El objetivo de nuestro trabajo era de determinar los efectos de la tensin

oxidativa sobre el proceso de neuro degeneration en la sustancia negra , y

evaluar la oxidacin de dopamina en el plasma que usa una tcnica de
voltamperometra cclica (CV) . Tambin hemos estudiado la correlacin entre
los aumentos de niveles de especie de dopamina oxidados con la severidad de
lpido-peroxidation en el plasma. Sesenta y cuatro ratas de macho Wistar
fueron divididas en cuatro grupos experimentales y recibidas el aire (el Grupo I,
el control) o el ozono (0.25 ppm) diariamente por la inhalacin para 4 h para 15
(el Grupo II), 30 (el Grupo III), y 60 (el Grupo IV) das. Los sesos fueron
procesados para la posicin inmunohistoqumica de dopamina y p53 en la
sustancia negra . El plasma tranquilo de estos animales fue probado para
productos de dopamina oxidados que usan CV y los niveles de lpidoperoxidation fueron medidos. Nuestros resultados indican que la exposicin
crnica a O3 bajo causas medicas el nmero de neuronas Dopaminrgico
disminuy, y aumentos de clulas p53-immunoreactiva hasta 30 das; que era
una funcin del tiempo de exposicin al ozono. Estrs oxidativo produce un
aumento significativo de los niveles de las quinonas de dopamina (DAQs) que
tuvo correlacin bien (la r = 0.962) con perxidos de lpido en el plasma
durante el perodo de estudio. Estos resultados sugieren que DAQ pudiera ser
un indicador confiable, perifrico oxidante la sustancia nigra el dao en el
cerebro.
Introduccin
La dopamina (DA) es un catecolamina, que juega un papel importante en el
sistema nervioso central de mamferos (CNS) como un neurotransmisor, y est
presente en cantidades mayores que otros neurotransmisores. Bajo los niveles
de estriado DA han sido encontrados en pacientes con la enfermedad de
Parkinson (Wightman et al., 1988). El metabolismo normal de dopamina implica
muchas reacciones de oxidacin, que producen daos en el metabolismo capaz
de causar el dao de clula (Hermida-Ameijeiras et al., 2004). En un estado de
redox equilibrado, la oxidacin DA es la parte del metabolismo normal. Cuando
un desequilibrio de reduccin de oxidacin existe, la oxidacin de aumentos de
DA dar lugar a quinonas de dopamina (DAQs). Ellos pueden reaccionar con
cistena y producir residuos cysteinyl; aquellos son capaces de inhibir la funcin
de muchas protenas (Ramsden et al., 2001). Hay pruebas que una
permeabilidad aumentada " la barrera de cerebro de sangre " ocurri en varias
condiciones experimentales y patolgicas, como en el proceso de
neuroinflamacion o enfermedades neurodegenerativas, que ocurre
acompaado por aumentos de la especie de oxgeno reactivo (ROS) (Schreibelt
et al., 2007; Carvey et al., 2005; Zlokovic, 2008). Por lo tanto, la dopamina
oxidada puede cruzar la barrera cerebral de sangre (BBB) y circularse en el
plasma (Carvey et al., 2005).
Dosis de ozono bajas son usadas como un modelo no invasivo para causar la
tensin de oxidativa (Rivas-Arancibia et al., 1998). Este estado de oxidativatensin produce un aumento de niveles de lpido-peroxidation en estructuras
diferentes cerebrales (Rivas-Arancibia et al., 2000). Dopaminergico la muerte

neuronal es una parte fundamental de este proceso neurodegenerativo cuando

un animal es expuesto 4 horas por da durante al menos 1 mes al ozono
(Pereyra-Mu~noz et al., 2006).
Como el DA rpidamente es oxidado, tcnicas electroqumicas han sido
exploradas para su anlisis en parachoques y medios de comunicacin
controlados, pero la oxidacin DA ha sido investigada en sistemas biolgicos.
(Guan-Sonido metlico et al., 2004, 2007; Ramesh et al., 2004; Aguilar et al.,
2004; Patel et al., 2005). Usamos un mtodo basado en la voltamperometra
cclica (CV) que nos permite para medir el DAQS en el plasma y correlacionar
esto con el dao progresivo en el substantia nigra causado porel estrs
oxidativo .
Nuestro objetivo era determinar si el estado de oxidative-tensin causado por
la exposicin crnica baja O3, causa el proceso progresivo neurodegenerativo
en el substantia nigra y el aumento de metabolismo oxidado de dopamina en el
plasma.
Materiales y mtodos
Animales y cuidado animal
Sesenta y cuatro ratas de macho Wistar que pesan 250-300 g individualmente
fueron almacenadas en cajas acrlicas con el alimento ad libitum (NutriCubo,
Purina, EE.UU.) y guardadas en un espacio aire limpio. Ambos el control y trat
ratas fueron mantenidos en una temperatura y la humedad control y fue
matada conforme al Instituto Nacional de Directrices de Salud para el
Tratamiento animal.
Procedimiento general
Las ratas al azar fueron divididas en cuatro grupos experimentales (la n = 16).
El grupo 1 fue compuesto de animales expuso diariamente a una corriente de
aire sin O3 por 4 h y los grupos 2, 3, y 4 eran animales expuestos para 15, 30,
y 60 das a O3. La exposicin al ozono fue hecha diariamente para 4 h en una
dosis de 0.25ppm (similar hasta un da de alta contaminacin en Ciudad de
Mxico) (Rivas-Arancibia et al., 2010).
Dos horas despus de la ltima exposicin para limpiar el aire O3, plasma de
seis animales de cada grupo fue obtenido de sangre de corazn para niveles de
lpido-peroxidation (LPO). Cuatro animales de cada grupo profundamente
fueron anestesiados con el sodio pentobarbital (50 mg/kg ip; Sedalpharma,
Edo. de Mxico, Mxico) e inundado transcardial con paraformaldehdo del 4 %
(Sigma-Aldrich Chemie, Alemania) en parachoques de fosfato 0.1M (J.T.
Panadero, NJ) (PB, Tecsiquim; pH 7.4). Los sesos fueron aadidos con el
formaldehdo del 10 % (J.T. Panadero, EE.UU.) para 24 h e integrado en parafina
(Mc Cormick, San Louis, MO, EE.UU.). Las rebanadas sagitales del cerebro que
contiene el substantia nigra fueron cortadas en 5 ' el lunes amicrotome (el
americano ptico) y montadas sobre diapositivas. De cada grupo rebanadas
sagitales cerebrales que contienen el substantia nigra fueron procesadas por
inmunohistoqumica para DA y p53. Adems, seis animales de cada grupo profundamente

fueron anestesiados y una muestra de sangre fue obtenida, que la muestra era entonces
centrifugeda y 1.5mL del plasma inmediatamente fue estudiado por CV

Exposicin de 03
Los animales fueron guardados diarios para 4 h en una cmara con un difusor,
unidos a un flujo variable O3 el generador (5 L/s). El ozono fue generado en un
tubo por el cual una corriente de voltaje alto se circulado, que caus la
conversin de oxgeno en O3. Los niveles de produccin de ozono eran
proporcionales a la intensidad corriente y al flujo de aire. Un Ozono PCI y el
Monitor de Sistema de control fueron usados medir la concentracin O3 dentro
de la cmara en todas partes del experimento.

Ensayo de Lpido-peroxidacin (LPO)

Los niveles de LPO fueron cuantificados usando un Ensaye de k LPO el equipo
(Kamiya la Compaa Biomdica). Despus de la ltima exposicin a O3, seis
animales de cada grupo profundamente fueron anestesiados, matados por la
decapitacin, y su plasma fue obtenido. Los reactivo de enzima (ascorbic
oxidase y lipoprotein lipase) fueron aadidos. La mezcla fue incubada para
5min en 35? C y el reactivo chromogen (10-n-methylcarbamoyl-3,7dimethylamine-10-h-phenothiazide) fue aadido. La mezcla de pasar fue
incubada durante 10 minuto en 30? C. El absorbancewasthen moderado en
675nmin un espectrofotmetro (Jenway 355). Una curva de calibracin de dos
puntos fue hecha usando la salina en blanco (0 nmol/mL) y 50 nmol/mL
cumene hydroperoxidase el estndar provedo del equipo.
Los resultados fueron calculados usando la ecuacin, cuya gama lineal para
este ensaye estaba entre 2.0 nmol/mL y 300 nmol/mL, LPO [nmol/mL] = [(Es Eb) 50 / (Estd - Eb)], donde Es es la muestra absorbance, Eb es absorbance
en blanco, y Estd es el cumene absorbance (50 nmol/mL)

Immunohistochemistry for DA and P53

Las secciones sagitales de cada cerebro que contiene el substantia nigra tenan
la parafina quitada, se trat con un retiro de parafina y la solucin de
recuperacin de calor (Biocare Mdico), e introdujo en una olla a presin
elctrica (Decloacking la Cmara, Biocare Mdico) por 5min. Despus del
lavado con el agua destilada y tratamiento con perxido de hidrgeno (diluido
1:5; el Pescador Cientfico) para 5min, las secciones fueron aclaradas otra vez
con el agua destilada y tratadas con un reactivo obstructor (el Francotirador De
fondo, 4plus el Componente de Deteccin, Biocare Mdico) para 10 minuto.
Ellos entonces fueron lavados con el parachoques de salina de fosfato 0.1M
(PBS), el pH 7.4 (Merck), e incubados para 12 h en 4? C con Anti-DA (conejo
purificado polyclonal anticuerpo, diluido 1:500, Chemicon) o p53 (conejo
purificado polyclonal anticuerpo, diluido 1:200, Biocare). Las secciones fueron
aclaradas con PBS y tratadas con el anticuerpo biotinylated secundario (el

Eslabn Universal, Biocare Mdico) para 1 h. Despus del lavado con PBS, trat
con streptavidinenzyme conjuga (4plus el componente de deteccin,
streptavidin-hrp, Biocare Mdico) durante 30 minuto, y lavado otra vez con
PBS, el anticuerpo atado fue visualizado usando 3,3-diaminobenzidine (APLICAR
el Equipo de Sustrato, ScyTek) como el cromgeneo. Las rebanadas fueron
lavadas en el agua destilada y contramanchadas con la solucin hematoxylinparachoques. Secciones representativas cerebrales de cada grupo fueron
procesadas en la paralela despus de la cubierta de ellos con Permount
coverslips y las secciones fueron examinadas con un olimpo BX41 el
Microscopio y fotografiadas con una Evolucin-QImagin el Equipo de Cmara
Digital (MediaCybernetics).

Numero de neuronas en la sustancia nigra

Cuatro animales de cada grupo experimental fueron analizados. El nmero de
clulas immunoreactivas en el substantia nigra fue contado, usando cuatro
secciones representativas cerebrales de cada animal de cada grupo y para
cada anticuerpo. El nmero total de clulas immunoreactivas por campo
microscpico en 40 la amplificacin (cada campo microscpico tena un rea
de 30,000 ' M2) fue contado, analizado para cada grupo, y el nmero de clulas
fue calculado.
Voltamperometra cclica (CV)
Las Medidas de voltamperometra cclicas fueron hechas usando un Controlado
por ordenador personal BAS el Epsiln terminal de trabajo electroqumico (el
Oeste Lafayette, Indianapolis, EE.UU.), unidos a un soporte de clula c-3 con
una configuracin de tres electrodos, que consisti en un carbn vidrioso (GC)
(BAS modelan MF-2012, = 3mm) como el electrodo trabajador, un AgCl-Ag
3M KCl (BAS modela MW-2063) como el electrodo de referencia, y un cable
platino como un electrodo auxiliar (BAS modela MW-1032), todos ellos del
Oeste Lafayette, Indianapolis, EE.UU.. OriginPro 7.0 software fue usado para la
transformacin de la seal inicial y para obtener los primeros derivados de las
seales de voltamperometra. Todos los potenciales fueron corregidos
comparados al electrodo normal de hidrgeno (NHE). Los animales
profundamente fueron anestesiados y una muestra de sangre fue recogida
directa del ventrculo izquierdo. El plasma (1.5 mL) fue puesto en una clula de
volumen baja, que fue purgada con el nitrgeno (la alta pureza Extrema,
Praxair) para eliminar el oxgeno antes de la adquisicin de datos. El
voltagrama fue registrado entre-1.3v y 1.7V en una tarifa de exploracin de
0.1Vs-1. La ventana completa plasma electroqumica era-1.6v a 1.7 V. Todas las
medidas fueron hechas en la temperatura ambiente. El electrodo vidrioso de
carbn fue pulido a mano con un pao de pulimento liso con alumina ( = 0.05
' m; LECO, San Joseph, MO, EE.UU.), sonicated en el agua destilada durante 2-4
minuto, y luego secado con acetona (Buehler, Fanfarronada de Lago, Il, EE.UU.)
antes de cada medida. Determinar las caractersticas voltametricas del sistema
biolgico no afectado por tensin de oxidativa, el CV del plasma de sangre

obtenido de ratas no expuestas a O3 fue registrado en la temperatura

ambiente con un carbn vidrioso como el electrodo trabajador. Estas curvas
fueron usadas como el control y las comparaciones subsecuentes estaban
basadas en estos resultados.
Mtodos estadsticos
Los datos del nivel de lpido peroxidation y cambios del nmero de clulas
immunoreactivas dentro del substantia nigra como una funcin del tiempo de
exposicin al ozono fueron analizados por una prueba de Kruskal-Wallis y la
Prueba de u de Mann-Whitney. La voltamperometra cclica y los datos del nivel
de lpido peroxidation fueron analizados por la estadstica no paramtrica. Para
facilitar el anlisis de los datos de la voltamperometra cclica, los datos
matemticamente fueron tratados para obtener el primer derivado de los picos
de ctodo. Esto permite a la ampliacin y la definicin las ondas que de otra
manera claramente no pueden ser observadas en un experimento de
voltammogram tpico. Los valores del primer derivado de cada grupo fueron
expresados como medianas y analizados estadsticamente usando KruskalWallis no paramtrico y la Prueba de u de Mann-Whitney . Una correlacin de
Lanza entonces fue calculada para obtener el nivel de correlacin de los niveles
de especie DA-oxidized contra niveles LPO.

Resultados
En el anlisis de niveles LPO plasma, encontramos los aumentos de 59.31.2
nmol/mL, 69.31.5 nmol/mL, y 78.330.4 nmol/mL como una funcin del
tiempo de exposicin al ozono (15, 30, y 60 das), comparado al grupo de
control, que tena un nivel de LPO de 47.370.63 nmol/mL (el Higo 1). La
prueba de Kruskall-Wallis mostr diferencias significativas entre los grupos en
los niveles del plasma LPO (P <0.001).
Los grupos expuestos por ozono, encontramos disminuciones de
immunoreactividad progresivas causadas por el aumento de la muerte celular.
En el substantia nigra de animales expuestos hasta 30 y 60 das de ozono, el
ncleo es desplazado y el citoplasma puede ser visto. Diferencias significativas
fueron medidas en los grupos expuestos al ozono para 15, 30, y 60 das (P
<0.05) comparado al grupo de control. Los grupos expusieron al ozono durante
30 y 60 das tienen considerablemente menos neuronas que el grupo expuesto
al ozono durante 15 das (P <0.05) (el FIG 2).
La prueba de Mann-Whitney mostr que los niveles de LPO en todos los grupos
expuestos al ozono eran considerablemente (P <0.001) ms alto comparados
al grupo de control.

Immunoreactividad de la dopamina

Neuronas normales dopaminergic y perikaryon bien definido podran ser vistos

en el DA immunoquimica en el grupo de control. En los grupos expuso al ozono
la morfologa normal de neuronas fue perdida en el substantia nigra. Para los
30-y de 60 das
Immunoreactividad p53

Immunoreactividad mnimo a p53 fue medido en el grupo de control en el

substantia nigra. Aumentos progresivos de las clulas immunoreactividad
fueron vistos en el grupo de 15 das y nosotros podramos ver el
desplazamiento de ncleo de p53 despus de 30 das en el substantia nigra. La
prueba de Kruskal-Wallis mostr diferencias significativas de las cuentas de
clulas immunoreactivas (P <0.03). La Prueba de u de Mann-Whitney mostr
una diferencia significativa entre el control y los grupos tratados por ozono y
tambin mostr diferencias significativas entre los grupos expuestos al ozono
15 das (P <0.05), 30 das, y 60 das (P <0.03) (el Higo 3).
3.3. Determinacin electroqumica

Grupo de control
La curva tpica plasma de rata con la alta conductividad mostr
electroactividad entre-1.6v y +1.7V contra el electrodo normal de hidrgeno
(NHE), con una resistencia media de 200 ' para nuestro arreglo de clula
electroqumica. El voltagrama, cuando explorado del cero a potenciales
positivos, muestra dos pequeas ondas , IA y IIA, en 0.597V y 1.147V (el Higo
4). La onda IA es amplia, causada por la oxidacin de especie DA y cido
ascrbico que ocurre en potenciales muy cercanos, mientras que la onda IIA es
causada por la oxidacin de otros componentes plasma. Explorando del cero a
un potencial negativo, en un experimento separado, ningunos picos catdicos
fueron medidos
GRUPO DE OZONO
El CVS de plasma obtenido de ratas expuestas para 15, 30, y 60 das (Higos 5a,
6a, y 7a) mostr un pico (Ic) en la zona catdica, atribuida a un proceso de
electroreduction irreversible de DAQS en el electrodo vidrioso de carbn sin
una interferencia de cido ascrbico (AA).
Los valores de densidad corriente del pico de Ic aumentaron directamente
como una funcin del tiempo de exposicin a O3, como demostrado por el
primer derivado de las seales catdicas (Higos 4b, 6b, y 7b). Los resultados
son las medianas de primer derivado de los picos catdicos. El plasma de
animales expuestos a O3 para 15, 30, y 60 das mostr los valores de densidad
corriente aumentados del pico de Ic de 22 ' Acm-2, 40 ' Acm-2, y 90 ' Acm-2. La
prueba de Kruskall-Wallis mostr diferencias significativas entre grupos en los
valores de densidad corriente plasma del pico de Ic (P <0.001). La prueba de

Mann-Whitney mostr que el primer derivado de los valores de densidad

corriente de los picos catdicos (Ic el pico) en todos los grupos expuestos por
ozono tena diferencias significativas en 15, 30, y 60 das (P <0.05) comparado
al grupo de control

Correlacin de coeficiente entre el LPO Y EL DAQS

Nuestros resultados indican una correlacin entre el LPO y la dopamina oxidada
. Los datos de los niveles aumentados de LPO y l del DAQS fue agrupado en
un argumento Dispersar y un coeficiente de correlacin de Lanza de 0.940
fueron obtenidos
Discusin

La exposicin de ratas a dosis de ozono bajo crnicas causa un estado de

oxidativa-tensin y causa la oxidacin de dopamina que cede la formacin de
quinona. La dopamina es una molcula fcilmente oxidada en una forma de
non-enzymatic, porque es compuesto de un toque de benceno odihydroxylated
(catechol) que forma una serie de electrophilic quinoid la especie. Tambin, la
oxidacin de dopamina espontnea en condiciones fisiolgicas es determinada
por su potencial de oxidacin bajo (+124mV contra el electrodo Ag-AgCl), que
es inferior que el mitochondrial cytochrome el potencial de oxidacin (Montine
et al., 1997). Durante este proceso una alta cantidad de ROS es formada. Todos
estos son asociados con una respuesta inflamatoria que causa alteraciones en
la funcin de BBB, y permiten a la dopamina oxidada metabolites para cruzar la
barrera y circularse en la sangre que conduce a la formacin de quinona en el
plasma, que puede ser determinado por la voltamperometra cclica
Immunoquimica contra la dopamina en el substantia nigra en el grupo de
control mostr clulas bien definidas y un nmero sustancial de neuronas
dopaminergico. En el grupo de tratamiento de 15 das observamos alteraciones
morfologica y una prdida en el nmero de clulas dopaminergico. En el grupo
de tratamiento de 30 das nosotros vimos disminuciones en el
immunoreactividad contra la dopamina y una alteracin evidente morfologicas
en las clulas restantes. Para el grupo de 60 das nosotros vimos un total
perdido de morfologa en el pequeo nmero de clulas restantes y casi
ninguna dopamina immunoreactividad.
Immunohistoquimica contra p53 en el substantia nigra mostr un aumento del
desplazamiento de p53 al ncleo como el tiempo de exposicin O3 aument,
esto indica que la tensin de oxidativa en s causa la muerte de clula.
La correlacin con el nmero de clulas dopaminergico y los resultados de la
voltamperometra cclica puede ser explicada porque despus de 15 das de
exposicin de ozono encontramos la oxidacin de dopamina y alteraciones
celulares, pero todava tenemos las clulas que podran producir las cantidades
significativas de dopamina. Estas alteraciones siguen hasta 30 das de
exposicin de ozono hasta que estos sistemas de antioxidante de
compensacin se hagan insuficientes en 60 das de exposicin de ozono. El

dao en las clulas causa una produccin de dopamina perdida y tambin en el

aumento de muchas molculas ms causadas por la oxidacin La tcnica de
voltamperometra cclica usada con este trabajo nos muestra la formacin de
quinona de dopamina en el plasma que ocurre secundario a la tensin de
oxidativa en animales expuestos al ozono. La densidad corriente (el pico Ic) es
equivalente a la concentracin DAQ plasma. Los resultados del anlisis CV del
grupo de control no mostraron picos catdicos, que muestran que en este
plasma prueba el DAQS no estaban presente. A diferencia del grupo de control,
los grupos ozono tratado mostraron aumentos de los niveles de dopamina
oxidada metabolicas como una funcin directa del tiempo de exposicin.
La dopamina reducida no puede cruzar el BBB, de modo que el pico de Ia
registrado en el CV sea causado por la dopamina plasma. A pesar de esto, en
una oxidativa-tensin declaran las alteraciones en el BBB la dopamina
permitida oxidada para entrar en la circulacin de sangre, y luego reaccionar
con protenas plasma para formar quinonas, de modo que nosotros pudiramos
registrarlos en el pico de Ic.
En los sistemas de antioxidante equilibrados por redox estatales, endgenos
por lo general puede reducir la dopamina oxidada en el cerebro. Por lo tanto, la
dopamina oxidada no es el presente en el plasma, y como una consecuencia,
las reacciones con las protenas plasma que producen el DAQS, registrado
como Ic picos, no estn presentes, como mostrado en el grupo de control. En
un estado de oxidativa-tensin causado por la exposicin de ozono crnica, el
pico de Ic aparece. Como el tiempo de exposicin O3 aument, el pico de y su
potencial cambi valores de y la ventana electroactividad fue acortada.
A pesar del pico de Ic moderado en 60 das y la correlacin entre el LPO nivela
y DAQS en la sangre, encontramos una contradiccin evidente con las
conclusiones del immunohistoquimica en el tejido cerebral en 60 das, porque
haba immunoreactividad bajo a la dopamina y un aumento importante del
p53, que indica la muerte progresiva celular. Nosotros explicamos esto porque
la gran tensin de oxidativa afectaba muchas molculas y estos superpuestos
como visto en el pasar Ic el pico.
Esto puede ser considerado como una grabacin no especfica con esta tcnica
en un estado avanzado de dao de oxidativa. Sin embargo, al principio del
proceso neurodegenerativo y durante la muerte celular en el substantia nigra
la tcnica resultados cedidos claros y mostraron que la sustancia que caus
todas las reacciones era la dopamina oxidada en el cerebro. Esto es importante
por el porvenir la consideracin para un temprano diagnstico de la
enfermedad de Parkinson.
Los mejores senderos sabidos de DAQS que causa dao a neuronas
dopaminergico son la formacin de residuo cysteinyl, que tiene la capacidad de
inhibir varias funciones de protena y reducir la concentracin ATP debido a un
bloqueo de cadena respiratorio (Ramsden et al., 2001). Otros informes sugieren
una relacin entre una respuesta inflamatoria y la vulnerabilidad de neuronas
dopaminergico. Todo encima de compuestos mandados a tambin son

caracterizados por su capacidad de interrumpir la sangre BBB (Ayata y Ropper,

2002). Segn esto, tambin se cambia del sistema vascular han sido
demostrados en el ventral mesencephalon de pacientes con la LIBRA (Faucheux
et al., 1999). Que es ms importante los cambios de la permeabilidad BBB en
el ventral mesencephalon de pacientes Parkinson a sido demostrado en vivo
(Kortekaas et al., 2005). Hay entonces la posibilidad de relacionar la formacin
del DAQS a las alteraciones de permeabilidad del BBB. Al principio el DAQS se
formara en el tejido cerebral que produce la especie de oxgeno reactivo y la
contribucin a de la muerte de las neuronas dopaminergico del substantia
nigra pares compacta. Las fracciones importantes del DAQS entonces cruzaran
BBB cambiado la produccin de la formacin de nuevas quinonas de
catecholamine fundado all, tan ello posible de medir la parte de ellos en el
plasma por CV como en nuestro experimento.
La sustancia negra (Substantia nigra en Latn, tambin conocida como Locus Niger) es una
porcin heterognea del mesencfalo, y un elemento importante del sistema de ganglios
basales (aunque no se la considere como un ncleo basal como tal). Estos la dopamina
oxidada en el plasma entonces contribuyen al aumento de los niveles LPO plasma. Los
resultados tambin muestran una relacin directa, por el ndice de correlacin de Lanza de
0.963, entre el nivel de tensin de oxidativa moderada por niveles de LPO y la especie de
dopamina oxidada, como nos manifestamos en el grupo de tratamiento de 30 das, y para otra
especie oxidada en el grupo de 60 das cuando el dao de oxidativa es tan grande e implica
tantas molculas ms que esto se para ser especfico para nuestra tcnica de medida.
Adems, es conocido que la deteccin de dopamina en muestras biolgicas fuerte es
interferida con por la presencia de cido ascrbico y otro como la serotonina, la adrenalina,
noradrenalin, y precursores de dopamina (el Guan-sonido-metlico et al., 2004; Xiang et al.,
2007). El objetivo principal de nuestro trabajo es de demostrar el aumento de la especie
oxidada como una respuesta de un estado oxidativa-acentuado. Esto es importante porque la
forma de la onda Ic, sumamente amplia y no bien definido, indica que hay el que la especie
oxidada que causa este pico. La identificacin exacta de la especie complicada en el IA, IIA, y
picos de Ic puede ser posible por el empleo de electrodos ms especficos. Con el futuro
trabajo trataremos de resolver estos picos para identificar toda la especie complicada.
CONCLUSION
La exposicin repetida a las dosis bajas de ozono produce un estado de tensin de
cronicoxidativa -en sistemas biolgicos, que en s es capaz de desarrollar la muerte progresiva
dopaminergico neuronal en el substantia nigra sin otros factores patolgicos. El perdido del
equilibrio de redox causa un aumento del metabolismo oxidativo de dopamina, que conduce al
aumento de los niveles de dopamina oxidada que contribuye a un ciclo vicioso que aumenta la
especie reactiva y produce una formacin principal de quinonas de dopamina.

La inmunohistoqumica es un procedimiento histopatolgico que se basa en la utilizacin de

anticuerpos que se unen especficamente a una sustancia que se quiere identificar (anticuerpo
primario). Estos anticuerpos pueden tener unida una enzima o esta puede encontrarse unida a
un anticuerpo secundario que reconoce y se une al primario. Aplicado a un tejido orgnico, el
anticuerpo primario se une especficamente al sustrato y se aprovecha la actividad enzimtica
para visualizar la unin. De esta manera se consigue un complejo sustrato-anticuerposenzima unido al lugar donde se encuentre el sustrato y mediante la activacin de la enzima

con la adicin de su sustrato se genera un producto identificable donde se encuentre el

complejo

Dopaminrgico significa "relacionado con la actividad de la dopamina", siendo la dopamina

uno de los neurotransmisores ms comunes
Sustancia nigra significa sustancia negra. Hace referencia al locus niger, una estructura
cerebral esencial que se localiza en el mesencfalo. La sustancia nigra est formada
por neuronas dopaminrgicas (es decir, que secretan dopamina, que es a la vez
un neurotransmisor y una neurohormona) y juega un papel muy importante en el control de las
actividades motrices. En caso de lesin o de destruccin de la sustancia nigra aparecen los
sntomas tpicos que se observan en la enfermedad de Parkinson.

Las catecolaminas son neurotransmisores que se vierten al torrente sanguneo. Son un

grupo de sustancias que incluyen la adrenalina, la noradrenalina y la dopamina, las cuales
son sintetizadas a partir del aminocido tirosina.
El striatum o cuerpo estriado, son un grupo de nucleos ubicado en el cerebro, que de medial a
lateral son el nucleo caudado, el nucleo lentiforme (formado por putamen y globo palido) y el
claustrum o antemuro.
El trmino estriado se utiliza debido al aspecto estriado producido por las bandas de sustancia gris
que atraviesan la cpsula interna y conectan el ncleo caudado con el putamen , forman parte de
los ganglios de la base (El trmino ncleos de la base se aplica al conjunto de masas de sustancia
gris situado dentro de cada hemisferio cerebral. Ellas son el cuerpo estriado, el ncleo amigdalino
el claustro,, el ncleo subtalmico, y la sustancia nigra, importantes para la coordinacin del
movimiento. )

La cistena ( abreviada como Cys o C) es un -aminocido con la frmula qumica HS-CH2CHNH2-COOH. Se trata de unaminocido no esencial, lo que significa que puede ser
sintetizado por los humanos. Los codones que codifican la cistena son UGU y UGC. La parte
de la cadena donde se encuentra la cistena es el tiol que es no polar y por esto la cistena se
clasifica normalmente como un aminocido hidrofbico. La parte tiol de la cadena suele
participar en reacciones enzimticas, actuando como nuclefilo. El tiol es susceptible a la
oxidacin para dar lugar a puentes disulfuros derivados de las cistena que tienen un
importante papel estructural en muchas protenas. La cistena tambin es llamada cistina, pero
esta ltima se trata de un dmero de dos cistenas a travs de un puente disulfuro.