2 Congreso Nacional de Qumica Mdica

Almanza-Prez y col.

MODELO EXPERIMENTAL DE RATONES CON

OBESIDAD, RESISTENCIA A LA INSULINA Y
DIABETES.
1,2

1,2

Almanza Prez Julio , Blancas Flores Gerardo , Vzquez Carrillo Laura , ngeles Meja Selene ,
2
2
1
1
Garca Macedo Rebeca , Cruz Lpez Miguel , Romn Ramos Rubn y Alarcn Aguilar Francisco .
1
Laboratorio de Farmacologa, Departamento de Ciencias de la Salud. Div. De Ciencias Biolgicas
2
y de la Salud. Universidad Autnoma Metropolitana Unidad Iztapalapa. Unidad de Investigacin
Mdica en Bioqumica. Hospital de Especialidades. CMNSXXI. Email: aaasj2@prodigy.net.mx

RESUMEN
La diabetes tipo 2 se puede definir como un grupo de enfermedades metablicas
caracterizado por un estado de hiperglucemia crnico, resistencia a insulina y, en la
mayora de los casos, obesidad, como resultado de la falta en la secrecin y/o accin de
la insulina. Debido a la complejidad del padecimiento, an se requieren nuevos modelos
animales para poder estudiar sus diversos aspectos fisiopatolgicos. En la literatura se
tiene reportado un modelo de ratones con obesidad inducida por la administracin de
glutamato monosdico (ratones ob/GMS). Los ratones ob/GMS desarrollan
complicaciones caractersticas como resultado de la neurointoxicacin inducida. Adems
de obesidad hipofgica, presentan ceguera e hipactividad. La obesidad se caracteriza
por gran contenido de tejido adiposo, entre cuyas funciones principales se encuentran la
regulacin del balance energtico y el metabolismo de lpidos, con la participacin de
adipocitocinas (resistina, leptina, adiponectina y TNF alfa, principalmente). Sin embargo,
an no se ha explorado la utilidad del modelo en la investigacin de los procesos que
llevan al desarrollo de obesidad y diabetes. El objetivo del presente trabajo consisti en
valorar algunos parmetros bioqumicos relacionados con estos padecimientos en ratones
ob/GMS, con la finalidad de validar su utilidad experimental. Despus de la administracin
subcutnea de GMS, se realizaron pruebas de tolerancia a la glucosa oral y se determin:
A1c, triglicridos, colesterol, cido rico, creatitinina, GPT y GOT, peso corporal, consumo
de agua y alimento. Los ratones mostraron incremento gradual en el peso corporal,
deterioro de la tolerancia a la glucosa, tendencia a desarrollar resistencia a la insulina y
poliuria. No se encontraron cambios en los otros parmetros bioqumicos. La glucemia en
ayuno tampoco mostr cambios importantes. Con esto se puede concluir que estos
ratones ob/GMS pueden ser considerados como un modelo til para el estudio de la
obesidad caracterstica de la diabetes tipo 2.
Palabras clave: Glutamato Monosdico, Obesidad, Diabetes.

INTRODUCCIN
La diabetes tipo 2 se puede definir como un grupo de enfermedades metablicas
caracterizado por un estado crnico de hiperglucemia, resistencia a insulina y, en la
mayora de los casos obesidad, como resultado de la falta en la secrecin y/o accin de la
insulina. Debido a la complejidad del padecimiento, an se requieren nuevos modelos
animales para poder estudiar sus diversos aspectos fisiopatolgicos.
Un modelo experimental de obesidad puede inducirse en roedores despus de su
neurointoxicacin neonatal con glutamato monosdico (GMS).
Estos animales

2 Congreso Nacional de Qumica Mdica

Almanza-Prez y col.

desarrollan obesidad severa en la edad adulta debido a que esta sal produce daos
severos en neuronas circuventriculares, como es el caso de la regin arcuato
hipotalmica, reduciendo el nmero de clulas hasta en un 75% y, por tanto,
disminuyendo las concentraciones del neuropptido Y (Elefteriou et al., 2003). El efecto
neurotxico del GMS, el cual culmina con la muerte neuronal, se atribuye al efecto
exitatorio mediado por sus receptores especficos, cuya concentracin incrementada en la
vecindad neuronal crea un estado de continua despolarizacin con un incremento
sostenido de la permeabilidad membranal, un influjo pasivo de agua y un notable aumento
de las concentraciones de Ca+2 intracelular, dando lugar a la exitabilidad y a la muerte
neuronal. Estos hechos afectan funciones homeostticas, tales como la reproduccin y,
principalmente, el peso corporal ya que los animales neurointoxicados con GMS
presentan un aumento en el peso corporal que no puede ser atribuido a la mayor ingesta
de alimento. Al parecer se trata de un desbalance metablico que culmina con obesidad
severa (Campos-Sepulveda et al., 2002).
Aunque en varias investigaciones se ha sugerido un deterioro en la tolerancia a la
glucosa con resistencia a la insulina en los animales obesos por la administracin de GMS
(ob/GMS), en realidad an no se ha explorado de manera conveniente la utilidad del
modelo en estudios de obesidad y diabetes.

OBJETIVO
El objetivo del presente trabajo consisti en valorar algunos parmetros bioqumicos
relacionados con estos padecimientos en ratones ob/GMS, con la finalidad de caracterizar
el trastorno metablico inducido y validar su utilidad experimental.

MATERIAL Y MTODOS
Ratones hembras y machos de la cepa CD-1 con un peso aproximado de 25-35 g,
obtenidos del bioterio de la UAM-I. fueron cruzados a razn de 3 hembras por 1 macho.
Las hembras preadas fueron distribuidas por separado, con alimento y agua ad libitum.
Una vez nacidas las cras, a las de una hembra se les administr solucin salina por va
subcutnea a dosis de 0.01 ml/g (grupo sano) y al resto, GMS a dosis de 2 mg/kg de peso
corporal, al da 2 y 4 postnatal y 4 mg/kg al da 6, 8, y 10 postnatal, por va subcutnea
para inducir obesidad (grupo experimental). Las cras fueron destetadas y sexadas al mes
de edad y se les mantuvo con alimento y agua ad libitum. Durante 18 semanas se
determin su peso corporal, consumo de agua y alimento. Se les realiz una curva de
tolerancia a la glucosa oral (2 g/kg), midiendo las concentraciones de glucosa en sangre
cada 30 minutos por 2 horas (con glucmetros Acutrend Sensor Roche). En la semana
15 se les realiz una segunda curva de tolerancia a la glucosa y al minuto 0, 30 y 150 se
obtuvo una muestra sangunea con la que se determinaron las concentraciones sricas de
insulina por medio de ELISA (Linco Research). As mismo, se les determinaron
parmetros bioqumicos con tiras reactivas de reflotron (Roche). Una semana despus se
sacrificaron y se realiz la diseccin de cada animal y se pesaron los siguientes rganos,
corazn, hgado, riones, pncreas y pulmn.

RESULTADOS
En la Figura 1 se muestran los cambios en el peso corporal a lo largo de 18
semanas. A los 3 meses de edad la diferencia en los pesos es estadsticamente

2 Congreso Nacional de Qumica Mdica

Almanza-Prez y col.

significativa, hasta llegar a formar una meseta que representa cerca del 22% de
incremento en peso con respecto a los animales sanos.
El tipo de obesidad que desarrollan estos animales es de tipo hipofgica, por lo
que se observ a lo largo de 14 semanas que estos animales consuman menor cantidad
de alimento y de agua que los ratones sanos, manteniendo un comportamiento similar
durante su desarrollo (Figura 2).
Los ratones obesos muestran intolerancia a la glucosa despus de la semana 14.
Esta intolerancia se va agravando conforme transcurre el tiempo pues otra prueba de
tolerancia a la glucosa realizada a las 18 semanas se determin que el pico
hiperglucemico es de mucho mayor tamao e intensidad que el que se presenta a las 14
semanas (Figura 3).
As mismo, se obtuvieron muestras de suero a los 0, 30, y 150 minutos despus
de la administracin de glucosa para cuantificar las concentraciones sricas de insulina en
ambos grupos de animales. En la figura 5 se puede observar que los ratones ob/GMS son
hiperinsulinmicos y tal parece que estos animales ya no tienen la capacidad de secretar
ms insulina de la que estn secretando normalmente, pues al recibir la carga de glucosa
no se detectaron cambios significativos en sus concentraciones de insulina.
En cuanto a los parmetros bioqumicos determinados (colesterol, triglicridos,
creatinina, urea, TGO y TGP) no se observaron cambios significativos con respecto a los
animales normales, al igual que en el peso de los diferentes rganos, aunque se observ
que en los animales obesos existe una ligera tendencia a presentar menor peso en sus
rganos, lo cual se correlaciona con una baja en la hormona de crecimiento.
Con esto se puede concluir que estos ratones ob/GMS pueden ser considerados
como un modelo til para el estudio de la obesidad caracterstica de la diabetes tipo 2.
Peso Corporal
70
60

Peso (g)

50

40
30
20

Sano

10

ob/GMS
0
5

10

11

12

13

14

15

16

17

18

19

Edad (sem anas)

Figura 1. Peso corporal, de ratones neurointoxicados con GMS y sanos a lo largo de 18 semanas de edad.
Media + D.E. *Diferencia significativa con respecto al control (p<0.05).
n=18

2 Congreso Nacional de Qumica Mdica

Almanza-Prez y col.

Consumo de alimento
40

*
Peso (g)

35

30

25

SANO

20

ob/GMS
15
0

10

11

12

13

14

Edad (sem ana)

Media + D.E. *Diferencia significativa con respecto al control (p<0.05).

n=18

Consumo de Agua
60

55

Agua (mL)

50
45
40
35
30

SANO

25

ob/GMS

20
0

10

11

12

13

14

Edad (sem anas)

Figura 2. Consumo de alimento y agua de ratones neurointoxicados con GMS y sanos a lo largo de 14
semanas de edad.
Media + D.E. *Diferencia significativa con respecto al control (p<0.05).
n=18

2 Congreso Nacional de Qumica Mdica

Almanza-Prez y col.

Curva de Tolerancia a la Glucosa

Glucosa (mg/dL)

200
Sano

180

ob/GMS

160
140
120

100
80
T0

T30

T60

T90

T120

T150

Tiem po (m in)

Media + D.E. *Diferencia significativa con respecto al control (p<0.05).

n=18

Curva de Tolerancia a la glucosa

250

Sano
ob/GMS

225

Glucosa (mg/dL)

200

175
150
125
100
75
50
25
0
T0

T30

T60

T90

T120

T150

Tiem po (m in)

Figura 3. Curva de tolerancia a la glucosa por va oral en ratones sanos y ob/GMS a las 14 y 18 semanas de
edad.
Media + D.E. *Diferencia significativa con respecto al control (p<0.05).
n=18

2 Congreso Nacional de Qumica Mdica

Almanza-Prez y col.

Curva de Insulina
5

Insulina (ng/ml)

Sano
ob/GMS

*
2.5

0
T0

T30

T150

Tiempo (min)

Figura 4. Curva de insulina en ratones sanos y ob/GMS a las 18 semanas de edad.

REFERENCIAS
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.

Campos-Sepulveda E., Ayala Guerrero F., Rubio Poo C., Roman Ramos R. (2002). Neonatal
monosodium glutamate increases etanol susceptibility effects in adult mice. Proc. West. Pharmacol. Soc.
45; 44-46.
de Carvalho-Papa P, Vargas AM, da Silva JL, Nunes MT, Machado UF. (2002). GLUT4 protein is
differently modulated during development of obesity in monosodium glutamate-treated mice. Life Sci. 6;
1917-28.
de Mello Ma., de Souza CT., Braga LR., dos Santos JW., Ribeiro IA., Gobatto CA. (2001). Glucosa
tolerante and insulin action in monosodium glutamate (MSG) obese exercise-trained rats. Physiol Chem
Phys Med NMR. 33; 63-71.
Dolnikoff M., Martn-Hidlgo A., Machado UF., Lima FB., Herrera E. (2001). Decreased lipolysis and
enhanced glycerol and glucose utilization by adipose tissue prior to development of obesity in
monosodium glutamate (MSG) treated-rats. Internat. J. Obes. 25; 426-433.
Ebihara, K., Ogawa, Y., Masuzaki, H., Shintani, M., Miyanaga, F., Aizawa-Abe, M., Hayashi, T., Hosoda,
K., Inoue, G., Yoshimasa, Y., et al. (2001). Transgenic overexpression of leptin rescues insulin resistance
and diabetes in a mouse model of lipoatrophic diabetes. Diabetes 50; 1440-1448.
Elefteriour F., Takeda S., Liu X., Armstrong D., Karsenty G. (2003). Monosodium glutamate-sensitive
hypothalamic neurons contribute to the control of bone mass. Endocrinol. 144; 3842-3847.
Hirata AE., Andrade IS., Vaskevicius P., Dolnikoff MS. (1997). Monosodium glutamate (MSG)-obese rats
develop glucose intolerance and insulin resistance to peripheral glucose uptake. Braz. J. Med. Biol. Res.
30; 671-4.
Nagata M., Susuki W., Iisuka S., Takeda S., Aburada M. y Miyamoto K. Type 2 diabetes mellitus in obese
mouse model induced by monosodium glutamate. (2006). Exp. Anim. 55(2); 109-115.
Nakayama D., Magami Y., Azuma T., Inokuchi H., Furukawa M., Ohyashiki J., Yoshimoto T., Mizuguchi J.,
Moriyasu F., Kawai K., i Hattori T. (2003). Turnover of Acinar and Islet Cells in the Pancreas of
Monosodium GlutamateTreated Obese Mice. Obes. Res. 11; 87-94.