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Tema 9:
Otras bacterias de importancia clnica
Lic. Liliana Gmez Gamboa (M.Sc.)
Corynebacterium
Gardnerella
Listeria
Bacillus
Bacilos
Gram
positivo
Bacterias
singulares
Tema 9: Otras
bacterias de
importancia
clnica
Bacilos
curvos o
espirales
Micobacterias
Bacterias
Anaerobias
estrictas
Corynebacterium
Familia
Corynebacteriaceae
Bacterionema
Caseobacter
Corynebacterium
Turicella
Gnero Corynebacterium
Corynebacterium
diphtheriae
Produjo grandes epidemias en los siglos XVI y XVII,
pero en esta poca no se diferenciaba con claridad
la difteria de otras enfermedades respiratorias altas
denominadas comnmente "catarro".
1821 Pierre Bretonneau (antomo patlogo)
describi las caractersticas clnicas particulares de
la difteria para poderla diferenciar de otras
enfermedades respiratorias.
Corynebacterium diphtheriae
Corynebacterium diphtheriae
Corynebacterium diphtheriae
En 1888 Roux y Yersin (Institutito Pasteur) confirmaron
el postulado de Leffler al demostrar que filtrados libres
de bacterias de los cultivos de bacilos diftricos eran
capaces de matar a los cobayos.
Corynebacterium diphtheriae
En 1913 Teobald Smith y Von Berhing vacunaron
exitosamente a nios con una mezcla de toxina y
antitoxina.
En 1923 el instituto Pasteur comprob que la
exposicin de la toxina a la formalina y su
calentamiento la volvan atxica para los
receptores, sin que por ello perdiera su capacidad
para inducir respuesta de anticuerpos.
Corynebacterium diphtheriae
En 1924 trabajos clnicos demostraron que la
inyeccin de este toxoide induca un nivel
elevado de proteccin entre los receptores.
Durante la dcada de 1950 Freeman, Groman,
Barksale, Pappenheimer y otros demostraron
que
la
produccin
de
toxina
por
Corynebacterium diphtheriae dependa de la
presencia de un fago -lisognico y durante la
dcada siguiente qued esclarecido el
mecanismo por el cual la toxina inhiba la
sntesis proteica.
Gnero Corynebacterium
Hbitat Natural
Importancia Clnica
Corynebacterium diphtheriae
Es un bacilo pleomorfo (0,3 a 0,8 x 1 a 8 m) que se tie
de manera irregular (grnulos metacromticos).
Esta especie se subdivide en cuatro biotipos en funcin de
la morfologa de sus colonias y sus propiedades
bioqumicas.
Diferentes cepas pueden o no producir la toxina diftrica
/DT)
Corynebacterium diphtheriae
El gen tox que codifica la exotoxina, se introduce en las cepas
mediante un bacterifago lisognico.
Son necesarios dos pasos para que se secrete el producto
activo del gen: 1) escisin proteoltica de la secuencia
adelantada de la protena tox durante la secrecin desde la
pared bacteriana, y 2) escisin de la molcula de la toxina en
dos polipptidos (A y B) que permanecen unidos mediante un
enlace disulfuro. Esta protena de 58.300 Da es un ejemplo de
la clsica exotoxina A-B.
Factor de crecimiento
epidrmico de unin a la
heparina
Tomado de: Ryan y col. Sherris Microbiologa Mdica. 5ta ed. 2011. McGrawHill.
Corynebacterium diphtheriae
Existen tres regiones funcionales en la molcula de
toxina, una regin de unin al receptor, una regin de
translocacin en la subunidad B y una regin
cataltica en la subunidad A. El receptor de la toxina
es el factor de crecimiento epidrmico de unin a la
heparina, que est presente en la superficie de
muchas clulas eucariotas, fundamentalmente en el
corazn y en las clulas nerviosas; su presencia
explica los sntomas cardacos y neurolgicos que se
observan en los pacientes con difteria grave.
Corynebacterium diphtheriae
Ambas subunidades ingresan en la clula dentro de la vacuola endoctica.
En el bajo pH de la vacuola, la toxina se desenvuelve, exponiendo los sitios
que facilitan la translocacin de la subunidad A del fagosoma al citosol.
La subunidad A finaliza la sntesis de protenas de dicha clula al inactivar el
factor de elongacin 2 (EF-2), que transfiere el ARN t del polipeptidil de sitios
aceptores a donadores en el ribosoma de la clula hospedadora (factor
necesario para el movimiento de las nuevas cadenas peptdicas que se estn
formando en los ribosomas). La accin especfica de la subunidad A es
desactivar el EF-2 mediante la ribosilacin de ADP (ADPR), que apaga la
sntesis de protenas.
Corynebacterium diphtheriae
Debido a que el recambio de EF-2 es muy lento y a que slo existe
alrededor de una molcula por ribosoma en cada clula, se ha
estimado que una nica molcula de exotoxina puede inactivar todo
el contenido de EF-2 en una clula para interrumpir por completo la
sntesis de protenas en la clula del organismo anfitrin.
Corynebacterium diphtheriae
La sntesis de la toxina est regulada por un elemento
codificado en un cromosoma, el represor de la toxina
diftrica (DTxR). Esta protena, que se activa en presencia
de concentraciones elevadas de hierro, se puede unir al
operador del gen de la toxina y evitar la produccin de la
misma.
Epidemiologa de C. diphtheriae
La difteria es una enfermedad de distribucin universal,
fundamentalmente en las zonas urbanas desfavorecidas
donde existen condiciones de hacinamiento y el nivel de
inmunidad inducido por la vacuna es bajo.
C. diphtheriae se mantiene en la poblacin como
consecuencia del estado de portador asintomtico en la
orofaringe o en la piel de las personas inmunizadas (por la
exposicin a C. diphtheriae o vacunacin). Se transmite de
una persona a otra a travs de gotitas respiratorias o
mediante contacto cutneo. El ser humano representa el
nico reservorio conocido de este microorganismo.
Enfermedades clnicas de
C. diphtheriae
viene
DIFTERIA RESPIRATORIA
DIFTERIA CUTNEA
Enfermedades clnicas de
C. diphtheriae
Enfermedades clnicas de
C. diphtheriae
DIAGNSTICO DE LABORATORIO
DIAGNSTICO DE LABORATORIO
DIAGNSTICO DE LABORATORIO
Microscopa
Cultivo
Pruebas de
toxigenicidad
DIAGNSTICO DE LABORATORIO
Cultivo
Catalasa
Metabolismo Fermentativo/Oxidativo
Reduccin de Nitratos
Ureasa
Hidrlisis de la Esculina
Lipofilismo
Pirazinamidasa
Reaccin de CAMP
Produccin de cido a partir de:
Glucosa
Maltosa
Sucrosa
Manitol
Xilosa
PRUEBAS DE TOXIGENICIDAD
Prueba de Elek anlisis de inmunodifusin in vitro.
Ensayo de neutralizacin de cultivo tisular que emplea una
antitoxina especfica.
Ensayo de neutralizacin in vivo (cobayos).
Prueba de amplificacin de cidos nucleicos (deteccin del
gen tox en cepas y muestras clnicas).
Pruebas de Susceptibilidad
intrnseca
Gardnerella vaginalis
Gardnerella vaginalis
Muestras clnicas
Aislamiento e identificacin:
Directo de secreciones vaginales
Presencia de clulas clave
Presencia de flora mixta, predominantemente Gram negativos
pequeos (Prevotella y Porphyromonas)
Bacilos y cocobacilos Gram variable (G. vaginalis)
Lactobacillus spp. ausentes o muy escasos.
Pruebas de Susceptibilidad
El metronidazol es la droga de eleccin.
Listeria
Especies:
L. monocytogenes (hombre)
Listeria ivanovii (animales)
Listeria ivanovii subsp. ivanovii
Listeria ivanovii subsp. londoniensis
L. innocua
L. seeligeri
L. welshimeri
L. grayi
Listeria
Hbitat Natural
FACTORES DE VIRULENCIA
Toxina (Listeriolisina O)
Hemolisinas
Fosfolipasas
ActA
Internalinas
Otros factores de virulencia: p60, factores
antioxidantes,
consumo de iones metales,
mediadores de respuesta al stress.
Patogenia e inmunidad
Patogenia e inmunidad
Su entrada en las clulas no fagocticas est mediada por
seis o ms protenas ricas en leucina, las internalinas (p. ej.,
InlA, InlB, InlC), que interaccionan con los receptores
glucoproteicos de la superficie de las clulas del organismo
anfitrin.
Patogenia e inmunidad
Patogenia e inmunidad
Una vez que la bacteria es ingerida por la clula
adyacente, se repite el proceso de lisis fagolisosmica,
replicacin bacteriana y movimiento direccional. La
entrada en los macrfagos despus de haber atravesado
las clulas que recubren el intestino conduce a las
bacterias hasta el hgado y el bazo, lo que produce la
diseminacin de la enfermedad.
Invasin
Tomado de: Ryan y col. Sherris Microbiologa Mdica. 5ta ed. 2011. McGrawHill.
Patogenia e inmunidad
La inmunidad humoral es poco importante en el desarrollo de las
infecciones por L. monocytogenes. La bacteria se replica en los
macrfagos y se mueve en el interior de las clulas, evitando as la
eliminacin mediada por anticuerpos.
Por este motivo, pacientes con deficiencias de la inmunidad celular,
pero no de la humoral, son especialmente susceptibles a las infecciones
graves.
Importancia Clnica
En adultos no embarazados, L. monocytogenes
produce principalmente meningitis, encefalitis y
septicemia.
Importancia Clnica
Importancia Clnica
DIAGNSTICO PRECOZ Deteccin de L.
monocytogenes en sangre de la madre y en
diferentes muestras
del recin nacido (LCR,
sangre,
lquido
amnitico,
secreciones
respiratorias, placenta, heridas cutneas, aspirado
gstrico o meconio). La observacin microscpica
de bacilos Gram positivo en estas muestras es de
invaluable ayuda en el diagnstico temprano de
esta patologa.
Importancia Clnica
Raramente
ocurren
Infecciones
localizadas
despus de un episodio de bacteriemia, sin
embargo, se ha descrito listeriosis primaria cutnea
con o sin bacteriemia en veterinarios y trabajadores
del campo, quienes adquieren la enfermedad a
travs del contacto con tejidos animales infectados.
Importancia Clnica
Infecciones como endocarditis, artritis, abscesos
intrabdominales,
endoftalmitis
e
infecciones
pleuropulmonares se han descrito infrecuentemente.
Epidemiologa
La enfermedad se asocia con el consumo de alimentos
contaminados (p. ej., queso no curado, leche, pavo, vegetales
crudos [especialmente repollo]) o con la diseminacin
transplacentaria de la madre al neonato; los casos espordicos
y epidmicos ocurren durante todo el ao pero tienen un mximo
en los meses ms clidos.
Diagnstico e Identificacin
Seguridad en el laboratorio.
Muestras
Clnicas
Alimentos
Aislamiento
Cultivo
Deteccin rpida
Diagnstico e Identificacin
Identificacin
Gnero:
Bacilos Gram positivo
Motilidad en vueltas de payaso en gota pendiente
Catalasa positiva
Esculina positiva
Crecimiento a 4 C y 37 C
Especie
Hemlisis
CAMP (S. aureus y R. equis)
Hipurato
Acido a partir de:
Manitol
D-metil-manosido
L-rhamnosa
Almidn
D-xilosa
Ribosa
N-acetil--D-manosamina
Pruebas de Susceptibilidad
Familia Bacillaceae
Gnero Bacillus
247 especies
05 subespecies
B. anthracis
B. cereus
Bacillus
Bacillus
Importancia Clnica
Bacillus cereus
Produce principalmente
infecciones oportunistas.
intoxicaciones
alimentarias
Bacillus cereus
Gastroenteritis
Enterotoxina
termoestable
resistente a protelisis
Forma emtica
Enterotoxina
termolbil similar a las
producidas por E. coli
y V. cholerae
Forma diarreica
Infecciones
oculares
1) Toxina necrtica (enterotoxina
termolbil)
2) Cereolisina (hemolisina)
3) Fosfolipasa C (lecitinasa)
Bacillus anthracis
Factores de Virulencia
Cpsula
Plsmidos de Virulencia
pX01
Gen cya (factor de edema)
Gen lef (factor letal)
Gen pag (antgeno protector)
Endos
poras
pX02
Potente
complejo de
Exotoxinas
Bacillus anthracis
https://www.youtube.com/watch?v=T1mlakCyscM
Una protena llamada antgeno protector (AP) transporta otras dos protenas, el
factor edema (FE) y el factor letal (FL) al receptor de la protena de morfognesis
capilar 2 (PMC-2) en la membrana celular de un macrfago blanco, donde AP, FE y
FL viajan a un endosoma. AP transporta a FE y FL del endosoma al citoplasma,
donde ejercen sus efectos txicos.
TOXINA
DE
EDEMA
CPSULA
TOXINA
LETAL
La
cpsula
inhibe
la
fagocitosis de las clulas en
fase de replicacin.
La actividad adenil ciclasa de
la toxina de edema origina la
acumulacin
de
lquidos
caracterstica del carbunco.
Bacillus anthracis
Manifestaciones clnicas
ntrax cutneo
ntrax respiratorio
ntrax gastrointestinal
Aislamiento e identificacin
Muestras clnicas.
Coloracin de Gram
Aislamiento
Asilamiento e identificacin
Identificacin
Antes de comenzar a identificar a nivel de especie es importante
establecer que es un microorganismo aerbico formador de endosporas.
Dimetro del bacilo (m)
Cadenas de clulas
Motilidad
Esporangio
Crecimiento en anaerobiosis.
Crecimiento a 50 y 65 C.
Reaccin en amarillo de huevo agar
Hidrlisis de la casena, almidn y gelatina.
Arginina dehidrolasa
Produccin de indol
Reduccin de nitratos
Gas de carbohidratos
Acido a partir de:
D-arabinosa
Glicerol
Glicgeno
Inulina
Manitol
Salicin
D-trealosa
Aislamiento e identificacin
Aislamiento e identificacin
Aislamiento e identificacin
Aislamiento e identificacin
Pruebas de Susceptibilidad
Es susceptible a GM, E y V.