Practica vean

INTRODUCCIN
Una tincin una tcnica auxiliar en la microscopia para mejorar el contraste de
la imagen en el microscopio.
La tincin, hace que las clulas aparezcan mayores de lo que realmente son,
de manera que las medidas de las clulas que han sido fijadas o teidas no
pueden realizarse con mucha precisin.
Existen diferentes tipos de tinciones entre los que se encuentran:
*Tincin simple: utilizada para destacar forma, tamao y arreglo celular.
*Tincin diferencial: para separar y clasificar los microorganismos de acuerdo a
sus caractersticas.
*Tincin de Gram: utilizada para distinguir entre clases diferentes de bacterias
(Grampositivas y Gramnegativas).
*Tincin de Ziehl-Neelsen: o cido-alcohol resistente. Utilizadas para distinguir
especies de Mycobacterium.
*Tincin de cpsula:
*Tincin especial: utilizada para colorear y aislar varias estructuras como
cpsulas, endoesporas y flagelos.
*Tincin negativa: para demostrar la presencia de cpsulas.
*Tincin de esporas: para detectar endoesporas en las bacterias.
*Tincin de flagelos: utilizada para denostar la presencia de flagelos.
Es importante mencionar que las tinciones se realizan sobre un frotis. Se
denomina frotis a la extensin que se realiza sobre un portaobjetos de una
muestra o cultivo con objeto de separar lo ms posible los microorganismos, ya
que si aparecen agrupados en la preparacin es muy difcil obtener una imagen
clara y ntida. Este frotis debe ser posteriormente fijado al vidrio del
portaobjetos para poder aplicar los mtodos habituales de tincin que permiten
la observacin al microscopio de las bacterias sin que la muestra sea
arrastrada en los sucesivos lavados.
Una tincin puede ser afectada por diferentes factores como son: edad de las
clulas, condiciones del cultivo, caducidad del tinte. Tambin factores como el
tiempo que permanezca la muestra en el tinte, el pH del mismo, la
temperatura de trabajo.

ANLISIS DE RESULTADOS
Al analizar los resultados obtenidos en la parte experimental, nos pudimos dar
cuenta de que las tinciones son una gran herramienta en la microscopia, pues
tal vez sin ella sera imposible detectar esa gran variedad de microorganismos
presentes.

Un factor clave observado en la prctica es la aplicacin del frotis, pues al

realizar la dispersin de la muestra por todo el portaobjetos se debe tener
cuidado de no aplicarlo con mucha fuerza, ya que si se aplica muy fuerte corres
el riesgo de lisar (romper) las clulas.
Para el primer caso donde se practic la tincin tipo Gram; todas las clulas
se tien por medio del cristal violeta, despus de agregar lugol las partculas
gram-positivas se tien de azul-rosa y ya que las clulas gram-negativas no se
tien de azul y se tornan de un color rosa-rojo.

Para la segunda parte experimental, la cual tena el propsito de efectuar una

tincin negativa, la cual se llev a cabo de manera correcta. Esta tincin es
muy utilizada ya que permite la observacin de microorganismos que
presentan las forma de capsulas con la ayuda de la tinta china, debido a que
estos microorganismo no se tien y presentan un color blanco, y por utilizacin
de la tinta china el fondo es de color opaco o negro, este es el motivo por el
cual se denomina como tcnica del cielo estrellado.

Para el caso de la quinta fase experimental determinada como tincin de

flagelos, en la cual se utiliza un colorante selectivo, pues su actividad se basa
en engrosar y teir los flagelos, para una mejor observacin. La observacin de
las bacterias utilizadas para este tipo de tincin no se pudo realizar de manera
adecuada, debido a la mala aplicacin del frotis, pues en la observacin no se
logr el resultado esperado ya que probablemente los flagelos se fracturaron.

En el caso de la ltima fase experimental dedicada a analizar la motilidad o

movilidad de las clulas, se recomend utilizar las bacterias utilizadas en la
tincin de Gram la cual presenta motilidad, pero lamentablemente no pudimos
tomar una foto.
Hay que tomar en cuenta que:
Movilidad: es el desplazamiento de los microorganismos por toda la muestra.
Motilidad: es el movimiento localizado de los microorganismos, pues solo se
mueven en una pequea rea.

Una recomendacin para realizar esta tcnica de manera adecuada es que al

contrario de las dems tcnicas poner un leve exceso de muestra, para que se
vea una gran cantidad de estas en movimiento, pero al igual no utilizar
demasiada fuerza en el frot

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