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CELULAS HEK293.

LINEA CELULAR
La lnea de clulas HEK se ha utilizado ampliamente como herramienta
de expresin de las protenas recombinantes, ya que se gener hace
ms de 25 aos. Aunque de origen epitelial, su maquinaria bioqumica
es capaz de llevar a cabo la mayor parte del plegado posterior a la
traduccin y el procesamiento requerido para generar protena
funcional, madura a partir de un amplio espectro de ambos cidos
nucleicos de mamferos y no mamferos. Aunque popular como un
sistema de expresin transitorio, este tipo de clulas tambin se ha visto
un amplio uso en formas transfectadas de manera estable (clulas
transformadas) es decir, para estudiar una variedad de preguntas de
biologa celular en la neurobiologa.Los principales atributos que han
hecho de la clula HEK una opcin popular entre los electrofisilogos
para estudiar los canales de los receptores aislados incluyen; su
reproduccin y mantenimiento rpido y fcil; IMPREGNABILIDAD
transfeccin utilizando una amplia variedad de mtodos; alta eficiencia
de transfeccin y la produccin de protenas; fiel traduccin y
procesamiento de las protenas; y tamao de clulas pequeas con
procesos mnimos adecuados para la experimentacin de fijacin de
voltaje. Estos, y otros atributos, tambin significan que las evaluaciones
biolgicas bioqumica / celulares complementarias de protenas
expresadas se pueden realizar en conjunto con anlisis funcionales para
establecer perfiles farmacolgicos y biofsicos detallados para la accin
de nuevos frmacos y sus dianas. El aumento de la cantidad de
informacin de la secuencia disponible en el genoma humano ha puesto
un mayor nfasis en los sistemas de expresin de clulas heterlogas
como objetivos para la evaluacin de alto rendimiento estructurafuncin de nuevas dianas de medicamentos y marcadores de la
enfermedad. Aqu hemos puesto de manifiesto algunas de las
caractersticas innatas de la clula HEK con el fin de que su idoneidad
como un vehculo para la expresin de un producto gnico se puede
evaluar para las necesidades particulares. Tambin hemos detallado
algunos de los mtodos estndar utilizados para la transfeccin y
obtencin de datos funcionales a partir de tcnicas de registro
electrofisiolgico.
Orgenes de la lnea celular HEK293:
HEK293 es una lnea celular derivada de clulas de rin embrionarias
humanas cultivadas en cultivo de tejidos. Tambin son conocidos, ms

informal, como las clulas HEK. Esta lnea particular se inici por la
transformacin y el cultivo de las clulas HEK normales con adenovirus 5
ADN cizallado. La transformacin dio lugar a la incorporacin de
aproximadamente 4,5 kilobases del genoma viral en el cromosoma
humano 19 de las clulas HEK. La lnea se cultiv el cientfico Alex Van
der Eb, a principios de 1970, en su laboratorio en la Universidad de
Leiden, Holanda.La transformacin fue ejecutado por Frank Graham, otra
cientfica Van der laboratorio de Eb, que invent el mtodo de fosfato de
calcio para la transfeccin de clulas. La fuente de las clulas era un
feto abortado saludable. El nombre HEK293 se thusly nombrado porque
era experimento 293a de Frank Graham.
El tipo de clula renal que la lnea celular HEK293 es desconocido, y es
difcil de caracterizar de manera concluyente la clulas despus de la
transformacin, ya que el adenovirus 5 podra haber alterado
significativamente la morfologa y la expresin de clulas, y los riones
de embriones son una mezcla heterognea de casi todos los tipos de
clulas presentes en el cuerpo. De hecho, se ha especulado por
investigadores independientes, incluyendo Van der Eb s mismo, que las
clulas pueden ser neuronal en origen. Esto es posible, aunque la
mayora de las clulas derivadas de un rin embrionario seran
endotelial, epitelial, o los fibroblastos. Origen neuronal se sospecha
debido a la presencia de la presencia de ARNm y productos gnicos se
encuentran tpicamente en las neuronas.
Expresin en clulas HEK293:

Factor de liberacin de corticotropina tipo 1 receptor [10]

Receptores de esfingosina-1-fosfato EDG1, EDG3 y EDG5 [11]

Receptores de acetilcolina muscarnicos M3 [12]

Receptor de potencial transitorio TRPC1, TRPC3, TRPC4, TRPC6


[13]

HEK293 Citogentica:
El nmero cromosmico modal para las clulas HEK293 es 64, que se
produce en el 60% de las clulas. Las clulas con ploidas mayores
ocurren con menos frecuencia, a una tasa del 4,2%. Lneas celulares
HEK293 muestran cierta inestabilidad citogentica.