Universidad veracruzana

Facultad de Qumica Farmacutica Biolgica

Laboratorio de Hematologa

Prctica No. 6
Recuento De Reticulocitos.
FUNDAMENTO:
El RNA residual de los hemates inmaduros (reticulocitos) es precipitado y
teido con una tincin supravital de azul de cresil brillante, lo cual permite
identificarlos. Se preparan las extensiones y se cuentan las clulas que contienen
precipitados (reticulares) teidos. Los resultados se dan en porcentajes de los
reticulocitos examinados y en cifras absolutas por mm 3.
PREGUNTAS GUIA:
1. Qu son los reticulocitos y en donde se producen?
2. Describe sus caractersticas morfolgicas
3. Qu utilidad tiene el efectuar en un paciente el recuento de
reticulocitos?
4. Qu nos indica encontrar valores elevados o disminuidos de
reticulocitos en la sangre?
5. Por qu debe reportarse tanto el valor relativo como el absoluto en este
recuento?
MATERIAL:
Material necesario para la extraccin de sangre
3 Tubos de ensaye
1 Pipeta Pasteur con bulbo de hule
Portaobjetos
Puente de tincin
1 Pipeta de Thoma para glbulos rojos con boquilla
1 Cmara de Neubauer
REACTIVOS:
E.D.T.A. al 10%
Colorante de Wright
Solucin buffer de fosfatos
Solucin de Gower
Solucin colorante de azul de cresil brillante, la cual se prepara de la
siguiente manera:
Oxalato de Sodio . . . . . . . 1.3 g
Azul de cresil brillante. . . . . 1.0 g
Agua destilada . . . . . . . . 100 ml
Disolver, dejar en reposo unos das y filtrar. Conservar en frasco de vidrio color
mbar.

EQUIPO:

Universidad veracruzana
Facultad de Qumica Farmacutica Biolgica
Laboratorio de Hematologa

Bao de agua a 37 C
Microscopio
Agitador de pipetas

TECNICA:
1. Extraer sangre venosa de la forma acostumbrada y mezclarla con
anticoagulante.
2. Colocar 3 gotas de la solucin colorante de azul de cresil brillante en un tubo de
ensaye, aadir 3 gotas de sangre y mezclar cuidadosamente. Dejar en reposo en
bao de agua a 37C durante 15 minutos.
3. Transcurrido el tiempo indicado, mezclar bien la suspensin, preparar 4 frotis

sobre portaobjetos y dejarlos secar al aire.

4. Cuando los frotis estn secos proceder a la tincin de fondo con colorante de
Wright en dos de ellos, los otros dos no teirlos.
5. Observar los frotis con objetivo de inmersin y anotar las diferencias
encontradas entre los frotis con y sin tincin de Wright.
6. Elegir el mejor frotis y contar en cada campo el nmero de reticulocitos (ver
esquema) y el nmero de eritrocitos hasta completar 1,000 clulas. Expresarlo
como porcentaje de clulas reticuladas (valor relativo en %).
7. Efectuar un recuento de eritrocitos por mm 3 y calcular el nmero de reticulocitos
por mm3 (valor absoluto) de acuerdo a la siguiente frmula:

T = No. de reticulocitos por mm3

N = No. de reticulocitos por 1000 eritrocitos
E = No. de eritrocitos por mm3

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Facultad de Qumica Farmacutica Biolgica
Laboratorio de Hematologa

VALORES DE REFERENCIA:
Relativo . . . . . . . . . 0.5 a 1.5 %
Absoluto . . . . . . . . . 24,000 a 84,000 por mm 3