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La locura individual es inmune a todas las consecuencias de la locura colectiva Un mundo feliz (Aldous Huxley)

ndice Captulo I: Inmunologa


1.1.

INTRODUCCIN A LA INMUNOLOGA

Inmunidad activa y pasiva


Resumen de inmunidad adaptativa
Hematopoyesis
rganos linfoides

4
4
7
8

INMUNIDAD INNATA

Receptores en inmunidad innata


Toll-like Receptors (TLR)
Barreras epiteliales
Clulas Linfoides Innatas (ILC)
Reclutamiento de leucocitos
Macrfagos
Sistema del complemento
Efectos locales y sistmicos de citoquinas en inflamacin
Interferones

10
11
13
13
14
15
16
17
17

ANTGENOS Y ANTICUERPOS

18

Antgenos
Inmunoglobulinas

18
20

GENERACIN DE DIVERSIDAD DE INMUNOGLOBULINAS

24

Diversidad en B Cell Receptors (BCR)


Diversidad en T Cell Receptors (TCR)

24
26

1.5.

COMPLEJO MAYOR DE HISTOCOMPATIBILIDAD (MHC)

27

1.6.

PROCESAMIENTO Y PRESENTACIN DE ANTGENOS

30

Clulas presentadoras de antgenos


Vas de procesamiento y presentacin de antgenos

31
32

RECEPTORES DE LINFOCITOS T Y B

35

Reconocimiento de antgenos en la respuesta inmune adaptativa


Receptor de linfocitos B (BCR)
Receptor de linfocitos T (TCR)
Sinapsis inmunolgica

35
36
36
37

CITOQUINAS Y QUIMIOQUINAS

39

Propiedades generales de las citoquinas


Funciones y clasificacin de citoquinas
Regulacin de citoquinas
Receptores de citoquinas
Citoquinas en subpoblaciones de linfocitos TH
Quimioquinas
Funciones de citoquinas importantes

39
40
42
42
43
43
43

1.2.

1.3.

1.4.

1.7.

1.8.

[1]

1.9.

MADURACIN DE LINFOCITOS

45

Maduracin de linfocitos B
Tolerancia central de linfocitos B
Subtipos de linfocitos B
Maduracin de linfocitos T
Seleccin de linfocitos T en el timo
Tolerancia central de linfocitos T
Migracin de linfocitos T
Supresin bystander por linfocitos T regulatorios

46
48
48
49
51
52
54
54

1.10. ACTIVACIN DE LINFOCITOS T

56

Fases de la respuesta de linfocitos T


Sealizacin intracelular durante la activacin de linfocitos T
Subtipos de linfocitos T helper

1.11. ACTIVACIN DE LINFOCITOS B

56
60
62

65

Etapas de la respuesta inmune humoral


Subpoblaciones de linfocitos B y sus respuestas de anticuerpos
Sealizacin intracelular durante la activacin de linfocitos B
Respuestas funcionales post-activacin: encuentro con el antgeno
Migracin e interaccin de linfocitos T y B en los ganglios
Cambio de isotipo
Maduracin por afinidad
Inhibicin de actividad de linfocito B por receptores de FC

1.12. TOLERANCIA

65
66
68
69
70
71
72
73

74

Caractersticas generales de la tolerancia inmunolgica


Tolerancia de linfocitos T
Tolerancia de linfocitos B
Factores que determinan inmunogenicidad y tolerancia a antgenos proteicos
Sitios inmunoprivilegiados y tolerancia materno-fetal
Inmunidad, tolerancia y enfermedades autoinmunes

1.13. HOMING DE LINFOCITOS

74
75
78
78
79
80

82

Rutas de recirculacin de linfocitos


Rolling de leucocitos y migracin a travs de HEV
Interaccin leucocito-endotelio
Selectinas, integrinas y quimioquinas
Etapas de reclutamiento de leucocitos
Migracin de linfocitos T vrgenes y efectores

82
83
83
84
86
88

[2]

1.1.

INTRODUCCIN A LA INMUNOLOGA

Existen dos tipos de inmunidad en el organismo: innata y adaptativa (adquirida).


o Innata: primera respuesta a agentes extraos/patgenos (respuesta en horas).
o Adaptativa: actan despus de la respuesta innata, la cual es esencial para esta respuesta.
INNATA

ADAPTATIVA

CARACTERSTICAS
Especificidad
Diversidad de respuesta

Limitada y fija: solo para estructuras


compartidas por grupos de
microorganismos relacionados (PAMPs).
Limitada: codificada en la lnea
germinal.

Memoria inmunolgica

No.

No reactividad a lo propio
COMPONENTES
Barreras celulares y qumicas
Protenas de la sangre
Clulas

S.
Piel, epitelios mucosas, qumicos
antimicrobianos.
Complemento, otros.
Fagocitos (macrfagos, neutrfilos),
clulas NK.

Fig. 1: Inmunidad innata y adaptativa.

[3]

Muy diversa: para antgenos microbianos y


no microbianos.
Enorme: los receptores son producidos por
combinacin somtica de segmentos.
S: provoca respuestas ms rpidas ante
una infeccin repetida.
S.
Linfocitos en epitelios, anticuerpos
secretados en superficie de epitelios.
Anticuerpos.
Linfocitos.

INMUNIDAD ACTIVA Y PASIVA

Pasiva: cuando se inyectan o traspasan anticuerpos o linfocitos T desde animales inmunes a infectados. Tiene
especificidad, pero no memoria.
Activa: cuando se adquiere una infeccin o se vacuna con microbios atenuados o fragmentos del microbio. Tiene
especificidad y memoria.

Fig. 2: Inmunidad activa y pasiva.

RESUMEN DE INMUNIDAD ADAPTATIVA

La inmunidad adaptativa puede ser:


o Humoral: mediada por linfocitos B que
producen anticuerpos.
o Celular: mediada por linfocitos T.

Los linfocitos B pueden reconocer directamente al


antgeno, mientras que los linfocitos T necesitan que
les presenten los antgenos (a travs de clulas
presentadoras de antgenos [CPA]).

Caractersticas de la respuesta inmune adaptativa.


1) Especificidad.
2) Diversidad de respuesta.
3) Memoria inmunolgica.
4) Expansin clonal.
5) Especializacin.
6) Contraccin y homeostasis.
7) No-reactividad a lo propio.

Fig. 3: Inmunidad adaptativa humoral y celular


[4]

CARACTERSTICAS
ESPECIFICIDAD
DIVERSIDAD DE RESPUESTA
MEMORIA INMUNOLGICA
EXPANSIN CLONAL
ESPECIALIZACIN
CONTRACCIN &
HOMEOSTASIS
NO-REACTIVIDAD A LO
PROPIO

SIGNIFICADO FUNCIONAL
Asegura que distintos antgenos produzcan respuestas especficas.
Permite al sistema inmune responder a una gran variedad de antgenos.
Lleva a una respuesta aumentada frente a exposiciones repetidas de un mismo
antgeno.
Aumenta el nmero de linfocitos antgeno-especfico para mantener el control sobre
los microorganismos.
Genera respuestas que son ptimas para la defensa contra distintos tipos de
microorganismos.
Permite al sistema inmune responder al encuentro de nuevos microorganismos.
Previene el dao al hospedero durante la respuesta a antgenos forneos.

Fig. 4: Especificidad, memoria y contraccin de la respuesta inmune adaptativa.

Tipos de linfocitos:
o Linfocito B: neutralizan microbios, promueven la fagocitosis, activan el complemento.
o Linfocitos T helper (TH): activan macrfagos, linfocitos T y B y generan inflamacin.
o Linfocitos T citotxicos (TC): matan clulas infectadas.
o Linfocitos T reguladores (TR): suprimen la respuesta inmune (cuando no hay, se producen enfermedades
autoinmunes).

[5]

Fig. 5: Tipos de linfocitos.

Etapas de la respuesta inmune adaptativa:


1) Reconocimiento del antgeno: las CPA presentan el antgeno a los linfocitos vrgenes (naive).
2) Activacin de linfocito: expansin clonal y diferenciacin.
3) Eliminacin del antgeno: a travs de la inmunidad humoral y celular.
4) Contraccin (homeostasis): mediada por apoptosis.
5) Memoria: se generan clulas de memoria (sobrevivientes de la contraccin).
Fig. 6: Etapas de la respuesta inmune
adaptativa.

[6]

Hiptesis de seleccin clonal:

Fig. 7: Hiptesis de seleccin clonal

HEMATOPOYESIS

Clula troncal hematopoytica:


o Serie linfoide:
Linfocitos B.
Linfocitos T (en
timo).
Clulas NK.
o Serie mieloide:
CFU eritroide.
CFU basfilo.
CFU eosinfilo.
CFU monocitos y
granulocitos.
Megacariocitos.

Fig. 8: Hematopoyesis

[7]

RGANOS LINFOIDES

rganos linfoides primarios: rganos en donde se


diferencian los linfocitos a partir de clulas primordiales.
o Timo (linfocitos T).
o Mdula sea (linfocitos B).

rganos linfoides secundarios: lugares donde se favorece


el encuentro entre linfocitos y antgenos.
o Bazo.
o Ganglios linfticos.
o Placas de Peyer.
o MALT.

Fig. 9: rganos linfoides primarios y secundarios.

Fig. 10: Generacin de linfocitos y respuestas inmunes in vivo.

[8]

1.2.

INMUNIDAD INNATA

La inmunidad innata es la respuesta inicial a microorganismos que previene, controla o elimina la infeccin del
hospedero causada por muchos patgenos.

Los mecanismos de la inmunidad innata eliminan clulas daadas e inician el proceso de reparacin tisular.

La inmunidad innata estimula la respuesta inmune adaptativa y puede influir en la naturaleza de esta respuesta
hacindola ptimamente efectiva para la eliminacin de distintos tipos de microorganismos.

Los principales tipos de respuesta del sistema inmune innato que protegen contra los microorganismos son la
inflamacin y la defensa antiviral.

COMPONENTES

FUNCIONES PRINCIPALES

BARRERAS
Epitelios
Previene la entrada de microorganismos.
Defensinas/catelicidina
Muerte de microorganismos.
Linfocitos intraepiteliales
Muerte de microorganismos.
CLULAS EFECTORAS CIRCULANTES
Neutrfilos
Fagocitosis temprana y muerte de microorganismos.
Fagocitosis eficiente y muerte de microorganismos.
Macrfagos
Secrecin de citoquinas que estimulan la inflamacin.
Lisis de clulas infectadas.
Clulas NK (Natural Killer) y otras ILCs
Activacin de macrfagos.
PROTENAS EFECTORAS CIRCULANTES
Muerte y opsonizacin de microorganismos.
Complemento
Activacin de leucocitos.
Opsonizacin de microorganismos.
Lectina de unin a manosa (collectin)
Activacin de complemento (ruta de lectina).
Opsonizacin de microorganismos.
Protena C-reactiva (pentraxina)
Activacin de complemento.
CITOQUINAS
TNF, IL-1, quimioquinas
Inflamacin.
IFN-, IFN-
Resistencia a infeccin viral.
IFN-
Activacin de macrfagos.
IL-12
Produccin de IFN- por clulas NK y linfocitos T.
IL-15
Proliferacin de clulas NK.
IL-10, TGF-
Control de inflamacin.

[9]

RECEPTORES EN INMUNIDAD INNATA

En la respuesta inmune innata, un mismo receptor puede reconocer diferentes microbios, ya que reconocen PAMPs
(Pathogen Associated Molecular Patterns) o DAMPs (Damage Associated Molecular Patterns).
Hay receptores de manosa, receptores scavenger, receptores N-formilmetionil, etc.

Fig. 11: Especificidad de la inmunidad innata y adaptativa.

Ejemplos de PAMPs:
o cidos nucleicos (ssRNA, dsRNA, CpG).
o Protenas (pilina, flagelina).
o Lpidos de pared celular:
LPS (bacterias Gram-negativa).
cido lipoteicoico (bacterias Gram-positiva).
o Carbohidratos (manano, glucanos tipo dectina).

Ejemplos de DAMPs:
o Protenas inducidas por estrs (HSP [protenas de shock trmico]).
o Cristales (urato monosdico).
o Protenas nucleares (HMGB1).

[10]

Localizacin celular de receptores de reconocimiento de patrones moleculares del sistema inmune innato:
o Extracelular (TLR, lectina).
o Endosoma (TLR).
o Citosol (NLR, RLR).

Fig. 12: Localizacin de receptores de PAMPs.

TOLL-LIKE RECEPTORS (TLR)

Uno de los ms importantes son los Toll-like Receptors (TLR), que pueden localizarse:
o En la membrana (TLR-2, 4, 5).
o En endosomas (TLR 7, 8, 9).

Cada TLR reconoce diferentes PAMPs.


o TLR-4 reconoce el lipopolisacrido (LPS) de las bacterias Gram (-).

La respuesta de los TLR es la transcripcin de genes y expresin de:


o Citoquinas inflamatorias (TNF, IL-1, IL-2).
o Quimioquinas.
o Molculas de adhesin endotelial (E-selectinas).
o Molculas coestimuladoras (CD80, CD86).
o Citoquinas antivirales (IFN-, IFN-).

Se han encontrado al menos 12 tipos de TLR.

[11]

Fig. 13: Localizacin y especificidades de TLR.

Fig. 14: Funcin y sealizacin de TLR.

Fig. 15: Inflamosoma.

[12]

BARRERAS EPITELIALES

Impiden el paso de microbios (barrera


fsica para la infeccin).
Matan microbios al producir defensinas
(pptidos antimicrobianos) que inducen
la lisis de microbios (crean poros en
ellos).
Matan microbios y clulas infectadas va
linfocitos intraepiteliales.
Funciones adicionales de las defensinas:
o Quimiotaxis.
o Antagonistas de ACTH.
o Opsonizacin.
o Interaccin con el complemento.
o Citotoxicidad y promocin del
crecimiento.
o Reparacin de daos y migracin
celular.
o Liberacin de histamina.

Fig. 16: Funciones adicionales de las defensinas.

CLULAS LINFOIDEAS INNATAS (ILC)

Son clulas generadas a partir de los mismos precursores de los


linfocitos B y T, pero no poseen los receptores especficos de
antgenos que ellos tienen.
Las clulas NK son un tipo de ILC.
Clulas NK (Natural Killer).
o En su superficie tienen receptores activadores e
inhibitorios. Los primeros asociados a una tirosinakinasa y los segundos a una fosfatasa.
o En condiciones normales, la clula NK recibe ambas
seales desde las clulas normales. La seal inhibitoria
la provee el MHC-I.
o Cuando la clula est infectada, el virus inhibe la
expresin del MHC-I (baja su expresin), por lo que slo
queda la seal activadora.
o Al activarse, las clulas NK inducen la lisis de las clulas
infectadas y adems activan macrfagos al secretar IFN.
o Los macrfagos activados producen IL-12 que induce a
las clulas NK a producir IFN-.
Fig. 17: Clulas linfoideas innatas.

[13]

Fig. 19: Funciones de las clulas NK.

Fig. 18: Funciones de los receptores de clulas NK.

RECLUTAMIENTO DE LEUCOCITOS

La infeccin o la inflamacin de un tejido induce al


endotelio a expresar ciertos ligandos que son
reconocidos por leucocitos.
1) Rolling.
2) Activacin de integrinas por quimioquinas.
3) Adhesin estable.
4) Migracin a travs del endotelio.

Fig. 20: Reclutamiento de leucocitos.

[14]

MACRFAGOS

Funciones efectoras de macrfagos:


o Matar microbios (mediado por oxidasas e iNOS).
o Inflamacin, inmunidad adaptativa aumentada (mediado por citoquinas).
o Remodelacin tisular (mediado por factor de crecimiento de fibroblasto, factores angiognicos,
metaloproteinasas).

Etapas de la fagocitosis y destruccin de microorganismos por los macrfagos:


1) Los microbios se unen a los receptores del fagocito.
2) La membrana del fagocito engulle al microbio.
3) Los microbios son ingeridos en fagosomas.
4) Fusin de los fagosomas con lisosomas (forman fagolisosomas).
5) Activacin del fagocito:
Mata microbios fagocitados a travs de enzimas lisosomales.
Mata microbios fagocitados a travs de ROS (Reactive Oxygen Species) y NO (Nitric Oxide).

Fig. 21: Fagocitosis y destruccin intracelular de microorganismos.

[15]

SISTEMA DEL COMPLEMENTO

Funciones del sistema del complemento:


o Lisis de bacterias.
o Quimiotaxis de fagocitos.
o Opsonizacin de bacterias.

La mayora de las protenas del complemento se forman


en el hgado.

C1, lectina de unin a manosa y ficolina inician la


activacin del complemento.

Se puede activar por 3 vas:


o Va clsica.
o Va alternativa.
o Va de la lectina.

Al activarse el sistema del complemento, el C3 se

fragmenta en C3a y en C3b.


Fig. 22: Funciones del complemento.
o C3a queda libre, pudiendo activar otras
respuestas (como la inflamacin).
o C3b se une al microbio opsonizndolo. Tambin puede activar a C5, fragmentndolo en C5a y C5b.
La cascada sigue hasta que se forma el complejo MAC (Membrane Attack Complex), que lisa los microbios (forma
poros).

Fig. 23: Rutas de activacin del complemento.

[16]

EFECTOS LOCALES Y SISTMICOS DE CITOQUINAS EN INFLAMACIN

Fig. 24: Citoquinas en inflamacin

INTERFERONES

Acciones biolgicas de los interferones


tipo I (IFN- e IFN-).
o Inhibicin de sntesis de protenas
virales.
o Degradacin de RNA viral.
o Inhibicin de la expresin
gentica viral y ensamblaje viral.

Fig. 25: Acciones biolgicas de los interferones tipo I.


[17]

1.3.

ANTGENOS Y ANTICUERPOS

ANTGENOS

Definicin: molcula de diversa naturaleza qumica, que el organismo no reconoce como sus constituyentes
normales y que son detectados y son capaces de activar linfocitos T o B.
o Pueden provenir del medio (microorganismos, plantas, alimentos, frmacos) o ser generados en el propio
organismo (metabolismo de drogas, transformacin neoplsica, enfermedades autoinmunes, etc.).
o Al sistema inmune no le importa el origen para mostrar una respuesta inmune. Solo importa si son
buenos o malos.

Propiedades de los antgenos:


o Inmunogenicidad: capacidad de inducir respuesta del sistema inmune. Depende de su estructura qumica.
o Antigenicidad: capacidad de interaccin de un antgeno con los productos de una respuesta inmune, ya sea
con anticuerpos o con linfocitos T.

Los linfocitos T reconocen secuencias de aminocidos (8 10 aminocidos), mientras que los linfocitos B reconocen
conformaciones proteicas (grmenes enteros, por ejemplo).

Determinante antignico (eptopo):


o Lugar del antgeno que es reconocido por un anticuerpo o
linfocito T.
o Los antgenos proteicos pueden contener ms de un
eptopo.
o Lineal o conformacional:
Lineal (secuencial): reconocidos por linfocitos T y
B. Derivan de la estructura primaria de una
protena (sigue siendo reconocida aunque sea

denaturalizada).
Fig. 26: Determinante antignico (eptopo).
Conformacional (discontinuo): reconocido por
linfocitos B. Derivan del arreglo espacial de la cadena polipeptdica (estructura secundaria o
terciaria). Una protena denaturalizada, si es conformacional, puede dejar de ser reconocida por su
anticuerpo.

Fig. 27: Naturaleza de los


determinantes antignicos.

[18]

Los antgenos pueden ser:


o Homlogos: cuando inducen la formacin del anticuerpo que lo est reconociendo.
o Heterlogos: cuando el antgeno, por reaccin cruzada, es capaz de interactuar con un anticuerpo que fue
inducido por otro antgeno. Un ejemplo de heterologa es el caso de cierto streptococco que tiene un
eptopo igual al de fibras miocrdicas.

Caractersticas del antgeno que lo hacen inmunognico:


o Tamao:
Protenas > 10 kDa.
Haptenos (< 10 kDa); stas deben acoplarse a un
transportador (conjugado carrier-hapteno).
o Presencia de grupos qumicos activos: de esto depende la
inmunogenicidad.
Principalmente los que presentan cargas negativas
(glu y asp).
En menor medida con carga positiva (lys).
Tambin los residuos aromticos (tyr).
o Conformacin espacial del eptopo(s) suelen corresponder a
prominencias sobre la superficie de las protenas.
o Movilidad atmica: contribuye a la antigenicidad.
Les permite adaptarse a receptores pre-existentes.
Existe flexibilidad en las estructuras antignicas.

Fig. 28: Conjugado carrier-hapteno.

Naturaleza qumica de los antgenos:


o Protenas (antgenos timo-dependientes).
o Carbohidratos (como LPS, sistema ABO).
o Lpidos, slo si estn unidos a protenas porque son insolubles (generalmente poco inmunognicos).
o cidos nucleicos; tambin deben conjugarse con protenas inmunognicas (generalmente poco
inmunognicos).

Hay dos tipos de antgenos:


o Antgenos timo-dependientes:
Principalmente protenas.
Requieren de linfocitos T.
Provocan respuestas primarias caracterizadas por la sntesis de IgM, pero en exposiciones
posteriores al antgeno, stas maduran hacia IgG o IgA y clulas de memoria.
o Antgenos timo-independientes:
Principalmente carbohidratos.
Antgenos capaces de activar linfocitos B sin ayuda de linfocitos T (como el LPS).
En general son molculas grandes con eptopos repetidos.
Son mitognicos (inducen proliferacin de linfocitos B).
Pueden activar la va del complemento.
Slo estimulan la produccin de IgM y muy pocas clulas de memoria.

Lo ms importante de la respuesta adaptativa, es el reconocimiento del antgeno por va de inmunoglobulinas y por


el receptor de linfocito T (TCR).
o Inmunoglobulinas (Ig): de membrana o soluble.
o Receptor de LT (siempre de membrana).
Requiere que el antgeno est asociado al MHC.
Reconoce pedacitos de antgeno (no completo) procesados por una clula presentadora de
antgeno.
Muy especfico (basta con cambiar un aminocido para que ya no reconozcan).

[19]

INMUNOGLOBULINAS

Glicoprotenas que se expresan de dos formas:


o Unidas a la membrana celular del
linfocito B (son los BCR). Son sus
receptores.
o Molculas
solubles
(anticuerpos)
sintetizados por las clulas plasmticas.

La interaccin entre antgeno y anticuerpo no es


covalente, depende de cuatro tipos de fuerzas
principalmente: puentes de hidrgeno, enlaces
inicos, interacciones hidrofbicas, fuerzas de
Van der Waals.
o Se puede ir modificando, depende de su
afinidad.
o Se pueden unir en bolsillos, surcos o
superficies de la FAB.

Fig. 29: Estructura molecular de una inmunoglobulina.

Caractersticas:
o 2 cadenas pesadas (H) y 2 cadenas livianas (L) idnticas.
o 2 sitios de unin a antgeno (FAB).
o Cada cadena tiene una regin variable (de unin a antgeno).
o Tienen una cola de la cadena pesada que le da su caracterstica biolgica (FC).
IgM, IgG, IgA en linfocitos B pueden reconocer al mismo antgeno, pero lo atacan de forma distinta
(aqu vara slo el FC).
o La regin bisagra permite que los 2 sitios de unin se acerquen o separen (punto de unin de cadenas
pesadas).
o La regin variable presenta 3 segmentos (regiones
hipervariables1) que son las que le dan la especificidad al
anticuerpo (3 en cadena pesada, 3 en cadena liviana).

Conceptos importantes:
o Afinidad: fuerza de interaccin entre ambas molculas,
donde la constante de disociacin (Kd) indica cunto tiempo
permanecen pegadas.
o Avidez: se refiere a la capacidad de interaccin, no
depende de la afinidad.
La alta y muy alta avidez es gracias a la regin
bisagra.
Sea dbil o alta la avidez, la afinidad puede ser la
misma.

De los cinco tipos de inmunoglobulinas, la IgG tiene la mayor vida


media (10 das v/s 6 das de los dems tipos).
Fig. 30: Valencia y avidez en la interaccin
antgeno-anticuerpo.

CORs: Complementarity Determining Regions.

[20]

Determinantes antignicos de las inmunoglobulinas:


o Isotipo: distinta regin constante (FC). Son 5 isotipos.
o Idiotipo: distinta regin variable (FAB).
Los determinantes antignicos idiotpicos de las
inmunoglobulinas son molculas que pueden ser
reconocidas como antgenos y ser atacadas (hiptesis
sobre cmo podra terminar la respuesta inmune).
Anticuerpo anti-idiotipo: anticuerpo que se genera
por la expansin de otro frente a una infeccin, para
regular su actividad (anticuerpo anti-anticuerpo).
Hay en muy baja cantidad y sirven para el control de
la homeostasis.
o Alotipo: relacionado con los trasplantes, son pequeas
modificaciones que tienen los anticuerpos de una persona,
que pueden o no ser compatibles con los de otra persona.
Distinta regin constante.

Que una inmunoglobulina sea de membrana o secretada depende de


splicing alternativo.

Fig. 31: Determinantes antignicos de


anticuerpos.
Inmunoglobulinas y sus caractersticas:

Fig. 32: Isotipos de anticuerpos.

Dnde estn?
o IgM
o IgA
o IgE
o IgG
o IgD

Circulando.
Principalmente en mucosas. Se traspasa por secrecin, puede dimerizar.
En niveles muy bajos, salvo en alergias. Induce degranulacin de clulas cebadas.
Altos niveles en suero, nica que traspasa la placenta.
Niveles ms bajos. No se sabe bien su funcin.

[21]

Expresin de inmunoglobulinas dependiendo del tipo de respuesta: primaria v/s secundaria.


o Infeccin reciente (presente):
IgM
IgG.
o Infeccin de hace tiempo (alguna vez en la vida): IgM
IgG.
o IgM e IgG son las que ms se activan por complemento (IgG3) e IgM principalmente.

Expresin de inmunoglobulina durante la maduracin de los linfocitos B.

Fig. 33: Expresin de inmunoglobulinas durante la maduracin de los linfocitos B.

Funcin efectora de los anticuerpos:


o Neutralizacin
de
antgenos:
neutraliza microbios y toxinas.
o Opsonizacin: el fagocito reconoce
mejor al antgeno marcado por las
opsoninas,
favoreciendo
su
degradacin.
o Activacin respuesta innata:
Complemento: induce lisis
por ataque a membrana,
generando poro en la
bacteria.
Fagocitosis.
Inflamacin.
Lisis de microbios.

Fig. 34: Funciones efectoras de los anticuerpos.

[22]

Receptores FC.
o Cada inmunoglobulina tiene un FC distinto que le
permite reconocerse por distintas clulas (como los
macrfagos y las clulas NK).
IgE est pegada al receptor, y en esta
condicin recibe interaccin y sealizacin
intracelular.
o Algunos estn asociados a activadores (ITAM, a
travs de quinasas) y otros a inhibidores (ITIM, a
travs de fosfatasas).
o Reconocen las distintas inmunoglobulinas.
o El receptor del linfocito T (TCR) se parece a un
fragmento FAB unido a la membrana.
No tiene mecanismo de sealizacin por s
mismo, slo puede unirse al antgeno-MHC.
Para sealizar, debe asociarse a distintos
elementos.
Presenta 2 cadenas, y , cada una de las
cuales presenta una regin variable y una
constante.

Fig. 35: Receptores FC.

Fig. 36: Opsonizacin y fagocitosis de microorganismos mediada por anticuerpos.

Fig. 37: Citotoxicidad celular mediada por anticuerpos.

[23]

1.4.

GENERACIN DE DIVERSIDAD DE INMUNOGLOBULINAS

Cada individuo es capaz de producir una gran cantidad de anticuerpos con distintas especificidades (1012 o ms).
Cmo se explica tanta diversidad?
o La diversidad est dada por la secuencia de aminocidos de la regin variable.
o Teora de la lnea germinal (Beadle y Tatum): un gen = una protena = un anticuerpo.
o Teora de la variacin somtica (Dreyer y Bennet): el nmero de genes de anticuerpos es pequeo; pero,
por mutaciones generan todos los anticuerpos del organismo.

Tonegawa en 1987 demostr que el genoma de los linfocitos B es diferente que el genoma original embrionario.
o Cada linfocito tiene receptores especficos para un antgeno, los que se definen antes del encuentro con el
antgeno (por lo tanto, al azar).
o El encuentro con el antgeno gatilla la proliferacin y diferenciacin (expansin clonal).
o As, el desarrollo del repertorio de receptores es antgeno-independiente.

Las cadenas pesadas (H) definen el tipo de inmunoglobulina.

DIVERSIDAD EN B CELL RECEPTORS (BCR)

Los genes para las cadenas livianas ( y ) y pesadas (9 tipos) estn localizados en distintos cromosomas, formando
en cada caso familias multignicas.

Cada una de estas familias multignicas contiene una serie de secuencias codificantes llamadas segmentos gnicos,
que son de distinto tipo.
o La familia de H posee segmentos de tipo V, D, J y C (recombinacin VDJ2).
o La familia de y tienen segmentos de tipo V, J y C (recombinacin VJ).

Fig. 38: Dominios de BCR y TCR.

V (variable), D (diversity), J (joining), C (constant).

[24]

Recombinacin (V(D)J): se toma un segmento de cada tipo mediante recombinaciones somticas al azar, que crea
un DNA diferente del original.
o Para que ocurra la recombinacin despus de cada segmento V y antes de cada J, existen secuencias
seales, las que son reconocidas por enzimas de restriccin (RAG-1 y RAG-2).
o Estas seales consisten en heptmeros y nonmeros, por lo que al ser cortadas, los fragmentos que quedan
no encajan exactamente entre s para ser ligados.
o Es por esto que existe una enzima, TdT3, que agrega nucletidos al azar (punto de mayor recombinacin)
para completar lo que falta.
Es un proceso muy ineficiente porque se pueden insertar codones de trmino y no se genera el
anticuerpo (pocos llegan a trmino).
No obstante, este es el precio de la recombinacin.
o Es este mecanismo el que genera hipervariabilidad en la 3 seccin de hipervariabilidad (las otras dos
secciones hipervariables vienen codificadas en el DNA).

Fig. 39: Recombinacin VDJ en BCR.

Exclusin allica: si se expresa efectivamente la cadena


pesada de un cromosoma (un alelo), se reprime la expresin
del otro alelo (lo mismo pasa con la liviana). Si ningn alelo
resulta funcional, el linfocito muere por apoptosis.
o La primera cadena que se sintetiza es la pesada, sea
materna o paterna.
o Si se forma efectivamente la protena, sta sale a la
superficie y sealiza para evadir la expresin de la
cadena pesada del otro origen (todas deben ser o
maternas o paternas).
Cmo sealiza? Se asocia a una cadena
sustituta que le da estabilidad y produce la
sealizacin, evitando la formacin de la
opuesta y adems estimula el inicio de la
expresin de la cadena liviana.
o Si fallan ambas opciones, el linfocito muere.
Fig. 40: Exclusin allica.

TdT: Terminal deoxynucleotidyl transferase.

[25]

Fases de la respuesta inmune humoral: hay 3 mecanismos del linfocito B para variar luego de la mdula sea.
o Inmunoglobulina de membrana o secretada:
Cuando el linfocito B est maduro, produce inmunoglobulinas de membrana (IgM, IgD).
Cuando se activa, ocurre un cambio en el isotipo de la inmunoglobulina hacia el tipo secretor (como
IgG).
Que una inmunoglobulina de un mismo tipo sea de membrana o secretada depende de un splicing
alternativo del mRNA, que a su vez depende del estado de actividad del linfocito B.
Cambio de isotipo:
o Se produce por unin de linfocito TH con linfocito B mediante CD40s.
o El linfocito T le entrega citoquinas que activan enzimas (AID). De esta manera, vuelve a cortarse el
DNA slo en la regin constante (no es splicing, ya que el corte es a nivel de DNA, no RNA).
o El isotipo al que se cambie depender de las citoquinas del ambiente.
Maduracin por afinidad: mutaciones somticas.
o El linfocito activado migra a un ndulo linftico donde sufre de mutaciones somticas que buscarn
aumentar la afinidad por el antgeno (mutaciones somticas en la regin variable).
o Algunos lo lograrn y otros no. Estos ltimos morirn cuando sean seleccionados por las clulas
foliculares
dendrticas (ocurre
despus
de
la
expansin clonal).

Fig. 41: Fases de la respuesta inmune


humoral.

DIVERSIDAD EN T CELL RECEPTORS (TCR)

Es muy similar y ms simple que la generacin de diversidad de BCR, ocurre en el timo y actan las mismas enzimas,
produciendo los mismos cortes.
No obstante, TCR slo puede sufrir modificaciones y mutaciones (al azar) en el proceso de corte y unin del DNA. El
linfocito B puede sufrir modificaciones y mutaciones posteriormente (cambio de isotipo, maduracin por afinidad,
cambio de forma de membrana a secretada).
En resumen, la variabilidad de los BCR depende de:
1) Recombinacin VDJ.
2) Cambio de isotipo.
3) Inmunoglobulina de membrana o secretada.
4) Mutaciones somticas.
La variabilidad en los TCR se produce solo por:
1) Recombinacin VDJ, que ocurre al azar y permite generar aproximadamente 1015 TCRs distintos.

[26]

1.5.

COMPLEJO MAYOR DE HISTOCOMPATIBILIDAD (MHC)

Tambin llamado Human Leukocyte Antigen (HLA).

El MHC controla la respuesta inmune y el rechazo de trasplantes.


1) Fue en su funcin en el rechazo de trasplantes cuando se descubri, he ah la razn de su nombre MHC.

Los genes que codifican para las molculas del MHC se encuentran en el cromosoma 6.
1) Un segmento de este cromosoma tiene una regin para el MHC-II.
2) Otra regin para el MHC-I.
3) Entre medio de ellas, una regin que codifica protenas que participan en la sntesis de MHC-I y MHC-II
(MHC-III).

Fig. 42: Organizacin gentica de los genes que codifican para el complejo mayor de
histocompatibilidad

Estos genes que codifican para molculas de MHC tienen 3 caractersticas bsicas:
1) Son polignicos: en un individuo, existen distintos genes que codifican para distintas molculas del MHC.
2) El MHC se hereda del padre y la madre (a diferencia de BCR y TCR).
3) Son polimrficos: en la poblacin existen distintas variantes de un mismo gen (haplotipo).
4) Son codominantes: todos los genes son expresados al mismo tiempo, por lo que un individuo puede tener
hasta 14 distintas molculas de MHC.

[27]

MHC clase I (HLA-A, HLA-B y HLA-C).


o Es expresado en la mayor parte de las clulas
nucleadas del organismo.
o Compuesto por:
1 cadena de 3 dominios (1, 2, 3).
Es el espacio entre los dominios 1 y
2 donde se alberga el antgeno.
Asociado a una pequea protena 2
microglobulina.
o Las regiones variables (polimrficas) son en 1 y 2,
las que unen al antgeno.
o Presenta antgenos a linfocitos T CD8+, de origen
proteico (8 11 aminocidos).
o La regin 3 une a CD8.
o La fuente de antgenos presentados por MHC-I
proviene comnmente del intracelular.
o En condiciones normales, estn constantemente
presentando antgenos propios.

Fig. 43: MHC-I.

MHC clase II (HLA-DR, HLA-DQ y HLA-DP).


o Presente en clulas presentadoras de antgenos
(APC):
Macrfagos.
Clulas dendrticas (DC).
Linfocitos B.
o Compuesto de 2 cadenas ( y ), las que poseen 2
dominios cada una.
o Presenta antgenos a linfocitos T CD4+, de origen
proteico (10 a 25 aminocidos).
Puede albergar pptidos de mayor tamao
porque al ser dos cadenas, el espacio es
mayor.
o Fuente de antgenos: extracelular.
o Su regin ms polimrfica es 1.
o La regin 2 une a CD4.

Fig. 44: MHC-II.


COMPARACIN ENTRE MHC-I & MHC-II.
MHC-I
MHC-II
(con 3 dominios)
(2 dominios)
Cadena polipeptdica
2-microglobulina.
(2 dominios)
Sitio de unin al TCR
3 (se une a CD8)
2 (se une a CD4)
Tamao de sitio de unin a antgeno
Pptido de 8 11 aminocidos
Pptido de 10 25 aminocidos
Nomenclatura
HLA-A, HLA-B, HLA-C
HLA-DR, HLA-DQ, HLA-DP

[28]

Residuos polimrficos en MHC ocurre principalmente en sitio de unin


a antgeno (el resto se mantiene ms bien constante).
o En caso de MHC-II, esto ocurre principalmente en la cadena
(regiones que ms varan entre un individuo y otro, no en una
misma persona).

Dentro del pptido antgeno hay aminocidos que slo sirven para
anclarse al MHC, los cuales son muy conservados dados distintos
antgenos.

Unin de pptidos:
o Cada molcula de MHC tiene regiones de anclaje y regiones
que lo deja libre (lo dejan expuesto).
Ejemplo: pptidos que se asocian a 1/3 del sitio del
antgeno, quedando el resto libre para ser identificado
por el linfocito T.
o Pptidos presentados en el MHC presentan aminocidos
conservados necesarios para su presentacin (varias MHC
iguales pueden presentar antgenos distintos).
o El antgeno es el que entrega la variabilidad, no el MHC.

Fig. 45: Residuos polimrficos de MHC.

Hay molculas de MHC que se expresan ms que otras:


o HLA-B
>
HLA-A
>
HLA-C
o HLA-DR
>
HLA-DQ
>
HLA-DP

Desequilibrio de unin (linkage desequilibrium): hay algunos alelos de MHC que tienden a heredarse juntos.
o Asociacin no aleatoria de alelos en dos o ms loci.
o Por ejemplo, la frecuencia observada de HLA-A1 es de 13,8% y la de HLA-B8 es de 9%, por lo que la
frecuencia esperada para ambos juntos HLA-A1-B8 es de 1,24%, sin embargo, la frecuencia observada es 6%.
o Esto se genera porque los genes del MHC se encuentran muy cerca en el cromosoma 6, haciendo ms
probable su expresin.

Para determinar la compatibilidad en trasplantes, se comparan los loci de los 3 tipos de MHC que ms influyen: HLADR, B y A. Dado el gran polimorfismo del sistema HLA, es muy poco probable encontrar una compatibilidad 6 de 6.

[29]

1.6.

PROCESAMIENTO Y PRESENTACIN DE ANTGENOS

Clulas presentadoras de antgeno:


o Clulas dendrticas (DC4).
o Macrfagos.
o Linfocitos B.

Mecanismos de captura y presentacin de antgenos.


o Procesamiento y presentacin de antgeno por molculas MHC-I.
o Procesamiento y presentacin de antgeno por molculas MHC-II.

Etapas de la respuesta inmune ante una infeccin:


1) Clulas de la respuesta inmune innata reconocen al antgeno.
a. Inflamacin controla parcialmente la infeccin.
b. Actan macrfagos, clulas NK y sistema del complemento, principalmente.
2) Los antgenos son procesados y son llevados al ganglio linftico por una clula presentadora de antgenos
(APC5).
3) En el ganglio linftico ocurre presentacin de antgeno a clulas de la respuesta inmune adaptativa.
4) Empieza la respuesta inmune adaptativa.
a. Linfocitos T.
b. Linfocitos B y anticuerpos.
5) Eliminacin del patgeno (inmunidad).

Fig. 46: Etapas de la respuesta inmune ante una infeccin.

4
5

DC: Dendritic cell.


APC: Antigen Presenting Cell.

[30]

CLULAS PRESENTADORAS DE ANTGENOS (APC)

Macrfagos6:
o Captan los antgenos por fagocitosis.
o Son clulas vida larga (meses e incluso
aos).
o Activan linfocitos T efectores.
o Abundante RER y muchas mitocondrias.

Clulas dendrticas (DC):


o Pueden
capturar
antgenos
por
endocitosis o fagocitosis.
o Son las nicas clulas capaces de activar
linfocitos T vrgenes (son APC
profesionales).
o Pueden hacer presentacin cruzada
presentando antgenos extracelulares
por MHC-I (para activar linfocitos T
CD8+). El mecanismo se desconoce.
o Las clulas dendrticas puede ser:
Plasmocitoides
(pDCs):
importante en respuesta viral).
Convencionales
(mieloides).
Estas son las ms importantes y
se encuentran en los tejidos.
Pueden ser:
Fig. 47: Clulas presentadoras de antgeno y sus caractersticas.
Residentes.
Migratorias (como las clulas de Langerhans en la epidermis o intersticiales en la dermis).
o Las clulas dendrticas se originan de las clulas madre hematopoyticas (HSC), pasando primero por:
Clula progenitora mieloide.
Promonocito.
Monocito.
Clula dendrtica inmadura.
o Una clula dendrtica inmadura tiene:
Alta capacidad de fagocitosis.
Baja expresin de MHC y mucho menor de molculas coestimuladoras.
Estn constantemente fagocitando y presentando antgenos propios por MHC-II a linfocitos T CD4+,
pero como no hay molculas coadyuvantes, el linfocito T no se activa (anergia). Esto otorga
tolerancia (en este estado, tienen un contacto mnimo con los linfocitos T).
Tolerancia perifrica: presenta antgenos propios en un contexto no inflamatorio.
Sin embargo, estn constantemente buscando patgenos mediante receptores de PAMPs, como
TLR.
o Cuando reconocen un patgeno, lo fagocitan y el receptor enva seales para la maduracin de la clula
dendrtica (clula dendrtica madura). De esa manera:
Disminuye su capacidad fagoctica.
Aumenta considerablemente la expresin de MHC-II y de coestimuladores.
As, la clula dendrtica madura es capaz de activar linfocitos T y generar inmunidad.
En estado maduro desarrollan varias proyecciones citoplasmticas que ayudan a la mejor
interaccin con linfocitos T.

Linfocito B: captan los antgenos por endocitosis mediada por receptores.

Los monocitos se encuentran circulando, mientras que los macrfagos estn en los tejidos.

[31]

VAS DE PROCESAMIENTO Y PRESENTACIN DE ANTGENOS

Por MHC-I:
o Cuando se presenta un antgeno en el citosol (protena cualquiera,
viral en caso de infeccin o incluso tumorales), es ubiquitinado por
una ubiquitin-ligasa y destinado a proteosomas, en donde es
fragmentado y degradado.
o Estos pptidos generados son enviados al retculo endoplasmtico
donde son translocados gracias a TAP y luego son ensamblados
junto al MHC-I, que ser destinado a la superficie.
Transportador TAP: son codificados por la regin MHC-II
de los genes MHC.
Hay dos tipos (TAP-1 y TAP-2) y tienen dominios
con actividad ATPasa.
Reconocen pptidos de entre 7 y 11 aminocidos y
los translocan hacia el RER.
o En la membrana del RER, la cadena del MHC-I se encuentra
estabilizada y unida a calnexina hasta que llega la cadena 2
microglobulina. Cuando sucede esto, la calnexina suelta el MHC y
ste se une a un complejo de chaperonas que lo estabilizan y lo
unen a TAP (va tapasina).
o Finalmente, cuando TAP transloca un pptido, ste se une al MHC-I
y as termina de plegarse, siendo as llevada hacia la membrana
plasmtica.

Fig. 48: Va de procesamiento y


presentacin de antgeno por
MHC-I.

Fig. 49: Va de procesamiento y presentacin de antgeno por MHC-I (detalles).

[32]

Por MHC-II:
o Cuando una APC endocita un patgeno (es decir, el antgeno
viene del exterior), es transportado mediante vesculas
endocticas a endosomas (lisosomas) donde son degradados por
catepsinas.
o Mientras tanto, en el RER se sintetiza el MHC-II, el cual es
estabilizado por protenas chaperonas7 (cadena invariante, li).
As sale del RER hacia el Golgi y de ah hacia el endosoma en
donde se fragment el antgeno.
o Una vez en el endosoma, debido al pH ms cido y a la catepsina
S, las protenas chaperonas (cadena invariante) son degradadas,
quedando slo un fragmento (CLIP8) en el sitio de unin al
antgeno.
El propsito de CLIP es prevenir la unin de fragmentos
de pptidos propios previo a la unin con el MHC-II en el
Fig. 50: Va de procesamiento y
endosoma (regulacin de unin de pptidos a MHC-II).
9
presentacin de antgeno por MHC-II.
o Luego, otra molcula, HLA-DM , remueve el CLIP de su lugar y
permite as la unin del antgeno al MHC-II.
o Finalmente, el MHC-II con antgeno es exportado a la superficie celular.

Fig. 51: Va de procesamiento y


presentacin de antgeno por MHC-II
(detalles).

Todas las MHC son inestables sin un pptido asociado (tanto en la membrana como dentro de la clula). Por lo que nunca habr un
MHC sin pptido en la membrana celular. Cuando se les asocia un pptido, se estabilizan y pueden permanecer varias semanas en la
membrana.
8
CLIP: Class II-associated invariant chain (li) Peptide.
9
HLA-DM = MHC-DM.

[33]

Presentacin de antgenos por clulas dendrticas: presentacin cruzada.


o La clula dendrtica puede tomar antgenos del extracelular y cargrsela a MHC clase I.
o De esta manera, pueden ser reconocidos por linfocitos T CD8+ (puede reconocer antgenos tanto intra como
extracelulares).
o La presentacin cruzada:
Permite amplificacin de la respuesta inmune.
Permite que la misma clula dendrtica pueda activar simultneamente linfocitos T CD4+ y CD8+.

Fig. 52: Presentacin cruzada de antgenos por las clulas dendrticas.

Presentacin de antgenos por CD1.


o Permite presentacin de lpidos (1 y 2 hidrofbicos).
o Estructura de CD1: cadena de 3 dominios, asociado a 2-microglobulina.
o Se carga en el RE.
o Asociado a respuestas mucosas.
o Estos antgenos son presentados a linfocitos T .

Fig. 53: Estructura de MHC-I, MHC-II y CD1.

[34]

1.7.

RECEPTORES DE LINFOCITOS T Y B

RECONOCIMIENTO DE ANTGENOS EN LA RESPUESTA INMUNE ADAPTATIVA

El reconocimiento de antgenos ocurre gracias a dos


protenas de superficie de los linfocitos:
o Inmunoglobulinas (anticuerpos) unidos a
membrana en linfocitos B (BCR).
o Receptor de linfocitos T (TCR).

Ambos receptores reconocen estructuras qumicas


diferentes (antgenos):
o BCR: conformaciones o formas de
macromolculas naturales (protenas, lpidos,
carbohidratos, cidos nucleicos).
o TCR: slo ven pptidos lineales en el
contexto de una molcula de MHC.

Los receptores de antgenos estn unidos no


covalentemente a otras molculas de membrana
invariables que se encargan de enviar las seales de
activacin al interior de la clula cuando se reconoce
el antgeno (los receptores de linfocitos no son
capaces de sealizar intracelularmente). El
reconocimiento antignico y la transduccin de la
seal estn mediadas por pptidos diferentes.
o Linfocitos B:
Receptor: BCR.
Transductor: Ig e Ig.
o Linfocitos T:
Receptor: TCR.
Transductor: CD3, cadena (zheta).
Fig. 54: Comparacin entre BCR y TCR.

La transduccin de seales es llevada a cabo gracias a unas


determinadas regiones de las protenas de sealizacin
intracelular que acompaan a los receptores:
o Dominio ITAM: mdulo de activacin del inmuno
receptor basado en tirosina. Son fosforilables por una
tirosina-quinasa (asociada a la membrana) cuando se
produce la unin a antgeno.
o Dominio ITIM: mdulo de inhibicin del inmuno-receptor.
Tambin se fosforilan en tirosina, pero stas, a travs de
un complejo con dominio SH2, activan fosfatasas
(SHP1/2).

Fig. 55: Estructura de los receptores BCR y TCR. Se ven


dominios ITAM en las porciones intracelulares de las
protenas sealizadoras.

[35]

Todos los linfocitos T maduros expresan junto con su receptor (restringido por el MHC) otra molcula que puede ser
CD4 o CD8. Estos son los co-receptores del linfocito T y se unen a una porcin invariable del MCH. Determinan si la
activacin del linfocito ser de ayuda (CD4) o citotxica (CD8).

RECEPTOR DE LINFOCITOS B (BCR)

Eventos de la sealizacin BCR:


o Receptor encuentra antgeno.
Co-receptor se asocia a complemento
(C3d) y aumenta la activacin del
linfocito B.
o Activacin de tirosina-quinasa de familia Src.
o Se encuentra con ITAM.
o Se fosforila ITAM.
o Anclaje para Syk (un tipo de tirosina-quinasa).
Puede o no fosforilar.
Fosforila sustratos.

Sealizacin inhibitoria en linfocito10:


o Fosforilacin ITIM.
o Sitio de anclaje para fosfatasas.
o Desfosforilacin de lo que estaba siendo
fosforilado.

BCR media la endocitosis del antgeno.


o

Para poder presentar al antgeno con MHC-II


al linfocito T, debe:
Endocitosis mediada por receptor.
Procesamiento y presentacin del
antgeno (+ MHC-II).

Fig. 56: Sealizacin intracelular de BCR (y amplificacin


de respuesta gracias al complemento C3d).

RECEPTOR DE LINFOCITOS T (TCR)

Eventos de sealizacin TCR:


o Unin del antgeno al TCR.
Requiere de un co-receptor11 (CD4/CD8).
El co-receptor puede estar unido a Lck.
o Activacin de tirosina-quinasa de la familia Src (Lck).
o Fosforilacin ITAM.
o Tirosina-quinasa ZAP-70 reconoce mediante SH2.
o Cadena de fosforilaciones (partiendo por sustratos
cercanos).

Fig. 57: Receptor de linfocitos T (TCR).

10
11

Normalmente los receptores inhibitorios actan despus de los activadores.


Recordar que aqu se est interactuando con una molcula de MHC, he ah la necesidad de co-receptores.

[36]

SINAPSIS INMUNOLGICA

La sinapsis inmunolgica:
o Consiste en:
Co-receptores.
Co-estimuladores.
Molculas de adhesin.
Receptores de antgeno.
o No es pasajera, debe ser estable (duradera).
o La afinidad de TCR por su antgeno es muy baja. Pero:
La sinapsis inmunolgica ayuda a aumentar
la avidez (muchas molculas interactuando
simultneamente).
Presencia de receptores co-estimuladores.
o Otorga seales:
Seal 1: reconocimiento del antgeno.
Seal 212: receptor co-estimulador (ejemplo:
CD28, que reconoce a sus ligandos B7-1 y B72 (= CD80/CD86).
Ambas seales juntas generan la activacin
de factores de transcripcin especficos
(NFAT, NF-B, AP-1).
Puede darse una seal 3 de carcter
moduladora. sta es dada por las citoquinas.

Para que exista una respuesta, debe existir un conglomerado


proteico que permita transducir la seal.

Fig. 58: Molculas de la sinapsis inmunolgica.

Existen mltiples vas de coestimulacin que


actividad de los linfocitos T:
APC.
Linfocito T.
o CD40
CD40-L

o CD80/86 CD28

o CD80/86 CTLA-4

modulan la

Estimula respuesta inmune.


Estimula respuesta inmune.
Inhibe la respuesta inmune.

Fig. 59: Mltiples vas de coestimulacin modulan la actividad


de clulas T.
12

La seal 2 aparece frente a seal de peligro. Adems, el linfocito B tambin requiere de esta seal (co-estimuladores), pero son
otros y menos claros.

[37]

CTLA-4 atena la activacin de linfocitos T:


o Son expresadas por los linfocitos T poco despus de su activacin (no aparece en linfocitos T vrgenes).
o Es mucho ms afn por CD80/86 que CD28 (500 2500 veces ms).
o Importante para la regulacin de los linfocitos T.
o Tambin forma parte de los mecanismos de tolerancia perifrica.

Ipilimumab:
o Anticuerpo que bloquea la seal de CTLA-4 (anticuerpo anti-CTLA-4), por lo que no hay freno del linfocito T
efector.
o Puede usarse como tratamiento de melanomas: activa la respuesta inmune contra el tumor.
o Tiene un riesgo: puede causar exacerbacin de la respuesta inmune (toxicidad).

Fig. 60: Ipilimumab.

Abatacept (Orencia):
o Protena
recombinante
humana
(quimrica) que incluye un dominio
extracelular de CTLA-4 humana y un
fragmento de dominio Fc modificado
de IgG humano.
o Se une a CD80/86 (evita que se una a
CD28) e inhibe la activacin completa
de clulas T.
o Permite evitar el rechazo contra
trasplantes, al disminuir la respuesta
inmune.
o Adems, al recibir el linfocito T la seal
1, pero no la seal 2, se aumenta la
tolerancia al trasplante.
Fig. 61: Abatacept.

[38]

1.8.

CITOQUINAS Y QUIMIOQUINAS

Las citoquinas (citokinas) son protenas secretadas por las


clulas de la inmunidad innata y adquirida en respuesta a
antgenos bacterianos u otros.
o Distintas citoquinas estimulan respuestas diversas
en las clulas comprometidas en la inmunidad y
en la inflamacin.
o La respuesta inmune incluye una completa
interaccin entre linfocitos, clulas precursoras
hematopoyticas en general y
clulas
inflamatorias.

La compleja interaccin entre las diversas clulas de la


respuesta inmune est mediada y regulada por
citoquinas. Las caractersticas de las citoquinas son:
Fig. 62: Citoquinas en respuesta inmune innata y
o Glicoprotenas (< 30 kDa).
o Secretadas principalmente por linfocitos T y por
adaptativa.
macrfagos (y por muchas otras).
o Actan sobre una gran diversidad de clulas blanco.
o Son secretadas en respuesta a antgenos bacterianos u otros.
o Algunas son ms propias de la inmunidad innata (IL-12, TNF, IL-1, etc.) y otras de la adaptativa (IL-2), pero
existe sobreposicin entre ellas.

FUNCIONAMIENTO Y PROPIEDADES GENERALES DE LAS CITOQUINAS


Sobre el funcionamiento:
1) Secrecin corta y autolimitada: RNAm inestable, por lo que su sntesis es transitoria.
2) Habitualmente no se almacenan en granos.
3) Se unen a su receptor, transducen seales y alteran la expresin gnica de la clula. La unin al receptor es de
mucha afinidad, por lo que pueden activar en pequeas cantidades.
4) Su secrecin puede ser:
o Autocrina: a s misma.
o Paracrina: a clulas en la vecindad.
o Endocrina: a travs de la sangre.
5) La sntesis de citoquinas es antgeno-inespecfica, pero como seales externas regulan la expresin de receptores
de citoquinas, stas se unirn de preferencia a las clulas que expresen el mayor nmero de receptores. As, se logra
mantener la especificidad de la respuesta inmune.
Propiedades:
6) Pleiotropa: una misma citoquina acta sobre distintos tipos celulares (ejemplo: IL-4).
7) Redundancia: citoquinas distintas ejercen una funcin parecida sobre un mismo tipo celular (ejemplo: IL-2, IL-4, IL5
sobre linfocito B).
8) Sinergia: necesidad de ms de una citoquina para ejercer una funcin (ejemplo: IL-4 e IL-5 sobre linfocito B).
9) Antagonismo: una citoquina puede inhibir el efecto de otra citoquina (ejemplo: IL-4 v/s IFN- sobre linfocito B).
[39]

Fig. 63: Propiedades de las


citoquinas.

FUNCIONES Y CLASIFICACIN DE CITOQUINAS

Se han descrito ms de 100 citoquinas:


o Familia de las hematopoytinas.
o Familia de los interferones (IFN).
o Familia de las quimioquinas (dirigen el trfico de linfocitos cuando salen a la circulacin).
o Familia del factor de necrosis tumoral (TNF).

Funcionalmente, las citoquinas se clasifican como:


o Mediadores y reguladores de la inmunidad innata (secretadas por macrfagos).
Factor de Necrosis Tumoral (TNF).
Interfern y (IFN-, IFN-).
Interleuquina 1, 10, 12, 15 y 18 (IL-1, 10).
Quimioquinas.
o Mediadores y reguladores de la inmunidad adaptativa (secretadas por linfocitos T).
Factor de Crecimiento Transformante (TGF-).
Interfern (IFN-).
Linfotoxina.
Interleucina 2, 4, 5, 13 y 17 (IL-2, 4).
o Estimuladores de la hemopoiesis13 (por clulas estromales de la mdula sea).

Funciones biolgicas de las citoquinas:


o Respuesta inmune celular y humoral.
o Respuesta inflamatoria (las citoquinas son cruciales en el proceso de inflamacin).
o Regulacin de la hematopoyesis.
o Proliferacin y diferenciacin celular.
o Cicatrizacin.

13

Hemopoiesis o hematopoyesis (del griego , --, 'sangre' y , 'creacin'): generacin de clulas sanguneas.

[40]

La diferenciacin de los linfocitos T CD4+ vrgenes es influida por las


citoquinas que inducen los distintos patgenos en las clulas dendrticas.
As, los linfocitos T CD4+ vrgenes activados en presencia de:
o IL-12 se diferenciarn hacia linfocitos TH1 (favorecen respuesta
celular). Empiezan a secretar IFN- (defensa contra patgenos
intracelulares).
o IL-4 se diferenciarn hacia linfocitos TH2 (respuesta humoral).
Empiezan a secretar IL-4 (defensa contra parsitos, alergia, asma).
o TGF1, IL-23, IL-6 se diferenciarn hacia linfocitos TH17. Empiezan a
secretar IL-17 (defensa contra bacterias, autoinmunidad y cncer).
o TGF1 se diferenciarn hacia linfocitos TREG. Empiezan a secretar
TGF1 (inmunosupresin).

Fig. 64: Influencia de las citoquinas en la diferenciacin de linfocitos T.

Los macrfagos tambin secretan distintas citoquinas en respuesta a productos bacterianos (IL-1, TNF-, IL-6, IL-8,
IL-12).

Fig. 65: Citoquinas producidas por macrfagos.

Las citoquinas pro-inflamatorias ms importantes son:


o TNF-: activa el endotelio para que exprese molculas de adhesin.
o IL-1: activa el endotelio.
o IL-6: aumenta la produccin de anticuerpos.

[41]

REGULACIN DE CITOQUINAS

Induccin por citoquinas de:


o Sus inhibidores.
o Inhibidores de los receptores.
o Las vas de transduccin de seales.

Los inhibidores pueden ser:


o Receptores decoy en la membrana celular.
o Molculas que bloquean la transduccin de seales.
o Molculas que bloquean factores de transcripcin o
fosfatasas.
Fig. 66: Regulacin de citoquinas.

RECEPTORES DE CITOQUINAS

Todos los receptores son protenas de transmembrana. La mayora son heterodmeros, donde una cadena
(extracelular) reconoce la citoquina y la otra (intracelular) transduce la seal.
o La sealizacin se activa por el agrupamiento de la regin intracitoplasmtica, inducida por el ligando.

Clases de receptores:
o Superfamilia inmunoglobulina.
Ligandos: IL-1, M-CSF, c-kit.
o Clase 1 (hematopoytica).
Ligandos: IL-2 7, IL-9, IL-11 13, IL-14, etc.
o Clase 2 (interfern).
Ligandos: IFN-//, IL-10.
o TNF.
Ligandos: TNF-, TNF-, CD40, NGF, Fas.
Acciones biolgicas del TNF:
En bajas concentraciones: induce inflamacin aguda (acta sobre leucocitos y endotelio).
En concentraciones moderadas: media efectos sistmicos de la inflamacin.
En altas concentraciones: causa efectos patolgicos como shock sptico.
o Receptores de quimioquinas.
Ligandos: IL-8, RANTES, MIP-1, PF4, MCAF, NAP-2.
o Superfamilia de receptores de IL-2 (subunidad comn).

La respuesta a las citoquinas es mediada en la


porcin intracelular del receptor por las kinasas
JAK.
o La unin de la citoquina al receptor
provoca su dimerizacin, lo que favorece
la interaccin entre las JAK de cada
receptor, fosforilndose (activndose)
mutuamente y fosforilando al receptor.
o Esta fosforilacin recluta factores de
transcripcin STATs (Signal Transducer
and Activator of Transcription), que son
fosforilados a su vez por los JAKs.
Fig. 67: Transduccin de seales (por el receptor de citoquinas).
o Los STATs fosforilados (activados) forman
dmeros y se van al ncleo a transcribir genes.
[42]

CITOQUINAS EN SUBPOBLACIONES DE LINFOCITOS TH

Linfocitos TH1:
o IFN-:

o IL-2:

Activa macrfagos (aumenta capacidad microbicida, expresin de MHC-II e IL-12).


Favorece el cambio a IgG con capacidad opsonizante.
Es central en hipersensibilidad retardada.
Bloquea la activacin de linfocitos TH2.
Proliferacin celular. Junto con IFN- promueven diferenciacin de linfocitos citotxicos.

Linfocitos TH2:
o IL-4 e IL-5:
Inducen produccin de IgE.
Inducen diferenciacin y activacin de eosinfilos.
Estimulan la sntesis de IgG que no activan el complemento.
o IL-4:
Suprimen la expansin de TH1.

QUIMIOQUINAS

Importantes en migracin. Sus receptores funcionan de forma distinta a la de las dems citoquinas.
No necesitan llegar al ncleo, actan mediante protenas G modificando el esqueleto de actina para la migracin
celular hacia sitios donde haya ms citoquinas.
Son cruciales en la salida de linfocitos hacia un foco inflamatorio determinado (extravasacin).
Se pueden crear inhibidores de citoquinas mediante la produccin de anticuerpos monoclonales contra una
determinada citoquina. De esta manera, se pueden neutralizar respuestas inflamatorias.

FUNCIONES DE CITOQUINAS IMPORTANTES

Interleuquina 2 (IL-2).
o Factor de crecimiento de los linfocitos T ms importante (responsable de la expansin clonal).
o Proliferacin de clulas especficas para el antgeno.
o Accin sobre otras clulas (linfocitos B y clulas NK).
o Apoptosis de linfocitos T activados por antgeno, aparentemente en estimulacin crnica.

Interleuquina 4 (IL-4).
o Sobre los linfocitos B: cambio de isotipo de la IgE y algunas IgG (la cual no activa el complemento).
o Principal estmulo para la generacin de linfocitos TH2 (desarrollo y expansin).
o Inhibe activacin de macrfagos.

Interfern gamma (IFN-).


o Importante en activacin de macrfagos, crtica en la inmunidad innata y adaptativa.
o Cambio de isotipo.
o Desarrollo de TH1.
o Aumento en la expresin de MHC.

Otras interleuquinas:
o IL-21: potenciales acciones en linfocitos T, NK y B.
o IL-7: desarrollo en linfocito T, desarrollo de linfocito B.
o IL-9: produccin de mucus, proliferacin de clulas cebadas.
o IL-15: desarrollo de clulas NK, homeostasis de linfocitos T, CD8+ y de memoria.
[43]

Factor de necrosis tumoral (TNF):


o Tiene dos mecanismos de accin:
NF-B: generacin de enzimas degradadoras
de tejidos mediante cambios en expresin
gnica (inflamacin).
Apoptosis: por la unin de FADD y activacin
de caspasa-8.
o Su accin biolgica vara dependiendo de la
concentracin que haya:
En pocas cantidades, participa en la
inflamacin local.
En cantidades moderadas, puede producir
efectos sistmicos (fiebre, etc.).
En cantidades elevadas, puede producir shock
sptico.
Fig. 68: Acciones biolgicas de TNF.
o Tiene un rol importante en la artritis reumatoidea
(RA):
Es mediador en la inflamacin patolgica.
Es mediador en la destruccin de las articulaciones.
Es mediador de sntomas sistmicos extra-articulares de la inflamacin.
Regula los niveles de molculas de adhesin responsables de la migracin de leucocitos.

[44]

1.9.

MADURACIN DE LINFOCITOS

Stem cell.
Common lymphoid progenitor (CLP).
o Pro-B.
Linfocitos B foliculares (90%).
Linfocitos B-1.
Linfocitos B de la zona marginal14 (poseen
receptor incompleto).
o Precursor de clula T e ILC.
ILC (clulas NK, por ejemplo).
Pro-T.
Linfocito T (95%).
o T CD4+ (helper).
o T CD8+ (citotxicos).
Linfocito T (5%).

Existen diversos check-points en la maduracin linfocitaria (en


rgano primario):
o Pro-B/T Pre-B/T: se comprueba la produccin de la
primera cadena (cadena pesada [H]) del pre-receptor. Si
falla, sufre apoptosis.
o Pre-B/T Linfocito B/T inmaduro: se comprueba la
produccin de la segunda cadena (cadena liviana [L]) del
Fig. 69: Linaje de linfocitos B y T
receptor. Si falla, sufre apoptosis.
o Linfocito B/T inmaduro Linfocito B/T maduro (Seleccin Negativa): si el linfocito inmaduro tiene alta
afinidad por su propio antgeno, es destruido. Si no, pasa a Seleccin Positiva.

Fig. 70: Check-points durante la


maduracin linfocitaria.
14

Tanto linfocitos B-1 como los de la zona marginal responden a antgenos timo-independientes (no proteicos).

[45]

Existen reguladores transcripcionales especficos que conducen el compromiso hacia el linaje T o B.


o Notch-1, GATA-3 Pro-T.
o EBF, E2A, Pax-5 Pro-B.

MADURACIN DE LINFOCITOS B

La fase de maduracin antgeno-independiente (Stem cell Linfocito B inmaduro) ocurre en la mdula sea.
o Stem cell Pro-B: slo hay proliferacin.
o Pro-B Pre-B: ocurre recombinacin15 (VDJ) de la cadena pesada (mRNA IgM) de las inmunoglobulinas
(VDJ). Aparece as el pre-receptor16 del linfocito B (cadena pesada + cadena constante pre-B).
o Pre-B Linfocito B inmaduro: se recombinan las cadenas livianas (VJ).
Aparece entonces el BCR (IgM).
Ocurre seleccin negativa: en este caso, la clula tiene dos vas.
Delecin (muerte) celular.
Edicin de receptor: acta como va de escape de la muerte.
Tambin hay proliferacin.

La fase antgeno-dependiente (activacin y diferenciacin) ocurre en la periferia (rganos linfticos secundarios).


o Linfocito B inmaduro Linfocito B maduro17: ocurre splicing alternativo del transcrito primario de la
cadena pesada de las inmunoglobulinas, crendose cadenas (original, IgM) y (IgD). Ambas de membrana.

Fig. 71: El desarrollo de linfocitos


B comienza en la mdula sea y
se completa en la periferia.

En las distintas etapas de maduracin se expresan diferencialmente distintas molculas en la superficie del linfocito.

15

En las etapas donde hay recombinacin (rearreglo gnico: donde se elimina todo lo que no se ocupa) se expresan los genes RAG.
Pre-receptor: forma previa del receptor final en donde hay un sustituto de la cadena liviana (cadena liviana subrogante). sta est
unida transitoriamente a la cadena pesada a travs de enlaces covalentes (disulfuro). La mayor diferencia con las verdaderas
cadenas livianas es que no son variables, sino que para todos los pre-receptores son idnticas.
17
El proceso de maduracin de linfocitos B finaliza en el bazo (aunque no se ha encontrado un homlogo de AIRE all). Mientras que
la activacin de linfocitos B (primer contacto con antgeno externo) ocurre en un rgano linftico secundario.
16

[46]

Fig. 72: Etapas de la maduracin de linfocitos B.

Aproximadamente 5 millones de linfocitos B salen de la mdula


sea al da (un 80% de linfocitos creados no pasa algn checkpoint). Sin embargo, slo un 10% de los linfocitos B que salen
se encuentran con su antgeno, el resto muere (ya que
necesitan seales de sobrevida, las cuales son otorgadas por el
reconocimiento antignico).

Las clulas del estroma de la mdula sea son esenciales en las


etapas tempranas de la maduracin de linfocitos B.
o La adhesin de las pro-B a las clulas del estroma
permite que se exprese la tirosina-kinasa c-kit, que une
el ligando SCF18.
o Esta unin har que se enven seales para que se
exprese el receptor de IL-7, que al captar IL-7 (de las
clulas estromales), inducir la proliferacin del prolinfocito B y el rearreglo de la cadena pesada del pre-B
(Pro-B Pre-B).

Fig. 73: Importancia de las clulas del estroma de


la mdula sea en la maduracin de linfocitos B.

La formacin correcta del pre-receptor del linfocito B es crtica en su desarrollo, ya


que el pre-receptor debe asociarse en la membrana con cadenas Ig e Ig, las
cuales estn encargadas de sealizar hacia intracelular gracias a secuencias ITAM
(ricas en tirosina, fcilmente fosforilables). Estas cadenas sealizan slo si estn
asociadas al pre-receptor. De esta manera, el pre-receptor19 enva las siguientes
seales:
o Envan seales de sobrevida y proliferacin de las clulas pre-B.
o Inhiben la recombinacin de la otra cadena pesada (exclusin allica).
o Estimula la recombinacin de la cadena liviana (siempre parte por
recombinar . Si resulta afuncional se rearregla el otro alelo y si no, se
pasa a las cadenas 20) e inhiben la transcripcin de la cadena liviana
subrogante (shutoff).

18

Fig. 74: Receptor de clula


pre-B (pre-receptor).

SCF: Stem Cell Factor.


No hay ligando en esta sealizacin, aunque se sospecha de algunos posibles candidatos.
20
Por lo tanto, hay 4 oportunidades de recombinacin de la cadena L (liviana). Adems, por eso hay ms receptores con que con .
19

[47]

TOLERANCIA CENTRAL DE LINFOCITOS B

Ocurre en la mdula sea.

Si un linfocito B tiene alta avidez (genera una seal


potente) con un antgeno propio, ste tiene dos vas:
o Seleccin negativa: linfocitos B autorreactivos son
eliminados.
o Edicin de receptor21: si el linfocito B reconoce un
antgeno propio con mucha afinidad, tiene la
capacidad de rearreglar la cadena liviana de otro
alelo (vuelve a expresar RAG). As, si el BCR sali
afuncional de la primera recombinacin de , ste
tiene 3 posibilidades de edicin. Si en alguno de
los 4 rearreglos dej de ser autorreactivo, no se
procede a apoptosis.

Si el linfocito B tiene una baja avidez con un antgeno


propio, ste pasa a ser un linfocito B anrgico.
o El linfocito B anrgico sale a la periferia, pero no se
activa al reconocer su antgeno22 y eventualmente
muere.

Fig. 75: Tolerancia central de linfocitos B

SUBTIPOS DE LINFOCITOS B

Linfocitos B-1: se desarrollan en el hgado


fetal.
o Tienen muy poca variabilidad (poco
rearreglo) y expresan slo IgM y
CD5.
o Reconocen antgenos no proteicos
(timo-independientes).

Linfocitos B-2: se desarrollan en la mdula


sea. Hay de 2 tipos:
o B-2 foliculares (95% de los linfocitos
o

B totales): expresan IgM e IgD.


Fig. 76: Subtipos de linfocito B
B-2 marginales: principalmente en
el bazo. Expresan CD21/CR2 y slo IgM.

Linfocitos B-10: poseen una funcin regulatoria (fueron descubiertos no


hace mucho tiempo).

La expresin simultnea de IgM e IgD (propio de los linfocitos B-2


foliculares) ocurre por splicing alternativo del mRNA primario, el cual
tiene los 2 segmentos constante y (para IgM e IgD, respectivamente).

21
22

La edicin del receptor es un proceso exclusivo de los linfocitos B.


In vivo no sale del estado anrgico. In vitro se ha logrado reactivar con varias seales.

[48]

Fig. 77: Expresin simultnea de


IgM e IgD.

MADURACIN DE LINFOCITOS T
1) Stem cell Pro-T: ocurre proliferacin y migracin desde la mdula sea hacia el timo.
2) Pro-T Pre-T: se recombina la cadena (VDJ). Aparece el pre-TCR con una cadena y una pre-T23.
3) Pre-T (Doble Negativo) Doble Positivo: se recombina la cadena (VJ). Aparece el TCR en la membrana. Se
expresan simultneamente los co-receptores CD4 y CD8.
4) Doble Positivo Simple Positivo (Linfocito T inmaduro): el linfocito se compromete a CD4 o CD8 debido a
seleccin positiva y negativa (hay respuesta a antgeno).
5) Simple Positivo Linfocito T virgen (maduro): el linfocito sale del timo listo para ser activado.

Fig. 78: Etapas de la maduracin de linfocitos T.

El 95% de los linfocitos T son , el otro 5% son


, los cuales son intraepiteliales en su mayora
y pueden reconocer antgenos lipdicos por
CD1.
o El rearreglo de es antes que el de
y es ms simple (reconoce antgenos
lipdicos).

En el timo, la mayor parte de los linfocitos T se


encuentran como doble positivo.

Fig. 79: Maduracin de linfocitos T en el timo.


23

Acta como la cadena subrogante (como la cadena liviana subrogante del pre-receptor en los linfocitos B). Es idntica a la cadena
, pero es constante.

[49]

El rearreglo gnico en linfocitos T es exactamente igual al que ocurre en linfocitos B:


LT
LB

Recombinacin
o Cadena Cadena pesada (H)

VDJ (cromosoma 7)
o Cadena Cadena liviana (L)

VJ (cromosoma 14)
Fig. 80: Dominios en las
protenas Ig y TCR.

Al igual que en los linfocitos B, la formacin correcta del pre-receptor es esencial


en su desarrollo. En este caso, el pre-TCR se asocia a un complejo constante CD3,
el que se encarga de sealizar hacia el intracelular gracias a sus secuencias
ITAM:
o Envan seales de sobrevida y proliferacin de pre-T.
o Inhiben la recombinacin de la otra cadena (exclusin allica).
o Estimulan la recombinacin de la cadena (e inhiben la transcripcin de
la pre- que era la cadena subrogante).
o Estimulan la expresin de CD4 y CD8 (paso de Doble Negativo a Doble
Positivo).
Fig. 81: Pre-receptor en el
desarrollo del linfocito T.

Fig. 82: Expresin de CD4 y CD8 en timocitos (linfocitos en proceso de maduracin a linfocitos T). A la izquierda se
ve un grfico de citometra de flujo. De este grfico y esquema podemos decir dos cosas importantes:
1. Se produce ms CD4+ que CD8+ porque los linfocitos T de ayuda son ms necesarios.
2. El paso de Doble (+) a Simple (+) no es directo, hay un estado intermedio (linfocito CD4+/CD8lo).

[50]

SELECCIN DE LINFOCITOS T EN EL TIMO

Es mucho ms crucial seleccionar bien a los linfocitos T que a los B. Si sale un linfocito B autorreactivo y no est su
contraparte T helper, la respuesta que se monte ser muy dbil. En cambio, si ocurre lo opuesto, un linfocito T
helper autorreactivo podr activar a muchas otras clulas inmunes que podrn atacar al cuerpo.

Seleccin Positiva: las clulas epiteliales de la corteza del timo (cTEC) se encargan de presentar antgenos a los
linfocitos T doble (+) por MHC-I y MHC-II. Juzgan su afinidad:
o Si el linfocito T reconoce un MHC con muy baja afinidad o no reconoce, ste es enviado a apoptosis.
o Si el linfocito T reconoce con baja/media (moderada) afinidad a un MHC-I o MHC-II, ste pasa la seleccin
positiva y entonces se compromete a CD4 o CD8 (pasa a ser un Simple Positivo).

Seleccin Negativa: es muy estricta. Las mTEC (clulas epitelio-reticulares medulares) presentan antgenos propios a
los linfocitos T mediante MHC-I y MHC-II.
o Si el linfocito T reconoce un antgeno propio con alta afinidad, ste muere por apoptosis.
o Si el linfocito T reconoce el antgeno propio con baja afinidad, ste se transforma en un linfocito T maduro.
o Si el linfocito T tiene una afinidad subumbral (intermedia) por un antgeno propio, ste linfocito se
transforma en un linfocito T regulatorio.

Fig. 83: Proceso de seleccin en el timo

[51]

TOLERANCIA CENTRAL DE LINFOCITOS T

El proceso de seleccin negativa puede producirse tanto en


la corteza como la mdula del timo, pero principalmente
ocurre en la mdula.

A diferencia de los linfocitos B, en el proceso de maduracin


de los linfocitos T no existe edicin del receptor. No
obstante, tambin existe una va de escape de la muerte
(apoptosis celular). Entonces, aquellos linfocitos T que
reconocen fuertemente un antgeno propio tienen dos
caminos:
o Delecin (muerte celular) por seleccin negativa.
o Produccin de linfocito T regulatorio (CD4+ CD25+)24:
su afinidad no es tan alta como para que se les
induzca apoptosis, pero tampoco es tan baja como
para que pueda madurar completamente.

Fig. 84: Destino de los linfocitos de acuerdo a la


afinidad de su receptor por los complejos
antgeno-MHC.

Fig. 85: Tolerancia central de linfocitos T.

Fig. 86: Principales eventos de la maduracin de linfocitos T en el timo.

24

CD25 es lo mismo que cadena del receptor de IL-2. La mayora de los linfocitos T regulatorios son CD4 , pero se ha descubierto
+
recientemente una poblacin que son CD8 .

[52]

Las cTEC (clulas epitelio-reticulares corticales) generan los complejos [Antgeno25-MHC] a travs de rutas nicas.
Presentan los mismo antgenos a travs de dos vas:
o Va clsica de presentacin: por MHC-I.
La protena endgena es destruida por proteosoma.
Los pptidos endgenos generados son introducidos al retculo endoplasmtico (a travs del
complejo TAP26, compuesto por TAP1 y TAP2).
En el retculo endoplasmtico los pptidos son asociados a la molcula de MHC-I27.
o Por MHC-II.
Generalmente asociamos MHC-II con antgenos externos28, no obstante, las cTEC tienen poca
actividad endoctica (a diferencia de los macrfagos o las clulas dendrticas), lo cual significa un
problema para poder mostrar antgenos a travs de MHC-II.
Es por ello que desarrolla una estructura llamada macroautofagosoma, el cual envuelve a la
protena endgena.
Lleva la protena a un endosoma donde habrn enzimas (catepsina) que la convertirn en pptidos
que podrn ser asociados a MHC-II y de esa manera, presentados.

Fig. 87: Las clulas epiteliales corticales del timo generan complejos pptidoMHC a travs de rutas nicas.

25

La variabilidad antignica presentada es muy baja, son solo algunos antgenos tmicos.
TAP: Transporter associated with antigen processing (tipo de transportador ABC).
27
En este proceso de presentar antgenos, lo fundamental es el reconocimiento de MHC por parte de los linfocitos. El pptido sirve
principalmente para estabilizar la molcula de MHC (ms que para el reconocimiento).
28
Vase captulo sobre Complejo Mayor de Histocompatibilidad (1.5)
26

[53]

Las mTEC (clulas epitelio-reticulares medulares)


expresan un factor de transcripcin exclusivo de
estas clulas, AIRE (autoimmune regulator), el cual
permite expresar antgenos propios de distintos
rganos del cuerpo (distintos del timo) al mismo
tiempo (expresin gnica promiscua).
o Con esto, se elimina un porcentaje
importante de linfocitos T autorreactivos
(los cuales son ms peligrosos que los
linfocitos B autorreactivos). Por eso el
organismo es ms meticuloso con la
seleccin y tolerancia de linfocitos T.

Fig. 88: Expresin gnica promiscua (distintos tejidos son representados en las mTECs).

Muchos de los antgenos de mTEC generados por AIRE son


transferidos a clulas dendrticas inmaduras. Esto se debe
gracias a dos razones:
o Las mTEC no son muy buenas APC29, adems de
que tienen una alta tasa de apoptosis.
o Las clulas dendrticas inmaduras poseen una alta
tasa de fagocitosis.

Como conclusin, podemos decir que:


o Las cTEC estn involucradas en la seleccin
positiva presentando antgenos propios tanto en
MHC-I (va clsica) como MHC-II (va nica).
o Las mTEC estn involucradas en la seleccin
negativa presentando variados antgenos propios
gracias al factor de transcripcin AIRE, pero como
no son muy buenas APCs realizan transferencia de
antgenos con clulas dendrticas.

Fig. 89: Tolerancia central a antgenos tejido-especficos por


mecanismos dominantes y recesivos.

29

Clulas que mueren por apoptosis, que realizan mecanismo dominante (mTEC) son fagocitadas por clulas dendrticas que luego
podrn expresar los antgenos propios (mecanismo recesivo).

[54]

MIGRACIN DE LINFOCITOS T

cTEC estimula la expresin de CCR7 en linfocitos


(aquellos con xito en la seleccin positiva).
o CCR7 es un receptor de quimioquinas.
o Las quimioquinas son CCL19 y CCL21,
las cuales son liberadas por las mTEC.
o Eso explica la migracin a la mdula
del timo.

Fig. 90: Migracin de linfocitos T de la corteza a la mdula


del timo.

Ya en la mdula, la dbil interaccin de las mTEC con los linfocitos T


estimula la expresin en estos ltimos de S1P130, el cual es un
receptor de S1P, un esfingolpido de sealizacin que est en altas
concentraciones en la sangre.
o Esto genera la migracin de los linfocitos T seleccionados
a la circulacin sangunea para poder trabajar.

Fig. 91: Migracin de linfocitos T de la mdula del timo a la


circulacin sangunea.

SUPRESIN BYSTANDER31 POR LINFOCITOS T REGULATORIOS

30
31

Este mecanismo puede


compensar una
representacin incompleta en el timo (una falla en
la tolerancia central).
En algunos casos puede salir del timo un linfocito T
CD4+ autorreactivo que reconoce un pptido de
alguna protena del cuerpo (por ejemplo: la cadena
de la H+-K+-ATPasa de las clulas parietales
gstricas), que puede presentada por una clula
dendrtica por MHC-II.
Sin embargo, en el timo puede haberse creado un
linfocito T regulatorio con afinidad media-alta por
un pptido propio que azarosamente forma parte
de la protena por la cual el linfocito T CD4+ es
autorreactivo (por ejemplo: la cadena de la H+-K+ATPasa).
En este caso, cuando el linfocito T CD4+ reconozca
en las clulas dendrticas su pptido, esa misma
clula dendrtica va a estar presentando tambin el
pptido del linfocito T regulatorio, por lo cual este
tambin se activar junto con el linfocito T CD4+.
Fig. 92: Supresin bystander.
Sin embargo, el linfocito T regulatorio realizar una
accin inhibitoria sobre el linfocito T CD4+, y evitar que se active (supresin bystander).
S1P1 (o S1PR1) es el receptor de esfingosina-1-fosfato (S1P).
Bystander podra traducirse como testigo o espectador.

[55]

1.10. ACTIVACIN DE LINFOCITO T

Activacin de linfocitos T vrgenes (nave): los linfocitos T


vrgenes son activados en los rganos linfticos
secundarios y solamente por clulas dendrticas (DC)
maduras. De esa manera, se transforman en linfocitos T
efectores.
o Al activarse comienzan a secretar IL-2
(interleuquina 2) autocrina y paracrinamente,
comenzando as la expansin clonal.
Activacin de linfocitos T efectores: los linfocitos T
efectores son activados por cualquier APC (clula
presentadora de antgeno) en el sitio de la infeccin (esta
activacin es distinta a la seal inicial dada por las clulas
dendrticas).
Fig. 93: Activacin de linfocitos T vrgenes y
efectores por antgeno

FASES DE LA RESPUESTA DE LINFOCITOS T


1)
2)
3)
4)
5)

Reconocimiento de antgeno: las clulas dendrticas (DCs) presentan antgenos a linfocitos T vrgenes.
Activacin de linfocitos: los linfocitos T vrgenes se activan y expresan IL-2 e IL-2R (receptor de IL-2).
Expansin clonal: gracias a la IL-2, los linfocitos T activados se multiplican.
Diferenciacin: los linfocitos se diferencian a clulas efectoras y de memoria.
Funciones efectoras.

Fig. 94: Fases de la respuesta de linfocitos T.

[56]

Gracias a la presentacin cruzada que hacen las


clulas dendrticas, estas pueden presentar
antgenos extracelulares por MHC-I y as pueden
activar linfocitos T CD8+ (presentan los mismo
antgenos por MHC-I [CD8+] y MHC-II [CD4+]).
o De esta manera, el linfocito T CD8+ ahora
puede atacar a las clulas infectadas.
Fig. 95: Presentacin cruzada de antgenos a linfocitos T
CD8+.

La diferenciacin de linfocitos T citotxicos (CTL) est influenciada por


coestimulacin:
o Activacin simple por reconocimiento de antgeno (seal 1) y
coestimuladores en la APC (seal 2).
o A la situacin anterior se agrega un linfocito T CD4+ que produce
citoquinas (seal 3) que favorecen an ms la diferenciacin (el
CD4+ ayuda a la APC a activar linfocitos).
o El linfocito T CD4+ aumenta la habilidad de las APC de presentar
antgenos y estimular la diferenciacin a CTL.

Una vez que comienza la expansin clonal, se obtiene la mxima


respuesta efectora alrededor del 7 da, y luego comienza a declinar
(contraccin, homeostasis) hasta llegar al da 14 donde slo quedan las
clulas de memoria.
Fig. 96: Seales de activacin de
linfocitos T.

Fig. 97: Expansin clonal de linfocitos T y generacin de


memoria.

32

Los coestimuladores son esenciales en la activacin de linfocitos T, ya


que si no hay en la APC, no ocurre respuesta (anergia tolerancia).
o Cuando la APC reconoce un PAMP, sta se activa, madura y
aumenta su expresin de coestimuladores, MHCs y secreta
citoquinas.
o Los coestimuladores ms importantes son:
B7-1 y B7-232 en APC. Su receptor en el linfocito T es
CD28. Importante para activar linfocitos T vrgenes.
ICOS-L en APC. Su receptor en LT es ICOS. Importante
para activar clulas efectoras.
B7-1 = CD80 / B7-2 = CD86. Bcl-xL y Bcl-2 son protenas anti-apoptticas.

[57]

Fig. 98: Mecanismos de estimulacin


de linfocitos T por CD28.

Un linfocito T efector mediante CD40L puede activar una APC sin que ella haya sido activada previamente por
PAMPs, inducindola as a expresar coestimuladores (B7) y citoquinas que ahora podrn activar otros linfocitos
vrgenes.
o Esto es importante para reclutar APCs y as amplificar la respuesta.

Fig. 99: Participacin de CD40 durante la activacin de linfocitos T.

Mecanismo de bloqueo teraputico de la coestimulacin:


o CTLA-4-Ig es una molcula quimrica.
o Secuestra molculas coestimuladoras y de esta manera,
el linfocito se vuelve anrgico.
o Este es un tratamiento deseable en trasplantes de
rganos.

Fig. 100: Bloqueo teraputico de la coestimulacin.

Cronologa de la expresin gnica en linfocito T activado (nivel


mximo de expresin):
o Todo empieza en primera instancia con una elevacin
del [Ca2+]i.
o c-Fos: factor de transcripcin, parte de AP-1.
o CD69: retiene el linfocito en el rgano linfoide.
o IL-2R33: aumenta proliferacin de linfocitos.
o CD40L: activa clulas dendrticas (DC), macrfagos
y linfocitos B (mejora las APC).
o CTLA-4: controla la respuesta inmune.

Fig. 101: Cambios en las molculas de superficie


luego de la activacin de linfocitos T.
33

La cadena del receptor de IL-2 (CD25) aumenta su afinidad por IL-2, por lo que genera una mayor proliferacin de linfocitos.

[58]

IL-2 y su receptor (IL-2R).


o El receptor de IL-2 est compuesto bsicamente de 3
cadenas: , , .
La cadena no es necesaria en la
estructura, pero cuando se expresa,
aumenta la afinidad del receptor por IL-2.
La activacin del linfocito T debido a la APC
(reconocimiento
de
antgeno
+
coestimulacin) hace que el linfocito libere
IL-2, la cual estimular la expresin de la
cadena , formando as el complejo de alta
afinidad IL-2R.
o Acciones biolgicas de la IL-2.
Proliferacin y diferenciacin de linfocitos T
(a clulas efectoras y clulas T de memoria).
Mantencin de linfocitos T regulatorios
funcionales.

Fig. 102: Regulacin de la expresin del IL-2R.

La interaccin entre TCR y MHC-I es dbil, por lo que se necesitan molculas estabilizadoras y de adhesin (sinapsis
inmunolgica).
o Juega un papel importante LFA-134 en el linfocito T (integrina L2) para la adhesin celular.
o Muchas clulas tumorales presentan PD-L1 y PD-L235 para disminuir la respuesta inmune contra ellas.

Fig. 103: Pared receptor-ligando involucrados en la activacin de linfocitos T.

34
35

LFA-1: Lymphocyte function-associated antigen 1.


PD-L1 (= CD274) y PD-L2: Programmed death-ligand 1 y 2.

[59]

SEALIZACIN INTRACELULAR DURANTE LA ACTIVACIN DE LINFOCITOS T

La sealizacin desde la superficie celular


involucra fases citoslicas y nucleares.

Las molculas correceptoras CD4 y CD8 tienen


en su porcin intracelular una tirosina-kinasa de
la familia Src: Lck36. Al activarse, la Lck fosforila
las secuencias ITAM del complejo CD3 y
(zheta), las cuales ahora reclutarn la protena
ZAP-7037 (por dominio SH2, que permite unin a
tirosinas fosforiladas). La ZAP-70 ahora ser
capaz de fosforilar otras protenas como LAT38, a
la cual se anclarn otras protenas, como la PLC
(Fosfolipasa C).

Secuencias de activacin:
o La PLC activada genera IP3 que aumenta
la [Ca2+] citoslico. El Ca2+ se une a la
calmodulina y ste luego se une y activa
a la calcineurina (una fosfatasa), la cual
activa finalmente el factor de
transcripcin NFAT39.
La calcineurina remueve un
fosfato de NFAT, lo que permite
su activacin y migracin hacia el
ncleo.
o La
PLC
activada
genera
DAG
(diacilglicerol), el cual activa la PKC
(fosfokinasa C). La PKC activa la IB
kinasa, que fosforila la IB (protena
inhibitoria unida a NF-B) haciendo que
se libere. De esta manera se activa el
factor de transcripcin NF-B40.
o A la protena LAT se le unen otras
protenas mediante adaptadores, las
cuales activan la va de RAS:
RAS-GDP RAS-GTP (mediante
SOS).
MEK-1 ERK-1.
Finalmente activar el factor de
transcripcin AP-141.
o Estos 3 factores de transcripcin (NFAT,
NF-B, AP-1) se unirn a distintas
regiones reguladoras en el DNA y
activarn la transcripcin de IL-2.

Fig. 104: Eventos de sealizacin intracelular durante la


activacin de linfocitos T.

Fig. 105: Activacin de factores de transcripcin en linfocitos


T.

36

Lck: lymphocyte-specific protein tyrosine kinase. Miembro de la familia de las Src kinasas (poseen un dominio SH2).
ZAP-70: Zeta-chain-associated protein kinase 70. Miembro de la familia de las Syk kinasas (poseen dos dominios SH2).
38
LAT: Linker for activacin of T cells.
39
NFAT: Nuclear factor of activated T-cells.
40
NF-B: Nuclear factor kappa-light-chain-enhancer of activated B cells.
41
AP-1: Activator protein 1. Formado por dos protenas: fos y jun.
37

[60]

La ciclosporina es un medicamento utilizado como inmunosupresor, ya


que acta inactivando la calcineurina. Es usado a partir de 1980
aproximadamente para pacientes trasplantados.

La transcripcin de seales desde CD28 es esencial para aumentar la


expresin de IL-2, ya que CD28 recluta la PI3-K.
o PI3-K fosforila PIP242 para formar PIP3.
o PIP3 activa PDK143.
o PDK1 activa Akt44, la cual finalmente promueve la sobrevida
celular.

El receptor inhibitorio CTLA-1 ejerce su funcin de dos maneras:


o Por su elevada afinidad por B7 (mucho ms que CD28), desplaza
a CD28.
o En su porcin intracelular, tiene fosfatasas asociadas que
pueden desfosforilar las secuencias ITAM.

Fig. 106: Participacin de PI3-kinasa


(PI3-K) en la respuesta de linfocitos T.

En la finalizacin de la respuesta participa tambin la ubiquitn-ligasa Cbl-b, que monoubiquitina la protena ZAP-70
y regiones del CD3 del TCR, envindolas a degradacin.

Fig. 107: Mecanismo de accin del


receptor inhibitorio CTLA-4.

Fig. 108: Participacin de la ubiquitn-ligasa Cbl-b en la


finalizacin de la respuesta de linfocitos T.

42

PIP2: fosfatidil-inositol 4,5-bifosfato. PIP3: fosfatidil-inositol (3,4,5)-trifosfato.


PDK1: 3-phosphoinositide dependent protein kinase-1.
44
Akt = PKB (protena kinasa B).
43

[61]

SUBTIPOS DE LINFOCITOS T HELPER

Dependiendo de las citoquinas secretadas por la clula dendrtica


activadora, el linfocito T CD4+ se diferenciar hacia distintos subtipos
celulares:
o Distintos antgenos/microorganismos (reconocido por PAMPs)
hacen que las APC presenten distintas citoquinas, las cuales
resultarn en distintas rutas de sealizacin y por lo tanto,
distintas subpoblaciones de linfocitos.

Fig. 109: Desarrollo de las subpoblaciones de linfocitos.

Diferenciacin de linfocito de acuerdo a las citoquinas secretadas por la clula dendrtica activadora:
o IL-12

Linfocito TH1.
o IL-4

Linfocito TH2.
o TGF- e IL-6

Linfocito TH1745.

Fig. 110: Propiedades de las distintas subpoblaciones de linfocitos T CD4+ (helper).

45

Los linfocitos TH17 son de reciente descubrimiento y se asocian a patologas. Sintetizan IL-17, la cual es pro-inflamatoria.

[62]

Funciones efectoras de los linfocitos TH1 (respuesta celular).


o Si el TH1 reconoce un antgeno en una APC, gracias a su secrecin de IFN-, puede activar macrfagos.
o El IFN- tambin estimula la produccin de anticuerpos en los linfocitos B (IgG), favoreciendo as la
opsonizacin de microbios. De esta manera son reconocidos por receptores Fc de los macrfagos
(fagocitosis).
o El TH1 tambin produce linfotoxina y TNF, los cuales pueden activar neutrfilos.

Fig. 111: Desarrollo de linfocitos TH1.

Fig. 112: Funciones de los linfocitos TH1.

Funciones efectoras de los linfocitos TH2 (respuesta humoral).


o Al activar linfocitos B, producen IL-4, que estimula la produccin de IgG e IgE por parte de estos.
o Gracias a su produccin de IL-5, tambin pueden activar eosinfilos.
o Por su produccin de IL-4 e IL-13 pueden activar alternativamente macrfagos (por ejemplo: en reparacin
de heridas, fibrosis, supresin o inflamacin).

Fig. 114: Funciones de los linfocitos TH2.

Fig. 113: Desarrollo de linfocitos TH2.


[63]

Funciones efectoras de los linfocitos TH17:


o Al liberar IL-17, sta puede generar inflamacin y aumentar la respuesta de los neutrfilos.
o Tambin liberan IL-22, la cual aumenta la funcin de barrera de los epitelios al aumentar la expresin de
tight junction.
o Ambas interleuquinas estimulan la produccin de pptidos anti-microbianos.

Fig. 115: Desarrollo de linfocitos TH17.

Fig. 116: Funciones de los linfocitos TH17.

Funciones efectoras de los linfocitos T CD8+


(citotxicos): mecanismos de induccin de
apoptosis.
o Intrnseca: los grnulos exocitados por las
CTL tienen perforinas y granzimas.
Las perforinas crean poros.
Las granzimas entran a travs de
los poros y activan caspasas y por
consiguiente se inducir la muerte
de la clula blanco.
o Extrnseca: el CTL tiene Fas-L en su
membrana, el cual se une y activa al
receptor Fas en la clula blanco,
activndose as un mecanismo de
apoptosis.
Fig. 117: Mecanismos de muerte celular inducida
por CTL.

[64]

1.11. ACTIVACIN DE LINFOCITO B

Para que ocurra la activacin de un linfocito B, ste


debe recibir dos seales:
o Seal 1: dada por el reconocimiento del
antgeno por el BCR.
o Seal 2: proveniente de la interaccin del
linfocito B con un linfocito T helper, mediante
molculas coestimuladoras CD40/CD40L.

Los antgenos pueden clasificarse en timo-dependientes


y en timo-independientes.
Fig. 118: Antgenos timo-independientes (TI) y timoo Antgenos timo-independientes:
dependientes (TD).
El mismo antgeno es capaz de proveer
las dos seales de activacin al linfocito
B, por lo que ste puede generar una respuesta directamente.
Generalmente no producen cambio de isotipo, maduracin por afinidad ni memoria inmunolgica.
Qumicamente son:
Antgenos timo-independientes tipo 1: componentes de la pared celular de bacterias (como
LPS).
Antgenos timo-independientes tipo 2: protenas polimricas.
Estos antgenos son reconocidos por linfocitos B-1 (5% del total de linfocitos B), que expresan IgM y
CD5.
o Antgenos timo-dependientes:
Necesitan que la seal 2 la provea un linfocito T helper para activarse.
Producen cambio de isotipo, maduracin por afinidad y memoria inmunolgica.
Son de naturaleza proteica.
Son reconocidos por linfocitos B-2 (convencionales), que expresan tanto IgM como IgD y
representan el 95% del total del linfocitos B (tambin llamados foliculares).

ETAPAS DE LA RESPUESTA INMUNE HUMORAL


1) Reconocimiento de antgeno: el
linfocito B maduro reconoce su
antgeno.
2) Activacin del linfocito: gracias a
linfocitos TH el linfocito B es
activado.
3) Proliferacin y diferenciacin46:
ocurre expansin clonal y los
siguientes eventos.
a. Secrecin primaria de
anticuerpos (IgM).
b. Cambio de isotipo: IgM /
IgD IgG.
c. Maduracin por afinidad:
IgG IgG de alta
afinidad.
d. Creacin de clulas B de
memoria.

Fig. 119: Etapas de la respuesta inmune humoral.

46

Cambio de isotipo, maduracin por afinidad y creacin de clulas de memoria son realizados solo si hay linfocito T de ayuda
(antgeno proteico).

[65]

Respuesta humoral primaria:


o El peak de respuesta tarda entre 5 a 10 das.
o La IgM es ms abundante que la IgG y son de
baja afinidad.
o Es inducida por cualquier inmungeno y
requiere altas dosis.
o Se generan clulas de memoria de larga vida
(este es el principio de las vacunas).

Respuesta humoral secundaria:


o El peak de respuesta tarda entre 1 y 3 das y
es mucho mayor que en la respuesta
primaria (se secretan ms anticuerpos).
o Generalmente hay ms IgG y en algunas
situaciones, IgA e IgE.
o Las inmunoglobulinas son de alta afinidad
(ocurri maduracin por afinidad).
o Es inducida slo por antgenos proteicos y
requiere bajas dosis.
o La respuesta secundaria es ms rpida por
las clulas de memoria y por la maduracin
por afinidad.

Fig. 120: Respuesta inmune humoral primaria y secundaria.

SUBPOBLACIONES DE LINFOCITOS B Y SUS RESPUESTAS DE ANTICUERPO

En bazo y nodos linfticos encontramos:


o Linfocitos B foliculares.
Reconoce antgenos proteicos (timo-dependientes).
Reaccin del centro germinal.
Necesita ayuda de linfocito T.
Producen clulas plasmticas de larga vida que generan anticuerpos de alta afinidad por toda la
vida.
o Linfocito B marginal.
Reconoce antgenos timo-independientes.
Producen IgM y clulas plasmticas de vida corta.
En tejido mucoso y cavidad peritoneal:
o Linfocitos B-1.
Igual que los linfocitos B marginales.

Fig. 121: Subpoblaciones de linfocitos


B.

[66]

Cmo llega el antgeno al folculo?


o Rutas linfticas aferentes Seno subcapsular.
o Desde el seno subcapsular hay dos posibilidades.
Antgenos pequeos (estos son solubles)
llegan directamente al folculo por conductos.
Antgenos ms grandes requieren de las
clulas dendrticas medulares o de
macrfagos del seno subcapsular que trizan
al antgeno en pedazos pequeos o bien
pueden presentrselos (el complejo inmune
completo).
o Ya el antgeno en el folculo, all se encuentran con las
clulas dendrticas foliculares, que presentan el
antgeno al linfocito B no con MHC, sino a travs de
Fig. 122: Rutas de llegada de antgenos hasta los
receptores.
linfocitos B foliculares.
El antgeno que presentan no es realmente
soluble, sino que est asociado a receptores
del complemento o FC (forma un complejo inmune).

Fig. 123: Presentacin de antgeno a linfocitos B foliculares.

[67]

SEALIZACIN INTRACELULAR EN LA ACTIVACIN DE LINFOCITOS B

El BCR es un complejo que tiene cadenas Ig e Ig que son las encargadas de


sealizar cuando se reconoce el antgeno. Tienen ITAMs.

Las seales generadas son equivalentes a las del linfocito T.


o ITAMs son fosforiladas por Src kinasas y reclutan la protena Syk
(equivalente a ZAP-70), la cual fosforilar y activar la PLC y otras
protenas que activarn la va RAS.
o De esta manera se activarn NFAT, NF-B y AP-1, los cuales van a activar
la transcripcin de IL-2.

Fig. 124: Complejo receptor


del linfocito B (BCR).

Fig. 125: Transduccin de seales generadas por


BCR.

La sealizacin intracelular puede ser


mejorada
para
antgenos
timodependientes gracias a:
o Receptores
del
complemento:
interacta
con
trozos
de
complementos unidos al antgeno
asociado al BCR.
Si el complemento C3d se
une al microbio, puede
unirse al receptor CR2, que
al igual que CD28 en
linfocitos T, recluta a PI3-K.
Sin embargo, en este caso no
es
esencial
para
la
activacin.
o Toll-like Receptors (TLR): reconocen
ciertos PAMPs del microorganismo.

Fig. 126: Participacin del complemento y de TLRs en la activacin


de linfocitos B.
[68]

RESPUESTAS FUNCIONALES POST-ACTIVACIN: ENCUENTRO CON EL ANTGENO

Aumenta la sobrevida y proliferacin (el encuentro con el


antgeno le otorga seales de vida al linfocito B, por lo que si
no encuentra su antgeno, el linfocito B se muere).
Aumenta la expresin de B7-1/B7-2: para interactuar y
activar el linfocito TH.
Aumenta la expresin de receptores de citoquinas (IL-2R, IL4R, etc.): para aumentar la respuesta a citoquinas.
Aumenta la expresin de CCR7 y el linfocito migra desde el
folculo hasta las reas de linfocitos T.

Fig. 127: Respuestas funcionales inducidas por el


entrecruzamiento del BCR mediada por antgeno.

Gracias a la expresin de CCR7, el linfocito B pudo migrar e interactuar ms fcilmente con linfocitos T helper (TH).
o Este linfocito T helper fue activado a clula efectora previamente por su interaccin con clulas dendrticas.
o La interaccin de linfocito T helper con linfocito B se puede generar en dos sitios:
Foco extrafolicular: genera clulas plasmticas de vida corta.
Reaccin del centro germinal: interaccin entre linfocitos B, linfocito T de ayuda folicular (que migr
al folculo) y clula dendrtica folicular. Esta reaccin genera clulas plasmticas de vida larga y
clulas de memoria.

Fig. 128: Secuencia de eventos de la respuesta humoral a antgenos proteicos (dependientes de linfocitos T).

[69]

Por qu migran?
o Los linfocitos B aumentan la expresin de CCR7 para quimioquinas CCL19 y CCL21.
o Los linfocitos T disminuye su expresin de CCR7 y aumentan la expresin de CXCR5.
o As, ocurre un encuentro en zona cercana al folculo: el linfocito B presenta el antgeno al linfocito T para
interactuar.

Fig. 129: Migracin e interaccin de linfocitos B y T helper.

MIGRACIN E INTERACCIN DE LINFOCITOS T Y B EN LOS GANGLIOS


1) En la paracorteza del ganglio linftico, una clula dendrtica activa un linfocito T
CD4+ (virgen).
a. La activacin har que el linfocito T helper migre hacia el borde del
folculo linftico.
b. En el folculo primario, el linfocito B reconocer y endocitar el antgeno.
Esto producir su migracin al borde del folculo.
2) En el borde del folculo, el linfocito B le presenta el antgeno va MHC-II al
linfocito T helper activado. Esta interaccin produce la activacin del linfocito B
gracias a la secrecin de citoquinas e interaccin por CD40-L del linfocito T
helper (al activar la clula dendrtica al linfocito T, ste expresa la molcula
CD40-L). Al mismo tiempo ocurre cambio de isotipo.
a. Lo que ve el linfocito T es distinto a lo que ve el linfocito B, ya que
distinguen distintos eptopos. El linfocito T reconoce lineales, mientras
que los B conformacionales (el linfocito B expone muchos eptopos del
mismo antgeno).
3) Al activarse el linfocito B, ste migra de vuelta al folculo y o curre la reaccin
de centro germinal:
a. Primero, en la zona oscura ocurre proliferacin de los linfocitos B e
hipermutacin de los genes Ig V (maduracin por afinidad).
b. Luego, en la zona clara, encontraremos dos tipos de clulas:
i. Clulas dendrticas foliculares: los linfocitos B son
seleccionados por clulas dendrticas foliculares, que les
presentan los antgenos a los linfocitos B de una manera
particular (stas no las fagocitan, sino que los presentan
completos mediante receptores de Fc y de complemento
[complejos inmunes]). Los linfocitos B hipermutados se
encontrarn entonces con su antgeno y slo sobrevivirn
aquellos que presenten la mayor afinidad.
ii. Linfocitos T foliculares: prestan ayuda al linfocito B en proceso
de maduracin por afinidad, generacin de clulas de
memoria y cambio de isotipo.

[70]

Fig. 130: Presentacin de antgeno


en linfocito B a linfocito TH.

Fig. 131: Reaccin del centro


germinal.

CAMBIO DE ISOTIPO

El cambio de isotipo consiste en una recombinacin de DNA. Se reordena la regin constante, no la variable.
o Regiones cercanas de VDJ: C y C.
o Definicin de isotipos distintos.
Se elimina por rearreglo un segmento del DNA, dejando ms cerca de VDJ el segmento de un isotipo
distinto. Es un proceso irreversible.
La interaccin del linfocito T helper con el linfocito B produce la secrecin de citoquinas que, dependiendo del
subtipo de TH, generar determinado cambio de isotipos:
o TH1 IFN-. Produce IgG (opsonizacin y activacin del complemento e inmunidad neonatal).
o TH2 IL-4: Produce IgE (inmunidad contra parsitos y alergias).
o Cuando el linfocito B es activado por un antgeno timo-independiente, secreta IgM (activacin del
complemento).

Fig. 132: Cambio de isotipo de la cadena pesada de Ig.

Fig. 133: Mecanismo del cambio de isotipo.

Un linfocito B puede presentar eptopos distintos de un mismo antgeno, por lo


que puede activar distintos linfocitos T helper (efecto carrier-hapteno).

La enzima clave en este proceso es la AID (activation-induced deaminase).


o La AID desamina una regin del DNA que determina la clase de la
inmunoglobulina (Ig), transformando las cistenas en uracilos.
o Luego, por otras reacciones, finalmente esa regin es cortada y ahora en
su lugar quedar otra seccin constante que determinar entonces otro
subtipo de inmunoglobulina.
o Es la activacin del linfocito B producto de su interaccin con un TH la que
induce la expresin de AID (por eso con antgenos timo-independientes
no hay cambio de isotipo).

Fig. 134: Participacin de AID y de la


transcripcin en el cambio de isotipo.
[71]

MADURACIN POR AFINIDAD

Cambio en la regin variable, haciendo a la inmunoglobulina (Ig) ms


especfica para su antgeno (cambio del sitio de unin a antgeno).

Se produce por mutaciones puntuales somticas al azar.


o En el DNA hay hot spots de mutaciones (zonas que estn ms
expuestas).
o Estas mutaciones se van acumulando frente a respuesta
inmunes sucesivas.
o Esta acumulacin de mutaciones genera mayor afinidad (por
lo tanto, menor Kd).

Cmo se eligen los linfocitos con las mutaciones ms eficientes?


o Es un proceso de seleccin dado por clulas dendrticas
o

Fig. 135: Maduracin por afinidad.

foliculares.
Estas clulas le muestran al linfocito B el mismo
antgeno que lo activ.
Si reconoce con alta afinidad: seales de
sobrevida.
Si reconoce con baja afinidad: no recibe
seales de sobrevida y por lo tanto muere.
Las clulas dendrticas foliculares pueden mantener
el antgeno unido largo tiempo en sus prolongaciones
o en icosomas (inmunocomplejos presentes en forma
de pequeos cuerpos de inclusin en las clulas
foliculares dendrticas).
Fig. 136: Mutaciones somticas en las regiones
variables de los genes de Ig.

Fig. 137: Seleccin de linfocitos B en los centros


germinales.

[72]

Produccin de cadenas de membrana y secretadas


en linfocitos B.
o Existen dos sitios de poliadenilacin: uno que
incluye y otro que no al segmento
transmembrana (TM).
o IgM de membrana (en linfocito B): splicing
mantiene el sitio TM.
o IgM de secrecin (en clula plasmtica):
splicing elimina el sitio TM.

Fig. 138: Cadena de membrana y secretada en


linfocitos B.

INHIBICIN DE ACTIVIDAD DE LINFOCITO B POR RECEPTORES DE Fc

El linfocito B tiene receptores para fragmentos FC de inmunoglobulinas, los cuales tienen fosfatasas asociadas en su
porcin intracelular.
As, cuando se secretan muchos anticuerpos, se promueve la inhibicin de la respuesta.

Fig. 139: Inhibicin de la activacin de linfocitos B por receptores FC.

[73]

1.12. TOLERANCIA
CARACTERSTICAS GENERALES DE LA TOLERANCIA INMUNOLGICA

Los individuos normales son tolerantes a los antgenos propios porque los linfocitos autorreactivos son eliminados,
silenciados o su especificidad es cambiada.
o No obstante, es importante destacar que cualquier persona sana tiene linfocitos autorreactivos en
circulacin, es algo normal.
o Pero este individuo no tiene una enfermedad autoinmune porque funciona la tolerancia perifrica.
La tolerancia es el resultado del reconocimiento de antgenos por linfocitos especficos.
La tolerancia a lo propio puede ser inducida en linfocitos autorreactivos inmaduros en los rganos generativos
(tolerancia central) o en linfocitos maduros en la periferia (tolerancia perifrica).
o La tolerancia central se produce durante la
maduracin de los linfocitos en los rganos
linfoides generativos, donde todos los
linfocitos en desarrollo pasan a travs de
una etapa en la que en el encuentro con
antgeno puede llevar a:
La muerte celular.
Al
reemplazo
del
receptor
autorreactivo por uno nuevo
(edicin del receptor, exclusivo de
linfocitos B).
Desarrollo
de
linfocitos
T
o

regulatorios (exclusivo linfocitos T).


Fig. 140: Tolerancia central y mecanismos de tolerancia
La tolerancia perifrica se produce cuando,
perifrica.
como consecuencia del reconocimiento de
antgenos propios, los linfocitos maduros:
Se vuelven incapaces de responder (anergia).
Mueren por apoptosis.
Son activamente suprimidos por linfocitos T
regulatorios.

El que los linfocitos que reconocen un antgeno se activen o se


vuelvan tolerantes es determinado por:
o Las propiedades del antgeno.
o El estado de maduracin de los linfocitos antgenoespecficos.
o El tipo de estmulo recibido por estos linfocitos cuando
se encuentran con el antgeno.

Algunos antgenos pueden ser ignorados por el sistema


inmune.

Antgenos forneos en ausencia de seales coestimulatorias


pueden inhibir la respuesta inmune induciendo tolerancia en
los linfocitos especficos.

La induccin de tolerancia inmunolgica puede ser


aprovechada como aproximacin teraputica para prevenir
respuestas inmunes dainas.
[74]

Fig. 141: Resumen de tolerancia central y


perifrica.

TOLERANCIA DE LINFOCITOS T

Tolerancia central de linfocitos T:


o Se genera en el timo (educacin tmica).
o La tolerancia central es muy importante, ya que no basta la perifrica.
o Si no hay expresin de AIRE, se puede producir autoinmunidad.

Fig. 142: Tolerancia central de linfocitos T y funcin de AIRE en la delecin de linfocitos T en el timo.

Tolerancia perifrica de los linfocitos T.


o Linfocito T incapaz de responder (anergia).
o Bloqueo de activacin (supresin).
o Apoptosis (delecin).

Fig. 143: Mecanismos de


tolerancia perifrica en los
linfocitos T.
[75]

Tolerancia perifrica de linfocitos T: anergia.


o La clula es incapaz de responder debido a la falta de seales coestimulatorias por parte de las clulas
dendrticas, y esto se debe a la falta de seales de peligro (PAMPs o DAMPs).
o En estos casos, una infeccin puede inducir una respuesta autoinmune.
o La anergia puede ser provocada tambin por la activacin de receptores inhibitorios, como CTLA-4.

Fig. 144: Tolerancia perifrica de linfocitos T (anergia) y mecanismo de accin de CTLA-4.

Tolerancia perifrica de linfocitos T:


supresin.
o En estos casos, los linfocitos T
tienen bloqueada su activacin
hacia clulas efectoras.
o Aqu juega un rol fundamental el
linfocito T regulatorio (Treg).
o Los linfocitos T regulatorios
pueden ser formados de forma
natural
(reconocimiento
de
autoantgeno en timo) o inducida
(reconocimiento de antgeno en
tejido perifrico).
o Los linfocitos T regulatorios
expresan:
IL-10 y CTLA-4: funcin
inmunosupresora.
CD25high (cadena de IL2R): aumenta la afinidad
de su receptor y por lo
Fig. 145: Linfocitos T regulatorios.
tanto secuestra la IL-2.
o Los linfocitos T regulatorios pueden inhibir a la clula presentadora de antgeno (APC) como al linfocito T y
tambin puede inhibir otras clulas (linfocitos B y NK).

[76]

Tolerancia perifrica de linfocitos T: apoptosis (delecin).


o Es uno de los mecanismos ms importantes en la tolerancia perifrica.
o Existen dos rutas de apoptosis:
Intrnseca: estimulada por dao celular.
Extrnseca: estimulada por receptores de muerte.
o En inmunologa, las molculas ms importantes son Fas y Fas-L.
La molcula Fas es un receptor que se expresa de manera constitutiva en los linfocitos.
La molcula Fas-L47 es el ligando de dicho receptor y se empieza a expresar en los linfocitos
activados al final de la respuesta inmune. Esto genera la contraccin (homeostasis).
Fas-L es un ligando importante en los sitios inmunoprivilegiados, tales como la crnea y los
testculos. En estos sitios, las clulas de ambos rganos expresan Fas-L e inducen la apoptosis de los
linfocitos que se infiltran.

Fig. 146: Tolerancia perifrica de linfocitos T (apoptosis).

47

Fas-L = CD95L.

[77]

TOLERANCIA DE LINFOCITO B

Se conoce menos la tolerancia de linfocitos B que la de linfocitos T.

Tolerancia central de linfocitos B.


o Apoptosis.
o Va de escape Edicin del receptor.
Tolerancia perifrica de linfocitos B.
o Anergia.
o Delecin (apoptosis).
o Regulacin por receptores inhibitorios (como por ejemplo, receptores FC inhibitorios).

Fig. 147: Tolerancia central de linfocitos B.

Fig. 148: Tolerancia perifrica de linfocitos B.

FACTORES QUE DETERMINAN INMUNOGENICIDAD Y TOLERANCIA A ANTGENOS PROTEICOS

FACTOR
Persistencia
Portal de entrada, localizacin
Presencia de adjuvantes
Propiedades de las clulas
presentadoras de antgenos (APC)

FACTORES QUE FAVORECEN LA


ACTIVACIN DE LA RESPUESTA
INMUNE (INMUNOGENICIDAD)
De vida corta (eliminado por la
respuesta inmune).
Subcutneo, intradrmico (ausencia
de rganos generativos).
Antgenos con adjuvantes:
estimulacin de linfocitos T de ayuda
(ejemplo: vacunas).
DC maduras: altos niveles de
coestimuladores.

[78]

FACTORES QUE FAVORECEN LA


TOLERANCIA
Prolongada (ejemplo: flora
bacteriana).
Intravenoso, en mucosas (presencia
de rganos generativos).
Antgenos sin adjuvantes: no
inmunognico o tolerognico
(ejemplo: tratamiento de alergias).
DC inmaduras (tolerognicas): bajos
niveles de coestimuladores o
citoquinas.

SITIOS INMUNOPRIVILEGIADOS Y TOLERANCIA MATERNO-FETAL

Sitios inmunoprivilegiados:
o Son sitios en los cuales pueden
entrar
linfocitos,
pero
hay
mecanismos que inducen tolerancia.
o En estos rganos, los procesos
inflamatorios seran deletreos.
o Son:
Cerebro.
Ojo.
Testculo.
tero (feto).

Hay varios mecanismos propuestos para la


regulacin de la tolerancia materno-fetal:
o Crry: inhibidor del complemento.
o IDO48: es una enzima que metaboliza
el triptfano, el cual es un
aminocido importante para los
linfocitos efectores. Una disminucin

Fig. 149: Factores que determinan la tolerancia materno-fetal.

de triptfano conlleva a muerte de


linfocitos (IDO induce tolerancia). IDO
no es una molcula propiamente fetal,
de hecho se encuentra tambin en
clulas tumorales como parte de un
mecanismo de evasin del sistema
inmune.

En el feto hay una baja expresin de MHC-I,


pero hay otros receptores que participaran en
la regulacin de la interaccin materno-fetal,
como sHGA-G (smil de MHC-I), el cual induce
seales inhibitorias.

Potenciales receptores para HLA-G son:


o Linfocitos NK.
o Linfocitos T CD8+.
o Linfocitos T CD4+.
o Linfocitos B.
o Clulas dendrticas.
o Macrfagos.
Fig. 150: Mecanismos propuestos para la regulacin de
la tolerancia materno-fetal.

48

IDO: indoleamine-2,3-dioxygenase.

[79]

INMUNIDAD, TOLERANCIA & ENFERMEDADES AUTOINMUNES

Inmunidad: respuesta fisiolgica antgeno-especfica, mediada por receptores, que confiere proteccin contra
patgenos, sustancias txicas o tumores.

Tolerancia:
o Distinto a inmunosupresin, ya que es antgeno-especfica.
o Ausencia de respuesta inmune contra un antgeno en particular, debido ya sea a la falta de receptores que
reconocen ese antgeno, o bien a la falta de inmunogenicidad del antgeno.
o La tolerancia a antgenos es ventajosa en ciertos casos:
Autoantgenos.
Flora normal: no genera respuesta inmune gracias a su localizacin especfica. Las bacterias generan
un ligando para el PPR (retiene a NF-B en citoplasma, por lo que no permite su actividad nuclear),
que es expresado en las clulas dendrticas, volvindolas tolerantes de forma especfica en un sitio
determinado.
Alrgenos.

Autoinmunidad: desequilibrio en el sistema inmunolgico que provoca la destruccin de tejidos sanos y la


consecuente muerte del individuo.

Cmo se logra la tolerancia inmune? Delecin, anergia o ignorancia.


o Receptores para antgenos se generan de manera aleatoria.
o Pero, este repertorio de receptores contendr algunos que reaccionarn con autoantgenos.
o Se puede distinguir entre lo propio y lo ajeno?
Se piensa que la distincin ocurre entre lo peligroso y lo inocuo (como en el embarazo). Pero las
alergias contradicen esta teora.
o Entonces, cmo se logra la tolerancia? Existen dos mecanismos conocidos.
Tolerancia central: edita a los linfocitos antes de que accedan a la circulacin como linfocitos
maduros (vrgenes). Muchos linfocitos se escapan de ella y son autorreactivos.
Tolerancia perifrica: acta como mecanismo para eliminar o neutralizar a aquellos linfocitos
autorreactivos que accedieron a la circulacin.
Algunos linfocitos son eliminados y otros son anergizados.
Los linfocitos anrgicos pueden ser reactivados por seales de peligro.

Las enfermedades autoinmunes han tendido a aumentar en el ltimo tiempo.


o Por qu? Debido a la menor exposicin a agentes microbianos, los cuales son necesarios para mantener la
respuesta inmune regulada.
o Son enfermedades en personas jvenes principalmente.

Las alergias tambin han tendido a aumentar.


o Las alergias ocurre cuando el sistema inmune falla en ignorar antgenos inmunes inocuos.

[80]

Hay 2 tipos de enfermedades autoinmunes:


o rgano-especficas (enfermedad de Graves, tiroiditis de Hashimoto, diabetes insulina-dependiente).
o Sistmicas (artritis reumatoide, lupus eritematoso sistmico).

ENFERMEDAD AUTOINMUNE
Diabetes mellitus
Lupus eritematoso
Miastenia gravis

Esclerosis mltiple

Tiroiditis de Hashimoto
Artritis reumatoide

DESCRIPCIN
Destruccin de clulas del islote de Langerhans.
Inflamacin sistmica.
Anticuerpos anti-DNA.
Blanco: receptores de acetilcolina (son internalizados) Destruccin.
Anticuerpos actan sobre receptores (actan como antagonistas).
Tratamiento: anti-acetilcolina-esterasa.
Blanco: vaina de mielina.
Conduccin interrumpida del impulso nervioso.
No hay tratamiento.
Paciente con permeabilidad en la barrera hemato-enceflica, pudiendo ingresar
anticuerpos.
Blanco: coloide (hay destruccin de la glndula).
Tratamiento: eutirox (reemplazo hormonal).
Blanco: articulaciones, cartlago.
Existe tratamiento exitoso, pero inespecfico.

[81]

1.13. HOMING DE LINFOCITOS

Homing consiste en cmo el linfocito


reconoce las rutas por las que debe viajar y
dnde quedarse.

Funciones de la migracin de leucocitos


desde la sangre a tejidos:
o Neutrfilos y monocitos migran a los
sitios de infeccin (primeros en
llegar) y de dao tisular. Inflamacin.
o Linfocitos B y T vrgenes deben
migrar a los ganglios linfticos.
o Linfocitos T efectores y clulas
plasmticas migran al sitio de
infeccin y dao tisular.
Las clulas plasmticas de
larga vida llega a la mdula
Fig. 151: Funciones de la migracin.
sea y de all secretan.
Asociadas a mucosas migran a ella y secretan IgA.
Las de corta vida secretan desde el ganglio mismo.
Las clulas de memoria tambin migran porque es poco factible que frente a una segunda
respuesta, las clulas presentadoras de antgenos lleguen al mismo ganglio.

RUTAS DE RECIRCULACIN DE LINFOCITOS


1) Clula precursora en la mdula sea.
2) Viaja al timo (linfocito T).
3) Linfocito T virgen viaja a rganos linfticos
secundarios (entra va HEV).
4) Contina viajando hasta contacto antignico.
a. Los linfocitos pueden ingresar al ganglio
linftico por vnula de endotelio alto
(HEV) o por el vaso linftico aferente.
b. La clula dendrtica, desde el sitio de la
infeccin, llega al linfonodo por
circulacin linftica (la clula dendrtica
slo puede llegar por la va linftica
aferente).
5) Linfocito T efector viaja al rgano especfico.
a. Sale del ganglio linftico por rutas
linfticas eferentes.
b. Pasa a travs del ducto torcico para
llegar al tejido especfico.

Fig. 152: Rutas de recirculacin de linfocitos.

[82]

ROLLING DE LEUCOCITOS Y MIGRACIN A TRAVS DE HEV

Los leucocitos se van asociando al endotelio gracias a interaccin


con molculas de adhesin, hasta quedarse quietas y migran.
o Para migrar deben deformarse.
o La migracin sigue un gradiente de citoquinas.

El rolling permite que leucocitos que viajen lentamente a pesar


de la rapidez del flujo sanguneo.

La migracin ocurre a nivel del endotelio de las vnulas. Es un


proceso exclusivo de las vnulas porque:
o Son ms anchas.
o Poseen un flujo ms lento.
o Tienen menos carga negativa en su endotelio que los
capilares (mayor expresin de sialomucinas).
o Su endotelio expresa ciertas molculas de adhesin.

Fig. 153: Migracin de leucocitos a travs de


HEV.

INTERACCIN LEUCOCITO-ENDOTELIO

Etapas de la interaccin leucocito-endotelio que median el reclutamiento de leucocitos a los tejidos:


1) Macrfago secreta citoquinas pro-inflamatorias desde el sitio de la inflamacin (TNF e IL-1).
2) El endotelio aumenta la expresin de molculas de adhesin: selectinas (estas causan el frenado de los
leucocitos).
a. No todas las selectinas estn en el endotelio.
b. El linfocito tambin puede ser quien expresa la selectina, reconociendo glicoprotenas del endotelio.
3) Las selectinas reconocen ligando (carbohidratos) en la superficie del linfocito.
4) Esta unin selectina-glicoprotena permite el rolling.
5) El linfocito expresa receptores de quimioquinas que aumentan la afinidad de su integrina.
a. Las quimioquinas tambin son secretadas por el macrfago.
b. Las integrinas poseen dos conformaciones (una de baja y otra de alta afinidad). Por lo general la de baja
afinidad es la que se encuentra normalmente.
c. Estas quimioquinas y las selectinas promueven un cambio de conformacin.
6) La adhesin se vuelve ms estable.
7) Migracin.
Fig. 154: Etapas
interaccin leucocitoendotelio.

[83]

SELECTINAS, INTEGRINAS Y QUIMIOQUINAS


Familia de las
selectinas

Ligando

Sialyl Lewis X.

Selectina-E

Sialyl Lewis X.

En endotelio activado por


citoquinas (TNF, IL-1).

PNAd49 Ganglios
linfticos.
MadCAM-150 MALT.

Leucocitos: neutrfilos, monocitos,


linfocitos T y B vrgenes (sirve para
entrar a ganglios linfticos).

Endotelio del HEV.

Ligando

Distribucin

Clula que tiene el ligando

Neutrfilos, monocitos, clulas T


(vrgenes, efectoras y de memoria).

Endotelio activado por


citoquinas.
Endotelio activado por
citoquinas.
Endotelio activado por
citoquinas.
Endotelio en sistema
gastrointestinal y tejidos
linfoides asociados al intestino
(GALT).

Familia de las
integrinas
LFA-1
(L2)

VLA-4
(41)

ICAM-1 (CD54).
ICAM-2 (CD102).
ICAM-1 (CD54).
ICAM-2 (CD102).
VCAM-1 (CD106).
Fibronectina.

LPAM-1
(47)

VCAM-1 (CD106).
MadCAM-1.

Mac-1

Monocitos, clulas dendrticas.


Monocitos, clulas T (vrgenes,
efectoras y de memoria).
Monocitos, clulas T (vrgenes,
efectoras, de memoria, linfocitos
que hacen homing en epitelio y
mucosas gastrointestinal).

Vnulas de Endotelio Alto (HEVs).


o Principalmente en paracorteza (zona
T) de ganglio linftico.
o Poseen lmina basal gruesa.
o Expresan alta concentracin del
ligando para la selectina-L (migracin
de linfocitos B y T vrgenes).
o Clulas columnares altas.
o Alta expresin de ICAM-1 (ligando de
LFA-1 [en linfocitos B y T vrgenes]).
o Slo las HEVs de la placa de Peyer
tiene alta expresin de MadCAM-1
(los linfocitos as se dirigen a los
linfonodos mesentricos o a las placas
de Peyer).

Fig. 155: Caractersticas nicas de vnulas de


endotelio alto (HEV).

50

Neutrfilos, monocitos y
clulas T (efectoras y
memoria).
Neutrfilos, monocitos y
clulas T (efectoras y
memoria).

Selectina-P

49

Clula que tiene el ligando

En endotelio activado por


citoquinas (TNF, IL-1), histamina o
trombina.

Selectina-L

Distribucin

PNAd: Peripheral Node Addressin.


MadCAM-1: Mucosal vascular addressin cell adhesion molecule 1.

[84]

Quimioquinas:
o Secretadas en el tejido y transportadas a travs
de l.
o Tambin pueden ser secretadas por el
endotelio.
o No se liberan libremente, sino que estn
ancladas al glicoclix del endotelio (esto es
para evitar que la seal se diluya).

Cmo saben los leucocitos a dnde llegar? Qu otorga


la selectividad? Bsicamente tenemos 3 etapas:
o Selectividad 1: ligandos y sus receptores en
endotelio (ejemplo: linfocito selectina).
o Selectividad 2: dnde se secretan las citoquinas
y qu clulas tienen sus receptores.
o Selectividad 3: qu integrina se est expresando
y sus receptores.
o Distintas clulas presentan distintos receptores
de quimioquinas que reconocen distintas
quimioquinas con mayor o menor afinidad.

Molculas de adhesin presentes en el endotelio.


o La MadCAM-1 tiene actividad dual: es ligando
de selectina-L (a travs de los carbohidratos) en
mucosas gastrointestinales y ligando para la
LPAM-1 (47), el cual se encarga del homing
hacia la mucosa gastrointestinal.

Fig. 157: Molculas de adhesin en endotelio.

[85]

Fig. 156: Quimioquinas.

ETAPAS DE RECLUTAMIENTO DE LEUCOCITOS

Los leucocitos migran desde un vaso sanguneo a un tejido en 3 etapas:


1) Atadura (tethering): el leucocito es frenado en la circulacin debido a molculas ligando en el endotelio
(selectinas), que son reconocidas por receptores especficos en la membrana de los leucocitos. As se
produce el rolling.
2) Triggering: cuando hay inflamacin, se producen quimioquinas en el tejido inflamado que son captadas por
el endotelio y son liberadas a su cara luminal, en donde quedan ancladas gracias al glicoclix negativo del
endotelio. Estas quimioquinas sern reconocidas por el leucocito y gatillarn la activacin de integrinas.
3) Adhesin: las integrinas activadas producirn finalmente un cambio en el citoesqueleto del leucocito que
permitir su extravasacin por el vaso sanguneo.

Fig. 158: Etapas del reclutamiento de leucocitos.

Luego que ocurre el tethering y el rolling, las


quimioquinas secretadas y expuestas en el endotelio se
unen a GPCRs del leucocito (Gi) que promueven un cambio
conformacional de las integrinas del leucocito desde
adentro hacia afuera (sealizacin inside-out), lo que
aumenta la afinidad de stas por su ligando.

La integrina activada ahora reconocer con mucha


afinidad su ligando, gatillando una sealizacin outside-in
que se traducir en:
o Movilizacin de integrinas que se van a agrupar
(formacin de clusters): aumenta la valencia
(permite que las integrinas puedan interactuar
con ligandos dispersos).
o Un cambio en el citoesqueleto del leucocito, que
permitir finalmente su extravasacin.
[86]

Fig. 159: Sealizacin outside-in.

Cuando los linfocitos B extravasan las HEVs del ganglio,


cambian su expresin de CCR7 a CXCR5, que le permitir su
migracin al folculo, ya que en l se expresa el ligando CXCL13
de CXCR5.
o Dejan de expresar CCR7 una vez que activan el
endotelio.

Cuando los linfocitos T vrgenes se activan en el ganglio,


cambian su expresin de L-selectina a ligando de E o Pselectina. Esto permite que slo linfocitos T vrgenes entren a
los ganglios y que los efectores vayan al tejido infectado.

Existe una expresin diferencial de integrinas y otros receptores


de homing entre distintos tejidos del organismo.
o Son las clulas dendrticas las que inducen la expresin
selectiva de receptores de homing tejido-especficos en
los linfocitos T en los ganglios linfticos.

Fig. 160: Quimioquinas y migracin celular hacia


los tejidos linfoides.

Si el linfocito no se activa en el ganglio, disminuye la expresin de CD69, evitando que el linfocito permanezca en el
ganglio.
o Aumenta la expresin del receptor de esfingosina-1-fosfato (SP1R) cuando no se activan o cuando se
activan y deben migrar.
o La SP1 tiene alta expresin en la sangre y en la circulacin linftica.

Fig. 161: Recirculacin de linfocitos a travs de ganglios linfticos.


[87]

MIGRACIN DE LINFOCITOS T VRGENES Y EFECTORES

Entra el linfocito T virgen por la vnula de endotelio alto.


o Si no se activa, aumenta la expresin del S1PR1 y disminuye la expresin de CD69.
o Si se activa, se genera un linfocito T efector: expresa CD69 para mantenerse en el ganglio. Al estar listo,
aumenta su expresin de S1PR1 y disminuye la de CD69 para salir del ganglio.
Una vez fuera del ganglio, viaja al tejido, donde debe migrar desde el vaso sanguneo. Para ello utiliza:
o Ligando de selectina E o P.
o Receptor de quimioquinas (CXCR3).
o Integrina LFA-1 o VLA-4.
Fingolimod: antagonista de S1PR1, impidiendo que el linfocito reconozca gradiente de concentracin y viaje al sitio
requerido (es un inmunosupresor).

Fig. 162: Migracin de


linfocitos T vrgenes y
efectores.

Fig. 163: Molculas de


adhesin, quimioquinas y
receptores de quimioquinas
responsables de la
migracin de linfocitos T
vrgenes y efectores.

[88]

Si tengo dos infecciones simultneas en dos sitios distintos, quin entrega especificidad a la migracin?
o Al intestino delgado:
Integrina 47 en clula plasmtica (IgA) y linfocito T de ayuda Reconoce MadCAM en endotelio.
Citoquina CCL25 (es secretada por el intestino delgado) es capaz de interactuar con receptor CCR9
en clulas plasmticas o linfocitos T.
o A la piel:
Integrina 41 en linfocito T efector Reconoce VCAM-1.
Linfocito T efector expresa dos receptores de quimioquinas: CCR4 y CCR10, as como un ligando para
la E-selectina.

Fig. 164: El trfico de clulas linfoides es mediado por molculas de adhesin y receptores de quimioquinas
especficos.
o

Hay patrones comunes, pero es el conjunto el que define la especificidad.

Cmo adquiere el linfocito estas caractersticas que le permiten reconocer el conjunto que define la especificidad?
o Las clulas dendrticas inducen la expresin selectiva de receptores de homing tejido-especficos
(imprinting) en los linfocitos T en los ganglios linfticos.
o Los linfocitos T adquieren molculas necesarias para migrar al sitio desde donde proviene la clula
dendrtica: esto porque la clula dendrtica recibi en el tejido donde estaba, seales de ese tejido que le
entregan un patrn de molculas propias del tejido.
o Adems, al llegar el linfocito al sitio de infeccin, recibir ms seales propias del tejido en el que se
encuentran, induciendo una mayor o menor expresin de ciertas molculas (mayor expresin de CD69, por
ejemplo).

[89]