytogenes posee un elevado tropismo por
el sistema nervioso central, lo que produce
enfermedades severas con una elevada tasa de
mortalidad (20-50%) o secuelas neurolgicas entre
los sobrevivientes.

Importancia Clnica

En mujeres embarazadas produce una


enfermedad bacterimica tipo influenza que,
si no es tratada, puede conducir a
placentitis y amnionitis e infeccin del feto,
lo que resulta en abortos y nacimientos
prematuros, ya que el microorganismo es
capaz de atravesar la placenta.

Importancia Clnica
DIAGNSTICO PRECOZ Deteccin de L.
monocytogenes en sangre de la madre y en
diferentes muestras
del recin nacido (LCR,
sangre,
lquido
amnitico,
secreciones
respiratorias, placenta, heridas cutneas, aspirado
gstrico o meconio). La observacin microscpica
de bacilos Gram positivo en estas muestras es de
invaluable ayuda en el diagnstico temprano de
esta patologa.

Importancia Clnica

Raramente
ocurren
Infecciones
localizadas
despus de un episodio de bacteriemia, sin
embargo, se ha descrito listeriosis primaria cutnea
con o sin bacteriemia en veterinarios y trabajadores
del campo, quienes adquieren la enfermedad a
travs del contacto con tejidos animales infectados.

Importancia Clnica
Infecciones como endocarditis, artritis, abscesos
intrabdominales,
endoftalmitis
e
infecciones
pleuropulmonares se han descrito infrecuentemente.

Se asla de la tierra, el agua, la vegetacin y de varios


animales, incluyendo al ser humano (portadores
gastrointestinales de bajo grado).

Epidemiologa
La enfermedad se asocia con el consumo de alimentos
contaminados (p. ej., queso no curado, leche, pavo, vegetales
crudos [especialmente repollo]) o con la diseminacin
transplacentaria de la madre al neonato; los casos espordicos
y epidmicos ocurren durante todo el ao pero tienen un mximo
en los meses ms clidos.

Los jvenes, los ancianos y las mujeres gestantes, as como los


pacientes con defectos de la inmunidad celular, tienen riesgo de
padecer esta enfermedad.

Diagnstico e Identificacin
Seguridad en el laboratorio.
Muestras
Clnicas
Alimentos
Aislamiento

Cultivo
Deteccin rpida

Diagnstico e Identificacin

Identificacin
Gnero:
Bacilos Gram positivo
Motilidad en vueltas de payaso en gota pendiente
Catalasa positiva
Esculina positiva
Crecimiento a 4 C y 37 C
Especie
Hemlisis
CAMP (S. aureus y R. equis)
Hipurato
Acido a partir de:

Manitol
D-metil-manosido
L-rhamnosa
Almidn
D-xilosa
Ribosa
N-acetil--D-manosamina

Pruebas de Susceptibilidad

Los patrones de susceptibilidad y resistencia de L.


monocytogenes han permanecido relativamente estables
por mucho tiempo.

In vitro es susceptible a AM, GM, E, Te, Ra y C, pero presenta


susceptibilidad moderada a quinolonas.

Penicilina o ampicilina con o sin un aminoglicsido son el


tratamiento recomendado.

Plsmidos de resistencia a TE, C y macrlidos en infecciones


graves por L. monocytogenes.

Las cefalosporinas son inactivas in vitro, sin embargo in vivo


al parecer poseen cierto efecto, por lo que no se recomiendan
para el tratamiento de listeriosis.

Familia Bacillaceae

Gnero Bacillus
247 especies
05 subespecies

B. anthracis
B. cereus

Bacillus

Son bacilos Gram positivo aerbicos, formadores de


esporas de resistencia, a excepcin de B. infernus que es
anaerbico estricto.

Son catalasa y motilidad positiva.

La mayora de las especies son mesfilos, pero existen


especies termfilas y psicrfilas.

La mayora de los miembros son aerbicos formadores


de esporas ampliamente distribuidos en la naturaleza,
pero algunas especies son oportunistas y patgenos
obligados de mamferos e insectos.

El principal habitad es el suelo, todo tipo de suelos,


cidos, alcalinos, fros, calientes, frtiles, desrticos, as
como las columnas de agua y depsitos de los fondos de
cuerpos de agua fresca y aguas marinas.

Bacillus

Sus esporas fcilmente sobreviven en el suelo, polvo y


aerosoles de una gran cantidad de ambientes naturales y
hbitat.

Alimentos secos como especies, leche en polvo y otros


productos estn frecuentemente contaminados con una
alta carga de esporas.

B. anthracis es un patgeno obligado de animales y el


hombre, ya que su multiplicacin en el ambiente es muy
rara.

B. cereus es un patgeno oportunista que produce


principalmente intoxicaciones alimentarias.

Importancia Clnica

La mayora de los miembros del gnero poseen poco o ningn poder


patgeno y no estn asociados a infecciones en el humano y otros
mamferos.

Las excepciones son B. anthracis, B. cereus y B. liqueniformis.

La alta resistencia de las esporas a la desecacin, radiacin,


desinfeccin y al calor permiten que estos se comporten como
contaminantes de quirfanos, instrumentos quirrgicos, productos
farmacuticos y alimentos.

Muchas especies son de utilidad biotecnolgica:

B. licheniformis y B. subtilis (bacitracina)


P. polymyxa (polimixina)
B. megaterium (vitamina B12 y B2)
B. subtilis (biotina y riboflavina)
B. cereus, B. circulans, B. megaterium, B. pumilis, B. subtilis, G.
stearothermophilus (ensayoe de antibiticos)
B. cereus (validacin de desinfectantes)
B. subtilis (monitoreo de fumigaciones)
G. stearothermophilus (esterilizacin por calor)
B. pumilis (esterilizacin por radiacin).

Bacillus cereus

Bacillus cereus es el segundo en importancia dentro del


gnero como patgeno humano.

Produce principalmente
infecciones oportunistas.

Produce dos tipos de intoxicacin alimentaria:

intoxicaciones

alimentarias

Tipo diarreica: caracterizada por dolor abdominal, con diarrea de 8


a 16 horas despus de la ingestin del alimento contaminado, esta
asociada a una amplia diversidad de alimentos como carnes,
vegetales, pastas, tortas, salsas y leche.
Tipo emtica: caracterizada por nauseas y vmito de 1 a 5 horas
despus de la ingesta del alimento contaminado, est asociada
principalmente a la ingesta de arroz chino, ocasionalmente se asocia
a cremas pasteurizadas, pudines de leche, pastas y formulas
lcteas reconstituidas.

Bacillus cereus

Ambos sndromes se deben a la capacidad de las esporas de


B. cereus de sobrevivir a los procedimientos de coccin
utilizados en la preparacin del alimento y a malas
condiciones de almacenamiento de los alimentos despus de
preparados, lo que permite la germinacin de las esporas.

Patogenia Bacillus cereus

Gastroenteritis

Enterotoxina
termoestable
resistente a protelisis

Forma emtica

Enterotoxina
termolbil similar a las
producidas por E. coli
y V. cholerae

Forma diarreica

Infecciones
oculares
1) Toxina necrtica (enterotoxina
termolbil)
2) Cereolisina (hemolisina)
3) Fosfolipasa C (lecitinasa)

Bacillus anthracis

Factores de Virulencia
Cpsula

Plsmidos de Virulencia
pX01
Gen cya (factor de edema)
Gen lef (factor letal)
Gen pag (antgeno protector)

Endos
poras

pX02

Potente
complejo de
Exotoxinas

Genes necesarios para la


sntesis de la cpsula de cido
poli-D-glutmico

Toxina del ntrax


Toxina letal (LeTx)
Toxina de edema (EdTx)

Bacillus anthracis
https://www.youtube.com/watch?v=T1mlakCyscM

Tomado de: Ryan y col.


Sherris Microbiologa
Mdica. 5ta ed. 2011.
McGrawHill.

Una protena llamada antgeno protector (AP) transporta otras dos protenas, el
factor edema (FE) y el factor letal (FL) al receptor de la protena de morfognesis
capilar 2 (PMC-2) en la membrana celular de un macrfago blanco, donde AP, FE y
FL viajan a un endosoma. AP transporta a FE y FL del endosoma al citoplasma,
donde ejercen sus efectos txicos.

TOXINA
DE
EDEMA

CPSULA

TOXINA
LETAL

La
cpsula
inhibe
la
fagocitosis de las clulas en
fase de replicacin.
La actividad adenil ciclasa de
la toxina de edema origina la
acumulacin
de
lquidos
caracterstica del carbunco.

La actividad de la metaloproteasa de zinc de la toxina letal estimula la liberacin de factor


de necrosis tumoral e interleucina, as como otras citocinas proinflamatorias, por parte de los
macrfagos. Esta toxina interviene, igualmente, en la lisis de macrfagos en ciertos cultivos
celulares.
PA (Antgeno protector) es la protena dotada de una mayor inmunogenicidad (de donde
proviene su nombre) de las principales protenas de B. anthracis. Tanto Factor letal como
Factor Edema inhiben el sistema inmunitario del organismo anfitrin.

Bacillus anthracis

El ntrax es la condicin clnica ms conocida y


estudiada, ocasionada por las especies de Bacillus.

Manifestaciones clnicas
ntrax cutneo
ntrax respiratorio
ntrax gastrointestinal

Aislamiento e identificacin
Muestras clnicas.
Coloracin de Gram
Aislamiento

Crecen y esporulan a 37 C en los medios de


rutina utilizados en un laboratorio clnico.
Consideraciones de bioseguridad.
Muestras con flora mixta.

Asilamiento e identificacin

Identificacin
Antes de comenzar a identificar a nivel de especie es importante
establecer que es un microorganismo aerbico formador de endosporas.
Dimetro del bacilo (m)
Cadenas de clulas
Motilidad
Esporangio

Forma, posicion, etc.

Crecimiento en anaerobiosis.
Crecimiento a 50 y 65 C.
Reaccin en amarillo de huevo agar
Hidrlisis de la casena, almidn y gelatina.
Arginina dehidrolasa
Produccin de indol
Reduccin de nitratos
Gas de carbohidratos
Acido a partir de:

D-arabinosa
Glicerol
Glicgeno
Inulina
Manitol
Salicin
D-trealosa

Aislamiento e identificacin

Aislamiento e identificacin

Aislamiento e identificacin

Aislamiento e identificacin

Pruebas de Susceptibilidad

Bacillus antharcis es invariablemente susceptible a la


penicilina, solo cinco trabajos han reportado la aparicin de
resistencia a penicilina.

Es susceptible a GM, E y V.

Es generalmente susceptible a estreptomicina pero resistente


a cefalosporinas.

El tratamiento de eleccin es una fluoroquinolona combinado


con otro antibitico al que el microorganismo sea sensible.

B. cereus y B. thuringiensis producen betalactamasa por lo


tanto son resistentes a
penicilina, ampicilina y
cefalosporinas, tambin son resistentes a TMP, pero casi
siempre sensibles a
CC, E, C, Va, Te, Sulfas y
aminoglicsidos.

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