Tripteina Soya Caldo

Medio adecuado para el desarrollo de microorganismos exigentes.

Fundamento
La triptena y la peptona de soya aportan nutrientes ricos en pptidos, aminocidos libres, bases pricas y pirimdicas,
minerales y vitaminas. La peptona de soya aporta carbohidratos que estimulan el crecimiento de muchos microorganismos.
El cloruro de sodio mantiene el balance osmtico. El fosfato dipotsico otorga capacidad buffer y la glucosa es la fuente de
energa.
Frmula (en gramos por litro)

Instrucciones

Triptena

17.0

Peptona de soya

3.0

Cloruro de sodio

5.0

Fosfato dipotsico

2.5

Glucosa

2.5

Suspender 30 g del polvo por litro de agua destilada.

Mezclar y calentar hasta disolver. Distribuir y
esterilizar en autoclave a 118-121C durante 15
minutos.

pH final: 7.3 0.2

Siembra

Inocular directamente el material en estudio.

Incubacin
Las condiciones de temperatura, tiempo y atmsfera de incubacin, sern acuerdo al material a estudiar.

Resultados
Microorganismos

Crecimiento

S. aureus ATCC 25923

Bueno

S. epidermidis ATCC 14990

Bueno

S. pyogenes ATCC 19615

Bueno

S. pneumoniae ATCC 6305

Bueno

S. pneumoniae ATCC 49619

Bueno

Caractersticas del medio

Medio preparado: mbar claro.

Almacenamiento
Medio deshidratado: a 10-35 C.
Medio preparado: a 2-8 C.
Presentacin
x 100g :Cdigo: B02-103-05

x 500g :Cdigo: B02-103-06

6 x 50 ml: B04-103-84

SIM Medio
Es un medio semislido destinado a verificar la movilidad, produccin de indol y de sulfuro de hidrgeno en un mismo tubo.
Es til para diferenciar miembros de la familia Enterobacteriaceae.

Fundamento
El triptfano es un aminocido constituyente de muchas peptonas, y particularmente de la triptena, que puede ser oxidado
por algunas bacterias para formar indol. En el proceso interviene un conjunto de enzimas llamadas triptofanasa. El indol
producido se combina con el aldehido del reactivo de Kovacs o de Erlich, para originar un compuesto de color rojo. Las
cepas mviles pueden apreciarse en este medio, por la turbidez que producen alrededor de la puncin de siembra, mientras
que aquellas cepas productoras de sulfhdrico se distinguen por la formacin de un precipitado negro de sulfuro de hierro a
partir del tiosulfato siempre que el medio se mantenga a un pH mayor a 7.2.
Frmula (en gramos por litro)

Instrucciones

Triptena

20.0

Peptona

6.1

Sulfato de hierro y amonio

0.2

Tiosulfato de sodio

0.2

Agar

3.5

Suspender 30 g del polvo por litro de agua destilada.

Mezclar hasta disolver; calentar agitando y hervir
durante un minuto. Distribuir unos 4 ml en tubos de
hemlisis y esterilizar en autoclave a 121C durante
15 minutos. Solidificar en posicin vertical.

pH final: 7.3 0.2

Siembra

A partir de un cultivo de 18-24 horas en medio slido, sembrar por puncin profunda con aguja de inoculacin recta (no usar
ansa con anillo). Se debe inocular el centro del tubo, y la puncin debe abarcar 2 tercios de profundidad del medio de cultivo
desde la superficie. Es importante que la siembra se realice en lnea recta.

Incubacin
Durante 24 horas, a 35-37 C, en aerobiosis.
Luego de la incubacin, agregar 3-5 gotas de reactivo de Kovacs o de Erlich.

Resultados
Cepas
Cepas
Cepas
Cepas
Cepas
Cepas

mviles: producen turbidez del medio, que se extiende mas all de la lnea de siembra.
inmviles: el crecimiento se observa solamente en la lnea de siembra.
SH2 positivas: ennegrecimiento a lo largo de la lnea de siembra o en todo el medio.
SH2 negativas: el medio permanece sin cambio de color.
indol positivas: desarrollo de color rojo luego de agregar el reactivo de Kovacs o de Erlich.
indol negativas: sin cambio de color.
Microorganismo

Movilidad

Indol

Produccin de cido
sulfhdrico

E. coli ATCC 25922

K. pneumoniae ATCC 700603

P. mirabilis ATCC 43071

S. typhimurium ATCC 14028

S. enteritidis ATCC 13076

S. flexneri ATCC 12022

Limitaciones
-En las bacterias aerobias estrictas, que slo crecen en superficie, la movilidad puede ser difcil de observar.
-Algunas bacterias productoras de melanina como M. morganii, pueden dar un color parduzco, que no debe confundirse con
el color negro debido a la produccin de cido sulfhdrico.

Caractersticas del medio

Medio preparado: mbar.

Almacenamiento

Medio deshidratado: a 10-35 C.

Medio preparado: a 2-8 C.
Presentacin
x 100g :Cdigo: B02-131-05

x 500g :Cdigo: B02-131-06

TSI Agar
Medio universalmente empleado para la diferenciacin de enterobacterias, en base a la fermentacin de glucosa, lactosa,
sacarosa y a la produccin de cido sulfhdrico.

Fundamento
En el medio de cultivo, el extracto de carne y la pluripeptona, aportan los nutrientes adecuados para el desarrollo
bacteriano. La lactosa, sacarosa y glucosa son los hidratos de carbono fermentables. El tiosulfato de sodio es el sustrato
necesario para la produccin de cido sulfhdrico, el sulfato de hierro y amonio, es la fuente de iones Fe 3+ , los cuales se
combinan con el cido sulfhdrico y producen sulfuro de hierro, de color negro. El rojo de fenol es el indicador de pH, y el
cloruro de sodio mantiene el balance osmtico.
Por fermentacin de azcares, se producen cidos, que se detectan por medio del indicador rojo de fenol,el cual vira al color
amarillo en medio cido. El tiosulfato de sodio se reduce a sulfuro de hidrgeno el que reacciona luego con una sal de hierro
proporcionando el tpico sulfuro de hierro de color negro.
Frmula (en gramos por litro)
Extracto de carne
Pluripeptona
Cloruro de sodio

Instrucciones
3.0
20.0
5.0

Lactosa

10.0

Sacarosa

10.0

Glucosa

1.0

Sulfato de hierro y amonio

0.2

Tiosulfato de sodio

0.2

Rojo de fenol
Agar

Suspender 62,5 g del polvo por litro de agua

destilada. Mezclar bien y calentar con agitacin
frecuente, hervir 1 o 2 minutos hasta disolucin
total. Llenar hasta la tercera parte de los tubos de
ensayo. Esterilizar a 121C por 15 minutos. Enfriar
en pico de flauta profundo.

0.025
13.0
pH final: 7.3 0.2

Siembra

A partir de un cultivo puro, sembrar en TSI, picando el fondo y extendiendo sobre la superficie del medio.

Incubacin
A 35-37C durante 24 horas, en aerobiosis.

Resultados
1-Pico alcalino/fondo cido (pico rojo/fondo amarillo): el microorganismo solamente fermenta la glucosa.
2-Pico cido/fondo cido (pico amarillo/fondo amarillo): el microorganismo fermenta glucosa, lactosa y/o sacarosa.
3-Pico alcalino/fondo alcalino (pico rojo/fondo rojo): el microorganismo es no fermentador de azcares.
4-La presencia de burbujas, o ruptura del medio de cultivo, indica que el microorganismo produce gas.
5-El ennegrecimiento del medio indica que el microorganismo produce cido sulfhdrico.
Microorganismo

Pico/Fondo

Produccin de gas

Produccin decido
sulfhdrico

E. coli ATCC 25922

A/A

K. pneumoniae ATCC 700603

A/A

P. mirabilis ATCC 43071

K/A

S. typhimurium ATCC 14028

K/A

S. enteritidis ATCC 13076

K/A

S. flexneri ATCC 12022

K/A

P. aeruginosa ATCC 27853

K/K

A: cido
K: alcalino

Caractersticas del medio

Medio preparado: rojo

Almacenamiento

Medio deshidratado: a 10-35 C.

Medio preparado: a 2-8 C.
Presentacin
x 100g :Cdigo: B02-134-05

x 500g :Cdigo: B02-134-06

Mac Conkey Agar.

Este medio se utiliza para el aislamiento de bacilos Gram negativos de fcil desarrollo, aerobios y anaerobios facultativos.
Permite diferenciar bacterias que utilizan o no, lactosa en muestras clnicas, de agua y alimentos. Todas las especies de la
familia Enterobacteriaceae desarrollan en el mismo.

Fundamento

En el medio de cultivo, las peptonas, aportan los nutrientes necesarios para el desarrollo bacteriano, la lactosa es el hidrato
de carbono fermentable, y la mezcla de sales biliares y el cristal violeta son los agentes selectivos que inhiben el desarrollo
de gran parte de la flora Gram positiva.
Por fermentacin de la lactosa, disminuye el pH alrededor de la colonia. Esto produce un viraje del color del indicador de pH
(rojo neutro), la absorcin en las colonias, y la precipitacin de las sales biliares.
Los microorganismos no fermentadores de lactosa producen colonias incoloras.
Frmula (en gramos por litro)
Peptona
Pluripeptona
Lactosa

Instrucciones
17.0
3.0
10.0

Mezcla de sales biliares

1.5

Cloruro de sodio

5.0

Agar

13.5

Rojo neutro

0.03

Cristal violeta

Suspender 50 g del polvo por litro de agua destilada.

Reposar 5 minutos y mezclar hasta uniformar.
Calentar suavemente y hervir 1 a 2 minutos hasta
disolver. Esterilizar en autoclave a 121C durante 15
minutos.

0.001
pH final: 7.1 0.2

Siembra

- Sembrar en superficie.
- Utilizando la tcnica de Pour Plate: sembrar 1 ml de muestra y agregar aproximadamente 15 ml de medio de cultivo
fundido y enfriado a 45-50 C.

Incubacin
Durante 18-48 horas, a 35-37 C, en atmsfera aerbica

Resultados

Microorganismos

Colonias

Escherichia coli ATCC 25922

Rojas con halo turbio

Klebsiella pneumoniae ATCC 700603

Rosadas mucosas

Salmonella typhimurium ATCC 14028

Incoloras, transparentes

Shigella flexneri ATCC 12022

Incoloras, transparentes

Proteus mirabilis ATCC 43071

Incoloras, transparentes

Enterococcus faecalis ATCC 29212

Diminutas, incoloras, opacas

Caractersticas del medio

Medio preparado: rojo prpura

Almacenamiento:

Medio deshidratado: a 10-35 C.

Medio preparado: a 2-8 C.

Presentacin
x 100g :Cdigo: B02-114-05

x 500g :Cdigo: B02-114-06

Manitol Salado Agar.

Medio de cultivo selectivo y diferencial, utilizado para el aislamiento y diferenciacin de estafilococos.
Es recomendado para el aislamiento de estafilococos patognicos a partir de muestras clnicas, alimentos, productos
cosmticos y otros materiales de importancia sanitaria.
Tambin, este medio puede utilizarse para el cultivo de especies halfilas de Vibrio, si no se dispone de medios apropiados
(TCBS Medio, Medio Marino, etc.), aunque algunas especies pueden no desarrollar.

Fundamento
Se trata de un medio altamente selectivo debido a su alta concentracin salina. Los estafilococos coagulasa positiva
hidrolizan el manitol acidificando el medio; las colonias aparecen rodeadas de una zona amarilla brillante. Los estafilococos
coagulasa negativos, presentan colonias rodeadas de una zona roja o prpura. Las colonias sospechosas, se repicarn en un
medio sin exceso de cloruro de sodio para efectuarles, posteriormente, la prueba de la coagulasa.
En el medio de cultivo, el extracto de carne y la pluripeptona, constituyen la fuente de carbono, nitrgeno, vitaminas y
minerales, el manitol es el hidrato de carbono fermentable, el cloruro de sodio (que se encuentra en alta concentracin) es
el agente selectivo que inhibe el desarrollo de la flora acompaante, y el rojo fenol es el indicador de pH.
Las bacterias que crecen en un medio con alta concentracin de sal y fermentan el manitol, producen cidos, con lo que se
modifica el pH del medio y vira el indicador de pH del color rojo al amarillo.
Los estafilococos crecen en altas concentraciones de sal, y pueden o no fermentar el manitol.
Los estafilococos coagulasa positiva fermentan el manitol y se visualizan como colonias amarillas rodeadas de una zona del
mismo color.
Los estafilococos que no fermentan el manitol, se visualizan como colonias rojas, rodeadas de una zona del mismo color o
prpura.
Frmula (en gramos por litro)
Extracto de carne

Instrucciones
1.0

Pluripeptona

10.0

d-Manitol

10.0

Cloruro de sodio

75.0

Agar

15.0

Rojo de fenol

Suspender 111 g de polvo por litro de agua destilada.

Reposar 5 minutos y mezclar calentando a ebullicin
durante 1 o 2 minutos. Distribuir y esterilizar en
autoclave a 118-121C durante 15 minutos.

0.025
pH final: 7.4 0.2

Siembra
Sembrar en superficie un inculo denso de la muestra.

Incubacin

De rutina: durante 18-24 horas a 35-37 C, en aerobiosis.

La American Public Health Association (A.P.H.A) recomienda la incubacin durante 3 das a 32 C, en aerobiosis.

Resultados
Microorganismos

Crecimiento

Caractersticas de las colonias

Staphylococcus aureus ATCC 25923

Excelente

Amarilla

Staphylococcus epidermidis ATCC 14990

Bueno

Roja

Escherichia coli ATCC 25922

Inhibido

Inhibido

Klebsiella pneumoniae ATCC 700603

Inhibido

Inhibido

Caractersticas del medio

Medio preparado: rojo

Almacenamiento:
Medio deshidratado: a 10-35 C.
Medio preparado: a 2-8 C.
Presentacin
x 100g :Cdigo: B02-118-05

x 500g :Cdigo: B02-118-06

Tripteina Soya Agar

Medio utilizado para propsitos generales,favorece el desarrollo y aislamiento de una gran variedad de microorganismos
aerobios, y anaerobios facultativos y estrictos.
El agregado de sangre, permite el aislamiento y cultivo de microorganismos aerobios y anaerobios nutricionalmente
exigentes y la observacin de reacciones de hemlisis.
Tambin, este medio de cultivo, puede utilizarse como medio base para preparar el medio agar chocolate.

Fundamento
La triptena y la peptona de soya aportan nutrientes ricos en pptidos, aminocidos libres, bases pricas y pirimdicas,
minerales y vitaminas. La peptona de soya aporta tambin carbohidratos que estimulan el crecimiento de muchos
microorganismos. El cloruro de sodio mantiene el balance osmtico.
Adicionado con 5-10 % sangre , se logra un medio enriquecido y adecuado para observar reacciones de hemlisis.
Cuando se prepara como agar chocolate, es til para el cultivo de Neisseria spp., Haemophilus influenzae y microorganismos
exigentes similares. Incubado en forma anaerobia, permite el crecimiento de Clostridium spp. y anaerobios NO esporulados.
Es un medio adecuado para cultivar y mantener cepas de Aeromonas, y aumentando el porcentaje de cloruro de sodio, para
mantener cepas de algunos Vibrios (excepto V. cholerae).
Frmula (en gramos por litro)
Triptena

15.0

Peptona de soya

5.0

Cloruro de sodio

5.0

Agar

15.0
pH final: 7.3 0.2

Instrucciones
Disolver 40 g de polvo deshidratado por litro de agua destilada. Mezclar y dejar reposar 5 minutos. Calentar suavemente
agitando y hervir durante 1 o 2 minutos hasta su disolucin. Distribuir y esterilizar en autoclave durante 15 minutos a 118121C.
Preparacin de la placa de Agar Sangre: aadir en forma asptica un 5% de sangre estril desfibrinada a temperatura
ambiente, el agar debe estar a 45C.
Preparacin de Agar Chocolate: despus de aadir la sangre y agitando frecuentemente se mantiene el medio de cultivo a
80C por 10 minutos hasta que adquiera un color pardo chocolatado.

Siembra

Por inoculacin directa del material en estudio, sobre la superficie del medio de cultivo.

Incubacin
Las condiciones de temperatura, tiempo y atmsfera de incubacin, sern acuerdo al material a estudiar.

Resultados
Microorganismos

Crecimiento

Hemlisis

E. coli ATCC 25922

Abundante

--

S. aureus ATCC 25923

Abundante

Beta

S. pyogenes ATCC 19615

Abundante

Beta

S. pneumoniae ATCC 6305

Abundante

Alfa

S. pneumoniae ATCC 49619

Abundante

Alfa

Caractersticas del medio

Medio preparado: mbar.

Medio preparado con 5% de sangre: rojo cereza.

Almacenamiento

Medio deshidratado: a 10-35 C.

Medio preparado: a 2-8 C.
Presentacin
x 100g :Cdigo: B02-102-05

x 500g :Cdigo: B02-102-06

6 x 50 ml: B04-102-84