EXPERIENCIA DE

APRENDIZAJE

SOP
Flebotoma

Hematologa

N SOP: I
Pg.: 1 de 2

OBJETIVO
El alumno llevara a cabo la extraccin de sangre venosa y la apropiada
recoleccin de la muestra.

JUSTIFICACIN
El lugar de adecuado de eleccin para obtencin de sangre a analizar es la regin venosa
ante cubital (venas baslica o mediana ceflica), ya que este nivel existe una piel fina y
mvil, y las venas son de grueso calibre y relativamente 3 superficiales. La manera de
obtencin pude ser jeringa o camiseta (vacutainer) teniendo caractersticas estndar de
dimetro interno las agujas (0,500 mm calibre 19 y 0.790 calibre 21). La cantidad de sangre
recogida con este sistema depender de la capacidad del medio de recoleccin
(jeringa/camiseta).
El sistema de recoleccin de tubo al vacio es de los ms empleados hoy en da ya
que permite recoger la sangre desde la vena o la jeringa en el tubo, evitando todo
contacto de la misma con el operador, el volumen de la sangre extrada mediante
este sistema depende del tamao del tubo y de la intensidad de vaco, lo que
permite, adems, conseguir siempre una porcin correcta entre la cantidad de sangre
extrada y el anticoagulante.

METODOLOGA
Preparacin del paciente:
1. Correcta identificacin del paciente
(nombre y dos apellidos)
2. Hacer constar siempre la edad
3. Condiciones de la extraccin
(reposo y ayunas)
4. Preguntar vicios (fumador/alcohol)
5. Posicin (sentado)

MATERIALES

Ligadura
Recipiente RPBI (algodn/ humedecido con alcohol

Elabor:
Shirley Karely Garca
Alcocer

Revis:
Aprob:
Jorge Alberto Romero Jorge Alberto Romero
Aguilando
Aguilando

etlico 40%)
Jeringa o

REACTIVOS
camiseta

vacutainer

(agujas vacutainer)
Tubos al vacio
Anticoagulante EDTA (tubos lila)
Anticoagulante citrato de sodio
Gradillas

Elabor:
Shirley Karely Garca
Alcocer

EXPERIENCIA DE
APRENDIZAJE

Revis:
Aprob:
Jorge Alberto Romero Jorge Alberto Romero
Aguilando
Aguilando

SOP

Hematologa

Flebotoma

N SOP: I
Pg.: _2_ de _2_

*Nota: el reactivo depende en este caso del examen que se realizara al paciente

PROCEDIMIENTO
1. Identificacin correcta del paciente, nombre, edad en caso contrario
marque la hoja de peticin con el numero del paciente, el cdigo de barra.
2. Posicin del paciente correctamente sentado (o tendido ) y el brazo a punzar
colocado en superficie de forma recta
3. Verificar que el material a utilizar este al alcance y en optimas condiciones
4
4. Preparar la jeringa/camiseta, seleccionar el/los tubos necesarios para los
anlisis del paciente
5. Colocar torniquete, seleccionar una vena mientras que el paciente apriete su
puo con fuerza *nota no dejar el torniquete por mas de 5 segundos..retirarlo
esperar un momento y volver a colocarlo.
6. Hacer una desinfeccin del lugar a punzar (vena seleccionada9 de forma
circular o ascendente.
7. Se realiza la puncin de forma que el bisel de la aguja quede hacia arriba,
insertando a un ngulo aproximado de 30-45 en la parte inferior de la vena.

Elabor:
Shirley Karely Garca
Alcocer

Revis:
Aprob:
Jorge Alberto Romero Jorge Alberto Romero
Aguilando
Aguilando

8. Traspasando el lumen de la vena, si la puncin fue correcta el segmento de la

jeringa posterior se produce a la extraccin.
9. Se retira el torniquete, se extrae la cantidad de tubos necesarios, no se
extrae la aguja/vacutainer solo se insertan los tubos. O en defecto se retira la
aguja. Se distribuye con movimiento suave los tubos con aditivos para su
correcta mezcla, sin ser bruscos para evitar la hemlisis.
10. Se coloca una torunda sin exceso de alcohol sobre el lugar de puncin,
retirando la aguja del mismo.
11. Se dobla el brazo del paciente, dando la indicacin de mantener alzado por
un periodo de 3-5 min.
12. Desechar la aguja usada en contener de R.P.B.I Y eliminacin de residuos de
seguridad.

OBSERVACIN

Se tiene que colocar en una posicin adecuadamente correcta al paciente.

No proceder a la extraccin si el paciente presenta piel lesionada o irritada.
Saber la correcta ubicacin de la vena antes de punzar
Si no se est seguro del lugar a punzar, no realizar la tcnica.

RESULTADO: Extraccin de sangre venosa de forma adecuada, a la primera

puncin y en tubo idneo tapa lila con anticoagulante EDTA
EXPERIENCIA DE
APRENDIZAJE

SOP
Frotis sanguneos

Hematologa

N SOP: II
Pg.: _1_ de _2_

OBJETIVO
Conocer las propiedades de las diferentes tinciones usadas para realizar el
frotis sanguneo.

JUSTIFICACIN
5
Se define como frote, frotis o extendido, a la preparacin microscpica delgada y
transparente, extendida entre dos cristales (porta o cubreobjetos), obtenida de un
lquido orgnico espeso o tejido semilquido o pastoso (sangre, aspirados,
secreciones, exudados, etc.)

Elabor:
Shirley Karely Garca
Alcocer

Revis:
Aprob:
Jorge Alberto Romero Jorge Alberto Romero
Aguilando
Aguilando

El frote perifrico se utiliza para el estudio de las caractersticas citolgicas de las

clulas de la sangre, lo cual permite valorar el funcionamiento general de la mdula
sea a travs de sus componentes celulares, lo cual implica la evaluacin de las
lneas eritrocticas, leucocitaria y megacarioctica, determinando anormalidades en
forma, tamao, color e inclusiones citoplasmticas, dando una medida cuantitativa y
cualitativa de los elementos que lo conforman.

METODOLOGA
La preparacin y tincin de un extendido
de sangre perifrica o de mdula sea es
una tcnica fundamental en hematologa,
ya que la informacin obtenida puede
conllevar a: 1) El diagnstico correcto de
una enfermedad; 2) Orientar al clnico
para brindar la teraputica adecuada y 3)
Monitorear el proceso de recuperacin del
paciente.
Un buen frotis sanguneo debe tener la presencia de cabeza, cuerpo y cola de
manera distinguible.

MATERIALES

REACTIVOS

2 portaobjetos limpios
Sangre con EDTA

XPERIENCIA DE
APRENDIZAJE

Hematologa

SOP
Frotis Sanguneos

Elabor:
Shirley Karely Garca
Alcocer

N SOP:II
Pg.: _2_ de _2_

Revis:
Aprob:
Jorge Alberto Romero Jorge Alberto Romero
Aguilando
Aguilando

PROCEDIMIENTO
1. Recoger una pequea gota de sangre y depositarla a 1cm del extremo de
un portaobjetos totalmente limpio.
2. Extender mediante otro portaobjetos de la manera siguiente: poner el
portaobjetos en contacto con la gota, que en principio se alargar en una lnea
en la zona de contacto de los dos portas. Hacer deslizar el portaobjetos sobre
el porta soporte en direccin opuesta a la de la gota de sangre; sta, por
tensin superficial, se extiende formando una lmina muy delgada. De esta
manera, la gota es atrada por el portaobjetos esmerilado y no empujada.
3. Dejar secar al aire.

OBSERVACIN
Se realizaron diferentes frotis correctos y otros inaceptables, por lo cual fue necesario
realizar varias veces el procedimiento de la prctica. Despus de haber elaborado los
frotis se procedi a la tincin para llevar a cabo el diferencial de los leucocitos.

RESULTADO
Extendido de manera adecuada se observa las 3 partes de un frotis ptimo, se
realizaron 15 frotis ptimos en tiempo diferido

EXPERIENCIA DE

SOP
Microscopio

APRENDIZAJE

N SOP: III
Pg.: _1_ de _2_

Hematologa

Elabor:
Shirley Karely Garca
Alcocer

Revis:
Aprob:
Jorge Alberto Romero Jorge Alberto Romero
Aguilando
Aguilando

OBJETIVO
Que el alumno conozca y aprenda a dar un correcto mantenimiento a los
microscopios.

JUSTIFICACIN
7

Un microscopio ptico es un microscopio

basado en lentes pticos. Tambin se le
conoce como microscopio de luz, (que
utiliza luz o "fotones") o microscopio de
campo claro. El desarrollo de este aparato
suele asociarse con los trabajos de Anton
van Leeuwenhoek.. La Microscopa es el
conjunto de tcnicas y mtodos destinados
hacer visible los objetos de estudio que por
pequeez estn fuera del rango de
resolucin del ojo normal.

a
su

Si bien el microscopio es el elemento

central de la microscopa, el uso del mismo se requiere para producir las imgenes
adecuadas, de todo un conjunto de mtodos y tcnicas afines pero extrnsecas al
aparato. Algunas de ellas son, tcnicas de preparacin y manejo de los objetos de
estudio, tcnicas de salida, procesamiento, interpretacin y registro de imgenes, etc.

MATERIALES

REACTIVOS

Microscopio
Gasas
Hisopos
Alcohol

PROCEDIMIENTO
1. Desmontar los oculares para su aseo con torunda de algodn y alcohol,
limpiar los lentes dentro de los mismos.

Elabor:
Shirley Karely Garca
Alcocer

Revis:
Aprob:
Jorge Alberto Romero Jorge Alberto Romero
Aguilando
Aguilando

SOP
Microscopio

EXPERIENCIA DE
APRENDIZAJE

N SOP: III
Pg.: _2_ de _2_

Hematologa

2. Con una pieza de tela para lentes limpiar los objetivos, despus de destornillar
la camiseta del objetivo para limpiar por dentro
3. Con ayuda de un hisopo limpiar el interior de los lentes del objetivo
4. Quitar los tornillos de tuerca del condensador para limpiar con tela, acomodar
las partes y colocarlas perfectamente.
8

5. Armar nuevamente todas las partes que hayan sido desinstaladas.

6. Para mejores resultados es necesario apartar de los microscopios que ya no
son aptos.

OBSERVACIN

Los microscopios se encontraban muy sucios

Se encontraron microscopios sin funcin
Se reacomodaron 5 condensadores

RESULTADO
Se realiz correctamente el mantenimiento de los microscopios
Teniendo un nmero elevado de microscopios con correcto funcionamiento, y
obteniendo la adecuada manera de limpiar y acomodar las partes desmontables del
microscopio obteniendo as mejor observacin de las muestras.

Elabor:
Shirley Karely Garca
Alcocer

Revis:
Aprob:
Jorge Alberto Romero Jorge Alberto Romero
Aguilando
Aguilando

EXPERIENCIA DE

SOP

APRENDIZAJE

Velocidad de sedimentacin globular

N SOP: IV
Pg.: _1_ de _3_

Hematologa

OBJETIVO
Detectar la presencia de inflamacin debida a causas como infecciones,
tumores o enfermedades autoinmunes.
Monitorizar trastornos especficos como arteritis de la temporal, vasculitis
sistmicas, poli mialgia reumtica o artritis reumatoide.
9 El
valor de la tcnica no es muy sensible y adems poco especfica, por s sola tiene poco
valor y se debe asociar a otros estudios para poder orientar un diagnstico.

JUSTIFICACIN
La velocidad de sedimentacin globular VSG es la precipitacin de los eritrocitos
(glbulos rojos) en un tiempo determinado, que se relaciona directamente con la
tendencia de los glbulos rojos hacia la formacin de acmulos (pilas de monedas)
as como a la concentracin plasmtica de protenas (globulinas y fibringeno). La
capacidad y la velocidad de formar estos acmulos depende de la atraccin de la
superficie de los glbulos rojos.
La VSG es una prueba analtica anloga a las conocidas como reactante de fase
aguda, como lo es la protena C reactiva o PCR (no confundir con la reaccin en
cadena de la polimerasa, Polymerase Chain Reaction). Esto significa que es un
marcador inespecfico, no relacionado con ninguna enfermedad en concreto, cuya
elevacin puede implicar procesos inflamatorios, infecciosos o neoplsicos. Por otra
parte, sus valores son ampliamente variables por causa de factores mltiples an mal
establecidos (por ejemplo, se sabe que aumenta con la edad), por lo que su

Elabor:
Shirley Karely Garca
Alcocer

Revis:
Aprob:
Jorge Alberto Romero Jorge Alberto Romero
Aguilando
Aguilando

interpretacin debe realizarse en el contexto de la clnica y del resto de pruebas

analticas. Existen tablas de valores normales mximos por edad y sexo (por ejemplo,
10 mm por hora en varones jvenes).
La VSG se utiliza como dato de rutina en el despistaje inicial (examen mdico
preventivo) de enfermedades, como seguimiento de mltiples enfermedades
crnicas, y excepcionalmente como criterio de diagnstico (por ejemplo en la arteritis
de clulas gigantes). Algunos procesos tambin pueden presentar disminucin de la
VSG.

SOP

EXPERIENCIA DE
APRENDIZAJE
Hematologa

Velocidad de sedimentacin globular

N SOP: IV
Pg.: _2_ de _3_

METODOLOGA
Para la prueba la sangre no debe
coagularse, motivo por el cual se
adiciona a la sangre extrada una
sustancia anticoagulante. La sangre 10
homogeneizada se carga en una pipeta.
Se
acomoda la pipeta en un soporte y a
determinado tiempo preestablecido (60
minutos
si est la pipeta a 90 grados de la mesa
donde
se apoya el soporte, o menos tiempo
cuanto
menor sea el ngulo entre la mesa y la
pipeta;
hay soportes especiales que permiten
inclinaciones controladas para obtener ngulos diferentes a 90 grados) se procede a leer
cuntos milmetros han sedimentado (decantado) los hemates.
La sedimentacin globular se realiza en tres etapas:

Elabor:
Shirley Karely Garca
Alcocer

Revis:
Aprob:
Jorge Alberto Romero Jorge Alberto Romero
Aguilando
Aguilando

Hemaglutinacin: es la tendencia de los hemates a formar agregados

en forma de "pilas de monedas". Estos sedimentan de forma muy lenta
por lo que van a determinar la velocidad de todo el proceso
Sedimentacin: desplazamiento de los hemates hacia el fondo de la
pipeta a velocidad constante.
Acumulo o depsito en el fondo.

El principio fsico de esta prueba se basa en la Ley de Stokes, considerando los

hemates como esferas suspendidas en un medio infinito.

MATERIALES

REACTIVOS

Gradilla para eritrosedimentacion con

indicador de nivel
Tubos de wintrobe limpios y secos
Pipeta pasteur larga o canula de wintrobe
Cronometro

SOP

EXPERIENCIA DE
APRENDIZAJE
Hematologa

Sangre anticoagulada con

EDTA de menos de 2hras
de haber sido extrada.

Velocidad de sedimentacin globular

N SOP : IV
Pg.: _3_ de _3_

PROCEDIMIENTO
1. Una vez teniendo la muestra, se llena el tubo de wintrobe hasta 10-0 con
ayuda de la pipeta pasteur, teniendo en cuenta de que no se formen burbujas.
En caso de formarse burbujas eliminar mediante agitacin
vigorosa.
11
2. Colocar inmediatamente el tubo de wintrobe en la gradilla de
eritrosedimentacion.
3. Iniciar el conteo con el cronometro
4. Tomar la lectura exactamente a los 60 minutos. Mida la velocidad como la
longitud de la columna de plasma

Elabor:
Shirley Karely Garca
Alcocer

Revis:
Aprob:
Jorge Alberto Romero Jorge Alberto Romero
Aguilando
Aguilando

OBSERVACIN

En la realizacin de esta prctica tuvimos problemas con la pipeta, debido a

que no eran lo suficientemente largas y formaban burbujas en el tubo.
No se contaba con la gradilla para eritrosedimentacion, por lo que se pusieron
las muestras en lnea formando un angulo de aproximadamente 90, haciendo
respaldo con la pared y sostenindolas sobre una mesa fija con ayuda de cinta
adhesiva

RESULTADO
Obteniendo 35 ml/hrs

EXPERIENCIA DE
APRENDIZAJE

SOP Microhematcrito

Hematologa

N SOP: V
Pg.: _1_ de _2_

OBJETIVO
Medir el porcentaje de clulas trasportadas de oxigeno con respecto al volumen
total de sangre.

JUSTIFICACIN
El hematocrito mide el porcentaje del volumen de la sangre total que es ocupado por los
eritrocitos, es uno de los mtodos de mayor valor estadstico, sencillo y 12 exacto. Al igual
que la hemoglobina y la cuenta de eritrocitos, el Ht es uno de los parmetros importantes
para determinar los ndices eritrocticos (VGM, CMH, CMHC).

Elabor:
Shirley Karely Garca
Alcocer

Revis:
Aprob:
Jorge Alberto Romero Jorge Alberto Romero
Aguilando
Aguilando

METODOLOGA
El Microhematcrito tambien llamado mtodo del tubo capilar, proporciona un
paquete mejor que el mtodo de Wintrobe, con valores de 2-3% ms bajos. Requiere
el uso de una centrifuga para microhematcrito especial que se mueve con una
cabeza llevando hasta 24 tubos capilares y capaz de dar 12,000rpm.
El tubo en forma de cilindro corto y delgado, se llena fcilmente por capilaridad de la
muestra de sangre no coagulada, y cuando est lleno se sella calentndolo con una
llama, El tubo se coloca en una de las ranuras de la cabeza de la centrifuga con el
extremo sellado hacia fuera. Se pueden usar tubos comunes y corrientes cuando se
usa sangre que tiene un anticoagulante y tubos heparinizados. MATERIALES

EQUIPO

Tubo capilar heparinizado.

Mechero de bounce.
Tubo de vidrio.

Centrifuga.

PROCEDIMIENTO
1. Se toma la muestra.
2. Se introduce el tubo capilar haparinizado dentro de la muestra. Se realiza una
breve inclinacin del tubo hasta que este se llene a 2/3 partes, es decir que la
muestra llene el tubo hasta la lnea negra delgada.
3. Una vez lleno el tubo capilar, este se coloca en la flama del mechero de
bounce a fin de que se selle. Se debe tomar por el extremo ms distante de la
sangre con objeto de no hemolizarla, efectuando un movimiento de rotacin.
EXPERIENCIA DE
APRENDIZAJE

SOP

Hematologa

Microhematcrito

N SOP: V
Pg.: _2_ de _2_

4 Ya sellado el tubo capilar, se procede a colocarlo en un tubo de vidrio el cual

posteriormente se lleva a la centrifuga, donde se centrifugara durante seis
minutos a 3200revoluciones.

Elabor:
Shirley Karely Garca
Alcocer

Revis:
Aprob:
Jorge Alberto Romero Jorge Alberto Romero
Aguilando
Aguilando

OBSERVACIN
13
Tras la centrifugacin, se observa que la muestra queda dividida en dos fracciones; el plasma
por un lado y la fraccin celular por el otro. En base a esto se puede calcular el hematocrito.
A: longitud total de la sangre en el
tubo
B: Longitud de la fraccin celular
X: microhematocrito
Ej: Clculo utilizando una regla de
tres
A= 75mm
B=2.8
75 X = 2.8 1
x00
X= (2.8x100)/75
X = 3.73

RESULTADO: 39.32%
Total= 8.9 cm = 100%
Sedimento= 3.5 mm

EXPERIENCIA DE

SOP
APRENDIZAJE

Conteo de Eritrocitos

Hematologa

Elabor:
Shirley Karely Garca
Alcocer

N SOP: VI
Pg.: _1_ de _2_

Revis:
Aprob:
Jorge Alberto Romero Jorge Alberto Romero
Aguilando
Aguilando

OBJETIVO
Determinar el nmero de eritrocitos mediante una dilucin con lquido de Hayem.

JUSTIFICACIN
Conocer la cantidad de eritrocitos para determinar si los valores obtenidos se

14

encuentran

fuera o dentro del rango normal.

METODOLOGA
Para el recuento de eritrocitos, la sangre se diluye con una solucin isotnica,
conservando ntegros a los eritrocitos, impidiendo a su vez, que se hinchen o se
contraigan, pero tambin esta solucin destruye a los leucocitos. Luego, esta dilucin
se coloca en una cmara de Neubauer con la ayuda de una pipeta de Thoma y se
cuentan cada uno de los eritrocitos al microscopio con el objetivo de 40X, para
calcular el nmero de eritrocitos por mm.
El recuento de eritrocitos es un examen de sangre que determina el nmero de
glbulos rojos (gr) que tiene una persona. la cantidad de oxgeno recibida por los
tejidos corporales depende de cuntos glbulos rojos tenga la persona y de qu tan
bien stos estn funcionando.

MATERIALES

Tubos de ensayo de 13 x 100 mm

Pipeta Thoma para glbulos rojos
Boquillas
Gasas
Gradilla
Microscopio
Cmara de Neubauer
Muestra sangunea

REACTIVOS

Solucin salina
Liquido de hayem

Elabor:
Shirley Karely Garca
Alcocer

Revis:
Aprob:
Jorge Alberto Romero Jorge Alberto Romero
Aguilando
Aguilando

EXPERIENCIA DE

SOP

PRENDIZAJE

Conteo de eritrocitos.

Hematologa

N SOP:VI
Pg.: _2_ de _2_

PROCEDIMIENTO
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.

Se llena de sangre la pipeta hasta la seal 0.5.

Limpiar cuidadosamente con una gasa la punta de de la pipeta.
Completar con lquido Hayem hasta marca de 101.
Se tapan los extremos de la pipeta y se agita suavemente por 3 minutos para
facilitar la mezcla en la ampolla de dilucin de la pipeta.
Eliminar las 3 primeras gotas de la pipeta y colocar una gota en la cmara 15
de Neubauer.
Dejar en reposo 2 o 3 minutos la cmara de Neubauer con el fin de que los
eritrocitos sedimenten.
Localizar la cuadricula de la cmara de Neubauer con el objetivo (10X) y
enseguida enfocar con objetivo de (40X).
El recuento se realizara en los cuadros ms pequeos de la cmara, contando
los hemates localizados en los 4 cuadros de los extremos y en el del centro,
haciendo un total de 5 cuadros.
Realizar los clculos para determinar la cantidad de eritrocitos resultantes.

OBSERVACIN

Se deben evitar burbujas ya que introduciran errores en la medicin.

No se debe agitar con demasiada energa, para evitar que se rompan las
clulas.

Elabor:
Shirley Karely Garca
Alcocer

Revis:
Aprob:
Jorge Alberto Romero Jorge Alberto Romero
Aguilando
Aguilando

RESULTADOS: Calculo: Nx200x10x400

153x200x10x40
80
CUADRANTE

ERITROCITOS

68

13

31

41

= 1450000

=
80

EXPERIENCIA DE
APRENDIZAJE
Hematologa

SOP

N SOP: VII

Tincin rpida hemotincin

Pg.: _1_ de _2_

OBJETIVO:
Realizar una tincin de las clulas blancas presentes en un frotis de sangre
mediante la tcnica de tincin hemocolorante rpido.

JUSTIFICACIN:

Elabor:
Shirley Karely Garca
Alcocer

Revis:
Aprob:
Jorge Alberto Romero Jorge Alberto Romero
Aguilando
Aguilando

16

El Hemocolorante Rpido Hycel es un equipo de soluciones colorantes para la

tincin
rpida manual de frotis sanguneos ,proporcionando resultados similares a la tincin de
Wright y Giemsa.

METODOLOGA:
El equipo consta de una solucin fijadora
y
dos soluciones colorantes
amortiguadas, cuyos componentes dan
por resultado una tincin clsica del tipo
Romanowsky que permite diferenciarlas
clulas sanguneas en tan solo 15
segundos. Este equipo tambin puede
ser utilizado para teir clulas que por su
morfologa y composicin fisicoqumica,
necesitan 2colorantes de contraste para
poder identificar
las
diferentes
estructuras celulares y as reconocer
procesos patolgicos .Los colorantes
vienen en frascos que permiten la inmersin directa de los portaobjetos
Materiales

Reactivos

Microscopio
Portaobjetos
Solucin fijadora

EXPERIENCIA DE

azul de metileno
fosina

SOP

APRENDIZAJE

Tincin rpida hemotincin

Hematologa

N SOP: VII
Pg.: _2_ de _2_

PROCEDIMIENTO:

1. Preparar un frotis sanguneo y dejar secar al aire.

Elabor:
Shirley Karely Garca
Alcocer

Revis:
Aprob:
Jorge Alberto Romero Jorge Alberto Romero
Aguilando
Aguilando

2. Sumergir el frotis en azul de metileno por 5 segundos.

3. De nuevo sumergir en fosina por 5 segundos.
4. Sumergir en solucin fijadora por 5 segundos.
5. Colocar una gota de aceite de inmersin
6. Observar al microscopio

17

OBSERVACIN
Se observaron clulas del frotis, se pudo notar que este tipo de tincin como su
nombre lo indica es mucho ms fcil y rpido.

RESULTADO

Neutrfilos segmentados
Linfocitos
Plaquetas
eritrocitos

XPERIENCIA DE

APRENDIZAJE

SOP
Conteo diferencial

Hematologa

Elabor:
Shirley Karely Garca
Alcocer

N SOP: VIII
Pg.: _1_ de _3_

Revis:
Aprob:
Jorge Alberto Romero Jorge Alberto Romero
Aguilando
Aguilando

OBJETIVO
Realizar el Conteo Diferencial de Leucocitos utilizando la tincin de
Hemocolorante Rpido, identificando los diferentes tipos de glbulos
blancos en sangre perifrica.
18
JUSTIFICACIN
La frmula leucocitaria nos da informacin sobre el porcentaje de leucocitos de cada
tipo, en base a su morfologa y caractersticas tintoriales. A partir de estos valores y
de la cuenta total de glbulos blancos obtenidos en micro litros, podremos calcular
los valores absolutos de cada lnea celular en sangre perifrica, y as compararlos
con los valores normales de cada una de ellas.

METODOLOGA
Hacer la cuenta diferencial de las
variedades de glbulos blancos es de
gran
importancia
en
la
CH,
normalmente, en sangre perifrica
pueden encontrarse los siguientes tipos
de
leucocitos:
neutrfilos
o
polimorfonucleares (incluye las formas
con ncleo segmentado, las de ncleo
en banda y los metamielocitos),
eosinfilos,
basfilos
linfocitos
y
monocitos.
El recuento diferencial evala la distribucin y la morfologa de loa glbulos blancos, y
de este modo, aporta informacin msespecfica respecto al sistema inmunitario de
los pacientes con el simple recuento de tales clulas. En este estudio de laboratorio
clasifica 100 o ms leucocitos en un frote de sangre teido. La ventaja que tiene esta
preparacin de sangre extendida y coloreada, es importante para el diagnstico
clnico ya que se observan los diferentes tipos de leucocitos, con los que se
establece el conteo diferencial, tambin nos puede informar sobre la presencia de
anormalidades morfolgicas en ellos que puede ser de considerable pronostico y
significacin diagnostica.

Elabor:
Shirley Karely Garca
Alcocer

Revis:
Aprob:
Jorge Alberto Romero Jorge Alberto Romero
Aguilando
Aguilando

XPERIENCIA DE

N SOP: VIII

SOP

PRENDIZAJE

Conteo diferencial

Hematologa

MATERIALES

Pg.: _2_ de _3_

REACTIVOS

Jeringa y aguja o sistema vacutainer

Tincin Hemocolorante Rpido

Portaobjetos

Aceite de inmersin

Algodn con alcohol

Ligadura

19

PROCEDIMIENTO
1. Se realiza la extraccin de sangre con la tcnica adecuada.
2. Posteriormente, se realiza un extendido de sangre perifrica (frotis sanguneo).
Este no debe de ser muy grueso, de lo contrario, el conteo no se realizar
correctamente.
3. Una vez que se ha dejado secar el frotis sanguneo, se procede a realizar la
tincin con los Hemocolorantes rpidos.
4. Cada frasco contiene 100ml de reactivo, se va sumergir el frotis dentro de cada
uno de los reactivos durante cinco segundos siguiendo el orden:
Se aade el buffer o solucin fijadora.
Sumergir el portaobjetos en el Hemocolorante UNO (solucin de Eosina
Amarillenta o colorante rojo) durante 5 segundos.
Lavar con agua corriente y sacudir para eliminar el excedente.
Sumergir por 5 seg. En el Hemocolorante DOS (solucin de Azur-Azul de
metileno o colorante azul).
Lavar con agua corriente y dejar secar.
5. Se aade una gota de aceite de inmersin sobre el extremo ms delgado del
frotis.
6. Se observa al microscopio. Se facilita su identificacin tomando en cuenta que
los ncleos son prpura oazules, el citoplasma azul plido, algunas
granulaciones son rojas como eosinfilos, azulesen los basfilos, las plaquetas
son azul prpura y los eritrocitos rosas.

Elabor:
Shirley Karely Garca
Alcocer

Revis:
Aprob:
Jorge Alberto Romero Jorge Alberto Romero
Aguilando
Aguilando

OBSERVACIN
La mejor manera de desplazar el portaobjetos y poder ejecutar un buen conteo es en
forma de zigzag, con lo que se evita contar dos veces el mismo campo.
El nmero mnimo de leucocitos contados en el recuento diferencial es 100, los
cuales deben ser el total de la suma de los dos lados de la extensin.
EXPERIENCIA DE

SOP

APRENDIZAJE

N SOP: VIII

Conteo diferencial

Hematologa

Pg.: _3_ de _3_

RESULTADO
TIPO CELULAR

N DE CLULAS

Meta mielocitos

Bandas

Segmentados

68

Linfocitos

25

Monocitos

Eosinfilos

Basfilos

Equipo de colorantes para tincin policromatica manual, rpida de frotis sanguneo. Incluye:
Eosina
Amarillenta en amortiguador de fosfatos, Azur-Azul de metileno en amortiguador de fosfatos
y
Solucin
fijadora.

Elabor:
Shirley Karely Garca
Alcocer

Revis:
Aprob:
Jorge Alberto Romero Jorge Alberto Romero
Aguilando
Aguilando

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EXPERIENCIA DE
APRENDIZAJE

SOP
Conteo de reticulocitos

Hematologa

N SOP: IX
Pg.: _1_ de _2_

OBJETIVO:
Realizar la determinacin de reticulocitos como medio para valorar la
hematopoyesis en un paciente JUSTIFICACIN:
El recuento de reticulocitos ha sido por muchos aos
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la prueba ms sencilla de la cual dispone el
laboratorio clnico para valorar la actividad
eritropoytica. El continuo aumento en los
transplantes de mdula sea, como procedimiento de
tratamiento de numerosas neoplasias y el uso
extensivo de agentes citotxicos (quimioterapia y
radioterapia) en estos trastornos, han aumento el uso
del recuento de reticulocitos para valorar la capacidad de respuesta medular frente a
estas estrategias teraputicas.
METODOLOGA:

Elabor:
Shirley Karely Garca
Alcocer

Revis:
Aprob:
Jorge Alberto Romero Jorge Alberto Romero
Aguilando
Aguilando

Se realiza el recuento de reticulocitos en 10 campos, en los cuales, haya

aproximadamente 100 hemates/campo.
Seguidamente calculamos la proporcin de reticulocitos en dichos campos.

% Reticulocitos =

n de reticulocitos observados
n de hemates contados

MATERIALES

X 100

REACTIVOS

Microscopio Azul de cresil brillante

Tubo de ensayo
Colorante wright
Portaobjetos
Pipetas pasteur con bulbo
Gradilla
Pipetas serolgicas

SOP

EXPERIENCIA DE
APRENDIZAJE

Conteo de reticulocitos
Hematologa

N SOP: IX
Pg.: _2_ de _2_

PROCEDIMIENTO
1. Pipetear en un tubo de ensaye 500ml de sangre y 500ul de Azul de cresil
brillante
2. Agitar la mezcla colorante sangre e incubar 15min a bao mara a una
temperatura de 37
3. Hacer una extensin en un portaobjetos, utilizando una gota de la mezcla
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4. Dejar secar
5. Teir con colorante de Wright
6. Colocar una gota de aceite de inmersin
7. Observar en el microscopio

Elabor:
Shirley Karely Garca
Alcocer

Revis:
Aprob:
Jorge Alberto Romero Jorge Alberto Romero
Aguilando
Aguilando

OBSERVACIN
Se observaron reticulocitos en alguno de los 10 campos observados

Elabor:
Shirley Karely Garca
Alcocer

Revis:
Aprob:
Jorge Alberto Romero Jorge Alberto Romero
Aguilando
Aguilando