Fisiologa de la Hemostasia

Endotelio y Plaquetas

Prof. Germn Detarsio.

Bioq. Especialista en Hematologa
Ctedra de Hematologa
Fac. de Cs. Bioqumicas. UNR.

Hemostasia
Sistema formado por clulas, protenas y otras
sustancias, encargado de mantener la sangre
en fase fluida en todo el rbol vascular.
Responde rpidamente ante lesiones para evitar
la prdida de sangre.
Cuando el sistema hemosttico falla o pierde el
equilibrio, sobreviene la hemorragia o la
trombosis.

Proceso Hemosttico
Vasoconstriccin localizada
Adhesin plaquetaria

Hemostasia 1

Agregacin plaquetaria
Formacin de la malla de Fibrina

Hemostasia 2

Activacin del Mecanismo Fibrinoltico

Fibrinlisis

Proceso Hemosttico
Vasoconstriccin localizada
Adhesin plaquetaria

Pared Vascular
Plaquetas
FvW
Fibringeno

Hem. 1

Agregacin plaquetaria
Formacin de la malla de Fibrina

Hem. 2

Activacin del Mecanismo Fibrinoltico

Factores de Coag.
Fosfolpidos (-) Ca++

Factores de Fibrinlisis
Fibrina

Plaquetas normales

MEMBRANA DE LA PLAQUETA
Rol fundamental:
- mantiene la integridad citoplasmtica
- mediadora de las interacciones con protenas
vasculares y plasmticas
- mediadora de las interacciones intracelulares
con los elementos del citoesqueleto
Limita la superficie plaquetaria extendiendo hacia adentro
mltiples canales que dan origen al sistema canalicular de
superficie.
Fosfolpidos: distribucin asimtrica, fosfolpidos neutros
en la capa externa y los aninicos en la interna.

MEMBRANA DE LA PLAQUETA
Glicoprotenas de membrana:
-GP Ib-IX-V
-GP IIb-IIIa (pool externo)
-GP IV
-GP Ia-IIa
-GP VI

Receptores de activacin:
- de ADP
- de Trombina
- de Tromboxano A2
- de Adrenalina

GP IIb IIIa
(Fibringeno y vW)
GP Ia IIa

GP
Ib-V-IX
(VWF)

GP VI
GP IV

Receptores de activacin
Colgeno

Protenas de 7 dominios
de trans-membrana
asociadas a protena G

GRANULOS PLAQUETARIOS
Fg, FV, FP4, vWF, Fn, Tr, Alb, Tp, PDGF

ADP, ATP, Serot, Ca2+

Enzimas Hidrolticas

RESPUESTA PLAQUETARIA A LA INJURIA VASCULAR

Adhesin

Agregacin

Cambio de forma

Contraccin

Liberacin del contenido de grnulos

Sntesis y liberacin de eicosanoides

Exposicin de Fosfolpidos de carga negativa

Exposicin de ligandos que la relacionan con otras clulas

Funcin plaquetaria
Matriz
sub-endotelial

Adhesin

Endotelio
activado

Activacin

Secrecin del
contenido de
grnulos
plaquetarios

Agregacin

Formacin y
liberacin de
eicosanoides
(Tromboxanos)

RESPUESTA PLAQUETARIA A LA INJURIA VASCULAR

NURDEN P

ADHESION

forman una monocapa

Liberacin de Agonistas

ADP y otros
activadores
son liberados
Generacin
de TXA2

ADP

Thromboxane A2

AGREGACIN

Amplificacin de la Activacin Plaquetaria

Se acelera la activaciny se incrementa la agregacin.

50 sec-1

Interaccin plaquetas
matriz subendotelial
La adherencia
plaquetaria y la
formacin del trombo
plaquetario se
incrementan en funcin
del aumento de
la velocidad de shear
de la pared del vaso
sanguneo.
Concomitantemente
disminuye la formacin
de fibrina y
acumulacin de GR.

650 sec-1

2600 sec-1

Interaccin con matriz sub-endotelial: GP IbVIX

-25000 copias por
plaqueta
-receptor del vWf
-alta afinidad por el vWf
en la plaqueta en estado
de reposo
-la unin a vWf induce
activacin plaquetaria
-es endocitada cuando la
plaqueta se activa

TRANSDUCCION DE SEALES

Rac

CD42

Rho
ROK

WASP
PI 5-K
p65PAK

WASP
PI 3-K
p65PAK

Actina

LAMINAR PSEUDOPODOS

PI 5-K

MLCK

PI 3-K

ADHESION CONTRACCION

Mecanismos de amplificacin
de la activacin plaquetaria inicial
- Secrecin de ADP: liberacin de grnulos densos
- Sntesis de Tromboxano A2:
El aumento de Ca++ citoplasmtico
activa la fosfolipasa A2 .
Esta liberar Acido Araquidnico
de los fosfolpidos de membrana.
La sntesis de Tromboxano A2 ocurre
en la membrana del sistema tubular denso
donde se encuentran las enzimas
responsables de su produccin.
El Tromboxano A2 es un
activador plaquetario
pero tambin es un
potente vasoconstrictor.

Acido Araquidnico
Ciclooxigenasa (COX 1)
Prostaglandina H Sintetasa 1
Actividad de Ciclooxigenasa

Endoperxidos
cclicos
Tromboxano A Sintetasa
Tromboxano A2
Tromboxano B2

Funcin plaquetaria
Va de los eicosanoides
Acido Araquidnico
Lipooxigenasa
Leucotrienos

Ciclooxigenasa (COX) 1
Prostaglandina H Sintetasa 1
Actividad de Ciclooxigenasa

Prostaglandina G2
Endoperxidos
cclicos

COX 1
Actividad de Peroxidasa

Prostaglandina H2
Tromboxano A Sintetasa

Tromboxano A2
Tromboxano B2

Agregacin
Interaccin plaqueta-plaqueta
GP IIb-IIIa mediadora de estas interacciones
Para esta funcin la GP se activa desde el interior,
como resultado de la unin de los agonistas
sobre la plaqueta
El estado activo resulta de un cambio conformacional de la GP IIb-IIIa
Esta funcin requiere la unin del fibringeno o
del vWf a la GP IIb-IIIa.

GP IIb-IIIa
- pertenece a la familia de
las integrinas
- es la GP ms abundante
40.000-80.000 copias
- existe un pool intracelular
en las membranas internas
- en el estado activo tiene
dos sitios de unin
para fibringeno, tambin
une vWf y fibronectina
- la unin a estos ligandos
genera una activacin
adicional de la plaqueta
(activacin outside-in)


Fg

Fg

RIBS
9F9,F2
a-Fg
ACTIVO

LIBS
PAC-1
AP6

REPOSO

GP IIb-III a

MECANISMO DE ACTIVACION

Ligandos
Fibringeno v3 / v1
Fibronectina v1
Vitronectina v3
von Willebrand Ib-IX-V
Trombospondina GP IV(CD36)

ACTIVACIN
Las plaquetas activadas expresan receptores de adhesin
para leucocitos.
Leucocitos

P-selectina
CD40 L

Unin de Plaquetas y Leucocitos

Secuencia

Adhesin

Activacin

Agregacin

PARED VASCULAR: Capas



Clula endotelial: el endotelio es un rgano activo que

participa en la regulacin de la hemostasia, del tono y
la permeabilidad vascular. Interviene en la
angiognesis, en la inflamacin y en la respuesta
inmune.

Subendotelio:

membrana basal elastina - microfibrillas



Lmina elstica interna

fibras de colgeno proteoglicanos fibronectina
glicosamiglicanos - clulas musculares lisas

PARED VASCULAR


Clula endotelial:

Existe una gran heterogeneidad en el fenotipo de las

clulas endoteliales segn su ubicacin geogrfica en el
rbol vascular y en el rgano en que se encuentran.

Son capaces de hacer cambios rpidos en su

comportamiento frente a variaciones en su microambiente.

Se adaptan rpidamente a isquemia, inflamacin, sepsis y

otros estmulos mecnicos como colocacin de stents,
balloons e injertos.

Endotelio: Modulador de la Trombogenicidad

ADPasa

Vasodilatadores
Antiagregantes

Vasoconstrictora

ATP y ADP asa

5 Nucleotidasa

Interaccin Endotelio - Leucocito - Plaqueta

Interaccin Endotelio - Plaqueta

La plaqueta acta como un reservorio de factores estimulantes
de la proliferacin celular que mantiene en equilibrio el sistema.

En la Trombocitopenia disminuye la interaccin entre el

endotelio y las plaquetas por lo que se debilitan las uniones
intercelulares y se favorece la extravasacin de sangre hacia el
espacio extravascular produciendo el cuadro purprico

Endotelio: Modulador
del Tono vascular
Renina-Angiotensina
Bradiquinina

Producci
n
Produccin
de
Trombina

Componentes del Sistema de Coagulacin

Simgenos:
Vitamina K dependientes: II - VII - IX - X- PC
No Vitamina K dependientes: PK - XII - XI - XIII

- PG-TAFI
Cofactores:

 Solubles: V - VIII - FvW - PS - PZ HMWK

 Celulares: FT- TM

Protena Estructural: Fibringeno

Fosfolpidos: Clulas endoteliales, Monocitos y

Plaquetas
Iones: Ca++ - Mg++ - Zn++
Inhibidores:AT - Cof. II Hep - PC - TFPI - PZI C1q Inh.- 1AT - 2MG

Grupo

Protena

Cromosoma

Concentracin
Plasmtica/ml

Vida Media (hs)

Protena
Estructural

Factor I
Cadena
Cadena
Cadena

4q23-q32
4q23-q32
4q23-q32

150 - 350 mg

72 - 120

100 150 g

60 - 70

0.5 g

3-6

4 - 5 g

18 - 24

8 - 10 g

30 - 40

4 - 5 g

5 g

52

30 g

60

50 g

35

10 g

240

Enzmas
Vitamina
K Dep.

Enzmas
Vitamina
K Indep.

Factor II
Factor VII

Prot. C

11p11-q12
13q34
Xq27.1-q27.2
13q34
2q13-q14

Factor XI
Factor XII
PK
Factor XIIIA
Factor XIIIB
TAFI

4q32-q35
5q33
4q35
6p24-p25
1q31-q32.1
13q14

Factor IX
Factor X

22 g
6 g

Cromosoma

Concentracin
Plasmtica/ml

Vida Media
(hs)

Cofactores
Solubles

Factor V
Factor VIII
Factor vW
PS
PZ
HMWK

1q21-q25
Xq28
12p13.2
3p11.1-q11.2
13q34
3q26

5 - 10
g
0,1 0,2
g
10
g
25g
2-3g
70g

12
8 12
12
42
60
150

Cofactores
Celulares

FT
TM

1p21-q22
20p12-cen

Inhibidores

AT
TFPI
IPZ

1q23-q25
2q31-q32.1
14q32

150 - 400g
0,1g
1 1,6g

72
18
-

Grupo

Protena

HEMOSTASIA
BALANCE ENTRE LOS MECANISMOS PROCOAGULANTES Y ANTICOAGULANTES
PLAQUETAS
FACTORES
PLASMTICOS

ACTIVADORES
DEL
PLASMINGENO

COAGULACIN

FIBRINLISIS

INHIBIDORES
AT - PZI
PC PS PZ
HC II - TFPI

INHIBIDORES
2 ANTIPLASMINA
2 ANTITRIPSINA
2 MACROGLOBULINA
CI INHIBIDOR
PAI - TAFI

Mecanismo de Carboxilacin Heptica

Precursor de Protrombina

Protrombina

HN CH CO

HN CH CO

CH2

CH2

COOH
OH
CH3

Acido-Carboxyglutamico
CH
(Gla)

Acido Glutmico
CH2
(Glu)
Carboxylasa
O=C=O
Epoxidasa
O2

O=C
O

COOH
O
CH3

KH2

O
R

Reductasa

OH
Vitamina K Reducida A. Orales

K Epoxi

R
O
Vitamina K Oxidada

SERINO PROTEASAS
Activacin

s s

s s
IIa

II

s s

s s
VIIa

VII

s s

s s
IXa

IX

s s

s s
Xa

s s
s
s

s s
XI

s s
s s

s
s

XIa

s s
s s
XIIa

XII

s s

s s
PK

KK

Factor XI

FIBRINGENO

IIa