COMPOSICIN DE ESTERES METLICOS DEL BIODIESEL OBTENIDO DE

SEMILLA DE FLAMBOYAN (Delonix regia)

Aldo de la Cruz Bentez1, Benito Reyes Trejo1, Diana Guerra Ramrez, Priscila Guerra
Ramrez1
1Lab

de Prod. Naturales, rea de Qumica, Depto. de Preparatoria Agrcola, Universidad Autnoma

Chapingo, AP 74, Correos Chapingo, Texcoco, 56230 Mxico, aldodlcb@hotmail.com

Resumen
La produccin de biodiesel a nivel mundial se obtiene principalmente a partir de aceite de
semilla de especies como como el de semillas de Jatropha curcas (pin) (Tiwari et al,
2007), Pongania glabra (Karanja), Madhuca indica (Mahua) y Salvadora oleoides (Pilu) en
la India (Kaul et al, 2007), entre otras, sin embargo es importante encontrar nuevas
alternativas de energas sustentables y amigables con el ambiente, ya que el uso de
biodiesel en los motores disminuye la emisin de contaminantes atmosfricos. Se
colectaron semillas de Delonix regia provenientes de Salvatierra, Guanajuato; se lavaron y
almacenaron hasta su secado, posteriormente se extrajo el aceite de las semillas por
maceracin con hexano durante dos das (tres veces). Al aceite extrado se le determin
el ndice de acidez (I.A.) y la densidad (d) por triplicado; despus fue sometido a una
reaccin de transesterificacin usando metanol y H2SO4 al 2% como catalizador, para
producir biodiesel con el 36.8% de rendimiento. Se determin la composicin qumica de
los esteres metlicos por cromatografa de gases. El rendimiento del aceite de semilla fue
del 5.3 %, con una d=0.9348 g/mL y un I.A de 0.59%. El biodiesel mostr un contenido de
esteres metlicos como palmitoleato (20.5 %), estearato (60.8%), oleato (8.1%), linoleato
(10.5%), lo que constituye el 81.36% de cidos grasos saturados presentando
solidificacin.

Palabras clave. Biodiesel, Tamarindus indica, aceite de semillas, sustentable

Introduccin
El biodiesel es un combustible producido a partir de materias renovables como los aceites
vegetales, que estn compuestos por triglicridos, que son tristeres de glicerina y cidos
grasos. El biodiesel se obtiene mediante un proceso qumico llamado transesterificacin,
en el cual los aceites orgnicos son combinados con alcohol y alterados qumicamente
para formar un ster etlico o metlico, el cual recibe finalmente el nombre de biodiesel
(Sharma et al; 2008).
El biodiesel se encuentra registrado como combustible y como aditivo para combustibles
en la Agencia de Proteccin del Medio Ambiente (Enviroment Protection Agency EPA
EEUU). Puede usarse como una base de mezcla para el diesel de petrleo en varias
proporciones por ejemplo 95:5 (B95), 90:10 (B10) y 70:30 (B70) entre otras, o en
proporcin muy bajas como aditivo del 1 al 5 %. De esta forma el biodiesel se
complementa, no compite con el petrleo (Bajpai et al., 2006).
El biodiesel se dice, es un tipo de energa verde que tiene la significacin estratgica del
desarrollo sostenible y sustentable. Siendo el biocombustible el mejor sustituto del diesel
derivado del petrleo, ya que este por ser de origen vegetal, tiene un menor impacto
ambiental, desarrollo econmico en la agricultura, entre otros.

Los aceites comestibles se obtienen principalmente de las anonceas. Las anonceas

constituyen una familia muy grande de plantas de aproximadamente 130 gneros y 2300
especies, qumicamente son poco conocidas de la familia de las plantas tropicales, por lo
que sus estudios qumicos se han incrementado recientemente. (Ghadge, S.V.; Reaman.
H.2006). Los aceites de oleaginosas son steres de los cidos grasos y el glicerol (Figura
1).
O

O
HO

CH2

CH

CH2

O O

CH2

OH

CH

OH

HO
O
HO

CH2

Un aceite

OH

glicerol

cidos grasos

Figura 1. Estructura de un aceite, el glicerol y algunos cidos grasos

Transformacin de aceites en biocombustible

Con una cantidad suficiente de aceite es factible su transformacin en biocombustible,
que especficamente es una reaccin de transesterificacin con metanol. Previo
tratamiento con hidrxido de potasio (Figura 2).
O
CH2
CH
CH2

O
O

R
R

O O R

1. KOH
2. CH3OH/H +

CH2

OH

CH

OH

CH2

OH

O
+

CH3O

Aceite

Glicerol

Ester metlico
de cido graso

Figura 2. Reaccin de transesterificacin de aceite para obtener biodiesel

El proyecto tiene como objetivo principal realizar la transformacin de los aceites de
semilla Delonix regia a biocombustible, primero se extrae el aceite de la semilla de
falmboyan y posteriormente se realiza la filtracin y determinacin del ndice de acidez del
aceite para proceder a la transformacin mediante transesterificacin. Una vez obtenido el
biodiesel se analiza el contenido de cidos grasos del biocombustible. (Norma ASTM
D6751), adems se determina el calor de combustin del biocombustible obtenido (Norma
ASTM D6751). Adema es importante mencionar que en el tema de bionergticos, segn
Saval (2012) actualmente existen el marco regulatorio a nivel federal para la produccin
de bioetanol y biodiesel, est conformado por la Ley de Promocin y Desarrollo de los
Bioenergticos (2008) y su Reglamento (2009), el Acuerdo por el que se emiten los
Lineamientos para el otorgamiento de permisos para la produccin, el almacenamiento, el
transporte y la comercializacin de bioenergticos del tipo etanol anhidro y biodiesel
(2009), el Acuerdo por el que se emiten los formatos de solicitudes de permisos para la
produccin, el almacenamiento, el transporte y la comercializacin de bioenergticos del
tipo etanol anhidro y biodiesel (2009), por lo que este proyecto realza su importancia para
su desarrollo ya que busca producir biocombustibles amigables con el ambiente (Toscano
et al., 2011)

MATERIALES Y MTODOS
Material vegetal
Se extrajeron las semillas de las vainas cortadas de rboles de flamboyn, tambin
conocido como tabachn (Delonix regia), situados en San Pedro de los Naranjos de
Salvatierra, Guanajuato, Mxico, en el mes de febrero de 2011, las semillas se
mantuvieron en almacenamiento a temperatura ambiente.
A un lote de 30 semillas elegidas aleatoriamente, se le determinaron caractersticas
fsicas: dimensiones (largo, ancho, y grosor) y se pesaron en balanza analtica Ohaus.
Se separ la cscara de la almendra, posteriormente se molieron y utilizaron para la
extraccin del aceite, el cual se llev a cabo por mtodo de maceracin

Extraccin de aceite
Las semillas se lavaron y durante dos semanas se expusieron al aire libre para su secado.
Para la extraccin del aceite se moli la semilla en una licuadora, posteriormente se
coloc el polvo en un matraz de bola y se le adicionaron 25 ml de hexano por cada 10 g
de semilla, se dej en maceracin por dos das, despus se decant y filtr el hexano
conteniendo el aceite, por ltimo se evapor el disolvente al vaco en un rotavapor, esta
operacin se repiti tres veces.

Caractersticas del aceite

Determinacin de la densidad.
Al aceite extrado se le determin la densidad utilizando un picnmetro de 10 mL
integrado por un termmetro de acuerdo con el mtodo general de anlisis MGA 0251D
descrito en la Farmacopea de los Estados Unidos Mexicanos (FEUM, 2008).
Determinacin del grado de acidez libre.
La presencia de cidos grasos libres en cada aceite se determin por titulacin de una
muestra de peso aproximado a 0.5 g de aceite, se le agreg 1 ml de etanol y 0.05 ml de
fenolftalena, se mantuvo en agitacin vigorosa a 50C y se titul con una solucin
valorada de KOH 0.0083 N. La prueba se realiz por triplicado y se determin la cantidad
de mg de KOH que neutraliza a 0.5 g de aceite.

Obtencin del biodiesel.

Una muestra de 0.5mL de aceite se mezcl con solucin de H2SO4 al 2% en 5 mL de
metanol y se mantuvo en reflujo durante 2:45 h. el punto final de esta reaccin se
determin mediante una placa cromatogrfica. Posteriormente el producto de reaccin se
transfiri a un embudo de separacin y se mantuvo en reposo durante toda la noche. Se
decant la parte inferior que contena glicerina y la fase superior del biocombustible se
lav con una disolucin de acetato de etilo (tres veces) con 10 ml y despus con agua
caliente (60C, 3 veces) con 10 ml, finalmente se seco con Na2SO4 anhidro y se filtr y
midi su volumen (Adewale et al., 2010).

Caractersticas del biodiesel

Composicin qumica de los esteres metlicos.
Se realiz por cromatografa de gases utilizando equipo Agilent 6890 integrado con una
columna ATSilar de 30m x0.25mm x 0.25mm, las temperaturas del horno de 170C con
una rampa de aumento de 10C cada minuto hasta llegar a una temperatura final de
240C. El gas portador fue hidrgeno con un flujo constante de 2.2 mL por minuto, el
tiempo de adquisicin de datos fue de 8 minutos. La tcnica estandarizada en el equipo
para controlar el sistema fue el de Esteres mesilar, se calcul la proporcin de esteres
metlicos en % de rea.

Anlisis y discusin de resultados

Caracterizacin fsica de las semillas
Las semillas de Delonix regia utilizadas presentaron como longitud, anchura y grosor
promedio de 1.96 0.11, 0.61 0.09 y 0.41 0.09 cm respectivamente, as como un
peso de 1.3471 0.2018 g.

Extraccin y caracterizacin del aceite

Se extrajo en promedio por cada 10 g de semilla de 0.53 ml de aceite utilizando hexano,
lo cual representa un 5.3%. El promedio de la densidad del aceite de flamboyn fue de
0.9348 g/mL.

Acidez de los aceites y produccin de biodiesel

La Tabla 1 muestra el ndice de acidez del aceite extrado, as como l porcentaje de
biodiesel obtenido despus de someterlo a transesterificacin. La obtencin de los
biocombustibles de aceites de oleaginosas se debe realizar a las muestras que arrojen
valores de acidez pequeos menores a 2% (Tiwari et al., 2007), se realiz la reaccin a
todas las muestras, ya que su acidez en promedio fue de 0.59%, solo se trasformo un
promedio de 36.8 %, lo que representa un bajo porcentaje de rendimiento de
transesterificacin del aceite a biodiesel, ya que mayor de 50% es aceptable (Sharma et
al., 2008), es necesario realizar la reaccin por el mtodo bsico (NaOH) para comparar
rendimiento.
Composicin qumica del biodiesel
La determinacin del tipo de esteres metlicos contenidos en el biocombustible obtenido
por transesterificacin con metanol y H2SO4 al 2% se muestran en la Tabla 2. La calidad
del biocombustible obtenido es muy baja, ya que contiene el 18.64 % de esteres metlicos
de cidos grasos insaturados (oleato y linoleato) y alta proporcin de esteres metlicos de
cidos grasos saturados equivalente al 81.36 % (palmitato y estereato), lo que explica que
despus de 2 horas de terminada la transesterificacin, el producto obtenido present
solidificacin, por lo que esta propiedad confiere al biodiesel un mal desempeo a bajas
temperaturas (Sharma et al., 2008). Por otra parte los resultados obtenidos en el presente
estudio en cuanto al porcentaje de contenido de esteres metlicos de cidos grasos
saturados (81.36%) e insaturados (18.64%)

muestra una diferencias significativas al

compararlos con los valores reportados por Adewale et al., (2010), donde las semillas de
D .regia recolectadas en el Estado de Oyo, Nigeria, contienen 30.4% de cidos grasos
saturado y 69.6%

insaturados, siendo el linoleato el de mayor presencia (58.7%),

mientras que en las semillas recolectadas en Mxico el estereato es el de mayor con

60.8333%, esto confirma que el contenido de cidos grasos totales de la misma especie a
partir de semillas recolectada en diferentes zonas edafoclimticas y pocas de corte varia
significativamente por lo que es necesario realizar estudios del contenido de aceite de las
semillas de D. regia en diferentes temporadas del ao.

Tabla 1. ndice de acidez de los aceites extrados y rendimiento de produccin de

biodiesel
Muestra

1
2
3
Promedio

ndice de
acidez
(g)
0.58
0.57
0.62
0.59

% de biodiesel en
v/v
36.5
39.0
35.5
36.8

Tabla 2. Composicin qumica del biodiesel obtenido de aceite de semillas de Delonix

regia
Ester metlico

Estructura

Palmitato
Estereato

16:0
18:0

Oleato

18:1 9

Linoleato

18:29,12

Saturados
Insaturados

Tiempo de
retencin
3.073
4.244

Composicin (%)
20.527
60.833

Composicin
(%)Reportada*
13.1
12.1

4.291

8.109

9.3

4.491

10.531

58.7

81.36
18.64

30.4
69.6

*Adewale et al., 2010.

CONCLUSIONES
Se obtuvo 5.3 % de aceite de semilla de D. regia, con una densidad= 0.9348 g/mL y un
ndice de acidez de 0.59%. La transesterificacin se llev a cabo con un 36.8% de
rendimiento, obteniendo biodiesel con un alto contenido de esteres de tipo palmitoleato
(20.527 %), estearato (60.835%), oleato (8.109 %) y linoleato (10.531%). El contenido de
cidos grasos saturados es equivalente al 81.4%, esta propiedad confiere al biodiesel un
bajo desempeo a bajas temperatura. Es necesario realizar muestreo de semillas en
diferentes temporadas del ao para estudiar el posible cambio en el % de aceite
contenido en D. regia. Los resultados en los % de esteres metlicos obtenidos presentan

diferencias significativas con los reportados por Adewale et al., lo que sugiere seguir
realizando estudios con semillas recolectadas en diferentes temporadas del ao.

Referencias bibliogrficas
Adewale A.; Rotimi A. O.; Rao B.V.S.K.; Prasad R.B.N. and Anjaneyulu B. (2010)
Chemical Component and Fatty acid Distribution of Delonix regia and Peltophorum
pterocarpum Seed Oils. Food Sci. Technol. Res., 16 (6), 565 570, 2010.
Bajpai, Divya; Tyagi, V. K. (2006) Biodiesel: source, production, composition, properties
and its benefits . J. Oleo Science, 55, 487-502.
Farmacopea de los Estados Unidos Mexicanos (2008) Volumen I. 9. 291-292.

Ghadge, S.V.; Reaman. H. (2006). Process optimization for biodiesel production from
mahua (Madhuca indica) oil using response surface methodology. Bioresource
Technology, 97, 379-384.
Kaul, S.; Saxena, R. C.; Kumar, A.; Negi, M. S.; Bhatnagar, A. K.; Goyal, H. B.; Gupta, A.
K. (2007). Corrosion behavior of biodiesel from seed oils of Indian origin on diesel engine
parts. Fuel Processing Technology 88, 303-307.
Sharma Y.C.A.; Singh B.; Upadhyay S.N. (2008) Advancements in development and
characterization of biodiesel: A review. Fuel: 23552373.
Tiwari, A.K.; Kumar, A.; Reaman, H. (2007) Biodiesel production from Jatropha oil
(Jatropha curcas) whit high free fatty acids: An optimized process. Biomass and
Bioenergy, 31:569-575.
Toscano, L.; Montero, G.; Stoytcheva, M.; Campbell, H.; Lambert, A. (2011) Preliminary
assessment of biodiesel generation from meat industry residues in Baja California, Mxico.
Biomass and Bioenergy. 35, 26-31.
Saval, Susana. 2012 Aprovechamiento de Residuos Agroindustriales: Pasado, Presente y
Futuro. BioTecnologa. Vol. 16 No. 2

MICROENCAPSULACIN DE Lactobacillus casei CON PROTENAS LCTEAS GELADAS

ENZIMTICAMENTE Y EVALUACIN DE SU SUPERVIVENCIA EN CONDICIONES
GASTROINTESTINALES SIMULADAS

Irene Margarita Arenales-Sierra1; Consuelo Lobato-Calleros1,2*; Gabriel Leyva-Ruelas1.

1

Posgrado en Ciencia y Tecnologa Agroalimentaria, 2Departamento de Preparatoria Agrcola,

Universidad Autnoma Chapingo, Km. 38.5, Carretera Mxico-Texcoco, 56230 Texcoco,

Mxico.
*Autor de correspondencia: consuelobato@yahoo.com

Resumen
Clulas de Lactobacillus casei (Lb) fueron microencapsuladas en matrices de protena lctea
sin y con recubrimiento de quitosano (Q) o alginato de sodio (A). El mtodo de preparacin de
las microcpsulas incluy los procesos de emulsificacin, gelacin enzimtica y subsecuente
recubrimiento usando soluciones de Q o A (0.1 o 0.5 % p/p). El dimetro, rendimiento, eficiencia
de entrampamiento y microestructura de las microcpsulas y la supervivencia de Lb
entrampado en condiciones gastrointestinales simuladas fueron evaluados. Se obtuvieron
microcpsulas semiesfricas y esfricas, de 104.8 a 142.2 m de dimetro y 74.8 a 96.4 % de
rendimiento. La estructura interna de las microcpsulas fue semejante a aquella de queso
fresco y su morfologa y topografa exterior fueron afectadas por la naturaleza y concentracin
de los polisacridos usados como recubrimiento. Para todos los casos, la eficiencia de
entrampamiento de Lb fue mayor al 95 %. Las microcpsulas recubiertas con una solucin de Q
al 0.5% p/p confirieron la mayor proteccin a Lb, observndose porcentajes de supervivencia de
73.4 % despus de su exposicin a condiciones gstricas simuladas y de 65.7 % despus de su
exposicin secuencial a condiciones gstricas simuladas y a la accin de sales biliares.

Palabras clave: probiticos, encapsulamiento, lactoprotenas, supervivencia.

Introduccin
Los probiticos son considerados como microorganismos vivos, que pasan a formar parte de
la microbiota colonica despus de su ingestin y confieren beneficios a la salud del husped
(Divya et al., 2012). Entre los numerosos beneficios a la salud ejercidos por los probiticos,
establecidos cientficamente y/o probados clnicamente, pueden sealarse la reduccin y

prevencin de diarreas de diferente origen, el mejoramiento del balance microbiano intestinal, el

alivio de sntomas de intolerancia a la lactosa, la prevencin de alergias alimentarias, el
aumento de actividad autoinmune y actividades contra la formacin de tumores (Saad et al.,
2013;.McFarland, 2009; Salminen et al., 2001). El nivel de consumo de probiticos
recomendado es de 108-109 ufc da-1, equivalente a 100 g de un producto alimenticio
conteniendo 106-107 ufc g-1 (Kailasapathy, 2005). No obstante, los niveles de probiticos en
productos alimenticios, se encuentran a menudo muy por debajo de los recomendados, debido
a las condiciones adversas generadas durante el almacenamiento (Heidebach et al., 2009;
Champagne et al., 2007). Adicionalmente, se ha demostrado que el medio altamente cido del
estmago y la accin de las sales biliares en el intestino delgado, pueden reducir
considerablemente el nmero de clulas viables capaces de alcanzar el colon (Anal y Singh,
2007; Muthukumarasamy et al., 2006).
La tcnica de microencapsulacin es considerada como una alternativa para aumentar la
supervivencia de los probiticos durante el procesamiento y el almacenamiento de los
alimentos, y en especial durante su trnsito a travs del tracto gastrointestinal, al proporcionar
una barrera fsica entre estos microorganismos y condiciones externas adversas (Fritzen-Freire
et al., 2013; Agrawal, 2005; Krasaekoopt et al., 2003). Aun cuando se han desarrollado diversas
tcnicas para la microencapsulacin de probiticos, la gran mayora de ellas presentan algunas
desventajas que es necesario resolver; por ejemplo, el secado por aspersin de concentrados
celulares de probiticos en varias dispersiones de protenas, presenta como desventajas la
obtencin de microcpsulas con alto grado de solubilidad en agua, liberndose clulas en el
producto en corto tiempo (Krasaekoopt et al., 2003); as como tambin prdidas significativas
en la viabilidad y la resistencia de los probiticos a las condiciones adversas del medio
ambiente, como consecuencia de las altas temperaturas empleadas durante el secado
(Desmond et al., 2002; Ross et al., 2005). El entrampamiento de probiticos en matrices
formadas por polisacridos, es un mtodo que prevalece para la produccin de microcpsulas
insolubles en agua y su aplicacin en alimentos (Doleyres y Lacroix, 2005; Krasaekoopt et al.,
2003); no obstante, los resultados sobre la proteccin que proporcionan estas matrices a los
probiticos durante el almacenamiento de los productos lcteos y a travs de su paso por el
tracto gastrointestinal, son inconsistentes (Heidebach et al., 2009). En adicin, las dispersiones
acuosas de los polisacridos usados como materiales de pared exhiben altas viscosidades, lo
que restringe su uso a concentraciones muy bajas, de alrededor del 2 al 4 %, resultando en la
formacin de estructuras de pared de baja densidad, que proporcionan una proteccin de
barrera limitada (Crittenden et al., 2006) y en la formacin de cpsulas relativamente grandes

(1- 3 mm de dimetro), que ocasionan efectos adversos en la calidad sensorial del alimento al
que se incorporan (Sandoval-Castilla et al., 2010). Resulta entonces un reto interesante el
desarrollo de nuevas tcnicas para la fabricacin de microcpsulas insolubles en agua, con
propiedades de barrera que garanticen la proteccin de probiticos durante el procesamiento y
el almacenamiento de productos lcteos y a travs de su trayecto por el tracto gastrointestinal.
Una alternativa para el logro de las caractersticas sealadas la puede constituir el uso de
lactoprotenas como materiales de pared, debido a sus propiedades funcionales ampliamente
reconocidas en el rea de los alimentos. Escasas investigaciones se han realizado sobre el uso
de lactoprotenas para la preparacin de microcpsulas insolubles en agua. El proceso de
gelacin de estas protenas se realiza tradicionalmente mediante tratamiento trmico; proceso
no aplicable a las bacterias probiticas, trmicamente sensibles. La gelificacin de las
lactoprotenas va enzimtica, constituye una opcin para su uso como materiales de pared de
microcpsulas conteniendo probiticos (Heidebach et al., 2009). Con base en lo expuesto, el
objetivo de este proyecto fue proteger clulas de Lactobacillus casei contra condiciones
gastrointestinales simuladas mediante su entrampamiento en microcpsulas de lactoprotenas
geladas enzimticamente, con y sin recubrimiento polisacrido.
Materiales y mtodos

Materiales
Cultivo liofilizado de Lactobacillus casei LBC81 LYO (Lb) (Danisco, Dange Saint Romain,
Francia). Caldo y agar Man, Rogosa y Sharpe (MRS) para lactobacilos y peptona de casena
(Becton Dickinson and Company, Le Pont de Claix, Francia). Leche descremada en polvo
(DIBICO S. A. de C. V., Mxico), cuajo fuerza 1:10 000 (Distribuidora Alcatraz, S. A. de C. V.,
D.F., Mxico), aceite de canola (Canoil, AGYDSA, Mxico). Cloruro de calcio, cido ascrbico,
cloruro de sodio, cido clorhdrico y etanol absoluto (Qumica Laitz, S. A. de C. V., Mxico).
Alginato de sodio (A) (de bajo peso molecular FD-175, 60.5 % de acido gulurnico (CP Kelco,
Lille, Skensved, Dinamarca). Glutaraldehdo al 2.5 % (v/v) (Electron Microscopy Sciences,
Washintgton, EUA.). Quitosano (Q) (de alto peso molecular, > 75 % de desacetilacin), bilis de
porcino B8631 y TWEEN 60 (peso molecular 1309, acido palmtico 35-50 %, acido esterico 4755 %, CMC 27 %, HLB 14.9) (Sigma-Aldrich Chemical Co., St Louis, MO, EUA).

Preparacin del concentrado celular de Lactobacillus casei a encapsular

Clulas de Lb se cosecharon por centrifugacin aplicando 2336.45 g durante 5 min en una
centrifuga (Damon/Iec Divisin IEC PR-J, Internacional Equipment Co., Nashville,Tennessee,
EUA) a partir de un cultivo en caldo MRS de 19 h de incubacin, periodo correspondiente a la
fase logartmica tarda de crecimiento de Lb. El sobrenadante fue decantado y el pellet celular
se lav dos veces con solucin de NaCl (0.9 % p/v) estril; en ambas ocasiones se centrifug
bajo las condiciones mencionadas y finalmente se resuspendi en agua peptonada estril (0.1 g
100 mL-1), obteniendo un concentrado celular (CC) con una carga de 11.56 0.1 log ufc mL-1).
Preparacin de las microcpsulas
Se prepar una dispersin de leche descremada en polvo (35 g 100 g-1 p/p) en agua destilada
estril aplicando agitacin moderada con un equipo caframo (modelo RZR1, Cole-Parmer,
Vernon Hills, IL, EUA). La DL se mezcl con el CC de Lb en una relacin 9:1 para mantener una
carga celular de 10.56 0.1 log ufc ml-1 y una concentracin de protena de 10.27 0.2 % en la
mezcla DL-Lb.
Se prepararon emulsiones agua-en-aceite (W/O) con una fraccin volumtrica () de 0.3,
mediante el procedimiento sugerido por Heidebach et al. (2009), con ligeras modificaciones: (a)
60 g de DL-Lb se adicionaron con 800 l de cuajo (diluido al 25 %, v/v) e incub durante 60 min
a 5 C; (b) por separado 140 g de aceite de canola se mantuvieron en refrigeracin, para que
tanto el aceite como la DL-Lb se encontraran a la misma temperatura al momento de preparar la
emulsin; (c) La DL-Lb se incorpor gota a gota al aceite mediante el equipo caframo, operado
a 1680 rpm y (d) la emulsin W/O formada fue adicionada con 480 L de cloruro de calcio
diluido al 10 % p/v y se agit durante 10 min ms. Para prevenir la prematura gelacin de las
lactoprotenas durante el proceso de emulsificacin, la temperatura se mantuvo a 5 1 C
mediante un bao de hielo.
Con la finalidad de inducir la gelacin de las lactoprotenas y as obtener las microcpsulas de
casena (MC), la emulsin W/O obtenida se someti a calentamiento (40 1 C) durante 5 min,
aplicando agitacin continua. La mezcla microcpsulas-sobrenadante se dej reposar 15 min a
5 1 C, despus de lo cual el sobrenadante se removi y las microcpsulas se lavaron dos
veces con TWEEN 60 diluido al 1 % p/p, para eliminar el residuo oleoso.

Recubrimiento de microcpsulas
A partir de las MC se prepararon cuatro variaciones de microcpsulas con recubrimiento, con
el objeto de brindar mayor proteccin a los microorganismos entrampados, usando las

siguientes dispersiones: 0.1 % de A (MC0.1A), 0.5 % de A (MC0.5A), 0.1 % de Q (MC0.1Q) y 0.5 %

de Q (MC0.5Q). Como control se consideraron las MC sin recubrimiento. Las dispersiones de
polisacridos se agregaron gota a gota a las MC, aplicando agitacin magntica durante 15
min, seguido de un reposo de 10 min a 5 C. Posteriormente, las microcpsulas se decantaron
y lavaron con agua peptonada (0.1 g 100 mL-1). Las microcpsulas obtenidas fueron vaciadas
en tubos de plstico estriles de 50 mL y centrifugadas durante 5 min a 1350 rpm, para eliminar
el lquido restante; el sobrenadante fue removido y se agregaron 5 mL de agua peptonada (0.1
g 100 mL-1) estril, para evitar la deshidratacin. Las microcpsulas se almacenaron a 5C
hasta su caracterizacin.

Caracterizacin de las microcpsulas

Tamao, rendimiento y eficiencia de entrampamiento

El dimetro mayor medio de veinte microcpsulas se determin despus de 1 d de su
elaboracin, utilizando el analizador de imgenes Motic Images Advanced 3.2 (Motic Co, Hong
Kong, China), a partir de las micrografas obtenidas con una cmara digital Motic 350 (Motic Co,
Hong Kong, China) a 40 (Rasband, 2007).
Se evalu el rendimiento de microcpsulas como funcin de la cantidad de protena gelificable
en la DL-Lb, utilizando la siguiente ecuacin:
Rendimiento (%) = (g de protena en las microcpsulas resultantes) / (5.7568 g de protena
gelificable en DL-Lb) 100

El contenido de protena en la DL y en las microcpsulas despus de 1 d de su elaboracin,

se determin por el mtodo de microkjeldahl (AOAC, 1995). Para el primer caso se consider
que el 80 % de la protena era atribuible a casenas (Fox et al., 2000); mientras que para la
microcpsulas el contenido de protena determinado se consider como igual al de casena.
Se evalu la eficiencia de entrampamiento de clulas de Lb, expresndose como el
porcentaje de clulas viables entrampadas relativo a la carga inicial presente en la DL-Lb. Para
el recuento de clulas viables entrampadas fue necesario destruir mecnicamente las cpsulas
y as liberar las clulas de Lb (Heidebach et al., 2009); diluciones decimales necesarias se
sembraron en agar MRS, se incubaron a 37C durante 72 h y se realiz el recuento en placa.
La eficiencia de entrampamiento se calcul de acuerdo a la siguiente ecuacin (Reid et al.,
2005):
Eficiencia de entrampamiento (%) = (ufc g-1 de microcpsulas)/(ufc g-1de DL-Lb) x 100

Microestructura
Las microcpsulas fueron preparadas para su observacin bajo un microscopio electrnico de
barrido, de acuerdo a lo propuesto por Sandoval-Castilla et al., 2010. Microcpsulas enteras y
fracturadas se observaron en un microscopio Electrnico de Barrido (MEB) (JEOL Scanning
Electron Microscope JMS-035, Jeol Ltd., Akishima, Japn), operado a 20 kV a una
magnificacin de 150 a 5 000 (Lobato Calleros et al., 2002).

Supervivencia

de

Lactobacillus

casei

microencapsulado

bajo

condiciones

gastrointestinales simuladas
Se determin la supervivencia de Lb en jugo gstrico simulado y en sales biliares de manera
secuencial, para lo cual se coloc 1 g de microcpsulas, por triplicado, en tubos conteniendo 9
mL de solucin gstrica simulada estril (pH 2.0, cido clorhdrico 0.1 N) y se incub a 37 C
durante 3 h en un bao de agua con agitacin (Precision 360 Scientific Orbital, West Cortland
St., Chicago, IL., EUA) (Hughes y Hoover, 1995). Posteriormente, las microcpsulas se filtraron,
enjuagaron con disolucin salina y se colocaron en tubos conteniendo 9 mL de extracto de bilis
de porcino al 1 % p/v y pH 6.4. Las muestras se incubaron a 37 C por 3 h con agitacin suave
(Madureira et al., 2005). Al finalizar el periodo de incubacin se determin la viabilidad de Lb
por el procedimiento descrito. Clulas de Lb sin encapsular en la misma concentracin, se
sometieron de manera directa a las mismas condiciones gastrointestinales simuladas que las
microcpsulas y sirvieron como control. La tasa de supervivencia de clulas libres y
encapsuladas de Lb despus de ser sometidas a condiciones gastrointestinales simuladas, se
determin de acuerdo con lo propuesto por Heidebach et al. (2009):
Tasa de supervivencia (%) = (ufcg-1 (t = ti) / (ufcg-1 (t = 0) 100
Donde:
ufc g-1(t = ti): ufc de Lb g-1 de microcpsulas despus de haber sido sometidas a condiciones
gastrointestinales simuladas a diferentes tiempos de incubacin (3 h para condiciones gstricas
y 3 h para condiciones biliares en anlisis secuencial); ufc g-1(t = 0): ufc de Lb g-1 de
microcpsulas antes de ser sometidas a condiciones gastrointestinales simuladas.
Anlisis de datos
Todos los experimentos se realizaron por triplicado, usando un diseo experimental
completamente al azar. Los datos correspondientes a las caractersticas de las microcpsulas
se sometieron a Anlisis de Varianza de Clasificacin Simple y en los casos pertinentes a

pruebas de comparacin de medias de Tukey. La significancia se estableci en p 0.05. Para

el anlisis de datos se us el software Statgraphics Plus (Statistical Graphics Corp.,
Manugistics, Inc., Cambridge, MA, EUA).
Anlisis y discusin de resultados

Tamao de las microcpsulas

Las soluciones de biopolmeros usadas para el recubrimiento de las MC0.1A, MC0.1Q y MC0.5Q,
rindieron microcpsulas individuales, exentas de la formacin de aglomerados de biopolmero,
pudiendo as lavarse despus del recubrimiento sin observarse prdidas significativas. En
contrate, molculas de A presentes en la solucin al 0.5 % p/p, usada para la preparacin de
las MC0.5A, precipitaron inmediatamente al entrar en contacto con los iones Ca+2 contenidos en
la solucin de CaCl2 utilizada como agente gelante, formando una masa amorfa de alginato de
calcio, la cual dificult la separacin de las microcpsulas MC0.5A a partir de la solucin de
recubrimiento. Lo anterior, gener prdida importante de microcpsulas, razn por la que el
tratamiento MC0.5A se desech. Se ha informado que a nivel molecular la precipitacin de A en
presencia de iones Ca+2 se debe a la formacin de una unidad dimrica en forma de bucles
originada por la interaccin entre los iones Ca+2 y las cadenas de A, el modelo llamado "eggbox", donde los iones Ca+2 se sitan como puentes entre los grupos con carga negativa del
cido galurnico, formndose alginato clcico con una estructura de gel (Braccini y Prez, 2001).
Los dimetros de las microcpsulas variaron de 104.8 a 142.2 m (Cuadro 1). Los dimetros
de las MC0.1A y MC0.1Q no difirieron (p > 0.05) del valor correspondiente a las MC. En contraste,
el dimetro de las MC0.5Q fue menor significativamente a aquel de las MC, debido
probablemente a que la presencia de Q provoc que las microcpsulas se aglomeraran en
menor grado que en el tratamiento MC, lo cual se observ tanto bajo el microscopio al
determinar dimetro mayor, como despus del lavado de las microcpsulas. El tamao de las
microcpsulas obtenido es semejante a aquel de 93 m informado por Heidebach et al. (2009)
para microcpsulas de casena preparadas mediante un procedimiento similar al realizado en
este trabajo. Estos mismos autores mencionaron que el dimetro de microcpsulas es una
caracterstica muy variante, pudiendo encontrarse valores desde 20 hasta 2200 m.
El tamao de las microcpsulas, medido mediante su dimetro, constituye un factor
determinante para la seleccin del tipo de producto alimenticio idneo al que pueden
incorporarse. Es importante que las microcpsulas presentes en un alimento no demeriten su
calidad sensorial. Esto es, es conveniente que microcpsulas con dimetros menores a 100 m

sean incorporadas a alimentos con tamao de partcula pequeo con la finalidad de que no
provoquen sensacin de granulosidad (Hansen et al., 2002); mientras que microcpsulas con
dimetros superiores a 100 m pudieran ser adicionadas a alimentos como el queso, con
tamao de partcula relativamente grande.
Cuadro 1. Valores medios (DE, n=20) del dimetro y rendimiento de las microcpsulas
Cdigo de

Dimetro

Rendimiento

Eficiencia de

Carga

microcpsula

(m)

(%)

entrampamiento

celular

(%)

(ufc g-1)

MC

142.2 35.5b

96.2 2.7a

99.0 0.2b

6.3 1012

MC0.1A

125.8 33.8ab

96.4 0.4a

104.1 0.0c

2.8 1013

MC0.1Q

121.3 17.5ab

74.9 1.2b

96.7 0.9a

3.2 1012

MC0.5Q

104.8 20.7a

95.6 6.7a

96.1 0.0a

2.6 1012

MC: microcpsulas sin recubrimiento; MC0.1A: microcpsulas con recubrimiento de 0.1 % de

alginato; MC0.1Q: microcpsulas con recubrimiento de 0.1 % de quitosano; MC0.5Q:
microcpsulas con recubrimiento de 0.5 % de quitosano. Diferentes superndices en una
columna indican que las medias son diferentes significativamente (p 0.05)
Rendimiento
No existieron diferencias significativas entre los rendimientos (95.6 a 96.4 %) obtenidos para
los tratamientos MC, MC0.1A y MC0.5Q. Estos resultados indican que en general ms del 90 % de
la protena gelificable (casena) se conserv en las microcpsulas. Por su parte, el tratamiento
MC0.1Q present el menor rendimiento (p 0.05), debido a que la disolucin de Q al 0.1 % no
brind recubrimiento a las MC, sino al contrario, las da, hacindolas quebradizas. As, una
gran parte de MC0.1Q se encontraron fracturadas y pequeas fracciones de ellas se perdieron
durante los lavados, reflejndose esto en un menor rendimiento. El fenmeno descrito se
atribuye al cambio brusco de pH que sufrieron las MC al adicionarles la solucin de Q al 0.1 %,
variando el pH de 6.8 a 1.3, lo cual provoc la insolubilizacin del calcio, la disminucin de
interacciones casena-casena y por lo tanto dao en las MC0.1Q.
Microestructura
Las MC exhibieron superficie lisa y compacta (Fig. 1a), distintiva de las microcpsulas
constituidas por lactoprotenas. Su superficie adems estuvo libre de Lb y tuvo una apariencia
compacta; esto ltima debido a que el proceso de gelacin ocurre del exterior hacia el interior

de la microcpsula. Al interior las MC presentaron una estructura relajada y porosa, pudiendo

adems observarse la presencia de clulas de Lb. La estructura interior es muy semejante a la
de queso fresco (Lobato-Calleros, et al., 2008), puesto que el principio de elaboracin es el
mismo.

(a)

(b)

Figura 1. Micrografas MEB de la superficie (a) y del interior (b) de microcpsulas de casena sin
recubrimiento.

Las MC0.1A (Fig. 2a) mostraron una superficie compacta y ms lisa que aquella de las MC (Fig.
1a), con nula presencia de clulas de Lb. La fraccin interna de las MC0.1A fue porosa y relajada
al igual que la correspondiente a las MC (Fig. 2b).

(a)

(b)

Figura 2. Micrografas MEB de la superficie (a) y del interior (b) de microcpsulas de casena
recubiertas con alginato de sodio (MC0.1A).
Las MC0.1Q consistieron de agregados de casena de distintos tamaos y estructuras amorfas,
con superficie en general lisa, pero con algunas fisuras superficiales (Fig. 3a). Las diferencias
apreciadas en la morfologa de las MC0.1Q, en comparacin con la morfologa de las MC (Fig. 1)

y MC0.1A (Fig. 2), son congruentes con la suposicin de que la elevada acidez de la solucin de

(b)

(a)

Q da la estructura de las MC a recubrir.

(b)
(a)

Figura 3. Micrografas MEB de la superficie (a) y del interior (b) de microcpsulas de casena
recubiertas con quitosano (MC0.1Q).
Las MC0.5Q (Fig. 4a) presentaron morfologa esfrica al igual que las MC (Fig. 1) y MC 0.5A (Fig.
2), con superficie lisa, compacta y sin presencia externa de Lb. Estos resultados indican que en
contraste con el efecto de la solucin de Q al 0.1 % sobre la estructura de las MC 0.1Q, la
disolucin de Q al 0.5 % s cumpli la funcin de recubrimiento. Lo anterior probablemente
debido a la mayor viscosidad de la solucin de Q al 0.5 %, en comparacin con aquella de la
solucin de Q al 0.1 % y a su mayor valor de pH (1.7). La fraccin interna de las MC0.5Q (Fig. 4b)
present una estructura porosa y relajada, as como la presencia de un nmero considerable de
clulas de Lb.

(a)

(b)

Figura 4. Micrografas MEB de la superficie (a) y del interior (b) de microcpsulas de casena
recubiertas con quitosano (MC0.5Q).

Eficiencia de entrampamiento
Todas las microcpsulas presentaron eficiencias de entrampamiento mayores al 95 %
(Cuadro 1), variando de la siguiente manera: MC0.5Q = MC0.1Q MC < MC0.1A. El valor de
eficiencia de encapsulamiento mayor al 100 % para MC0.1A, pudo deberse por una parte a que
las bacterias se cosecharon en fase logartmica tarda, por lo cual su crecimiento contina; y por
otra parte al efecto prebitico reconocido para A. Resultados similares han sido informados por
Heidebach et al. (2009).
Supervivencia de Lactobacillus casei bajo condiciones gastrointestinales simuladas
La supervivencia de Lb bajo condiciones gstricas simuladas (HCl, pH 2) vari de 6.5 %
(microrganismos libres) a 73.4 % (MC0.5A) (Fig. 5). La supervivencia de clulas de Lb libres fue
menor significativamente a aquella de clulas entrampadas, debido al contacto directo de las
primeras con el HCl. La proteccin que brindaron MC, MC0.1A y MC0.1Q a Lb contra la accin del
HCl fue similar (p > 0.05), pero menor significativamente a aquella proporcionada por las
MC0.5Q. As, la mayor supervivencia de Lb bajo condiciones gstricas se present cuando sus
clulas fueron entrampadas en MC0.5Q, originndose una disminucin de la carga celular de slo
0.135 log. Lo anterior, debido probablemente a que Q es un biopolmero catinico que contiene
numerosos grupos amino en su estructura, los cuales le confieren estabilidad en medios cidos
y permiten que su degradacin se desarrolle hasta el colon, por accin de la microflora presente
en este sitio (Chavarri et al., 2010). Los resultados obtenidos en este trabajo son satisfactorios
al compararlos con aquellos reportados en la literatura. Heidebach et al. (2009) informaron
disminuciones de 0.8 y 2.8 log en la supervivencia de Lactobacillus paracasei spp. paracasei
F19 y Bifidobacterium lactis Bb12, respectivamente, cuando microcpsulas de leche gelada
enzimticamente contenindolos fueron expuestas a condiciones gstricas simuladas. Chavarri
et al. (2010) informaron disminuciones de 0.8 y 0.23 log para Lactobacillus gasseri y
Bifidobacterium bifidum en microcpsulas de alginato-quitosano,
Las clulas libres de Lb fueron las que presentaron el menor porcentaje de supervivencia bajo
la accin secuencial del HCl y sales biliares, alcanzando apenas un valor de 0.12 % (Fig. 2).
Las clulas de Lb entrampadas en MC y MC0.1A presentaron una supervivencia
estadsticamente igual (p > 0.05), por lo cual se puede concluir que el recubrimiento con A no
confiri mayor proteccin a Lb ante condiciones gastrointestinales simuladas, en comparacin
con la proporcionada por MC sin recubrir. Por su parte la proteccin proporcionada a Lb por
parte de las MC0.1Q fue menor que aquella brindada por el resto de las microcpsulas,
posiblemente debido a las deficiencias en su estructura ya sealadas. En contraste, las MC0.5Q

confirieron la mayor proteccin a Lb ante condiciones gastrointestinales simuladas, de manera

similar a lo observado bajo condiciones gstricas simuladas, con una supervivencia de 65.7 %
(1.72 1012 ufc g-1), lo que equivale a una disminucin de apenas 0.18 log. Pimentel et al.
(2009) informaron una supervivencia de 89 % en Lactobacillus rhamnosus entrampado en
emulsiones dobles, despus de ser sometidas a condiciones gastrointestinales simuladas (pH
2.3 y sales biliares 0.3 % durante 2 y 24 h, respectivamente).

Figura 5. Supervivencia de Lactobacillus casei libre (CL) y entrampado, despus de su

exposicin secuencial a condiciones gastrointestinales simuladas (HCl y extracto de bilis
porcino SBP). MC: microcpsulas sin recubrimiento; MC0.1A: microcpsulas con recubrimiento
de 0.1 % de alginato; MC0.1Q: microcpsulas con recubrimiento de 0.1 % de quitosano; MC0.5Q:
microcpsulas con recubrimiento de 0.5 % de quitosano.
Conclusiones
El uso de soluciones de quitosano al 0.5 % p/v como recubrimiento de microcpsulas
formadas a base de casena gelada, permitieron la obtencin de microcpsulas esfricas con
104.8 m de dimetro, 95.6 % de rendimiento y 96.1 % de eficiencia de entrampamiento, las
cuales adems presentaron una proteccin mejorada para Lactobacillus casei contra
condiciones gastrointestinales simuladas (73.4 % para pH de 2.0 y 65.7 % para la accin de
sales biliares), en comparacin con la proporcionada por las microcpsulas de casena sin
recubrir. La microestructura interna de todas las microcpsulas fue semejante a la de la cuajada
de un queso fresco, pudiendo observarse la presencia de clulas de Lactobacillus casei
entrampadas.

Referencias Bibliogrficas
Agrawal, R. (2005). Probiotics: An emerging food supplement with health benefits. Food
Biotechnology, 19, 227-246.
Anal, A., Singh, H. (2007). Recent advances in microencapsulation of probiotics for industrial
applications and targeted delivery. Trends in Food Science & Technology, 18(5), 240251.
AOAC. (1995). Official methods of analysis, (16th ed.). Arlington, VA: Association of Official
Analytical Chemists.
Braccini, I., Prez, S. (2001). Molecular basis of Ca2+-induced gelation in alginates and pectins:
The egg-box model revisited. Biomacromolecules, 2(4),1089-1096.
Champagne, C. P., Fustier, P. (2007). Microencapsulation for the improved delivery of bioactive
compounds into foods. Current Opinion in Biotechnology, 18(2), 184-190.
Chandramouli, V., Kailasapathy, K., Peiris, P. y Jones, M. (2004). An improved method of
microencapsulation and its evaluation to protect Lactobacillus spp. in simulated gastric
conditions. Journal of Microbilogical Methods, 56(1), 27-35.
Chvarri, M., Maran, I., Ares, R., Ibez, F. C., Marzo, F., Villarn, M. C. (2010).
Microencapsulation of a probiotic and prebiotic in alginate-chitosan capsules improves
survival in simulated gastro-intestinal conditions. International Journal of Food
Microbiology, 142, 185189.
Crittenden, R., Weerakkody, R., Sanguansri, L., Augustin, M. (2006). Synbiotic microcapsules
that enhance microbial viability during nonrefrigerated storage and gastrointestinal
transit. Applied and Environmental Microbiology, 72, 22802282.
Desmond, C., Ross, R. P., O'Callaghan, E., Fitzgerald, G., Stanton, C. (2002) Improved survival
of Lactobacillus paracasei NFBC 338 in spray dried powders containing gum acacia.
Journal of Applied Microbiology, 93, 1003 1011.
Doleyres, Y., Lacroix, C. (2005). Technologies with free and immobilized cells for probiotic
bifidobacteria production and protection. International Dairy Journal, 15, 973988.
Divya, J. B., Varsha, K. K., Nampoothiri, K. M., Ismail, B., Pandey, A. (2012). Probiotic
fermented foods for health benefits. Engineering in Life Sciences, 12, (4), 377390.
Fox, P. F., Guinee, T. P., Cogan, T. M., McSweeney, P. L. H. (2000). Fundamentals of Cheese
Science. Gaithersburg, MD: Aspen Publishers.
Fritzen-Freire, C. B., Prudncio, E. S., Pinto, S. S., Muoz, I. B., Amboni, R. D.M.C. (2013).
Effect of microencapsulation on survival of Bifidobacterium BB-12 exposed to simulated

gastrointestinal conditions and heat treatments. LWT - Food Science and Technology,
50, 39-44.
Hansen, L. T., Ian-Wotjas, P. M., Jin, Y. L., Paulson, A. T. (2002). Survival of Ca-alginate
microencapsulated Bifidobacterium spp. In milk and simulated gastrointestinal conditions.
Food Microbiology, 19(1), 35-45.
Heidebach, T., Frst, P., Kulozik, U. (2009). Microencapsulation of probiotic cells by means of
rennet-gelation of milk proteins. Food Hydrocolloids, 23, 16701677.
Hughes, D. B., Hoover, D. G. (1995). Viability and enzymatic activity of bifidobacteria in milk.
Journal of Dairy Science, 78(2), 268-276.
Kailasapathy, K., Masondole, L. (2005). Survival of free and microencapsulated Lactobacillus
acidophilus and Bifidobacterium lactis and their effect on texture of feta cheese.
Australian Journal of Dairy Technology, 60(3), 252-258.
Krasaekoopt, W., Bhandari, B., Deeth, H. (2003). Evaluation of encapsulation techniques of
probiotics for yoghurt. International Dairy Journal, 13(1), 313.
Lobato-Calleros, C., Ramirez-Santiago, C., Osorio-Santiago, V. J., Vernon-Carter, E. J. (2002).
Microstructure and texture of Manchego cheese-light products made with canola oil,
lipophilic, and hydrophilic emulsiers. Journal of Texture Studies, 33, 165182.
Lobato-Calleros, C., Sosa-Prez, A., Rodrguez-Tafoya, J., Sandoval-Castilla, O., Prez-Alonso,
C., Vernon-Carter, E. J. (2008). Structural and textural characteristics of reduced-fat
cheese-like products made from W 1/O/W 2 emulsions and skim milk. LWT - Food Science
and Technology, 41, 18471856.
Madureira, A. R., Pereira, C. I., Truszkowska, K., Gomes, A. M., Pintado, M. E., Malcata, F. X.
(2005). Survival of probiotic bacteria in a whey cheese vector submitted to environmental
conditions prevailing in the gastrointestinal tract. International Dairy Journal, 15, 921
927.
McFarland, L. V. (2009). Evidence-based review of probiotics for antibiotic associated diarrhea
and Clostridium difficile infections. Anaerobe, 15, 274280.
Muthukumarasamy, P., Allan, P. W., Holley, A. R. (2006). Stability of Lactobacillus reuteri in
different types of microcapsules. Journal of Food Science, 71(1), 2024.
Pimentel-Gonzlez, D. J., Campos-Montiel, R. G., Lobato-Calleros, C., Pedroza-Islas, R.,
Vernon-Carter, E.J. (2009) Encapsulation of Lactobacillus rhamnosus in double
emulsions formulated with sweet whey as emulsifier and survival in simulated
gastrointestinal conditions. Food Research International, 42, 292297.

Rasband, W.S. (2007). ImageJ, Image Processing and Analysis in Java U. S. National Institutes
of Health, Bethesda, Maryland, EUA, http://rsb.info.nih.gov/ij/, 1997-2007. Consultada
26-06-2001.
Reid, A. A., Vuillemard, J. C., Britten, M., Arcand, Y., Farnworth, E., Champagne, C. P. (2005).
Microentrapment of probiotic bacteria in a Ca2+-induced whey protein gel and effects on
their viability in a dynamic gastro-intestinal model. Journal of Microencapsulation, 22(6),
603-619.
Ross, R. P., Desmond, C., Fitzgerald, G. F., Stanton, C., (2005). Overcoming the technological
hurdles in the development of probiotic foods. Journal of Applied Microbiology, 98, 1410
1417.
Saad, N.., Delattre, C., Urdaci, M., Schmitter, J.M., Bressollier, P. (2013). An overview of the last
advances in probiotic and prebiotic field. LWT - Food Science and Technology, 50, 1-16.
Salminen, M. K., Jrvinen, A., Saxelin, M., Tynkkynen, S., Rautelin, H., Valtonen, V. (2001).
Increasing consumption of Lactobacillus GG as a probiotic and the incidence of
lactobacilli bacteraemia in Finland. Clinical Microbiology and Infection, 7 (Suppl 1), 802.
Sandoval-Castilla, O., Lobato-Calleros, C., Garca-Galindo, H. S., lvarez-Ramrez, J., VernonCarter, E. J. (2010). Textural properties of alginate-pectin beads and survivability of
entrapped Lb. casei in simulated gastrointestinal conditions and in yoghurt. Food
Research International, 43, 111-117.
Sheu, T. Y., Marshall, R. T. (1993). Microencapsulation of Lactobacilli in calcium alginate gels.
Journal of Food Science, 54, 557-561.

CAMBIOS FISICOQUIMICOS EN LA VISCOSIDAD Y DENSIDAD DE LAS MEZCLAS

DE DIESEL Y BIODIESEL OBTENIDO DEL ACEITE DE SEMILLAS DE Jatropha
curcas COLECTADAS EN EL TOTONACAPAN, PUEBLA
Benito Reyes Trejo;1 Diana Guerra Ramrez;1 Holber Zuleta Prada,1 Laura Pamela Ruiz
Ponce, Velzquez Cortes Daniel Eduardo, Jess A. Cuevas Snchez;2 Lino J Reyes3
1

Laboratorio de Productos Naturales, rea de Qumica, Departamento de Preparatoria

Agrcola, 2Banco de Germoplasma, Departamento de Fitotecnia, Universidad Autnoma

Chapingo, Apartado 74, Oficina de correos Chapingo, Texcoco, Mxico, 56230,
Mxico,3Departamento de Qumica Orgnica, Facultad de Qumica UNAM, Delegacin
Coyoacn D.F.
Resumen
La calidad del aceite y biodiesel obtenido se determin segn las propiedades fsicas y
qumicas de cada uno de ellos y su comparacin con estndares y parmetros
establecidos, para este estudio las propiedades identificadas ms importantes fueron:
ndice de acidez, ndice de saponificacin, ndice de yodo, viscosidad dinmica,
viscosidad cinemtica, densidad, entalpia de combustin y perfil de esteres de cidos
grasos. Se realizaron mezclas de diesel petroqumico y biodiesel de Jatropha curcas L. a
diferentes concentraciones (B20 - B100) que permitieron estudiar de manera precisa las
propiedades fisicoqumicas ligadas al fluido de estos materiales tales como las
viscosidades dinmica y cinemtica y la densidad en intervalos de temperatura de 10 a 90
C. Para mencionar algunos resultados el biodiesel de pin es ligeramente ms viscoso
(4.99 mm2/s) que el diesel (3.97 mm2/s) a 20 C. Como se esperaba, una tendencia
general que tanto los valores de viscosidad como los de densidad de estos fluidos,
disminuyen al aumentar la temperatura, por ejemplo hasta los 80 C la densidad del
biodiesel es 0.8657 g/mL, en tanto que la del diesel es 0.7853 g/mL cercano al valor
descrito. El desarrollo de este trabajo de investigacin permite conocer el amplio
panorama de especies nativas en Mxico que pueden ser de uso para la produccin de
biocombustibles, como es la Jatropha curcas L.
Palabras clave: Jatropha curcas, pin, aixhtle, biodiesel, viscosidad, densidad, mezclas

Introduccin
Dentro de los constituyentes de las plantas, existe un grupo especial de molculas
conocidas como aceites. Estos aceites son del tipo de los triglicridos, o sea, del glicerol
esterificado con cidos grasos. Estn contenidos principalmente en las semillas de
oleaginosas como por ejemplo, maz, trigo, crtamo y de soya entre otras. Tambin se
han localizado en otras fuentes como el aceite de la palma de coco y de higuerilla, estos
aceites son susceptibles de ser transformados a biocombustibles. El biodiesel es un
biocombustible afn con el medio ambiente, se prepara a partir de aceites que provienen
de grasas vegetales y animales (Bajpai et al, 2006; Toscano et al., 2011). El diesel de
origen petroqumico se mezcla con biocombustible en varias proporciones por ejemplo
95:5 (B95), 90:10 (B10), 70:30 (B70) y 50:50 (B50) entre otras. La razn de utilizar estas
mezclas estriba en que el biodiesel puro, a bajas temperaturas (Desde 3 C o menos)
genera fases slido-blanquecinas por lo que taponaran los ductos de fluido combustible
que viaja hacia el motor de combustin (Tat y Gerpen, 2000). Actualmente se llevan a
cabo estudios sobre la sntesis y caracterizacin de biodiesel a partir de aceites no
comestibles como el de semillas de Jatropha curcas, Pongania glabra (Karanja), Madhuca
indica (Mahua) y Salvadora oleoides (Pilu) en la India (Kaul et al, 2007) y estn siendo
exploradas fuertemente (Shuit et al., 2010). El objetivo de esta investigacion es obtener el
aceite de semillas de pin de cerro (Jatropha curcas) estudiar sus propiedades
fisicoqumicas y su transformacin a biodiesel. Tanto el aceite como el biodiesel sern
caracterizados por su densidad, viscosidad, ndices de acidez.
Material y mtodos
Material vegetal

Las semillas de Jatropha curcas L. (5000 g) fueron colectadas en el Totonacapan, Sierra

Norte de Puebla en el periodo de cosecha julio-noviembre del 2012.

Extraccin del aceite de las semillas

Mtodo Soxhlet
Extraccin de aceite de Jatropha curcas L.por equipo Soxhlet. Para la extraccin del
aceite de la almendra se tomaron 3 muestras de 35 g cada una, pesndolas en una
balanza analtica y molindolas en una licuadora. Una vez molidas las muestras, se

introdujeron dentro de unos cartuchos de papel filtro y se colocaron en la cmara de

Soxhlet, montando previamente el equipo. La extraccin se realiz durante 16 horas
utilizndose como disolvente 200 mL de hexano. El extracto hexnico se sec con sulfato
de sodio anhidro y se filtr. La evaporacin del disolvente se efectu utilizando un
evaporador rotatorio. El volumen del aceite obtenido se midi en una probeta, obteniendo,
fue de 57 mL por las tres muestras de almendra de Jatropha curcas L.
Mtodo de Extraccin por Maceracin
Para la extraccin del aceite de la almendra se utiliz 1000 g de muestra molida, la cual
se coloc en un matraz Erlenmeyer con capacidad de 2 L, adicionando posteriormente 1 L
de hexano, agitando ocasionalmente y dejando reposar por 3 das. Pasado el tiempo de
reposo, se decant el extracto hexnico del bagazo y se filtr para evaporar el disolvente
en el evaporador rotatorio. Se efectuaron tres extracciones ms, utilizndose el mismo
disolvente recuperado del evaporador rotatorio. Se junt las fracciones de aceite
correspondiente a las tres extracciones y se midi el volumen en una probeta.
Determinacin de ndice de acidez
A 1 g de muestra de aceite se le adiciono 2 mL de etanol y 0.1 mL de fenolftalena se
mantuvo en agitacin vigorosa a 50C y se titul con una solucin valorada de KOH 0.1N
hasta que la muestra permanezca de color rosa durante 5 minutos. Se determin la
cantidad de mg de KOH que neutraliza al gramo de aceite y se estim el clculo para
obtener el valor de ndice de acidez usndose la siguiente ecuacin:

Donde el ndice de acide se expresa en mg KOH/g de muestra.

Esta determinacin se llev a cabo por triplicado para las muestras de aceite por el
mtodo de maceracin y Soxhlet.
Reaccin de transesterificacin
La reaccin de transesterificacin es una reaccin orgnica de un ster y un alcohol para
producir otro ster por medio del intercambio de grupo alcoxi. De esta forma, si un ster
interacciona con un alcohol para sustituir su grupo alquilo por el del alcohol, se denomina

alcohlisis, si el ster reacciona con un cido carboxlico para sustituir el grupo acilo por el
cido y el alquilo de dos esteres diferentes la reaccin se conoce como interesterificacin
o transesterificacin (Torossi, 2006). La reaccin en reversible y requiere 1 mol de
triglicrido y 3 moles de alcohol, sin embargo, se utiliza un exceso de alcohol para
aumentar la produccin del ster alqulico y permitir separar la glicerina de la fase de
biodiesel (Ramos et al, 2009).
Obtencin del biodiesel a partir del aceite de Jatropha curcas L.
Para la obtencin del biodiesel, la reaccin de transesterificacin se realiz con el aceite
extrado de la almendra de Jatropha curcas L. por los mtodos de Soxhlet y maceracin.
En un matraz bola de fondo plano se prepar una disolucin de KOH (1 g) en metanol
anhidro (100 mL), se calent en agitacin vigorosa hasta la disolucin de la potasa, paso
seguido se adicionaron 200 mL de aceite, se mantuvo bajo reflujo con agitacin constante
durante 60 minutos, el desarrollo de la reaccin se sigui por cromatografa de capa
delgada usando una mezcla de elusin Hexano:AcOEt:agua, en proporcin 9:1:0.1 (v/v/v)
es enfriada y transferida a un embudo de separacin y se dej reposar por 10 horas. La
parte superior del biodiesel se lav con dos porciones de 25 mL de disolucin de cido
ctrico al 0.1% despus con agua caliente a 60C(2x50 mL)

Mezclas Diesel:Biodiesel
La preparacin de las mezclas diesel: biodiesel, se llev a cabo con biodiesel obtenido
con aceite por maceracin (57 ml) y con diesel petroqumico obtenido comercialmente.
Las mezclas se prepararon en viales pequeos obteniendo una mezcla de 5 mL para
cada una y se etiquetaron por tipo de mezcla para su identificacin y posterior anlisis,
como se muestra en la tabla 1.
Tabla 1. Cantidades mezcladas de disel y biodiesel en el estudio de viscosidad y
densidad con respecto a la temperatura.
Mezcla

Proporciones Diesel: Biodiesel

Diesel (mL)

Biodiesel (mL)

B10 (m.90:10)

90:10

4.5

0.5

B20 (m.80:200)

80:20

B30 (m.70:30)

70:30

3.5

1.5

B40 (m.60:40)

60:40

B50 (m.50:50)

50:50

2.5

2.5

Determinacin de viscosidad cinemtica

La medicin se realiz con un viscosmetro de rotacin SVM Stabinger 3000 de la
empresa Anton Paar, bajo los estndares de calidad ASTM D445 e ISO 3104, la cual est
basada en una medicin de torque y de revolucin a travs de un imn en rotacin. Se
utiliz una muestra no mayor a 3 mL, que fue inyectada y transportada a una celda de
medicin, la cual est equipada con un tubo en rotacin con rgimen constante. En la
muestra, quedo flotando el rotor de medicin (con el imn) integrado), que por su baja
densidad se centr por la fuerza centrfuga. El rotor al flotar libremente con la ausencia de
friccin, permiti que la cantidad de muestra inyectada tuviera un cambio rpido de
temperatura (Peltier). Al poco tiempo de iniciar la medicin, el rotor alcanz un rgimen
estable, que es determinado por el equilibrio entre el efecto de frenado de la corriente
inducida y las fuerzas propulsoras de cizallamiento de la prueba. En el viscosmetro
automticamente, con el rgimen del rotor se calcul la viscosidad dinmica y luego al
hacerse una relacin con la medicin de la densidad, se estim el valor de la viscosidad
cinemtica.
Resultados y discusin
La densidad y la viscosidad son dos importantes propiedades que son tiles para
seleccionar combustibles, ya que valores altos de viscosidad demandan un mayor
esfuerzo para mover al combustible al interior de la cmara de combustin, adems de
provocar una muy baja atomizacin en dicha cmara, as mismo un incremento en los
valores de densidad implican la inyeccin de una mayor masa de combustible y por lo
tanto la eficiencia del combustible es menor (Moradi et al., 2013). El estudio los efectos de
la temperatura del aceite de pin, su biodiesel y diesel en la variacin de la densidad y
viscosidad fueron investigados, mismos que se muestran en las figuras 1, 2 y 3. Siendo el
biodiesel de pin ligeramente ms viscoso (4.99 mm2/s) que el diesel (3.97 mm2/s) a 20
C. Como se esperaba, una tendencia general que tanto los valores de viscosidad como
los de densidad de estos fluidos, disminuyen al aumentar la temperatura, por ejemplo
hasta los 80 C la densidad del biodiesel es 0.8657 g/mL, en tanto que la del diesel es
0.7853 g/mL cercano al valor descrito recientemente. Como biocombustibles, no se
estara en la posibilidad de sustituir todo el diesel de nuestro planeta por biodiesel, motivo
por el cual se estn empleando mezclas de biodiesel y diesel para mover autotransportes
y entonces ahora se estudian algunas propiedades fisicoqumicas para predecir el

comportamiento de estas mezclas en los motores diesel. En este estudio se observa que
al aumentar la cantidad de biodiesel en las mezclas (Diesel-Biodiesel) los valores de
viscosidad tambin van incrementndose sin sobrepasar el valor del diesel, tambin se
observa que al aumentar la temperatura de las mezclas, estos valores (densidad y
viscosidad) tambin disminuyen (Figuras 1, 2 y 3).

Figura 1. Variacion de la viscosidad dinamica con la temperatura de mezclas de biodiesel

de semillas de pim con diesel

En el estudio de las propiedades fisicoqumicas de mezclas de disel y biodiesel, a 40 C

la viscosidad cinemtica de la mezcla Diesel-Biodiesel (m.90:10) es 2.7617 mm2/s en
tanto que a la misma temperatura la mezcla m.60:40 es 3.1688 mm2/s. Donde estas
mismas mezclas a 80 C sus viscosidades son de 1.4615 y 1.6607 mm2/s,
respectivamente.

Figura 2. Variacion de la viscosidad cinematica con la temperatura de mezclas de

biodiesel de semillas de pin con diesel

Figura 3. Variacion de la densidad con la temperatura de mezclas de biodiesel de

semillas de pin con diesel

Conclusiones
Las pruebas de calidad lograron establecer la caracterizacin evaluar el aceite obtenido,
para comparar con los estndares establecidos, as como con trabajos de investigacin
anteriores. Los resultados obtenidos nos han permito establecer comparaciones con el
diesel petroqumico y cada una de la mezclas diesel: biodiesel que nos indiquen las
caractersticas favorables de cada una de ellas y el ahorro de combustible qumico que
puede llevar el uso en bajas proporciones de biodiesel.
Se determinaron valores de viscosidad y densidad tanto al aceite como al biodiesel y
diesel petroqumico. Los valores de viscosidad y densidad disminuyeron al aumentar la
temperatura tanto en forma individual como en mezclas entre diesel y biodiesel. El diesel
obtenido del pin de cerro constituye una alternativa no viable para ser utilizado en
motores de autotransportes. El desarrollo de este trabajo de investigacin permite conocer
el amplio panorama de especies nativas en Mxico que pueden ser de uso para la
produccin de biocombustibles, como es la Jatropha curcas L. Por ello es necesario el
impulso en trabajos de investigacin que permitan conocer el potencial gentico como
especie para la produccin de aceites y su transformacin a biocombustibles.

Referencias
Bajpai, Divya; Tyagi, V. K. (2006), Biodiesel: source, production, composition, properties
and its benefits . J. Oleo Science, 55, 487-502
Kaul, S.; Saxena, R. C.; Kumar, A.; Negi, M. S.; Bhatnagar, A. K.; Goyal, H. B.; Gupta, A.
K. (2007). Corrosion behaviour of biodiesel from seed oils of Indian origin on diesel
engine parts. Fuel Processing Technology 88, 303-307

Moradi, G.R., Karami, B., Mohadesi, M. J. Chem. Eng. Data. 2013, 58: 99105
Shuit, S.H.; Lee, K.T.; Kamaruddin, A.H.; Yusup, S. (2010) Reactive Extraction of Jatropha
curcas L. Seed for Production of Biodiesel: Process Optimization Study. Environ. Sci.
Technol., 44 (11), 43614367
Tat, M.E.; Gerpen, H.V. (2000) The specific Gravity of biodiesel and its blends with diesel
fuel. JAOCS, 77, 115-119.
Toscano, L.; Montero, G.; Margarita Stoytcheva, M.; Campbell, H.; Lambert, A. (2011)
Preliminary assessment of biodiesel generation from meat industry residues in Baja
California, Mxico. Biomass and Bioenergy. 35, 26-31

ALGUNAS PROPIEDADES DEL BIODIESEL OBTENIDO DEL ACEITE DE Jatropha

curcas L. Y DE SUS MEZCLAS CON DIESEL
Diana Guerra Ramrez,1 Benito ReyesTrejo,1 Laura Pamela Ruiz Ponce, Daniel Eduardo
Velzquez Cortes, Jess Axayacatl Cuevas Snchez.3
Resumen
El aceite de Jatropha curcas L., obtenido mediante extraccin exhaustiva con hexano, fue
transformado a biodiesel mediante una reaccin de transesterificacin utilizando metanol
e hidrxido de potasio como catalizador. El anlisis de la composicin qumica de los
steres metlicos presentes en el biodiesel revel que la mezcla contiene los steres
metlicos de los cidos grasos C16:0 (13.15%), C18:0 (6.93%), C18:1 (41.92%), C18:2
(35.96%). Diferentes mezclas en relaciones volumtricas del biodiesel-diesel 10% (B10),
20% (B20), 30% (B30), 40% (B40) y 50% (B50) fueron estudiadas con respecto a su
viscosidad, densidad y calor de combustin. Se encontr que la viscosidad cinemtica de
la mezcla B20 tiene propiedades similares al diesel esta es una de las principales
propiedades fsicas que permiten el buen funcionamiento de las mquinas de combustin
interna principalmente en lugares de clima fro donde B100 tiende a solidificarse.
Palabras clave: Jatropha curcas L., calor de combustion, biodiesel

Introduccin
Jatropha curcas L., pertenece a la familia Euphorbeaceae, es originaria de Mxico y
Centroamrica, crece en la mayora de los pases tropicales y se cultiva en Amrica
Central, Sudamrica, sureste de Asia, India y frica (Schmook y Serralta-Peraza, 1997).
De acuerdo con los lineamientos del programa de produccin sustentable de insumos
para la produccin de bioenergticos y desarrollo cientfico y tecnolgico, Jatropha
curcas L. y otras especies vegetales como la higuerilla (Ricinus cummunis) y la palma de
aceite (Elaeis guineensis)) son considerados fuentes de energa renovable debido a que
el aceite obtenido de estas especies es altamente recomendado para la obtencin de
biodiesel (Faupel y Kurki, 2002). En la actualidad el concepto del biodiesel se restringe a
las mezclas de alquilsteres de cidos grasos obtenidos a partir de lpidos renovables
como aceites y grasas de orgenes vegetal o animal y es ampliamente reconocido como
una alternativa en la industria de los combustibles (Ghobadian et al., 2009). Con respecto
al disel, el biodisel presenta algunas ventajas: es biodegradable, emite 40% menos de

sustancias txicas, lubrica las mquinas de combustion interna y tiene un punto de

ignicin muy alto por lo que su transporte y almacenamiento son ms seguros (Ulusoy et
al., 2004). Por otro lado, el biodiesel tiende a deteriorar los empaque de hule, su uso en
climas fros es desfavorable porque tiende a solificarse y el costo por galn es ms alto
debido a su baja disponilidad (Demirbas, 2010). Considerando que el biodiesel a bajas
temperaturas (menores de 3 C) tiende a solificarse, lo cual ocasiona tamponamiento de
los ductos de los motores (Sarin, et al., 2009) se ha propuesto el uso de mezclas con
diferentes proporciones de biodiesel-diesel por ejemplo una mezcla B10 contiene 10 % de
biodiesel y 90 % de diesel, dichas mezclas favorecen el uso del biodiesel sobre todo en
los lugares de clima fro. Como una contribucin a los datos existentes en la literatura, en
este trabajo se presentan los resultados de la obtencin de biodiesel a partir de las
semillas de J. curcas L. y los datos de densidad, viscosidad y calores de combustin del
biodiesel y las mezclas biodiesel-diesel en relaciones volumtricas de B10, B20, B30, B40
y B50.
Materiales y Mtodos
Material vegetal
Las semillas de J. curcas fueron colectadas en el mes de agosto de 2012 de uno de los
rboles ms antiguos que se conocen en el Municipio de Jonotla, Estado de de Puebla
Contenido de aceite
Las semillas de J. curcas sin cascarilla y previamente molidas (50 g) se colocaron en
cartuchos de papel filtro y fueron sometidas a una extraccin exhaustiva (durante 16
horas) con hexano, utilizando un aparato Soxhlet. Transcurrido dicho tiempo la mezcla
hexano/acetite fue evaporada al vaco. Una vez eliminado el hexano se midi la cantidad
de aceite obtenido de cada una de las muestras y se determin su peso. Los procesos de
extraccin y medicin del aceite contenido en las semillas molidas se hicieron por
triplicado.
ndice de acidez del aceite de J. curcas
La produccin de biodiesel requiere de un aceite rico en triglicridos de cidos grasos
insaturados, con un contenido bajo de cidos grasos libres ( del 2 %). La determinacin
de ndice de acidez se llevo a cabo por triplicado tomando muestras de aproximadamente
1g de aceite y titulando con hidrxido de potasio 0.0097N, utilizando como indicador
fenolftalena. El ndice de acidez se calcula cuantificando los miligramos de hidrxido de
potasio necesarios para neutralizar un gramo de aceite con base en cido oleico.

Preparacin de biodiesel
Las proporciones de cada componente de la mezcla de reaccin fueron: metanol/aceite
0.25 y 0.7% de KOH, con base en la cantidad de aceite a ser transesterificado. La mezcla
se agit y calent bajo reflujo a una temperatura de 60 C durante 60 minutos.
Transcurrido dicho tiempo se transfiri a un embudo de separacin hasta observar la
separacin de dos fases consistentes en biodiesel y glicerina. El biodiesel fue tratado con
cio citrico al 0.1% (dos lavados en proporcin 1:1), despus se lav con agua caliente y
finalmente se sec con sulfato de sodio anhidro.
Composicin qumica del biodiesel
El porcentaje y tipo de esteres metlicos contenidos en el biodiesel se determin por
cromatografa de gases en un equipo de marca Agilet 6890, columna ATSilar 30 m de
largo por 0.25 mm dimetro interno y 0.25 m de espesor de pelcula con detector de
ionizacin de flama (FID). La temperatura inicial del horno fue de 170 C (1 min), rampa
10 C/min, temperatura final 240 C. Temperatura del inyector y detector 260C. Se utiliz
hidrgeno, a una velocida de flujo de 1.8 mL/min, como gas acarreador. Una mezcla de
esteres metlicos de cidos grasos se utiliz como estndar y los tiempos de retencin se
utilizaron para la deteccin los picos de las muestras, Los cidos grasos fueron estimados
como porcentaje del rea total de los picos de steres metlicos.
Medicin de la viscosidad y densidad
Las viscosidades cinemtica, dinmica y la densidad del biodiesel y de cada una de las
mezclas B10, B20, B30, B40 y B50 fueron medidas a presin atmosfrica a 20 y 40 C en
un Viscosimtro-densimtro Anton Parr rotacional Stabinger SVM 3000.
Determinacin de los calores de combustin
La medicin de los calores de combustin del biodiesel y las mezclas B10, B20, B30, B40
y B50 se llevaron a cabo en un calormetro marca Anton Parr modelo 6 400, utilizando
aproximadamente 1 g de muestra.
Resultados y Discusin
Un parmetro importante para evaluar si un aceite vegetal es factible de ser transformado
a biodiesel, es su ndice de acidez, la cuantificacin por triplicado de este parmetro para
el aceite en estudio, dio como resultado un valor de ndice de acidez de 1.7 %, a
diferencia de otro aceite de J. curcas obtenido a partir de las semillas procedentes de
Tanzania cuyo ndice de acidez fue de 8.14 % (Kafuku y Mbarawa 2010). Un aceite con
indice de acidez mayor al 2 % tiene un alto contenido de cidos grasos libres y por lo
tanto una reaccin de transesterificacin catalizada con una base conducir a la

formacin de jabones. Cuando se tienen estos casos es necesario esterificar previamente

a los cidos grasos libres con metanol en medio cido y posteriormente transesterificar los
triglicridos. Este procedimiennto consume tiempo y recursos y por lo tanto encarece el
proceso de produccin del biodiesel, de acuerdo con datos previos, los aceites de
Jatropha obtenidos de semillas del estado de Puebla y con menos de un ao de cosecha
tienen ndices de acidez apropiados para llevar a cabo la reaccin de transestrificacin sin
necesidad de un tratamiento previo..
El perfil de cidos grasos contenidos en una mezcla de steres metlicos influye en las
propiedades fsicas y qumicas, un alto contenido de cidos grasos insaturados podra
propiciar la oxidacin, mientras que los cidos grasos saturados deben estar en
proporciones bajas para evittar la solidificacin del biodiesel, principalmente cuando se
usa en lugares de clima fro.
En el Cuadro I se observa que el biodiesel preparado a partir del aceite de las semillas
de J. curcas provenientes del estado de Jonotla, contiene un 77.8 % de esteres metlicos
de cidos grasos insaturados lo cual concuerda con los datos obtenidos con anterioridad
con respecto a biodiesel obtenido de esta misma especie pero de otros municipios del
Etado de Puebla cuyos porcentajes varian desde 77.14 a 79.83 % (referencia del libro).
Cuadro 1. Esteres metlicos del biodiesel derivado de Jatropha curcas L.
Ester metlico

Procedencia de las semillas

1

Palmitato (C16:0)
Esterarato (C18:0)

13.15 13.07 15.10 13.34 14.83 14.57 15.6

6.93

7.26

7.74

6.96

5.82

7.30

9.70

8
14.2
6.90

Oleato (C16:1)

41.92 38.06 43.10 42.91 38.19 40.42 40.80 43.10

Linoleato (C16:2)

35.96 41.60 34.04 35.62 41.64 37.71 32.10 34.90

Otros

2.04

0.01

0.02

1.17

1.8

0.9

1-Jonotla, 2-Olintla, 3-Tenanpulco, 4-Tuzamapan, 5-Xochitlan, 6-Cuetazalan, 7- India, 8Asia

Por otro lado, el biodiesel obtenido de J. curcas de la India presenta un alto contenido de
steres metlicos de cidos grasos saturados ( 25.3 %) (Mohibbe, et al. 2005) contrastante
con J. curcas de origen asitico cuya composicin es muy semejante a la composicin de
las muestras de originarias de Mxico (Sarin, et al., 2007; Sarin, et al., 2010). En la
bsqueda de la composicin ideal del biodiesel, se recomienda la presencia elevada de

cidos grasos monoinsaturado (como los cidos oleico y palmitoleico), la presencia

reducida de cidos grasos poliinsaturados y un contenido controlado de cidos grasos
saturados. En este sentido, C18: 1 y C16: 1, son los cidos que mejor se ajustan en
trminos de la estabilidad oxidativa y el comportamiento de clima fro, entre muchas otras
propiedades. (Pinzi et al., 2009).
En lo que respecta a los resultados obtenidos al medir algunas propiedades de biodiesel y
mezclas biodiesel-diesel, en el Cuadro 2 se muestran los datos de las viscosidades
cinemtica, dinmica y de la densidad, as como los calores de combustion del biodisel y
de las mezclas B50, B40, B30, B20 y B10. La viscosidad cinemtica es la resistencia al
flujo de un fluido por la gravedad. La viscosidad es la propiedad ms importante del
biodiesel ya que afecta la operacin del equipo de inyeccin del combustible,
particularmente a bajas temperaturas, cuando se incrementa la viscosidad la fluidez del
combustible se ve afectada, lo que tiene como consecuencia una atomizacin deficiencte
y por lo tanto a una operacin menos exacta de los inyectores del combustible (Kafuku y
Mbarawa, 2010). Una temperatura baja incrementa la viscosidad debido a la cristalizacin
de los steres metlicos, especialmente los saturados. En todas las mezclas de biodieseldiesel se observa una disminucin de la viscosidad al aumentar la proporcin de diesel,
sin embargo la mezcla B20 es la que tiene una cambio ms notable, adems cuando este
parmetro se determina a 40C, la viscosidad baja drsticamente de 4.46 mm 2s-1 a 20 C
a 2.86 mm2s-1 a 40 C. Esta disminucin favorece el uso de la mezcla B20 ya que la
viscosidad se acerca a las diesel.
Cuadro 2. Propiedades medidas en biodiesel y diferentes mezcla biodiesel-diesel
Muestra

Propiedades
Viscosidad dinmica Viscosidad cinematica Densidad

Calor de combustin

(mPa.s a 20C/40C) (mm2/s a 20C/40 C)

kJ/kg

(g/cm3 a
20C/40C)

diesel

4.24/2.09/

3.97/2.58

0.827/0.813

45. 200

B100

5.83/2.93

4.99/3.27

0.9127/0.897

38. 275

B50

4.90/3.00

5.71/3.56

0.857/0.843

42. 000

B40

3.89/2.65

4.97/3.16

0.850/0.836

43. 003

B30

3.89/2.45

4.57/2.94

0.849/0.834

43. 563

B20

3.75/2.36

4.46/2.86

0.840/0.826

44. 292

B10

3.59/2.26

4.31/2.76

0.834/0.820

45. 030

Otro parmetro importante es la densidad que disminuye de manera importante desde

B100 a cualquiera de las mezclas biodiesel-diesel, mantenindose casi constante sin
importar la proporcin de biodiesel en la mezcla. Una de las desventajas del biodiesel con
respecto al diesel es su calor de combustin que vara poco en las mezclas hasta B20
misma que se utiliza en el continente Europeo.
Conclusiones
La calidad del aceite de obtenido de las semillas de J. curcas, con respecto a su ndice de
acidez permiti la preparacin del biodiesel sin necesidad de un tratamiento previo.
La composicin de steres metlicos del biodiesel mostr un equilibrio ptimo entre el
contenido de cidos grasos insaturados y saturados lo cual favorece las propiedades de
viscosidad y densidad y bajo nivel oxidativo.
Para el biodiesel y las mezclas biodiesel-diesel se midieron la densidad, dinmica y
cinemtica, as como sus respectivos calores de combustin siendo muy cercanos al valor
del diesel puro cuando se trata de las mezclas B10 y B20.
Citas bibliogrficas
Demirbas, A. (2010) Biodiesel impacts on compression ignition engine (CIE): Analysis of
air pollution issues relating to exhaust emissions. Energy Sources, Part A:
Recovery, Utilization, and Environmental Effects 27, 549558.
Faupel, K. and Kurki, A.
Transfer

(2002) Biodiesel; a brief overview. Appropiate Technology

for

Rural

Areas

http://www.angelfire.com/ks3/go_diesel/files042803/biodiesel.pdf

(ATTRA),
consultada en

febrero 22 de 2012
Ghobadian, B. H. ; Rahimi, A.M. ; Nikbakht, G. ;Najafi and Yusaf, T.F. (2009). Diesel
engine performance and exhaust emission analysis using waste cooking biodiesel
fuel with an artificial neural network. Renewable Energy 34, 976982.
Mohibbe, A. M.; Waris, A.; Nahar, N.M. (2005) Prospects and potential of fatty acid methyl
esters of somenon-traditional seed oils for use as biodiesel in India. Biomass and
Bioenergy 29, 293302.
Pinzi, S.; Garcia, I. L.; Lopez-Gimenez, F. J., M. D.; Luque de Castro; Dorado, G. and
Dorado, M. P. (2009). The Ideal Vegetable Oil-based Biodiesel Composition: A
Review of Social, Economical and Technical Implications Energy & Fuels, 23,
2325234.

Sarin, A. ; Arora, R.; Singh, N.P.; Sarin, R.; Sharma, M. ;Malhotra, R. K.; Kundu, K. (2009),
Effect of blends of Palm-Jatropha-Pongamia biodiesels on cloud point and pour point.
Energy 34, 20162021.
Sarin, A.; Arora, R.; Singh, N. P.; Sarin, R; Malhotra K.;Sarin, S. (2010) Blends of
Biodiesels Synthesized from Non-edible and Edible Oils: Effectson the Cold Filter
Plugging Point. Energy Fuels24, 19962001.
Sarin, R.; Sharma, M; Sinharay, S.; Malhotra, R.K. (2007) Palm biodiesel blends: An
optimum mix for Asia. Fuel 86, 13651371.
Schmook, B. y Serralta-Peraza, L. (1997) J. curcas: Distribution and Uses in the Yucatan
Peninsula of Mexico. In G. M. Gbitz, M. Mittelbach, M. Trabi (Eds.). Biofuels and
industrial products from Jatropha curcas. DBV Graz.
Ulusoy, Y.; Tekin, Y.; Cetinkaya, M. and Karaosmanoglu, F. (2004) The engine tests of
biodiesel from used frying oil. Energy Sources, Part A: Recovery, Utilization, and
Environmental Effects 26, 927932

ANALISIS FITOQUMICO BIODIRIGIDO DE LA ACTIVIDAD HIPOGLUCEMIANTE DE

Combretum farinosum EN RATAS

Benito Reyes Trejo; Mario Torres Solano; Erick Alberto Tenorio Jimnez; Diana Guerra
Ramrez; Holber Zuleta Prada; Aldo De la Cruz Bentez; Priscila Guerra Ramrez.
Laboratorio de Productos Naturales, rea de Qumica, Departamento de Preparatoria
Agrcola, Universidad Autnoma Chapingo, benijovi@yahoo.com.mx
Resumen
La diabetes figura como la segunda causa de muerte en Mxico. Suele ser tratada adems
con extractos de plantas. Algunas especies del gnero Combretum son utilizadas en el
tratamiento de la diabetes como Combretum farinosum, por lo que el objetivo de esta
investigacin es evaluar su actividad hipoglucemiante. Los extractos de hexano,
diclorometano (CH2Cl2) y de metanol (MeOH) obtenidos de corteza y hojas de C. farinosum,
fueron suspendidos en tween 80 y solucin isotnica, y administrados por via oral (dosis de
300 mg/kg) a ratas wistar. Se emple glibenclamida como control positivo a la dosis de 10
mg/kg, as mismo se consider un lote de control de vehculos (Tween 80 en solucin
isotnica). Los niveles de glucosa fueron estimados cada 1.5 h durante 9 horas, tomando
muestras de la vena caudal de la rata y cuantificando la glucosa sangunea en mg/dL
utilizando un equipo One Touch Ultra II. El extracto de mayor actividad hipoglucemiante fue
el de CH2Cl2 de corteza. Mismo que fue percolado en una columna empacada con gel de
slice, para dar seis fracciones (F1 a F6), eludidas con hexano y mezclas de Hexano/AcOEt
en orden de polaridad creciente. Dichas fracciones fueron reevaluadas en el modelo de
actividad hipoglucemiante, la fraccin la F4 fue la de mayor actividad hipoglucemiante. Esta
fraccin fue sometida a una serie de recromatografias sucesivas para dar un slido
cristalino, mismo que est en vas de establecimiento de su estructura molecular utilizando
tcnicas de Infrarrojo, espectrometra de masas, y RMN de 1H y 13C.
Palabras clave
Diabetes, cepillo, Combretum farinosum, hipoglucemiante

Introduccin
La diabetes es una enfermedad crnica degenerativa, de mal pronstico en Mxico debido a
factores sociales como heredofamiliares, la diabetes es un problema de salud en Mxico ya
que adems de ser la segunda causa de muerte en Mxico de acuerdo al INEGI, tambin es
la principal causa del retiro prematuro, ceguera, as como fallas renales. Se estima que para
el ao 2025 cerca de 11.7 millones de Mexicanos sufran algn tipo de diabetes (Rull, 2005).
Durante 2009, del total de egresos hospitalarios en Mxico, 2.8% fue por diabetes, del cual
el 44.9% es atendido por el IMSS as como por la Secretaria de Salud (36.2%) y el ISSSTE
(12.3%) (INEGI, 2011). A pesar de que parte del costo para el tratamiento de la diabetes lo
cubren las instituciones de salud, otra parte del tratamiento es solventado por las familias, el
cual en el caso de la diabetes mellitus tipo 1 en nios representa un promedio del 40 al 50%
del ingreso familiar, el cual es destinado a la compra de jeringas de insulina, glucmetros,
tiras reactivas as como en la dieta de los pacientes (Carlos, 2011). En cuanto al sector
salud el Instituto mexicano del seguro social (IMSS) gast en 2010 un total de 452 millones
de dlares, y 3 192 dlares por paciente (Rodriguez-Bolaos, 2010).
En cuanto a la mortalidad debido a la diabetes, de 2005 a 2009 aument de 64.54 a 72.18
por cada 100 mil personas. La entidad federativa que supera en casi 30 puntos la media
nacional es el Distrito Federal, con tasas de 93.81 en 2005 y de 100.78 en 2009, seguida
por Coahuila (86.59 en 2005 y 88.44 en 2009). Por el contrario, los estados que el menor
nmero de defunciones por esta causa son Quintana Roo (con tasas de 30.16 en 2005,
37.14 en 2009); Chiapas (con 37.73 en 2005 y 46.68 en 2009), y Baja California Sur (con
38.86 en 2005 y 50.76 en 2009) (INEGI 2011).

Sntomas
Las personas con diabetes de tipo 2 pueden no presentar sntomas durante meses o aos
hasta que la enfermedad es diagnosticada. Los primeros sntomas son causados por los
elevados niveles de azcar en la sangre, cuando estos niveles aumentan demasiado, el
azcar aparece en la orina, para expulsar las elevadas cantidades de este, los riones
expulsan una cantidad de agua adicional, por lo que los pacientes producen grandes
volmenes de orina (poliuria). La prdida de agua provoca polidipsia (sed anormal) as como
tambin debido a que el azcar no se utiliza como fuente de energa se presenta un hambre
excesiva (polifagia)

que conlleva a

una prdida de peso. Otros sntomas son visin

borrosa, vrtigos, escasa resistencia al esfuerzo y sensacin de mareo (Beers, 2004).

Tratamiento
El objetivo del tratamiento es mantener los niveles de azcar en la sangre dentro de los
niveles normales, as como prevenir o controlar los sntomas y reducir el riesgo de

desarrollar complicaciones asociadas como hipertensin o hipercolesterolemia. Se

recomienda la modificacin de las costumbres diarias, el rgimen, la actividad fsica y en
caso de que estos no funcionen se realiza un tratamiento farmacolgico utilizando
hipoglucemiantes orales (Beers, 2004).
Costo del tratamiento farmacolgico de la diabetes mellitus tipo 2 en Mxico.
Como se mencion antes la diabetes mellitus es un grave problema de salud pblica y de
alto costo, la DM cuando est mal controlada puede representar una pesada carga
econmica tanto para el paciente como para la sociedad. Lo cual se ve reflejado en cifras
del IMSS ya que en el periodo de 1991 a 1996 el gasto promedio anual para la atencin de
pacientes diabticos fue de 1650 millones de pesos.
De acuerdo a un estudio publicado en 2007 (Mariana, 2007), el mercado de los agentes
hipoglucemiantes tuvo una tendencia de ascenso con un incremento de 141.13% de 1999 a
2003. Siendo las combinaciones Sulfonilureas/Biguanidas los agentes hipoglucemiantes
ms vendidos en el mercado representando un 56.03% de las ventas en 2003, de esta
combinacin la ms consumida fue la de glibenclamida/metformina con un 69.1% de las
ventas de ambos grupos. El costo del tratamiento por 30 das oscil entre los 54 y 2256
pesos lo cual, teniendo en cuenta que el salario mnimo fue de 46 pesos, y que el 40% de
los hogares mexicanos recibe un ingreso menor a dos salarios mnimos mensuales adems
de que el banco mundial estima un total de 58 millones de pobres hace evidente que un
amplio nmero de pacientes no tiene acceso a los medicamentos (Mariana, 2007).
Plantas medicinales
Se define como cualquier vegetal que contenga, en cualquiera de sus rganos, alguna
sustancia con actividad farmacolgica que se pueda usar con fines teraputicos o que se
pueda emplear como prototipo para obtener nuevos frmacos por sntesis o hemisntesis.
(Kuklinski, 2000). Las plantas medicinales siempre han sido un elemento importante en las
comunidades rurales o indgenas como es el caso de Mxico, en el cual existe una gran
tradicin herbolaria, debido en muchos de los casos a su importancia cultural, por lo que se
puede decir que estas no fueron elegidas al azar (Heinrich, 1998). Debido a esta importancia
muchas de ellas son usadas cotidianamente como remedios caseros y tienen una gran
aceptacin a pesar de que pueden provocar efectos txicos, los cuales suelen ser muy
raros y en muchas de las ocasiones estn relacionados a contaminantes o interacciones
entre frmacos (Rodriguez-Fragoso, 2008).
Mxico es un pas con gran biodiversidad, se estima que hay 23 522 especies de plantas de
las cuales aproximadamente 15 000 son endmicas del pas (Convention on Biological
Diversity, 2012) de las cuales hay una gran cantidad de plantas medicinales.

Algunas plantas medicinales utilizadas en el tratamiento de la diabetes mellitus

La diabetes mellitus es una enfermedad que en algunas comunidades de Mxico suele ser
tratada con extractos de plantas, esto en la etapa inicial de la enfermedad. El nmero de
especies que se utilizan en Mxico para el tratamiento de la diabetes asciende a 306
especies documentadas aunque se estima que se utilizan alrededor de 500 (Andrade-Cetto
y Heinrich, 2005), algunos ejemplos con actividad farmacolgica documentada son:
Agastache mexicana Agave atrovirens, Allium cepa, Aloe barbadensis, Aloe vera, Ananas
comosus, Annona cherimola, Annona glabra, Annona muricata, Arctostaphylos pungens,
Argemone

mexicana,

Argemone

ochroleuca,

Argemone

platyceras,

Aristolochia

asclepiadifolia, Aristolochia malacophylla, Aristolochia sercea, Artemisia absinthium,

Bocconia arbrea, Bursera simaruba, Castela texana, Cecropia peltata, Cnidosculus
chayamansa,. Combretum farinosum, Equisetum giganteum, Equisetum hyemale, Guazuma
ulmifolia, Juliania adstringens, Kalanchoe pinnata, Loeselia mexicana, Mentha piperita,
Opuntia ficus-indica, Piper auritum, Prunus serotina subsp.capuli, Randia echinocarpa,
Rhipsalis baccifera, Tamarindus indica, Tecoma starts

Plantas del gnero Combretum sp.

El gnero Combretum pertenece a la familia de las Combretaceae, este gnero incluye
aproximadamente 370 especies, en frica se encuentra dentro de las especies ms
abundantes, muchas de las especies del gnero Combretum se utilizan con fines
medicinales en el tratamiento de dolor abdominal, dolor de espalda, tos de pecho, diarrea,
dismenorrea, dolor de odo, fiebre, anquilostoma, infertilidad en mujeres, lepra, mordeduras
de serpiente, hinchazn causada por paperas, sfilis, dolor de dientes y debilidad general,
suelen utilizarse las hojas o el tallo, ya que los frutos han reportado toxicidad en humanos.
(McGaw, 2001). Algunas de las especies del gnero Combretum son utilizadas en el
tratamiento de la diabetes como Combretum farinosum en Mxico (Andrade-Cetto y
Heinrich, 2005) y Combretum molle en frica (Ojewole, 2009) el cual presenta actividad
hipoglucemiante debido al glucsido del cido mollico. Algunas estructuras de metabolitos
secundarios aislados de C. quadrangulare se muestran en la figura 1 (Banskota et al.,1998).

O
H

OR

OH

MeO

H
OH

HO

H
COOMe
1 R=H
2 R = OH

HO

H
COOMe

OR1

RO

4 R=H
5 R = Ac

H
COOMe

R2O

6 R1 = R2 = H
7 R1 = Ac, R2 = H
8 R1 = R2 = Ac

H
COOH

O
H

HO

H
COOH

HO

H
COOH

10

Figura 1. Estructura de metabolitos secundarios aislados de Combretum quadrangulare

Descripcin general de Combretum farinosum

Se conoce tambin como Carape, escobetillo, guam viejo, peineta, peinetillo. Es una planta
que presenta tallos dbiles, sus hojas son ovaladas o un poco alargadas, de color verde
claro. Sus flores son anaranjadas, rojas o verde-amarillentas y pueden estar agrupadas en
forma alargada como peines muy vistosos. Es originaria de Mxico. Habita en climas clido,
semiclido y templado. Tradicionalmente se utiliza toda la planta, en infusin para el
tratamiento de la tos. En afecciones renales pulmonares y del corazn se utilizan las hojas
las cuales se hierven y se administran va oral. En el tratamiento de la diabetes se chupa la
savia del tallo directamente; la savia tambin se utiliza de forma tpica en infecciones de los
ojos (Biblioteca Digital de la Medicina Tradicional Mexicana, 2012). Por lo que el objetivo de
esta investigacin es evaluar la actividad hipoglucemiante de diferentes extractos de
Combretum farinosum en ratas.

Materiales y mtodos
Material vegetal
Hojas y tallos de Combretum farinosum, fueron recolectados en el estado de Guerrero, en el
Municipio de Tecpan de Galeana en abril de 2011. Una muestra de referencia fue
depositada en el Herbario Hortorio Jorge Hernndez Espinoza del rea de Biologa,
Departamento de Preparatoria Agrcola de la Universidad Autnoma Chapingo.

Preparacin de extractos
A partir de 3.741 kg de tallos, se prepararon los extractos orgnicos empleando hexano (3
veces, 14 L, 3 das), luego con cloruro de metileno (CH2Cl2) (3 veces, 11 L, 3 das), y
finalmente con metanol (MeOH) (3 veces,14 L, 3 das). Los disolventes fueron evaporados al
vaco empleando un rota vapor (Bchi Modelo R111, Waterbath B-461), para dar 19.3 g,
20.4 g, y 341.9 g de extractos de hexano, de CH2Cl2 y de MeOH, respectivamente. Por otro
lado, 2.1 kg de hojas fueron extradas maceracin empleando primero hexano (12 L x 3
veces), luego CH2Cl2 (10 L x 3 veces) y al final MeOH (11 L x 3 veces) al evaporar los
disolventes en un rotavapor al vaco se obtuvieron 56.9 g, 73.9 g y 255.4 de extractos de
hexano, CH2Cl2 y de MeOH, respectivamente.

Animales
Se utilizaron ratas Wistar macho, de 180 a 220 g de peso corporal y alimentadas con dieta
normal (Nutricubos PurinaMR), las ratas fueron mantenidas y cuidadas en condiciones
normales de Bioterio del rea de Biologa del Departamento de Preparatoria Agrcola de la
Universidad Autnoma Chapingo (UACh) a temperatura ambiente (23 a 25 C), humedad y
ciclos de luz y oscuridad ambiental de 12 horas por 12 horas. Previo al estudio las ratas
fueron sometidas a 18 horas en ayuno, con libre acceso al agua. El uso y manejo de estos
animales se llev a cabo conforme a la Norma Oficial Mexicana para su Cuidado y Manejo
(NOM-062-ZOO-1999) y de acuerdo con las reglas internacionales relativas al cuidado y
manejo de animales de laboratorio.

Efecto hipoglucmico de extractos

Se valor el efecto hipoglucmico de los extractos de hexano, CH2Cl2 y MeOH tanto hojas
como tallos, en ratas Wistar normoglicmicas utilizando los extractos obtenidos. Los
extractos fueron suspendidos en Tween 80 (0.05 %, en solucin salina isotnica), Las dosis
a evaluar para cada tipo de extracto fue de 300 mg/kg de peso corporal, ms el control,
consistente en el vehculo de agua destilada y tween 80. Se utilizaron lotes exploratorios de
tres individuos por tratamiento para encontrar el extracto activo, adems se incluy un lote
de control. Las dosis de extractos fueron administradas por va oral (0.5 mL/100 g) a ratas

en ayuno de 18 horas, mediante una sonda flexible. El efecto hipoglucmico se evalu con
el mtodo de la glucosa oxidasa empleando un glucmetro modelo One Touch ultra II
(American Life Scan Co., Milpitas, CA, USA). Las muestras de sangre fueron obtenidas por
medio de un corte de la parte final de la cola (vena caudal) de la rata, sumergiendo
previamente la cola en bao de agua a 391 C durante 30 s. Los niveles de glucosa basal
en los animales fueron medidos antes de administrar los extractos y despus a intervalos de
tiempo de 1.5 h despus de suministrar la dosis correspondiente y registrando las seis
lecturas para cada animal a las 0, 1.5, 3.0, 4.5, 6.0 y 9.0 h. El porcentaje de variacin de la
hipoglucemia para cada grupo fue calculado con respecto a los niveles iniciales de acuerdo
con la ecuacin siguiente:
% de variacin = (Gt Gi) X 100
Gi
Donde Gi corresponde a los niveles de glucosa iniciales, Gt son los valores de glucosa
sangunea en cada intervalo de tiempo.
Efecto hipoglucemiante de la glibenclamida
Para corroborar el efecto hipoglucemiante experimentado por los grupos de animales en los
tratamientos, se incluy un experimento adicional consistente en la observacin y medicin
del efecto de un frmaco conocido, en este caso se empleara glibenclamida como agente
hipoglucemiante de uso comn en humanos. Este frmaco ser suspendido en Tween 80
(0.05 %), Similarmente, las dosis a evaluar fueron: 10, 30, 100 y 300 mg/kg de peso
corporal,

ms el control, consistente en el vehculo de agua destilada y tween 80. Se

utilizaron lotes de 3 individuos por tratamiento. Las dosis de extractos sern administradas
por va oral (0.5 mL/100 g) a ratas en ayuno de 18 horas, mediante una sonda flexible. Los
niveles de glucosa basal en los animales fueron medidos antes de administrar la
glibenclamida y despus a intervalos de tiempo de 1.5 h suministrando las dosis
correspondientes y registrando las seis lecturas para cada animal a las 0, 1.5, 3.0, 4.5, 6.0 y
9.0 h.

Anlisis estadsticos
Los resultados se expresan en un anlisis de varianza (ANOVA) como el promedio la
desviacin estndar, empleando la prueba t de student al 95% de confianza.
Anlisis y discusin de resultados
Se prepararon los extractos de corteza y hojas de Combretum farinosum a partir de 3.741 kg
de tallos y 2.1 kg de hojas.

Efecto hipoglucmico de extractos de C. farinosum

Los resultados de la evaluacin del efecto hiperglucemico de los extractos de tallos y hojas
de C. farinosum se muestran en las figuras 1 y 2, respectivamente. Algunos extractos
mostraron un efecto de aumento de los niveles de glucosa en rata, por ejemplo el extracto
metanlico de tallos entre las 2 y 3 horas (figura 1) y los extractos de hojas de hexano y
CH2Cl2 entre la primera y la segunda hora de observacin, este efecto hiperglicemico inicial
ha sido observado previamente en la evaluacin de algunas plantas con actividad
hipoglucemiante (Akhtar y Iqbal, 1991). Descartando el efecto del extracto de MeOH de
hojas por ser muy errtico, los extractos de hexano y CH 2Cl2

desarrollaron la menor

actividad hipoglucemiente en rata reflejado en un porcentaje de variacin de -30 (figura 2)

con respecto a los extractos de tallos (figura 1) donde el porcentaje de variacin fue de -40 a
las 5 horas despus de la administracin oral de extractos. Tanto el extracto de hexano
como el de CH2Cl2 obtenidos de los tallos de esta planta mostraron la ms alta actividad
hipoglucemiante, se seleccion el extracto de CH2Cl2 de tallos de C. farinosum por tener
disponible una cantidad ligeramente mayor de dicho extracto.

Figura 1. Evaluacin del efecto hipoglucemiante de extractos orgnicos de tallos de C.

farinosum en ratas normoglucmicas

Figura 2. Evaluacin del efecto hipoglucemiante de extractos orgnicos de hojas de

C. farinosum en ratas normoglucmicas

Percolacin del extracto de mayor actividad

El extracto de CH2Cl2 del tallo de C. farinosum redujo los niveles de glucosa a 46 mg/dL a
las 5 horas. Una parte de este extracto (16 g) fue sometido a una percolacin empleando
una columna empacada con gel de slice (0.0630.200 mm, 270 g) utilizando como eluyente
hexano (0.84 L, F1, 0.320 g), hexano/EtOAc (9:1, 0.84 L, F2, 2.03 g), hexano/EtOAc (7:3,
0.84 L, F3, 1.96 g), hexano/EtOAc (1:1, 0.84 L, F4, 2.482 g), acetato de etilo (EtOAc) (0.84
L, F5, 1.717 g) y Metanol (0.84 L, F6, 0.682 g). Las fracciones obtenidas fueron evaluadas
en ratas wistar normoglicmicas, utilizando 6 lotes de tres ratas cada uno, incluyendo el
grupo control de vehculos y glibenclamida. En la figura 3, se muestran los resultados de la
actividad hipoglucemiante de las fracciones obtenidas de la percolacin del extracto de
CH2Cl2 de tallos de esta planta. Como se observa en dicha grafica la fraccin F4 fue la ms
activa, cuyo porcentaje de variacin fue de -35 a las 7 horas despus de la administracin
oral de extractos, la actividad hipoglucemiante de la fraccin F6 tambin mostro un efecto
importante sin embargo su desempenio fue de manera errtica, por lo que se seleccion la
F4 para continuar con el estudio biodirigido. Esta fraccin esta actualmente analizada por
cromatografa en columna de silicagel y los solidos obtenidos que mostraron homogeneidad
en su pureza, estn siendo analizados por RMN, IR y espectrometra de masas.

Figura 3. Evaluacin del efecto hipoglucemiante de las fraccipnes F1 a F6 obtenidos por

percolacin del extracto de tallos de C. farinosum en ratas normoglucmicas

Conclusiones
Se prepararon extractos con disolventes orgnicos tanto de las hojas como de los tallos de
C. farinosum. Dichos extractos fueron evaluados en su actividad hipoglucemiantes utilizando
ratas wistar macho, el extracto de CH2Cl2 de los tallos de esta planta desarrollaron la mayor
actividad hipoglucemiante. La fraccin F4 obtenida de la percolacin en silicagel resulto ser
la ms activa por lo que se analiz por recromatografias susescivas con la finalidad de
obtener compuestos puros que estn siendo deducidos en su estructura molecular
empleando tcnicas de Infrarrojo, E. de masas, y RMN de 1H y

13

C. Falta por evaluar el

efecto antidiabtico de los extractos preparados en ratas diabetizadas con alloxan.

Agradecimientos
Se agradece la asistencia tcnica de la Sra. Obdulia Palma por el manejo de animales de
laboratorio. Tambin se agradece al Centro de Investigacion en Etnobiologa y biodiversidad
(CIETBIO) y a la Direccin General de Investigacin y Posgrado (DGIP) de la Universidad
Autonma Chapingo por el financiamiento de este proyecto.

Referencias bibliogrficas

Akhtar, M. S.; Iqbal, J. (1991). Evaluation of the hypoglycaemic effect of Achyranthes

aspera in normal and alloxan-diabetic rabbits. Journal of Ethnopharmacology. 31, 1,
49-5.
Andrade-Cetto, A.; Heinrich, H. (2005). Mexican plants with hypoglycaemic effect used in the
treatment of diabetes. Journal of Ethnopharmacology 99 (2005) 325348
Banskota A. H.,Tezuka Y., Phung L. K., Tran K. Q., Saiki I., Miwa Y., Taga T., Kadota
S.1998. Cytotoxic cycloartane-type triterpenes from Combretum quadrangulare.
Bioorg. Med. Chem. Lett., 8, 3519-3524
Banskota et al. 1998. Combretum quadrangulare Bioorg. Med. Chem. Lett. 8, 3519-3524.
Beers MH. 2004. Manual Merck de informacin mdica, edad y salud Barcelona: Oceano
Biblioteca Digital de la Medicina Tradicional Mexicana. [Online]. [cited 2012 agosto 7.
Available from: HYPERLINK
http://www.medicinatradicionalmexicana.unam.mx/monografia.php?l=3&t=&id=7293
Carlos RV. 2011. Diabetes mellitus tipo 1 en Mxico. Un gasto catastrofico para las familias.
Acta Peditrica de Mxico. julio-agosto; 32(4).
Convention on Biological Diversity. [Online]. [cited 2012 agosto 28. Available from:
HYPERLINK "http://www.cbd.int/countries/profile.shtml?country=mx"
Heinrich M. 1998. Medicinal plants in mexico: healers consensus and cultural importance.
Social Science & Medicine.; 47, 11.
INEGI, Geografa INdEy.. [Online].; 2011 [cited 2012 agosto 12. Available from:
HYPERLINK"http://www.inegi.org.mx/inegi/contenidos/espanol/prensa/aPropositom.
asp?s=inegi&c=2816&ep=75"http://www.inegi.org.mx/inegi/contenidos/espanol/pren
sa/aPropositom.asp?s=inegi&c=2816&ep=75 .
Kuklinski C. 2000. Farmacognosia. primera ed. Barcelona, Espaa: Ediciones Omega.
Marina AM. 2007. Diabetes mellitus tipo 2, ventas de los hipoglucemiantes orales y costos
de los tratamientos farmacolgicos en Mxico. Revista mexicana de ciencias
farmacuticas. 38, 1, 23-33.
McGaw LJ. 2001. An investigation on the biological activity of Combretum species. Journal of
Ethnopharmacology. 75, 45-50.
Norma Oficial Mexicana NOM-015-SSA2-1994, para la Prevencin, Tratamiento y Control de
la Diabetes.
Ojewole JA. 2009. Hypoglycaemic effect of mollic acid glucoside, a 1-hydroxycycloartenoid
saponin extractive form Combretum molle R. Br. ex G Don (Combretaceae) leaf, in
rodents. Journal of Natural Medicines. 63, 117-123.
Rodriguez-Bolaos R. 2010. costos directos de atencin mdica en pacientes con diabetes
mellitus tipo 2 en Mxico: anlisis de microcosteo. Revista Panamericana de Salud
Pblica. 6, 28.

Rodriguez-Fragoso L. 2008. Risk and benefits of commonly used herbal medicines in

Mxico. Toxicology and Applied Pharmacology. 227, 125-135.
Rull JA. Epidemiology of type 2. 2005. Diabetes in Mexico. Archives of Medical Research.
36: p. 188-196.

AISLAMIENTO Y PURIFICACION DE CICLOPPTIDOS PRESENTES EN SEMILLAS

Jatropha curcas DE LA SIERRA NORTE DE PUEBLA
Benito Reyes Trejo;1 Diana Guerra Ramrez;1 Laura Pamela Ruiz Ponce;2

Holber Zuleta

Prada,1 Jess A. Cuevas Snchez;3 Lino J. Reyes;4

1

Laboratorio de Productos Naturales, rea de Qumica, Departamento de Preparatoria Agrcola,

Deparatmento de Agroecologa,

Banco de Germoplasma, Departamento de Fitotecnia,

Universidad Autnoma Chapingo, Apartado 74, Oficina de correos Chapingo, Texcoco, Mxico,
56230, Mxico,4Departamento de Qumica Orgnica, Facultad de Qumica UNAM, Delegacin
Coyoacn D.F.
Resumen

Se colectaron semillas de J. curcas del poblado de Olintla, Sierra Norte de Puebla, se extrajo el
aceite, se prepararon tres extractos de metanol de esta colecta. Las muestras se sometieron a
un estudio de cromatografia en capa delgada empleando ninhidrina como revelador especifico
el cual indic la presencia de aminocidos y/o pptidos de cadena abierta. Ciclopptidos fueron
detectados utilizando orto-tolidina como revelador especifico, desarrollando manchas de
coloracin azul. Enseguida el extracto de metanol se aplic a una placa de silicagel preparativa,
despus de raspar las bandas donde se localizaron los ciclopptidos, estas fueron extradas
con metanol y con agua, al evaporar los disolventes se obtuvo una sustancia que correspondi
a las caractersticas de un ciclopeptido puro. Es la primera vez que se aslan y purificaban
ciclopptidos en semillas de esta especie..

Palabras clave: Olintla, Sierra Norte de Puebla, pin de cerro, cromatografa, ciclopeptidos

INTRODUCCION

Entre las plantas que aportan semillas con potencial para la produccin de biodiesel, Jatropha
curcas L. es muy importante debido a sus mltiples atributos. El alto contenido y calidad de las
protenas del bagazo de semillas de algunas plantas, podra ser utilizado en la obtencin de
pptidos bioactivos. Los pptidos bioactivos son pequeas secuencias aminoacdcas inactivas
dentro de la protena, pero que pueden ser liberados tras la hidrlisis de estas protenas y

ejercer diversas funciones. Entre los de mayor inters, sobresalen los pptidos con actividad
opioide, opioide antagonista, antitrombtica, inmunomoduladora, transportadora de iones o
hipotensora. Se discute la posible presencia de estos pptidos en otras fuentes proteicas,
principalmente plantas oleaginosas y su posible aprovechamiento (Vioque et al., 2000). Por lo
que, en esta investigacin se estudia el contenido de ciclopptidos bioactivos en semillas de J.
curcas.

ANTECEDENTES
A la temperatura ambiente las semillas Jatropha curcas pueden tener una alta viabilidad. A
pesar de que las semillas son la parte ms interesante de esta planta por su potencial, desde
un punto de vista comercial, la mayora de las variedades son txicas para los humanos y los
animales, por dicha razn la utilizacin nutricional no es posible (Abdu-Aguye et al., 1986;
Mampane et al., 1978; Liberalino et al., 1988; Gandhi et al. 1995; Becker y Makkar, 1998).
Se encuentran descritos varios trabajos donde se utiliza el ltex que producen plantas de la
familia de las euforbiceas como la Jatropha curcas o pin de cerro de la que se han
identificado ciclopptidos como la curcaciclina (Auvin et al., 1997). Mientras que de Jatropha
gossypifolia se aisl ciclogossina B (Auvin-Guette et al 1997) mismos que desarrollaron
propiedades antimalricas e inmunosupresoras entre otras (Tan y Zhou, 2006).
Ahora se contina el estudio de las semillas de J. curcas en la Sierra Norte de Puebla, con la
finalidad de detectar, purificar e identificar ciclopptidos bioactivos.
Materiales y mtodo
Recolecta del material vegetal
Las semillas de Jatropha curcas se colectaron de diferentes regiones del Totonacapan, Sierra
Norte de Puebla, Mxico. Especmenes de referencia se depositaron en el Banco Nacional de
germoplasma (BANGEM) y en el Herbario del Departamento de Bosques de la Universidad
Autnoma Chapingo.

Preparacin de extractos a partir de semillas

Extraccin con disolventes orgnicos de semillas J. curcas, se obtuvieron los extractos
orgnicos. Primero el material vegetal se extrajo con hexano (3 veces, 3 das), se filtr el
disolvente y se evapor en un rotavapor al vaco. Al residuo vegetal resultante despus de la
filtracin ser extrajo va maceracin con metanol (3 veces por 3 das), despus de evaporar los
disolventes, resultaron los extractos de hexano y de metanol.

Preparacin de reactivos (reveladores)

Disolucin de o-tolidina
Se disolvieron 40 mg de o-tolidina en 8 mL de cido actico glacial, y se afor la solucin a 62.5
mL con agua destilada y finalmente se agreg 0.25 g de yoduro de potasio.
Eluyente: Diclorometano/metanol/agua (5:4:1)

Procedimiento:
Se cort una seccin longitudinal de 5 cm procedente de una placa cromatogrfica preparativa
de silicagel (2 mm de espesor, de 20x20 cm), se marcaron a una altura de 1.5 cm y se aplic
tanto al segmento de 5x20 cm como al de 15x20 cm una porcin de 100 mg de extracto de
metanol de las semillas de J. curcas. El segmento de 5x20 cm de la placa despus de eluida,
se dej reposando en una atmsfera de cloro (Cloralex) durante 15 minutos, procurando que la
solucin de cloro no tocara la placa. Transcurrido este tiempo, se dej evaporar el cloro que
est en exceso a temperatura ambiente por unas horas (5 horas aproximadamente). Para
conocer si ya se evapor totalmente el cloro que no reaccion y no tener un falso positivo, en
una esquina de la placa se le aplic la solucin de o-tolidina, la coloracin azul nos indic aun la
presencia de cloro. Despus de confirmar la ausencia de coloracin azul, se procedi a rociar el
segmento angosto de la placa con la solucin de o-tolidina y sin aplicar calor, se observaron
coloraciones azules, lo que indic la presencia de ciclopptidos. Este segmento de placa ya
revelado, fue alineado junto a la placa de medicin 15x20 cm y la porcin de aparicin de
ciclopptido ayud para el marcado con lpiz de dos bandas donde se localizaron ciclopptidos.
Dichas bandas fueron raspadas, se extrajeron primero con metanol y enseguida con agua
destilada, al evaporar los disolventes, se obtuvo un ciclopptido puro.

Resultados y discusin
Despus de extraer el aceite de semillas de Jatropha curcas, result un residuo o bagazo, dicho
residuo (aprox. 10 g) se someti a una extraccin con metanol (8 mL) tres veces por 3 das
cada una. .

Deteccin de aminocidos y pptidos

Los extractos de metanol obtenidos de la muestra de semillas de la Sierra Norte de Puebla, se
analizaron por cromatografa en capa delgada. Para esto, cada muestra fue aplicada en carriles
separados a una cromatoplaca analtica de silicagel, tambin se aplic una muestra de L-valina

como

referente de

comparacin.

La cromatoplaca se eluy con una mezcla de

diclorometano:metanol:agua en una proporcin 5:4:1, despus de evaporar la mayor parte del

eluyente, dicha placa se revel por aspersin de una disolucin de ninhidrina y enseguida se
revel por aplicacin de calor en un plato de calentamiento marca corning a 100 C por 30 s. Se
observaron una serie de seis manchas color rosa intenso, indicando la presencia de seis
aminocidos o de pptidos de cadena abierta, ya que este reactivo detecta los grupos NH2
libres en las molculas.

Deteccin y aislamiento de ciclopptidos

Para la deteccin de ciclopptidos (Tan y Zhou, 2006), los extractos de metanol obtenidos de
las semillas de J. curcas, fueron aplicados a una cromatoplaca analtica de silicagel, tambin se
aplic una muestra de 2,5-piperazindiona, como referente de comparacin. La cromatoplaca se
eluy con una mezcla de diclorometano:metanol:agua en una proporcin 5:4:1, despus de
evaporar la mayor parte del eluyente, dicha placa se mantuvo dentro de una cmara de vidrio
en un ambiente de vapores de cloro durante 15 min., se dej reposar fuera de la cmara por
espacio de 5 horas y posteriormente se revel por aspersin con una disolucin de o-tolidina,
observndose una serie de al menos dos manchas azules semejantes al color desarrollado por
la 2,5-piperazindiona, (Figura 1), indicndose con este ensayo que adems del ltex de las
hojas de J. curcas, tambin las semillas contienen ciclopptidos. La observacin de esta prueba
positiva para ciclopptidos se fundamenta en una reaccin de N-cloracin a los grupos amido
de los ciclopptidos, (Jun y Ninghua, 2000).
Despus de extraer los ciclopptidos de las placas preparativas de silicagel, se observ que
solo uno de los dos ciclopeptidos extraidos con metanol y agua, asignndoles las claves C1M y
C1A se obtuvo como ms abundante, figura 1. Para complementar el estudio esta muestra fue
sometida a un estudio de infrarrojo empleando la tcnica de FT-IR ATR, figura 2. En dicho
espectro, se muestra en 1736 cm-1 una banda caracterstica de grupo carbonilo de grupos
amdicos que forman al ciclopptido, as mismo se observan bandas a 1460 y 2921 cm-1para las
vibraciones de enlaces carbono-carbono y carbono-hidrgeno, respectivamente.

Figura 1. Cromatografia en capa delgada (CCD) de la franja rica en ciclopptidos obtenidos por
CCD preparativa, a) Franja extrada con metanol; b) Franja extrada con agua.

Figura 2. Espectro de Infrarrojo tipo ATR de la franja abundante en ciclopptidos de semillas de

Jatropha curcas.

Conclusiones
Se colectaron semillas de J. curcas del poblado de Olintla, Sierra Norte de Puebla, se extrajo el
aceite, se prepararon extractos de metanol de esta colecta. Las tres muestras indicaron la
presencia de aminocidos y/o pptidos de cadena abierta. Tambin se detectaron ciclopptidos
en estos extractos. Este resultado es de inters, ya que es la primera vez que se detectan
ciclopptidos en semillas de esta especie, falta aislarlos, purificarlos y caracterizarlos a nivel de
estructura molecular, empleando Resonancia Magntica Nuclear (RMN), espectrometra de
masas (EM), espectroscopa infarroja (IR) entre otras tcnicas.
BIBLIOGRAFA

Abdu-Aguye, I. Sannusi, A., Alafiya-Tayo, R. A., Bhusnurmath, S. R. (1986). Acute Toxicity

Studies with Jatropha curcas. Hum. Toxicol. 5, 269-274

Auvin, C.; Baraguey, C.; Blond, A.; Lezenven, F.; Pousset, J.-L.; Bodo, B. (1997) Curcacycline
B, a cyclic nonapeptide from Jatropha curcas enhancing rotamase activity of cyclophilin.
Tetrahedron Lett. 38, 2845

Auvin-Guette, C.; Baraguey, C.; Blond, A.; Pousset, J-L.; Bodo, B. (1997). Cyclogossine B, a
Cyclic Octapeptide from Jatropha gossypifolia. Journal of Natural Products 60, 1155-1157

Becker, K., Makkar, H.P.S. (1998) Toxic effects of phorbol esters in carp (Cyprinus carpio L.)
Vet. Hum. Toxicol. 40, 82-86.

Duke, J. A. (1985). A Review of Jatropha curcas: an Oil Plant of Unfulfilled Promise. Biomass
and Bioenergy 19, 2000.

Gandhi, V.M., Cherian, K.M.; Mulky, M. J. (1995) Toxicological studies on ratanjyot oil. Food.
Chem. Toxicol. 33, 39-42.

Jun, Z.; Ninghua, T. (2000). Application of a new TLC chemical method for detection of
cyclopeptides in plants Chinese Science Bulletin 45, 1825-1831

Liberalino, A. A. Bambirra, E. A., Moraes-Santos, T., Vieira, E.C. (1988) Jatropha curcas L.
seeds: chemical analysis and toxicity.. Arq. Biol. Tecnol.31, 539-550.

Mampane, K.J., Joubert, P.H., Hay. I.t. (1987) Jatropha curcas: Use as a traditional Tswana
medicine and its role as a cause of acute poisoning. Phytother, Res. I, 50-51.

Tan, N-H.; Zhou, J. (2006). Plant Cyclopeptides. Chemical Reviews, 106, 840-895

Vioque, J.; Snchez-Vioque, R.; Clemente A.; Pedroche, J.; Yust, M.M.: Milan, F. (2000).
Pptidos Bioactivos en protenas de reserva. Grasas y aceites. 51, 5, 361-365.

TITULO
PREPARACINDE

N-(2-BROMOBENCIL)-N-(2-(FENILSULFINIL)VINIL)ACETAMIDAS

COMO

PRECURSORES HACIA LA SINTESIS DE 1,2-DIHIDROISOQUINOLINAS.

AUTORES : Holber Zuleta Prada1;Benito Reyes Trejo1.

ADSCRICION Y DIRECCION
Laboratorio de Productos Naturales, AP 74 Oficina de Correos Chapingo, Universidad Autnoma
Chapingo. Km. 38.5 Carretera Mxico-Texcoco. Texcoco, Estado de Mxico, 56230.

RESUMEN
En este trabajo de investigacin se describen los resultados de una serie de reacciones conducentes
a la preparacin de N-(2-bromobencil)-N-(2-(fenilsulfinil)vinil)acetamidaI. Se obtuvieron con xito tres
ejemplos de esta familia de compuestos, los cuales; se presentan como insumo principal para el
desarrollo de una metodologa de sntesis enfocada al acceso a diferentes alcaloides del tipo 1,2dihidroisoisoquinolnicosII. En trminos generales, el proceso de elaboracin de estos compuestos se
llevo a cabo en 5 pasos de sntesis, usando materias primas de fcil disponibilidad, como
tiofenetilamina 1 y orto-bromobenzaldehidos 2. Esquema 1.

R1

NH 2

+
SPh

R2

Br

varios pasos

R1

R2

O
R1

R2

Br
PhS

reacciones de
ciclacin y eliminacin

II

Esquema 1. Preparacin de vinilsulfxidos I. Como precursores de 1,2-dihidroisoquinolinas II.

Las transformaciones orgnicas usadas para la sntesis de los vinilsulfxidos I, son comnmente
conocidas y reportadas en la literatura1. Sin embargo; se hicieron ajustes en las condiciones de
reaccinintentando obtener altos rendimientos de los productos deseados. El logro importante de este
trabajo, fue la obtencin de los vinilsulfxidos Ien buen rendimiento, que serian precursores directos
en la sntesis de las 1,2-dihidroisoquinolinasII. El proceso final de ciclacin y eliminacin que genere
el ncleo estructural isoquinolinico; se encuentra en desarrollo actualmente. Los avances presentados
en este trabajo, son el primer paso hacia la sntesis de los derivados isoquinolinicos de gran inters,
anlogos a medicamentos usados para el tratamiento de diferentes padecimientos en humanos y
animales.

PALABRAS CLAVES
Acetamidas vinlicas, vinilsulfxidos, isoquinolinas.

INTRODUCCIN.
Los alcaloides constituyen una de las clases ms amplias de productos naturales, siendo sintetizados
prcticamente por la mayora de los organismos marinos y terrestres, en cualquier nivel evolutivo 2. La
extraordinaria variedad, complejidad estructural de los alcaloides y las propiedades biolgicas que
exhiben, han intrigado durante mucho tiempo a los qumicos dedicados a los productos naturales
(estudios biosintticos y determinacin estructural), a los anlisis qumicos y a la qumica orgnica,
particularmente a los dedicados a la sntesis orgnica. Por otro lado, los toxiclogos, farmaclogos y
las compaas farmacuticas han usado y sin duda; continuarn utilizando alcaloides como
herramientas biolgicas o como compuestos tiles para el desarrollo de nuevos frmacos.La
importancia de estos compuestos, se evidenciapor la cantidad impresionante de documentos que
describen las estructuras, las actividades biolgicas y farmacolgicas de los alcaloides.
Compilaciones, excelentes libros y un flujo constante de publicaciones son ejemplo de ello. Uno de los
conjuntosde alcaloides interesantes son las isoquinolinas y sus derivados, los cuales; constituyen uno
de los grupos ms numerosos de la inmensa familia de los alcaloides (ms de 15.000) e incluyen los
principios activos de numerosas plantas medicinales. Las caractersticas estructurales derivadas de el
esqueleto comn de isoquinolina (frecuentemente como tetrahidroisoquinolina) y anlogos con
diferentes patrones de sustitucin, conducen a una amplia diversidad estructural, que juegan un papel
muy importante en el campo de la medicina debido a su elevado potencial qumico y
actividades farmacolgicascomo:

antimicrobiana

y antitumoral ,

antiviral

diversas

antiinflamatoria4,

antipasmodica5, antifungica6, antioxidante7 e inhibidor de enzimas8. Los derivados alcaloideos que

poseen actividad antihelmntica han sido usados ampliamente en la ganadera como antiparasitario.
En consecuencia, los procesos orientados hacia la obtencin de compuestos que contienen como
estructura base un anillo isoquinolinico, cetoquinolinico o derivados de tetrahidroisoquinolinas, han
sido objeto de numerosos estudios por investigadores dedicados a la sntesis de alcaloides9. Por lo
tanto la contribucin al desarrollo de nuevas metodologas para la obtencin de las isoquinolinas es
un trabajo importante; cuando los procesos seenmarcan en protocolos sencillos, condiciones
amigables con el medio ambiente y metodologas novedosas.

ANTECEDENTES
Un numero inmenso de mtodos apropiados sntesis de isoquinolinas han sido descritos en la
literatura.

Los procesos involucran reacciones conocidas como: Pictec-Spengler10 y Bischler-

Napieralski11, hasta protocolos elegantes con una gran variedad de metodologas sintticas modernas
2

y robustas que ofrecen selectividad y eficiencia. Estos procedimientos, han sido explotados y estn
disponibles para la obtencin de productos naturales que contienen el ncleo isoquinolinico. Dado que
el ncleo de isoquinolina contiene un anillo aromtico fusionado con un anillo de 6 miembros; las
metodologas de sntesis estn encaminadas a la formacin de este ciclo de 6 miembros. Una de las
metodologas ms conocidas, para obtener este ciclo IV, es a travs de una reaccin de ciclacin por
radicales alquilo o fenilo sobre dobles enlaces de enamidasIII.(Esquema 2).

Esquema 2. Productos de la ciclacin radical de enamidas vinlicas

En este proceso se obtiene en mayor rendimiento el producto de ciclacin reducido IV y solo trazas
del producto oxidado II, el cual contiene una doble ligadura adicional, la cual puede ser usada para
posteriores reacciones. La ciclacin se logra de manera eficiente por el uso de el sistema (iniciadoracarreador de radicales) ACN/Bu3SnH, al usar este sistema las condiciones de reaccin son
exclusivamente reductoras, esto explica porque se obtiene el producto IV como mayoritario. Como se
puede observar, el intermediario clave para la ciclacin es la enamida vinlica III. (Esquema 3).

Esquema 3. Ciclacin sobre enamidas para la formacin de anillo de 6 miembros.

La preparacin de la enamida vinlica III, fue reportada por ishibashi12partiendo de aminas tipo 3 que
se alquilaron para obtener la acetamida 4, que se oxid al sulfxido 5 y se elimin a la enamida III.
Esquema 4.

Esquema 4. Proceso de obtencin de enamidas vinlicas

En este proceso el intermediario clave para la obtencin de la enamida vinlica, es el

vinilsulfxido5.Con estos antecedentes en mente y observando la versatilidad de los sulfxidos, se
plantea explorar la preparacin del vinilsulfxido como intermediario para la sntesis de isoquinolinas
oxidadas tipo II.
En el presente trabajo: se propone preparar un sistema optimo para una ciclacin similar,
condicionando el proceso a la formacin de los compuestos 1,2-dihidroisoquinolinico va la
combinacin del proceso de ciclacin radical y posterior eliminacin tipo Chugaev13 de un
vinilsulfxido,VI de esta manera se generaran derivados de 1,2-dihidroisoquinolinaII, que
eventualmente podra ser utilizada como intermediario sinttico en la construccin de sistemas
anulares de mayor complejidad; como los de algunos alcaloides, por funcionalizacin del doble enlace
obtenido en el proceso de eliminacin, remarcando que el intermediario clave sera en este caso el
vinilsulfxido 5en lugar de las enamidas vinlicas III, como se plante en los ejemplos anteriores.(
Esquema 5).

Esquema 5. Propuesta para la obtencin de 1,2-dihidroisoquinolinas

La propuesta sinttica se enfoca en la hiptesis de que, un radical arilo VIII formado a partir de los
haluros correspondientes (en este caso bromuros VI) se ciclar de manera 6-endo sobre el enlace
doble del vinilsulfxidoVIII, generando as un nuevo radical IX, el cual a su vez sera reducido por
condiciones bastantes reductoras proporcionadas por el hidruro de tributilestano al derivado
isoquinolinico VII, que luego podra eliminarse trmicamente para generar el producto deseado II
(Esquema 6).

Esquema 6. Mecanismo propuesto para la reaccin de ciclacin-eliminacin

En esta propuesta se plantean 2 etapas la primera es obtener los vinilsulfxidos y la segunda es llevar
a cabo las ciclaciones radicalarias para la obtencin del ncleo isoquinolinico. En el momento actual
se ha concluido la primera etapa y se espera iniciar a etapa 2.
4

OBJETIVOS
-Establecer las condiciones de reaccin optimas, para llevar a cabo la sntesis de los derivados de
vinilsulfxidos tipo II.
- Realizar la sntesis y caracterizacin de los derivados de vinilsulfxidoscon diferentes
bromobenzaldehdos.

MATERIALES Y METODOS
Reactivos y disolventes
Todos los reactivos qumicos fueron adquiridos de Sigma-Aldrich y la mayora fueron utilizados sin
purificacin adicional. Los disolventes: acetato de etilo, hexano, diclorometano, metanol, etanol y
acetona, se destilaron por los mtodos comunes reportados14.
Seguimiento y purificacin de productos
El seguimiento de las reacciones se llev a cabo por cromatografa de capa fina, en cromatoplacas de
gel de slice 60 (ALUGRAM SIL G/UV254), las visualizacin se realiz con luz ultravioleta en lmpara
de UV Mineral Light, tambin se uso como revelador el acido fosfomolbtico por calentamiento de las
cromatoplacas. La cromatografa flash por columna para purificacin de los compuestos se realiz
sobre gel de slice 60 (0.040-0.063mm., malla 230-4000 ASTM) como fase estacionaria.

Anlisis fsico y espectroscpico de los productos obtenidos

Los puntos de fusin fueron medidos con un aparato Fischer-Johns y no fueron corregidos.
Los espectros de infrarrojo fueron obtenidos en un espectrofotmetro Nicolet FT-IR Magna 740,
usando la tcnica de disolucin en CHCl3 en celdas de NaCl y sobre pastilla de KBr. Perkin-Elmer 337
y Bruker tensor 37 FT-IR. Magna 750, usando la tcnica de disolucin en CHCl3 en celdas de NaCl.
Los espectros de masas (EM) fueron determinados en un espectrofotmetro Joel JEMAX505HA de
baja resolucin por la tcnica de impacto electrnico, (IE) a 70 eV.
Los espectros Resonancia Magntica Nuclear de proton y carbono (1H-RMN y
determinaron mediante un equipo Bruker AC 300 (300MHz para 1H y 75MHz para

13

C-RMN) se

13

C) usando

cloroformo deuterado (CDCl3) como disolvente, y tetrametilsilano (TMS) como referencia interna.
El desplazamiento qumico () est dado en partes por milln (ppm) y las constantes de acoplamiento
(J) estn dadas en Hertz (Hz).

Procedimiento experimental

La sntesis de los derivados deN-(2-bromobencil)-N-(2-(fenilsulfinil)vinil)acetamida (7a-c) se realiz a

partir de una serie de pasos sintticos los cuales iniciaron con la preparacin de la tiofenetilamina,
que sirvi como precursor para la reaccin de aminacin reductiva del producto entre la
tiofenetilamina 1y

ortobromobenzaldehdos, 2a-c, que generlas aminas secundarias 3a-c. Las

aminas secundarias 3a-c, se acilarn

con cloruro de acetilo en trietilamina, obtenindose las

acetamidas correspondientes 4a-c. La oxidacin al sulfxido de las acetamidas 4a-c, fue realizada
con cido metacloroperbenzoico en diclorometano. El tratamiento de los sulfxidos generados 5a-c,
con anhdrido trifluoroacetico seguido por el calentamiento a reflujo en tolueno origina los vinilsulfuros
6a-cproductos de arreglo de Pummerer15, que finalmente fueron oxidados para obtener los productos
deseados vinilsulfxidos7a-c. Esquema 7.

Esquema 7. Resumen de la metodologa para la obtencin de los vinilsulfxidos 7a-c

A continuacin se describen los protocolos usados para la preparacin de cada uno de los productos
obtenidos en cada paso.

Preparacin de la tiofenetilamina (1)

En un matraz de 50mL se disolvieron (0.20g, 8.6mmol) de sodio en 25mL de etanol.
A esta mezcla se agregaron (1.0g, 9.0mmol) de tiofenol. La mezcla de reaccin se
coloc por 1 hora en agitacin a temperatura ambiente. Seguidamente se
adicionaron (0.79g, 9.0mmol) de 2-oxazolidinona. La mezcla de reaccin se coloc a reflujo por 8
6

horas. Al termino de la reaccin se evaporo al solvente a vaco y se disolvi en agua (25mL) se y se

extrajo con CH2Cl2 (3 x 15mL). La fase orgnica se seco sobre sulfato de sodio anhidro y se elimin el
solvente al vacio. El producto fue purificado por cromatografa flash (AcOEt/MeOH 6:4), obtenindose
en un rendimiento (1.29g, 93%). como un liquido amarillo. Los datos espectroscpicos corresponden
con los reportados en la literatura16.

Preparacin de las aminas secundarias 3a-c

N-(2-bromobencil)-2-(tiofenil)etanamina (3a)
En un matraz redondo de 200mL se colocaron (4.5g, 29.0 mmol) de 2(tiofenil)etanamina (1), mas (5.0g, 27.0 mmol) del 6-bromo-1,3-benzodioxol5-carbaldehido (2a) disueltos en 100mL de metanol anhidro. La mezcla de
reaccin se coloc en agitacin a temperatura ambiente por 8 horas. Seguidamente, se agreg
lentamente (10 min) (1.05g, 27.0mmol) de NaBH4, la mezcla de reaccin se dej en agitacin a
temperatura ambiente por 12 horas. Al trmino de la reaccin se elimino el disolvente al vaco. El
producto fue purificado por cromatografa flash (hexano/ACOEt 7:3), obtenindose como un aceite
amarillo oscuro en un rendimiento de (8.24g, 98% ).
N-[(6-bromo-1,3-benzodioxolano-5-il)metil]-2(tiofenil)etanamina (3b)
En un matraz redondo de 100mL se colocaron (3.0g, 19.6 mmol) de 2(tiofenil)etanamina (1), mas (4.5g, 19.7 mmol) del 6-bromo-1,3benzodioxol-5-carbaldehido (2b) disueltos en 20mL de metanol anhidro. La mezcla de reaccin se
coloc en agitacin a temperatura ambiente por 8 horas. Seguidamente, se agreg lentamente (10
min) (0.7g, 19.7mmol) de NaBH4, la mezcla de reaccin se dej en agitacin a temperatura ambiente
por 12 horas. Al trmino de la reaccin se elimino el solvente al vacio. El producto fue purificado por
cromatografa flash (hexano/ACOEt 7:3), obtenindose como un aceite oscuro en un rendimiento de
(6.75g, 94% ).
N-(2-bromo-4,5-dimetoxibencil)-2-(tiofenil)etilamina (3c)
En un matraz redondo de 100mL se colocaron (0.5g, 3.5 mmol) de 2(tiofenil)etilamina (1), mas (0.8g 3.2 mmol) del 2-bromo-3,4dimetoxibenzaldehido (2c) disueltos en 20mL de metanol anhidro. La
mezcla de reaccin se coloc en agitacin a temperatura ambiente por 8 horas. Seguidamente, se
agrego lentamente (10min) (0.1g, 3.5 mmol) de NaBH4. La mezcla de reaccin se dej en agitacin a
temperatura ambiente por 20 horas. Al trmino de la reaccin se elimino el solvente al vacio. El

producto fue purificado por cromatografa flash (hexano/AcOEt 1:1), obtenindose como un aceite
amarillo claro, en un rendimiento (1.20g, 96%).
Preparacin de las acetamidas 4a-c
N-(2-bromobencil)-N-(2-(tiofenil)etil)acetamida (4a)
En un matraz redondo de 100mL se colocaron (1.0g, 3.1 mmol) de la N-(2bromobencil)-2-(tiofenil)etanamina (3a), mas (0.37g 0,52mL, 3.6mmol) de
trietilamina disueltos en 40mL de CH2Cl2. Seguidamente se agreg gota a gota
(10 min), (0.29g 0.26mL, 3.6 mmol) del cloruro de acetilo. La mezcla de
reaccin se coloc por 1 hora en agitacin a temperatura ambiente. Al trmino de la reaccin, se
elimino el solvente al vaco. El crudo se disolvi en agua (100mL) y se extrajo con CH2Cl2 (3 x 30mL).
La fase orgnica se seco sobre sulfato de sodio anhidro y se elimino el solvente al vaco. El producto
fue purificado por cromatografa flash (hexano/AcOEt 8:2), obtenindose como un aceite traslucido en
un rendimiento (1.12gr 99%) de rendimiento.

N-((6-bromobencil[d][1,3]dioxolano-5-il)metil)-N-(2-(tiofenil)etil)acetamida (4b)
En un matraz redondo de 50mL se colocaron (0.65g, 1.7 mmol) de la N-[(6bromo-1,3-benzodioxolano-5-il)metil]-2-(tiofenil)etanamina (3b), mas (0.21g
0,29mL, 2.1mmol)

de trietilamina disueltos en 20mL de CH2Cl2.

Seguidamente se agreg gota a gota (10 min), (0.16g 0.15mL, 2.1 mmol)
del cloruro de acetilo. La mezcla de reaccin se coloc por 1 hora en agitacin a temperatura
ambiente. Al trmino de la reaccin, se elimino el solvente al vaco. El crudo se disolvi en agua
(100mL) y se extrajo con CH2Cl2 (3 x 30mL). La fase orgnica se seco sobre sulfato de sodio anhidro
y se elimino el solvente al vaco. El producto fue purificado por cromatografa flash (hexano/AcOEt
8:2), obtenindose como un aceite traslucido en un rendimiento (0.72gr 98%) de rendimiento
N-(2-bromo-4,5-dimetoxibencil)-N-(2-(tiofenil)etil)acetamida (4c)
En un matraz redondo de 50mL se colocaron (2.0g, 5.23mmol) de la N(2-bromo-4,5-dimetoxibencil)-2-(tiofenil)etanamina

(3c),

mas

(0.63g

0.87mL, 6.20mmol) de trietilamina disueltos en 30mL de CH2Cl2.

Seguidamente se agreg gota a gota (10 min), (0.49g 0.44mL, 6.20mmol)
del cloruro de acetilo. La mezcla de reaccin se coloc por 1 hora en agitacin a temperatura
ambiente. Al trmino de la reaccin, se elimin el solvente al vacio. El crudo se disolvi en agua
(130mL) y se extrajo con CH2Cl2 (3 x 40mL). La fase orgnica se seco sobre sulfato de sodio anhidro

y se elimino el solvente al vaco. El producto fue purificado por cromatografa flash (hexano/AcOEt
1:1), obtenindose como un aceite traslucido en un rendimiento (2.17gr 95%) de rendimiento.
Preparacin de los sulfxidos (5a-c)
N-(2-bromobencil)-N-(2-(fenilsulfoxido)etil)acetamida (5a)
En un matraz redondo de 100mL se coloc (0.80g, 2.1mmol) de la N-(2bromobencil)-N-(2-(tiofenil)etil)acetamida (4a), se disolvi en 20mL de CH2Cl2.
Seguidamente se agreg lentamente a 0oC durante 10 minutos (0.49g,
2.8mmol) de MCPBA. La mezcla de reaccin se coloc en agitacin a
temperatura ambiente por 3 horas. Al trmino de la reaccin. Se agreg NaHCO 3, (10mL), se disolvi
en agua (30mL) y se extrajo con CH2Cl2 (3 x 10mL). La fase orgnica se seco sobre sulfato de sodio
anhidro y se elimino el solvente al vacio. El producto fue purificado por cromatografa flash
(hexano/AcOEt 1:1), obtenindose como un aceite amarillo en un rendimiento (0.82gr 99%)
N-((6-bromobencil[d][1,3]dioxolano-5-il)metil)-N-(2-(fenilsulfoxido)etil)acetamida (5b)
En un matraz redondo de 100mL se coloc (0.65g, 1.59mmol) de la N-((6bromobenzo[d][1,3]dioxolano-5-il)metil)-N-(2-(tiofenil)etil)acetamida (4b), se
disolvi en 15mL de CH2Cl2. Seguidamente se agreg lentamente a 0oC
durante 10 minutos (0.32g, 1.82mmol) de MCPBA. La mezcla de reaccin
se coloc en agitacin a temperatura ambiente por 3 horas. Al trmino de la reaccin. Se agreg
NaHCO3, (10mL), se disolvi en agua (30mL) y se extrajo con CH2Cl2 (3 x 10mL). La fase orgnica se
seco sobre sulfato de sodio anhidro y se elimino el solvente al vaco. El producto fue purificado por
cromatografa flash (hexano/AcOEt 1:1), obtenindose como un aceite amarillo en un rendimiento
(0.67gr 98%)

N-(2-bromo-4,5-dimetoxibencil)-N-(2-(fenilsulfoxido)etil)acetamida (5c)
En un matraz redondo de 100mL se coloc (1.40g, 3.30mmol) de la N-(2bromo-4,5-dimetoxibencil)-N-(2-(tiofenil)etil)acetamida (4c), se disolvi en
20mL de CH2Cl2. Seguidamente se agreg lentamente a 0oC durante 20
minutos (0,85g, 4.95mmol) de MCPBA. La mezcla de reaccin se coloc
en agitacin a temperatura ambiente por 3 horas. Al trmino de la
reaccin. Se agreg NaHCO3, (15mL), se disolvi en agua (70mL) y se extrajo con CH2Cl2 (3 x 15mL).
La fase orgnica se seco sobre sulfato de sodio anhidro y se elimino el solvente al vacio. El producto
fue purificado por cromatografa flash (hexano/AcOEt 1:1), obtenindose como un aceite amarillo en
un rendimiento (1.44gr 97%)
9

Preparacin de los vinilsulfuros (6a-c)

(E)-N-(2-bromobencil)-N-(2-(tiofenil)vinil)acetamida (6a)
En un matraz redondo de 25mL equipado con un refrigerante se colocaron
0.5g(1.3mmol) dela N-(2-bromobencil)-N-(2-(fenilsulfoxido)etil)acetamida (5a)
disuelta en 15mL de CH2Cl2

ms 0.3g (1.44mmol) del anhdrido

trifluoroacetico. La mezcla de reaccin se coloc en agitacin a temperatura

ambiente por 3 horas. Seguidamente se evapor el CH2Cl2, al crudo de la reaccin se le adicion
tolueno (15mL) y la mezcla de reaccin se coloc a reflujo por 5 horas. Al trmino de la reaccin, se
elimino el disolvente al vaco. El crudo se disolvi en agua (30mL) y se extrajo con CH2Cl2 (3 x 15mL).
La fase orgnica se seco sobre sulfato de sodio anhidro y se elimin el solvente al vaco. El producto
fue purificado por cromatografa flash (hexano/AcOEt 8:2), obtenindose como un aceite traslucido en
(0.23g 48%) de rendimiento.
(E)-N-((6-bromobenzo[d][1,3]dioxol-5-il)metil)-N-(2-(tiofenil)vinil)acetamida (6b)
En un matraz redondo de 25mL equipado con un refrigerante se
colocaron 0.8g (1.88mmol) de la N-((6-bromobencil[d][1,3]dioxolano-5il)metil)-N-(2-(fenilsulfoxido)etil)acetamida (5b)disuelta en 15mL de CH2Cl2
ms 0.43g (2.07mmol) del anhdrido trifluoroacetico. La mezcla de
reaccin se coloc en agitacin a temperatura ambiente por 3 horas. Seguidamente se evapor el
CH2Cl2. Al crudo de la reaccin se le adicion tolueno (15mL) y la mezcla de reaccin se coloc a
reflujo por 5 horas. Al trmino de la reaccin, se elimin el disolvente al vaco. El crudo se disolvi en
agua (30mL) y se extrajo con CH2Cl2 (3 x 15mL). La fase orgnica se seco sobre sulfato de sodio
anhidro y se elimin el solvente al vaco. El producto fue purificado por cromatografa flash
(hexano/AcOEt 7:3), obtenindose como un aceite traslucido en (0.4g 49%) de rendimiento.
(E)-N-(2-bromo-4,5-dimetoxibencil)-N-(2-(tiofenil)vinil)acetamida (6c)

En un matraz redondo de 25mL equipado con un refrigerante se

colocaron 0.6g (1.3mmol) de la N-(2-bromo-4,5-dimetoxibencil)-N-(2(fenilsulfoxido)etil)acetamida (5c)disuelta en 15mL de CH2Cl2 ms 0.31g
(1.49mmol) del anhdrido trifluoroacetico. La mezcla de reaccin se
coloc en agitacin a temperatura ambiente por 3 horas. Seguidamente se evapor el CH2Cl2, al
crudo de la reaccin se le adicion tolueno (15mL) y la mezcla de reaccin se coloc a reflujo por 5
horas. Al trmino de la reaccin, se elimino el disolvente al vaco. El crudo se disolvi en agua (30mL)
y se extrajo con CH2Cl2 (3 x 15mL). La fase orgnica se seco sobre sulfato de sodio anhidro y se
10

elimin el solvente al vaco. El producto fue purificado por cromatografa flash (hexano/AcOEt 7:3),
obtenindose como un aceite traslucido en (0.3g 49%) de rendimiento.
(E)-N-(2-bromobencil)-N-(2-(fenilsulfoxido)vinil)acetamida (7a)
En un matraz redondo de 10mL se coloc (0.2g, 0.55mmol) de la (E)-N-(2bromobencil)-N-(2-(tiofenil)vinil)acetamida (6a), se disolvi en 5mL de CH2Cl2.
Seguidamente se agreg lentamente a 0oC durante 20 minutos (0,12g,
0.71mmol) de MCPBA. La mezcla de reaccin se coloc en agitacin a
temperatura ambiente por 3 horas. Al trmino de la reaccin. Se agreg NaHCO 3, (15mL), se disolvi
en agua (20mL) y se extrajo con CH2Cl2 (3 x 10mL). La fase orgnica se seco sobre sulfato de sodio
anhidro y se elimin el solvente al vaci. El producto fue purificado por cromatografa flash
(hexano/AcOEt 6:4), obtenindose como un aceite amarillo en un rendimiento (0.2g 87%)
(E)-N-((6-bromobenzo[d][1,3]dioxol-5-il)metil)-N-(2-(fenilsulfxido)vinil)acetamida(7b)
En un matraz redondo de 10mL se coloc (0.2g, 0.49mmol) de la (E)-N-((6bromobenzo[d][1,3]dioxol-5-il)metil)-N-(2-(tiofenil)vinil)acetamida (6b)
, se disolvi en 5mL de CH2Cl2. Seguidamente se agreg lentamente a 0oC
durante 10 minutos (0.11g, 0.63mmol) de MCPBA. La mezcla de reaccin
se coloc en agitacin a temperatura ambiente por 3 horas. Al trmino de la reaccin. Se agreg
NaHCO3, (15mL), se disolvi en agua (20mL) y se extrajo con CH2Cl2 (3 x 10mL). La fase orgnica se
seco sobre sulfato de sodio anhidro y se elimin el solvente al vaci. El producto fue purificado por
cromatografa flash (hexano/AcOEt 1:1), obtenindose como un aceite amarillo en un rendimiento
(0.2g 87%)

(E)-N-(2-bromo-4,5-dimetoxibencil)-N-(2-(fenilsulfxido)vinil)acetamida (7c)
En un matraz redondo de 10mL se coloc (0.2g, 0.47mmol) de la (E)-N(2-bromo-4,5-dimetoxibencil)-N-(2-(tiofenil)vinil)acetamida

(6c),

se

disolvi en 5mL de CH2Cl2. Seguidamente se agreg lentamente a 0oC

durante 20 minutos (0.10g, 0.61mmol) de MCPBA. La mezcla de
reaccin se coloc en agitacin a temperatura ambiente por 3 horas. Al
trmino de la reaccin. Se agreg NaHCO3, (15mL), se disolvi en agua (20mL) y se extrajo con
CH2Cl2 (3 x 10mL). La fase orgnica se seco sobre sulfato de sodio anhidro y se elimin el solvente al
vaci. El producto fue purificado por cromatografa flash (hexano/AcOEt 6:4), obtenindose como un
aceite amarillo en un rendimiento (0.21 g 90%)

11

DISCUSIN DE RESULTADOS
Como se mencion en los antecedentes, La metodologa general usada1a para preparar
vinilsulfxidos, involucr inicialmente una reaccin de aminacin reductiva entre la tiofenetilamina 1 y
los aldehdos 2a-c, donde se generaron las aminas secundarias 3a-c, que se obtuvieron en
excelentes rendimientos y se identificaron completamente por espectroscopia de 1H-RMN,

13

C-RMN,

IR, EM (Esquema 8).

Esquema 8. Reaccin de tiofenetilamina con aldehdos.

Los datos espectroscpicos de las aminas 3a-c corroboran las estructuras obtenidas. Tabla 1.

Tabla 1. Coleccin de datos espectroscpicos de las aminas 3a-c

Aminas

Datos espectroscpicos
1

H-RMN (300 MHz, CDCl3) ppm=7.54-7.07 (m, 9H), 3.86 (s, 2H), 3.11-3.06 (m,
2H), 2.87-2.82 (m, 2H), 1.88 (s, 1H); 13C-RMN y DEPT (75.4 MHz, CDCl3): ppm
=139.0, 135.6, 132.8, 130.1, 129.8, 129.8, 128.8, 128.8, 128.5, 127.3, 126.2, 53.2,
47.4, 34.4;. IR (pelcula,): cm-1=3308, 3059, 3014, 2922, 2836, 1441, 1287, 1024;
EM (IE) (286C) (EI): m/z (%) M+: 322(5.0), 242(15), 198(98), 169(100); 124(70).
EMHR: Calculadopara C15H16BrNS= 322.0265, observado: 322.0265.
1

H-RMN (300 MHz, CDCl3) ppm=7.36-7.18 (m, 5H), 6.98 (s, 1H), 6.87 (s, 1H), 5.95
(s, 2H), 3.11-3.07 (m, 2H), 2.85-2.81 (m, 2H), 3.77 (s, 2H), 2.07 (s, 1H); 13C-RMN y
DEPT (75.4 MHz, CDCl3): ppm =147.4, 147.3, 135.4, 131.9, 129.8, 129.8, 128.9,
128.9, 126.2, 114.1, 112.7, 110.0, 101.6, 53.0, 47.1, 34.1;. IR (pelcula,): cm1
=3308, 3057, 3010, 2895, 2840, 1476, 1237, 1037; EM (IE) (297C) (EI): m/z (%)
M+: 366(2.5), 286(20), 242(45), 213(100); EMHR: Calculadopara C16H16BrNO2S=
366.0163, observado: 366.0171.
1

H-RMN (300 MHz, CDCl3) ppm=7.36-7.14 (m, 5H), 6.99 (s, 1H), 6.92 (s, 1H), 3.85
(s, 3H), 3.85 (s, 3H), 3.80 (s, 2H), 3.12-3.08 (m, 2H), 2.88-2.84 (m, 2H), 2.00 (s,
1H); 13C-RMN y DEPT (75.4 MHz, CDCl3): ppm =148.5, 148.5, 135.6, 130.9,
129.7, 129.7, 129.1, 128.8, 126.2, 115.5, 113.7, 112.9, 56.1, 56.0, 52.9, 47.4, 34.2;.
IR (pelcula,): cm-1=3328, 3057, 2929, 2834, 1503, 1441, 1259, 1213; 1159, 1031,
742; EM (IE) (216C): m/z (%) M+: 382(15), 302 (35), 258 (50), 231 (100), 229 (10);

12

EMHR: Calculadopara C17H20BrNO2S= 382.0480, observado: 382.0476.

Es importante mencionar que la tiofenetilamina 1 se debi preparar, ya que no es comercializada. Se

uso un mtodo bastante verstil, reportadoigualmente por Ishibashi basado en estudios de la qumica
de tiofenoles.16 Este mtodo consisti en mezclar el tiofenol 9, con una solucin de etxido de sodio
en etanol, a la cual se le adicion la 2-oxazolidinona 8, que es susceptible a un ataque de forma
regioselectiva por parte del tiofenxido originando la tiofenetilamina1. Con esta metodologa, se
obtuvo la amina en buen rendimiento. Esta sntesis result ser ms eficiente que la anterior puesto
que la reaccin ocurre en un solo paso a pesar de lo desagradable que resulta trabajar con el tiofenol
y sus derivados (Esquema 9).

Esquema 9. Sntesis de tiofenetilamina a partir del tiofenol.

La tiofenetilamina 1, se identific plenamente por espectroscopia de 1H-RMN,

13

C-RMN, IR, EM+ ,

datos que se corroboraron con los reportados en la literatura16. Tabla 2.

Tabla 2. Datos espectroscpicos de la tiofenetilamina 1.

tiofenetilamina Datos espectroscpicos
1

H-RMN (300 MHz, CDCl3) ppm=7.39-7.16 (m, 5H), 3.06-3.04 (m, 2H), 2.94-2.90 (m, 2H),
2.84 (s, 1H); 13C-RMN y DEPT (75.4 MHz, CDCl3): ppm =135.6, 129.7, 129.7, 128.9,
126.2, 40.8, 38.02; IR (pelcula,): cm-1=3356, 3290, 3055, 2924, 2855, 1581, 1475; EM (IE)
(218C) (EI): m/z (%) M+: 153(30), 136(5), 124(100), 109(12), 91(10), 77(10), 65(7), 45(10),
30(45)

Prosiguiendo con la sntesis de las Acetamidas, las aminas secundarias 3a-c, se acetilaron en
condiciones suaves y de manera eficiente, con cloruro de acetilo-trietilamina obtenindose las amidas
4a-c en buen rendimiento. (Esquema 10)

Esquema 10. Acetilacin de las aminas secundarias 3a-c.

13

Las Acetamidas 4a-c, se identificaron plenamente por espectroscopia de 1H-RMN, 13C-RMN, IR, EM+ ,
tabla 3.
Tabla 3. Coleccin de datos espectroscpicos de las acetamidas 4a-c.
acetamida

Datos espectroscpicos
1

H-RMN (300 MHz, DMSO 80oC) ppm=7.54-7.07 (m, 9H), 3.86 (s, 2H), 3.113.06 (m, 2H), 2.87-2.82 (m, 2H), 2.02 (s, 3H); 13C-RMN y DEPT (75 MHz,
DMSO 25oC),: ppm =170.5, 170.4, 139.0, 139.0 135.6, 135.2 132.8, 130.1,
129.8, 129.8, 128.8, 128.8, 128.5, 127.3, 126.2, 53.2, 47.4, 34.4;. IR
(pelcula,): cm-1=3308, 3059, 3014, 2922, 2836, 1651, 1441, 1287, 1024; EM
(IE) (286C) (EI): m/z (%) M+: 364(4.0), 320 (80), 198(98), 169(100); 124(70).
1

H-RMN (300 MHz, DMSO 80oC) ppm=7.35-7.22 (m, 4H), 7.21-7.13 (m, 2H),
6.73 (s, 1H), 6.03 (s, 2H), 4.48 (s, 2H), 3.44 (s, 2H), 3.10 (s, 2H), 2.02 (s, 3H),;
13
C-RMN y DEPT (75 MHz, DMSO 25oC), se observo como una mezcla de
rotmeros; ppm =170.3, 170.1, 147.6, 147.4, 147.2, 135.4, 134.8, 129.6,
129.0, 128.9, 128.5, 127.6, 126.1, 125.5, 112.6, 112.5, 112.2, 108.4, 108.1,
102.0, 101.8, 52.2, 47.7, 47.1, 45.1, 30.4, 28.9, 21.1; IR (pelcula,): cm-1=
3054, 2903, 1650, 1478, 1416, 1238, 1036, 929; EM (IE) (52.8C): m/z (%)
M+: 408 (2), 364 (3), 328 (100), 271 (25);
1

H-RMN (300 MHz, DMSO, 80oC) ppm=7.32-7.25 (m, 4H), 7.20-7.13 (m,
2H), 6.78 (s, 1H), 4.51 (s, 2H), 3.78 (s, 3H), 3.71 (s, 3H), 3.48-3.43 (m, 2H),
3.12-3.03 (m, 2H), 2.04 (s, 3H); 13C-RMN y DEPT (75.4 MHz, DMSO 25oC):
se observo como una mezcla de rotmeros: ppm =170.2, 169.9, 148.9,
148.6, 148.5, 148.3, 135.4, 134.8, 129.0, 128.9, 128.3, 128.2, 127.4, 127.3,
126.0, 125.4, 116.0, 115.6, 112.5, 112.4, 112.0, 55.9, 55.8, 55.7, 55.6, 52.1,
47.2, 46.8, 45.0, 30.3, 28.9, 21.5, 21.1;. IR (pastilla KBr,): cm-1=3060, 2938,
2844, 1639, 1502, 1445, 1268, 1161; 1001; EM (IE) (270C): m/z (%) M+: 424
(0), 382 (5), 344 (100), 287 (20), 229 (70).

Las acetamidas 4a-c, se oxidaron en condiciones muy suaves usando el cido metacloroperbenzoico
en CH2Cl2, generando los sulfxidos 5a-c, tambin en buen rendimiento. (Esquema 11).

Esquema 11. Oxidacin al sulfxido mediada por MCPBA.

Los sulfxidos 5a-c se identificaron completamente por espectroscopia de 1H-RMN, 13C-RMN, IR, EM+
Tabla 4.

14

Tabla 4. Coleccin de datos espectroscpicos de las sulfxidos 5a-c.

vinilsulfxidos

Datos espectroscpicos
1

H-RMN (300 MHz, DMSO 80oC) ppm=7.53-7.08 (m, 9H), 3.86 (s, 2H), 3.113.06 (m, 2H), 2.87-2.82 (m, 2H), 2.02 (s, 3H); 13C-RMN y DEPT (75 MHz,
DMSO 25oC),: ppm =170.5, 170.4, 139.0, 139.0 135.6, 135.2 132.8, 130.1,
129.8, 129.8, 128.8, 128.8, 128.5, 127.3, 126.2, 53.2, 47.4, 34.4;. IR
(pelcula,): cm-1=3308, 3059, 3014, 2922, 2836, 1651, 1441, 1287, 1024; EM
(IE) (288C) (EI): m/z (%) M+: 364(4.0), 320 (80), 198(98), 169(100); 124(70).
1

H-RMN (300 MHz, DMSO, 80oC) ppm=7.65-7.62 (m, 2H), 7.59-7.52 (m,
3H), 7.13 (s, 1H), 6.72 (s, 1H), 6.04 (s, 2H), 4.44 (s, 2H), 3.70-3.50 (m, 1H),
3.47-3.37 (m, 1H), 3.29-3.09 (m, 1H), 3.05-2.98 (m, 1H), 2.03 (s, 3H); 13CRMN y DEPT (75.0 MHz, DMSO, 25oC): se observo como mezcla de
rotmeros; ppm =170.4, 170.1, 147.6, 147.4, 147.2, 143.6, 143.1, 130.7,
130.6, 129.4, 129.2, 129.1, 128.8, 123.9, 123.8, 112.7, 112.5, 112.3, 108.4,
108.0, 102.1, 101.9, 52.6, 52.0, 47.7, 40.8, 40.3, 38.7, 21.4, 21.1;. IR
(pelcula,): cm-1= 3050, 2920, 1649, 1478, 1238, 1037; EM (IE) (66.2C): m/z
(%) M+: 424(10), 364 (3), 328 (100), 271 (25);
1

H-RMN (300 MHz, DMSO, 80oC) ppm=7.61-7.51 (m, 5H), 7.12 (s, 1H), 6.76
(s, 1H), 4.47 (s, 2H), 3.78 (s, 3H), 3.72 (s, 3H), 3.66-3.36 (m, 2H), 3.20-2.90
(m, 2H), 2.04 (s, 3H); 13C-RMN y DEPT (75.4 MHz, DMSO, 25oC): se observo
como mezcla de rotmeros; ppm =170.3, 169.9, 148.9, 148.7, 148.5, 148.3,
143.6, 143.1, 130.7, 130.6, 129.1, 129.0, 128.0, 127.2, 123.7, 123.7, 116.0,
115.6, 112.7, 112.0, 55.9, 55.7, 54.8, 52.8, 51.9, 47.1, 40.4, 38.5, 21.4, 21.1;.
IR (pelcula,): cm-1= 2935, 1649, 1507, 1442, 1263, 1212, 1163, 1038, 751;
EM (IE) (53.1C): m/z (%) M+: 440(0.5), 424 (5) ,398 (8) ,382 (15) ,314 (15),
272(10), 229 (100), 206 (10), 192(10).

El penltimo paso para la obtencin de los productos deseados, consisti en la generacin de los
vinilsulfuros

6a-c, Se us una transposicin tipo Pummerer, la cual permite despus de un

calentamiento en tolueno a ebullicin eliminar los grupos hidroxilos formados en el proceso de

gtranferencia y asi obtener las dobles ligaduras.

Esquema 12. Formacin de vinilsulfuro, usando una reaccin de transposicin de Pummerer

15

Convencionalmente esta reaccin genera mayoritariamente los productos con geometra E, sin
embargo por las condiciones de reaccin y la formacin en menor rendimiento del producto Z, los
rendimientos se abaten sustancialmente, pero considerando el proceso; son aceptables en este tipo
de reacciones. (Esquema 12). Los vinilsulfuros 6a-c se identificaron completamente por
espectroscopia de 1H-RMN, 13C-RMN, IR, EM+. Tabla 5.

Tabla 5. Datos espectroscpicos de los vinilsulfuros 6a-c

Vinilsulfuros

Datos espectroscpicos
1

H-RMN (300 MHz, DMSO 80oC) ppm=8.27-8.25 (d, 1H), 7.58-7.08 (m, 9H),
6.03-6.01 (d, 1H) 3.86 (s, 2H), 2.02 (s, 3H); 13C-RMN y DEPT (75 MHz,
DMSO 25oC),: ppm =170.5, 170.4, 139.0, 139.0 135.6, 135.2 ,133.8,132.8,
130.1, 129.8, 129.8, 128.8, 128.8, 128.5, 127.3, 126.2, 109.4, 47.4, 34.4;. IR
(pelcula,): cm-1=3306, 3055, 3014, 2923, 2836, 1651, 1441, 1287, 1024; EM
(IE) (286C) (EI): m/z (%) M+: 362(2.0), 321 (80), 198(98), 169(100); 124(70).
1

H-RMN (300 MHz, DMSO, 80oC) ppm=8.25-8.23 (d, 1H), 7.65-7.62 (m, 2H),
7.59-7.52 (m, 3H), 7.13 (s, 1H), 6.72 (s, 1H), 6.04 (s, 2H), 6.03-6.01 (d, 1H),
4.44 (s, 2H), (m, 1H), 2.03 (s, 3H); 13C-RMN y DEPT (75.0 MHz, DMSO,
25oC): se observo como mezcla de rotmeros; ppm =170.4, 170.1, 147.6,
147.4, 147.2, 143.6, 143.1, 130.7, 130.6, 129.4, 129.2, 129.1, 128.8, 123.9,
123.8, 112.7, 112.5, 112.3, 108.4, 108.0, 102.1, 101.9, 52.6, 52.0, 47.7, 40.8,
40.3, 38.7, 21.4, 21.1;. IR (pelcula,): cm-1= 3050, 2920, 1649, 1478, 1238,
1037; EM (IE) (200C) (EI): m/z (%) M+: 406(2.0), 321 (80), 198(98),
169(100); 124(70).
1

H-RMN (300 MHz, DMSO, 80oC) ppm=7.61-7.51 (m, 5H), 7.12 (s, 1H), 6.76
(s, 1H), 4.47 (s, 2H), 3.78 (s, 3H), 3.72 (s, 3H), 3.66-3.36 (m, 2H), 3.20-2.90
(m, 2H), 2.04 (s, 3H); 13C-RMN y DEPT (75.4 MHz, DMSO, 25oC): se observo
como mezcla de rotmeros; ppm =170.3, 169.9, 148.9, 148.7, 148.5, 148.3,
143.6, 143.1, 130.7, 130.6, 129.1, 129.0, 128.0, 127.2, 123.7, 123.7, 116.0,
115.6, 112.7, 112.0, 55.9, 55.7, 54.8, 52.8, 51.9, 47.1, 40.4, 38.5, 21.4, 21.1;.
IR (pelcula,): cm-1= 2935, 1649, 1507, 1442, 1263, 1212, 1163, 1038, 751;
EM (IE) (70C): m/z (%) M+: 422 (2.5), 424 (5) ,398 (8) ,382 (15) ,314 (15),
272(10), 229 (100), 206 (10), 192(10).

El paso final para acceder a los intermediarios que finalizan esta etapa se llevo a cabo realizando una
reaccin de oxidacin del vinil sulfuro al vinilsulfxido como se haba realizado anteriormente, la
reaccin fue eficiente y se obtuvieron los vinilsulfxidos 7a-c en excelentes rendimientos. Esquema 13

16

O
R1
R2

O
MCPBA 1.5eq

CH 2Cl2, 3h, t.a. 0oC

Br
SPh

R1
R2

5a R1 =R 2 = H
5b R1 = R 2 = OCH2O
5c R1=OCH 3, R 2= OCH 3

N
Br
PhS

7a = 87%
7b = 87%
7c = 90%

Esquema 13. Oxidacin con MCPBA para la formacin delos vinilsulfxidos 7a-c
Los vinilsulfxidos 7a-c se identificaron completamente por espectroscopia de 1H-RMN,

13

C-RMN, IR,

EM . Tabla 6.

Tabla 6. Datos espectroscpicos de los vinilsulfxidos 7a-c

vinilsulfoxidos

Datos espectroscpicos
1

H-RMN (300 MHz, DMSO 80oC) ppm=8.26-8.25 (d, 1H), 7.58-7.08 (m, 9H),
6.03-6.01 (d, 1H) 3.86 (s, 2H), 2.02 (s, 3H); 13C-RMN y DEPT (75 MHz,
DMSO 25oC),: ppm =170.5, 170.4, 139.0, 139.0 135.6, 135.2 ,133.8,132.8,
130.1, 129.8, 129.8, 128.8, 128.8, 128.5, 127.3, 126.2, 109.4, 47.4, 34.4;. IR
(pelcula,): cm-1=3307, 3055, 3014, 2923, 2836, 1651, 1441, 1287, 1024; EM
(IE) (286C) (EI): m/z (%) M+: 377 (10.0), 320 (80), 196(98), 169(100);
124(70).
1

H-RMN (300 MHz, DMSO, 80oC) ppm=8.25-8.23 (d, 1H), 7.65-7.62 (m, 2H),
7.59-7.52 (m, 3H), 7.13 (s, 1H), 6.72 (s, 1H), 6.04 (s, 2H), 6.03-6.01 (d, 1H),
4.44 (s, 2H), (m, 1H), 2.03 (s, 3H); 13C-RMN y DEPT (75.0 MHz, DMSO,
25oC): se observo como mezcla de rotmeros; ppm =170.4, 170.1, 147.6,
147.4, 147.2, 143.6, 143.1, 130.7, 130.6, 129.4, 129.2, 129.1, 128.8, 123.9,
123.8, 112.7, 112.5, 112.3, 108.4, 108.0, 102.1, 101.9, 52.6, 52.0, 47.7, 40.8,
40.3, 38.7, 21.4, 21.1;. IR (pelcula,): cm-1= 3056, 2920, 1649, 1478, 1238,
1037; EM (IE) (278C) (EI): m/z (%) M+: 422 (2.5), 320 (80), 193(98),
169(100); 124(70).
1

H-RMN (300 MHz, DMSO, 80oC) ppm=7.61-7.51 (m, 5H), 7.12 (s, 1H), 6.76
(s, 1H), 4.47 (s, 2H), 3.78 (s, 3H), 3.72 (s, 3H), 3.66-3.36 (m, 2H), 3.20-2.90
(m, 2H), 2.04 (s, 3H); 13C-RMN y DEPT (75.4 MHz, DMSO, 25oC): se observo
como mezcla de rotmeros; ppm =170.3, 169.9, 148.9, 148.7, 148.5, 148.3,
143.6, 143.1, 130.7, 130.6, 129.1, 129.0, 128.0, 127.2, 123.7, 123.7, 116.0,
115.6, 112.7, 112.0, 55.9, 55.7, 54.8, 52.8, 51.9, 47.1, 40.4, 38.5, 21.4, 21.1;.
IR (pelcula,): cm-1= 2932, 1649, 1508, 1440, 1263, 1212, 1163, 1038, 751;
EM (IE) (68.3C): m/z (%) M+: 437(2.9), 422 (5) ,397 (8) ,382 (15) ,314 (15),
272(10), 229 (100), 206 (10), 192(10).

CONCLUSIN

17

Se han sintetizado 3 diferentesfenilsulfxidosvinilacetamidas 7a-c, por medio de procedimientos

sintticos conocidos y en buen rendimiento en cada una de las etapas de sntesis. Los resultados
indican que la metodologa es viable para seguir con laetapa 2 de ciclacin radicalaria.

BIBLIOGRAFIA
1. a) Ishibashi, H.; Kato, I.; Takeda, Y.; Kogure, M.; Tamura, O. Chem. Commun. 2000, 1527.b)
Ishibashi, H.; Masatake, I.; Masashi, O.; Masazumi, I. Tetraedron Lett. 1999, 40, 1149-1150
2. Fattorusso, E.; Taglialatela-Scafati, O.Modern Alkaloids: Structure, Isolation, Synthesis, and
Biology. Ed. Wiley VCH, Weinhem, 2008.
3. Wu, Y.-C, Liou, Y. F., Lu, S.-T., Chen, C.-H., Chang, J.-J. and Lee, K.-H. Planta Medica. 1989,
55, 163165,
4. De Silva, L. B. Medicinal plant researchretrospect and prospect, in R. S. Thakur et al.
(eds), Proceedings of International Symposium on Medicinal & Aromatic Plants, Central
Institute of Medicinal & Aromatic Plants, Lucknow. 1983.
5. Martin, M.L., Diaz, M.T., Montero, M.J., Prieto, P., Roman, L.S. and Cortes, D. Planta
Medica.1993, 59, 6367.
6. Grayer, R.J. and Harborne, J.B. Phytochemistry. 1994, 37, 19-42
7. Muller, K. and Ziereis, K. Planta Medica. 1994, 60, 21424.
8. Robinson, T., The biochemical pharmacology of plant alkaloids, in L. E. Cracker and J. E.
Simon (eds), Herbs, Spices, & Medicinal Plants, Vol. 1, Oryx Press, Phoenix. 1986
9. (a) Manske, R. H. Chem. Rev., 1942, 30, 145-158. (b) Chrzanowska, M.; Rozwadowska,
M. D. Chem. Rev. 2004, 104, 3341-3370 (c) Pedrosa, R.; Andrs C.; Iglesias J. M.;
Obeso, M. A. Tetrahedron, 2001, 57, 4005-4014.
10. Pictec, A.; Spengler T. Chem. Ber. 1911, 44, 2030.
11. Bischler, A.; Napieralsky, B. Chem. Ber. 1893, 26, 1903
12. a) Ikeda, M.; Hamada, M.; Yamashita, T.; Ikegami, F.; Sato, T.; Ishibashi, H. Synlett 1998,
1246-1248. (b) Ikeda, M.; Hamada, M.; Yamashita, T.; Matsui, K.; Sato, T.; Ishibashi, H. J.
Chem. Soc., Perkin Trans. 1 1999, 1949.
13. Chugaev, L. Ber. 1899, 32, 3332.
14. Perrin, D. D.; Armarego,W. L. F.; Perrin, D. R. Purification of laboratory chemicals..
Pergamon Press. 1980
15. a) Pummerer, R. Ber. 1909, 42, 2282-2291. b) Bur, S. K., Padwa, A. Chem. Rev.
2004,104, 2401-2432
18

16. Ishibashi, H.; Uegaki, M.; Sakai, M.; Takeda, Y. Tetrahedron2001, 57, 2115

19

CALIDAD E INOCUIDAD PARA EL CULTIVO DE TILAPIA (Oreochromis

niloticus) EN EL EMBALSE EL INFIERNILLO EN EL ESTADO DE
MICHOACAN.
Brianda Leticia Ibarra Valdez1 ; Miguel Angel Sanchez Rodriguez2 , Omar Calvario
Martinez3
Observaciones:
Pg. 1 ltimo prrafo: Escribir en cursivas los nombres cientficos.
PG. 3. LTIMO PRRAFO. Se realiz cercano... debe decir: Se realiz en un sitio cercano...
PAG. 6. CHECAR FUENTE BIBLIOGRAFICA: Garca-Ortega y Calvario-Martnez, no coinciden en la
bibliografa.
TABLA 2 y 3. Escribir en cursivas los nombres cientficos.
La evaluacin del trabajo no sigui un riguroso anlisis estadstico.
El anlisis y discusin de resultados no tiene un suficiente fundamento de anlisis estadstico. El
trabajo parece ser un estudio descriptivo.

TITULO
PREPARACIN DE N-(2-BROMOBENCIL)-N-(2-(FENILSULFINIL)VINIL)ACETAMIDAS
COMO PRECURSORES HACIA LA SINTESIS DE 1,2-DIHIDROISOQUINOLINAS.
AUTORES : Holber Zuleta Prada1; Benito Reyes Trejo1.
Observaciones: Por favor, ajustarse al Formato de Artculos del Congreso.
Pg 1. Quitar las palabras TTULO, AUTORES, ADSCRICION Y DIRECCIN ETC.
Pg 1. autores va junto con Adcripcin y direccin.
Pg. 1. Se sugiere en el resumen iniciarlo con Se desarroll una metodologa de sntesis
Pg. 1. El resumen se recomienda continuarlo con: Se describen los resultados ....
Pg,1 . Se sugiere obviar en el resumen las revisiones de literatura.
Pg. 4. Se sugiere que como objetivo se establezca el ajuste de las tcnicas analticas para la
sntesis de los derivados de ... y , que se mencione que no se realiz un anlisis estadstico.
Pg. 6 y otras. Se deben separar las unidades de medida de cada cantidad.
Pg. 2. Introduccin y Antecedentes deben ir integrados.

Pg. 12. Discusin de los resultados debe ser Anlisis y discusin de los resultados
Pg. 13. Se sugiere integrar lo sealado en la parte de Materiales y Mtodos.

Pg. 18. Cambiar el ttulo de Bibliografa a Referencias bibliogrficas.

Pg. 18. Los dos autores a) y b). Ishibashi, se sugiere ponerlos por separado

CALIDAD E INOCUIDAD PARA EL CULTIVO DE TILAPIA (Oreochromis

niloticus) EN EL EMBALSE EL INFIERNILLO EN EL ESTADO DE
MICHOACAN.

Brianda Leticia Ibarra Valdez1 ; Miguel Angel Sanchez Rodriguez2 , Omar Calvario
Martinez3
1

Instituto Tecnolgico de Mazatln/ Calle Corsario 1 No. 203 Col. Urias CP 82070,
AP 757 Mazatln, SIN/ pely_roja2@hotmail.com

Centro de Investigacin en Alimentacin y Desarrollo, A.C. Unidad Mazatln en

Acuicultura y Manejo Ambiental/Av. Sbalo-Cerritos s/n. Estero del Yugo
Mazatln, SIN/ ocalvario@ciad.mx Tel: 669898700 Fax: 669898701.

Centro de Investigacin en Alimentacin y Desarrollo, A.C. Unidad Mazatln en

Acuicultura y Manejo Ambiental/Av. Sbalo-Cerritos s/n. Estero del Yugo
Mazatln, SIN/ msanchez@ciad.mx Tel: 669898700 Fax: 669898701.

Resumen
En el presente trabajo se evalu la calidad e inocuidad para el cultivo de la tilapia
(Oreochromis niloticus) en el embalse El Infiernillo en el estado de Michoacn. Se
establecieron doce puntos de muestreo de agua cercanos a la cortina de dicho
embalse durante tres periodos, 24-feb-2013, 18-may-2013 y 27-jun-2013. Se utiliz
una sonda multiparamtrica marca Hach modelo DS 5X, la cual se someti al agua y
midi temperatura, pH, salinidad, conductividad elctrica y % de saturacin de
oxigeno a lo largo del cuerpo de agua hasta llegar al fondo. Por otra parte, por
medio de un laboratorio certificado se evalu la inocuidad del agua y musculo en
dicho embalse. Los resultados obtenidos en todas las estaciones muestran que la
calidad e inocuidad del embalse es favorable para el desarrollo y cultivo de la tilapia.
Palabras claves: Calidad e inocuidad; tilapia; embalse; El Infiernillo.

1. Introduccin
El cultivo de la tilapia se inici en Mxico en 1964 con la importacin de los primeros
ejemplares procedentes de los Estados Unidos, los cuales fueron depositados en la
estacin pisccola de Temascal, Oaxaca. Las especies introducidas fueron la Tilapia
rendalli, Oreochromis mossambicus y Oreochromis aureus, las cuales se
distribuyeron ampliamente en una gran cantidad de cuerpos de agua naturales y
artificiales pertenecientes a las zonas tropical y templada del pas. Las tilapias ms
cultivadas en Mxico son las que tienen hbitos alimentarios macrfagos, como es
el caso de O. niloticus, O. mossambicus y O. aureus. De ellas, la mayor cantidad de

2
alevines producidos en la actualidad corresponde a la especie Oreochromis niloticus
(Toledo y Garca, 2000).

El pas cuenta con una superficie de 2.9 millones de hectreas de aguas

continentales, en las que se encuentran diferentes embalses como lagos, presas,
bordos, etc., inicialmente fueron creados para generar energa elctrica o como
almacn de agua para riego, pero ahora son usados para la produccin de
alimentos. Al paso del tiempo, estos han sido colonizados por organismos como los
peces de los ros y aunado a esto se han sembrado: trucha, carpa, charal y tilapia
(Navarrete et al, 2007 y FAO, 1997).

En la ltima dcada ha aumentado considerablemente el inters del pblico y de los

gobiernos de diversos pases, incluido Mxico por la forma en la que se producen
los alimentos para el consumo humano, los cuales deben estar libres de cualquier
caracterstica que ponga en riesgo la salud de los consumidores. Los casos de
intoxicacin por consumo de alimentos contaminados y los casos de fraudes
relacionados con la calidad de los alimentos ocurridos en diversos pases, han
aumentado la preocupacin de los consumidores que demandan a los gobiernos
mejoras en las leyes actuales para establecer controles ms eficientes en materia
de inocuidad de los alimentos (Garca y Calvario, 2008).

Es de suma importancia conocer la calidad sanitaria de las tilapias que son

cultivadas y producidas en el embalse El Infiernillo ya que con esta garantizamos la
inocuidad de dichos peces y a su vez evitamos la contaminacin de los
consumidores y de los mismos pescadores que se alimentan con este tipo de
producto.

Tambin es importante rescatar que el agua del embalse cuente con las condiciones
ptimas no solo para el desarrollo de las tilapias, sino tambin de su cultivo, y para
confirmarlo se realizarn algunos anlisis.

Por lo tanto, el presente trabajo pretende evaluar la calidad del agua en el embalse
para saber si cuenta con las condiciones optimas para el cultivo de la tilapia y los
posibles contaminantes fsicos y qumicos que puedan afectar la inocuidad del
cultivo.

2. Materiales y Mtodos

3
rea de estudio
El embalse El Infiernillo, ubicada en los municipios de Arteaga, La Huacana y
Churumuco del Estado de Michoacn y en el municipio de Coahuayutla del Estado
de Guerrero, es un embalse artificial construido por la Secretara de Recursos
Hidrulicos en el perodo agosto 1962 diciembre 1963 y puesta en operacin el 15
de junio de 1964, con el propsito de captar agua para la generacin de energa
elctrica, aprovechamiento para el riego y como medio para el control de avenidas
como se muestra en la figura 1 (Manzolillo y Egea, 2001).

Figura 1. Ubicacin geogrfica del embalse El Infiernillo, Michoacn.

La parte baja del embalse El Infiernillo, se caracteriza por presentar una alta
proporcin de taxa endmicos as como plantas y mamferos de distribucin
restringida. La regin presenta gran fragmentacin y las reas que rodean al
embalse presentan vegetacin de selva baja caducifolia con vegetacin secundaria,
encontrando en la parte norte agricultura de temporal as como porciones de
pastizales inducidos (Vega, 2012).

La medicin de perfiles de profundidad se realiz cercano a la cortina con 12 puntos

de muestreo (fig. 2), en tres periodos, el primero el 24 de febrero del 2013, el
segundo el 18 de mayo del 2013 y el tercero el 27 de junio del 2013.

Figura 2. Ubicacin de los puntos de muestreo en el embalse El Infiernillo,

Michoacn.

El procesamiento de las mediciones se realiz en el Laboratorio de Qumica y

Productividad Acutica (LQyPA) del Centro de Investigacin en Alimentacin y Desarrollo
(CIAD) A.C. Unidad Mazatln mediante el uso de una sonda multiparamtrica marca
Hach modelo DS 5X, desde la superficie del cuerpo de agua hasta el fondo del mismo
(Tabla 1).
Tabla 1. Parmetros de calidad del agua y mtodo analtico que se utiliz.
Anlisis de agua

Mtodo analtico

Temperatura

Hydrolab DS5X

pH

Hydrolab DS5X

Salinidad

Hydrolab DS5X

Conductividad elctrica

Hydrolab DS5X

Oxgeno disuelto

Hydrolab DS5X

% de saturacin de
oxigeno

Hydrolab DS5X

Para determinar la inocuidad del agua y musculo, se realizaron colectas de muestras de

agua y msculo de tilapia para los anlisis.La colecta de muestras sigui las intrusiones
recomendadas por el personal del laboratorio de anlisis de muestras (Laboratorio
FERMI) acreditado por la Entidad Mexicana de Acreditacin (EMA). Las tcnicas
utilizadas se muestran en las tablas 3 y 4:

Tabla 2. Anlisis acreditados de metales y microbiolgicos de agua por el laboratorio

FERMI
Anlisis de agua
Mtodo analtico
Metales
Aluminio, mg/L
Arsnico, mg/L
Cadmio, mg/L
Cobre, mg/L
Cromo, mg/L
Manganeso, mg/L
Mercurio, mg/L
Nquel, mg/L
Plomo, mg/L
Microbiolgicos
Bacterias mesoflicas aerobias,
UFC/mL
Coliformes fecales, NMP/100 mL
Vibrio cholerae. en 50 mL
Salmonella spp. en 25 mL
Staphylococcus aureus, UFC/mL

NOM-117-SSA1-1994/EPA 6010B-1996 (I)

NOM-117-SSA1-1994/EPA 6010B-1996 (I)
NOM-117-SSA1-1994/EPA 6010B-1996 (I)
NOM-117-SSA1-1994/EPA 6010B-1996 (I)
NOM-117-SSA1-1994/EPA 6010B-1996 (I)
NOM-117-SSA1-1994/EPA 6010B-1996 (I)
NOM-117-SSA1-1994/EPA 6010B-1996 (I)
EPA 6010B-1996 (I)
NOM-117-SSA1-1994/EPA 6010B-1996 (I)
NOM-092-SSA1-1994
NMX-AA-042-1987
Compendium of meth for the microbiolog
examin of food
NOM-114-SSA1-1994
NOM-115-SSA1-1994

Tabla 3. Anlisis acreditados de metales, qumicos y microbiolgicos en musculo de

tilapia por el laboratorio FERMI
Anlisis de msculo de Tilapia
Mtodo analtico
Metales
Cadmio, mg/kg
Plomo, mg/kg
Qumicos
Nitrgeno amoniacal, mg/100g
Microbiolgicos
Coliformes fecales, NMP/g
Salmonella spp. en 25 g
Staphylococcus aureus,
UFC/g

3. Anlisis y discusin de resultados

Perfiles del 24 de febrero del 2013

NOM-242-SSA1-2009. A.N.B10
NOM-242-SSA1-2009. A.N.B10
NOM-242-SSA1-2009. A.N.B9
NMX-242-SSA1-2009. A.N.B17
NOM-242-SSA1-2009. A.N.B14
NOM-242-SSA1-2009. A.N.B15

6
Temperatura
Los perfiles de temperatura que se efectuaron en la cortina del embalse El Infiernillo
arrojaron datos que van desde un mximo de 27.71C en la estacin 8 y mnimos de
22.90 C en la estacin 1, teniendo una similitud entre cada columna de cada perfil, se
puede notar que en este parmetro la profundidad no afecta, ya que desde los primeros
dos metros el valor se mantiene constante a 26 C hasta una profundidad de 60 m por lo
tanto se mantienen dentro del rango optimo descrito por El-Sayed (2006) el cual nos dice
que la tilapia tiene un rango ptimo de 25 a 30 C, as mismo Saavedra Martnez (2006)
nos menciona que la temperatura optima es de 25 a 32 C.

Oxgeno disuelto
El comportamiento del oxgeno disuelto es muy similar en la mayor parte de la presa, ya
que se observa que en la mayora de los perfiles a partir de los 10 metros de profundidad
la concentracin de oxgeno se mantiene en 5 mg/L hasta una profundidad de 50 m , solo
se presenta una variacin en la estacin 8, la cual demuestra que despus de los 55
metros de profundidad, el valor decrece de 5 mg/L hasta un mnimo de 0.9 mg/L, de
acuerdo a lo establecido por Saavedra Martnez (2006) el oxgeno disuelto debe tener
valores de 5.0 a 9.0 mg/L para el ptimo desarrollo de la tilapia, Garca-Ortega y CalvarioMartnez (2008) varia un poco en su rango optimo ya que ellos nos mencionen que la
tilapia puede desarrollarse mejor en valores por arriba de 4.5 mg/L, as tambin, se
cumple con el lmite establecido por los criterios ecolgicos de calidad del agua, CECA
(1989) en lo referente a la proteccin de la vida acutica en agua dulce de 5 mg/L.

% de saturacin de oxgeno
Los valores de los perfiles de % de saturacin de oxigeno son muy similares en sus
concentraciones, ya que tienen un mximo de 125.60 mg/L, siendo importante sealar
que en la estacin 8 se nota un cambio a partir de los 50 metros de profundidad, donde la
concentracin disminuye hasta un mnimo de 11.30 mg/L, se puede observar que a partir
de los 10 metros de la concentracin de % de saturacin de oxgeno se mantiene
constante.

Salinidad
La salinidad observada en este perfil fue muy constante y similar en todas las estaciones,
se mantuvo en valores mximos de 0.30 UPS y de nuevo la profundidad no afecto las
concentraciones de este parmetro, solo en la estacin 7 se puede notar un cambio ya
que se obtuvo una concentracin mnima de

0.01 UPS, el valor optimo que nos

recomienda EL-Sayed (2006) menciona que los valores deben estar entre los 5 y 10 UPS

7
lo cual en este caso los valores salieron muy por debajo de lo ptimo para el desarrollo
normal de la tilapia, aunque la tilapia puede crecer en valores muy bajos de salinidad.

Potencial de hidrogeno (pH)

Segn lo establecido por Wicki (1997), los valores ptimos de pH deben ser de 6.5 a 8.5,
aunque Saavedra Martnez nos menciona que el pH ptimo es de 6.0 a 9.0. En relacin
con los valores de pH, se encontraron en un rango poco variable en toda la presa, que
estn entre un mnimo de 7.1 y un mximo de 8.2, el comportamiento es muy similar, ya
que en los primeros 10 metros el valor baja un poco y a partir de ah se mantiene en un
rango de 7.5 y 7.6, aunque presenta mucho ruido durante su desarrollo, lo cual es
contrario en las estaciones 11 y 12, ya que en ests se observa ms linealidad teniendo
valores de 7.6.
El embalse El Infiernillo zona de la cortina, presenta valores que son adecuados para la
ptima produccin de tilapia segn los autores antes mencionados. Es importante
mencionar, que el pH de esta presa, disminuye conforme aumenta su profundidad.

Conductividad elctrica
Se observa como la mayora de los perfiles comienzan con 545 S/cm, aunque en la
estacin 1 se puede notar como la conductividad elctrica tiene el valor mximo en la
superficie con 582 S/cm, la cual decrece y se mantiene estable en los primeros 10
metros, esto no ocurre en las estaciones 5, 6, y 7, donde hay un decremento y despus
un incremento, la estacin 10 pertenece al ro San Antonio y sus valores se mantienen
estable en los primeros 10 metros, teniendo un mnimo de 538 S/cm, en este parmetro
la profundidad no afecta a las concentraciones.
Perfiles del 18 de Mayo del 2013

Temperatura
Segn los perfiles de temperatura, se cumple con los criterios establecidos por El-Sayed
(2006) que indica temperaturas ideales en el rango de 25 a 30 C. Superficialmente se
encontr una temperatura promedio de 27.5 C en todas las estaciones mientras que a lo
largo de la columna de agua la temperatura promedio fue de 25.8 C aproximadamente
hasta los 10 metros, al ir aumentando la profundidad la temperatura fue disminuyendo
poco, pues en los perfiles se puede apreciar que al llegar a la mxima profundidad de
cada estacin la temperatura no disminuyo ms de los 25.5 C.

8
Oxgeno disuelto
Los perfiles de oxgeno disuelto para el embalse El Infiernillo muestran que el oxgeno
disuelto de la superficie va de 8 a 8.5 mg/L en las 12 estaciones, concentracin que va
disminuyendo conforme aumenta la profundidad, pues a los 5 metros de profundidad
existe un decremento notorio, pues se observa un promedio de 4 mg/L aproximadamente
en todas las estaciones a excepcin de la estacin 10, la cual a los 10 metros de
profundidad tiene una concentracin de oxgeno disuelto de casi 2 mg/L, cabe mencionar
que esta estacin es la menos profunda de la presa con no ms de 35 metros de
profundidad y que se ubica sobre la entrada a la presa del ro San Antonio. Es importante
sealar que al aumentar la profundidad, no se observa una disminucin de oxgeno
disuelto, pero tampoco sobrepasa los 5 mg/L. De acuerdo a lo establecido por Saavedra
Martnez (2006), que indica que las concentraciones ptimas de oxgeno disuelto para el
ptimo desarrollo de la tilapia van de 5.00 a 9.00 mg/L, algunas zonas a partir de los 5
metros de profundidad se salen del rango, pero esto no afecta directamente al desarrollo
de las tilapias, ya que su decremento es menor a 1 mg/L. En lo referentes a los
establecido por los criterios ecolgicos de calidad del agua, CECA (1989), la cual
menciona que la concentracin de oxgeno disuelto debe encontrarse en 5 mg/L en lo
referente a la proteccin de la vida acutica en agua dulce, por lo que esto se cumple
prcticamente en todas la estaciones sobre la zona superficial y hasta los 5 metros,
excepto para la estacin 10 en la que se cumple nicamente hasta los 3 metros de
profundidad.

% de saturacin de oxgeno
Los valores de los perfiles de % de saturacin de oxgeno para el embalse El Infiernillo en
la parte superficial de todas las estaciones de muestreo tiene una concentracin de 110
% Sat. aproximadamente, saturacin que va disminuyendo bruscamente conforme la
profundidad aumenta, al llegar aproximadamente a los 10 metros el % de saturacin de
oxgeno se encuentra alrededor de 50 % Sat. en las estaciones 1 a la 8, 11 y 12, mientras
que en la estacin 9 esta concentracin disminuye a 45 % Sat. aproximadamente y la
estacin 10 disminuye hasta 20 % Sat., al aumentar an ms (de los 20 a 60 metros de
profundidad) la profundidad la concentracin de % de saturacin de oxgeno en la
mayora de las estaciones aumenta aproximadamente a 60 % Sat.

Salinidad
La salinidad observada en este perfil fue muy constante y similar en todas las estaciones,
se mantuvo en valores de alrededor de 0.26 UPS en los primeros 10 metros de
profundidad. La profundidad no afecto las concentraciones de este parmetro, solo en la

9
estacin 12 se aprecia que el valor se mantuvo hasta los 20 metros y de ah empez a
subir al mismo rango que las dems estaciones, el valor optimo que EL-Sayed (2006)
menciona, es que los valores deben estar entre los 5 y 10 UPS, en este embalse los
valores salieron por debajo de lo establecido pero esto no influye en el desarrollo de la
tilapia.

Potencial de hidrogeno (pH)

En el embalse El Infiernillo, el pH en las 12 estaciones de muestreo en la superficie, fue
de aproximadamente 7.9. Conforme aumentaba la profundidad, el pH tenda a disminuir,
a tal grado que en profundidades de 5 metros, el pH era de aproximadamente 7.7 en la
mayora de las estaciones, al llegar a 10 metros, de 7.5 en casi todas las estaciones,
mientras que en los puntos de muestreo 1 y 5 el pH fue de aproximadamente 7.9 a los 10
metros de profundidad. Al llegar a una profundidad alrededor de los 25 metros, el pH
empieza a ser constante, aunque segn los perfiles en las estaciones 1, 2, 4, 11 y 12 al
alcanzar la mxima profundidad de cada columna de agua el pH disminuye bruscamente,
alcanzando en la estacin 2 un pH de 5.5 como mnimo.
Segn Wicki (1997) el pH ptimo en los cuerpos de agua corresponde al rango de 6.5 a
8.5, mientras que Nandlal and Pickering (2004) indican que estos valores deben estar de
6.5 a 9. La variacin indicada entre estos autores no es mucha y segn los valores
arrojados en los perfiles de pH, las estaciones de muestreo de este embalse entran es
ambos lmites hasta la profundidad de 20 metros.

Conductividad elctrica
Los perfiles de conductividad elctrica para el embalse El Infiernillo muestran que la
conductividad elctrica superficial medida en las 12 estaciones de muestreo es
aproximadamente 505 S/cm, al aumentar la profundidad esta conductividad elctrica va
aumentando teniendo un promedio de 520S/cm a los 10 metros de profundidad. Cabe
mencionar que la conductividad elctrica sigue aumentando conforme la profundidad se
incrementa, pues a los 20 metros de profundidad la conductividad elctrica se encuentra
alrededor de los 530 S/cm y sigue aumentando hasta los 540 S/cm en las
profundidades mximas de las columnas de agua muestreadas.

Perfiles del 27 de junio del 2013

Temperatura

10
Los perfiles de temperatura que se realizaron en el embalse El Infiernillo muestran que en
superficie se presentan valores de aproximadamente 29.5 C en todas las estaciones,
excepto en la estacin 10 que tiene 29 C, tambin se observa que los valores decrecen
de una forma similar en todas las estaciones, mientras que al llegar a los 40 metros de
profundidad los valores se mantienen entre 25 y 26 C, descartando obviamente las
estaciones que no llegan hasta esa profundidad como es el caso de las estaciones 6, 9,
10 y 12. por tal motivo todas las estaciones se mantienen dentro del rango optimo
descrito por El-Sayed (2006) el cual nos dice que la tilapia tiene un rango ptimo de 25 a
30 C, as mismo Saavedra Martnez (2006) nos menciona que la temperatura optima es
de 25 a 32 C.

Oxgeno disuelto
El comportamiento del oxgeno disuelto es muy similar en la mayor parte de la presa, ya
que se observa que en la mayora de los perfiles la concentracin comienza en
aproximadamente 10 mg/L, solo se presenta una variacin en la estacin 10, la cual
comienza marcando 2 mg/L y se muestra como conforme hay ms profundidad el valor
decrece hasta tal punto que llegan al valor de 0 mg/L, esto sucede en la profundidad de
40 metros para las estaciones 7, 8 y 11, y en profundidad de 50 metros sucede en las
estaciones 1, 2, 3, 4 y 5. Pero aun asi eso no importa porque el desarrollo de la tilapia se
dar en los primeros 10 metros, en los cuales se observa que todas las estaciones
marcan valores de 4.5 mg/L, descartando la estacin 10, la cual en sus primeros 10
metros se encontraron valores por debajo de los 4 mg/L.
De acuerdo a lo establecido por Garca-Ortega y Calvario-Martnez (2008) nos
mencionan que la tilapia puede desarrollarse mejor en valores por arriba de 4.5 mg/L, as
tambin, se cumple con el lmite establecido por los criterios ecolgicos de calidad del
agua, CECA (1989) en lo referente a la proteccin de la vida acutica en agua dulce de 5
mg/L.

% de saturacin de oxgeno
Los valores de los perfiles de % de saturacin de oxigeno son muy similares en sus
concentraciones, en la zona superficial presentan valores de entre los 130 y 140 % sat.,
siendo importante sealar que en la estacin 10 su valor superficial es de
aproximadamente 30 % sat. Se puede observar que en los primeros 10 metros de
profundidad el valor decrece hasta 50 % sat, exceptuando la estacin 10 que presenta
valores por debajo de los 50 % sat.

11
Salinidad
La salinidad observada en este perfil fue muy constante y similar en todas las estaciones,
se mantuvo en valores mximos de 0.27 UPS y de nuevo la profundidad no afecto las
concentraciones de este parmetro, solo en la estacin 10 se puede notar un cambio ya
que se obtuvieron concentraciones menores a los 0.18 UPS, el valor optimo que nos
recomienda EL-Sayed (2006) menciona que los valores deben estar entre los 5 y 10 UPS
lo cual en este caso los valores salieron muy por debajo de lo ptimo para el desarrollo
normal de la tilapia, aunque la tilapia puede crecer en valores muy bajos de salinidad.

Potencial de hidrogeno (pH)

Segn lo establecido por Wicki (1997), los valores ptimos de pH deben ser de 6.5 a 8.5,
aunque Saavedra Martnez nos menciona que el pH ptimo es de 6.0 a 9.0. En relacin
con los valores de pH, se encontraron en un rango poco variable en toda la presa, que
estn entre un mnimo de 7.44 y un mximo de 8.78, el comportamiento es muy similar,
ya que en los primeros 10 metros el valor baja casi hasta 8 en las primeras 8 estaciones,
mientras que en las estaciones 9, 10 y 11, su valor baja hasta 8.5 y en la estacin 10
hasta 7.5.
El embalse El Infiernillo zona de la cortina, presenta valores que son adecuados para la
ptima produccin de tilapia segn los autores antes mencionados. Es importante
mencionar, que el pH de esta presa, disminuye conforme aumenta su profundidad.

Conductividad elctrica
Se observa como la mayora de los perfiles comienzan entre 500 y 550 S/cm, y se
observa como en los primeros 10 metros los valores aumentan hasta casi 600 S/cm,
para comenzar a decrecer hasta mantenerse en su valor de superficie en la profundidad
de 40 a 50 metros aproximadamente. Destaca la estacin 10 con concentraciones en
superficie de 363.50 S/cm y en los primeros 10 metros de profundidad aumentan hasta
550 S/cm aproximadamente, en este parmetro la profundidad no afecta a las
concentraciones.

Anlisis de metales pesados, plaguicidas, hidrocarburos y biolgicos por un

laboratorio acreditado por la Entidad Mexicana de Acreditacin
La colecta de musculo de tilapia y agua se realiz el 4 de diciembre del 2012 siguiendo
los lineamientos establecidos por el laboratorio FERMI (Laboratorio acreditado por la
Entidad Mexicana de Acreditacin, EMA). Los resultados de la muestra de musculo de

12
tilapia del embalse se muestran en la Tabla 13. Como se puede observar a detalle en
dicha tabla, tanto los resultados de metales, como los qumicos y microbiolgicos en
musculo de tilapia, ninguno sobrepasa el lmite mximo permisible de la norma NOM-242SSA1-2009. Productos y servicios. Productos de la pesca frescos, refrigerados,
congelados y procesados. Especificaciones sanitarias y mtodos de prueba. Por otro
lado, en lo que respecta a la muestra de agua, esta sigui las recomendaciones
establecidas por Schlotfeldt y Alderman (1995), como se puede observar en la Tabla 14,
tampoco ninguno de los anlisis de metales y microbiolgicos determinados supero
dichas recomendaciones.

Tabla 4. Anlisis acreditados por FERMI de metales, qumicos y microbiolgicos en

musculo de tilapia en el embalse El Infiernillo, Michoacn.
Anlisis de msculo de
Tilapia
Metales
Cadmio, mg/kg

Mtodo analtico

NOM-242-SSA12009. A.N.B10
NOM-242-SSA12009. A.N.B10

Plomo, mg/kg

Embalse El
Infiernillo

NOM-242-SSA12009*

ND

0.5

ND

0.5

23.26

35

Qumicos
Nitrgeno amoniacal,
mg/100g
Microbiolgicos
Coliformes fecales,
NMP/g
Salmonella spp. en 25 g

NOM-242-SSA12009. A.N.B9

NMX-242-SSA1-2009.
<3
400
A.N.B17
NOM-242-SSA1Ausente
Ausente
2009. A.N.B14
Staphylococcus aureus,
NOM-242-SSA1< 100
1000 UFC/g
UFC/g
2009. A.N.B15
* NORMA Oficial Mexicana NOM-242-SSA1-2009, Productos y servicios. Productos
de la pesca frescos, refrigerados, congelados y procesados. Especificaciones
sanitarias y mtodos de prueba.
Tabla 5. Anlisis acreditados por FERMI de metales y microbiolgicos de agua en el
embalse El Infiernillo, Michoacn.
Anlisis de agua
Metales
Aluminio, mg/L
Arsnico, mg/L
Cadmio, mg/L

Mtodo analtico

NOM-117-SSA1-1994/EPA
6010B-1996 (I)
NOM-117-SSA1-1994/EPA
6010B-1996 (I)
NOM-117-SSA1-1994/EPA

Embalse El
Infiernillo

Schlotfeldt y
Alderman, 1995*

ND

0.100

ND

0.050

ND

0.004

13

Cobre, mg/L
Cromo, mg/L
Manganeso,
mg/L
Mercurio, mg/L
Nquel, mg/L
Plomo, mg/L

6010B-1996 (I)
NOM-117-SSA1-1994/EPA
6010B-1996 (I)
NOM-117-SSA1-1994/EPA
6010B-1996 (I)
NOM-117-SSA1-1994/EPA
6010B-1996 (I)
NOM-117-SSA1-1994/EPA
6010B-1996 (I)
EPA 6010B-1996 (I)
NOM-117-SSA1-1994/EPA
6010B-1996 (I)

ND

0.100

ND

0.050

0.0114

0.100

ND

0.050

ND

0.020

ND

0.030

Microbiolgicos
Bacterias
NOM-092-SSA1-1994
200
mesoflicas
aerobias,
UFC/mL
Coliformes
NMX-AA-042-1987
ND
fecales, NMP/100
mL
Salmonella spp.
NOM-114-SSA1-1994
Ausencia
en 25 mL
Staphylococcus
NOM-115-SSA1-1994
< 100
aureus, UFC/mL
* Schlotfeldt, H.J. y D.J. Alderman. 1995. What should I do? A practical guide
for the freshwater fish farmer. Bulletin of the European Association of Fish
Pathologists 15(4). 60 p.

4. Conclusiones
Los resultados obtenidos de los perfiles muestran que el embalse El Infiernillo
cuenta con condiciones ptimas en lo que respecta a la calidad del agua para el
crecimiento de la tilapia.
Conforme a los resultados obtenidos de inocuidad de musculo y agua se observa
que el embalse se encuentra libre de contaminacin de metales, qumicos y
microbiolgicos, por lo que se observo ausencia en la mayora de los anlisis o muy
bajas concentraciones.

Agradecimientos
Se agradece al Proyecto FORDECYT No. 172471 "Sistema Regional de Produccin
Intensiva de Tilapia para Mercados de Alto Valor Comercial e Impulsar el Desarrollo
Econmico y Social en el Occidente de Mxico" por el apoyo econmico otorgado
para la realizacin del presente trabajo.

Referencias

14
CECA. 1989. Criterios ecolgicos de calidad del agua. Publicada en el D.O.F. el 13
de diciembre de 1989.

El-Sayed, Abdel-Fattah M. 2006. Tilapia culture. Cabi Publishing Oxfordshire U.K. 277 p.
FAO. 1997. La pesca continental. Orientaciones tcnicas para la pesca responsable. No.
6 Roma, FAO. Dpto de Pesca. Mxico. 49 p.

Garca, A.; Calvario, O. 2008. Manual de Buenas Prcticas de Produccin Acucola de

Tilapia

para

la

Inocuidad

Alimentaria.

Programa

de

Inocuidad

de

Alimentos

SENASICA/SAGARPA, Mxico D.F., Mxico. 156 p. ISBN-13: 978-968-5384-14-8

Manzolillo, J. y Egea, O. 2001. Construcciones elctricas. Mxico.

Nandlal, S. and Pickering, T. 2004. Tilapia fi sh farming in Pacifi c Island countries.

Volume 1. Tilapia hatchery operation. Noumea, New Caledonia: Secretariat of the Pacific
Community. 32 pp.

Navarrete, S.N.A.; Aguilar, R. J.; Gonzlez, D. M.; Elas, F. G. 2007 a. Espectro trfico y
trama trfica de la ictiofauna del Embalse San Miguel Arco, Soyaniquilpan, Estado de
Mxico. Revista de Zoologa (18):1-12

Norma Oficial Mexicana NOM-114-SSA1-1994. Bienes y servicios. Mtodo para la

determinacin de salmonella en alimentos.

Norma Oficial Mexicana NOM-115-SSA1-1994. Bienes y Servicios. Mtodo para la

Determinacin de Staphylococcus Aureus en Alimentos.

Norma Oficial Mexicana NMX-AA-42-1987. Calidad del agua determinacion del numero
ms probable (nmp) de coliformes totales, coliformes fecales (termotolerantes) y
escherichia coli presuntiva.

Norma Oficial Mexicana NOM-117-SSA1-1994. Bienes y servicios. Mtodo de prueba

para la determinacin de Cadmio, Arsnico, Plomo, Estao, Cobre, Fierro, Zinc y
Mercurio en alimentos, agua potable y agua purificada por espectrometra de absorcin
atmica.

15
Norma Oficial Mexicana NOM-092-SSA1-1994, bienes y servicios. Mtodo para la cuenta
de bacterias aerobias en placa.

Norma Oficial Mexicana NOM-242-SSA1-2009, Productos y servicios. Productos de la

pesca frescos, refrigerados, congelados y procesados. Especificaciones sanitarias y
mtodos de prueba.

Saavedra Martnez M. 2006. Manejo del cultivo de tilapia. Managua, Nicaragua.

Shlotfeldt, H.J. y D.J. Alderman. 1995. What should I do? A practical guide for the
freshwater fi sh farmer. Bulletin of the European Association of Fish Pathologists 15(4). 60
p.

Toledo, S.; Garca, M. 2000. Nutricin y alimentacin de tilapia cultivada en Amrica

latina y el Caribe. La Habana, Cuba.

Vega, A. 2012. Reservas Ecolgicas en Mxico. Mxico.

Wicki. G.A. 1997. Estudio de desarrollo y produccin de tilapia (Oreochromis niloticus).

Secretaria de Agricultura, Pesca y Alimentacin. Subsecretaria de Pesca, Buenos Aires
Argentina. 11 p.

CONSIDERACIONES DE CALIDAD E INOCUIDAD PARA EL CULTIVO DE TILAPIA

(Oreochromis niloticus) EN EL EMBALSE San Rafael, NAYARIT

Diana Beatriz Flores-Peuelas1; Miguel Angel Snchez-Rodrguez2; Omar CalvarioMartnez2+

1,

Instituto Tecnolgico de Mazatln/

Calle Corsario 1 No. 203 Col Uras CP 82070, AP 757 Mazatln,
SIN/diana_fp9@hotmail.com
2,2+Centro de Investigacin en Alimentacin y Desarrollo, A.C.
Unidad Mazatln en Acuicultura y Manejo Ambiental/Av. Sbalo-Cerritos s/n. Estero
del Yugo Mazatln, SIN/ocalvario@ciad.mx Tel.: (669) 9 89 87 00 Fax: (669) 9 89 87
00 01 Laboratorio de Qumica y Productividad Acutica
RESUMEN
En el presente trabajo se evaluaron las condiciones de calidad del agua superficial
para el cultivo de tilapia en el embalse San Rafael, ubicada en el estado de Nayarit y
as determinar si estas son ptimas para el cultivo de tilapia (Oreochromis
niloticus). Para llevar a cabo dicho estudio se establecieron seis estaciones de
muestreo de agua a lo largo del embalse, en tres periodos de muestreo (27-11-2013,
15-05-2013 y 30-06-2013). La metodologa utilizada para la medicin de los perfiles
de calidad del agua: temperatura, pH, salinidad, conductividad elctrica, oxigeno
disuelto y % de saturacin de oxgeno fueron medidos por medio de una sonda
multiparametrica, as como tambin se evalu por medio de un laboratorio
certificado la inocuidad del agua y musculo en el embalse San Rafael. Conforme a
los resultados obtenidos para la mayora de las estaciones muestran que en ambos
perodos de muestreo el agua es favorable para el cultivo de la tilapia.
Palabras Clave: Calidad e Inocuidad del agua; tilapia; Nayarit; embalse.

1. Introduccin
En Mxico la acuicultura representa la opcin ms viable que existe en la actualidad para
alcanzar la sustentabilidad y seguridad alimentaria de los mexicanos, tambin presenta
un alternativa para el desarrollo rural en el pas (Lugo,2012).

2
La produccin nacional de tilapia cerr el ao 2012 con 75 mil 915 toneladas, lo cual
representa un valor comercial de mil 146 millones de pesos, lo que sita a esta actividad
comercial en la quinta posicin pesquera y acucola del pas y en la tercera en valor de
produccin de acuerdo a estimaciones de la Comisin Nacional de Acuacultura y Pesca
(Garca y Calvario, 2008).
La demanda que ha tenido el cultivo de tilapia (Oreochromis niloticus) en los ltimos
aos, se debe principalmente al excelente sabor de su carne, a la gran resistencia fsica,
al crecimiento acelerado, elevado potencial reproductor, y a la adaptacin de esta especie
al cautiverio, lo cual permite a estos organismos desarrollarse en aguas dulces o
salobres, as como en aguas poco oxigenadas (NICOVITA, 2010).
La acuicultura se encuentra sujeta a la aplicacin de regulaciones y cambios en las
legislaciones nacionales e internacionales relacionadas con la produccin de alimentos
aptos para el consumo humano. El objetivo de estas leyes es que todas las industrias
productoras de alimentos asuman la responsabilidad de garantizar productos seguros
para el consumidor (Alonso, 2009).
De acuerdo al (Codex Alimentarius, 1993) el concepto de inocuidad es la garanta de
que un alimento no causar dao al consumidor cuando sea preparado o ingerido de
acuerdo con el uso al que se destine. Esto significa que el alimento preparado en forma
inocua ser sano y no producir enfermedad en el consumidor, es decir, que la materia o
materias primas utilizadas no sern capaces de producir enfermedad, as como no lo
sern los procedimientos empleados durante su elaboracin (ej.: conservas, ahumados,
seco, seco-salado, marinados, cocido, etc.).
En lo que respecta a la calidad del agua esta se refiere a las caractersticas o
propiedades (atributos) fsicas, qumicas y biolgicas que hacen susceptibles de usar en
cualquier actividad productiva, estas caractersticas o parmetros merecen especial
atencin al momento de plantear proyectos productivos acuiculturales.
Por este motivo, el presente trabajo busca evaluar la calidad del agua en el embalse San
Rafael (Nayarit), para determinar si esta es apta para el cultivo de tilapia.

2. Materiales y Mtodos
El embalse San Rafael se ubica en el estado de Nayarit, sobre el cauce del ro Santiago
en el municipio El Nayar, 16.8 km aguas debajo de la presa Hidroelctrica Aguamilpa a
45 km de Tepic (Fig.1).

Figura 1. Ubicacin del embalse San Rafael, Nayarit.

Dentro de este embalse se establecieron seis estaciones de muestreo a lo largo del

embalse, como se muestra figura 2. El monitoreo de la columna de agua y toma de
muestra se realizo en dos perodos de muestreo, el primero el 27 de noviembre del 2012
el segundo el 15 de mayo del 2013 y el tercero el 30 de junio del 2013.

Figura 2. Ubicacin de las 6 estaciones de muestreo.

La medicin de la concentracin de temperatura, pH, salinidad, conductividad elctrica y

oxigeno disuelto se llev a cabo por medio de una sonda multiparamtrica Hydrolab

4
DS5X (Tabla 1), en toda la columna de agua hasta lo ms profundo de la presa en cada
estacin de muestreo.
Tabla 1. Parmetros de calidad del agua y mtodo analtico que se utiliz.
Anlisis de agua

Mtodo analtico

Tiempo de preservacin

Temperatura

Hydrolab DS5X

--

pH

Hydrolab DS5X

--

Salinidad

Hydrolab DS5X

--

Conductividad elctrica

Hydrolab DS5X

--

Oxgeno disuelto

Hydrolab DS5X

--

% de saturacin de
oxigeno

Hydrolab DS5X

--

Para determinar la inocuidad del agua y musculo, se realizaron colectas de muestras de

agua y msculo de tilapia para los anlisis de metales, qumicos y microbiolgicos,
exceptuando los qumicos en las muestras de agua. La colecta de muestras sigui las
instrucciones recomendadas por el personal del laboratorio de anlisis de muestras
(Laboratorio FERMI) acreditado por la Entidad Mexicana de Acreditacin (EMA). Las
tcnicas utilizadas se muestran en las tablas 2 y 3.
Tabla 2. Anlisis acreditados de metales y microbiolgicos de agua por el laboratorio
FERMI
Anlisis de agua
Mtodo analtico

Metales
Aluminio, mg/L
Arsnico, mg/L
Cadmio, mg/L
Cobre, mg/L
Cromo, mg/L
Manganeso, mg/L
Mercurio, mg/L
Nquel, mg/L
Plomo, mg/L
Microbiolgicos
Bacterias mesoflicas aerobias,
UFC/mL

NOM-117-SSA1-1994/EPA 6010B-1996 (I)

NOM-117-SSA1-1994/EPA 6010B-1996 (I)
NOM-117-SSA1-1994/EPA 6010B-1996 (I)
NOM-117-SSA1-1994/EPA 6010B-1996 (I)
NOM-117-SSA1-1994/EPA 6010B-1996 (I)
NOM-117-SSA1-1994/EPA 6010B-1996 (I)
NOM-117-SSA1-1994/EPA 6010B-1996 (I)
EPA 6010B-1996 (I)
NOM-117-SSA1-1994/EPA 6010B-1996 (I)
NOM-092-SSA1-1994

Coliformes fecales, NMP/100 mL

Vibrio cholerae. en 50 mL
Salmonella spp. en 25 mL
Staphylococcus aureus,
UFC/mL

NMX-AA-042-1987
Compendium of meth for the microbiolog
examin of food
NOM-114-SSA1-1994
NOM-115-SSA1-1994

Tabla 3. Anlisis acreditados de metales, qumicos y microbiolgicos en musculo de

tilapia por el laboratorio FERMI

Anlisis de msculo de Tilapia

Metales
Cadmio, mg/kg
Plomo, mg/kg
Qumicos
Nitrgeno amoniacal, mg/100g
Microbiolgicos
Coliformes fecales, NMP/g
Salmonella spp. en 25 g
Staphylococcus aureus,
UFC/g

Mtodo analtico

NOM-242-SSA1-2009. A.N.B10
NOM-242-SSA1-2009. A.N.B10
NOM-242-SSA1-2009. A.N.B9
NMX-242-SSA1-2009. A.N.B17
NOM-242-SSA1-2009. A.N.B14
NOM-242-SSA1-2009. A.N.B15

3. Anlisis y discusin de resultados

Perfiles
Los perfiles obtenidos con ayuda de una sonda multiparmetro marca Hach modelo
DS5X, nos proporcion varias lecturas de parmetros bsicos de calidad del agua en
cada estacin de muestreo, se cuenta con tres periodos de muestreos, el primero
correspondiente al 27 de noviembre del 2012, el segundo correspondiente al 15 de
mayo del 2013 y el tercero el 30 de junio del 2013, los cuales se muestran a
continuacin.
Perfiles de la presa derivadora San Rafael del 27 de Noviembre del 2012

Temperatura
En el embalse San Rafael la temperatura se mantuvo estable, con muy poca variacin
en cuanto a la profundidad, encontrndose la temperatura ms alta cerca de la
superficie, aproximadamente con 28.98 C, esto fue en la estacin 6, atribuido a la
mayor irradiacin solar que se da en la superficie, pero conforme va bajando, va
descendiendo la temperatura hasta niveles de 26.36C, la temperatura ms baja que

6
se encontr, que fue en la estacin 1 y en la parte ms profunda de este punto de
muestreo (6 metros). Estos niveles cumplen con las recomendaciones establecidas
por El-Sayed (2006), quien establece que las condiciones ptimas de temperatura
para llevar a cabo el cultivo de tilapia son 25 30 C, en tanto que Saavedra Martnez
(2006) establece un rango de 25 32 C, ambas condiciones se presentan en todas
las estaciones de muestreo y a cualquier profundidad, por lo que desde el punto de
vista de esta medicin, la presa San Rafael si es considerada apta para el cultivo de
tilapia.
Potencial hidrogeno (pH)
En el embalse San Rafael los valores de pH se mostraron muy estables, ya que estos
valores oscilan entre 6.89 y 8.04. En las estaciones 1, 2, 4 y 5, se muestra una
tendencia que a partir de los 2 metros de profundidad, el pH va disminuyendo
conforme va aumentando la profundidad, mientras que en las zonas cercanas a la
superficie el pH aumenta. Segn Nandlal and Pickering (2004), los valores ptimos de
pH para el cultivo de tilapia es en un rango de 6.5 a 9, mientras Wicki (1997)
establece valores de 6.5 a 8.5, lo cual nos muestra que los valores obtenidos en San
Rafael entran en estos rangos, en cualquier estacin y profundidad. El valor mnimo
de pH se encontr en la estacin 6 a una profundidad de 11 metros profundidad
mxima de la estacin y del embalse), mientras que el valor mximo tambin se
registr en la misma estacin, pero en la superficie.
Salinidad
En el embalse San Rafael este parmetro oscila entre los rangos 0.09 UPS y 0.10
UPS, como se puede ver esta diferencia es mnima, solo de 0.01 UPS, la diferencia
de este parmetro no muestra gran diferencia en cuanto a la profundidad, lo cual se
atribuye a la poca profundidad del embalse (no mayor a 11 metros). El-Sayed (2006)
establece que la salinidad ptima para el cultivo de tilapia es de 5 a 10 UPS, situacin
que no se cumple para San Rafael, ya que los valores registrados estn por debajo,
por lo que, aunque el lugar no tiene condiciones ptimas para el cultivo de tilapia, esta
si puede crecer en aguas de muy baja salinidad.

En el embalse San Rafael, este parmetro al igual que la salinidad, registro valores

arroyo que llega a

profundidad de 11 metros (profundidad mxima de la estacin y del embalse). Es
importante sealar que las estaciones 5 y 6, estaciones ubicadas cerca de la cortina y
de mayor profundidad, mostraron tendencias de conductividad elctrica a
incrementarse conforme aumentaba la profundidad.

Oxigeno disuelto
Garca Ortega y Calvario Martnez (2008), describen una concentracin de oxgeno
disuelto > 4.5 mg/L como el valor ptimo para el cultivo de tilapia. En el embalse San
Rafael se presentaron estas condiciones entre la superficie y los primeros dos metros
de profundidad para las estaciones 1, 2 y 4, mientras que la estacin 5 lo presento
hasta los 4 metros de profundidad, finalmente la estacin 6 se observa un valor mayor
de 4.5 mg/L de oxgeno disuelto a una profundidad no mayor de 6 metros. De manera
general se puede decir que los valores mayores a 4.5 mg/L se presentaron muy
cercanos a la superficie en todas las estaciones. Los valores de oxgeno disuelto
oscilan entre los 2.26 mg/L en la estacin 6 a 11 metros de profundidad (zona ms
profunda de la estacin y del embalse) y 9.21 mg/L en la estacin 6 en la superficie.
Por lo tanto, segn las recomendaciones establecidas por Garca Ortega y Calvario
Martnez, San Rafael no es un lugar ptimo para el cultivo de la tilapia, por los niveles
tan bajos de oxgeno a cortas profundidades. Desde el punto de vista de calidad del
agua, los criterios ecolgicos de calidad del agua, CECA (1989) en lo referente a la
proteccin de la vida acutica en agua dulce establecen que un agua debe presentar
valores de > 5 mg/L, situacin que se cumple nicamente por encima de los 2 metros
en este embalse.
% de saturacin de oxigeno
En el embalse San Rafael este parmetro oscila entre los rangos 28.6 % y 121.6 %,
como se observa la diferencia de % de saturacin de oxigeno es alta, con una
diferencia de 93 % Sat., se observa en la estacin 1, 2, 4, 5 y 6 a partir de los 2
metros de profundidad el % de saturacin es menor de 70, y va bajando su valor al
aumentar su profundidad, mientras que los valores ms alto de saturacin, mayores al
100% se dan en las estaciones 1,2 y 6 los cuales se presentan en la superficie, el
valor mnimo de % de saturacin lo encontramos en la estacin 6 a una profundidad
de 11 metros (zona ms profunda de la estacin), mientras que el valor mximo se
encuentra tambin en la estacin 6, solo que en la parte superficial.
Perfiles de la presa derivadora San Rafael del 15 de Mayo del 2013
Temperatura
Para este periodo de estudio, en el embalse San Rafael la temperatura registro una
mayor variacin respecto al periodo anterior, con una variacin de aproximada a 4 C.
La temperatura disminuye conforme aumenta la profundidad, encontrndose la
temperatura ms alta en la zona superficial de la estacin 1, con un valor de 28.70 C,
lo cual es atribuido a la irradiacin solar. Sin embargo, conforme aumenta la
profundidad, se observa un descenso en la temperatura, llegando a valores de hasta
24.31C (Estacin 1, en la zona ms profunda de esta estacin a 9 metros).
Segn El-Sayed (2006), establece que las condiciones ptimas de temperatura para
llevar a cabo el cultivo de tilapia son 25 30 C, en tanto que Saavedra Martnez
(2006) establece un rango de 25 32 C, ambas condiciones se presentan hasta
cierta profundidad en el embalse San Rafael, debido a que en las estaciones 1 y 2,

8
por debajo de los 4 m de profundidad, se tienen temperaturas inferiores a los 25C, en
tanto que para las estaciones 4, 5 y 6 se tienen estos valores por debajo de los 8
metros aproximadamente. Por lo que, desde el punto de vista de esta medicin, la
presa San Rafael cuenta parcialmente con estas recomendaciones, sin embargo las
temperaturas por debajo de 25C solo disminuyen hasta un mnimo de 24.31,
concluyendo que la temperatura no es un problema para el cultivo de tilapia en este
embalse hasta este periodo.
Potencial hidrogeno (pH)
En el embalse San Rafael los parmetros de pH se mostraron poco variables, con
valores oscilantes entre 6.5 y 7.82. En las estaciones 1,2,4,5 y 6, el pH baja conforme
aumenta la profundidad, comportamiento no observado en la estacin 3, debido a que
el pH se incrementa en la parte ms profunda (2 metros), siendo importante sealar
que esta estacin no es profunda, adems que corresponde a un pequeo arrollo que
llega al embalse San Rafael. El valor mnimo de pH se encontr en la estacin 5 a
una profundidad de 11 metros (profundidad mxima de la estacin), mientras que el
valor mximo se encuentro en la estacin 6 sobre la superficie.
Saavedra Martnez (2006), establece valores ptimos de pH para el cultivo de tilapia
de 6 a 9, en tanto que Nandlal and Pickering (2004), mencionan un rango de 6.5 a 9,
mientras Wicki (1997) establece valores de 6.5 a 8.5, lo cual nos muestra que los
valores obtenidos en San Rafael para este segundo periodo de estudio entran en
estos rangos en cualquier estacin y profundidad, por lo que se puede decir que
desde el punto de vista de este parmetro, el agua en San Rafael es ptima para el
cultivo de tilapia.
Salinidad
En el embalse San Rafael este parmetro al igual que en el periodo anterior se
muestra muy poca variabilidad, con valores oscilantes entre 0.15 UPS y 0.16 UPS,
como se puede ver esta diferencia es de 0.01 UPS. Las estaciones 2, 4, 5 y 6 el valor
inicial de salinidad es de 0.15 en los primeros metros de profundidad, a partir de los 8
metros en adelante la salinidad aumenta hasta llegar a su valor mximo de 0.16 UPS.
En la estacin 1 no existe variacin de salinidad en toda la columna de agua, lo cual
podemos atribuir a que esta zona es la de mayor flujo de agua y por tanto existe una
buena mezcla de la columna, en tanto que la estacin 6 la salinidad varia hasta los 10
metros de profundidad, la cual es una estacin cercana a la cortina y es donde existe
la mayor profundidad (12 metros).
El-Sayed (2006) establece que la salinidad ptima para el cultivo de tilapia es de 5 a
10 UPS, situacin que no se cumple nuevamente para San Rafael, ya que los valores
registrados estn por debajo, por lo que, aunque el lugar no tiene condiciones ptimas
para el cultivo de tilapia, esta si puede crecer en aguas de muy baja salinidad.
Conductividad elc

9
(excepto la 3 que es el aporte de un arroyo) a partir del segundo metro de profundidad
la conductividad elctrica va en aumento hasta la parte ms profunda de cada
estacin. Es importante sealar que en la estacin 1 y 2 ocurre una disminucin en la
conductividad en el primer metro de profundidad, para posteriormente se incremente
a partir del segundo metro, esto se atribuye, a que estas dos estaciones estn
ubicadas en una zona de mayor dinmica del agua. El valor mnimo de conductividad
elctrica se encontr en la estacin 1 a una profundidad de un metro, mientras que el
valor mximo se encuentro en la estacin 6 a una profundidad de 12 metros
(profundidad mxima de la estacin y del embalse).
Oxigeno disuelto
Saavedra Martnez (2006), describen una concentracin de oxgeno disuelto de 5-9
mg/L como el valor ptimo para el cultivo de tilapia. En el embalse San Rafael se
presentaron estas condiciones en todas las estaciones del embalse (excepto la 3
ubicada en la salida de un arroyo) 1, 2, 4, 5 y 6 pero a partir de los 4 metros de
profundidad hasta el fondo de cada estacin. Sin embargo, en todas las estaciones se
registraron concentraciones superiores a los 9 mg/L de oxgeno disuelto desde la
superficie hasta los 2 metros de profundidad aproximadamente. De manera general,
los valores de oxgeno disuelto oscilaron entre 5.04 mg/L y 15.71 mg/L, como se
puede observar, la variacin entre las concentraciones es alta (casi 10 mg/L). El valor
mnimo de oxgeno disuelto se observ en la estacin 6, a 12 metros de profundidad
(zona ms profunda de la estacin y del embalse), mientras que el valor mximo se
encuentro en la estacin 2, a 1 metro de profundidad. Es importante sealar que esta
zona cumple tambin para este periodo de estudio con el lmite establecido por los
criterios ecolgicos de calidad del agua, CECA (1989) en lo referente a la proteccin
de la vida acutica en agua dulce de > 5 mg/L.
% de saturacin de oxigeno
En el embalse San Rafael este parmetro oscila entre los rangos 61.7 % y 202.8 %,
como se observa la diferencia de % de saturacin de oxigeno es alta con una
diferencia de 140 %, se observa en todas las estaciones como el porcentaje de
saturacin de oxgeno va disminuyendo conforme aumenta la profundidad. Se
observa como valores de 120% o menos, se dan en profundidades de 2 metros en
adelante, mientras que los valores ms altos de saturacin de oxigeno como 140% o
mayores, se dan en la superficie. El valor mnimo de % de saturacin lo encontramos
en la estacin 6, a 12 metros de profundidad (zona ms profunda de la estacin y del
embalse), mientras que el valor mximo se encuentra en la estacin 2, a 1 metro de
profundidad.

10

Perfiles de la presa derivadora San Rafael del 30 de Junio del 2013

Temperatura
Conforme a este periodo de estudio, en la Presa derivadora San Rafael la
temperatura registro una menor variacin respecto al periodo anterior, con una
variacin de poco ms de 2 C. La temperatura disminuye conforme aumenta la
profundidad, este comportamiento se presenta en todas las estaciones,
encontrndose la temperatura ms alta en la zona superficial de la estacin 3, con un
valor de 31.64 C, lo cual es atribuido a la irradiacin solar. Sin embargo, conforme
aumenta la profundidad, ocurre un descenso en la temperatura, llegando a valores de
hasta 26.52C (Estacin 2, en la zona ms profunda de esta estacin a 9.83 metros).
Segn El-Sayed (2006), establece que las condiciones ptimas de temperatura para
llevar a cabo el cultivo de tilapia son 25 30 C, en tanto que Saavedra Martnez
(2006) establece un rango de 25 32 C, ambas condiciones se presentan a
diferentes profundidades en la Presa derivadora San Rafael, todas las estaciones a
todas profundidades entran en el rango establecido por Saavedra Martnez,
concluyendo que la temperatura no es un problema para el cultivo de tilapia en este
embalse hasta este periodo. Los perfiles de temperatura para el Presa derivadora San
Rafael conforme al muestreo del 30 de junio 2013 se muestran en la Figura 24.
Potencial hidrogeno (pH)
En la Presa derivadora San Rafael los parmetros de pH variaron un poco, en todas
las estaciones excepto la estacin 3, descendi el pH poco menos de 1 unidad
mientras aumentaba la profundidad, caso contrario en la estacin 3 en la cual muestra
un pH bajo en cuanto a la profundidad ya que no rebasa el metro de profundidad y
presenta el valor ms bajo de todos con 7.1, mientras que el valor ms alto obtenido
es 8.34 en la estacin 6 en zona superficial de esta, cabe destacar que la estacin 3
la cual presenta un comportamiento diferente es una estacin con poca profundidad y
est situada en un pequeo arrollo que llega a la Presa derivadora San Rafael.
Saavedra Martnez (2006), establece valores ptimos de pH para el cultivo de tilapia
de 6 a 9, en tanto que Nandlal and Pickering (2004), mencionan un rango de 6.5 a 9,
mientras Wicki (1997) establece valores de 6.5 a 8.5, lo cual indica que todos los
valores presentados en las estaciones a diferentes profundidades entran en los
rangos establecidos, por lo que se puede decir que desde el punto de vista de este
parmetro, el agua en San Rafael es ptima para el cultivo de tilapia.
Salinidad
En el embalse San Rafael este parmetro al igual que en los perodos anteriores se
muestra muy poca variabilidad, con valores oscilantes entre 0.17 UPS y 0.18 UPS,
como se puede ver esta diferencia es de 0.01 UPS. En las estaciones 1,2,4,5 y 6 se
presenta el valor mayr que fue 0.18 UPS a cualquier profundidad, mientras que en la
estacin 3 se presenta el valor menor que es 0.17 UPS en cualquier profundidad de
esa estacin,

11
El-Sayed (2006) establece que la salinidad ptima para el cultivo de tilapia es de 5 a
10 UPS, situacin que no se cumple nuevamente para San Rafael, ya que los valores
registrados estn por debajo, por lo que, aunque el lugar no tiene condiciones ptimas
para el cultivo de tilapia, esta si puede crecer en aguas de muy baja salinidad.

la conductividad elctrica aumenta conforme aumenta la temperatura, en el caso de

todas las estaciones excepto la estacin 3 la cual est situada en un arrollo en la
misma presa, se aprecia como a partir de los primeros metros de profundidad la
conductividad aumenta hasta llegar a los valores ms altos, el valor mayor de 368
mientras que el valor menor obtenido se presento en la estacin 3 en la zona
stacin 2, 4, 5 y 6 ocurre una
disminucin de conductividad elctrica, esto puede deberse a que en estas zonas
ocurren mayores movimientos en las aguas.
Oxigeno disuelto
En el embalse San Rafael se present una variacin amplia de oxigeno disuelto, ya
que el valor ms alto de 10.02 mg/L se registr en la estacin 6 en la zona
superficial no mayor a medio metro de profundidad, conforme al valor mnimo
obtenido de 0.87 mg/L se registro en la estacin 2 a la profundidad mayor en esa
estacin que fue 9.83 metros, Saavedra Martnez (2006), describen una
concentracin de oxgeno disuelto de 5-9 mg/L como el valor ptimo para el cultivo de
tilapia, estos valores se presentan en todas las estaciones desde la zona superficial
hasta profundidades menores a 4 metros, conforme la profundidad aumenta el
oxigeno disuelto en el agua disminuye, sin embargo en todas las estaciones excepto
1 y 3, se presentaron valores mayores a 9 mg/L en las zonas superficiales. Cabe
sealar que esta zona cumple tambin para este periodo de estudio con el lmite
establecido por los criterios ecolgicos de calidad del agua, CECA (1989) en lo
referente a la proteccin de la vida acutica en agua dulce de > 5 mg/L.
% de saturacin de oxigeno
En la Presa derivadora San Rafael este parmetro oscila entre los rangos 11 % que
es el menor el cual se obtuvo en la estacin 2 a 9.83 metros de profundidad, y 133.7
% el valor ms alto obtenido el cual se ubica en la estacin 6 en la zona superficial no
mayor a medio metro de profundidad, la diferencia de % de saturacin de oxigeno es
poco alta con una diferencia de 122.7 %, en todas las estaciones de muestreo se
observa cmo va decayendo el % de saturacin mientras aumenta la profundidad, se
observa cmo a partir de los 2 metros de profundidad en adelante se obtienen valores
menores a 80% de saturacin de oxgeno en todas las estaciones excepto la estacin
3 y 5, los valores ms altos de 100 a 140 % se ubican desde la zona superficial a los
metros de profundidad.

12
Parmetros considerados para definir la inocuidad en el musculo de la tilapia
La colecta de musculo de tilapia y agua se realiz el 27 de noviembre del 2012 siguiendo
los lineamientos establecidos por el laboratorio FERMI (Laboratorio acreditado por la
Entidad Mexicana de Acreditacin, EMA). En lo que respecta a la muestra de agua, esta
sigui las recomendaciones establecidas por Schlotfeldt y Alderman (1995), como se
puede observar en la Tabla 4, solo el aluminio de los metales, supero la concentracin
limite recomendable de 0.100 mg/L, presentado una concentracin de 2.32 mg/L. En lo
que respecta a los anlisis microbiolgicos, no se present ningn problema con
Coliformes fecales, Salmonella, Vibrio cholerae y Staphylococcus aureus.
Por otro lado, los resultados de la muestra de musculo de tilapia del embalse se muestran
en la Tabla 5. Como se puede observar a detalle en dicha tabla, tanto los resultados de
metales, como los qumicos y microbiolgicos en musculo de tilapia, ninguno sobrepasa
el lmite mximo permisible de la norma NOM-242-SSA1-2009. Productos y servicios.
Productos de la pesca frescos, refrigerados, congelados y procesados. Especificaciones
sanitarias y mtodos de prueba.
Tabla 4. Anlisis acreditados por FERMI de metales y microbiolgicos de agua en la
Presa Derivadora San Rafael, Nayarit
Anlisis de
agua
Metales
Aluminio,
mg/L
Arsnico,
mg/L
Cadmio, mg/L
Cobre, mg/L
Cromo, mg/L
Manganeso,
mg/L
Mercurio,
Nquel, mg/L
Plomo, mg/L
Microbiolgicos
Bacterias
mesoflicas
aerobias,
UFC/mL

Mtodo analtico

Embalse San
Rafael, Nayarit

Schlotfeldt
y Alderman,
1995*

NOM-117-SSA1-1994/EPA
6010B-1996 (I)
NOM-117-SSA1-1994/EPA
6010B-1996 (I)
NOM-117-SSA1-1994/EPA
6010B-1996 (I)
NOM-117-SSA1-1994/EPA
6010B-1996 (I)
NOM-117-SSA1-1994/EPA
6010B-1996 (I)
NOM-117-SSA1-1994/EPA
6010B-1996 (I)
NOM-117-SSA1-1994/EPA
6010B-1996 (I)
EPA 6010B-1996 (I)
NOM-117-SSA1-1994/EPA
6010B-1996 (I)

2.3200

0.100

ND

0.050

ND

0.004

ND

0.100

ND

0.050

0.0988

0.100

ND

0.050

ND
ND

0.020
0.030

NOM-092-SSA1-1994

240000

13

Coliformes
fecales,
NMP/100 mL
Vibrio
cholerae. en 50
mL
Salmonella
spp. en 25 mL

NMX-AA-042-1987

ND

Compendium of meth for the

microbiolog examin of food

Ausencia

NOM-114-SSA1-1994

Ausencia

NOM-115-SSA1-1994
< 100
Staphylococcus
aureus, UFC/mL
* Schlotfeldt, H.J. y D.J. Alderman. 1995. What should I do? A practical guide for the
freshwater fish farmer. Bulletin of the European Association of Fish Pathologists 15(4).
60 p.

Tabla 5. Anlisis acreditados por FERMI de metales, qumicos y microbiolgicos en

musculo de tilapia en la Presa Derivadora San Rafael, Nayarit.
Anlisis de
msculo de
Tilapia
Metales
Cadmio,
mg/kg
Plomo, mg/kg
Qumicos
Nitrgeno
amoniacal,
mg/100g
Microbiolgicos
Coliformes
fecales, NMP/g
Salmonella
spp. en 25 g

Mtodo analtico

Embalse San
Rafael, Nayarit

NOM-242SSA1-2009*

NOM-242-SSA1-2009.
A.N.B10
NOM-242-SSA1-2009.
A.N.B10

ND

0.5

ND

0.5

NOM-242-SSA1-2009. A.N.B9

20.78

35

NMX-242-SSA1-2009.
A.N.B17
NOM-242-SSA1-2009.
A.N.B14
NOM-242-SSA1-2009.
A.N.B15

3.6

400

Ausente

Ausente

< 100

1000 UFC/g

Staphylococcus
aureus, UFC/g
* NORMA Oficial Mexicana NOM-242-SSA1-2009, Productos y servicios. Productos de
la pesca frescos, refrigerados, congelados y procesados. Especificaciones sanitarias y
mtodos de prueba.

14

5. Conclusiones
Conforme a los resultados obtenidos de parmetros de calidad del agua se concluye que
el embalse San Rafael cuenta con condiciones ptimas para el cultivo de tilapia respecto
a calidad del agua.
De acuerdo a los resultados de inocuidad en musculo y agua se puede establecer
predominantemente como apta ya que en la mayora de los parmetros se mantuvieron
dentro de los rango establecidos.

Referencias Bibliogrficas
Alonso, F. T. 2009.Inocuidad alimentaria y enfermedades transmitidas por alimentos,
Pg. 2.
CECA. 1989. Criterios ecolgicos de calidad del agua. Publicada en el D.O.F. el 13 de
diciembre de 1989.

Garca O. A. y Calvario M. O. 2008. Manual de Buenas Prcticas de Produccin Acucola

de Tilapia para la Inocuidad Alimentaria. Programa de Inocuidad de Alimentos
SENASICA/SAGARPA, Mxico D.F., Mxico. 156 p. ISBN-13: 978-968-5384-14-8

Lugo,

R.

2012.

Tierra

Fertil.

La

acuicultura

contra

la

escasez

de

alimentos:http://tierrafertil.com.mx/index.php?option=com_content&view=article&id=118:la
-acuicultura-contra-la-escasez-de-alimentos&catid=8:noticias&Itemid=22.

Fecha

de

acceso 29 diciembre 2012.

Nandlal, S. and Pickering, T. 2004. Tilapia fi sh farming in Pacifi c Island countries.

Volume 1. Tilapia hatchery operation. Noumea, New Caledonia: Secretariat of the Pacific
Community. 32 pp.

NICOVITA.

2010.

Manual

de

crianza

de

tilapia.

Nicovita.

http://www.industriaacuicola.com/biblioteca/Tilapia/Manual%20de%20crianza%20de%20ti
lapia.pdf. Fecha de acceso 29 diciembre 2012.

Norma Oficial Mexicana NOM-114-SSA1-1994. Bienes y servicios. Mtodo para la

determinacin de salmonella en alimentos.

15
Norma Oficial Mexicana NOM-115-SSA1-1994. Bienes y Servicios. Mtodo para la
Determinacin de Staphylococcus Aureus en Alimentos.

Norma Oficial Mexicana NOM-117-SSA1-1994. Bienes y servicios. Mtodo de prueba

para la determinacin de Cadmio, Arsnico, Plomo, Estao, Cobre, Fierro, Zinc y
Mercurio en alimentos, agua potable y agua purificada por espectrometra de absorcin
atmica.

Norma Oficial Mexicana NOM-092-SSA1-1994, bienes y servicios. Mtodo para la cuenta

de bacterias aerobias en placa.

Norma Oficial Mexicana NOM-242-SSA1-2009, Productos y servicios. Productos de la

pesca frescos, refrigerados, congelados y procesados. Especificaciones sanitarias y
mtodos de prueba.

Norma Oficial Mexicana NMX-AA-42-1987. Calidad del agua determinacion del numero
ms probable (nmp) de coliformes totales, coliformes fecales (termotolerantes) y
escherichia coli presuntiva.

Saavedra Martnez M., Manejo del cultivo de tilapia. Managua, Nicaragua, 2006
El-Sayed, Abdel-Fattah M. 2006. Tilapia culture. Cabi Publishing Oxfordshire U.K. 277 p.

Wicki. G.A. 1997. Estudio de desarrollo y produccin de tilapia (Oreochromis niloticus).

Secretaria de Agricultura, Pesca y Alimentacin. Subsecretaria de Pesca, Buenos Aires
Argentina. 11 p.