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ESCUELA ACADMICO PROFESIONAL DE ESTOMATOLOGA

GUA DE PRCTICAS DE BIOLOGA Y


GENTICA

SEMESTRE CADMICO 2014

COORDINADOR DEL CURSO: Mg. Marco Antonio Mesa Guevara

Mg. Marco Antonio Mesa Guevara

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INTRODUCCIN

El laboratorio constituye el lugar trabajo, tanto para la enseanza como para la


investigacin y es preciso conocer los diferentes materiales, instrumentos, reactivos
y equipos con los que cuenta.
Las prcticas de biologa son una parte fundamental en la enseanza de dicha
materia ya que permiten que los conocimientos tericos aprendidos por el alumno
se puedan aplicar, es por esta razn que los estudiantes deben comprender los
procedimientos bsicos en la tcnica del manejo de los materiales y equipos de
laboratorio para lograr un buen aprendizaje de la biloga.
El concepto de asepsia y de trabajo ordenado ayuda al desarrollo de la prctica.
El trabajo de laboratorio representa uno de los aspectos fundamentales que
contribuye en la definicin de la vocacin tecnolgica y cientfica del ser humano y
en especial de los jvenes por estar en un periodo de formacin intelectual, ya que
ello permite que la teora sea comparada con la prctica.
Es tarea fundamental de los docentes es motivar la participacin activa de los
estudiantes en el desarrollo de prcticas de laboratorio y de campo, con el fin de
que se mejoren sus habilidades y destrezas en cuanto al manejo de materiales y
reactivos, con lo cual estn en posibilidades de lograr un cambio o transformacin
del entorno en donde vive, as como la de su propia realidad.

Por esta razn, cremos por conveniente la elaboracin de esta gua de prctica,
cuyo contenido tiene como finalidad brindar al estudiante un material ordenado y
de fcil acceso al trabajo de laboratorio en la asignatura de Biologa.
Esta gua

est descrita de manera clara y sencilla con el fin de que la ejecucin

prctica pueda hacerse completamente.


El presente trabajo consta de catorce experiencias, las cuales se
desarrollaron en

varias etapas mediante la recopilacin de

prcticas.

Cada

prctica inicia con el ttulo en la parte central, el cual se seleccion de acuerdo a la


dosificacin del programa por semana. La competencia hace referencia al aspecto
Mg. Marco Antonio Mesa Guevara

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significativo que se pretende que logren los alumnos al final del experimento. El
fundamento terico de

cada una de las

prcticas,

fue elaborado en base a

diversas referencias bibliogrficas. En la parte experimental, el procedimiento fue


desarrollado consultando diversos manuales de Educacin Superior; del mismo
modo, en la preparacin de la gua nos hemos apoyado en los aos de experiencia
en la enseanza universitaria en diversas instituciones. El cuestionario en el que el
alumno demuestra su aprovechamiento logrado al final de la secuencia de
aprendizaje, se elabor

basado en el aspecto

introductorio

resultados

experimentales que se esperan de cada prctica.


Finalmente, agradezcoanticipadamente en nombre de la plana del curso y el
mopropio a sus lectores por hacerlo de su conocimiento. Asimismo; agradezco de
manera muy especial a la profesora Adriana Cordero Vilca por su valiosa
participacin en la elaboracin de la presente gua.

Mg. Marco Antonio Mesa Guevara


Coordinador de la Asignatura de Biologa y Gentica

Mg. Marco Antonio Mesa Guevara

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RECOMENDACIONES GENERALES PARA EL TRABAJO EN EL LABORATORIO DE


BIOLOGA

1. La asistencia a prctica es obligatoria, no habr tolerancia y el inicio es a la hora


indicada, despus de este tiempo, no se permitir al acceso al laboratorio.
2. Los alumnos debern ingresar con el uniforme completo, estando el guardapolvo
debidamente abotonado.
3. Las mesas debern estar siempre limpias y desocupadas, las mochilas sern
colocadas en los cajones de las mesas de trabajo.
4. Est prohibido comer y fumar en el laboratorio, evite el uso de celulares durante el
desarrollo de la prctica.
5. Limpiar y desinfectar el rea de trabajo antes y despus de usarla.
6. No pasear entre las mesas del laboratorio, el trabajo deber efectuarse sentado y en
su equipo de trabajo.Hablar slo lo necesario con los compaeros.
7. El material para el desarrollo de la prctica, es responsabilidad de los integrantes del
grupo, en caso de no traerlo se suspender la prctica para dicho grupo.
8. Ser cuidadoso con el uso del material de laboratorio (microscopios, materiales de
vidrio y porcelana, reactivos, etc.), con el fin de evitar cualquier accidente.
9. Verifique que los frascos con las sustancias a emplear estn debidamente rotulados
o etiquetados.
10. El material una vez terminada la prctica, deber ser entregado totalmente limpio y
ordenado.
11. Informe al profesor de cualquier accidente que ocurra. En caso de dao o deterioro
de algn instrumento o equipo,SON LOS ALUMNOS QUE CONFORMAN LA MESA
LOS RESPONSABLES DE DICHO DAO y debern subsanarlo a la brevedad
posible y en un tiempo no mayor a una semana, siendo retenido su carnethasta el
cumplimiento de la deuda pendiente.
12. La evaluacin en el laboratorio ser permanente. Se tomar dos exmenes, un
examen parcial y un examen final de prctica sin derecho a sustitutorio.

Mg. Marco Antonio Mesa Guevara

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CONTENIDO DE LAS PRCTICAS


SEMANA
1

PRCTICA
1

TEMAS
RECONOCIMIENTO, USO Y MANEJO DE MATERIALES DE

PGINA
6

LABORATORIO.
2

MICROSCOPA

16

RECONOCIMIENTO DE GLCIDOS

26

RECONOCIMIENTO DE LPIDOS

32

RECONOCIMIENTO DE PROTENAS

38

ACTIVIDAD ENZIMTICA

42

AISLAMIENTO DE LOS CIDOS NUCLEICOS

49

EXAMEN PARCIAL

CLULA PROCARIOTA: TCNICA DE COLORACIN BACTERIANA

53

10

CLULA EUCARIOTA: SMOSIS

59

11

10

PLASTIDIOS E INCLUSIONES CITOPLASMTICAS

69

12

11

CARIOTIPO HUMANO

75

13

12

DIVISIN CELULAR: MITOSIS

84

14

13

LEYES DE MENDEL (Problemas)

87

15

14

LA FERMENTACIN

90

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PRCTICA 1: RECONOCIMIENTO DEL MATERIAL DE LABORATORIO


Y MEDICIN DE VOLMENES

I.

COMPETENCIAS:
Reconoce los materiales de laboratorio.
Describe correctamente el uso de ellos.
Efecta mediciones de volmenes usando los materiales necesarios.

II.

MATERALES
Vaso de Precipitado
Erlenmeyer
Baln de Fondo Redondo
Baln de Fondo Plano
Probeta
Bureta
Pipeta Graduada.
Pipetas Aforadas
Tubos de Ensayo
Agitador
Embudo
Embudo de Separacin
Cpsula de Porcelana

Tringulo
Pinza para Tubos de Ensayo
Esptula
Soportes
Vidrio de Reloj
Pizetas
Placas de toque
Micropipetas
Pipeteadores
Mortero y piln.
Escobilla para tubos
Mechero bunsen

Crisoles
Gradilla

III.

FUNDAMENTO TERICO

En el laboratorio se emplean una variedad de implementos para la realizacin de


las experiencias, algunos de ellos son denominados volumtricos, ya que se usan
para medir volmenes de fluidos, ya sean lquidos o gases.

Mg. Marco Antonio Mesa Guevara

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Entre los aparatos volumtricos ms usados tenemos: Probetas, Pipetas, Buretas,


Vasos de precipitado, tubos de ensayo, entre otros. En algunos aparatos el lquido
se mide adicionndolo en el interior de este, mientras que en otros como en el caso
de las pipetas el lquido se mide llenando esta mediante succin (o vaco) con
peras de caucho. Una alternativa poco recomendable es hacerlo por succin por la
boca y poniendo el dedo ndice sobre la parte superior de la pipeta para evitar la
salida de lquido, pero cuando se trabaja con lquidos corrosivos o venenosos esto
puede desembocar en quemaduras o envenenamiento. Al medir un lquido con el
uso de pipetas se debe tener la precaucin de que la punta inferior quede muy por
debajo de la superficie del lquido, ya que de lo contrario absorber aire, el cual
impulsar el lquido hasta hacer contacto con la
boca o con la pera de caucho.

Cuando se mide un lquido, la superficie de este


generalmente adopta una curvatura denominada
menisco, para efectos de una buena medicin la
parte inferior del menisco debe quedar tangente a la seal de referencia.

Diferencia entre materiales, instrumentos, reactivos y equipos de laboratorio

Artefactos que
facilitan el estudio

Mg. Marco Antonio Mesa Guevara

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A continuacin se hace referencia a los materiales de uso comn en el laboratorio:

PROBETA GRADUADA
Se utiliza, para contener o medir volmenes de
lquidos

de

una

forma

aproximada.

Es

un

recipiente cilndrico de vidrio con una base ancha,


que generalmente lleva en la parte superior un
pico para verter el lquido con mayor facilidad.

PIPETA VOLUMTRICA
Instrumento de laboratorio que se utiliza para
medir o transvasar pequeas cantidades de
lquido..

ERLENMEYER
Son matraces de paredes rectas, muy usados
para

las

valoraciones.

Se

pueden

calentar

directamente sobre la rejilla.

Mg. Marco Antonio Mesa Guevara

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MORTEROS
Se utilizan para disgregar sustancias, mediante la
presin ejercida, suelen ser de porcelana.

BURETA
Bureta, instrumento de laboratorio que se utiliza en
volumetra para medir con gran precisin el
volumen de lquido vertido.

PIZETA O FRASCO LAVADOR


Se utilizan para enjuagar el material de laboratorio

BALON DE FONDO PLANO


Son recipientes de vidrio, esfricos, provistos de
un cuello. Algunos tienen marcada una
determinada capacidad (aforados).

Mg. Marco Antonio Mesa Guevara

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TRPODE
Se utiliza como soporte para calentar distintos
recipientes; sobre la plataforma del trpode se
coloca una malla metlica para que la llama no d
directamente sobre el vidrio y se difunda mejor el
calor.

MECHERO BUNSEN
Mechero Bunsen, dispositivo que se utiliza mucho
en los laboratorios debido a que proporciona una
llama caliente, constante y sin humo.

REJILLA DE ASBESTO
Material de laboratorio de metal que est cubierto
con un crculo de asbesto; se usa para proteger el
fuego directo el material de vidrio que va a sufrir
calentamiento. Se suelen colocar encima del
mechero, apoyadas en un aro sujeto al soporte.
Sobre ellas se coloca el matraz o recipiente que
queremos calentar, evitando as que la llama le d
directamente.

Mg. Marco Antonio Mesa Guevara

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EMBUDO BUCHNER
Es un embudo con la base agujereada. Se acopla
por su extremo inferior mediante un corcho
taladrado al matraz kitasato. Encima de los
orificios se coloca un papel de filtro. Se utiliza para
filtrar sustancias pastosas.

CAJA PETRI
La placa de Petri es un recipiente redondo, de
cristal o plstico, de diferentes dimetros (siendo
ms comunes los de dimetros alrededor de 10
cm), de fondo bajo, con una cubierta de la misma
forma que la placa, pero algo ms grande de
dimetro, para que se pueda colocar encima y
cerrar el recipiente.
Se utiliza en los laboratorios principalmente para el
cultivo de bacterias y otros microorganismos.

CRISOL GUSH O CRISOL FILTRANTE


Suele ser de porcelana, de un metal inerte o de
algn tipo de material refractario. Se utiliza para
calcinar o fundir sustancias. Se calienta a fuego
directo. Es similar a las cpsulas.

CPSULA DE PORCELANA
Sirve para calentar y evaporar lquidos, fundir
cristalizar slidos.

Mg. Marco Antonio Mesa Guevara

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VARILLA DE AGITACIN
La varilla de agitacin es de vidrio y se utiliza para
agitar las disoluciones.

GRADILLA
Pueden ser de metal, madera o platico. Se utilizan
para sostener los tubos de ensayo.

TUBOS DE ENSAYO
Son cilindros de vidrio cerrados por uno de sus
extremos que se emplean para calentar, disolver o
hacer

reaccionar

pequeas

cantidades

de

sustancias. Los hay de vidrio ordinario y de


PIREX.

Estos ltimos son los que se deben

utilizar cuando se necesita calentar.

VASOS DE PRECIPITADO
Se usan para preparar, disolver o calentar
sustancias. Junto con el matraz, la probeta y los
tubos de ensayo constituyen lo que se llama en el
laboratorio Material de vidrio de uso general.Se
fabrican en vidrio ordinario y en PIREX, y de
distintos tamaos. Son cilndricos y en la boca
llevan un pequeo apndice en forma de pico para
facilitar el vertido de las sustancias cuando se
transvasan.Puede ir aforados o graduados, si bien
su exactitud es menor que la de un matraz aforado
o una probeta.

Mg. Marco Antonio Mesa Guevara

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MATRAZ FONDO REDONDO


Tambin se conoce con el nombre de matraz de
fondo esfrico y se utiliza en pocas experiencias.

EMBUDOS
Se emplean para filtrar sustancias liquidas o
simplemente para trasvasarlas de un recipiente a
otro. En el laboratorio se utilizan embudos de
diversos materiales: vidrio ordinario, PIREX,
plstico o porcelana, segn el tipo aplicacin que
se les vaya a dar. Hay embudos de cristal
graduados; en este caso tienen una llave en el
tubo que, al cerrarla, impide la salida del lquido.
Es preferible que el extremo del embudo tenga un
corte oblicuo para facilitar la cada del lquido.

PINZAS PARA TUBOS DE ENSAYO


Son instrumentos en forma de tenacillas que
sirven para sujetar los tubos de ensayo; pueden
ser de madera o metlicas.

ESCOBILLA
Se utiliza para la limpieza del material de
laboratorio.

Mg. Marco Antonio Mesa Guevara

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SOPORTE UNIVERSAL
El soporte universal es una herramienta que se
utiliza en laboratorio para realizar montajes con los
materiales presentes en el laboratorio y obtener
sistemas de medicin o de diversas funciones,
como por ejemplo: un fusimetro, un equipo de
destilacin.
Est formado por una base o pie en forma de
semicrculo o de rectngulo, y desde el centro de
uno de los lados, tiene una varilla cilndrica que
sirve para sujetar otros elementos a travs de
doble nueces.

IV.

PARTE EXPERIMENTAL:

RECONOCIMIENTO DE MATERIALES DE LABORATORIO

1- Para el desarrollo de la prctica el grupo recibir un conjunto de materiales


para identificarlos y sealar sus caractersticas.
2- Efectuar el dibujo cientfico correspondiente de todos los materiales de la
prctica.
3- Realizar la actividad con sumo cuidado evitando romper los materiales.
MEDICIN DE VOLMENES
1. Cada alumno de la mesa medir 2,5 y 7 ml de agua destilada y lo colocar
en tubos de ensayo.
2. Medir 10 ml. de agua con una pipeta aforada de 5 ml y colocarlos en un tubo
de ensayo.
3. Colocar 50 ml de agua medidos desde una probeta a un beaker.
4. Colocar en un vaso de precipitado de 250 ml, 200 ml de agua medidos con
probetas, comparando los volmenes.
Mg. Marco Antonio Mesa Guevara

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V.

CUESTIONARIO

1. Qu volumen cree usted ms exacto, el medido con una pipeta aforada o el


medido con una graduada?
2. Qu implementos volumtricos miden vaciando?
3. Para qu se usan los implementos que se le entregaron en esta sesin de
laboratorio?
4. Cul es el objetivo de usar la rejilla de asbesto?

Mg. Marco Antonio Mesa Guevara

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PRCTICA 2:MICROSCOPA

I.

COMPETENCIAS:
Identifica sin error cada una de las partes del sistema mecnico y
ptico del microscopio convencional.
Describe correctamente el funcionamiento de cada una de las partes
del microscopio compuesto.
Prepara correctamente las muestras para ser observadas al
microscopio.Ilumina correctamente el campo del microscopio.
Gradadebidamente la apertura del diafragma del microscopio
compuesto para visualizar una imagen.

II.

MATERIALES

Microscopio
Lminas
Laminillas
Pizeta con agua destilada
Azul de metileno
Lana
Hisopos.
Una hoja de papel peridico con letras pequeas.
Papel absorbente.
Microscopio.

III.

FUNDAMENTO TERICO

MICROSCOPIO PTICO

Se usa para aumentar el tamao de la imagen aparente de los objetos, lo cual


permite observar los detalles estructurales de los microorganismos.

Mg. Marco Antonio Mesa Guevara

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El microscopio ptico normal que se usa para observar bacterias y otros


organismos celulares es un microscopio compuesto, el cual est provisto de una
fuente luminosa, una lente condensadora de luz que la dirige hacia el objeto a
observar y dos juegos de lentes que ayudan a la amplificacin de la imagen.

AMPLIFICACIN
La capacidad amplificadora de un microscopio compuesto es el producto del
aumento individual de los oculares y los lentes objetivos. Un microscopio tpico que
se usa en bacteriologa tiene objetivos con poder de amplificacin de 10X, 40X y
100X y oculares de 10X, por lo cual es capaz de amplificar la imagen de la muestra
100, 400 y 1000 veces.

PODER DE RESOLUCIN
La resolucin se define como la capacidad para observar claramente dos puntos
vecinos en el campo visual como entidades diferentes o independientes.
El poder de resolucin se mide utilizando como unidad la inversa del lmite de
resolucin.
Poder de resolucin= 1/Lmite de resolucin

LMITE DE RESOLUCIN
Se define como la distancia mnima entre 2 puntos,para que puedan distinguirse
como tales.
Se calcula con la frmula de Abbe:

Lmite de resolucin = 0,61 X Longitud de onda


Apertura numrica

A menor lmite de resolucin, mayor es el poder de resolucin.

Mg. Marco Antonio Mesa Guevara

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APERTURA NUMRICA
Esta expresin, que suele abreviarse AN, indica la cantidad de luz que entra en un
objetivo desde un punto del campo del microscopio. La apertura numrica es una
constante de cada lente y mide su calidad para concentrar luz. Tal valor es de
suma importancia,

de l depende el Lmite de Resolucin, la propiedad ms

importante de un objetivo.
La apertura numrica es igual:
n x seno

Siendo n el ndice de refraccin (cambio en la velocidad de la luz difractada) del


medio entre el medio y el objeto, es el ngulo de semiapertura de la lente, su
valor siempre es menor a 1 (0,93 como mximo en los microscopios actuales.)

El aire tiene un ndice de refraccin de 1.0, que


limita la resolucin que se puede obtener, pero se
puede incrementar la AN poniendo aceite de
inmersin entre el espcimen y el objetivo,
aumentando as el poder de resolucin del
microscopio.

El aceite de inmersin tiene un ndice de


refraccin

de

1.5,

lo

que

aumenta

considerablemente la AN ingresando por lo tanto un mayor cono de luz hacia el


objetivo y permitiendo de esta manera la observacin de la muestra.
La calidad de un objetivo es tanto mayor cuanto ms elevada es su apertura
numrica.

Mg. Marco Antonio Mesa Guevara

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TIPOS DE MICROSCOPIO

Simple.
Los primeros microscopios, construidos por Leeuwenhoek alrededor de 1675, eran
simples, es decir, contenan slo una lente o lupa.
Compuesto.
Tiene varias lentes combinadas, capaces de producir gran aumento. Existe adems
el Microscopio electrnico, que debido a sus posibilidades para obtener imgenes
claras de los objetos ms diminutos, ha hecho contribuciones de la mayor
importancia, sobre todo en el estudio de la constitucin y ciclos vitales de los virus
filtrables.

MICROSCOPIO COMPUESTO DE CAMPO LUMINOSO

El microscopio de uso ms comn en el trabajo de laboratorio es el microscopio


compuesto de campo luminoso.
El microscopio compuesto consta de una fuente luminosa, una lente que concentra
la luz (condensador) y

la dirige hacia el espcimen y dos juegos de lentes

convergentes, objetivo y ocular, que ayudan a la amplificacin de la imagen.


El objetivo est en el extremo inferior del tubo del microscopio, justo por encima del
objeto que se halla encima de la platina, y cuya distancia focal es muy pequea
(distancia focal, es la distancia entre el foco de la lente y su centro ptico). El
objetivo forma imagen real, invertida y aumentada del objeto. La otra lente llamada
ocular, se halla en el extremo superior, de mayor distancia focal, y es por donde se
observa para percibir las imgenes. El ocular forma una imagen virtual, aumentada
y derecha de la imagen formada por el objetivo.
El microscopio compuesto consta bsicamente de dos lentes convergentes: el
objetivo y el ocular que reproducen al combinarse una imagen virtual, invertida y
cuyo tamao es el producto de las amplificaciones de ambas lentes.

Mg. Marco Antonio Mesa Guevara

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OCULAR X OBJETIVO = AUMENTO

OCULAR

OBJETIVO

AUMENTO

10 X

4X

40 X

10 X

10 X

100 X

10 X

40 X

400 X

10 X

100 X

1000 X

PARTES DEL MICROSCOPIO PTICO COMPUESTO


Localice estas partes en su microscopio e indique en el esquema.

PARTE MECNICA:
1.

Tubo ptico

2.

Tornillo Macromtrico

3.

Tornillo Micromtrico

4.

Revolver

5.

Brazo

6.

Platina

7.

Base o pie

1.

Tubo ptico: Es un cilindro de metal que en su parte superior se


encuentra colocado el OCULAR y en su parte inferior se dispone el
REVOLVER al cual se atornillan los OBJETIVOS. En la parte posterior
se encuentra la CREMALLERA que se adapta a un pin interno.

2.

Tornillo Macromtrico: Se utiliza para enfocar la preparacin, es de


largo recorrido y permite movimientos de gran amplitud. Se utiliza para
movilizar el tubo o platina (enfoque grosero).

3.

Tornillo Micromtrico: Tambin se utiliza para enfocar la preparacin,


pero es de pequeo recorrido, para movimientos de pequea amplitud.

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4.

Revolver: Es un dispositivo metlico giratorio que se encuentra en la


parte inferior del tubo ptico y posee de dos a cuatro lentes que al
hacerles girar deben disponerse en el Retn, indicando que se
encuentran en posicin de observacin.

5. Brazo: es el metal macizo, en forma de C. Por la parte superior se une


con el

TUBO y por su extremidad inferior se pone en contacto con la

BASE por medio de la CHARNELA, la que permite inclinar el aparato.


En su extremo superior se encuentra el TORNILLO MACROMTRICO.
El Brazo sirve para transportar el microscopio.
6.

Platina: es una plancha metlica de forma circular o cuadrangular, que


se encuentra en la parte inferior del Brazo.
Posee una abertura central denominada

ABERTURA DE PLATINA,

cuyo fin es dejar pasar la luz hacia el objeto de observacin colocado en


su respectivo portaobjetos sujetado por las Presillas.
7.

Base o pie: Es un dispositivo metlico pesado, unas veces en forma de


herradura, otras en forma circular que permite la estabilidad del
Microscopio.

PARTE PTICA:
1. Oculares
2. Objetivos
3. Condensador
4. Diafragma
5. Espejo

1.

Oculares.- Son cilindros cortos y huecos que se


colocan en la parte superior del tubo ptico.
Interiormente llevan dos lentes uno en cada
extremo y entre ambos existe un diafragma.
La lente superior se denomina lente ocular y la inferior lente de campo.

Mg. Marco Antonio Mesa Guevara

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Observando la parte exterior del ocular notaremos la presencia de unos


nmeros 5X, 10X, 15X, etc., que es el aumento de cada ocular. Esta
parte se llama as porque el ojo del observador se coloca en este lugar.
La funcin del ocular es aumentar la imagen real e invertida dada por el
objetivo.
Cuando se utiliza el ocular 10X con el objetivo de pequeo aumento da
una amplificacin final de 100 veces. El de 50X dar una amplificacin
final de 500 veces y el de 100X una amplificacin final de 1000 veces.
Acta como una lupa y produce imagen virtual aumentada y derecha de
la imagen del objetivo.
2. Objetivos.- Son tubos cortos atornillados al revolver en la parte inferior del
tubo ptico. El objetivo es un sistema de lentes de los cuales el que est
ms cerca del objeto se denomina lente frontal. El aumento de cada
objetivo se encuentra en la parte exterior del mismo: 5X, 10X, 45X, etc.

Objetivo de pequeo aumento o "Seco dbil".


til para observar microorganismos grandes, p. ej. Protozoarios. Este
objetivo est marcado con un 3 2/3, que significa 2/3 de pulgada
16 mm.
Tambin est marcado como 10X. Tiene una lente en el extremo
mucho ms grande que cualquiera de los otros objetivos.

Objetivo de gran aumento o "Seco fuerte".


Este se usa para el examen de microorganismos vivos suspendidos
en gotas de agua u otros lquidos. Est marcado con 6 1/6 que
significa 1/6 de pulgada 4 mm. Tambin est marcado como 45X o
50X. La lente del extremo es de menor tamao que la del seco dbil.

Objetivo de inmersin en aceite.


Existen los objetivos denominados de inmersin (100X), que se utiliza
con aceite de cedro y se les reconoce por que llevan una banda roja.

3.

Condensador.- Es un sistema de lentes cuya funcin es concentrar los


rayos luminosos a la preparacin, los que son proyectados por el espejo.

Mg. Marco Antonio Mesa Guevara

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Se moviliza mediante una cremallera accionada por un tornillo de


enfoque.

4.

Diafragma.- En algunos microscopios desprovistos de condensador, es


un disco metlico circular que se encuentra dispuesto por debajo de la
platina. Posee aberturas de diferentes dimetros y su funcin es regular
la cantidad de luz proyectada a la abertura de platina. Existe diafragma
iris que se encuentra por debajo del condensador.

5.

Espejo.- Se encuentra debajo de la platina montada en un soporte


metlico en forma de herradura. Posee dos caras: una cncava y otra
plana.

IV.

PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL
A. MANEJO Y USO DEL MICROSCOPIO PTICO

1. Coloque el microscopio delante suyo y acomode su asiento de tal manera


que pueda observar con facilidad. Prenda el foco del microscopio.
2. Colocar el objetivo de menor aumento en posicin de empleo y bajar la
platina completamente. Si el microscopio se recogi correctamente en el uso
anterior, ya debera estar en esas condiciones.
3. Colocar la preparacin sobre la platina sujetndola con las pinzas metlicas.
4. Comenzar la observacin con el objetivo de 5x (ya est en posicin).

Mg. Marco Antonio Mesa Guevara

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PARA REALIZAR EL ENFOQUE DE LA MUESTRA


a. Acercar al mximo la lente del objetivo a la preparacin, empleando el
tornillo macromtrico. Esto debe hacerse mirando directamente y no a
travs del ocular, ya que se corre el riesgo de incrustar el objetivo en
la preparacin pudindose daar alguno de ellos o ambos.
b. Mirando, ahora s, a travs de los oculares, ir separando lentamente
el objetivo de la preparacin con el macromtrico y, cuando se
observe algo ntida la muestra, girar el micromtrico hasta obtener un
enfoque fino.
c.

Pasar

al

siguiente

objetivo.

Para

cambiar

de

objetivo,gire

cuidadosamente el revlver hasta escuchar un click que indica un


tope. De esta forma usted pasar desde el objetivo de 5 al de 10 X y
luego al de 40X.
ES PROBABLE QUE AL OBSERVAR LA MUESTRA LUEGO DEL CAMBIO DE
OBJETIVO SE NOTE ALGO BORROSO. PARA CORREGIR SOLAMENTE DEBE
MOVER EL TORNILLO MICROMTRICO, NO DEBE MOVER EL TORNILLO
MACROMTRICO, SI LO HACE DESENFOCAR LA MUESTRA Y DEBER
EMPEZAR DE NUEVO DESDE EL PASO 5 DE ENFOQUE DE LA MUESTRA.
B. PREPARACION Y OBSERVACIN DE LAS MUESTRAS.1. Corte una letra e minscula de la hoja de peridico o revista, dejndole un
pequeo marco alrededor.
2. Coloque el pedacito de papel en la parte media del portaobjeto. La letra
debe estar siempre derecha.
3. Agregue una gota de agua sobre la muestra.
4. Cubra la muestra con una laminilla cubreobjetos evitando que se formen
burbujas .Para esto en un primer momento, la laminilla debe ser colocada en
uno de los extremos del preparado con una inclinacin en un ngulo de
45grados.Luego se deja caer suavemente la laminilla sobre la muestra, de
Mg. Marco Antonio Mesa Guevara

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esta forma se evita la formacin de burbujas que evita la correcta


visualizacin de la muestra .Si la laminilla quedara chueca enderezarla
delicadamente con ayuda de la pinza.
5. Quitar el excedente de agua tanto en la parte superior como de la base de la
laminilla con ayuda de un pedazo de papel higinico.
6. En otra lmina coloque una hebra muy delgada de lana o hilo de color y deje
caer una gota agua sobre ella.Cbralo con la laminilla como hiciera con la
letra e.NOSE DEBE COLOCAR UN PEDAZO DE LANA GRUESA
PORQUE ESTO IMPEDIRA EL PASO DE LUZ Y NO PODRA VISUALIZAR
LA MUESTRA.
7. Trabaje con las muestras que haya trado siguiendo el mismo procedimiento.
C. CUIDADOS DEL MICROSCOPIO AL TERMINAR DE TRABAJAR
1. Luego de que ha realizado sus observaciones y hecho sus esquemas,
saque la lmina de la platina y con un pedazo de papel higinico limpie
dicha platina.
2. Gire el revlver y colquelo en el objetivo de menor aumento.
3. Apague la lmpara de iluminacin.
4. desenchufe el microscopio y enrolle el cable alrededor de l.
CUESTIONARIO
1- Hacer un esquema del recorrido de la luz a travs de un microscopio ptico
compuesto.
2- Mencione las caractersticas de un microscopio compuesto.
3- Defina: imagen virtual, imagen real, lmite de resolucin,lente convergente,
poder de resolucin.
4- Cul es la importancia que tiene el diafragma en el microscopio?
5- Importancia del microscopio en la actualidad.

Mg. Marco Antonio Mesa Guevara

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PRCTICA 3:RECONOCIMIENTO DE GLCIDOS

I.

COMPETENCIAS:
Identifica la presencia de carbohidratos en diferentes insumos
alimenticios.

II.

MATERIALES
-

Soluciones diluidas (5 gr. en 100 ml.) de glucosa, almidn.

Muestras de tubrculos,semillas,jugos,etc.

Reactivo de Benedict

Reactivo de Lugol (solucin iodada).

Gradilla con tubos de ensayo, pinzas sujetatubos, pipetas,


Beaker y mechero de alcohol.

III.

FUNDAMENTO TERICO

Los carbohidratos o hidratos de carbono glcidos constituyen compuestos


qumicosformados principalmente por carbono, hidrgeno y oxgeno, elementos
que se conjugan paraformar diversos tipos, en una proporcin generalmente de
1:2:1, respectivamente.Qumicamente se definen como polialcoholes con un grupo
aldehdo o cetona.
Estas biomolculas ejercen funciones fundamentales en los seres vivos, como:
soporte(celulosa), reserva de alimento (almidn), reserva energtica (glucgeno),
energa inmediata(glucosa).
Pueden clasificarse atendiendo a varios criterios: de acuerdo al nmero de
monmerosque constituyen al carbohidrato, al nmero de carbonos de sus
monmeros, segn el grupofuncional que posee ese monmero.
Responden a la frmula general (CH2O)n. Con n entre 3 y 7.

Mg. Marco Antonio Mesa Guevara

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RECONOCIMIENTO DE AZCARES REDUCTORES


REACTIVO DE BENEDICT
Los monosacridos tienen poder reductor debido a los radicales aldehdo o cetona
de sus molculas. Los disacridos con enlace glucosdico entre un radical reductor
y un grupo alcohol tambin tienen poder reductor. Si el enlace se realiza entre los
dos radicales reductores (carbonos carbonlicos), no tienen poder reductor. Este
poder reductor puede ponerse de manifiesto frente a sales de cobre, ya que el in
cprico se reduce por ganancia de un electrn, pasando a in cuproso en un medio
alcalino:
Cu++ + radical reductor -----> Cu+ + radical oxidado
(Cprico)

(Cuproso)

Esta reaccin es especfica para azcares con grupo reductores libres (C=O).
Todos los monosacridos poseen un grupo reductor libre. Los disacridos maltosa
y lactosatienen grupos reductores libres, pero la sacarosa no los posee, ya que se
pierden los gruposreductores de sus componentes cuando sta es formada.
La accin reductora se manifiesta mediante una solucin de sulfato cprico
(SO4Cu) de color azul, que pasa a xido cuproso (Cu2O) de color rojo ladrillo que
precipita. El reactivo utilizado es el de Benedict o el de Fehling, que contienen
sulfato cprico. Una turbidez verde-amarillenta en los resultados indica un 0,1-0,3%
de azcar reductor. Un precipitado de color mbar anaranjado, indica ms de un
1,5% de azcar reductor.
La coloracin depender de la concentracin de xido de cobre y sta a su vez de
lareduccin del cobre; va desde verde, amarillo, anaranjado o rojizo.

Mg. Marco Antonio Mesa Guevara

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RECONOCIMIENTO DE POLISACRIDOS
REACTIVO DE LUGOL
El Lugol (solucin de yodo-yodurado) colorea las micelas de almidn de color azul
intenso casi negro. El almidn es una mezcla (en diferentes proporciones segn las
especies) de los polisacridos amilosa (10-20%) y amilopectina (80-90%). El
almidn es coloreado de azul en presencia de Lugol, debido a una adsorcin o
fijacin del I-3 sobre las unidades de glucosa de la amilosa, y ayuda a mantener su
estructura. Al calentar hasta ebullicin, desaparece la estructura ternaria (incoloro)
y reaparece al enfriar (azul-violeta).
IV.

PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL

A.

Preparacin de las muestras


1. Se preparan

soluciones con las diferentes muestras de alimentos

raspando o triturando un trocito de tubrculo o semillas, adicionando


aproximadamente 5 ml de agua destilada.
2. En el caso de jugos diluir previamente la muestra: Medir 0,5 mL de
jugo y agregar 5 ml de agua destilada. Reservar en frascos rotulados.

Mg. Marco Antonio Mesa Guevara

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3. En el laboratorio se tendrn muestras controles de soluciones de


almidn, glucosa, etc.
B.

Identificacin cualitativa de azcares reductores con el reactivo de


Benedict
1. Se preparan una serie de tubos de ensayo con 2 ml. de las
soluciones preparadas en A rotulando cada tubo.
2. Preparar un tubo control con 2 ml de la solucin de glucosa.
3. Agregar a cada tubo 0,5 ml de reactivo de Benedict.
4. Llevar todos los tubos a bao Mara hirviente por 3 minutos.
Observar

si se producen variaciones de coloracin e

interpretar los resultados. Concluye acerca de la existencia de


azcares reductores en la solucin problema.
C.

Identificacin cualitativa de almidn con el reactivo de Lugol


1. Se preparan una serie de tubos de ensayo con 2 ml. de las
soluciones preparadas en A rotulando cada tubo.
2. Preparar un tubo control con 2 ml de la solucin de almidn.
3. Agregar a cada tubo 5 gotas de reactivo de Lugol.
4. Observar e interpretar los resultados. Concluye acerca de la
existencia de almidn en la solucin problema.

D.

Resultados:
1. Llenar la siguiente tabla en donde se colocar positivo (+) si hay
cambio de coloracin, formacin de precipitado, etc. o negativo (-) si
la muestra no cambia con la adicin del reactivo de identificacin

Mg. Marco Antonio Mesa Guevara

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Muestra

E.

Reactivo

Reactivo de

Lugol

Benedict

Anlisis de resultados:
1- Por cada muestra se indicar por separado si existe almidn
azcares reductores o si hay una mezcla de ambas.

V.

CUESTIONARIO

1. Qu otros reactivos qumicos se utilizan para la identificacin de


carbohidratos?
2. Ejemplos de carbohidratos reductores y no reductores.
3. Esquematice la estructura qumica del almidn, de la glucosa, de la
sacarosa, de la lactosa.
4. Por qu se considera reductor un azcar?
5. Escriba la reaccin de cada una de las pruebas realizadas en la
prctica.

Mg. Marco Antonio Mesa Guevara

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6. Qu ocurre si la disolucin de sacarosa es tratada previamente con


cido clorhdrico? Explica tu respuesta.
7. A qu se debe que el almidn con Lugol pierda el color al calentar, y
que vuelva a recuperar su color azul-violeta despus de enfriarse?

Mg. Marco Antonio Mesa Guevara

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PRCTICA 4: RECONOCIMIENTO DE LPIDOS

I.

COMPETENCIAS:
Identifica cualitativamente la presencia de lpidos en muestras de
alimentos.

II.

MATERIALES

Mechero.

Trpode

Rejilla de asbesto

Gradillas con tubos de ensayo

Vaso de precipitado

Solucin de detergente

Aceite vegetal

Solucin de Sudn III en frasco cuentagotas

Solucin de Hidrxido sdico al 20%.

ter

Cloroformo.

Bencina

Alcohol

Acetona

Mg. Marco Antonio Mesa Guevara

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III.

FUNDAMENTO TERICO

Los lpidos son un conjunto de molculas orgnicas, la mayora biomolculas,


compuestas principalmente por carbono e hidrgeno y en menor medida oxgeno,
aunque tambin pueden contener fsforo, azufre y nitrgeno, que tienen como
caracterstica principal el ser hidrofbicas o insolubles en aguay s en disolventes
orgnicos

como

la

bencina,

el

alcohol,

el

benceno

el

cloroformo.

En trminos generales llamamos aceites a los triglicridos de origen vegetal, y


corresponden

derivados

que

contienen

cidos

grasos

insaturados

predominantemente por lo que son lquidos a temperatura ambiente. (aceites


vegetales de cocina, y en los pescados.
Los lpidos desempean diferentes tipos de funciones biolgicas:

Funcin de reserva energtica. Los triglicridos son la principal reserva de


energa de los animales ya que un gramo de grasa produce 9 kilocaloras en
las reacciones metablicasde oxidacin, mientras que las protenas y los
glcidos slo producen 4 kilocaloras por gramo.

Funcin estructural. Los fosfolpidos, los glucolpidos y el colesterol forman


las bicapas lipdicasde las membranas celulares. Los triglicridos del tejido
adiposorecubren y proporcionan consistencia a los rganos y protegen
mecnicamente estructuras o son aislantes trmicos.

Funcin reguladora, hormonal o de comunicacin celular. Las vitaminas


liposolublesson de naturaleza lipdica (terpenos, esteroides); las hormonas

Mg. Marco Antonio Mesa Guevara

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esteroides regulan el metabolismoy las funciones de reproduccin; los


glucolpidos actan como receptores de membrana; los eicosanoides
poseen un papel destacado en la comunicacin celular, inflamacin,
respuesta inmune, etc.

Funcin transportadora. El transporte de lpidos desde el intestino hasta su


lugar de destino se realiza mediante su emulsin gracias a los cidos biliares
y a las lipoprotenas.

La caracterstica comn a todos los lpidos es que son insolubles en agua y


solubles en disolventes orgnicos como la gasolina, benceno, xilol, cloroformo.
Las grasas son insolubles en agua. Cuando se mezcla agua y aceite y se agita
fuertemente la mezcla, se forma una emulsin transitoria. Esto significa que si se
deja la mezcla reposar unos instantes, las gotas de aceite, de menor densidad,
suben y se unen entre s, formndose dos capas, la superior de aceite y la inferior
de agua.
Si a esta mezcla se la aade una solucin de jabn o detergente y se agita, se
produce entonces una emulsinpermanente. Esto es debido a que el jabn rodea
a las gotas de aceite quedando su parte hidrofbica (cola del cido graso) en
contacto con el aceite y su zona polar (COO Na+) en contacto con el agua. Esto
es lo que da a los jabones en general, sus cualidades como agentes de limpieza y
es una propiedad muy utilizada en la fabricacin de cosmticos que tienen en su
composicin agua y aceites, consiguindose un producto homogneo (se evita la
formacin de dos fases)

IV.

PARTE EXPERIMENTAL

1- PRUEBA DE SOLUBILIDAD
OBJETIVO: Comprobar la solubilidad de las grasas y los aceites en diferentes
solventes.

Mg. Marco Antonio Mesa Guevara

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PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL
1. Colocar aproximadamente 2ml de aceite en 4 tubos de ensayo previamente
rotulados.
2. Aadir a uno de ellos 2ml de agua, al otro 2ml de bencina, al otro 2 mL de
cloroformo y 2 ml de alcohol al ltimo tubo.
3. Agitar fuertemente ambos tubos y dejar reposar.
4. Observar los resultados.
5. Colocar soluble, poco soluble, insoluble de acuerdo a sus resultados en la
siguiente tabla:

bencina

agua

cloroformo

alcohol

Aceite

2- TINCINCON SUDN III


OBJETIVO: Reconocer Lpidos con la Coloracin de Sudan III.
PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL
1. Poner 2 ml. de aceite en un tubo, aadir 2 ml. de agua y dejar reposar. Una
vez formadas las dos fases, dejar caer unas gotas de Sudn III y agitar.
Dejar reposar el tubo y anotar los resultados.
Las grasas se colorean en rojo anaranjado por el colorante denominado
Sudan

III.

Se observar en el tubo al que se le aadi Sudn, que todo el aceite


aparece teido.

Mg. Marco Antonio Mesa Guevara

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3- SAPONIFICACIN
OBJETIVO: Comprobar cmo los lpidos saponificables forman jabn.
PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL

1. Colocar en un tubo de ensayo 2ml de aceite y 2ml de NaOH al 20%.


2. Agitar enrgicamente y colocar el tubo al bao Mara de 20 a 30 minutos.
3. Pasado este tiempo, se pueden observar en el tubo 3 fases: una inferior clara
que contiene la solucin de sosa sobrante junto con la glicerina formada, otra
intermedia semislida que es el jabn formado y una superior lipdica de aceite
inalterado.
4. Dibuja el tubo de ensayo indicando lo que contiene cada una de las fases que
observas.

4- FORMACIN DE EMULSIN ESTABLE


OBJETIVO:
Simular la accin de la Bilis durante la emulsin.
PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL
1. En 2 tubos de prueba secos colocar en cada uno de ellos ,2 ml de aceite
ms 2 ml de agua.
2. Se mezcla y luego de unos minutos se le agrega 0,5 ml de detergente (que
simula la accin de la Bilis) slo a uno de los tubos y

se mezcla

nuevamente.
3. Observar los resultados. Dibuja los tubos e indica en cul se forma una
emulsin transitoria y en cul una emulsin permanente.

Mg. Marco Antonio Mesa Guevara

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V.

CUESTIONARIO

1. Qu son los jabones?


2. Qu enzima logra en el aparato digestivo la hidrlisis de las grasas?
3. Qu es el Sudan III?
4. Qu es una emulsin?
5. Qu son las sales biliares y cules son sus funciones?

Mg. Marco Antonio Mesa Guevara

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PRCTICA 5: RECONOCIMIENTO DE PROTENAS

I.

COMPETENCIAS:
Identifica la presencia de protenas en diferentes insumos
alimentarios

II.

MATERIALES

Mechero.

Trpode

Rejilla de asbesto

Gradillas con tubos de ensayo

Vaso de precipitado

Pipetas

Clara de huevo o leche

Pizeta con agua destilada

HCl concentrado

Alcohol etlico

Reactivo de Biuret (Solucin de SO4Cu al 1% /NaOH al 20%)

Solucin de albmina al 1-2%

Solucin de Hidrxido sdico al 20%.

III.

FUNDAMENTO TERICO

Las protenas son macromolculas compuestas por carbono, hidrgeno, oxgeno y


nitrgeno. La mayora tambin contienen azufre y fsforo. Las mismas estn
formadas por la unin de varios aminocidos, unidos mediante enlaces peptdicos.
El orden y disposicin de los aminocidos en una protena depende del cdigo
gentico, ADN, de la persona.
Las protenas constituyen alrededor del 50% del peso seco de los tejidos y no
existe proceso biolgico alguno que no dependa de la participacin de este tipo de
sustancias.
Mg. Marco Antonio Mesa Guevara

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Las protenas desempean un papel fundamental para la vida y son las


biomolculas ms verstiles y ms diversas. Son imprescindibles para el
crecimiento del organismo. Realizan una enorme cantidad de funciones diferentes,
entre las que destacan:

Estructural (colgenoy queratina

Reguladora (insulina y hormona del crecimiento)

Transportadora (hemoglobina)

Defensiva (anticuerpos),

Enzimtica (sacarasa y pepsina)

Contrctil (actina y miosina)

Son esenciales para el crecimiento. Las grasas y carbohidratos no las


pueden sustituir, por no contener nitrgeno.

Proporcionan los aminocidos esenciales fundamentales para la sntesis


tisular.

Son materia prima para la formacin de los jugos digestivos, hormonas,


protenas plasmticas, hemoglobina, vitaminasy enzimas.

Funcionan como amortiguadores, ayudando a mantener la reaccin de


diversos medios como el plasma.

Las protenas estn formadas por aminocidos. Las protenas de todo ser vivo
estn determinadas mayoritariamente por su gentica (con excepcin de algunos
pptidos antimicrobianos de sntesis no ribosomal), es decir, la informacin
gentica determina en gran medida qu protenas tiene una clula, un tejidoy un
organismo.

Mg. Marco Antonio Mesa Guevara

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COAGULACIN DE LAS PROTENAS

Las protenas, debido al gran tamao de sus molculas, forman con el agua
soluciones coloidales. Estas soluciones pueden precipitar con formacin de
cogulos al ser calentadas a temperaturas superiores a los 70C o al ser tratadas
con soluciones salinas, cidos, alcohol, etc.
La coagulacin de las protenas es un proceso irreversible y se debe a su
desnaturalizacin por los agentes indicados, que al actuar sobre la protena la
desordenan por la destruccin de su estructura secundaria, terciaria y cuaternaria.

REACCIN DE BIURET
Esta reaccin la producen los pptidos
y

las

protenas,

pero

no

los

aminocidos ya que se debe a la

presencia del enlace peptdico CO-NH


que

se

destruye

al

liberarse

los

HN

NH

CH

en solucin acuosa alcalina (gracias a

HC

2+

aminocidos.
El reactivo de Biuret contiene CuSO4

Cu
O

HN

NH

la presencia de NaOH o KOH). La


reaccin se basa en la formacin de un

CH

HC

compuesto de color violeta, debido a la


formacin de un complejo de coordinacin entre los iones Cu 2+ y los pares de
electrones no compartidos del nitrgeno que forma parte de los enlaces peptdicos.
La intensidad de color depende de la concentracin de protenas.

Mg. Marco Antonio Mesa Guevara

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IV.

PARTE EXPERIMENTAL

REACCIN DE BIURET
1. En 2 tubos de ensayo colocar en uno 2 ml de clara de huevo diluida con
agua y en el otro tubo 2 ml leche diluida con agua.
2. Agregar 1 ml del reactivo de Biuret a cada tubo.
3. Observar los resultados.

COAGULACIN DE PROTEINAS
1. Colocar en tres tubos de ensayo una pequea cantidad de clara de huevo
(puede diluirse en un poco de agua para obtener una mezclaespesa) o 2-3ml de
leche.
2. Calentar uno de los tubos al bao Mara, aadir a otro 2-3ml de HClconcentrado
y al tercero 2 o 3ml de alcohol etlico.
3. Observar los resultados.

V.

CUESTIONARIO

1. Cmo se manifiesta la desnaturalizacin de la clara de huevo?


2. Cul de los agentes utilizados tiene mayor poder de desnaturalizacin?
3. Cmo podramos saber que una sustancia desconocida es una protena?
4. Qu coloracin da la reaccin del Biuret?
5. Una protena coagulada podra dar la reaccin del Biuret?
6. Si se realiza la reaccin del Biuret sobre un aminocido como la Glicina es
positiva o negativa? Por qu?

Mg. Marco Antonio Mesa Guevara

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PRCTICA 6:ACTIVIDAD ENZIMTICA

I.

COMPETENCIAS:
Al finalizar esta prctica el alumno:
Pondr de manifiesto la presencia de la enzima catalasa en tejidos
animales y vegetales.
Comprobar la accin de la temperatura sobre la actividad de las
enzimas.
Comprobar la accin hidroltica de la amilasa.
Realiza experimentalmente la hidrlisis del almidn por accin de la
amilasa salival.
Identifica cualitativamente la presencia de sustrato y producto.
Evala el efecto del pH en la accin de la enzima.

II.

MATERIALES:
Gradillas
Tubos de ensayo
Mechero
Pipetas
Bao Mara
Trocitos de hgado
Trocitos de papa
Arena fina
Agua oxigenada

Beaker pequeo para colectar saliva


Solucin de almidn al 1%
HCl
Reactivo Lugol
Reactivo de Benedict

Mg. Marco Antonio Mesa Guevara

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III.

FUNDAMENTO TERICO

Las enzimas son molculas de naturaleza proteica que catalizanreacciones


qumicas, siempre que sea termodinmicamente posible .En estas reacciones, las
enzimas actan sobre unas molculas denominadas sustratos, las cuales se
convierten en molculas diferentes denominadas productos. Casi todos los
procesos en las clulas necesitan enzimas para que ocurran a unas tasas
significativas. A las reacciones mediadas por enzimas se las denomina reacciones
enzimticas.
Como todos los catalizadores, las enzimas funcionan disminuyendo la energa de
activacin (G) de una reaccin, de forma que se acelera sustancialmente la tasa
de reaccin. Las enzimas son generalmente protenas globulares sintetizadas por
las propias clulas.
Las actividades de las enzimas vienen determinadas por su estructura
tridimensional, la cual viene a su vez determinada por la secuencia de
aminocidos. Casi todas las enzimas son mucho ms grandes que los sustratos
sobre los que actan, y solo una pequea parte de la enzima (alrededor de 3 a 4
aminocidos) est directamente involucrada en la catlisis. La regin que contiene
estos residuos encargados de catalizar la reaccin es denominada centro activo. La
mayora de las enzimas, al igual que el resto de las protenas, pueden ser
desnaturalizadas si se ven sometidas a agentes desnaturalizantes como el calor y
los pHs extremos. Estos agentes destruyen la estructura terciaria de las protenas
de forma reversible o irreversible, dependiendo de la enzima y de la condicin.

Mg. Marco Antonio Mesa Guevara

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IV.

PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL A
Para todas las pruebas, la velocidad de reaccin (desprendimiento de
burbujas), se registrar como sigue:
0 = No reacciona
1 = Lenta
2 = Moderada
3 = Rpida
4 = Muy rpida

1. Reconocimiento de la catalasa:
Como se mencion anteriormente la catalasa es una enzima que se encuentra en
las clulas de los tejidos animales y vegetales.

La funcin de esta enzima en los tejidos es necesaria porque durante el


metabolismo celular, se forma una molcula txica que es el perxido de
hidrgeno, H2O2 (agua oxigenada).
Esta enzima, la catalasa, lo descompone en agua y oxgeno, por lo que se
soluciona el problema.
La reaccin de la catalasa sobre el H2O2, es la siguiente:

La existencia de catalasa en los tejidos animales, se aprovecha para utilizar el agua


oxigenada como desinfectante cuando se echa sobre una herida. Como muchas de
las bacterias patgenas son anaerobias (no pueden vivir con oxgeno), mueren con
Mg. Marco Antonio Mesa Guevara

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el desprendimiento de oxgeno que se produce cuando la catalasa de los tejidos


acta sobre el agua oxigenada.
Desarrollo:
Rotular tres tubos de ensayo con las letras A, B y C.
Colocar en el tubo A un pedazo de hgado del tamao de un frijol, en
el tubo B un pedazo similar de papa y en el tubo C arena.
Aadir 3 mililitros de agua oxigenada a cada tubo.
Se observa un intenso burbujeo debido al desprendimiento de
oxgeno (anote la velocidad de reaccin segn lo indicado
anteriormente).
2. Reutilizacin de la enzima:
Rotule dos tubos con las letras D y E.
Sacar 2 ml del sobrenadante del tubo A.
Verter 1 ml de dicho sobrenadante en D y 1ml en E.
Aadir al tubo D un pedazo de hgado fresco y al tubo E 1ml de agua
oxigenada.
Anote sus observaciones.
3. Efecto del tamao de las partculas:
Rotule dos tubos con las letras F y G.
Triturar un pedazo de hgado y colocarlo en el tubo F.
Triturar un pedazo de papa y colocarlo en el tubo G.
Aadir 2 ml de agua oxigenada a cada tubo.
Observar la velocidad de reaccin y anote sus resultados.
4. Desnaturalizacin de la catalasa:
Mediante esta experiencia, vamos a ver una propiedad fundamental de protenas,
que

es

la

desnaturalizacin.

Ya que la catalasa qumicamente es una protena, podemos desnaturalizarla al


someterla a altas temperaturas. Al perder la estructura terciaria, pierde tambin la
funcin y como consecuencia su funcin cataltica, por lo que no podremos

Mg. Marco Antonio Mesa Guevara

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descomponer el agua oxigenada y no se observaremos ningn tipo de reaccin


cuando hagamos la experiencia anterior con muestras de tejidos hervidos.
1. Colocar en un tubo de ensayo un trocito de hgado entero.
2. Poner el tubo en un beaker con agua hirviendo durante cinco minutos.
3. Despus de este tiempo, retirar el tubo.
4. Aadir 2 ml de agua oxigenada.
5. Observar el resultado.
6. Repetir lo mismo con la papa cruda.
HIDRLISIS DEL ALMIDNPOR ACCIN DE LA AMILASA
El almidn es un polisacrido homogneo, formado por molcula de
unidas mediante

enlaces glucosdicos.

Constituye

la

glucosa

principal forma

de

almacenamiento de sustancias de reserva de los vegetales y de algunas bacterias


bajo la forma de grnulos.
Estructuralmente el almidn se encuentra bajo 2 formas: la - amilosa (cadena
lineal) y la amilopectina (cadena ramificada). Mediante esta experiencia, vamos a
ver la actividad de la enzima amilasa, presente en la saliva. Esta enzima acta
sobre el almidn, hidrolizando el enlace -glucosdico, obtenindose

azcares

reductores como producto de la accin de la enzima. Se ver como el pH cido


afecta la accin de la enzima.
V.

PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL B

COLECCIN DE SALIVA Antes de la coleccin se proceder a un enjuague


simple de la cavidad oral con agua; luego manteniendo la boca cerrada esperar
entre 5 a 7 minutos evitando hablar y pasar saliva. La coleccin se realizar en un
recipiente de boca ancha(beaker) dejando caer por gravedad la saliva, evitando as
la formacin de espuma.

Mg. Marco Antonio Mesa Guevara

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DILUCIN DE LA SALIVA
En un tubo de ensayo colocar 1 ml de saliva y agregar 4 ml de agua destilada.
Mezclar por inversin .Se obtiene as la saliva diluida.

TUBOS DE DIGESTION

ml de almidn al 1%

2.0

2.0

mlde agua

1,0

mlHCl 0.5 N

1,0

ml saliva diluida

1.0

1.0

Incubar en bao Mara de 37 C por 10 minutos .Luego retirar del bao Mara y
agitando previamente los tubos de la digestin preparar las siguientes bateras:

REACCIN DE LUGOL
TUBOS

Digerido 1 ml

1.0

Digerido 2

ml

1.0

HCl 0.5 N

ml

0.5

0.5

2.0

2.0

Lugol

ml

Mezclar y observar los resultados:

REACCIN DE BENEDICT:

TUBOS

Digerido 1

ml

0.5

Digerido 2

ml

0.5

0.5

0.5

Reactivo de Benedict ml

Colocar en bao de agua hirviente (100 C) por 5 minutos, observe los resultados.

Mg. Marco Antonio Mesa Guevara

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VI.

CUESTIONARIO
a. Qu sucede cuando se pone perxido de hidrgeno en una herida?
Qu sugiere la evidencia?
b. Explique por qu tantas especies producen la enzima catalasa.
c.

Mencione ejemplos de cosas en nuestro diario vivir que envuelven


algn uso de enzima.

d. Cules son los productos finales de la digestin del almidn por la


amilasa?
e. Qu funcin cumple el HCl 0,5 N en el tubo 3 de digestin?

Mg. Marco Antonio Mesa Guevara

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PRCTICA 7: AISLAMIENTO DE CIDOS NUCLEICOS


I.

COMPETENCIAS
Utiliza tcnicas de extraccin de ncleos de los tejidos
Emplea tcnica de extraccin del ADN
Reconoce las fibras de ADN extradas

II.

MATERIALES
SDS al 20% detergente lquido.
NaCl 2M
Agua destilada
Colorante Wright
Baguetas
Embudos
Morteros c/ piln
Hoja de bistur
Guantes
Lmina y laminilla por Alumno
Hgado de pollo con sus dos lbulos. al que se ha quitadopreviamente todo el
tejido conjuntivo
150 gr. de fresa(6 fresas)
2 vasos de Beaker medianos :100 mL
1 paquete pequeo de gasa
Jugo fresco colado de pia recin hecho ( 50 mL)
2 frascos de 100 ml. alcohol etlicoHelado

Mg. Marco Antonio Mesa Guevara

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ATENCIN el alcohol debe ser colocado en el frzer desde el da anterior y tiene


que ser de

96 si Ud. tuvieran un recipiente hermtico colocarlo para que se

conserve bien frio hasta la hora de la prctica.


III.

FUNDAMENTO TERICO

La informacin necesaria para la construccin de los seres vivos se encuentra


almacenada en los cidos nucleicos. Su nombre deriva de su carcter cido y del
hecho de que fueron descubiertos en el ncleo de las clulas eucariontes.
Existen dos variedades qumicas de cidos nucleicos: el DNA (cido
desoxirribonucleico) y el RNA (cido ribonucleico). Generalmente, la informacin
gentica se almacena en forma de cromosomas de DNA y se expresa en forma de
mRNA (RNA mensajero).

Las clulas eucariotas presentan un contenido en DNA mucho mayor que las
clulas procariotas. Las molculas de DNA en eucariotas se combinan con
protenas y se organizan en fibras de cromatina, la cual est totalmente
condensada con el fin de ocupar el mnimo volumen posible en el interior del ncleo
de la clula.
Las principales funciones del DNA son:
- Almacenar la informacin gentica completa, necesaria para determinar la
estructura de todas las protenas y RNAs de cada especie.
- Programar en el tiempo y espacio ordenadamente la biosntesis de las clulas y
los componentes de los tejidos.
- Determinar las actividades de un organismo a travs de su ciclo de vida.
- Determinar la individualidad de un organismo dado.
Los RNAs, aun siendo mucho ms cortos que los DNAs, son mucho ms
abundantes en la mayora de las clulas. Tanto en clulas eucariotas como
procariotas las tres clases mayoritarias de RNAs son: mensajero (mRNA),
Mg. Marco Antonio Mesa Guevara

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ribosomal (rRNA) y transferente (tRNA). Cada uno consta de una cadena simple de
ribonucletidos con un determinado peso molecular, secuencia de nucletidos y
funcin biolgica.
La cantidad y pureza de los cidos nucleicos en una preparacin puede estimarse
mediante espectrofotometra. La absorcin a 260 nm permite calcular su
concentracin: 1 unidad de absorbancia (UA) corresponde aproximadamente a
50 g/mL para DNA de cadena doble y 40 g/mL para DNA de cadena simple y
RNA. El cociente A260/A280 da una estimacin de la pureza de los cidos
nucleicos: una preparacin pura de DNA y RNA tiene un valor de A260/A280 de 1,8
y 2,0 respectivamente. Valores significativamente menores indican contaminacin
con protenas o fenol, y, por consiguiente, no ser posible cuantificar con precisin
la cantidad de cidos nucleicos.
El objetivo de esta prctica es aislar cidos nucleicos (fundamentalmente DNA) a
partir de un tejido animal: Hgado de pollo y tejido vegetal: Fresa

UTILIDAD DE LA PURIFICACIN DE CIDOS NUCLEICOS


La importancia del proceso de obtencin y purificacin del material gentico es
recobrar el producto mximo de ADN de alto peso molecular libre de protenas,
fenol e inhibidores de las enzimas de restriccin. El ADN de alta calidad es un
prerrequisito para su uso en tcnicas de Biologa molecular como impresiones
digitales de ADN o Fingerprinting (utilizando secuencias altamente repetitivas
denominadas mini satlites que permite la identificacin gentica de las personas)
y PCR (para la identificacin de las secuencias especficas de ADN mediante el
usos de cebadores).
IV.

PROCEDIMIENTO

EXTRACCIN DE ADN: TEJIDO ANIMAL VEGETAL


1. Triturar el hgado de pollo la fresa en un mortero.
2. Aadir al triturado, 50 ml. de agua destilada y con una cuchara, mover y
presionar hasta que se torne homognea.
Mg. Marco Antonio Mesa Guevara

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3. Filtrar, mediante una gasa, hasta verificar la separacin de los restos de


tejido.
4. El filtrado trasvasarlo a unBeaker mediano y aadir un volumen similar de
NaCl 2M, mezclar. Agregar 5 ml. de Lauril sulfato de sodio (SDS)

detergente lquido y mezclar bien agitando suavemente por 10 minutos.


5. Aadir 2 mL de jugo de pia fresco y agitar suavemente para no romper el
ADN.
6. Aadir suavemente, por la paredes del vaso, alcohol etlico de 96
(preferencia fro), verificando que se formen 2 fases. En la interfase precipita
el ADN.
7. Introducir una bagueta o varilla de vidrio y mover en una misma direccin
para que las hebras de ADN se vayan enrollando y adhiriendo a la bagueta.
8. COLORACION: Tomar una muestra del ADN enrollado en la bagueta y
extender sobre una lmina, dejar secar bien y agregar el colorante Wright,
dejar por 5 minutos. Lavar y dejar secar, observar al microscopio con los
objetivos de 10 y 40X.
V.

CUESTIONARIO

1. Explique los paso para realizar la extraccin de ADN


2. Qu funcin cumplen cada uno de los reactivos utilizados en la extraccin
de ADN?
3. Qu utilidad tiene la extraccin de ADN en el laboratorio?
4. Qu importancia tiene la extraccin del ADN en salud?

Mg. Marco Antonio Mesa Guevara

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PRCTICA 8:CLULA PROCARIOTA-TCNICA DE


COLORACIN BACTERIANA
TINCIN DE PARED CELULAR
I.

COMPETENCIA

II.

III.

Conoce las diversas tcnicas de tincin y el fundamento de las mismas.

MATERIALES

Asa de siembra

Mechero Bunsen

Microscopio

Batera para tincin Gram

Porta objetos

Mondadientes

Aceite de inmersin

Guantes

Pizeta con agua destilada

Gorro

Solucin salina

Mascarilla

FUNDAMENTO TERICO
PARED CELULAR
Debajo de las sustancias extracelulares tales como las cpsulas o
capas mucosas y externas a la membrana citoplasmtica est la pared
celular que es una estructura muy rgida y que da forma a la clula.

Las

paredes celulares bacterianas son esenciales para el crecimiento y la


divisin. Todas las bacterias poseen paredes celulares rgidas que protegen
a la clula de explotar en medios de baja presin osmtica.
Composicin qumica de las paredes celulares.-

El pptidoglucano

proporciona a la pared celular una estructura rgida. Estos grandes


polmeros, estn compuestos de tres clases de bloques estructurales: NAcetil-Glucosamina, cido N- Acetil-Murmico y un pptido que consta de
cuatro o cinco aminocidos. Adems contiene protenas con polisacridos,
lipoprotenas y lipopolisacridos.
Mg. Marco Antonio Mesa Guevara

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Propiedades y Funciones:

Brinda proteccin y resistencia a la bacteria frente a los posibles


cambios de presinosmtica del medio en el que se encuentra y a la
accin de ciertos agentes externos.

Presenta Poros que actan como filtros, permitiendo el pasaje de


aguay metabolitos esenciales.

Presenta antgenos de tipo y grupoespecficos.

Participa en la divisin (multiplicacin) bacteriana (se invagina junto


con la membrana plasmtica).

En las bacterias Gram .negativas tiene poder patgeno debido a que


presenta endotoxinas (Lpido A).

MTODO DE TINCIN DE GRAM


A pesar de que fue desarrollada en el siglo XIX la tincin de Gram es la ms
utilizada en el diagnstico microbiolgico.
La tincin de Gram es una tincin diferencial que permite distinguir dos grandes
grupos bacterianos: las Gram (+) y las Gram (-).
Tincin empleada en microbiologa para la visualizacin de bacteriasen muestras
clnicas. Tambin se emplea como primer paso en la diferenciacin bacteriana. El
examen con microscopio ptico de preparacin con tincin de Gram se emplea de
rutina para determinar la forma de las bacterias. Las formas comunes son cocos
(esfricas), bacilos (alargadas) y formas espiraladas

Las bacterias pueden

diferenciarse con esta tincin en dos grupos. Los microorganismos Grampositivos


se tien de azul, mientras que aproximadamente un tercio de los cocos, la mitad
de los bacilos y todos los organismos espira lados se tien de rojo y se dice que
son Gramnegativos.
El valor diagnstico de esta tincin es variable; normalmente permite una buena
orientacin al microbilogo para seleccionar las tcnicas de cultivo ms adecuadas

Mg. Marco Antonio Mesa Guevara

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y tambin tiene valor en orientar hacia un diagnstico etiolgico, en especial para


instaurar un tratamiento inicial.
La tincin de Gram requiere cuatro soluciones:
Primer colorante: El cristal violeta es un colorante bsico que en contacto
con las clulas bacterianas cargadas negativamente, reaccionan con ellas
colorendolas.
Solucin mordiente: El Lugol que fija las tinciones y aumenta la afinidad
entre el colorante y las clulas. El ingrediente activo de este compuesto es el
I2; El KI simplemente hace soluble el I2 en el agua. El I2entra en las clulas y
forma un complejo insoluble en agua con el cristal violeta. Hasta este
momento las clulas Gram (+) como Gram (-) se encuentran teidas de color
violeta.
Agente decolorante: El alcohol acetona es un solvente orgnico que disuelve
la membrana externa de las Gram (-) facilitando la salida del complejo
colorante-mordiente. Debemos tomar en cuenta la delgada capa de murena
incapaz de retener este complejo en las Gram (-).
Luego de este tratamiento las bacterias Gram (+) mantienen el color violeta y
las Gram (-) quedan decoloradas.
Colorante de contraste: Es un colorante bsico de distinto color que el primer
colorante, como la safranina ola fucsina bsica

Mg. Marco Antonio Mesa Guevara

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Los dos grupos bacterianos que distingue esta tcnica difieren en el color con el
que finalmente aparecen. Las bacterias Gram (+) se tien de azul-violeta por el
cristal violeta y no perdern esta coloracin durante los pasos sucesivos. Las
bacterias Gram (-) perdern la coloracin inicial del cristal violeta en los siguientes
pasos y se teirn de rosa debido al colorante de contraste.
La diferencia est determinada por la composicin de su pared celular. Las
bacterias Gram (+) poseen una gruesa malla de pptidoglucano en su parte ms
externa, mientras que, las Gram (-), recubriendo una capa fina de pptidoglucano,
presentan una membrana lipdica externa que envuelve toda la clula.

Mg. Marco Antonio Mesa Guevara

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PROCEDIMIENTO
REALIZACIN DEL FROTIS

1. Colocar una pequea gota de agua en el centro de un portaobjetos limpio.


Es necesaria muy poca cantidad de agua, por lo que se puede usar el asa
de siembra, ya que en el extremo curvo de su filamento queda retenida una
mnima gota de agua, que resulta suficiente.
2. Flamear el asa de siembra, tomar, en condiciones aspticas, una pequea
cantidad del cultivo bacteriano en medio slido y transferirlo a la gota de
agua. Remover la mezcla con el asa de siembra hasta formar una
suspensin homognea que quede bastante extendida para facilitar su
secado. Si la muestra se toma de un cultivo en medio lquido, no es
necesario realizar los dos primeros pasos ya que basta con colocar y
extender una gota de la suspensin bacteriana, que se toma con el asa de
siembra, directamente sobre el portaobjetos.
3. Esperar hasta que el lquido se evapore o acelerar su evaporacin
acercando el portaobjeto a la llama del mechero. En este caso hay que tener
mucha precaucin de no calentar demasiado el porta pues las clulas
pueden deformarse o romperse.
A) TINCIN DE GRAM
1. Realiza la preparacin del frotis bacteriano como se explic en el paso
anterior
2. Teir con cristal violeta 1min.
3. Lavar con abundante agua el exceso de colorante.
4. Cubrir con Lugol 1min.
5. Lavar con agua el exceso de Lugol.
6. Decolorar con alcohol-acetona o simplemente con alcohol hasta que la
preparacin deje de perder color (30)
7. Lavar con abundante agua para eliminar el resto de disolvente.
8. Teir con safranina 1min.
Mg. Marco Antonio Mesa Guevara

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9. Lavar con agua para eliminar el colorante de contraste.


10. Secar la preparacin.
11. Examinar al microscopio con aceite de inmersin y fijndose sobre todo en
el color de cada preparacin.
CUESTIONARIO
1. Qu es un frotis?
2. Con qu finalidad se fija la muestra de microorganismos en el porta
objetos?
3. Qu importancia tiene teir las muestras bacterianas?
4. Por qu es necesario emplear aceite de inmersin para la observacin de
los microorganismos?
5. De los reactivos que utilizaste para la tincin de Gram, cul es el que
funciona como colorante primario?
6. Qu funcin tiene el Yodo en la tincin de Gram?
7. Qu color se tien las bacterias Gram (+) y Gram (-)?
8. Menciona tres bacterias Gram (+) y escribe la enfermedad que causan.
9. Menciona tres bacterias Gram (-) y escribe la enfermedad que causan.

Mg. Marco Antonio Mesa Guevara

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PRCTICA 9:CLULA EUCARIOTA-SMOSIS

I.

COMPETENCIAS:
Al finalizar esta prctica el alumno:
Describe la estructura general de las clulas animales y vegetales y
comprueba la importancia que tiene la concentracin del medio en
que estn inmersas, para la vida de las clulas.
Comprueba el fenmeno de smosis en clulas animales y vegetales

II.

MATERIALES

Proporciona el Laboratorio

Traern los alumnos

Microscopio Compuesto.

Hisopos estriles.

Azul de metileno.

Planta Elodea

Lugol

Bulbo de cebolla

Solucin salina:

Hoja de geranio

0.9% NaCl

Pinza

0.2% NaCl

Gotero

2.0% NaCl

Hoja de afeitar

Lminas portaobjeto

Papel

Lminas cubreobjetos

Gota de sangre

III.

servilleta

FUNDAMENTO TERICO
La biologa celular (antiguamente citologa de cito=clula y Logos=Estudio o
Tratado ) es una disciplina acadmica que se encarga del estudio de las
clulas en cuanto a sus propiedades, estructura, funciones, orgnulos que
contienen, su interaccin con el ambiente y su ciclo vital.

Mg. Marco Antonio Mesa Guevara

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Con la invencin del microscopio ptico fue posible observar estructuras


nunca antes vistas por el hombre, las clulas. Esas estructuras se estudiaron
ms detalladamente con el empleo de tcnicas de citoqumica y con la ayuda
fundamental del microscopio electrnico.
La biologa celular se centra en la comprensin del funcionamiento de los
sistemas celulares, de cmo estas clulas se regulan y la comprensin del
funcionamiento de sus estructuras. Una disciplina afn es la biologa molecular
La clula es la unidad fundamental de la vida, representa la unidad
morfolgica, fisiolgica, gentica y evolutiva de todos los seres vivos. Las
clulas vivientes difieren unas de otras en forma, tamao, estructura interna,
funciones, etc. No existe pues, clula viva tpica, hay una gran variedad en
morfologa y funcin, pero todas coinciden en la estructura bsica: Envoltura
celular, membrana, citoplasma y ncleo.
En las clulas vegetales podemos encontrar adems la presencia de plastos y
pared celular celulsica y la ausencia de centriolo y lisosomas.
Sin embargo, hay caractersticas comunes a la mayor parte de las clulas, de
este modo, las cuatro partes bsicas corresponden a:
a. Envoltura celular
b. Membrana celular
c. Citoplasma
d. Ncleo

DIFERENCIAS ENTRE CELULA ANIMAL Y VEGETAL

CLULA ANIMAL.
1. Presenta una membrana celular simple.
2. La clula animal no lleva plastidios.
3. El nmero de vacuolas es muy reducido.
4. Tiene centrosoma.
5. Presenta lisosomas.
Mg. Marco Antonio Mesa Guevara

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6. No se realiza la funcin de fotosntesis (nutricin hetertrofa).


7. Nutricin hetertrofa.

CLULA VEGETAL
1. Presenta una membrana celulsica o pared celular, rgida que contiene
celulosa.
2. Presenta plastidios o plastos como el cloroplasto.
3. Presenta numerosos grupos de vacuolas.
4. No tiene centrosoma.
5. Carece de lisosomas.
6. Se realiza funcin de fotosntesis (nutricin auttrofa).

IV.

PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL
Para observar clula animal:
1.

Con un hisopo haga un raspado del epitelio bucal.

2.

Coloque en una lmina porta objetos la muestra obtenida.

3.

Realice un frotis en una sola direccin (extendido de la muestra).

4.

Secar al medio ambiente durante 5 minutos.

5.

Agregar 1 a 2 gotas de azul de metileno y esperar 3 minutos.

6.

Echar unas gotas de agua sobre la preparacin para lavar el exceso.

7.

Observe al microscopio a menor y mayor aumento. Esquematice.

Para observar clula vegetal:


Clula de epidermis de la cebolla (Allium cepa)
1.

Coloque una gota de agua en el


centro de la lmina.

2.

Con

una

pinza

desprenda

la

epidermis de la cara interior de un


catfila

de

epidrmica

cebolla,
deber

Mg. Marco Antonio Mesa Guevara

la

capa
ser
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transparente.
3.

Coloque en la lmina porta objeto la epidermis de la cebolla.

4.

Extienda cualquier doblez de la epidermis.

5.

Coloque una lmina cubre objetos sobre la epidermis; no aplique


presin alguna sobre la lmina.

6.

Observe con los objetivos: seco dbil y seco fuerte. Esquematice.

7.

Una vez observado la muestra anterior, separe la lmina del


microscopio, levante el cubre objetos para agregarle 2 gotas de lugol
y espere unos 3 minutos.

8.

Si hay exceso de colorante, lave la muestra con cuidado o elimine con


papel servilleta.

9.

Coloque nuevamente el cubre objeto y observe.


Clula de Elodea (Planta acutica)

1.

Coloque una gota de agua en el centro de la lmina.

2.

Tome una hoja de Elodea, llvela al porta objeto.

3.

Coloque una laminilla. Luego observe con los objetivos: seco dbil y
seco fuerte. Esquematice.
Pared celular

Cloroplastos

Citoplasma

Clula de Geranio
1. Coloque una gota de agua en el centro de la lmina.
2. Con una pinza desprenda la epidermis de la cara interior de la hoja, la
capa epidrmica deber ser transparente.
Mg. Marco Antonio Mesa Guevara

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3. Coloque en la lmina porta objeto la epidermis del geranio.


4. Extienda cualquier doblez de la epidermis.
5. Coloque una lmina cubre objetos sobre la epidermis; no aplique presin
alguna sobre la lmina.
6. Observe con los objetivos: seco dbil y seco fuerte. Esquematice.
7. Una vez observado la muestra anterior, separe la lmina del microscopio,
levante el cubre objetos para agregarle 2 gotas de lugol y espere unos 3
minutos.
8. Si hay exceso de colorante, lave la muestra con cuidado o elimine con
papel servilleta.
9. Coloque nuevamente el cubre objeto y observe.
Ostiolo
Clula estomtica

FUNDAMENTO TERICO-SMOSIS
La membrana celular adems de delimitar y proteger las clulas, se encarga de
regular el transporte de materiales entre stas y su medio circundante.
Existen diferentes tipos de transporte, dependiendo de la naturaleza de las
sustancias transportadas y de la cantidad en que se encuentren, dentro o fuera de
las clulas.
A escala celular se reconocen 2 tipos de transporte: el pasivo y el activo. El
transporte pasivo es el movimiento de molculas a travs de los poros de la
membrana celular, desde una zona de alta concentracin a otra de menor
concentracin; el proceso no implica gasto de energa. La difusin y osmosis son
ejemplo de este tipo de transporte. La smosis es el movimiento de molculas de
agua a travs de una membrana semipermeable.

Mg. Marco Antonio Mesa Guevara

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La difusin es el movimiento de molculas de una sustancia a travs de la


membrana desde una zona de mayor concentracin de molculas a una de menor
concentracin. Es un proceso fsico irreversible, en el que partculas materiales se
introducen en un medio que inicialmente estaba ausente, aumentando la entropa
del sistema conjunto formado por las partculas difundidas o soluto y el medio
donde se difunden o disolvente.
Normalmente los procesos de difusin estn sujetos a la Ley de Fick. La membrana
semipermeable puede permitir el paso de partculas y disolvente siempre a favor
del gradiente de concentracin. La difusin, proceso que no requiere aporte
energtico, es frecuente como forma de intercambio celular.
La smosis es el movimiento de molculas de agua a travs de una membrana
semipermeable, se la define como un fenmeno en el que se produce el paso o
difusin de un disolvente a travs de una membrana semipermeable, la cual
permite el paso del disolvente pero no el del soluto, desde una disolucin ms
diluida a otra ms concentrada.
La capacidad que tiene el agua de atravesar la membrana plasmtica, que se
comporta como una membrana semipermeable, depende de la diferencia de
concentracin entre los lquidos extracelular e intracelular y viene determinada por
la presencia de sales minerales y molculas orgnicas disueltas.
SOLUCIONES FISIOLGICAS
El agua se mueve fcilmente cruzando las membranas celulares, a travs de
canales especiales revestidos de protena. Si el total de la concentracin de todos
los solutos disueltos no es igual en ambos lados, habr un movimiento neto de
molculas de agua hacia dentro o fuera de la clula. Para donde es el movimiento
del agua, depende si el medio donde se encuentra la clula es isotnico, hipotnico
o

Mg. Marco Antonio Mesa Guevara

hipertnico.

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Solucin isotnica
Cuando dos medios son isotnicos, el total de la
concentracin molar de los solutos disueltos es el mismo
en ambos.
Cuando las clulas estn en una solucin isotnica, el
movimiento de agua hacia afuera est balanceado con el
movimiento de agua hacia adentro. Un 0.9% de solucin
de NaCl (salina) es isotnica para las clulas animales. Note que el nmero de
molculas de agua en ambos lados de la membrana, permaneces esencialmente
sin cambios.

Solucin hipotnica
Hipotnico viene del griego "hypo," que significa bajo, y
"tonos," que significa dilatarse. En una solucin hipotnica,
el total de la concentracin molar de todas las partculas
disueltas, es menos que el de otra solucin o menos que el
de la clula.
Si las concentraciones de solutos disueltos son menos fuera de la clula que
dentro, la concentracin de agua afuera es correspondientemente ms grande.
Cuando una clula es expuesta a condiciones hipotnicas, hay un movimiento neto
de agua hacia dentro de la clula. Las clulas sin pared celular se inflan y pueden
explotar (lisis). Si el exceso de agua no es removido de la clula. Las clulas con
paredes celulares a menudo se benefician de la presin que da rigidez en medios
hipotnicos. Note que el nmero de molculas de agua dentro de la clula se
incrementa con el tiempo, y la clula se hincha como resultado.

Mg. Marco Antonio Mesa Guevara

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Solucin hipertnica
Hipertnica viene del griego "hyper," que significa sobre
y "tonos," que significa expandirse. En una solucin
hipertnica, la concentracin molar total de todas las
partculas de soluto disuelto, es ms grande que el de
la otra solucin, o ms grande que la concentracin de
la clula.
Si las concentraciones de solutos disueltos son mayores fuera de la clula, la
concentracin de agua es correspondientemente menor. Como resultado, el agua
dentro de la clula sale para alcanzar el equilibrio, produciendo un encogimiento de la
clula. Al perder agua la clula tambin pierden su habilidad para funcionar o
dividirse. Los medios hipertnicos, como la salmuera o jarabes, han sido utilizados
desde la antigedad para preservar la comida, debido a que los microbios que
causan la putrefaccin, son deshidratados en esos medios hipertnicos y son
incapaces de funcionar. Note que el nmero de molculas de agua dentro de la clula
disminuye con el tiempo, y la clula se encoge como resultado.

I.

PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL

Experiencia 1: Permeabilidad celular en epidermis de cebolla


Haga tres preparaciones hmedas de epidermis de cebolla.
En la primera lmina coloque tres gotas de solucin salina 0.9%
(solucin isotnica), en la segunda lmina coloque solucin salina 2%
(solucin hipertnica) y en la ltima lmina coloque solucin salina
0.2% (solucin hipotnica).
Marque cada una de las preparaciones.
Cubra las diferentes preparaciones con las laminillas.
Examine al microscopio cada una de las preparaciones con los
objetivos de menor y mayor aumento.

Mg. Marco Antonio Mesa Guevara

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Dibuje sus observaciones. Incluya los dibujos con el aumento en


donde se note mejor la estructura.
Experiencia 2: Permeabilidad celular en hoja de Elodea
Haga tres preparaciones hmedas de la hojita de Elodea.
Adicinele tres gotas de solucin isotnica a la primera lmina, tres
gotas de solucin hipertnica a la segunda lmina y finalmente tres
gotas de solucin hipotnica a la tercera lmina.
Marque cada una de las preparaciones.
Cubra las diferentes preparaciones con laminillas.
Observe con menor y mayor aumento.
Dibuje sus observaciones.

Experiencia 3: Permeabilidad celular en eritrocitos


Haga tres preparaciones colocando una gota de sangre sobre lminas
portaobjeto.
Adicinele tres gotas de solucin isotnica a la primera lmina, tres
gotas de solucin hipertnica a la segunda lmina y finalmente tres
gotas de solucin hipotnica a la tercera lmina.
Marque cada una de las preparaciones.
Cubra las diferentes preparaciones con laminillas.
Observe con menor y mayor aumento.
Note el cambio que se produce en las clulas
Dibuje sus observaciones.

Mg. Marco Antonio Mesa Guevara

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Plasmlisis en clulas de cebolla

II.

Plasmlisis en Elodea

Crenacin En glbulos rojos

CUESTIONARIO
1.

Por qu es posible obtener algunas clulas por simple frotamiento del


interior de la mejilla?

2.

Qu diferencia existen entre una clula eucariota y una clula


procariota?

3.

Qu es una clula animal?

4.

Con qu finalidad empleamos el Lugol?

5.

Qu es una clula vegetal y cules son sus componentes?

6.

Por qu la pared celular es ms fcil de observar que las estructuras de


la reas internas de la clula?

7.

Qu estructuras observ en la clula de Elodea?

8.

Qu diferencias estructurales existen entre las clulas del epitelio bucal


con las de la cebolla?

9.

Qu es la ciclosis?

10. A qu se llama solucin hipertnica, hipotnica e isotnica?


11. Qu es el osmmetro y en qu consiste?
12. Qu es y en qu tipo de clulas acta la bomba de Sodio / Potasio?
13. Qu mecanismo presentan los peces para vivir, algunos en el agua
salada y otros en el agua dulce? Explique.
14. Qu puedes decir sobre la concentracin osmtica del citoplasma de
las clulas de la epidermis de cebolla?
15. Se habran obtenido los mismos resultados si se hubiera empleado un
alga marina en el experimento?
Mg. Marco Antonio Mesa Guevara

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PRCTICA 10: PLASTIDIOS E INCLUSIONES CITOPLASMTICAS

I.

COMPETENCIAS:
Reconoce algunos orgnulos vegetales: cromoplastos y amiloplastos, as
como las diferentes inclusiones citoplasmticas.

II.

MATERIALES
Microscopio ptico
Portaobjetos y cubreobjetos
Soporte para tinciones
Cuchilla o bistur
Lugol.
Material biolgico:

III.

Papa

Tomates

Camote

Pimiento

Yuca

Zanahoria

Semillas de trigo

Penca de tuna

Arroz

Ajos.

FUNDAMENTO TERICO
Los vegetales son seres auttrofos fotosintticos. Gracias a la clorofila son
capaces de sintetizar materia orgnica, fundamentalmente glcidos, a partir de
compuestos inorgnicos como el CO2. Los plastos son los principales orgnulos
implicados en dicho proceso.

A. LOS PLASTIDIOS
Son orgnulos exclusivos de vegetales, provistos de una doble membrana y cuya
funcin es almacenar y sintetizar determinadas sustancias.
Mg. Marco Antonio Mesa Guevara

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Pueden ser:
CLOROPLASTOS: Son los plastidios ms importantes, dentro de ellos se
encuentra la clorofila y por eso los vegetales pueden fotosintetizar.
CROMOPLASTOS: Son plastidios fotosintticamente inactivos, contiene
pigmentos amarillos, (Xantofilas) anaranjados (Carotenos) y rojos (Licopeno)
Son los responsables del color de las flores y frutos. Sirven como indicadores de
madurez en funcin de su concentracin adems poseen protenas lpidos y RNA.
LEUCOPLASTOS
Presentes en rganos de reserva. Los encontramos en tubrculos (papa), rizomas
(batata), frutos (banana), y semillas (maz). Es una fuente de energa.
AMILOPLASTOS
Son leucoplastos especializados en la reserva de almidn

B. INCLUSIONES CITOPLASMTICAS:
CRISTALES DE OXALATO DE CALCIO:

La formacin de cristales de oxalato de calcio parece jugar un papel central en


importantes funciones de las plantas, entre las que se incluyen la regulacin en los
niveles de calcio, la proteccin contra la herbivora y la detoxificacin de metales
pesados. Las morfologas especie-especficas que presentan estos cristales, indican que
su formacin est altamente regulada. Esta regulacin es llevada a cabo por una matriz
proteica que se encuentra dentro de la vacuola de clulas altamente especializadas
llamadas idioblastos. Esta matriz controla la forma, orientacin y estado de hidratacin
de los cristales de oxalato de calcio formados por la planta, dotndolos de caractersticas
especiales que no comparten con su contraparte inorgnica.

Mg. Marco Antonio Mesa Guevara

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La mayora de las plantas producen cristales de oxalato de calcio, los cuales pueden
representar ms del 85 % del peso seco de algunas de ellas (cactceas) (1). Los
primeros reportes de estos cristales en las plantas fueron realizados por Leeuwenhoek
en el siglo XVII; sin embargo, no se les dio mucha importancia, ya que se les consider
slo como productos de desecho. Debido a que presentaban morfologas peculiares y
una compleja fenomenologa asociada a su formacin, en la dcada de los aos 70 se
iniciaron una serie de estudios para demostrar que estos cristales no eran simples
productos de desecho.
Cristales de este mineral han sido observados virtualmente en todos los tipos de tejidos
vegetales e igualmente en algunas bacterias, hongos y animales. La formacin de
oxalato de calcio es un proceso esencial en la mayora de las especies de plantas
conocidas y en algunos casos cerca del 90 % del calcio total en la planta puede
encontrarse secuestrado en forma de cristales de oxalato de calcio; sin embargo, este
porcentaje vara entre las diferentes especies de plantas que presentan este tipo de
cristales. Lo anterior parece indicar que su formacin representa el mayor mecanismo de
regulacin de los niveles de calcio en la planta.
Las plantas producen cristales de oxalato de calcio en una gran variedad de formas y
tamaos, aunque la mayora de los cristales pueden clasificarse dentro de cuatro tipos
principales en base a su morfologa: rafidios (cristales aciculares en agregados), drusas
(agregados cristalinos esfricos), estiloides (cristales aciculares) y prismas. (Fig.1).
Generalmente la morfologa de los cristales y su distribucin dentro de los tejidos de la
planta son especie especficos.
El tipo de polimorfo del oxalato de calcio presente en las plantas tambin es especieespecfico y puede ser la whewellita (oxalato de calcio monohidratado) o la weddellita
(oxalato de calcio dihidratado)

CLULAS FORMADORAS DE CRISTALES


Los idioblastos son clulas que estn especializadas para la acumulacin de Ca2+ en
forma de oxalato de calcio cristalino. Estas clulas crecen muy rpidamente y se
diferencian de todas las dems clulas vegetales por su gran tamao.
Los idioblastos jvenes son clulas extremadamente activas en relacin a la sntesis de
protenas, adems poseen una gran cantidad de mitocondrias, aparato de Golgi,
Mg. Marco Antonio Mesa Guevara

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ribosomas y retculo endoplsmico, organelos asociados con los procesos metablicos,


los cuales proveen la energa para el secuestro del calcio, la sntesis de protenas,
lpidos y polisacridos y la produccin de cido oxlico.
Cuando los idioblastos maduran totalmente (es decir poseen un cristal totalmente
formado en su interior) inhiben el flujo de calcio hacia su interior, lo cual demuestra su
capacidad para regular los procesos de transporte de calcio a travs de la membrana
plasmtica. A pesar de que el cristal ocupa casi todo el espacio disponible en los
idioblastos, estos permanecen activos, lo cual est relacionado con su habilidad para
utilizar el calcio cristalino almacenado bajo condiciones de dficit de calcio en la planta.

TIPOS DE CRISTALES DE OXALATO CLCICO:


DRUSAS
Cristales de oxalato clcico con numerosas caras y puntas muy agudas.
Tamao: 5-10 nm de dimetro.
Normalmente hay una por clula.

Mg. Marco Antonio Mesa Guevara

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RAFIDIOS
Cristales de oxalatos clcicos muy largos, finos y afilados que se presentan agrupados y
en gran nmero formando un haz dentro de la clula.
Algunos estn bajo presin dentro de la clula.
IV.

PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL

CROMOPLASTOS.
1. Partir una zanahoria y raspar con la punta del bistur, depositando el producto
obtenido en un portaobjeto.
2. Adicionar una gota de agua y colocar el cubreobjetos.
3. Observar al microscopio a menor y mayor aumento.
4. Esquematice sus observaciones.
5. Repetir con tomate, pimiento.

LEUCOPLASTOS: AMILOPLASTOS.
1. Partir una patata y raspar con la punta del bistur,
depositando el producto obtenido en dos

porta-

objetos.
2. A la primera lmina adicionar una gota de agua y
colocar la lmina cubreobjetos.
3. A la segunda lmina adicionar una gota de Lugol y colocar la lmina cubreobjetos.
4. Observe al microscopio a menor y mayor aumento.
Mg. Marco Antonio Mesa Guevara

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5. Esquematice sus observaciones.


6. Repetir el proceso con camote, yuca y semillas de arroz, trigo.
INCLUSIONES CITOPLASMTICAS: CRISTALES
OBSERVACIN DE DRUSAS
1. Realizar un corte fino de la aparte interna del tallo de una tuna y extenderla sobre
una lmina.
2. Agregar una gota de agua y cubrir con una lmina cubreobjetos.
3. Observar a menor y mayor aumento.
4. Esquematice sus observaciones.
OBSERVACION DE RAFIDIOS
1. Exprimir un trozo de hoja

de una planta ornamental que el profesor le

proporcionara.
2. Extender sobre un portaobjetos.
3. Cubrir con una lmina cubreobjetos.
4. Observar a menor y mayor aumento.
5. Esquematice sus observaciones.
ANLISIS Y CONCLUSIONES.

Realizar un informe en el que se incluyan las figuras de cada uno de los tipos de
plastos, y cristales analizando las diferencias de los mismos.

V.

CUESTIONARIO:
1- Qu son los cromoplastos y leucoplastos y qu funciones cumplen?
2- Qu importancia tienen los cristales de oxalato de calcio para la planta?
3- Cul es la razn de utilizar Lugol para el reconocimiento de leucoplastos.
4- Defina cada una de las inclusiones observadas en la prctica.

Mg. Marco Antonio Mesa Guevara

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PRCTICA 11: CARIOTIPO

I.

COMPETENCIAS:
Al finalizar esta prctica el alumno:
Reconoce los pares cromosmicos humanos a partir de las placas
metafsicas.
Construye el Cariotipo Humano sobre la base de las caractersticas
establecidas.

II.

MATERIALES

Foto de placas matafsicas (Anexo)

Lpiz

Tijeras

Regla

Goma

III.

FUNDAMENTO TEORICO

El conjunto de cromosomas de un individuo constituye su cariotipo. En 1956 Tjio y


Levan demostraron que el cariotipo humano est formado por 46 cromosomas, o lo que
es igual, 23 parejas. Para estudiar los cromosomas humanos se cultivan linfocitos y
mientras se estn dividiendo se tratan con colchicina, que interrumpe las mitosis en
metafase, que es el momento ms adecuado para observar los cromosomas. Despus
se someten a una solucin hipotnica para que se hinchen y dispersen, y por ltimo se
tien con orcena actica y se fotografan a travs del microscopio.
Los cromosomas se diferencian por su tamao y por su forma; en 1960 un grupo de
expertos acord ordenar los cromosomas humanos de mayor a menor tamao, y dentro
del mismo tamao, por la posicin del centrmero. Se clasificaron despus en 7 grupos
designados por

letras (desde la A ala G). Un idiograma es la representacin

esquemtica del tamao, forma y patrn de bandas de todo el complemento


Mg. Marco Antonio Mesa Guevara

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cromosmico, los cromosomas se sitan alineados por el centrmero, y con el brazo


largo siempre hacia abajo.

Mg. Marco Antonio Mesa Guevara

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SNDROME
Sndrome de
Down o
mongolismo

Sndrome de
Edwards

Trisoma del 18
(tienen 47
cromosomas)

Sndrome de
Patau

Trisoma del 13
o del 15
(tienen 47
cromosomas)
44 autosomas
+ XXY

Sndrome de
Klinefelter
(intersexo
masculino)
Sndrome de
duplo Y

Sndrome de
Turner (intersexo
femenino)
Sndrome de
triple X

IV.

TIPO DE
MUTACIN
Trisoma del 21
(tienen 47
cromosomas)

44 autosomas
+ XYY

44 autosomas
+X
44 autosomas
+ XXX

CARACTERSTICAS Y
SNTOMAS DE LA MUTACIN
Se caracteriza por retraso mental,
ojos oblicuos, trastornos cardiacos,
crecimiento retardado, propensin a
las infecciones, etc. Es ms frecuente
en hijos de madres adolescentes o de
edades tardas, por anomalas en la
meiosis.
Anomalas en la forma de la cabeza,
boca pequea, mentn huido, lesin
cardiaca y membrana interdigital en
los pies.
Labio leporino, lesiones cardiacas,
frecuentemente dedos
supernumerarios, etc.
Varones de estatura elevada, brazos
y piernas largos, bajo coeficiente de
inteligencia, desarrollo de mamas y
esterilidad.
Elevada estatura, personalidad
infantil, bajo coeficiente intelectual,
tendencia a la agresividad y al
comportamiento antisocial, etc.
Mujeres con cuello ancho y aspecto
hombruno, trax en forma de escudo,
baja estatura, atrofia de ovarios, etc.
Infantilismo y escaso desarrollo de las
mamas y de los genitales externos.

PROCEDIMIENTO

Realiza los idiogramas correspondientes a los cariotipos de los individuos de las pginas
adjuntas. Para ello recorta los cromosomas y pgalos en los lugares correspondientes,
fijndote en el cuadro que acompaa. En cada caso indica su sexo y, si la hay, tipo de
anomala cromosmica y sndrome a que da lugar.

Mg. Marco Antonio Mesa Guevara

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INDIVIDUO N 1:

B
1

10

11

12

16

17

18

21

22

E
13

14

15

G
19

20

SEXO: ..............................
ANOMALA CROMOSMICA: ..................................................................

SNDROME: ...................................................

Mg. Marco Antonio Mesa Guevara

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INDIVIDUO N 2:

B
1

10

11

12

16

17

18

21

22

E
13

14

15

G
19

20

SEXO: ..............................

ANOMALA CROMOSMICA: ..................................................................

SNDROME: ...................................................

Mg. Marco Antonio Mesa Guevara

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INDIVIDUO N 3:

B
1

10

11

12

16

17

18

21

22

E
13

14

15

G
19

20

SEXO: ..............................

ANOMALA CROMOSMICA: ..................................................................

SNDROME: ...................................................

Mg. Marco Antonio Mesa Guevara

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INDIVIDUO 1

Mg. Marco Antonio Mesa Guevara

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INDIVIDUO 2:

Mg. Marco Antonio Mesa Guevara

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INDIVIDUO 3:

Mg. Marco Antonio Mesa Guevara

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PRCTICA 12: MITOSIS

I.

COMPETENCIAS:
Al finalizar esta prctica el alumno:
Reconoce cada una de las fases de la mitosis en clulas meristemticas
de raz de cebolla (Allium cepa)

II.

MATERIALES
Races de cebolla
Bistur
Lminas portaobjetos
Laminillas
Orcena actica
Lpiz con borrador en un extremo
Microscopios

III.

FUNDAMENTO TERICO
La divisin celular es el fenmeno citolgico por el que una clula origina dos

clulas hijas, cada una de las cuales recibe idntica informacin gentica. Consta de dos
etapas: la cariocinesis o mitosis que asegura el reparto equitativo del material
hereditario y la citocinesis o divisin del citoplasma.
El significado biolgico de la mitosis es asegurar la conservacin del patrimonio
hereditario nuclear en el proceso de formacin de un individuo adulto a partir de una
clula inicial o cigoto.
La mitosis consta de las siguientes etapas: profase, metafase, anafase y telofase.
(a) Antes de la profase hay una interface, durante la cual se produce la duplicacin del
material

hereditario,

con

lo

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cual

los

cromosomas

estn

formados

por

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dos

cromtidasunidas mediante el centrmero.


Profase. La cromatina comienza a condensarse, a medida que avanza este estadio
desaparece el nuclolo. Los cromosomas aparecen como filamentos delgados.
Metafase. Cada cromosoma, integrado por dos cromtidas hermanas, se dispone con su
centrmero en el plano ecuatorial.
Anafase. Las cromtidas hermanas se separan y comienzan a migrar hacia los polos
opuestos de la clula. Ahora los cromosomas se observan formados por una sola
cromtida, con los centrmeros dispuestos hacia los polos y los telmeros hacia el centro
de la clula.
Telofase. Los nuclolos reaparecen y los cromosomas comienzan a descondensarse,
con lo que dejan de ser visibles. La membrana nuclear reaparece alrededor de cada
grupo de cromosomas, delimitndose as dos zonas nucleares, una en cada polo de la
clula. Las membranas se forman a partir del retculo endoplsmico.
IV.

PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL

Preparacin previa.

Tres o cuatro das antes de hacer la prctica se pone un bulbo de cebolla en un vaso de
precipitados lleno de agua, de tal manera que la parte inferior del mismo est en
contacto con el agua. Al cabo de esos tres o cuatro das se habrn formado numerosas
raicillas, cuyos pices se utilizarn en esta prctica.
1.

Con una tijera se corta el extremo de varias raicillas, procurando que su longitud

sea de unos 2 a 3 mm.ya que es en esta zona de la raz donde se encuentran las clulas
en divisin.
2.

Se depositan los trozos de raz en un vidrio de reloj, en el que previamente se

han vertido de 2 a 3 ml de orcena A, cuya funcin es la de reblandecer las membranas


celulares.

Mg. Marco Antonio Mesa Guevara

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3.

Con ayuda de unas pinzas de madera se calienta el vidrio de reloj a la llama del

mechero durante 8 minutos, teniendo gran cuidado de que no entre en ebullicin (si es
necesario se retirar el vidrio de reloj para que no se produzca la ebullicin); el
calentamiento termina cuando se observa la emisin de unos tenues vapores.
4.

Se coge con las pinzas de punta fina uno de los extremos (pice) de la raz y se

coloca en un portaobjetos aadiendo una gota de orcena B y se deja actuar durante un


minuto. La funcin de la orcena B es la de completar el proceso de teido de los
cromosomas.
5.

Hacer un squash: que consiste bsicamente en poner la preparacin en un

portaobjetos y aplastarla con otro mientras este otro se gira.,la presin se ejerce para
separar las clulas, que no haya capas de estas para que la observacin se pueda hacer
claramente
6.

Se observa la preparacin con el microscopio empezando con el objetivo de menor

aumento para luego utilizar los de mayor aumento.


Resultados
Dibujar lo observado a travs del microscopio, indicando: nmero de aumentos con lo que
se est trabajando, estructuras observadas y etapas de la mitosis que se han visto.

Mg. Marco Antonio Mesa Guevara

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PRCTICA 13: LEYES DE MENDEL

I.

COMPETENCIAS
Realiza cruzamientos simulados para comprobar los resultados estadsticos de
las Leyes de Mendel.

II. MATERIALES
20 fichas circulares de cartoncillo negro y 20 fichas de cartoncillo blanco, todas de
5 cm. de dimetro y con una ranura radial.

Frijoles de dos colores contrastantes (claro y obscuro)


Dos bolsas de papel

III.

FUNDAMENTO TERICO

La Ciencia explica los fenmenos de la naturaleza mediante teoras que son en realidad
la interpretacin de cmo actan y se relacionan los diferentes factores que intervienen
en el fenmeno que se est estudiando. Estas teoras pueden representarse en el
lenguaje matemtico o por otros medios. La herencia de gran cantidad de caractersticas
somticas

de

los

seres

vivos

obedece

las

Leyes

de

Mendel.

Al cruzar dos individuos Homocigotos con una caracterstica contrastante, se obtendr


en la Primera Generacin (F1), un 100% de Hbridos, todos con el carcter Dominante.
Si se cruzan dos Hbridos de la Primera Generacin, se obtendr en la Segunda (F 2),
una proporcin de 3:1 en el Fenotipo y una proporcin de 1:2:1 en el Genotipo.

IV.

PROCEDIMIENTO

Se maneja un modelo con fichas blancas y negras; frijoles claros y obscuros: cada ficha
representa un Gameto o clula sexual que contiene un Gene Alelo. Las blancas llevan el
Alelo Recesivo y las negras el Alelo Dominante, (nmero Haploide o n).
Mg. Marco Antonio Mesa Guevara

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Cada pareja de fichas ensambladas representa un individuo (nmero 2n).


Si son dos blancas, representa a un individuo con carcter puro Recesivo.
Si son dos negras, representa a un individuo con carcter puro Dominante.
Si

es

una

blanca

una

negra,

representa

un

Hbrido.

Los frijoles representan al Fenotipo. El frijol claro representa el carcter recesivo y el


obscuro

el

dominante.

1. En una bolsa de papel, se colocan las fichas ensambladas de color negro, y en la otra
bolsa las fichas ensambladas de color blanco, nmero 2 n de cromosomas. Ambas
representan los genotipos de los individuos Homocigotos con carcter Dominante y los
Homocigotos

con

carcter

Recesivo.

2. Para obtener la primera generacin Filial (F 1), se separan las fichas ensambladas de
cada bolsa, esto simula la meiosis o divisin celular para producir los gametos, los
cuales

tienen

el

nmero

de

cromosomas.

Se saca una ficha sencilla de cada bolsa y se unen, esto representa la fecundacin.
Las fichas ensambladas se colocan en la mesa y junto se pone un frijol que representa
el fenotipo. Se anotan los resultados y la proporcin.

3. Segunda Generacin Filial (F 2). Las fichas ensambladas obtenidas anteriormente se


distribuyen equitativamente en las dos bolsas vacas.

Se separan dentro de la bolsa (meiosis) y se repite el procedimiento del punto 2


Se sacan ala azar las fichas de ambas bolsas para formar parejas, pues esto demuestra
la unin aleatoria de los gametos en la naturaleza.
4. Se anota cuntos puros Recesivos, cuntos puros dominantes y cuntos hbridos
se
5.

obtuvieron.
Se

anotan

los

Fenotipos

obtenidos

6. En el pizarrn, se concentran en un cuadro los resultados de todos los equipos.


7. Se suman las columnas para comprobar que se presentan las proporciones
aproximadas de 3:1 del Fenotipo y de 1:2:1 de Genotipo como lo establece la Ley de la
Segregacin de Caracteres.
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V.

CUESTIONARIO
1. Qu importancia tienen los trabajos de Mendel?
2. Con que organismos trabaj Mendel?
3. Investigue Cules son los dos principios de probabilidad de importancia
para la gentica?
4. Sale exacta la proporcin 3:1 y 1:2:1? Por qu?
5. Analice el dibujo o Cuadro de Punnett donde se muestra la herencia de
la forma de la semilla de chcharo. Complete el Cuadro de Punnett,
suponga que los progenitores son Homocigotos para el carcter dominante
y recesivo. Interprete el cuadro.

Mg. Marco Antonio Mesa Guevara

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PRCTICA 14: LA FERMENTACIN

FERMENTACIN LCTICA Y BACTERIAS DEL YOGUR.

I.

COMPETENCIAS
Obtiene yogur por fermentacin lctica.
Distingue las bacterias causantes de la fermentacin.

II. MATERIALES
Microscopio

Pipeta de 5 mL

Portaobjetos

Varilla de vidrio

Asa de siembra

Papel indicador de pH

Mechero

Metanol xileno

Estufa de cultivo o yogurtera

Cristal

Matraz de 250 mL

violeta

(o

azul

de

metileno).

III. FUNDAMENTO TERICO


Las fermentaciones son procesos de respiracin anaerobia realizados por ciertas
bacterias y levaduras. En ellos, el aceptor de H+ y electrones cedidos por una molcula
orgnica no es el oxgeno sino otra molcula. Dependiendo de cul sea esta molcula se
obtendrn distintos productos finales. En el caso de la fermentacin lctica, la molcula
aceptora es el cido pirvico y el producto resultante es el cido lctico. Esta
fermentacin se emplea en la industria alimentaria para obtener derivados lcteos como
el yogur.

Mg. Marco Antonio Mesa Guevara

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El yogur es un producto producido por la fermentacin natural de la leche. A escala


industrial se realiza la fermentacin aadiendo a la leche dosis del 3-4 % de una
asociacin de dos cepas bacterianas. El Streptococcus thermophilus, poco productor de
cido, pero muy aromtico, y el Lactobacillus bulgaricus, muy acidificante. En esta
preparacin se podrn, por tanto, observar dos morfologas bacterianas distintas (cocos
y bacilos) y un tipo de agrupacin (estreptococos, cocos en cadenas arrosariadas).
Adems, el tamao del lactobacilo (unos 30 um de longitud) facilita la observacin
aunque no se tenga mucha prctica con el enfoque del microscopio.
IV. PROCEDIMIENTO
Experimento 1. Obtencin de yogur por fermentacin lctica.
1. Coloca 100 mL de leche en el matraz y aade 1 mL de yogur.
2. Incuba el matraz en la estufa durante 24 horas a 37 C.
3. Saca el matraz y observa el contenido.
4. Mueve con la varilla para homogeneizarlo e introduce una tipa de papel indicador de
pH.
5. Describe lo observado en el matraz y en el papel indicador.
Para realizar este experimento tambin puedes utilizar una yogurtera domstica.

Experimento 2. Observacin de las bacterias causantes de la fermentacin.


Mg. Marco Antonio Mesa Guevara

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1. Con el asa de siembra toma una gota de yogur y depostala sobre un portaobjetos
limpio. Aade una gota de metanol tambin xileno para desengrasar y mzclala con el
yogur.
2. Extiende la mezcla y djala secar completamente. Luego pasa el portaobjetos por la
llama del mechero 4 o 5 veces para fijar la preparacin.
3. Aplica el colorante cristal violeta durante 2 minutos.
4. Lava cuidadosamente con agua destilada hasta que el lquido no salga teido y
deposita sobre ella un cubre cuidando que no se formen burbujas.
5. Observa al microscopio con el objetivo adecuado (utiliza los mayores aumentos)
6. Dibuja lo que ha observado.

V. CUESTIONARIO
1. Elabora hiptesis sobre lo sucedido en el experimento 1.
2. Por qu se utiliza papel indicador de pH en este experimento?
3. Si la leche utilizada no estuviera pasteurizada o esterilizada, El producto
obtenidohubiera sido distinto?
4. Qu tipo de microorganismos observas al microscopio?

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