Practica n4

Antibiograma

Introduccin:
Se entiende por antibiograma el estudio de la sensibilidad "in vitro"
de las bacterias a los antibiticos. Por extensin, se suele incluir el
estudio de la sensibilidad a las y otros quimioterpicos.
El antibiograma es un mtodo de diagnstico rpido y preciso
Con ayuda del antibiograma se puede escoger el antibitico ms
adecuado
para
el
tratamiento
de
una
enfermedad .
La razn por la cual es conveniente el estudio del antibiograma de
una bacteria determinada radica en el hecho de la diferente
sensibilidad a los antibiticos de las distintas especies bacterianas y,
ms an, en el hecho de que en numerosas especies existen grandes
diferencias de sensibilidad a un determinado antibitico entre unas y
otras cepas.
El estudio no representa peligro alguno para el paciente, ya que la
muestra se analiza en un laboratorio y se trabaja directamente con
los microorganismos en condiciones aisladas
Existen diferentes tcnicas de laboratorio que permiten medir o
calcular de forma rutinaria, y de manera semicuantitativa, las CIM
(mtodos manuales y mtodos automatizados o semiautomatizados).
Se puede realizar mediante:
1.- Difusin en agar: Disco placa y E test
2.- Dilucin: Medio slido y Medio lquido (micro/macrodilucin)
3.- Mecanizados y Automatizados

Agentes microbianos
sensibilidad

para

las

pruebas

de

-Lactmicos Los antibiticos -lactmicos poseen un anillo central de

cuatro tomos denominado anillo -lactmico. Su principal modo de accin
es la inhibicin de la sntesis de pared celular.
Penicilinas El espectro de las penicilinas est dirigido a bacterias no
productoras de -Lactamasas: gram positivas, algunos fastidiosos y gram
negativosLas penicilinas resistentes a las penicilinasas (cloxacilina ,
dicloxacilina, meticilina, nafcilina y oxacilina) poseen actividad contra gram
positivos, inclusive los Staphylococcus productores de penicilinasas.

Combinacin de -Lactmico / inhibidor de -Lactamasas Esta

combinacin antimicrobiana incluye a una penicilina y un segundo agente
que posee una actividad antibacteriana mnima pero funciona como
inhibidor de algunas -lactamasas.
Cefalosporinas y otros Cephems Las distintas cefalosporinas y cephems
frecuentemente poseen un espectro de actividad levemente diferente
contra bacterias gram positivas y gram negativas. Estos agentes son
frecuentemente referidos como cefalosporinas de "primera", "segunda" o
"tercera" generacin, dependiendo en gran parte de su actividad frente a
bacterias gram negativas con alto grado de resistencia.

Carbapenemes La estructura de los carbapenemes difiere levemente de la

estructura de la penicilinas y son mucho ms resistentes a la hidrlisis por
las -lactamasas. Esta caracterstica les provee un amplio espectro de
actividad contra muchas bacterias gram negativas y gram positivas.
Monobactames Los monobactames son estructuralmente los nicos
antibiticos que muestran actividad slo contra bacterias gram negativas
aerbicas.

Glicopptidos Los glicopptidos poseen una compleja estructura qumica

y actan inhibiendo la sntesis de pared celular en un sitio diferente al de los
-Lactmicos. La actividad de este grupo est dirigida a las bacterias gram
positivas. La vancomicina es aceptada para el tratamiento de infecciones
por bacterias gram positivas en pacientes alrgicos a la penicilina y tambin
es til para la terapia de infecciones debidas a especies bacterianas
resistentes a - Lactmicos. Aminoglucsidos Son un grupo de
antibiticos de estructura similar que inhiben la sntesis de protenas a nivel
ribosomal. Pueden utilizarse para el tratamiento de infecciones causadas
por bacilos gram negativos aerbicos o en combinaciones sinrgicas (con
antibiticos inhibidores de la sntesis de pared celular) contra algunas
bacterias gram positivas resistentes.
Macrlidos Los macrlidos son antibiticos estructuralmente relacionados
que inhiben la sntesis proteica a nivel ribosomal.
Tetraciclinas Las tetraciclinas inhiben la sntesis de protenas a nivel
ribosomal, de ciertas bacterias gram positivas y negativas
Quinolonas Este grupo de compuestos incluye un nmero de agentes
antimicrobianos ntimamente relacionados que funcionan primariamente
inhibiendo la actividad de la DNA-girasa de muchas bacterias gram positivas
y negativas.
Sulfonamidas y Trimetoprima Este grupo de compuestos, abarcan varios
agentes quimioteraputicos con similar espectro de actividad, los cuales
inhiben el metabolismo del folato. El sulfisoxazol es la sulfonamida ms
comnmente usada para el tratamiento de infecciones del tracto urinario y
por lo tanto podra ser apropiada su seleccin para un test in-vitro. El
sulfametoxazol es usualmente ensayado en combinacin con trimetoprima.

Procedimiento
1) Se moja el
hisopo
en
la
solucin
del
inculo
y
se
escurre
en
las
paredes
internas
del
tubo.
Se
siembra la placa
MH en estras muy
juntas
en
3
direcciones,
girando la placa
60, sin volver a
sumergir el hisopo
en la suspensin.
Dejar
secar
la
placa durante 5 minutos.

2) Se moja el hisopo
en la solucin del
inculo y se escurre en
las paredes internas
del tubo. Se siembra la
placa MH en estras
muy
juntas
en
3
direcciones, girando la
placa 60, sin volver a
sumergir el hisopo en
suspensin.
Dejar
secar la placa durante
minutos.

la
5

3) Del dia 1 al 2: el
profesor
prepara
simulacin
del
crecimiento
bacteriano.

la

4) Comparar los halos de inhibicin del crecimiento microbiano

alrededor de cada antibitico: medir con una regla el dimetro de
cada halo

Resultados:
Lectura del antibiograma
ciprofloxacina
sulfametropin
ceftriaxona
cefotaxima
cefalotina
Acido nalidoxico
Amo/ ac. Clavilanico
agtreonam
gentamicina
clongenicol

staphylos
sulfatrimet
Amikacina
sultamecelina
ceftriaxona
cefazolina
oxacelina
dicloxacelina
tetraciclina

2.8cm- 28mm
2.9cm-29mm
2.8cmm.28mm
17mm
21mm
13mm
3mm
21mm
15mm

2.8cm- 28mm
29mm
19mm
21mm
12mm
11mm
13mm
15mm

ponecelina
Ampecelina

11mm
11mm

Conclusiones
El antibitico se difunde en forma radial en cada disco de papel
grafico y cuanto mayor sea el dimetro mas sensible ser y por
lo contrario a menor dimetro mayor resistencia
El anlisis de los dimetros de sensibilidad tiene un aspecto
esencial y una gran trascendencia clnica