BIOINDICADORES PARA UMA ANLISE DE

Pesquisa
Meio
ambiente

RISCO AMBIENTAL

Organismos geneticamente modificados e grupos funcionais de microrganismos do solo

Galdino Andrade
Bilogo, Doutor, Professor da Universidade Estadual
de Londrina, CCB, Departamento de Microbiologia
Laboratrio de Ecologia Microbiana,
Londrina, PR.
andradeg@uel.br

Marco Antonio Nogueira

Engenheiro-Agrnomo, Doutor, Professor da
Universidade Estadual de Londrina
Imagens cedidas pelos autores

1. Introduo
necessidade de alimentar
a populao mundial em
crescente aumento faz
com que novas tecnologias e tcnicas de cultivo sejam empregadas, muitas das
quais eram utpicas para o homem
h no mais que duas dcadas. Nesse
cenrio esto as plantas e microrganismos geneticamente modificados,
ou simplesmente organismos geneticamente modificados (OGMs). Se
por um lado seus defensores vislumbram uma forma de produo agrcola e defesa das culturas quanto a
pragas, doenas e plantas concorrentes de uma forma totalmente indita, por outro, muito pouco se sabe
sobre seus efeitos em longo prazo
no ambiente. Os possveis riscos
ambientais em decorrncia de seus
(possveis?) efeitos colaterais, somente as pesquisas podero responder. Afirmaes calorosas pr ou
contra, sem embasamento cientfico, so apenas especulaes que
no contribuem em nenhum sentido
para o desafio da produo de alimentos para uma populao cada
vez maior, num planeta cada vez
mais escasso de recursos naturais
que precisam ser conservados.
O desenvolvimento e o uso
de plantas geneticamente modificadas (PGMs) polmico e o debate
pblico intenso. O uso de PGMs na
produo agrcola pode ter um grande potencial para a melhora dos
nveis nutricionais dos alimentos ou
na proteo do solo devido produo de maior quantidade de matria
orgnica, de cidos orgnicos na

rizosfera, que podem melhorar as

qualidades fsicas, qumicas e biolgicas do solo, bem como promover a
obteno mais eficiente de nutrientes do solo pelas razes das plantas.
Neste artigo ser abordado o efeito
que as PGMs podem ter sobre as
comunidades microbianas do solo e
o meio ambiente.
2. O Solo
Quando se fala em meio ambiente, impossvel dissociar os ambientes terrestres do solo e dos organismos que nele habitam. Os processos pedogenticos envolvem complexas interaes fsicas, qumicas e
biolgicas que dependem do material de origem, da topografia, do
clima e da ao de organismos vivos.
Os primeiros organismos habitantes
do solo em formao so as algas,
que alm de realizarem fotossntese
tambm fixam nitrognio atmosfrico. Quanto associadas a determinados fungos formam os liquens, os
quais constituem as primeiras fontes
de carbono orgnico e de nitrognio
no solo em formao, o que possibilita o estabelecimento de outros microrganismos e plantas (Figura 1). O
estabelecimento de outros microrganismos, incrementa a produo de
CO2, o qual convertido em cido
carbnico (H2CO3) e atua na dissoluo dos minerais, contribuindo ainda
mais para a formao do solo. Alm
disso, muitos microrganismos produzem cidos orgnicos, que tambm
atuam nesse processo.
Alm de ser a base de sustentao fsica para as plantas, o solo a
fonte dos nutrientes essenciais para

Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento n.34 - janeiro/junho 2005 11

Figura 1. Liquens colonizando um afloramento de rocha, propiciando o

estabelecimento de outros (micro)organismos que aturaro nas etapas iniciais
de formao do solo
o desenvolvimento vegetal. Com o
estabelecimento dos vegetais superiores nesse ambiente, surge uma
importante zona ao redor de suas
razes, a rizosfera, a qual ser abordada mais detalhadamente neste artigo. Nessa complexa interao entre
vegetais, animais e minerais, os microrganismos desempenham um
papel essencial no funcionamento
dos ecossistemas pelo seu papel
fundamental nos ciclos biogeoqumicos, que compreendem a
ciclagem de nutrientes e do carbono.
A frao orgnica do solo, composta por restos vegetais, animais e
microbianos em diversos estgios de
decomposio e sntese microbiana,
chamada hmus, a poro estvel

da matria orgnica do solo. Ele o

reservatrio de energia para microrganismos e nutrientes para plantas e
microrganismos, alm de desempenhar importante papel na estabilidade de agregados do solo e reteno
de gua. Alm disso, gua e gases
tambm ocupam a poro porosa do
solo. A interao entre esses fatores
fsicos e qumicos resulta na diversidade de habitats que se formam no
solo, o que determina a composio
e a atividade da comunidade
microbiana do solo num determinado local e tempo.
Depois da rizosfera, os locais de
maior atividade microbiana so as
superfcies das partculas de solo e
os microporos, formando diversos

Tabela 1. Mtodos de deteco de microrganismos geneticamente modificados aps

sua liberao no solo.
Mtodos extrativos
Mtodos in situ
- Microscopia direta
(imunofluorescncia, outras
coloraes especficas,
bioluminescncia)

Deteco celular
- Contagem em placas
- Estimativa pelo nmero mais
provvel
- Mtodos imunolgicos
- Citometria de fluxo
- Concentrao de afinidade
- Tcnicas baseadas em
luminescncia

12

Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento n.34 - janeiro/junho 2005

Deteco
gentica
- Amplificao de
genes por PCR
- Seqenciamento
e mapeamento de
genes
- Anlises de
RNA

microhabitats. Mesmo um nico

microagregado de solo pode apresentar diversos microambientes e,
conseqentemente, hospedar uma
gama diversificada de microrganismos (Figura 2). As condies fsicoqumicas em um microhabitat podem mudar rapidamente no tempo
e no espao; a concentrao de O2
representada na Figura 2 apenas
uma representao instantnea e
pode mudar drasticamente em funo da atividade microbiana e da
umidade do solo.
Razes de plantas, microrganismos e animais que compem a comunidade biolgica do solo produzem enzimas intra e extracelulares
que tm grande participao nos
ciclos biogeoqumicos. Essas enzimas
podem continuar ativas por longo
tempo aps terem sido liberadas no
solo, desempenhando sua atividade
de acordo com sua especificidade. A
razo pela longa viabilidade no ambiente reside no fato de que essas
enzimas interagem com as superfcies carregadas dos colides do solo,
orgnicos e minerais, onde permanecem protegidas da ao de
proteases, mas ainda mantm sua
capacidade cataltica.
2.1 OGMs e comunidade
microbiana do solo
As alteraes genticas de
plantas representam uma das reas
de mais rpido desenvolvimento

Distncia(mm)

Distncia(mm)
Figura 2. Diagrama ilustrando as concentraes (%) de O2 ao redor de uma
partcula de solo. Em termos de exigncias de O2 para diversos grupos
microbianos, pode-se dizer que cada regio delimitada por uma isolinha
representa um microhabitat.
dentro da biotecnologia. Essas alteraes tm vrios objetivos, tais como
o aumento da resistncia de plantas
a fungos, vrus, insetos, congelamento, herbicidas e mesmo para aumentar a eficincia fotossinttica das plantas com conseqente aumento da
quantidade de CO 2 fixado. No
difcil concluir que qualquer modificao gentica que altere a fisiologia
da planta tambm alterar a comunidade microbiana no solo em que
essa planta for cultivada, visto que,
em ltima anlise, os microrganismos heterotrficos do solo tm sua
atividade dependente dos produtores primrios de substrato para obteno de energia, as plantas. Essa
alterao dever ser mais evidente
na rizosfera, mas tambm dever ser
percebida nos demais microhabitats
do solo.
Alm das alteraes genticas
de plantas, tambm existe potencial
de uso dessa tecnologia em microrganismos, principalmente simbiontes
ou promotores de crescimento de
plantas. A introduo de uma planta
geneticamente modificada no ambi-

ente pode ser menos problemtica

que a introduo de um microrganismo, pois estes quando introduzidos
ao solo e sendo estranhos quele
ambiente, precisam ser hbeis em
competir com os microrganismos
nativos por nichos especficos. Por
outro lado, qualquer risco associado
a organismos geneticamente modificados no ambiente so mais previsveis e mais facilmente controlveis
quando se empregam plantas em
comparao com microrganismos,
porque o gene do microrganismo
engenheirado pode ser transferido
para outros grupos microbianos do
solo por meio de recombinao gentica.
No caso de microrganismos
simbiontes como os rizbios, seja
qual for o mecanismo de alterao
gentica, o objetivo final o aumento dos nveis de produtividade da
cultura a se beneficiar da interao
microbiana, quer seja por meio do
aumento da eficincia do simbionte
na associao com a planta ou pelo
aumento de sua competitividade no
solo. Esse ltimo caso pode ser al-

canado pela manipulao gentica

do prprio rizbio ou ainda por uma
estratgia indireta de co-inoculao
do rizbio com bactrias produtoras
de antibiticos para aumentar a colonizao e a nodulao das
leguminosas. No caso de introduo
de genes de resistncia a antibiticos, bem como a co-inoculao com
bactrias j resistentes, possvel
que haja efeitos sobre a comunidade
microbiana do solo, j que as bactrias modificadas tero um mecanismo a mais para competir por um
nicho com os microrganismos nativos. Caso esses microrganismos nativos desempenhem um papel importante nos ciclos biogeoqumicos,
este poder deixar de ocorrer em
sua plenitude, comprometendo a funcionalidade daquele ecossistema.
O desenvolvimento biotecnolgico de plantas e microrganismos
geneticamente modificados, embora possa trazer muitos benefcios para
a agricultura ou para outras aplicaes, como a biorremediao, pode
ter efeitos ambientais adversos. Todos esses possveis efeitos devem
ser avaliados, de preferncia em condies controladas, antes que seja
feita qualquer introduo desses organismos no ambiente.
2.2 Estratgias de
monitoramento dos efeitos
de OGMs no ambiente
Os efeitos de plantas e microrganismos geneticamente modificados no ambiente podem ser
monitorados por meio de vrias estratgias, cada qual dependendo do
gene inserido e do organismo envolvido. A competio (persistncia e
invaso de comunidades indgenas),
patogenicidade e toxicidade a organismos no-alvo, transferncia de
genes a organismos indgenas e a
disperso para alm do ambiente
alvo, devem ser avaliados em condies controladas antes que se faa o
uso desses organismos modificados
em ambiente aberto. As tcnicas necessrias para se fazer tais avaliaes
so bem definidas no caso de plantas
em comparao a microrganismos. A
avaliao de determinados grupos
microbianos que desempenham funes especficas no solo, os chama-

Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento n.34 - janeiro/junho 2005 13

Figura 3. Rizosfera. Os microrganismos crescem ao

redor da raiz (Ra) formando a rizosfera (Ri).
dos grupos funcionais, pode ser uma
ferramenta til para avaliar o efeito
de organismos geneticamente modificados no ambiente solo, visto que
esses grupos so bastante sensveis
a alteraes ambientais, podendo ser
utilizados como indicadores. Os grupos funcionais de microrganismos
do solo sero abordados com mais
detalhes neste artigo.
A deteco e monitoramento
de microrganismos geneticamente
modificados no solo podem ser feitos por tcnicas que envolvem extrao ou ainda in situ (Tabela 1).
As tcnicas ideais de deteco
e monitoramento de organismos
geneticamente modificados seriam
aquelas que pudessem identificar
uma nica clula in situ, avaliar sua
atividade e facilitar o rastreamento
do gene em questo. Uma estratgia
utilizada envolve a clonagem de
genes lux provenientes de vibries
14

marinhos em organismos carregando

algum gene estranho de interesse.
Dessa forma, poder-se- obter a imagem da clula modificada, bem como
a sua atividade metablica, que ser
proporcional bioluminescncia catalisada pela enzima luciferase. O
marcador envolvendo bioluminescncia tem a vantagem de no trazer
consigo preocupaes ambientais
adicionais associadas aos marcadores
para resistncia a antibiticos, utilizados em muitas situaes.
2.3 OGMs no ambiente
A sobrevivncia e disperso de
microrganismos geneticamente modificados dependero da sua
interao com a biota nativa do solo
(plantas, microrganismos e animais)
bem como com as caractersticas
fsico-qumicas do solo em questo.
Microrganismos exgenos, quando
adicionados ao solo, geralmente tm

Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento n.34 - janeiro/junho 2005

baixa sobrevivncia devido sua

incapacidade de habitar um ambiente distinto, ou ainda competir com os
microrganismos nativos, j adaptados quele ambiente. Por exemplo,
se um microrganismo geneticamente modificado introduzido num
solo mido, as clulas se localizaro
predominantemente na soluo do
solo. Nessas condies, essas clulas
sero alvo fcil para protozorios
que se alimentam de bactrias, diminuindo rapidamente o nmero de
clulas das bactrias recm
introduzidas. No que se refere disperso de microrganismos, o potencial de gua no solo desempenha
importante papel, pois a maior parte
do movimento de clulas microbianas
est restrita a perodos aps ocorrncia de chuvas ou irrigao, quando a
maior parte dos macroporos do solo
est cheia de gua, que se movimenta por drenagem ao longo do perfil
ou mesmo por movimento lateral,
caso haja um gradiente de potencial
de gua no solo em determinado
sentido. Outro fator que pode colaborar na disperso de microrganismos geneticamente modificados no
solo a ao de minhocas e
protozorios, ingerindo microrganismos num ponto e evacuando em
outro.
Alguns autores defendem que
a liberao de microrganismos geneticamente modificados no ambiente
no afetaria a integridade funcional
do solo, uma vez que as diferenas
entre os microrganismos selvagens e
os modificados so muito sutis: apenas um ou dois genes so inseridos
ou deletados entre milhares, a no
ser nos casos em que a
patogenicidade do microrganismo
seja alterada. Assim como os efeitos
de pesticidas e outros qumicos sobre processos e integridade funcional do solo so avaliados, o mesmo
deve ser feito para os organismos
geneticamente modificados e para
isso os bioindicadores com alta sensibilidade devero ser empregados.
Entre eles, podem ser citados os
grupos funcionais de microrganismos do solo envolvidos nos ciclos do
carbono, nitrognio e fsforo.
Uma estratgia para minimizar
os efeitos da introduo de micror-

ganismos geneticamente modificados no solo pode ser a limitao de

sua persistncia por meio da insero de genes suicidas, os quais so
acionados sob determinada situao
ambiental, levando as clulas que os
contm morte. Entretanto, h que
se considerar a questo da
recombinao gentica entre microrganismos, os quais podem incorporar
fragmentos de DNA das clulas mortas.
3. Rizosfera
A maior parte da atividade
microbiana do solo est localizada
principalmente em uma zona do solo
que est em ntimo contato com a
superfcie das razes que chamada
de rizosfera (Figura 3). Nesta zona
ocorrem inmeros processos de
interao entre os diferentes grupos
de macro e microrganismos e a
planta.
Como pode ser visto na Figura 3,

uma comunidade microbiana se estabelece ao redor das razes at onde

a concentrao de nutrientes liberada pelos exsudatos e lisatos
radiculares suficiente para suportar seu crescimento. A rizosfera
uma fronteira ainda inexplorada para
a engenharia gentica. Os processos
que ocorrem nesta zona do solo
influenciam a incidncia de doenas
das plantas e a sua nutrio, por sua
vez, as razes influenciam a dinmica
e a composio das comunidades
microbianas
qualitativa
e
quantitativamente.
Por estas razes, os microrganismos rizosfricos so excelentes
bio-indicadores para avaliar qualquer
alterao benfica ou malfica que
possa ocorrer no solo. As PGMs devido introduo de novos genes
podem expressar protenas ou produtos do metabolismo que seguramente sero liberados pelos
exsudatos ou lisatos radiculares; o

Figura 4. Possveis alteraes que as PGMs podem causar na comunidade

microbiana da rizosfera.

efeito benfico ou malfico destes

produtos no meio ambiente pode
ser avaliado pelas alteraes que
ocorrem nas comunidades
microbianas que vivem na rizosfera
(Figura 4).
Por outro lado, as PGMs podem
tambm alterar qualitativamente microrganismos benficos da rizosfera,
resultado da composio dos seus
exsudatos. Uma PGM poderia ter
maior resistncia a fitopatgenos ou
pragas por conter nos seus exsudatos
compostos que estimulam populaes de microrganismos antagonistas destes patgenos ou pragas. Tambm poderiam ser estimulados outros grupos de microrganismos que
participam ativamente da nutrio
das plantas como as bactrias
fixadoras de nitrognio e fungos
micorrzicos arbusculares (MA)
4. Grupos funcionais
de microrganismos
A ecologia do solo tem muito
para contribuir na compreenso dos
importantes processos que ocorrem
em diferentes nveis do ecossistema
que afetam o crescimento da planta
tais como a microbiota da rizosfera, a
dinmica da matria orgnica, a
ciclagem de nutrientes e a estrutura
do solo. A proposta discutir o papel
dos grupos funcionais de microrganismos que vivem na rizosfera e
participam da ciclagem de nutrientes e sua importncia como bioindicadores da sade do solo ou de
distrbios que podem ocorrer devido ao antrpica.
Muitos destes grupos atuam
diretamente na nutrio da planta,
como os rizbios e os fungos
micorrzicos que so microrganismos
simbiticos. Nas dcadas anteriores,
estes grupos foram estudados extensivamente, mas muito pouco foi
feito com relao s interaes com
outros grupos de microrganismos funcionais, esquecendo-se que no sistema rizosfrico existem muitas outras
interaes que possuem grande importncia ecolgica para a manuteno da vida no planeta e conseqentemente no solo, j que este parte
de um todo.
Muitas etapas da ciclagem de

Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento n.34 - janeiro/junho 2005 15

Parte area da planta

Nematides
predadores de
plantas

Cupins
predadores de
fungos

Razes
Cupins

Fungos
micorrzicos

Colembola
Fungos
sapfritas

Matria orgnica

Nematides
predadores de
fungos

Nematides
predadores de
bactria

Bactria

Figura 5. Esquema simplificado da cadeia

alimentar e os diferentes nveis trficos que
ocorrem no solo

Nematides
predadores

Flagelados

Amebas

Ciliados

nutrientes so realizadas exclusivamente por microrganismos, sendo

que alguns podem participar de um
ou mais ciclos biogeoqumicos. A
compreenso das interaes entre
diferentes populaes de acordo com
fentipos especficos pode nos dar
uma maior viso dos processos que
esto ocorrendo no solo. Agrupar as
comunidades microbianas por
fentipos mais realstico do que
determinar as espcies que esto
envolvidas nos processos. certo

que somente uma pequena porcentagem da comunidade microbiana

capaz de crescer em meio de cultura, mas mesmo assim se considerarmos que temos uma amostra da comunidade microbiana, podemos obter dados de qualidade para o
monitoramento dos efeitos de produtos qumicos ou biolgicos e seu
impacto ambiental e os eventuais
efeitos na ciclagem de nutrientes e
na fertilidade do solo.
Os aspectos da funcionalida-

Indivduo

Populao

Figura 6. A partir de uma clula formada uma populao

16

Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento n.34 - janeiro/junho 2005

de so muito mais importantes do

que a biodiversidade nos sistemas
naturais e agrcolas. Algumas questes podem ser levantadas com relao biodiversidade. A primeira
pergunta que devemos fazer : O
que mais importante para o
ecossistema: o nmero de espcies
que compe um grupo funcional ou
o potencial de transformao que
possui este grupo? Por outro lado,
algumas questes podem ser levantadas como: Dentro da dinmica biolgica o que representa uma espcie no sistema? Qual a importncia
que uma espcie pode ter na
ciclagem de nutrientes? Estas perguntas podem nos levar a concluir
que precisamos comear a rever nossa viso em relao ao microcosmo
do solo. Devemos ampliar a compreenso dos processos biolgicos
que ocorrem no sistema solo-planta,
assumindo estes processos como um
todo, e cada grupo funcional como
uma frao deste todo. Somente as-

Figura 7. Vrias populaes de microrganismos podem participar de um ou mais

ciclos biogeoqumicos
sim, vamos poder determinar o impacto ambiental ou a influncia das
PGMs sobre as comunidades de microrganismos do solo, no apenas
sobre um grupo funcional. tambm necessrio fazer uma avaliao
dos diversos grupos funcionais que
participam de diferentes etapas dos
ciclos biogeoqumicos do carbono,
fsforo, enxofre e nitrognio, bus-

cando as correlaes entre eles.

Os grupos funcionais tambm
esto diretamente relacionados com
a cadeia alimentar do solo (Figura 5),
que mantida pelo equilbrio da
interaes entre a parte bitica (microrganismos, macrorganismos e planta) e abitica (solo e gua) do solo.
Estas interaes entre os diferentes
nveis trficos so responsveis em

Figura 8. A partir da introduo de novos genes, as PGMs poderiam ter uma

rizosfera engenheirada capaz de mediar as interaes microrbianas que beneficiariam o meio ambiente, a nutrio e a sade da planta

grande parte pela sustentabilidade

do ecossistema.
A cadeia alimentar pode sofrer
grandes variaes tanto positivas
como negativas sob a influncia das
PGMs. Qualquer populao que for
afetada pode desequilibrar todo o
sistema. Em relao biodiversidade
da microbiota, esta importante para
outros objetivos, como na busca de
produtos especficos com uso potencial na indstria. A importncia no
meio ambiente ainda deve ser
investigada, j que as tcnicas
moleculares utilizadas atualmente
no nos permitem avaliar os mecanismos de interao microbiana no
microcosmo do solo.
No solo, uma nica clula d
origem a uma populao (Figura 6).
Populaes metabolicamente semelhantes formam grupos chamados de
funcionais, e esses grupos funcionais, desempenhando processos fisiolgicos complementares e interagem para formar comunidades microbianas. Por sua vez, essas comunidades microbianas interagem com
comunidades de macrorganismos,
para definir o ecossistema em sua
plenitude.
Podemos definir grupos funcionais como um grupo de populaes
de microrganismos que participa de
um mesmo processo de transformao de um dado nutriente no solo,
sendo que uma mesma populao
de microrganismo pode participar
de uma etapa de um ou mais ciclos
bigeoqumicos (Figura 7). Como
exemplo, podemos citar o grupo
funcional de microrganismos
celulolticos. Ao inocular uma suspenso de solo em uma placa de
Petri com meio seletivo para microrganismos celulolticos, em que a nica
fonte de carbono a celulose, sero
observadas vrias colnias formadoras de halo de degradao compostas por vrias espcies de fungos,
actinomicetos e bactrias, geralmente nessa ordem numrica decrescente.
A biodiversidade dos fungos,
actinomicetos e bactrias que formam este grupo funcional so
parmetros secundrios, quando o
objeto de estudo avaliar a funcionalidade do ciclo biogeoqumico.

Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento n.34 - janeiro/junho 2005 17

Tabela 2. Efeito de diversas PGMs na comunidade microbiana do solo (Kowalchuk et al., 2003)
PGM

Modificao

Alfafa

Glucanase cida (Aglu 1) e quitinase

bsica de arroz (RCH 10)

No apresentou efeitos na nodulao e no foi

deletrio para os fungos fitopatognicos
Stem phylium alfalfae ou Colleototrichum trifolii

Alfafa

-amilase

Modificou a comunidade de bactrias na raiz

Algodo

Produo da endotoxina do Bacillus

thuringiensis var kurstaki

Aumentou a populao de bactrias e fungos

Batata

Produo de lisozima T4

Diminui a populao de Bacillus subtilis nos

plos radiculares; no influencia a microbiota da
rizosfera; no foi observado efeito em bactrias
associadas raiz

Batata

Barnase/Barnstar e gene gus

Efeitos na interao espao x tempo sobre a

composio da comunidade microbiana

Beterraba aucareira

Resistncia a kanamicina e ao
glifosinato de amnia

O DNA transgnico foi encontrado por vrios

meses no solo no campo

Canola

Tolerncia ao glufosinato de amnia e

ao glifosate

Baixo efeito nas comunidades microbianas; Perfis

fenotpicos avaliados pelo FAME e Biolog de
microrganismos endofticos e rizosfricos foram
diferentes da variedade no OGM; Diminuiu a
diversidade de bactrias endofticas nas razes

M edicago truncatula

Agrobacterium rhizogenes
transformado Gus A e npt II

Razes transformadas tiveram boa nodulao com

Sinorhizobium m eliloti e boa colonizao com
micorriza arbuscular (MA) Glom us intraradices

Milho

Produo endotoxina (Cry1 Ab) de B.

thuriingiensis var kurstaki

Lignina da PGM foi degradada mais rapidamente

e a populao de bactrias nas fezes de
Porcellio scaber alimentado com milho Bt era
60% menor do que nas fezes de P. scaber
alimentado com milho hbrido; No foi observado
efeito deletrio nas populaes de minhoca,
nematides, protozorios, bactrias e fungos

Milho

Gene Pat para resistncia ao

glufosinato

No foi observado efeito deletrio na diversidade

ou composio das comunidades microbianas na
rizosfera

Tabaco

Quitinase

Efeito deletrio sobre os fungos micorrzicos

arbusculares

Tabaco

Expresso de protenas anti-fngicas

No afetou a colonizao das razes por fungo MA

G. m osseae

Tabaco

Biossntese de lignina

A lignina de PGM foi decomposta mais

rapidamente

Tabaco

Inibidor de proteinase

Diminuiu a populao de nematide, e

microartrpodos, no teve efeito na respirao
microbiana

5. A rizosfera de uma planta

geneticamente modificada
Como foi visto at o momento,
os microrganismos tambm atuam
na ciclagem de nutrientes e
consequentemente na nutrio e sade das plantas. Quando a comunidade microbiana na rizosfera das plan-

18

Efeito

tas est em equilbrio, os grupos de

microrganismos interagindo entre si
participam em seu potencial mximo na nutrio e proteo da planta
e na sade do solo. Entretanto, esse
equilbrio pode ser rompido, principalmente nos sistemas agrcolas intensivos, devido a vrios fatores que
no sero abortados aqui.
Desde que Cohen & Boyer inici-

Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento n.34 - janeiro/junho 2005

aram a era da modificao gentica

nos anos 70, a idia do uso de organismos geneticamente modificados
cercada de expectativas e apreenses. A primeira planta modificada
foi obtida h mais de 15 anos, e
desde o incio inmeras tcnicas tm
sido desenvolvidas para a introduo
de vrios genes em um grande nmero de plantas. A maioria das plan-

tas geneticamente produzida at o

momento produtora de alimentos
(milho, soja, batata, canola e arroz) e
de plantas no alimentcias (algodo, plantas ornamentais, tabaco).
No entanto, estas modificaes genticas visam diretamente a proteo da planta ou a melhora do processo de cultivo. At o momento,
muitos crticos das PGMs as vem
como contaminantes em potencial
do meio ambiente devido aos novos
produtos metablicos por elas produzidos. verdade que a liberao
destas plantas deve ser feita aps
criteriosa avaliao de risco ao meio
ambiente, sade animal e humana,
mas no se pode desprezar o potencial que existe nesta tecnologia para
melhorar a prtica agrcola em vrios
aspectos.
No solo, os efeitos das plantas
engenheiradas so muito pouco estudados, apesar de ser grande o conhecimento da importncia de vrios grupos de microrganismos para a
nutrio e proteo da planta e tambm na ciclagem de nutrientes. Os
microrganismos so responsveis
pela maioria da biomassa, excluindo
as razes, e pela atividade metablica (respirao), alm de participarem ativamente dos ciclos
biogeoqumicos e na ciclagem da
matria orgnica.
PGMs influenciam a micro e
macrobiota na rizosfera e certamente os novos produtos metablicos
produzidos devido introduo de
novos genes vo influenciar a comunidade microbiana da rizosfera. Neste sentido, o importante determinar se o efeito positivo ou negativo
e dimensionar quanto estes produtos influenciam. Apesar de serem
poucos os experimentos realizados
at o momento, grande o impacto
dessas plantas na microbiota do solo
que consome os novos produtos
metablicos liberados pelas PGMs.
Kowalchuk et al. (2003), em uma
reviso, descreve os efeitos das PGMs
na microbiota do solo. Como pode
ser observado na Tabela 2, os estudos de impacto tm resultados muito variveis, cada planta e cada gene
introduzido tem diferentes efeitos
na comunidade microbiana da

rizosfera.
Uma estratgia interessante que
possa influenciar de forma positiva
os grupos funcionais de microrganismos na rizosfera a produo de
PGMs com a rizosfera engenheirada
para selecionar microrganismos benficos na sua rizosfera, alterando
assim sua funo para benefcio do
meio ambiente, da nutrio e sade
da planta (Figura 8). Mtodos clssicos e de biologia molecular ainda
no permitem um profundo estudo
de monitoramento da rizosfera. No
entanto, vrias propostas neste sentido tm surgido, aumentando o interesse pelo estudo da biologia das
razes, da rizosfera e das interaes
entre rizosfera e microrganismos.
Engenheirar a rizosfera requer
novas tcnicas para introduzir e regular a expresso de novos genes,
assim como compreender a expresso dos genes nos tecidos radiculares
e de promotores que regulam as
clulas em tecidos especficos da
raiz. A camada mais externa de clulas da raiz poderia ser um alvo a ser
engenheirado, pois est em contato
direto com o solo e influencia diretamente na rizosfera. Esta camada
bastante promissora para a modificao gentica porque formada por
um tipo de tecido diferente das demais partes da planta, expressa um
nico complemento de genes e se
mostra adaptada a mediar os processos da rizosfera. Tais PGMs, por
exemplo, poderiam ser alteradas para
apresentar mais stios especficos
para microrganismos simbiontes tais
como fungo MA e rizbios, ou ainda
serem mais eficientes em absorver P
e/ou fixarem N por si prprias. Tambm poderiam produzir e excretar
atravs dos seus exsudatos fatores
de crescimento que estimulariam
grupos funcionais de microrganismos que atuam em etapas chave dos
diferentes ciclos biogeoqumicos.
A produo e liberao de sinais
qumicos para a expresso de genes
introduzidos em microrganismos GM
a serem disseminados no solo tambm poderia ser uma excelente ferramenta para o controle da expresso desses genes, os quais poderiam
ser ativados em diferentes etapas do

crescimento da planta, conforme a

convenincia.
6. Consideraes finais
Os efeitos dos OGM no ambiente e mais especificamente sobre a
comunidade microbiana do solo ainda so pouco conhecidos, de modo
que os potenciais riscos e impactos
ambientais somente podero ser
conhecidos aps uma avaliao
criteriosa desses novos genes e seus
produtos no ambiente. Por outro lado,
o potencial desta tecnologia pode
fazer com que as plantas tenham
papel importante na revitalizao da
microbiota do solo, recuperando assim a fertilidade e suas propriedades
fsico-qumicas, tornando a agricultura uma atividade menos impactante
do meio ambiente. claro que, mesmo tendo genes que possam beneficiar o meio ambiente, estas plantas
e eventuais microrganismos devem
obrigatoriamente ser avaliados quanto ao impacto que possam causar
funcionalidade do ecossistema.
Referncias
Borm, A. Biotecnologia e Meio Ambiente. Viosa: UFV, 2004. 325 p.
Callaway, R.M.; Thelen, G.C.; Rodriguez, A.; Holben, W.E. Soil biota
and exotic plant invasion. Nature,
427:731-733, 2004.
Kowalchuk, G.A.; Bruinsma, M.; vanVeen, J.A. Assessing responses of
soil microorganisms to GM plants.
Trends in Ecology and Evolution,
18:403-410, 2003.
OConnel, K. P.; Goodman, R.M.; Handelsman, J. Engineering the rhizosphere: expressing a bias. Trends
in Biotechnology, 14:83-88, 1996.
Phillips, D.A.; Streit, W.R. Modifying
rhizosphere microbial communities to enhance nutrient availability
in cropping systems. Field Crops
Research, 56:217-221, 1998.
Rengel, Z. Genetic control of root
exudation. Plant and Soil, 245:5970, 2002.
Varma, A.; Abbott, L.; Werner, D.; Hampp, R. (Eds.) Plant Surface Microbiology. Berlin: Springer, 2004.
628 p.

Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento n.34 - janeiro/junho 2005 19