Depto.

Laboratorio Biomdico
Seccin Inmunodiagnstico
Instituto de Salud Pblica de Chile

Material de Referencia Secundario:

Anticuerpos Anti-Nucleares

Clave nica de identificacin del Material de Referencia Secundario

Anticuerpos Antinucleares: MRIANA-006/08; Lote IANA-001.

Valores certificados:

ANALITO

Anticuerpos
AntiNucleares

PROCEDENCIA
CONCENTRACIN INCERTIDUMBRE
PATRN
MR
(UI/mL)
(UI/mL)
PRIMARIO

NIBSC

105 UI/mL

+ 25 UI/mL

Moteado

Fuente del material de referencia:

El Material de Referencia Secundario de Anticuerpos Antinucleares (ANAs)
corresponde a muestras de suero de donantes serolgicamente negativos para
VIH, VHB y VHC con un ttulo > 1/640 y un Patrn Homogneo. Se form un
pool nico de suero, el que fue tratado segn el IT-222.24-003. Fueron
excluidos los sueros ictricos y lipmicos.
Proveedor del material de referencia:
Diferentes hospitales de la Regin Metropolitana. Este suero ha sido preparado
de sangre de donantes de acuerdo a mtodos aprobados por el Ministerio de
Salud y por el Instituto de Salud Pblica de Chile y cumplen con todas las
pruebas serolgicas de escrutinio y con resultados negativos a las
enfermedades susceptibles de transmisin por transfusin requeridas; incluida
la enfermedad de Chagas. A pesar de su negatividad, este material debe
manejarse como una muestra de paciente; por lo que es responsabilidad de la
persona encargada de llevar a cabo la medicin el establecer las medidas de
seguridad apropiadas para el uso y la disposicin del suero, DE ACUERDO A
LA NORMATIVA VIGENTE.
Preparador del material de referencia:
Seccin Inmunodiagnstico (SID), Instituto de Salud Pblica de Chile (ISP). La
preparacin de este material se llevo a cabo segn Normativa Vigente ILACG12:2000 en un Laboratorio de Produccin de Material de Referencia.
Descripcin del material de referencia:
La presentacin es de 0.5 mL de suero humano liofilizado contenido en un vial
de vidrio mbar con tapn de goma y sello, identificado con una etiqueta que
contiene la identificacin y codificacin correspondiente, la identificacin del
material y el nmero de vial que corresponde al nmero consecutivo de
llenado. Consignas de Seguridad para los usuarios: EL MRIANA-006/08 FUE
PREPARADO PARA SU UTILIZACIN NICAMENTE EN MEDICIONES DE
DIAGNOSTICO IN-VITRO.
Propsito de uso:
El MRIANA-006/08, fue preparado para evaluar la exactitud de los
procedimientos clnicos utilizados para la medicin de ANAs en suero humano.
Tambin puede ser empleado en la validacin de mtodos y para la
preparacin de materiales de referencia terciarios y/o controles.

Fecha de certificacin:
Marzo 2009.
Disponibilidad de alguna otra forma o expresin del resultado del material
de referencia:
Los resultados del material de referencia de ANAs deben ser expresados en
UI/mL, para este efecto se muestra el siguiente ejemplo:
Titulacin del MR 2 ANAs de 105 UI/mL:
1/40

1/160

1/320

1/640

1/1280

+++

++

--

--

Por lo tanto el cut-off del MR 2 de ANAs es de 1/320 y al multiplicarlo por su

concentracin que es de 105 UI/mL nos da un factor de 0,33 UI/mL.
Titulacin MR 3 o Suero Control a Trazar:
Se determina el cut-off del MR 3 o Suero Control a Trazar y el ttulo respectivo
a este cut-off se multiplica por el factor de 0,33 UI/mL del MR 2. Por ejemplo si
este MR 3 o Suero Control a Trazar tiene un cut-off de 1/640, la operacin
para el calcular el valor final sera:
1/640 = 640 x 0,33 UI/mL = 211,2 UI/mL
Estabilidad, manejo y almacenamiento:
Se garantiza la estabilidad de este material de referencia siempre y cuando el
contenedor original se mantenga perfectamente cerrado y almacenado en un
congelador a una temperatura entre -20 y -80C hasta antes de su uso. El
MRIANA-006/08 no debe ser congelado una vez reconstituido, expuesto a los
rayos del sol o radiacin; no introducir al vial material extrao ni regresar el
remanente de la porcin utilizada.

Instrucciones para el uso correcto del material de referencia:

Reconstituir el vial con 0,5 mL de agua destilada y antes de utilizarlo dejar que
alcance el equilibrio con la temperatura del ambiente (de 20C a 25C) aprox. 1
hora y media. Rodar el vial en posicin vertical por 20 segundos e invertirlo
suavemente 10 veces. Destapar el vial y tomar la alcuota que se necesite para
el anlisis. El material debe ser utilizado inmediatamente despus de ser
reconstituido.
Mtodo de preparacin:
La preparacin del MRIANA-006/08 se realiz en las instalaciones del ISP. Se
prepar un pool de suero humano (con un ttulo de ANAs > a 1/640 y un

Patrn Moteado) al cual se le adicion Phenylmethylsulfonyl fluoride como

inhibidor de serino-proteasas y Metiolato de Sodio como agente antimicrobiano.
Posteriormente el pool fue filtrado para la eliminacin de fibras y/o partculas.
El suero fue envasado manualmente, etiquetado, congelado a -20C y
finalmente liofilizado hasta su utilizacin.
Homogeneidad del material:
El estudio de homogeneidad se llev a cabo al mismo tiempo que se realizaron
las mediciones para la certificacin. Se utiliz un muestreo y se consider el
proceso de llenado de cada vial. Los resultados indicaron que el lote es
homogneo y que no existe diferencia considerando la secuencia de llenado de
los viales.
Tcnicas de medicin utilizadas para la certificacin:
Para la certificacin de este MRIANA-006/08, se utiliz el mtodo de
Inmunofluorescencia Indirecta, trazado a un material de referencia primario de
ANAs, adems se realizaron una serie de pruebas de comparacin
interlaboratorios en 5 laboratorios de referencia nacional.
Valores de informacin:
El material fue probado para el contenido bacteriano y los resultados fueron
negativos.
Estimacin del valor de incertidumbre:
El valor de incertidumbre correspondiente al valor certificado fue estimado
como U= kuc, en donde uc, es la incertidumbre estndar combinada estimada
de acuerdo a la "Guide to Expression of Uncertainty in Measurement7, y k es el
factor de cobertura. La incertidumbre expandida, U, con un factor de cobertura
k=2 define un nivel de confianza de aproximadamente el 95 %.
Divisin y personal participante en la certificacin del material de
referencia:
Los aspectos de soporte tcnico involucrados en la preparacin y certificacin
de este material de referencia fueron coordinados en la Seccin
Inmunodiagnstico del ISP, por personal de todas las Secciones participantes.
En la preparacin y envasado del material participaron 2 personas. Un
profesional y un tcnico.