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TITULO
AISLAMIENTO E IDENTIFICACIN DE MICROORGANISMOS
DE LA MATRIZ AMBIENTAL: AIRE
ASESORA
Dr. ROSA RICO MATA
DATOS DE IDENTIFICACIN DE LOS ANALISTAS
Fecha de inicio del anlisis: 29 DE JUNIO DEL 2015
Fecha de trmino: 10 DE JULIO DEL 2015
Nombre
Rea Garca Cesar Alejandro
Cargo
Responsable
Administrador
Laboratorista 1
Laboratorista 2
Laboratorista 3
GENERACIN: 2014-2016
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Ubicacin
/coordenadas GPS
Universidad
tecnolgica de
len
Blvd. Universidad
tecnolgica de len
#225 col san Carlos
CP.37670
Edificio F
21.063223
-101.578865
Edificio F
SITIO DE
MUESTREO
2.Parmetros Fisicoqumicos
Color:N/A
Olor: N/A
25C
pH: N/A
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AISLAMIENTO DE MICROORGANISMOS
1. Justificacin del proceso para la identificacin bacteriana
La identificacin bacteriana es de gran importancia porque a travs de las diferentes pruebas bioqumicas que
se le realizan a las bacterias y hongos se puede establecer de manera especfica las bacterias presentes en
determinadas zonas de muestreo, y poder identificar la funcin que realizan en los diferentes ciclos
biogeoqumicos y como contribuyen a estos.
2. Dos medios de siembra (Nombre y Composicin)
Medio No. 1: Agar Sabouraud
FRMULA (en gramos por litro)
Peptona...........................5.0.
Triptena...........................5.0.
Glucosa.............................40.0.
Cloranfenicol....................0.05.
Agar..................................15.0.
pH final: 5.6 0.2
Imagen
Imagen
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Descripcin
Descripcin
Colonias ovaladas, lisas, plegadas, rugosas o Colonias de un color verde claro, de forma ovalada
membranosas, brillantes, de color blanco brillante su de apariencia mucosa, tarde en crecer de 5 a 8 das,
brillantes, lisas y membranosas
crecimiento tarde de 5 a 8 das
Imagen
Imagen
Imagen No. 3. Cultivo de C. albicans Agar BD Imagen No. 4. Cultivo de C. albicans en Agar
Sabouraud glucosa con cloranfenicol
Sabouraud con Gentamicin y Cloranfenicol
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4. Procedimiento de Aislamiento
(describir detalladamente la cantidad de materiales y los pasos a seguir)
Materiales/Reactivos/Medios de cultivo/ Equipo a utilizar
Material
- 4 cajas Petri
- 4 matraz Erlenmeyer de 250 ml
- 2 probetas
- 1 pipeta
- 1 autoclave
- 2 esptulas
- 1 mechero bunsen
- 4 charolas de pesado
- 1 pizeta
- 1 bascula de pesado
- Algodn
- Gasas
- Papel de aluminio
- Agar sabouraud
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chromID
Candida
Hidrlisis
especfica de un
substrato
cromognico,
hexosaminidasa
(patente de
bioMrieux).Las
colonias de
Candida albicans
se colorean de
azul
Crecimiento
en Sabouraud
con 6.5% de
cloruro de
sodio
Fermentacin
de azucares
Observaciones
microscpicas a
partir del cultivo
Agar Sabouraud
con 6.5% de
cloruro de sodio
La Candida
Albicans es las
nicas bacterias
que cresen en
este medio
Se lleva a cabo en
Agar Sabouraud . Se
identifica una colonia
y se observa al
microscopio para
identificar algunos
rasgos caractersticos
Se lleva a cabo
en caldo base
rojo fenol con
maltosa,
lactosa,
dextrosa,
galactosa y
sacarosa y se
observa la
generacin de
gas
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FOTO 1
FOTO 2
FOTO 3
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1.-
chromID
Candida
Medio de cultivo
utilizado
Resultado obtenido
(positivo/negativo)
Evidencia fotogrfica
Las
colonias
de
Hidrlisis
Candida albicans se
especfica de un colorean de azul
substrato
cromognico,
hexosaminidasa
(patente
de
bioMrieux).
Fundamento de la prueba
Los agares cromognicos son medios selectivos y diferenciales disponibles comercialmente. Contienen como
base glucosa y peptona, la selectividad es dada por el cloranfenicol, contiene una mezcla de sustratos
cromgenos que liberan unos componentes coloreados diferentes cuando son degradados por enzimas
especficas producidas por ciertas especies de Candida. Este medio permite el desarrollo de las especies ms
comunes de Candida y hongos levaduriformes mediante la formacin de colonias coloridas diferenciadas: C.
albicans (azul), C. dubliniensis (verde oscuro), C. tropicalis(azul oscuro), C. krusei (violeta plido), C.
glabrata (violeta intenso). (http://www.biomerieux.es)
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2.- Crecimiento
en Sabouraud
con 6.5% de
cloruro de sdio
Fundamento de la prueba
Esta prueba se realiza con el fin de determinar la capacidad de crecimiento de Candida albicans en un medio
Sabouraud hipertnico incubado a temperatura ambiente (25C), a diferencia de C. dubliniensis que no crece a
estas concentraciones de sal
3.-
Observaciones
microscpicas a
partir del
cultivo
Agar Sabouraud
Colonia de color
blanco mucoide.
Fundamento de la prueba
(http://aprendeenlinea.udea.edu.co/lms/moodle/mod/resource/view.php?inpopup=true&id=100778)
Este es un mtodo presuntivo donde solamente se observan las colonias en el microscopio y por su morfologa
se clasifica el tipo de candida ms idntico.
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4.-
Fermentacin
Fundamento de la prueba
Las fermentaciones, indican un cambio marcado de color del medio de fucsia a amarillo intenso se indican
positivas, en casi de no haber cambio de color la reaccin se torna como negativa, y las reacciones dbiles se
indican con un ms menos
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3. Caractersticas generales
Candida albicans es un hongo dimrfico, es decir, se desarrolla de forma distinta en funcin de la temperatura
de crecimiento, como levadura, normalmente a 37C en el husped, y como hongo de aspecto filamentoso, a
25C en la naturaleza. Pertenece al filo Ascomycota y se reproduce de forma asexual por gemacin. En forma
de levadura presenta un aspecto de clulas redondas u ovaladas, de 3-8 x 2-7 micras de tamao, agrupadas en
pequeos grupos, mientras que, en forma de hongo filamentoso, las clulas se alargan y se diversifican
tomando la apariencia de filamentos, pseudo-hifas o pseudo-micelio. Estos hongos estn siempre presentes en
la piel y en la mucosa del tracto digestivo, genitourinario y respiratorio de la mayora de las personas, pero se
encuentran controlados por otros microorganismos no patgenos. Cuando se produce un desequilibrio, el
aumento desmedido de la poblacin de hongos produce esta u otras micosis. La Candida Albicans se encuentra
en todo tipo de ambiente, y pueden detectarse en interiores o exteriores durante todo el ao. El crecimiento
del hongo es promovido por condiciones hmedas y clidas. En los exteriores puede encontrarse en reas
sombreadas y hmedas, o en lugares donde se descomponen hojas y otro tipo de vegetacin. En interiores,
puede encontrarse en lugares donde haya altos niveles de humedad.
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