FUNDACION UNIVERSIDAD AUTONOMA DE COLOMBIA

Laura Lizeth ngel Cruz

Mary Sanmiguel Vargas
Leidy Ramrez Montejo
LABORATORIO No. 7: FIJACION DE NITROGENO: AZOTOBACTER

INTRODUCCIN
Las bacterias fijadoras de nitrgeno que se desarrollan de forma natural en
el suelo, se conocen desde hace ms de un siglo. Representan un
biofertilizante ecolgico y se dividen en dos grandes grupos: Las
simbiticas, especficas de las leguminosas, como el Rhizobium, y las libres,
que viven en el suelo y no necesitan la planta para su reproduccin, como el
Azotobacter y el Azospirillum, entre los ms importantes en agricultura.
El Azotobacter y el Azospirillum, en concentraciones adecuadas, pueden
sustituir al nitrgeno qumico (Urea, amonaco) sin merma de la produccin
y a menor coste. Otras ventajas comprobadas del uso de estas bacterias
como biofertilizante son:
a) Producen fitohormonas, como el cido indolactico y las citoquininas,
capaces de acelerar y potenciar el crecimiento de las plantas.
b) Al permanecer vivas durante aos y reproducirse en el suelo, no slo no
lo degradan sino que contribuyen a su enriquecimiento en nitrgeno y a su
regeneracin de forma ecolgica y gradual, incluso en terrenos de alta
concentracin salina.
c) Se ha comprobado que fertilizando los cultivos con estas bacterias y con
nitrgeno qumico en un porcentaje entre el 20 y 50% del utilizado
normalmente, se consigue un aumento de produccin sobre las cosechas
obtenidas nicamente con fertilizante qumico al 100%. Esto es debido a
que, al liberarse la bacteria de su funcin fijadora de nitrgeno, produce
ms factores de crecimiento vegetal, En cereales de secano, esto puede
suponer el ahorro del abonado de cobertera.
d) Crea una barrera protectora contra hongos y bacterias patgenas en la
raz de la planta, por lo que sta crece ms sana y fortalecida.
e) Producen enzimas que solubilizan los fosfatos y los hacen ms accesibles
a la planta, as como factores que facilitan la absorcin de oligoelementos.
f) Se ha demostrado que resisten mejor las condiciones de sequa y los
climas ridos ya que se forman alginatos en las races de las plantas.
g) Como consecuencia de todo lo anterior, es un mayor desarrollo de las
races de las plantas, con el consiguiente beneficio general para sta, as
como el peso de los frutos.
h) Tambin se ha comprobado un mayor ndice de germinacin de semillas
comparada con otros sistemas de abonado.

i) Las nuevas estirpes de Azotobacter y Azospirillum son capaces de fijar un

72,64% ms de nitrgeno atmosfrico, que las estirpes originales.
Hay pues un cmulo de ventajas para el usuario, econmicas, ecolgicas, A
corto, medio y largo plazo en la progresiva sustitucin de la fertilizacin
qumica por las bacterias naturales, totalmente inofensivas para el medio y
el ser humano.
Azotobacter es un gnero de bacterias usualmente mtiles, ovales o
esfricas, que forman quistes de pared gruesa, y pueden producir grandes
cantidades de baba capsular. Tiene una tasa respiratoria efectiva y rpida a
nivel superficial. Es de vida libre. Adems del uso de Azotobacter como
organismo modelo, tiene aplicaciones biotecnolgicas. Azotobacter es una
bacteria Gram-negativa.

OBJETIVOS
GENERAL: Aislar bacterias de vida libre del gnero Azotobacter propias
para la fijacin de nitrgeno a travs de la tcnica de grnulos de suelo.
ESPECFICOS
-

Establecer cul es el funcionamiento de la bacteria Azotobacter para

la fijacin del nitrgeno.
Reconocer los mecanismos de proteccin de la nitrogenasa que tiene
la bacteria Azotobacter.
Despus de un primer aislamiento, realizar una siembra por
aislamiento para comprobar que Azotobacter es la responsable de la
fijacin de nitrgeno en la tierra.

RESULTADOS

DISCUSION
En la primera imagen tenemos que la forma macroscpica de Azotobacter
es de color transparente amarillenta y creci alrededor de cada muestra de
tierra, tomamos una de las colonias sospechas y a esta le realizamos tincin
de gram.
La segunda imagen muestra la tincin de gram realizada y se obtuvieron
resultados buenos, ya que la bibliografa dice que Azotobacter es un
bacteria gram negativa por lo tanto se debe teir de forma rosada y se fue
el resultado obtenido.

CUESTIONARIO
1. Investigue y a travs de un grfico explique el ciclo del nitrgeno.

2. A travs de consulta bibliogrfica, proponga detalladamente una

metodologa de identificacin bioqumica, y una metodologa de
identificacin molecular del microorganismo en estudio.
-

Se puede realizar una caracterizacin con base en el comportamiento

bioqumico frente a la fermentacin de glucosa, manitol y benzoato.
Para la identificacin molecular de las cepas, se puede realizar un
anlisis de restriccin del DNA ribosomal 16S, con la enzima Alu I.

BIBLIOGRAFA
-

http://www.porquebiotecnologia.com.ar/educacion/cuaderno/ec_87.as
p?cuaderno=87
Borda, D. Pardo,J. Martnez, M. Montaa, J. (2009) Produccin de un
biofertilizante apartir de un aislamiento de Azotobacter nigricans
obtenido en un cultivo de Stevia rebaudiana Bert. PUJ-UNIVERSITAS
SCIENTIARUM Vol. 14 N1, 71-78
http://www.posgradoeinvestigacion.uadec.mx/Documentos/AQM/AQM
8/4.pdf
http://www.scielo.org.co/pdf/unsc/v14n1/v14n1a09.pdf