Med. leg. Costa Rica vol.15 n.1-2 Heredia Dec.

1998

Identificacin De Restos Oseos Humanos Mediante Anlisis De ADN

Bernal Morera-Brenes (*), Gerardo Jimnez-Arce (**)

RESUMEN
En los ltimos aos la tecnologa del ADN se ha convertido en una poderosa herramienta para la
identificacin individual, incluso cuando solamente se cuenta con restos seos. Se ilustra un caso en el
cual se realiz la prueba de identificacin comparando el ADN de los supuestos padres contra el ADN
extrado del hueso de un menor de sexo femenino, utilizando los marcadores: HLA-DQA1, LDLR,
GYPA, HBGG, D7S8, Gc, y D1S80. Los perfiles genticos obtenidos permitieron concluir una
identificacin positiva de los restos como pertenecientes a la nia desaparecida. Esta metodologa
queda disponible para futuros casos forenses que as lo ameriten.

PALABRAS CLAVES
Tipo de ADN, huesos humanos, identificacin de restos humanos, postmortem, Ciencias Forenses.

ABSTRACT
The DNA technology has become a powerful tool for human identification in the last few years even in
cases where the bones are the only remains. We now report the successful identification of the skeletal
remains of a murder victim by comparative typing on nuclear DNA in remains, and in the presumptive
parents of the victim. The genetic markers used were: HLA-DQA1, LDLR, GYPA, HBGG, D7S8, Gc,
and D1S80. This feasibility of bone DNA typing is available in forensic investigation in Costa Rica
now.
KEY WORDS
DNA typing, human bone DNA, human identification, Postmortem, Forensic Sciences.

INTRODUCCION
Uno de los desarrollos tcnicos ms importantes en el campo de las pruebas de identificacin humana
es el uso de la caracterizacin del ADN a partir de evidencias biolgicas1. As, muchos restos humanos
que consistan solamente en huesos, han sido exitosamente identificados de esta forma2.
A la fecha, dos laboratorios costarricenses, de la Universidad de Costa Rica y del Poder Judicial, se han
enfrentado al reto de identificar restos seos humanos mediante anlisis de ADN con propsitos
forenses. Esta comunicacin tiene el objetivo de describir los resultados de uno de estos casos, y a la
vez informar sobre la implementacin de esta tecnologa.
Identificacin de restos seos humanos mediante anlisis de ADN
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ANTECEDENTES
Se encontr un esqueleto completo en un lote baldo. El cuerpo estuvo expuesto por alrededor de un
mes, a las condiciones ambientales de la zona premontana tropical hmeda.
Por antropometra se presumi que corresponda a un menor de sexo femenino de entre 5 y 9 aos de
edad de 1.20 m de estatura.
El estudio de Patologa Forense estim el tiempo de muerte en menos de un ao, por la desintegracin
de los tejidos hasta esqueleto y por la presencia de gusanos necrosantes. Por los restos de ropa y los
zapatos se presumi que corresponden a una nia desaparecida haca 22 das, sin embargo, no fue
posible asociarla contundentemente con ninguna nia desaparecida en ese rango de edad3.
Al no haber tejidos biolgicos que permitieran su identificacin por las pruebas bioqumicas y
serolgicas convencionales se descart estas vas de identificacin.
Se remiti el fmur izquierdo al Laboratorio de ADN del Organismo de Investigacin Judicial para
realizar anlisis de marcadores de ADN que permitieran la identificacin de los restos por comparacin
con el perfil gentico de los presuntos padres.

MATERIALES Y METODOS
Para dicho anlisis se tomaron 6 ml de sangre a los supuestos padres, con ACD como anticoagulante.
El ADN fue extrado por el mtodo de Chelex a partir de manchas de sangre en tela, que es el usado de
rutina en muestras frescas4. Al hueso se le recortaron dos fragmentos cuadrangulares (25 mm2) en los
extremos usando un taladro Dremel y se le extrajo ADN por el mismo mtodo de Chelex, sin
descalcificacin.
Se amplific el ADN mediante PCR, se corri mediante electroforesis y se hibrid de acuerdo al
protocolo del fabricante, utilizando los marcadores: HLA-DQA1, LDLR, GYPA, HBGG, D7S8, Gc5, y
D1S806.
Se realiz la prueba de identificacin comparando el perfil gentico de los supuestos padres contra el
ADN del hueso. Se clculo la probabilidad de exclusin de una relacin de primer grado madre-hijo y
padre-hijo y la probabilidad de exclusin forense7, utilizando como referencia las frecuencias gnicas
de Costa Rica8.

RESULTADOS
Se logr amplificar y caracterizar el ADN de los fragmentos de hueso de ambos extremos del fmur,
usando los marcadores mencionados. Los resultados obtenidos en el tipo de marcadores genticos de
ADN se presentan en el cuadro 1.

Identificacin de restos seos humanos mediante anlisis de ADN

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Cuadro 1.
CARACTERIZACIN DE LOS GENOTIPOS DE ADN EN UN CASO FORENSE.
INDIVIDUO

MARCADORES GENETICOS
DQA1 LDLR GYPA HBGG D7S8 GC D1S80

Padre
Huesos
Madre
C+

1.1,1.2
1.2,4
1.3,4
1.1,4

AB
AA
AA
BB

AB
AB
AA
AB

AB
AB
BB
AA

AA
AB
AB
AB

AC
BC
BC
BB

18-25
18-18
18-18
18-31

INTERPRETACION Y CONCLUSIONES
Segn las leyes mendelianas de la herencia y en relacin a los marcadores genticos estudiados, se
lleg a la conclusin de que, no se excluye que los restos seos pertenezcan a un posible hijo de la
pareja analizada. Se obtuvo adems una probabilidad de exclusin de una relacin de primer grado
madre-hijo (maternidad) de 99.99999996%, y una probabilidad de exclusin de una relacin de primer
grado padre-hijo (paternidad) de 99.99999999%. Resultados que permitieron concluir que los restos
seos pertenecen a dicho posible hijo de los denunciantes, ya que estos valores se ubican en el rango
verbal de "prcticamente probado", de acuerdo a la clasificacin de la Asociacin Americana de
Bancos de Sangre9.
Esto implica que la poblacin de Costa Rica debera tener al menos 2500 millones de habitantes para
poder encontrar otra persona que, por casualidad, compartiera los mismos marcadores genticos que los
restos seos comparten con cada uno de los padres.
El perfil gentico obtenido sugiere que los restos seos y la nia desaparecida corresponden a la misma
persona, ya que la probabilidad de exclusin forense (de 99.997%), ubica la relacin en el rango de
"prcticamente probada". Siendo as, la concordancia no es casual.
Dicha probabilidad seala que habra que analizar 588.235 nios costarricenses entre 5 y 9 aos de
edad para, por casualidad, encontrar el mismo perfil gentico. Sin embargo segn los datos de la
Direccin de Estadsticas y Censos de Costa Rica, actualizados a 1995, la poblacin real de Costa Rica
est formada por un 49% de mujeres y solamente hay 361.830 nios y nias entre 5 y 9 aos de edad.
Por lo tanto, se puede concluir una identificacin positiva de los restos seos como pertenecientes a la
nia desaparecida.
De esta forma, queda implementada en nuestro laboratorio, la metodologa para la identificacin de
restos seos humanos a partir del anlisis de ADN, la cual est disponible para futuros casos forenses
que as lo ameriten.

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Bernal Morera-Brenes (*), Gerardo Jimnez-Arce (**)

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AGRADECIMIENTOS
Agradecemos a Luis Del Valle Carazo de la Seccin de Patologa Forense por los datos gentilmente
suministrados, y a A.I. Morales del Laboratorio de ADN por la lectura crtica del manuscrito, ambos
del Poder Judicial de Costa Rica.

REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS
(1)
(2)
(3)
(4)
(5)
(6)
(7)
(8)
(9)

Reynolds R., Sensabaugh G., and Blake E. 1991. Analysis of genetic markers in forensic DNA samples using the
polymerase chain reaction. Analytical Chemistry 63:2-15.
Jimnez-Arce, G. y Morera-Brenes, B. 1997. Revisin sobre la extraccin de ADN a partir de huesos humanos.
Medicina Legal de Costa Rica, en prensa.
Del Valle, L. Seccin de Patologa Forense. Comunicacin personal. 12/III/1997
Walsh P.S., Metzger D.A., et al. 1991. Chelex 100 as a medium for a simple extraction of DNA for PCR-based
typing from forensic material. BioTechniques 10: 506-513.
Perkin Elmer. 1995. AmpliType PM+DQA1. PCR Amplification and typing kit.44 p.
Perkin Elmer. 1995. AmpliFLP D1S80. PCR Amplification Kit. 20 p.
Weir, B. 1990. Gentic Data Anlisis: methods for discrete population genetic data. Sinauer Associates, Inc.
Publishers. pp 173-209.
Morales A.I, Morera-Brenes B. y Jimnez-Arce, G. 1996. Determinacin de las frecuencias de los marcadores
genticos de ADN. LVIII Congreso Mdico Nacional. San Jos, Costa Rica.
AABB. 1978. Paternity Testing. Nov. 78. pp. 87.

_____________________________
(*)

Escuela Biologa, Universidad de Costa Rica y Departamento de Laboratorios de Ciencias

Forenses, Laboratorio de ADN, Poder Judicial.

(**)

Ciatha, Hospital San Juan de Dios

Identificacin de restos seos humanos mediante anlisis de ADN

Bernal Morera-Brenes (*), Gerardo Jimnez-Arce (**)