Ao del Centenario de Machu Picchu para el Mundo

UNIVERSIDAD DE HUNUCO
FACULTAD CIENCIAS DE LA SALUD
E.A.P. ODONTOLOGA

EFICACIA ANTIBACTERIANA IN VITRO DEL

EXTRACTO DE HOJA DE COCA EN COMPARACIN
CON CLORHEXIDINA FRENTE A STAPHYLOCOCCUS
Y STREPTOCOCCUS
HUANUCO 2011

Presentado por el Bachiller Ricardo A Rojas Sarco.

HUNUCO PER
2011

INDICE
DATOS GENERALES DE LA TESIS
Pg.
RESUMEN
PRESENTACIN
INTRODUCCIN

CAPITULO I
1. EL PROBLEMA DE INVESTIGACION
1.1 Fundamentacin del Problema

1.2 Formulacin del Problema.......

7
8

Problema General

Problema Especfico...

1.3 Justificacin....

1.4 Objetivos. ....

Objetivo General....

Objetivos Especficos......

1.5 Limitaciones o Dificultades.....

10

CAPITULO II
2. MARCO TERICO
2.1 Antecedentes.......

11

2.2 Base Tericas y Cientficas...

14

2.2.1 Coca (Erythroxylum)..

14

2.2.2 Clorhexidina..

19

2.2.3 Staphylococos Aureus y estreptococos mutans..

22

2.3 Definicin de Trminos...

32

2.4 Hiptesis...

35

2.5 Identificacin de variables.....

35

2.6 Operacionalizacin de Variables...........

36

CAPITULO III
3. DISEO METODOLOGCO
3.1 Tipo de Investigacin.

37

3.2 Poblacin y Muestra ..

38

3.3 tecnica de recoleccion de instrumentos.

39

3.4 plan de tabulacion y analisis de datos

40

CAPITULO IV
4. RESULTADOS
4.1resultados De Las Observaciones..

41

4.2 Prueba De Hiptesis

44

DISCUSIN

55

CONCLUCIONES..

57

RECOMENDACIONES

58

BIBLIOGRAFA

59

ANEXOS..

65

CAPITULO I
EL PROBLEMA
1.1 FUNDAMENTACION DEL PROBLEMA
La cavidad oral esta formada por un conjunto de tejidos, con numerosos microorganismos
asociados a ellos, constituyendo un ecosistema. Cuando este sistema ecolgico se
encuentra en equilibrio se denomina eubiosis y, en cambio, cuando estas relaciones se han
alterado, pasara a llamarse disbiois, que correspondera a una boca enferma.
La gran mayora de la poblacin andina del Per, padecen de enfermedades buco dentales
debido a la carencia de conocimiento sobre la higiene bucal. Pero de manera
compensatoria e inconsciente, el consumo de la hoja de coca en la poblacin, ha
demostrado interferir con el rol del proceso carioso, debido a los componentes beneficiosos
que contiene dicha hoja; al mismo tiempo la excesiva actividad masticatoria a perjudicado
las estructuras dentales produciendo traumas en las estructuras duras del diente y en las que
lo rodean, conllevando ha enfermedades periodontales, ocasionando la perdida dentaria.
Gracias a la investigacin realizada por la U.N.M.S.M. sobre la hoja de coca como
antibacteriano sobre microorganismos de la cavidad oral, se pretende comparar la eficacia
antibacteriana de dicha hoja con la clorhexidina en el tratamiento de staphylococcus aureus

y streptococcus mutans., y dar una opcin en el futuro de revertir la dramtica situacional

de la salud bucal de la poblacin andina del

Per. Es por tal motivo que dicha

investigacin tiene como propsito principal dar solucin a las enfermedades buco dentales
de las personas de bajo recursos econmicos y menos accesibilidad a un establecimiento de
salud bucal.

1.2 FORMULACIN DEL PROBLEMA

Eficacia antibacteriana in Vitro del extracto de hoja de coca en comparacin con la
clorhexidina al 0.12% en el tratamiento de staphylococcus aureus y streptococcus mutans.
Para este estudio se elabora la siguiente pregunta:

General

Cul es la eficacia antibacteriana in vitro del extracto de hoja de coca en

comparacin con la clorhexidina 0.12 % en el tratamiento de staphylococcus
aureus y streptococcus mutans?

Especifico

Ser el extracto de hoja de coca un eficaz antibacteriano in vitro frente a

staphylococcus aureus y streptococcus mutans?

Habr diferencia entre la eficacia antibacteriana in Vitro de la clorhexidina 0.12%

en comparacin con extracto de hoja de coca frente a staphylococcus aureus y
streptococcus mutans?

1.3 JUSTIFICACION
Una de las incgnitas que se tratan de explicar de manera, es la causa de los bajos niveles
de lesiones cariosas en personas que practican el hbito de masticar la hoja de coca
crnicamente, pero la mayora de las investigaciones de la hoja de coca en el rea de la
Odontoestomatologa no logran explicar, de manera clara dicha eficacia. Es necesario que
se consideren todos los factores que puedan intervenir en la baja incidencia de las lesiones
cariosas en los chacchadores de hoja de coca, y uno de los factores que necesita mayor
importancia de estudio, es la actividad antibacteriana de la hoja de coca, para poder aportar
un mayor conocimiento en el rea de la Odontoestomatologa y aclarar las incgnitas sobre
el beneficio de dicha planta. Con los resultados positivos que se obtengan de la existencia
de la eficacia antibacteriana del extracto alcohlico de la hoja de coca, se podr comparar
con otro agente bactericida efectivo que es la clorhexidina y encaminar una planificacin
para el tratamiento, tanto preventivo como interceptivo, de enfermedades orales de origen
infeccioso con el uso de extractos de la hoja de coca o con los componentes exactos de la
planta que causen dicho efecto antibacteriano.

1.4 OBJETIVOS DE LA INVESTIGACIN

Objetivo General:

Determinar la eficacia antibacteriana in Vitro del extracto de hoja de coca en

comparacin con la clorhexidina al 0.12 % en el tratamiento de staphylococcus
aureus y streptococcus mutans

Objetivos Especficos:

Identificar la eficacia del extracto de hoja de coca como antibacteriano in vitro en

el tratamiento de staphylococcus aureus y streptococcus mutans.

Evaluar la eficacia antibacteriana in vitro entre la clorhexidina 0.12%

en

comparacin con el extracto de hoja de coca en el tratamiento de staphylococcus

aureus y streptococcus mutans.

1.5 LIMITACIONES O DIFICULTADES

Los pocos estudios realizados con la hoja de coca a nivel local, la cual
impide obtener datos importantes para realizar este trabajo.

El crecimiento inadecuado de la bacteria con la que se esta trabajando.

Contaminacin del los agares con otros microorganismos

10

CAPITULO II
MARCO TEORICO
2.1 ANTECEDENTES

Segn GOICOCHEA, A., en 1954; realizo un estudio en 30 masticadores de la

hoja de coca, que el nmero de piezas que faltaban y el porcentaje de caries eran
bajos. Mientras que el grado de abrasin dentaria fue alto.1

Segn AYALA, C., en 1963; realiza un estudio a 40 individuos en Puno, en el

cual da como uno de sus resultados, que los chacchadores (masticadores) de la hoja
de coca presentaban lesiones cariosas en un mnimo porcentaje, mientras que la
abrasin dentaria fue elevada.2

Segn NGARO, M., en 1972; realiza un estudio en un grupo de 500

chacchadores de la hoja de coca, que la prevaleca de lesiones cariosas era de un
68%.3

11

Segn CORONEL, M., en 1988; realiz estudios en comunidades de

chacchadores de hoja de coca con un tiempo de hbito mayor de 10 aos y edades
comprendidas entre los 30 y 50 aos.4

Segn NAVARRO A., ngel, en 1988; realizo un estudio con 67 sujetos entre 30
y 45 aos de edad y con un tiempo del habito mayor a 10 aos.5

Segn PANDO, R., en 1988; realiza un estudio en una comunidad de

chacchadores con 60 individuos, con edades comprendidas entre los 30 y 50 aos y
con un tiempo de chacchado de la hoja de coca mayor de 10 aos.6

Segn LI SING, C., en 1994; estudio las propiedades inhibitorias del

Erythroxylum coca lam. var. coca y del Erythroxylum Novogranatense var.
truxillense contenidos en el filtro de mate de coca frente a las especies de hongos.7

Segn AGUILAR, E. y ENCARNACIN, J., en 1995; realizaron un estudio para

observar el comportamiento in vitro de algunas especies del gnero
Mycobacterium frente a Erythroxylum coca-Erythroxylum novogranatense (Mate
de coca).8

Segn CASTRO, P. y CHAVEZ, J., en 1995; realizaron un estudio sobre la

accin inhibitoria in vitro de Erythroxylum coca Lam var. coca y Erythroxylum
Novogranatense var. truxillense contenidas en el filtro de Mate de Coca frente a
cepas de uropatgenos Gram negativos multiresistentes.9

Segn CAM, O. y VILLANUEVA, P., en 1996; hicieron un estudio de actividad

inhibitoria del extracto acuoso metanlico de los principios activos totales extrados
de las hojas de Erythroxylum novogranatense (Morris) var. truxillense Rugby
frente a cepas bacterianas de bacterias Gram (-), Gram (+) y levaduras aisladas.10

Segn MERTZ, M. y REYES, E., en 1996; realizaron un trabajo de investigacin

sobre la propiedad inhibitoria de Erythroxylum coca lam. Y Erythroxylum
novogranatense (Morris) var. truxillense Rugby contenidas en el filtro de Mate de
coca, sobre el crecimiento de Enterobacterias, Cocos Gram (+) y Bacillus.11

12

Segn SOLANO, D., en 1996; la presente investigacin ha comprendido el estudio

de 40 muestras; correspondientes a placa bacteriana, caries dental, clculo dental,
absceso radicular y gingivitis, frente a dos extractos de Erythroxylum
Novogranatense (Morris) var. truxillense. Rusby: Acuoso y metanlico de
principios activos totales.12

Segn FLORES MIR, F., en 1997; realizo un estudio para determinar la

prevalencia de lesiones cariosas, enfermedad periodontal y desgaste dentario y su
relacin con la presencia, tiempo y frecuencia del habito de masticacin de hojas de
coca.13

Segn GALVEZ, O., en 1997; realiz un estudio sobre la accin inhibitoria de

crecimiento del extracto acuoso de Erythroxylum Novogranatense Morris var.
truxillense (Rugby) frente a bacterias Gram negativas que presentaron resistencia a
5 antibacterianos.14

Segn BORROVIC RAMOS, F., en el 2006; realizo una investigacin acerca del
efecto antibacteriano del extracto alcohlico de la hoja de coca frente a la
microflora oral.15

Segn VENTURA G., CASTRO A., ROQUE M., RUIZ J., en el 2009;estudi
la actividad antibacteriana del aceite esencial de la hoja de coca, frente a las cepas
de Escherichia coli, Bacillus subtilis, Staphylococcus epidermidis, y Pseudomonas
aeruginosa.16

13

2.2 BASES TEORICAS

2.2.1 COCA (ERYTHROXYLUM):

2.2.1.1 Generalidades:
Etimolgicamente la palabra coca proviene del quechua kuka o koka que debe
interpretarse, segn Storni, ku o ko, parte ms destacada o principal de algo, ka o
kau vivificante, que da vida, vigorosa y fuerte.17
El gnero Erythroxylum, familia Erythroxylaceae. (Anexo 1). Se encuentra ampliamente
distribuido en las regiones tropicales de Sudamrica, principalmente en el Per y Bolivia y
en menor escala en Colombia, Ecuador, Venezuela y Brasil.18
Actualmente se cultivan varias especies de coca en el pas. El Erythroxylum coca, planta
arbustiva de crecimiento silvestre en las laderas de los Andes Peruanos, principalmente
entre los 1000 y 2000 m de altitud, cultivadas desde tiempos remotos en el Per, Bolivia y
otros pases clidos. En la poblacin andina tradicional, donde el uso ms conocido que se
le da a las hojas de coca es el chacchado. Sin embargo tambin las usan como
lubricante para la interaccin social, como medicina, instrumento para adivinar el futuro
y diagnosticar enfermedades.19, 20

___________________________
17. BORGHELLI, R.: Revista de la Asociacin Odontolgica Argentina.
18. BURCHARD, R.: la masticacin de la coca. Amrica Indgena.
19. TERRAN, M. y SANDAGORDA, A.: Aspectos socioculturales del consumo de la coca.
20. CARTER, W.; MAMANI, M. y PARKENSON, P.: Coca en Bolivia. Universidad de Florida. Miami.

14

2.2.1.2 Botnica:
Erythroxylum (Erythroxylaceae) es un gnero de 250 especies que se hallan distribuidos en
las regiones tropicales de Sudamrica. No obstante que la mayora de las especies contiene
alcaloides relacionados con la cocana, Erythroxylum Lambran coca y Erythroxylum
Novogranatense son las especies ms conocidas y extensamente cultivadas en el Per.18, 21
De acuerdo al lugar de su probable procedencia, la coca peruana es separada en dos
variedades:
1. Variedad de Huanuco o boliviana: Hojas anchas y gruesas, color verde oscuro,
sabor amargo, con alto porcentaje de cocana. Derivada de Erythroxylum lambran.
Coca (Anexo 2), es cultivada en los valles tropicales de las faldas occidentales de
los Andes (desde Ecuador hasta Bolivia). Sus hojas son oblongas, elpticas,
grandes, anchas, gruesas y de color verde oscuro. Es la ms importante por su
contenido promedio de alcaloide, que presenta el ms alto de todas las especies
1.1%.22
2. Variedad de Trujillo: Hojas pequeas y delgadas, color verde claro, sabor dulce y
aromtico. Derivada de Erythroxylum Novogranatense (Anexo 3), cultivada en
reas secas de Colombia y la variedad truxillense, cultivada en el norte del Per, su
contenido promedio de cocana es de 0.56%. Esta coca es de gran comercializacin
por el agradable sabor se sus hojas debido a su alto contenido de cidos grasos
voltiles que son usados como saborizantes en la industria de bebidas gaseosas.22

_____________________________
18. BURCHARD, R.: Una nueva perspectiva sobre la masticacin de la coca. Instituto Indigenista Interamericano.
21. MACHADO, E.: El Gnero Erythroxylum en el Per.
22. MACHADO GARZOLA, EDGARDO: El gnero Erythroxylum en el Per.

15

2.2.1.3 Efectos:
Sobre el Organismo:
Los efectos del hbito de la masticacin de la coca sobre el individuo se deben
principalmente a la dosis de alcaloides que ellos ingieren. Se calcula que extraen un
promedio de 86% de los alcaloides y que el 80% de los alcaloides es cocana, el efecto del
resto de los alcaloides (menores) no puede ir ms all de un planeamiento terico, pues no
existen estudios farmacolgicos adecuados.23, 25
Estos efectos son de diversa ndole, pero entre ellos destacan los de carcter fisiolgico y
psicolgico, tanto agudos como crnicos. Las manifestaciones fisiolgicas agudas se
caracterizan por taquicardia, ligero aumento de presin arterial y de la temperatura
corporal, alteraciones respiratorias, aumento de resistencia a la fatiga, entre otros. En
cuanto a las manifestaciones fisiolgicas de carcter crnico, su delimitacin se ve
obstaculizada por el alcoholismo, la deficiente alimentacin y en general por las
desfavorables condiciones higinicas en que viven los chacchadores, pero generalmente se
asocia a malnutricin, hepatomegalia, linfadenopatias, deficiencias visuales, etc.
Respecto a las alteraciones psicolgicas, como de la personalidad, se hicieron diversos
estudios los cuales se contradicen entre s, adems en algunos ellos se usaron tcnicas que
ahora no pueden aceptarse como vlidas ni fidedignas, por lo tanto tendramos que esperar
nuevos trabajos acerca del efecto del hbito sobre el estatus mental de los individuos que lo
practican.24, 25, 26

______________________
23. CABIESES, F.: Apuntes de medicina tradicional.
24. CABIESES, F.: Aspectos etnolgicos de la coca y la cocana. Cocana
25. DOMIC, Z.: Revisin crtica bibliogrfica y consideraciones generales acerca del masticado de coca.
26. ZAPATA O., V.: El problema de la masticacin de la coca en el Per.

16

 Sobre la Cavidad Oral:

La mucosa oral, es una de las estructuras de nuestro cuerpo que constantemente est
expuesta a substancias extraas dependiendo de muchos factores, entre ellos los hbitos de
cada persona, de all que sustancias como el tabaco, alcohol, caf, etc. Han sido motivo de
diversas investigaciones sobre el efecto de dichas sustancias sobre la mucosa oral, en el
caso de la masticacin de la hoja de coca y su efecto sobre las estructuras orales, los
estudios son limitados.
Sobre la Mucosa Oral:
El chacchador crnico mantiene el bolo de coca, durante un tiempo promedio de 6 horas
diarias, habindose sugerido que la accin irritante y/o friccional de estas sustancias,
causan a largo plazo, alteraciones en la mucosa oral

28

, tales como zonas blanquecinas,

rugosas, agrietadas, paraqueratosis, acantosis, hiperqueratosis, leucoedema y leucoplasia.17,

27, 28

Sobre los Dientes y Periodonto:

Segn la mayora de estudios realizados, el desgaste dentario y la enfermedad periodontal
tienden a incrementarse con el hbito del chacchado. Se cree que la primera de ellas es
causada tanto por efectos fsicos (abrasin) como qumicos (erosin) y la segunda por el
contacto de las sustancias usadas en el chacchado con las estructuras de soporte dentario,
las cuales son debilitadas.1, 3 Pero ninguno de estos estudios tiene un sustento cientfico con
respecto a la relacin entre los componentes de la hoja de coca y la incidencia a caries.

________________________
1. GOICOCHEA I., A.: Estudio de la cavidad bucal en los sujetos habituados a la masticacin de hojas de coca
3. UNGARO, M.: Patologa oral en masticadores de hojas de coca.
17. BORGHELLI, R.: Lesiones de la mucosa bucal por el uso de hojas de coca
27. HAMER, J. E : The effect of coca leaf chewing on de buccal mucosa of Aymara and Quechua Indians in Bolivia.
28. BERNAL, J.: Odontoestomatologa y Precancerosis oral.

17

2.2.1.4 Composicin Qumica de la Coca:

La hoja de coca (anexo 04, 05, 06), depende de factores intrnsecos y extrnsecos. Entre los
factores extrnsecos, se tiene a la ubicacin geogrfica, la forma en que ha sido cultivada la
planta y el medio ambiente en el que se desarrolla la especie; como intrnsecos tenemos la
edad de la especie vegetal. La hoja de coca tambin presenta en su composicin qumica:
Aceites esenciales y son los que le dan a las hoja de coca su aroma especial.10
Propiedades Nutricionales de la Hoja de Coca: Gracias a la investigacin realizada por
la Universidad de Harvard, en 1975, titulada Valor nutricional de la hoja de coca, se ha
probado que la masticacin diaria de 100 gramos de hojas de coca, satisface la racin
alimentara recomendada tanto para el hombre para la mujer. Su contenido en vitaminas y
determinados oligoelementos hacen que al mismo tiempo el mate de coca constituya un
complemento nutritivo de la dieta diaria. Estos mismos estudios de la Universidad de
Harvard sostienen que en 100 gramos de coca se pueden tener casi dos gramos de potasio
que son necesarios para el equilibrio del corazn y se le atribuyen adems propiedades
adelgazantes. Sabiendo que estos mates son tan ricas en estos nutrientes, se convierten en
alimento y medicina. La concentracin de cocana en la hoja es muy baja, segn
investigaciones realizadas por mdicos farmaclogos de la Universidad de Caldas, y por lo
tanto, ingerida en forma natural, no produce toxicidad ni genera dependencia. Acta como
estimulante leve, mejora la atencin y la coordinacin de ideas.

___________________________
10. CAM ALBUJAR, O. y VILLANUEVA VLCHEZ, P. Accin Inhibitoria in vitro del extracto acuoso y extracto
metanlico de la hoja de Erythroxylumnovogranatense (Morris) var. truxillense (Rusby) frente a bacterias Gram (-) y
Gram (+). Tesis de bachiller para Qumico farmacutico UNMSM. Lima, 1996

18

2.2.2 CLORHEXIDINA (Bucoxidina 0.12%)

INTRODUCCIN
La clorhexidina fue desarrollada en la dcada de los 40 por Imperial Chemical Industries
en Inglaterra por cientficos que realizaban un estudio sobre la malaria. En ese momento
los investigadores fueron capaces de desarrollar un grupo de compuestos denominados
polibiguanidas, que demostraron tener un amplio espectro antibacteriano y sali al
mercado en 1954 como antisptico para heridas de la piel. Posteriormente comenz a
usarse en medicina y ciruga tanto para el paciente como para el cirujano. En odontologa
se utiliz inicialmente para desinfeccin de la boca y endodoncia.29, 30

2.2.2.1 Concepto:
La clorhexidina es un potente antisptico del grupo de las biguanidas que acta eficaz y
rpidamente como bactericidas sobre microorganismos Gram. (+) y (-) 31 ,pero poco eficaz
sobre bacterias acido resistentes hongos o virus. se utiliza para enjuagues bucales en el
tratamiento de la gingivitis y de la enfermedad periodontal y tpicamente en la preparacin
de la piel del paciente antes de una operacin quirrgica, lavado de heridas, y tratamiento
del acn vulgar. Otros usos de la clorhexidina incluyen la profilaxis y el tratamiento de las
infecciones de boca, la estomatitis, la estomatitis ulcerativa y la gingivitis aguda ulcerativa
necrotizante.

________________________
29. BASCONES MARTNEZ A. Antispticos en el tratamiento de la enfermedad periodontal.
30. MARISOL BETANCOURTH, Microorganismos inusuales en surcos y bolsas periodontales.
31. HERNN PREZ TORRES (2005) Farmacologa Y Teraputica Odontolgica..

19

2.2.2.2 Composicin:
Este compuesto es una base fuerte dicatinica a pH superior a 3,5 con dos cargas positivas
en cada extremo del puente de hexametileno. Es esta naturaleza dicatinica la que la hace
extremadamente interactiva con los aniones, lo que es relevante para su eficacia, seguridad,
efectos secundarios locales y dificultad para formularla en productos.32
Cada 100 ml de solucin contiene:
Clorhexidina gluconato...0.12g.
Excipientes csp...100 ml.

2.2.2.3 Mecanismo de Accin:

La clorhexidina desestabiliza y penetra las membranas de las clulas bacterianas. La
clorhexidina precipita el citoplasma y interfiere con la funcin de la membrana, inhibiendo
la utilizacin de oxgeno, lo que ocasiona una disminucin de los niveles de ATP y la
muerte celular. En las bacterias Gram-negativas, la clorhexidina afecta la membrana
exterior permitiendo la liberacin de las enzimas periplasmticas. La membrana interna de
estos microorganismos no es destruda, pero s que es impedida la absorcin de pequeas
molculas. A bajas concentraciones, la clorhexidina exhibe un efecto bacteriosttico,
mientras que a altas concentraciones es bactericida. Los siguientes microorganismos
muestran una alta susceptibilidad a la clorhexidina: Estreptococos, estafilococos, Cndida
albicans, Escherichia coli, salmonellas, y bacterias anaerbicas.32, 33

________________________
32. BUCOXIDINA (clorhexidina 0.12%) colutorio, gianfarma s.a.
33. VADEMECUN FARMACOLOGICO PERUANO. Clorhexidina,

20

2.2.2.4 Reacciones Adversas

Ocasionalmente

se puede presentar alteracin transitoria en el gusto, efecto cuya

incidencia es reducida por la baja concentracin de principio activo.33

2.2.2.5 Concentraciones:
La clorhexidina suele presentarse en dos concentraciones, al 0,12% y al 0,2%, 0.4%.32, 33

2.2.2.6 Indicaciones y Dosificacin:

Colutorios: la clorhexidina para enjuagues orales se comercializa en envases que
contienen un vasito o medida de unos 15 ml. Esta es la dosis que se debe mantener en la
boca durante aproximadamente 1 minuto. 34
Clorhexidina para aplicacin tpica: utilizar una gasa o algodn para tratar el rea
deseada. Evitar el contacto con los ojos, los odos y la boca. Si esto ocurriera, enjuagar
inmediatamente con agua abundante.
La clorhexidina se debe mantener fuera de la luz, evitando temperaturas extremas. 33, 34

2.2.2.7 Contraindicaciones:
Hipersensibilidad al gluconato de clorhexidina.33

2.2.2.8 Interacciones
Aunque la clorhexidina se absorbe muy poco por el tracto digestivo puede haber una
interaccin potencial con el disulfiram, debido al contenido en alcohol de los enjuagues
orales. La ingestin de alcohol en los pacientes tratados con disulfiram puede ocasionar
serios efectos secundarios. Los pacientes tratados simultneamente con metronidazol y
clorhexidina pueden experimentar una reaccin similar a la del disulfiram.33

________________________
32. BUCOXIDINA (clorhexidina 0.12%) colutorio, gianfarma s.a.
33. VADEMECUN FARMACOLOGICO PERUANO. Clorhexidina.
34. DRA. MILEYDI. La clorhexidina, bases estructurales y aplicaciones en; la estomatologa.

21

2.2.3 STAPHYLOCOCCUS AUREUS Y STREPTOCOCCUS MUTANS.

2.2.3.1 Generalidades: Ecologa de la Boca
La boca alberga innumerables microorganismos en un ecosistema de complejidad
considerable que todava no ha sido investigado en su totalidad y est lejos de ser
comprendido en toda su magnitud. Hasta hace muy poco, la boca se consideraba como un
hbitat simple para los microorganismos pero en la actualidad se reconoce que los dientes,
el surco gingival, la lengua, otras superficies mucosas y la saliva, todos forman habitis o
sitios diferentes donde los microorganismos se multiplican. Cada zona o hbitat contiene
su propia poblacin caracterstica, a menudo, con muchas especies microbianas distintas,
las cuales pueden complementarse o competir con otras en la misma poblacin, por tanto,
la flora bucal es una entidad dinmica afectada por numerosos cambios durante la vida del
husped.35

_______________________
35. JOSE LIBANA UREA. Microbiologa Oral.

22

2.2.3.2

Staphylococcus Aureus

Los estafilococos son clulas esfricas Gram positivas, generalmente dispuestas en racimos
irregulares parecidos a racimos de uvas; crecen con rapidez sobre muchos tipos de medios
y son metabolitamente activos, fermentan carbohidratos y producen pigmentos que varan
desde el color blanco hasta amarillo intenso. Algunos son miembros de la flora normal de
la piel y de las mucosas de los humanos; otros causan supuracin, formacin de abscesos,
varias infecciones pigenas e incluso septicemia mortal. Los estafilococos patgenos casi
siempre causan hemlisis y coagulacin del plasma; y producen varias encimas y toxinas
extracelulares.37
El tipo ms comn de envenenamiento alimentario es causado por una enterotoxina
termoestable de los estafilococos. Estos desarrollan con rapidez resistencia a muchos
antimicrobianos y presentan problemas teraputicos difciles.37
El genero staphylococcus contiene al menos 30 especies. Las tres de importancia clnica
son staphylococcus aureus, staphylococcus epidermidis, staphylococcus saprophyticus. El
primero es coagulasa positivo que lo diferencia de las otras especies, el S. aureus es un
patgeno importante para los humanos. Casi toda persona padece algn tipo de infeccin
por S. aureus durante su vida, que varia en gravedad desde intoxicacin alimentara o
infecciones cutneas menores hasta infecciones graves potencialmente mortales.37
1. Caractersticas del Gnero:
Los estafilococos son clulas esfricas de casi 0.5 a 1.5 um de dimetro

36

, dispuestas en

grupos irregulares, en lquidos de cultivos tambin se observan cocos nicos en parejas,

ttradas y cadenas. Los cocos jvenes son fuertemente Gram positivos; despus de
envejecer muchas clulas se hacen Gram negativas

37

. Los cocos estn desprovistos de

motibilidad y no forman esporas. Bajo la influencia de frmacos los estafilococos sufren

lisis

37

. En la actualidad este gnero comprende 35 especies o ms y junto con otros

gneros integra la familia de micrococcaceae

36

. Viven de manera libre en el ambiente y

forman paquetes regulares de 4 u 8 cocos, sus colonias pueden ser de color amarillo, rojo o
naranja 37.

__________________________________
37. GEO. F. BROOKS, MD., JANET S. BUTEL, PhD., STEPHEN A. MORSE, PhD., Microbiologa medica de jawets.

23

2. Cultivo:
Los estafilococos crecen con facilidad sobre casi todos los medios bacteriolgicos en
condiciones aerbicas o microaerofilicas. Crecen con mayor rapidez a 37 C, pero el
pigmento se forma mejor a temperatura ambiente (20 a 25 C), sobre medios slidos las
colonias son redondas, lisas prominentes o brillantes. El S. aureus comnmente forma
colonias de color gris o amarillo dorado intenso 37.
3. Caractersticas de Crecimiento:
Los estafilococos producen catalasa que los diferencia de los estreptococos, fermentan
latentemente muchos carbohidratos y producen acido lctico pero no gas. Los estafilococos
son relativamente resistentes a la desecacin al calor (resisten 50 C durante 30 min.) y al
cloruro de sodio al 9%, pero se inhiben con facilidad mediante ciertas sustancias qumicas,
por ejemplo, hexaclorofeno al 3%. Los estafilococos muestran resistencia a muchos
frmacos por la produccin de beta lactamasa baja el control de un plasmido y confiere al
microorganismo resistencia a muchas penicilinas 37.

Composicin Antignica y Factores de Virulencia:

Los estafilococos poseen un antgeno especfico de especie, el polisacrido A, unido al
mucopeptido, y por lo tanto, presenta en la pared celular. En dicha pared tambin se
encuentra la protena A, que se une a la regin Fc. De la IgG, lo que le da actividad
antifagocitica.36
El peptidoglucano de la pared, que acta como una endotoxina, atrae leucocitos PMN y
activa la lisozima.36
Los cidos teitoicos favorecen la adhesin, al igual que la capa del limo o slime,
constituida por hidratos de carbono y protenas extracelulares. Esta capa facilita la
adhesin e inhibe la quimiotaxis y la fagocitosis.36

___________________________
36. MARTA NEGRONI. Microbiologa Estomatologa Fundamentos Y Gua Prctica.
37. GEO. F. BROOKS, MD., JANET S. BUTEL, PhD., STEPHEN A. MORSE, PhD., Microbiologa medica de jawets.

24

Encimas y Toxinas
Catalasa: Los estafilococos producen catalasa, que convierte el peroxido de hidrgeno en
agua y oxigeno. La prueba de catalasa pude diferenciar los estafilococos que positivos, de
los estreptococos, que son negativos.37
Coagulasa y Factor de Agrupamiento: Los S. aureus produce coagulasa, una protena
parecida a enzima que coagula. La coagulasa de une la con protronbina; juntas se vuelven
activas desde el punto de vista enzimtico e inician la polimerizacin de fibrina. La
coagulasa puede depositar fibrina sobre la superficie de los estafilococos, alterando talvez
su ingestin por clulas fagocticas o su destruccin dentro de dichas clulas. Se considera
que la produccin de coagulasa es sinnimo de patgeno potencialmente invasor.37
Otras Enzimas: Otras enzimas producidas por los estafilococos incluyen una
hialuronidasa, o factor de propagacin; una estafilocinasa que produce fibrinolisis, pero
acta de manera mucho mas lenta en comparacin con la estreptocinasa, la proteinasa, la
lipasas, y la beta lactamasa.37
Exotoxinas: La hemolisina estafilococica o toxinas alfa, beta, Y, O, se diferencia por los
tipos de eritrocitos que lisan. Estas toxinas tambin actan sobre otras clulas 36:

Toxina alfa: daa el msculo liso, las clulas de la piel, los macrfagos y las
plaquetas.

Toxina beta: degrada esfingomielina.

Toxina y: disuelve los eritrocitos de humanos y animales.

Toxinas o: toxina para muchas clulas polimorfonucleares, macrfagos, linfocitos y

plaquetas.

Leucocidina: esta toxina posee dos compuestos (F y S) que actuan en forma sinrgica para
daar PMN y macrfagos; si bien su mecanismo de accin no es muy claro, aparentemente
parecera que consiste en alterar la permeabilidad de la membrana celular.36

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36. MARTA NEGRONI. Microbiologa Estomatologa Fundamentos Y Gua Prctica.
37. GEO. F. BROOKS, MD., JANET S. BUTEL, PhD., STEPHEN A. MORSE, PhD., Microbiologa medica de jawets.

25

Exfoliatina o Toxina Epidermolitica (Exotoxina): Hay dos tipos A y B; son codificadas

por un plasmido y producen una lesin cutnea conocida como dermatitis aguda
exfoliativa.36
Toxina del Sndrome de Shock Toxico (TSSS-I) o Toxina Pirogenica: Se trata de una
toxina semejante a las que producen los estreptococos y se la considera un sper antgeno.
Puede causar una erupcin escarlatiniforme. No se la encuentra en todos los casos de
shock sptico estafilococico (SSS).36
CUADROS CLINICOS 36

Infecciones cutneas: foliculitis, orzuela, imptigo

Sndrome del shock toxico: Ataca a mujer en la etapa de menstruacin

Neumona

Osteomielitis

Infecciones de heridas

Enteritis o enterocolitis

Infecciones odontolgicas: Se han encontrado infecciones endodonticas, y algunos

abscesos periapicales. La osteomielitis de huesos maxilares, parotiditis,
manifestaciones gingivales, periodontitis y estomatitis.

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36. MARTA NEGRONI. Microbiologa Estomatologa Fundamentos Y Gua Prctica.
37. GEO. F. BROOKS, MD., JANET S. BUTEL, PhD., STEPHEN A. MORSE, PhD., Microbiologa medica de jawets.

26

2.2.3.3

Streptococcus Mutans

Los estreptococos son bacterias esfricas Gram positivas que por lo general forman pares
de cadenas durante su crecimiento. Se distribuyen ampliamente en la naturaleza. Algunos
son miembros de la flora humana normal; otros se asocian con enfermedades humanas
importantes atribuibles en parte a infeccin por estreptococos y en parte a sensibilizacin a
ellos. Elaboran varias sustancias extracelulares y enzimas.37
Los estreptococos son un grupo heterogneo de bacterias y no hay un sistema apropiado
para clasificarlos.37

Morfologa e Identificacin
1. Caractersticas del Gnero
Los estreptococos son microorganismos sumamente difundidos y, la cavidad bucal alberga
gran nmero de especies de este gnero

36

. Los estreptococos tienen formas esfricas u

ovoides y se disponen en cadenas, se agrupan en cadenas de longitud variable. Cada uno de

los elementos aisladamente tiene un dimetro que oscila entre 0.6 y 1 a 2 um

36

. Los

miembros de esta cadena con frecuencia presentan una aspecto de diplococos. Los
estreptococos son Gram positivos, sin embargo, conforme un cultivo envejece y las
bacterias mueren, pierden su Gram positividad y se tornan Gram negativos; esto puede
ocurrir despus de incubacin durante una noche.37
Algunos estreptococos elaboran un polisacrido capsular. La mayor parte de las cepas de
los grupos A, B y C producen capsulas compuestos de acido hialuronico. Las capsulas son
mas notables

es los cultivos jvenes. Impiden la fagocitosis. La pared de la clula

estreptoccica contiene protenas (antgenos M, T, R), carbohidratos (especficos del

grupo) y peptidoglucanos. Los Pili semejantes a vellosidades se prolongan a travs de la
capsula de los estreptococos del grupo A. los Pili contienen parte protena M y estn
cubiertos de acido lipoteicoico. Este ltimo es importante para la adhesin de los
estreptococos a otras clulas epiteliales.37

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36. MARTA NEGRONI. Microbiologa Estomatologa Fundamentos Y Gua Prctica.
37. GEO. F. BROOKS, MD., JANET S. BUTEL, PhD., STEPHEN A. MORSE, PhD., Microbiologa medica de jawets.

27

2. Clasificacin de los Estreptococos:

Las clasificaciones que se han propuesto para estas bacterias son innumerables y se basan
en sus distintas caractersticas; las ms actuales tienen encuesta la biologa molecular.37
Segn la doctora lancefield (1933), ubico a estas bacterias en grupos identificados con
letras. Estas son 37:
Grupo A: S. pyogenes. Beta hemoltico
Grupo B: S. agalactia. Beta hemoltico.
Grupo D: enterococcus faecalis (y otros enterococos). Alfa hemoltico y no hemoltico.
Grupo C, G: S. dysgalalactiae. Alfa y beta hemoltico.
Grupo D: S. Bovis. No hemolticos
Grupo F (A, C, G) y no tipicables: S. anginosus (S. intermedius, constellatus, millen).
Alfa y beta hemolticos y no hemolticos
No tipificados: S. viridans (S. mutans). Alfa hemolticos y no hemolticos.
Sin grupo: S. pneumoniae. Alfa hemolticos
Sin grupo: peptostreptococcus (muchas especies). Alfa hemolticos y no hemolticos.
Factores de Virulencia
Los mayores factores de virulencia son los anfgenos de superficie. La llamada protena M
se comporta como un factor antifagicitico (hay mas de 80 tipos de protena M), esta
protena contribuye a la adhesin y, por lo tanto a la colonizacin.36
Existen dos protenas tiles para la identificacin, la T (tripsina resistente) y la R,
pero hasta el momento no a demostrado que confiera virulencia al microorganismo.36
Las fimbrias de los estreptococos, que desempean un papel en la adherencia, estn
recubiertas por protena M y acido teitoico. 36
La secrecin de una capsula de acido hialuronico les confiere cierto poder
antifagocitico.36

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36. MARTA NEGRONI. Microbiologa Estomatologa Fundamentos Y Gua Prctica.
37. GEO. F. BROOKS, MD., JANET S. BUTEL, PhD., STEPHEN A. MORSE, PhD., Microbiologa medica de jawets.

28

El acido lipoteitoico tambin acta como un factor de adherencia y se une la fibronectina

de las clulas del hospedero. Se ha detectado una protena F estreptoccica de unin a la
fibronectina que genera una unin mas firme que la del acido lipoteitoico.36

Enzimas y Toxinas
Que no son muy especficas de cada una. Casi todas producen 37:

Exotoxina Pirogenica Estreptoccica o Toxina Eritrogenica: Esta toxina que es

excretada por la cepas que se encuentran en estado lisognico, es responsable
citotoxicidad, erupcin escarlatina y pirogenicidad, inmunosupresion y alteraciones
de la permeabilidad de las clulas de la corteza cerebral.36

Estreptolisina O: Que se llama as por su labilidad frente al oxigeno y que es

segregado por los estreptococos del grupo A y por algunos del grupo C y G,
conduce ala lisis de os glbulos rojos, y es citotxica para los neutrofilos, las
plaquetas y las clulas del tejido cardiaco. Se inactiva con el oxigeno, de ah la letra
que lo identifica.36

Estreptolisina S: Que debe su nombre a que la producen algunas cepas en

presencia de suero, sirve para identificar a los estreptococos en agrar sangre, tiene
accin ltica para los leucocitos pero no es un antgeno.36

Estreptocinasa (Fibrinolisina): Es una protena natural antignica que secretan los

estreptococos del grupo A, C y G. esta protena digiere la fibrina y as impide la
formacin de una barrera de esta sustancia por lo que favorece la diseminacin.36

Desoxirribonucleasa: Hay 4 tipos de esta enzima presentes en los de los grupos A,

C y G. las desoxirribunucleasas hidrolizan cidos nucleicos y nucleoprotenas que
utilizan como nutrientes. Al reducir la viscosidad del pus, facilitan la diseminacin
de la infeccin.36

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36. MARTA NEGRONI. Microbiologa Estomatologa Fundamentos Y Gua Prctica.
37. GEO. F. BROOKS, MD., JANET S. BUTEL, PhD., STEPHEN A. MORSE, PhD., Microbiologa medica de jawets.

29

Hialuronidasa: Que es producida por los grupos A, B, C y G, favorece la

disfuncin en los tejidos y por eso tambin se le conoce como factor de
disfuncin.36

NADasa: Se relaciona al efecto leucotoxico y es producido por los estreptococos

del grupo A, C y G.36

Lipoproteinaza o Factor de Opacidad del Suero: Esta enzima es caracterstica

del grupo A tipo M; la lipoproteinaza esta relacionada con la protena M, es
antignica y sirve para identificar a los estreptococos. Los estreptococos del grupo
A tambin pueden segregar C5a peptidasa; esta enzima inactiva al componente C5a
del complemento que impide que se una a los PMN y altera la efectividad de este
elemento de defensa.36

Fuentes De Infeccin
Boca (presente en la saliva), colonizan el tracto gastrointestinal, la vagina, el aparato
respiratorio superior.36
CUADROS CLNICOS 36

Erisipela (puede conllevar a una celulitis de la zona)

Fiebre Puerperal (posparto)

Sepsis (en heridas y politraumatizados)

Faringitis

Imptigo o Piodermia (en nios)

Facitis Necrotizante

Miositis

Sd. de Shock Estreptoccico (Px. HIV)

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36. MARTA NEGRONI. Microbiologa Estomatologa Fundamentos Y Gua Prctica.

30

Enfermedades Pos-Estreptoccicas: 36

Fiebre reumtica

Glomerulonefritis

En Odontologa: 36

Lengua afranbuesada

Palidez peribucal

Abscesos

Caries dental

___________________________
36. MARTA NEGRONI. Microbiologa Estomatologa Fundamentos Y Gua Prctica.

31

2.4 DEFINICION DE TERMINOS

o Microorganismos: Tambin llamado microbio, es un ser vivo que slo puede
visualizarse con el microscopio.42
o Antibacteriano: Relativo a una sustancia que destruye las bacterias o inhibe su
crecimiento y reproduccin.42
o Bactericida: Que mata las bacterias./ Poder bactericida: La ms dbil
concentracin de una sustancia capaz de provocar la destruccin definitiva de la
vitalidad de un microbio.42
o Bacteriosttico: Concentracin mnima de una sustancia capaz de impedir el
desarrollo de una bacteria sin llegar a destruirla.42
o Grampositivo: Que conservan el color violeta de la tincin que se utiliza en el
mtodo de Gram. para teir microorganismos.42
o Gramnegativo: que posee la coloracin rosada de la contra tincin que se utiliza
en el mtodo de Gram. para teir microorganismos.42
o Carbohidrato: Grupo de compuestos orgnicos entre los que se hallan la glucosa,
la fructuosa, el almidn, la celulosa y la goma.42
o Pigmentos: Cualquier material colorante orgnico producido en el organismo,
como la melanina.42
o Enzimas: Protena producida por las clulas vivas que cataliza las reacciones
qumicas en la materia orgnica.42
o Toxinas: Veneno o toxico, generalmente producido por una planta o
microorganismo.42

32

o Coagulasa: Enzima producida por bacterias en especial staphylococcus aureus, que

desencadena la coagulacin.42
o Lisis: Sufijo que significa degradacin o destruccin.42
o Aerbio: Microorganismo que vive y crece en presencia de oxigeno libre. Los
aerobios se dividen en aerobios facultativos y aerobios obligados.42
o Protena: Compuesto nitrogenado natural de carcter organico complejo,
constituido por muchos aminocidos.42
o IgG.: Uno de los 5 tipos de anticuerpos hormonales producido por el organismo. Es
una protena especializada que se sintetiza como respuesta a la invasin de
bacterias, hongos y virus.42
o Quimiotaxis: respuesta que supone un movimiento positivo, hacia un estimulo
qumico, o negativo alejndose del mismo.42
o Fagocitosis: Proceso por el cual determinadas clulas engullen y desechan
microorganismos y detritus celulares.42
o Protrombina: Protena plasmtica precursora de la trombina. La transformacin de
protrombina en trombina para la formacin de coagulo.42
o Fibrina: Proteina filamentosa insoluble que proporciona su carcter semislido al
coagulo sanguneo y esta producida por la accin de la trombina sobre el
fibrinogeno en el proceso de la coagulacin.42
o Patgeno: Cualquier microorganismo capaz de producir una enfermedad.42
o Virulencia: capacidad de un microorganismo para producir una enfermedad.42

33

o Hialuronidasa: Enzima que hidroliza el acido hialuronico.42

o Eficacia: Es la capacidad de lograr un efecto deseado o esperado.42
o Necrotizante: Muerte de una porcin de tejido consecutiva a enfermedad o
lesin.42
o Interaccin: Modificacin del efecto de un frmaco que se produce cuando este se
administra con otro. El efecto puede consistir en el aumento o disminucin de la
accin42.

34

2.5 HIPTESIS:

Hiptesis de Investigacin
La eficacia antibacteriana in Vitro del extracto de hoja coca es mayor que la eficacia de la
clorhexidina al 0.12% en el tratamiento de Staphylococos Aureus y estreptococos mutans.

Hiptesis Nula
La eficacia antibacteriana in Vitro del extracto de hoja coca a las concentraciones de 250
ug / 20ul, 500 ug / 20ul, 1000 ug / 20ul, 1500ug / 20ul, no es mayor que la eficacia de la
clorhexidina al 0.12% en el tratamiento de staphylococcus aureus y streptococcus mutans.

Hiptesis Alterna
La eficacia antibacteriana in Vitro del extracto de hoja coca a las concentraciones de 250
ug / 20ul, 500 ug / 20ul, 1000 ug / 20ul, 1500ug / 20ul, es igual que la eficacia de la
clorhexidina al 0.12% en el tratamiento de staphylococcus aureus y streptococcus mutans.

2.6 IDENTIFICACION DE VARIABLES

2.6.1 Variables Independiente

Concentracin del extracto alcohlico de la hoja de coca y clorhexidina 0.12%.

2.6.2 Variable Dependiente

Eficacia antibacteriano del extracto alcohlico de la hoja de coca.

35

2.6 OPERACIONALIZACION DE VARIABLES

Variable

Definicin

Indicadores

Independiente

Escala

Categora

Numrica

De Razn

Numrica

De Razn

Numrica

De Razn

250g/ 20l.
Concentracin del
extracto alcohlico
de la hoja de coca
y clorhexidina.

Cantidad del
extracto
alcohlico de la
hoja de coca
contenidos en
un volumen
determinado de
agua destilada y
alcohol rectificado
al 80
y clorhexidina al
0.12%

500g/ 20l.

1000g/ 20l.

Numrica

De Razn

1500g/ 20l.

0.12%

Numrica

De Razn

Numrica

De Razn

Dependiente

Eficacia
antibacteriano del
extracto alcohlico
de la hoja de coca.

Es la inhibicin
en el desarrollo
o crecimiento
de las bacterias
debido a la
presencia del
extracto
alcohlico de
Hoja de coca.

8 mm.
resistencia
11 mm.
sensible

36

CAPITULO III
METODOLOGIA
3.1 TIPO DE ESTUDIO
La presente investigacin se realiz con un diseo de tipo experimental y longitudinal.

3.1.1 Tipo De Investigacin

Segn el propsito: Aplicativa
Segn la ocurrencia de hechos: prospectivo
Segn el periodo y secuencia: longitudinal
Segn el anlisis y la secuencia: experimental
Segn la participacin del investigador: Participativo
3.1.2 Mtodo
Comparativo

37

3.1.3 Nivel De Estudio

Experimental

3.2

POBLACIN Y MUESTRA

3.2.1 Poblacin
20 Cepas staphylococcus aureus y 20 cepas streptococcus mutans.de diferentes espcimen
clnicos, adquiridos del banco de bacterias del laboratorio del H.R.H.V.M.

3.2.2 Muestra
Muestreo no probabilstico, intencional por conveniencia (al azar).

CRITERIOS DE INCLUSION Y EXCLUSION

Criterios de inclusin:
Cepas que pertenezcan al genero staphylococcus aureus y streptococcus mutans.
Criterios de exclusin:
Cepas que no pertenezcan al genero staphylococcus aureus y streptococcus mutans.

Unidad maestral:

Cepas de staphylococcus aureus y streptococcus mutans.

Unidad de anlisis:

Cultivos bacterianos de staphylococcus aureus y streptococcus mutans.

Diseo experimental
G1

O1

X1

O2

G2

O3

X2

O4

G3

O5

X3

O6

G4

O17

X4

O8

G5

O9

X5

O10

38

G1 Muestra de estudio recibir tratamiento con 250g/ 20l de extracto alcohlico de

hoja de coca.
G2 Muestra de estudio recibir tratamiento con 500g/ 20l de extracto alcohlico de
hoja de coca.
G3 Muestra de estudio recibir tratamiento con 1000g/ 20l de extracto alcohlico de
hoja de coca.
G4 Muestra de estudio recibir tratamiento con 1500g/ 20l de extracto alcohlico de
hoja de coca.
G5 muestra de estudio recibir tratamiento con 0.12% de clorhexidina.

3.3

TCNICA DE RECOLECCIN DE DATOS

INSTRUMENTOS DE RECOLECCIN DE DATOS

Protocolo de trabajo

Gua de observacin. Para detallar la medicin de halos bajo la inspeccin clnica

Procedimiento para la extraccin de los principios activos totales

El medio de extraccin utilizado es el mtodo de maceracin alcohlica. En un envase de
vidrio estril (2 litros de capacidad) forrado con papel aluminio, se coloco en su interior
kg de hojas de erythroxylum lambran (coca) previamente cortada, luego se aadio el
alcohol rectificado al 80, se dejo reposar por 7 das (se agito la botella 3 veces al dia).
Luego se filtro el macerado de hoja de coca a travs de un papel estril y el lquido
obtenido se evaporo en un horno al vacio en 40, para poder obtener los principios activos
totales de la hoja de erythroxylum lambran (coca de Huanuco).
El insumo de hoja de coca obtenido se diluy en agua destilada, luego fue impregnado en
discos de papel filtro con las diferentes concentraciones, para simular discos de
sensibilidad. Ejemplo: 250g (microgramos), diluido en 20l (microlitros) de agua
destilada

39

Tcnica de Observacin Directa.

Examen De Laboratorio
Con las cepas proporcionadas por el del laboratorio del H.R.H.V.M., se procedio
a realizar el antibiograma en el agar Muller Hinton en el cual se coloco los discos
de sensibilidad preparados con las distintas concentraciones del extracto alcohlico
de la hoja de coca y con la clorhexidina. Los que se incubaron a 37C por 24 y 48
horas.

Medicin del halo inhibicin

Las muestras son evaluadas en las primeras, 24 horas, 48 horas, periodo en cual se
realiza las mediciones correctamente estipuladas de los halos de inhibicin con una
regla flexible milimetrada para determinar con una escala categrica de sensible
halo > 11 mm , resistente halo <8mm.

3.4

PLAN DE TABULACIN Y ANLISIS DE DATOS

Procesamiento de Datos
El proceso de recoleccin de datos se realizo mediante la aplicacin una gua de
observacin de campo. El procesamiento de datos se realizo de manera automatizada
empleando una computadora utilizando el siguiente software:

Procesador de texto Microsoft Word XP.

Programa de Anlisis Estadstico SPSS 15.

Anlisis de Datos
Prueba U de Mann-Whitney (prueba no paramtrica)

40

CAPITULO IV
RESULTADOS
4.1 RESULTADOS DE LAS OBSERVACIONES
4.1.1 MUESTRA
La muestra de estudio lo constituye 20 cepas de staphylococcus aureus y 20 cepas de
streptococcus mutans de diferentes especimenes clnicos, adquiridos del Banco de
bacterias del Laboratorio del Hospitar Regional Hermilio Valdizan Medrano de Hunuco.

4.1.2 RESULTADOS
Las observaciones se realizaron en cada una de las muestras indicadas anteriormente. El
tratamiento consisti en la aplicacin de dos diferentes concentraciones del extracto seco
obtenido por extraccin alcoholica; el cual luego se diluy en agua destilada en las
siguientes concentraciones: 1000 g/20 l y

1500 g/20 l. Comparndolo con un

antibitico convencional como clorhexidina al 0.12 %; observndose el tamao de los

halos como medida de la inhibicin bacteriana ante el extracto de coca y el del antibitico.
Los resultados se presentan en las tablas 1 y 2 respectvamente

41

Tabla 1: Dimetros de los halos de inhibicin obtenidos al aplicar extracto de coca y

clorhexidina sobre staphylococcus Aureus.
ANTIBIOGRAMA
Staphylococcus
Aureus
Cultivo #01 24 horas
Cultivo #01 48 horas
Cultivo #02 24 horas
Cultivo #02 48 horas
Cultivo #03 24 horas
Cultivo #03 48 horas
Cultivo #04 24 horas
Cultivo #04 48 horas
Cultivo #05 24 horas
Cultivo #05 48 horas
Cultivo #06 24 horas
Cultivo #06 48 horas
Cultivo #07 24 horas
Cultivo #07 48 horas
Cultivo #08 24 horas
Cultivo #08 48 horas
Cultivo #09 24 horas
Cultivo #09 48 horas
Cultivo #10 24 horas
Cultivo #10 48 horas
Cultivo #11 24 horas
Cultivo #11 48 horas
Cultivo #12 24 horas
Cultivo #12 48 horas
Cultivo #13 24 horas
Cultivo #13 48 horas
Cultivo #14 24 horas
Cultivo #14 48 horas
Cultivo #15 24 horas
Cultivo #15 48 horas
Cultivo #16 24 horas
Cultivo #16 48 horas
Cultivo #17 24 horas
Cultivo #17 48 horas
Cultivo #18 24 horas
Cultivo #18 48 horas
Cultivo #19 24 horas
Cultivo #19 48 horas
Cultivo #20 24 horas
Cultivo #20 48 horas

Concentracin del Extracto Alcohlico de la Hoja Clorhexidina

de Coca
250g/20l 500g/20l 1000g/20l 1500g/20l
0.12%
-

10mm
10mm
8mm
7mm
7mm
8mm
8mm
10mm
10mm
8mm
8mm
-

42

10mm
10mm
10mm
11mm
11mm
11mm
15mm
15mm
13mm
15mm
10mm
11mm
10mm
10mm
11mm
11mm
11mm
11mm
11mm
11mm
10mm
10mm
12mm
13mm
10mm
11mm
11mm
11mm
15mm
15mm
14mm
14mm
10mm
12mm
10mm
10mm
13mm
13mm
14mm
15mm

12mm
13mm
12mm
12mm
12mm
12mm
17mm
17mm
18mm
18mm
13mm
13mm
15mm
15mm
12mm
12mm
13mm
13mm
12mm
12mm
15mm
15mm
14mm
14mm
12mm
12mm
12mm
12mm
15mm
15mm
17mm
17mm
13mm
14mm
12mm
12mm
15mm
15mm
15mm
15mm

15mm
15mm
20mm
20mm
23mm
23mm
23mm
23mm
15mm
15mm
24mm
24mm
20mm
20mm
15mm
15mm
17mm
17mm
15mm
15mm
18mm
18mm
15mm
15mm
20mm
20mm
20mm
20mm
18mm
18mm
22mm
22mm
20mm
20mm
25mm
25mm
25mm
25mm
25mm
25mm

Tabla 2: Dimetros de los halos de inhibicin obtenidos al aplicar extracto de coca y

clorhexidina sobre Streptococcus Mutans
ANTIBIOGRAMA
Streptococcus Mutans
Cultivo #01 24 horas
Cultivo #01 48 horas
Cultivo #02 24 horas
Cultivo #02 48 horas
Cultivo #03 24 horas
Cultivo #03 48 horas
Cultivo #04 24 horas
Cultivo #04 48 horas
Cultivo #05 24 horas
Cultivo #05 48 horas
Cultivo #06 24 horas
Cultivo #06 48 horas
Cultivo #07 24 horas
Cultivo #07 48 horas
Cultivo #08 24 horas
Cultivo #08 48 horas
Cultivo #09 24 horas
Cultivo #09 48 horas
Cultivo #10 24 horas
Cultivo #10 48 horas
Cultivo #11 24 horas
Cultivo #11 48 horas
Cultivo #12 24 horas
Cultivo #12 48 horas
Cultivo #13 24 horas
Cultivo #13 48 horas
Cultivo #14 24 horas
Cultivo #14 48 horas
Cultivo #15 24 horas
Cultivo #15 48 horas
Cultivo #16 24 horas
Cultivo #16 48 horas
Cultivo #17 24 horas
Cultivo #17 48 horas
Cultivo #18 24 horas
Cultivo #18 48 horas
Cultivo #19 24 horas
Cultivo #19 48 horas
Cultivo #20 24 horas
Cultivo #20 48 horas

Concentracin del Extracto Alcohlico de la Hoja de Clorhexidin

Coca
a
250g/20l 500g/20l 1000g/20l 1500g/20l
0.12%
15mm
17mm
23mm
15mm
17mm
23mm
10mm
15mm
20mm
25mm
10mm
15mm
20mm
25mm
10mm
20mm
15mm
10mm
20mm
15mm
10mm
16mm
20mm
10mm
16mm
20mm
10mm
15mm
17mm
11mm
15mm
17mm
12mm
14mm
20mm
12mm
14mm
20mm
8mm
11mm
16mm
15mm
8mm
11mm
16mm
15mm
8mm
10mm
15mm
17mm
8mm
11mm
15mm
17mm
9mm
12mm
15mm
15mm
9mm
13mm
15mm
15mm
12mm
15mm
20mm
12mm
15mm
20mm
11mm
13mm
20mm
11mm
13mm
20mm
15mm
18mm
22mm
15mm
18mm
22mm
10mm
14mm
20mm
10mm
14mm
20mm
14mm
15mm
19mm
15mm
15mm
19mm
15mm
15mm
23mm
15mm
16mm
23mm
10mm
12mm
16mm
20mm
10mm
12mm
16mm
20mm
12mm
14mm
20mm
12mm
14mm
20mm
13mm
15mm
25mm
13mm
15mm
25mm
10mm
11mm
13mm
20mm
10mm
11mm
13mm
20mm
15mm
18mm
22mm
15mm
18mm
22mm

43

4.2 PRUEBA DE HIPTESIS

La hiptesis de investigacin plantea la eficacia antibacteriana del extracto de coca,
comparndola con un antibitico convencional como la clorhexidina al 0.12 %, en el
tratamiento de staphylococcus Aureus y de Streptococcus Mutans.
En primer lugar vamos a probar que el tratamiento con una concentracin de extracto de
coca de 1500 g/20l es superior al de 1000 g/20l. En la siguiente tabla se comparan los
datos del halo obtenido con las dos concentraciones del extracto de coca.
Tabla 3: Tamao del halo obtenido (mm) al aplicar extracto de coca sobre
staphylococus aureus medido despus de 24 horas
Concentracin del extracto de coca
Cultivo N 1000 g/20 l
1500 g/20 l
1
10
12
2
10
12
3
11
12
4
15
17
5
13
18
6
10
13
7
10
15
8
11
12
9
11
13
10
11
12
11
10
15
12
12
14
13
10
12
14
11
12
15
15
15
16
14
17
17
10
13
18
10
12
19
13
15
20
14
15

44

El planteamiento de nuestra hiptesis lo realizamos utilizando una prueba estadstica no

paramtrica que es la U de Mann-Whitney, en previsin a la no normalidad de los datos
1. Hiptesis nula: No hay diferencias entre los dos tratamientos con el extracto de coca. Lo
planteamos matemticamente por Ho: 1000, 24 hr = 1500, 24 hr.
2. HA: 1500, 24 hr.> 1000, 24 hr (La concentracin a 1500 es superior a la de 1000)
3. = 0.05 (nivel de significacin)
4. Estadstica U de Mann Whitney, se utiliza para probar la hiptesis nula de dos muestras
independientes, asumiendo que los datos no son normalmente distribuidos.
5. Utilizaremos el programa SPSS 15. Los resultados del procesamiento de los datos se dan
a continuacin:
La U de Mann Whitney es el ms pequeo de los valores calculado para los 2 grupos. En
este caso es de 68.5. De tablas se obtiene para n=19, m=19 y =0.05 prueba de una cola
w=123. Puesto que 68.5<123; se rechaza la hiptesis nula. Adems el valor de Asymp.
Sig (una cola), que es la probabilidad extrema es de 0.005<0.05; por lo que tambin se
rechaza la hiptesis nula y se conviene que el tratamiento con una concentracin de 1500
g/20 l, es ms eficaz que con 1000 g/20 l.

Tabla 4: Salida del SPSS para los datos de la tabla 3

HALO
U de MannWhitney
W de Wilcoxon
Z
Sig. asintt.
(bilateral)
Sig. exacta
[2*(Sig.
unilateral)]

68.500
258.500
-3.317
.001
.001(a)

a No corregidos para los empates.

b Variable de agrupacin: CONCENT

45

La contrastacin de los datos a 48 horas de tratamiento prcticamente arrojara el mismo

resultado, ya que no se observan cambios en el halo despus de 24 horas.
Por lo tanto utilizaremos la concentracin de coca de 1500 g/20 l y tiempo de
tratamiento de 24 horas para probar la hiptesis de que es equivalente al tratamiento con
clorhexidina al 0.12 %. A continuacin se presenta en las siguientes tablas el dimetro de
halo obtenido con extracto acuoso de coca versus clorhexidina al 0.12 % sobre
staphylococus aureus, as como sobre Streptococcus Mutans, medido despus de 24 horas
de aplicacin.
Tabla 5: Tamao del halo obtenido (mm) al aplicar extracto de coca y clorhexidina
sobre staphylococus aureus, medido despus de 24 horas

Cultivo N
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20

Diametro del halo obtenido (mm)

aplicando los siguientes tratamientos
Extracto acuoso
Clorhexidina
de coca, 1500 g/20L al 0.12 %
17
23
20
25
20
15
16
20
15
17
14
20
16
15
15
17
15
15
15
20
13
20
18
22
14
20
15
19
15
23
16
20
14
20
15
25
13
20
18
22

46

Tabla 6: Tamao del halo obtenido (mm) al aplicar extracto de coca y clorhexidina
sobre streptococcus mutans, medido despus de 24 horas

Cultivo N
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20

Diametro del halo obtenido (mm)

aplicando los siguientes tratamientos
Extracto acuoso
Clorhexidina
de coca, 1500 g/20L al 0.12 %
17
23
20
25
20
15
16
20
15
17
14
20
16
15
15
17
15
15
15
20
13
20
18
22
14
20
15
19
15
23
16
20
14
20
15
25
13
20
18
22

47

Grfico 1: Histograma del diametro del halo de staphylococcus aureus

aplicando clorhexidina al 0.12 %

10

Frecuencia

0
15,00

17,50

20,00

22,50

25,00

Media =19,90
Desviacin tpica
=2,989
N =20

dimetro del halo en mm

La distribucin de tamaos observada en el grfico no es normal, observamos una

concentracin de los dimetros entre 19 a 21 mm, los datos no son simtricos ms bien
estn concentrados al lado negativo de la distribucin, es decir se tiene una grfica con
asimetra negativa. Esto significa que la mayora de tamaos alcanzados sern superiores a
19 mm en el caso de clorhexidina.

El grfico 2 nos muestra la distribucin de tamaos del halo en el caso de utilizar un

extracto de coca sobre staphylococus aureus

48

Grfico 2: histograma del dimetro del halo de staphylococus aureus

aplicando extracto de coca

Histograma
10

Frecuencia

0
12,00

14,00

16,00

18,00

20,00

22,00

Media =15,70
Desviacin tpica
=2,003
N =20

diametro del halo, mm

Nuevamente se observa que la distribucin de tamaos difiere de la normal, observndose
que la mayora de los dimetros se concentra en tamaos que oscilan entre 14 y 16 mm;
con una concentracin de datos entre 13 y 17 mm, teniendo la distribucin una asimetra
positiva.
La observacin de los datos nos inducen a sostener que la eficacia de la clorhexina es
superior al del extracto de coca; para probarlo utilizaremos nuevamente la prueba
estadstica no paramtrica U de Mann Whitney.
1. Ho : diametros clorhexidina = dimetros coca
2. HA: dimetros clorhexidina> dimetros coca
3. Nivel de significacin = 0.05
4. Estadstica de prueba: U de Mann Whitney
5. Clculos obtenidos por el SPSS 15

49

Tabla 7: salida SPSS de la prueba estadstica para staphylococus aureus

DIAMET
RO
53.500
263.500
-4.029
.000

U de Mann-Whitney
W de Wilcoxon
Z
Sig. asintt. (bilateral)
Sig. exacta [2*(Sig.
.000(a)
unilateral)]
a No corregidos para los empates.
b Variable de agrupacin: CULTIVO

Siendo la significacin asinttica bilateral 0.00<0.05; concluimos con un nivel de

significancia del 0.05; que la media de los dimetro obtenidos con clorhexidina es mejor
que la obtenida con extracto de coca aplicado a stapylococus aureus; lo que confirma la
distribucin de los datos.
En el diagrama de cajas que se presenta a continuacin se puede confirmar esta conclusin.

Grfico 3: diagrama de cajas de los dimetros

del halo para staphylococcus aureus
24,00

DIAMETRO

22,00
23
20,00

22

18,00
16,00
14,00
12,00
CLORHEX

COCA

CULTIVO

La mediana del halo para clorhexidina es de 20mm y para coca es de 15 mm; con
clorhexidina el 50 % de los datos oscila entre 18 y 22 mm y en el caso de coca los datos

50

estn entre 14 y 17 mm. Nuevamente se puede confirmar la ganancia en eficacia de la

clorhexidina, pero tambin se debe percibir la eficacia como tratamiento aunque en menor
cuanta del extracto de coca.
En el caso del tratamiento sobre streptococcus mutans, los datos que se presentan a
continuacin comparan la eficacia entre el tratamiento con clorhexidina al 0.12 % y
extracto de coca de 1500 g/20 l, por medicin del halo en mm, donde un tamao mayor
del halo representa mejor eficacia de tratamiento. Los datos para 24 horas despus de su
aplicacin son los siguientes:
Tabla 8: Tamao del halo obtenido (mm) al aplicar extracto de coca y clorhexidina
sobre streptococcus mutans, medido despus de 24 horas

Cultivo N
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20

Diametro del halo obtenido (mm)

aplicando los siguientes tratamientos
Extracto acuoso de coca,
Clorhexidina
1500 g/20L
al 0.12 %
17
23
20
25
20
15
16
20
15
17
14
20
16
15
15
17
15
15
15
20
13
20
18
22
14
20
15
19
15
23
16
20
14
20
15
25
13
20
18
22

51

Grfico 4: histograma del dimetro del halo de streptococcus mutans

Aplicando extracto de coca

STRPCOC
10

Frecuencia

0
12,00 13,00 14,00 15,00 16,00 17,00 18,00 19,00 20,00 21,00 22,00

Media =15,70
Desviacin tpica
=2,003
N =20

STRPCOC

Grfico 5: histograma del dimetro del halo de streptococcus mutans

Aplicando clorhexidina

STRPCLR
10

Frecuencia

0
15,00

17,50

20,00

22,50

25,00

Media =19,90
Desviacin tpica
=2,989
N =20

STRPCLR

52

En el grfico de cajas podemos observar el comportamiento de los datos.

Grfico 4: Diagrama de cajas del dimetro del halo para

streptoccus mutans

24

DIAMETRO

22
23
20

22

18

16

14

12
CLORHEX

COCA

CULTIVO

Los histogramas obtenidos nos confirman la no normalidad de los datos, siendo ms bien
asimtrico positivo en el caso de coca y streptococcus; y en el caso de clorhexidina nos
presenta una ligera asimetra negativa.
Nuevamente se observa que los dimetros obtenidos con clorhexina son superiores a los
obtenidos con el extracto de coca. Los tamaos para el intervalo entre el percentil 25 y el
percentil 75 para la clorhexina es de 18 a 22 mm, teniendo una mediana de 20 mm. Para la
coca oscila entre 14.5 a 16.5, con una mediana de 15 mm. De modo que nuevamente se
determina que que el tratamiento con clorhexina es superior al obtenido con extracto de
coca a esa concentracin.
La prueba estadstica no paramtrica U de Mann Whitney se proporciona en la siguiente
tabla:

53

Tabla 9: salida SPSS de la prueba estadstica para streptococcus mutans

U de Mann-Whitney
W de Wilcoxon
Z
Sig. asintt.
(bilateral)
Sig. exacta [2*(Sig.
unilateral)]

DIAMETRO
53.500
263.500
-4.029
.000
.000(a)

Nuevamente la probabilidad extrema es 0.00 < 0.05; lo que nos indica que el dimetro
medio obtenido con clorhexidina es superior al obtenido con el extracto de coca.
Si consideramos que la eficacia de la clorhexidina es del 100%, siendo su mediana 20
mm; entonces la coca con una mediana de 15mm, tendra una eficacia de 75 % en el caso
de streptococcus mutans y en el caso de staphylococcus aureus la efectividad es tambin de
75 %.
Del anlisis de los datos se concluye que la clorhexidina es ms eficaz que la coca para el
tratamiento de 2 bacterias, pero que la coca representa el 75 % de la eficacia del
antibitico.

CONCLUSIONES DE LA PRUEBA DE HIPTESIS

1. El aumento de la concentracin de extracto de coca aumenta la eficacia del tratamiento;
por ejemplo se ha demostrado que el tratamiento con 1500 g/20 L; es mejor que con
1000 g/20L.
2. El tratamiento de staphylococcus aureus con clorhexidina al 0.12 % resulta ms eficaz,
que con extracto de coca de 1500 g/20L(7.5%); donde el extracto de coca tiene una
eficacia del 75 % con respecto a la clorhexidina.
3. El tratamiento de streptococcus aureus con clorhexidina al 0.12 % es ms eficaz que con
extracto de coca de 1500 g/20L(7.5%); pero el extracto de coca tambin tiene una
eficacia del 75 % con respecto a la clorhexidina.

54

DISCUSIN
En la presente investigacin se busco evaluar si el extracto de la hoja de Erythroxylum
lambran ejerca una eficacia antibacteriana en el tratamiento de staphylococcus aureus y
streptococcus mutans de la flora oralen comparacin con la clorhexidina al 0.12%
normalmente utilizado como colutorio, lo cual qued demostrado, la existencia de un
efecto de inhibicin de desarrollo bacteriano del extracto estudiado, segn los resultados
obtenidos; pero no demuestra superioridad para con los resultados obtenidos con la
clorexidina a adems se encontr diferencias significativas (segn los anlisis estadsticos)
con respecto al tamao de los halos de inhibicin en las distintas concentraciones utilizadas
del extracto de Erythroxylum lambran (coca de Huanuco).
Los resultados indican que existe una accion antibacteriana del extracto de la hoja
Erythroxylum lambran, lo cual da sustento a otras investigaciones realizadas en
chacchadores de coca, como son los trabajos de investigacin de Goicochea1, Ayala2,
Coronel4, Navarro5 y Pando6, quienes obtuvieron como resultados una disminucin en la
prevalenca e incidencia de caries en sus grupos poblacionales que tenan el habito del
chacchado. Adems en los resultados de Coronel4, Pando6 y Flores13 sobre la enfermedad
periodontal en personas que presentan el hbito de chacchado de hoja de coca, se observa
una tendencia de aumento en la prevalencia de enfermedad periodontal .
Existen estudios que tratan sobre las propiedades antibacterianas del extracto de
Erythroxylum lambran como en el caso de Castro y Chvez9, Mertz y Reyes11, por el
contrario si hay estudios sobre el mismo genero de la planta pero distinta especie como en
el caso de investigaciones de Can y Villanueva10, Solano12, Glvez14 los cuales obtienen
resultados positivos del efecto antibacteriano del Erythroxylum Novogranatense var.
truxillense en distintos agentes microbianos como son respectivamente bacterias Gram (-)
y Gram (+), Stretococcus de la cavidad bucal, bacterias Gram (-) resistentes.
Aguilar y Encarnacin8, Castro y Chvez9, Mertz y Reyes11 basaron sus estudios sobre el
efecto bacteriano sobre el mate de coca de Erythroxylum coca Lambran-Erythroxylum
Novogranatense var. truxillense sobre agentes microbianos como Mycobacterium

55

tuberculosis, uropatgenos Gram (-) multiresistentes, enterobacterias, obtenindose

resultados positivos con respecto al efecto antibacteriano del mate de coca estudiado por
los autores antes mencionados. Por los tanto, se observa que los distintos estudios
observados se obtiene un efecto antibacteriano del Erythroxylum, ya sea que la extraccin
de los principios activos totales hayan sido bajo el mtodo de la extraccin alcohlica (la
utilizada en el presente estudio) o la extraccin acuosa (mate de coca), en distintos agentes
microbianos se obtuvieron resultados de un efecto antibacteriano del Erythroxylum (coca).
Pero en ningunos de las investigaciones mencionadas realizan comparacines con agentes
bactericidas (clorhexidina 0.12% u otros), como en el caso de la presente investigacin.
En el caso de estudios microbiolgico de ndole oral solo se hall el realizado por
borrovic15, en dicho estudio solo se analiz la flora mixta salival para ello tomo la muestra
solo de origen salival.
borrovic15 utilizo un medio de cultivo enriquecido no selectivo como es el Agar Tripticasa
Soya, para tratar de desarrollar al mximo todas las bacterias presentes en la saliva, con el
fin de observar un efecto antibacteriano de la flora salival, a diferencia de la presente
investigacin que se utiliz un medio de antibiograma como es el agar muller hinton con el
fin de observar un efecto eficas frente a las bacterias de staphylococcus aureus y
streptococcus mutans en comparacin con la clorhexidina.
Con respecto a los resultados se observo coincidencia en la inhibicin bacteriana, sin
embargo, en la presente investigacin se encontr un efecto antibacteriano en las
concentraciones (1000 y 1500 g) pero no una eficacia en la comparacin con la
clorhexidina al 0.12%, a diferencia de borrovic15 que hallo efecto antibacteriano a partir de
las concentraciones de (250, 500, 1000 y 1500 g) con un control negativo sobre la flora
mixta salival.
Cabe resaltar que a mayor sea la concentracin

utilizada del extracto de hoja de

Erythroxylum (coca), mayor ser el halo de inhibicin producida sobre las bacterias para
determinar el efecto antibacteriano de dicha planta, motivo que demuestra tal
investigacin.

56

CONCLUSIONES

Existe un efecto antimicrobiano positivo a las concentraciones de 1000 y 1500 g/

20 l del extracto de Erythroxylum lambran en el tratamiento de staphylococcus
aureus y streptococcus mutans.

A mayor concentracin del extracto de Erythroxylum lambran mayor efecto

antimicrobiano.

Las concentraciones 1000 y 1500 g/ 20 l utilizadas tienen una diferencia

estadsticamente significativa pero no superior con respecto al grupo control.

57

RECOMENDACIONES

Se recomienda continuar con las investigaciones utilizando microorganismos

patgenos de la microflora oral.

Se recomienda realizar estudios con respecto a la composicin de la hoja de coca

con el fin de determinar el o los compuestos qumicos que causan la accin
antimicrobiana.

Se recomienda hacer estudios sobre la posibilidad de una accin sinrgica entre el o

los compuestos antimicrobianos del Erythroxylum lambran y los distintos frmacos
antimicrobianos.

Se recomienda realizar trabajos comparativos entre las distintas especies de hoja de

coca.

58

BIBLIOGRAFA
1) GOICOCHEA I., A.: Estudio de la cavidad bucal en los sujetos habituados a la
masticacin de hojas de coca en la hacienda Collambay-Trujillo. Tesis de Bachiller
en Odontologa. UNMSM. Lima, 1954.
2) AYALA M., C.: Accin de la coca y la llipta frente al cido lctico y pH de la
saliva y la dentadura del aborigen del altiplano. Tesis de Bachiller en Odontologa.
Lima, 1963.
3) UNGARO, M.: Patologa oral en masticadores de hojas de coca. Tesis Doctoral.
UPCH. Lima, 1972.
4) CORONEL A., M.: Estudio comparativo de la prevalencia de caries, enfermedad
periodontal y abrasin entre un grupo de sujetos con el hbito de masticacin de
hojas de coca y un grupo control en la comunidad de Apaycauchilla, provincia de
Tarma. Tesis de Bachiller en estomatologa. UPCH. Lima; 1988.
5) NAVARRO A., Angel: Prevalencia de caries dental por superficie en sujetos con
el hbito de masticar hojas de coca en el distrito de Palcamayo, provincia de Tarma,
departamento de Junn. Tesis de Bachiller en Estomatologa. UPCH. Lima, 1988.
6) PANDO, R.: Estudio comparativo de la prevalencia de caries, enfermedad
periodontal y abrasin en un grupo de sujetos con el hbito de masticacin de coca
y un grupo controlen la comunidad de Punsay, provincia de Tarma. Tesis de
Bachiller en Estomatologa. UPCH. Lima, 1988.
7) LI SING, C.: Propiedades inhibitorias del crecimiento de hongos oportunistas in
vitro de Erythroxylum coca y Erythroxylumnovogranatensevar. truxillense (Mate
de coca). Tesis de bachiller para Qumico farmacutico UNMSM. Lima, 1994.

59

8) AGUILAR

FELICES,

E.

ENCARNACIN

MONTALVO,

J.:

Comportamiento in vitro de Erythroxylum coca-Erythroxylumnovogranatense

Mate de coca sobre Mycobacterium tuberculosis y otras especies de
Mycobacterium. Tesis de bachiller para Qumico farmacutico UNMSM. Lima,
1995.
9) CASTRO VERASTEGUI, P. y CHAVEZ DIESTRA, J.: Accin inhibitoria in
vitro de Erythroxylum Lam. Var. coca y Erythoxylumnovogranetensevar.
truxillense Mate de Coca frente a uropatgenos Gram negativos multiresistentes.
Tesis de Bachiller para Qumico Farmacutico UNMSM. Lima, 1995.
10) CAM ALBUJAR, O. y VILLANUEVA VLCHEZ, P.: Accin Inhibitoria in
vitro

del

extracto

acuoso

extracto

metanlico

de

la

hoja

de

Erythroxylumnovogranatense (Morris) var. truxillense (Rusby) frente a bacterias

Gram (-) y Gram (+). Tesis de bachiller para Qumico farmacutico UNMSM.
Lima, 1996.
11) MERTZ LOO, M. y REYES GARCA, E.: Propiedades inhibitorias del
crecimiento in vitro de Enterobacterias, Cocos y Bacillus, de Erythroxylum coca
lam. y Erythroxylumnovogranatense (Morris) var. truxillense Rugby (Mate de
coca). Tesis de bachiller para Qumico farmacutico UNMSM. Lima, 1996.
12) SOLANO OYARCE, D.: Accin antibacteriana de extractos acuoso y metanlico
de principios activos totales de ErythroxylumNovogranetense (Morris) var.
truxillense (Rusby) sobre Streptococcus de la cavidad bucal. Tesis de Bachiller para
Qumico Farmacutico UNMSM. Lima, 1996.
13) FLORES M., F.: Prevalencia de Caries, Enfermedad Periodontal y Desgaste
Dentario en sujetos entre 40 y 70 aos de edad segn hbitos de masticacin de
hojas de coca en la comunidad de Quircan, Distrito de Mosca, Provincia de Ambo,
Departamento de Huanuco. Tesis de Cirujano Dentista. UPCH. Lima, 1997.

60

14) GALVEZ ESPINO, O.: Accin Inhibitoria del extracto acuoso de principios
activos totales de Erythroxylumnovogranetense Morris var. Truxillense (Rusby),
frente a bacterias Gram negativas resistentes a cinco antibacterianos. Tesis de
bachiller para Qumico farmacutico UNMSM. Lima, 1997.
15) BORROVIC RAMOS, F., (2006), efecto antibacteriano del extracto alcoholico
de la hoja de coca frente a la microflora ora [tesis de cirujano dentista]. Lima:
servicio de publicaciones e intercambio cientfico, UNMSM, 2006.
16) VENTURA G., CASTRO A., ROQUE M., RUIZ J., Chemical composition of
essential oil Erythroxylum coca Lam var. coca (Coca) and evaluation of its
antibacterial activity, Facultad de Farmacia y Bioqumica, Ciencia e Investigacin
UNMSM 2009; 12(1): 24-28

17) BORGHELLI, R.: Lesiones de la mucosa bucal por el uso de hojas de coca en el
grupo etario de varones de 20 aos de la provincia de Jujuy (Argentina). Revista de
la Asociacin Odontolgica Argentina, Vol. 61 N 7. Buenos Aires, 1973.
18) BURCHARD, R.: Una nueva perspectiva sobre la masticacin de la coca. Instituto
Indigenista Interamericano. Amrica Indgena, Vol. XXXVIII, N 4, octubrediciembre. Mxico, 1978.
19) TERRAN, M. y SANDAGORDA, A.: Aspectos socioculturales del consumo de la
coca. Cocana 1980-Actas del Seminario Internacional sobre Aspectos Mdicos y
Sociolgicos de la Coca y la Cocana. Editorial F. R. Jeri. Lima, 1980.
20) CARTER, W.; MAMANI, M. y PARKENSON, P.: Coca en Bolivia.
Universidad de Florida. Miami, 1980.
21) MACHADO, E.: El Gnero Erythroxylum en el Per. Lima, 1968.

61

22) MACHADO GARZOLA, EDGARDO: El gnero Erythroxylum en el Per, las

cocas silvestres y cultivadas del pas. Imprenta de la Universidad Nacional Mayor
de San Marcos. Revista RAYMONDIANA, Vol. V, pg. 101, diciembre. Lima,
1972
23) CABIESES, F.: Apuntes de medicina tradicional. A&B S.A. Lima, 1993.
24) CABIESES, F.: Aspectos etnolgicos de la coca y la cocana. Cocana 1980-Actas
del Seminario Interamericano sobre Aspectos Mdicos y Sociolgicos de la Coca y
la Cocana. Editorial F. R. Jeri. Lima, 1980.
25) DOMIC, Z.: Revisin crtica bibliogrfica y consideraciones generales acerca del
masticado de coca. Cocana 1985-Actas del Seminario Interamericano sobre
Aspectos Mdicos de la Coca y la Cocana. Editorial F. R. Jeri. Lima, 1985.
26) ZAPATA O., V.: El problema de la masticacin de la coca en el Per. Boletn
sobre estupefacientes, Vol. IV N2, abril-junio. Naciones Unidas. New York, 1952.
27) HAMER, J. E. and VILLEGAS, L. O.: The effect of coca leaf chewing on de
buccal mucosa of Aymara and Quechua Indians in Bolivia. Oral Surg, August
28(2): 287-295. 1969.
28) BERNAL, J.: Odontoestomatologa y Precancerosis oral. Tesis de Bachiller
UNMSM. Lima, 1962.
29) BASCONES MARTNEZ A. Antispticos en el tratamiento de la enfermedad
periodontal. Av Periodon Implantol. 2002; 14,3: 101-114.
30) MARISOL BETANCOURTH, Microorganismos inusuales en surcos y bolsas
periodontales. Colomb. Cali.mar Med. 2006; 37(1)

62

31) HERNN PREZ TORRES. Farmacologa Y Teraputica Odontolgica.

Antispticos Y Desinfectantes Odontolgicos Clorhexidina. Editorial Celsus
2005; Pg. 349.
32) BUCOXIDINA (clorhexidina 0.12%) colutorio, gianfarma s.a.
33) VADEMECUN FARMACOLOGICO PERUANO. Clorhexidina, ediciones
mdicas internacionales, 2004 pag. 523.
34) DRA. MILEYDI DE LA C. TORRES LPEZ, DR. MARCIAL DAZ
LVAREZ, DRA. ALINA ACOSTA MORALES. La clorhexidina, bases
estructurales y aplicaciones en; la estomatologa. Revista estomatologca de Mxico
2008.
35) JOSE LIBANA UREA. Microbiologa Oral. Mc Graw Hill Interamericana
De Espaa 1995. Cp. 29. Pg.393.
36) MARTA NEGRONI. Microbiologa Estomatologa Fundamentos Y Gua
Prctica. Editorial Mdica Panamericana 2009; Pg. 347 - 377.
37) GEO. F. BROOKS, MD., JANET S. BUTEL, PhD., STEPHEN A. MORSE,
PhD., Microbiologa medica de jawets, melnick y adelberg. Editorial el manual
moderno2005, Cp. 14 15.
38) PATRICK R. MURRAY, PhD; KEN S. ROSENTHAL, PhD; GEORGE S.
KOBAYASHI, PhD; MICHAEL A. PFALLER, MD., Microbiologa Medica,
Cuarta Edicin en Espaol 2002. Espaa
39) ELLEPOLA AN, SAMARANAYAKE LP. Adjunctive use of chlorhexidine in
oral candidoses: a review. Oral Dis 2001 Jan 7

63

40) TRIPATHI. Farmacologa Odontologa Fundamentos. Clorhexidina. Editorial.

Medica Panamericana 2009; Pg. 317, 487, 489.
41) ENACO. Empresa Nacional De La Coca S.A 2011.
42) LUIS MISSOURI USA.: Ocano Mosby. MMIV Editorial Ocano, milanesat 21
23.
43) WALPOLE, MYERS, Probabilidad y estadstica, Mexico 1992, cuarta edicin,
editorial Mc Graw Hill
44) DANIEL, Bioestadstica, Mexico 2004, cuarta edicin, Editorial Limusa S.A.

64

ANEXOS

65

ANEXO N1

PRINCIPALES ESPECIES ERYTHROXYLUM EN EL PER

REINO

: Vegetal

DIVISION

: Discfloras

SUBDIVISION : Displotemonas

CLASE

: Dicotiledneas

ORDEN

: Gerianales

FAMILIA

: Erythroxylaceae

GENERO

: Erythroxylum

ESPECIE

: Erythroxylum coca Lambran (Huanuco)

Erythroxylum Novogranatense Var. Truxillense (trijillo)

66

ANEXO N2

ERYTHROXYLUM COCA LAMBRAN (HUANUQUEA)

67

ANEXO N3

ERYTHROXYLUM NOVOGRANATENSE VAR. TRUXILLENSE

(TRUJILLO)

68

ANEXO N4
PRINCIPAL COMPOSICIN QUMICA DE LA HOJA DE COCA
HUMEDAD
CALORAS
PROTENAS
CARBOHIDRATOS
GRASAS

6.5
305 cal %
12.99 g %
46.2 g %
5g%
VITAMINAS

VITAMINA A
VITAMINA C
VITAMINA E
VITAMINA B12
RIBOFLAVINA
NIACINA
CIDO PANTOTENICO
PIRIDOXINA
TIAMINA
BIOTINA

11000
1.46
43.50
1.05
1.90
1.29
0.6684
0.503
0.35
0.0863

UI
mg %
UI
mg %
mg %
mg %
mg %
mg %
mg %
mg %

MINERALES
FSFORO
MAGNESIO
FIERRO
SODIO
ALUMINIO
ESTRONCIO
MANGANESO
BORO

911.00
213.00
45.80
40.60
39.50
9.71
6.65
5.35

mg %
mg %
mg %
mg %
mg %
mg %
mg %
mg %

BARIO
CINC
POTASIO
CALCIO
COBRE
CROMO
YODO

4.67
2.70
2.02
1.54
1.21
0.359
5.0

mg %
mg %
mg %
mg %
mg %
mg %
mg %

ALCALOIDES TOTALES 0.25 % A 2.25 %

COCANA
BENZOILECGONINA
CINNAMOILCOCAINA
BENZOILTROPINA
CUSCOHIGRINA
DIHIDROXITROPINA
HIGRINA

TROPOCAINA
ALFA-TRUXILLENSE
BETA-TRUXILLENSE
HYGROLINA
METILCOLINA
METILECGONIDINA
NICOTINA
OTROS

TANINOS
FLAVONOIDES
FENOLES

SAPONINAS
ACEITES ESENCIALES
GLICOSIDOS

69

ANEXO N5

COMPOSICIN QUMICA DE LAS HOJAS DE COCA (HUANUCO)

CONTENIDO EN 100 gr.

70

ANEXO N6

Alcaloides Naturales de la Hoja de Coca

Es el ter metlico de la benzoilegnonina, tiene propiedades anestsicas y
Cocana
analgsicas.
Es un derivado carboxilado de la atropina, tiene propiedades de metabolizar
Egnonina
grasas, glcidos y carbohidratos. Adelgaza la sangre.
Atropina. O es anestsico que produce sequedad en el rbol respiratorio.
escopolamina Pectina. Es absorbente y antidiarreico, junto a la Vitamina E, regula la
produccin de melanina para la piel.
Es absorbente y antidiarreico, junto a la Vitamina E, regula la produccin de
Pectina
melanina para la piel
Esta proteasa, que en mayor proporcin contiene la papaya, es muy parecida a
Papana
la catepsina animal, es una especie de fermento que acelera la digestin.
Excita las glndulas salivares cuando hay deficiencia de oxgeno en el
Higrina
ambiente
Es un cardiotnico que regula la carencia de oxgeno en el ambiente,
Globulina
mejorando la circulacin sangunea. Evita el sorojche (mal de altura)
Acelera la formacin y funcionamiento del cerebro, aumenta la irrigacin
Piridina
sangunea a la hipfisis y las glndulas, traducindose en una mejora del
cuerpo en general
Evita la formacin de la caries dental junto al fsforo y al calcio.
Quinolina
Es un anestsico poderoso.
Conina
Es un analgsico que junto a la anterior, ayuda a aumentar las propiedades
Cocamina
anestsicas y analgsicas de la cocana natural.
Acelera la formacin de clulas musculares y evita la putrefaccin de
Benzona
alimentos, de ah sus propiedades teraputicas para gastritis y lceras.
Regula la presin arterial en hipo e hipertensin y ayuda a la formacin de
Reserpina
clulas seas.
Refresca y mejora el funcionamiento del hgado, la secrecin de la bilis y su
Inulina
acumulacin a la vescula. Es diurtico, Es un polisacrido, muy parecido a
las vitaminas B-12, que produce aumento de clulas de la sangre.

Estos 14 alcaloides, los aminocidos que contienen, los cidos y las vitaminas A, B1, C y
E, la tiamina, niacina y riboflavina, la convierten en la planta ms completa del universo
en Nitrgeno No Proteico, que es el que elimina las toxinas y patologas del cuerpo,
obteniendo combinaciones ptimas con frutas y plantas medicinales

71

ANEXO N7
Materiales para el proceso de maceracin alcohlica de la hoja de coca
Erythroxylum Coca Lambran (Huanuquea)

Botella de vidrio transparente

alcohol rectificado al 80

Papel aluminio para forrar la botella de vidrio

Hoja de coca huanuquea

72

ANEXO N8
Procesamiento de filtrado y evaporacin en horno al vacio de extracto alcoholico de
hoja de coca
Laboratorio de biotecnologa de la UDH

73

ANEXO N9
Dilucin y preparacin de las concentraciones del extracto de hoja de coca de pasta
slida

74

ANEXO N10
Impregnado de la solucin de extractote hoja de coca con la s concentraciones en los
discos de papel filtro

75

ANEXO N11
Los discos de sensibilidad

76

Anexo n12
Discos de sensibilidad insertados en los agares Muller Hinton ya sembrados con las
bacterias en cultivo y verificacin de la formacin de halos

77

ANEXO N13
Lecturas de las lminas al microscopio

78

79

ANEXO N14
CRONOGRAMA DE ACTIVIDADES

Setiembre
2010

Octubre
2010

Noviembre
2010

Diciembre
2010

Enero
2011

Febrero
2011

Marzo
2011

Abril
2011

Mayo
2011

Junio
2011

Aprobacindel
proyectode
investigacin

Ejecucindel
proyectode
investigacin

Anlisise
interpretacin
datos
(estadsticos,
tablasygrficos).

Presentacindel
informefinal.

Sustentacinde
latesis

ACTIVIDADES

Elaboracindel
anteproyectode
investigacin.
Elaboracindel
proyectode
investigacin

80

1.FORMULACIN
DELPROBLEMA
GENERAL
Cul es la eficacia
antibacterianainvitrodel
extracto de la hoja de
cocaencomparacincon
laclorhexidina0.12%en
el
tratamiento
de
staphylococcus aureus y
streptococcusmutans?

ESPECFICOS
Ser el extracto de la
hoja de coca un eficaz
antibacteriano in vitro
frente a staphylococcus
aureus y streptococcus
mutans?
Habrdiferenciaentre
la eficacia antibacteriana
inVitrodelaclorhexidina
0.12% en comparacin
con extracto de la hoja
de coca frente a
staphylococcus aureus y
streptococcusmutans?

2.OBJETIVOS

3. JUSTIFICACIN

4. HIPTESIS

Aclarar las incgnitas sobre el

beneficio de dicha planta. Con los
resultados positivos que se obtengan
de la existencia de la eficacia
antibacterianadelextractoalcohlico
delahojadecoca,sepodrcomparar
con otro agente bactericida efectivo
que es la clorhexidina y encaminar
unaplanificacinparaeltratamiento,
tanto preventivo como interceptivo,

de enfermedades orales de origen

infeccioso con el uso de extractos de
la hoja de coca o con los
ESPECFICOS
componentes exactos de la planta
Identificar la eficacia que
causen
dicho
efecto
delextractodelahojade antibacteriano.
coca

como
antibacteriano in vitro en
el
tratamiento
de
staphylococcus aureus y
streptococcusmutans.
Evaluar la eficacia
antibacteriano in vitro
entre la clorhexidina
0.12% en comparacin
conelextractodelahoja
decocaeneltratamiento
de staphylococcus aureus
ystreptococcusmutans.

GENERAL

Determinar eficacia
antibacterianoinVitrodel
extracto de la hoja de
coca en comparacin con
la clorhexidina al 0.12 %
en el tratamiento de
staphylococcus aureus y
streptococcusmutans

5.VARIABLES

HiptesisdeInvestigacin
VARIABLEINDEPENDIENTE
La efectividad antibacteriana (Vi)
in Vitro del extracto de la
Concentracin del extracto alcohlico de la hoja de coca y
hoja coca es mayor que la
clorhexidina0.12%.
efectividaddelaclorhexidina
ESCALA
CATEGORIA
al 0.12% en el tratamiento INDICADORES
DeRazn
250g/20l. Numrica
de Staphylococos Aureus y
estreptococosmutans.
DeRazn
500g/20l. Numrica

1000g/20l. Numrica
1500g/20l. Numrica
Numrica
0.12%
HiptesisNula
VARIABLEDEPENDIENTE
La efectividad antibacteriana (Vd)

DeRazn
DeRazn
DeRazn

in Vitro del extracto de la

Eficacia antibacteriano del extracto alcohlico de la hoja de
hoja coca a las
coca.
concentracionesde250,500,
INDICADORES
ESCALA
CATEGORIA
1000, 1500ug / 20ul, no es

mayor que la efectividad de

laclorhexidinaal0.12%enel
tratamiento
de

staphylococcus aureus y
8mm.resistencia
streptococcusmutans.

HiptesisAlterna
11mm.sensible
Numrica
DeRazn
La efectividad antibacteriana
in Vitro del extracto de la
hoja coca a las
concentracionesde250,500,
1000,1500ug/20ul,esigual
que la efectividad de la
clorhexidina al 0.12% en el
tratamiento
de
staphylococcus aureus y
streptococcusmutans.

81