INTERES MICROBIOLOGICO DEL ESPUTO

La mucosa que reviste el tracto respiratorio segrega, normalmente, un sustancia

mucinosa que contiene algunos leucocitos y clulas de las capas superficiales; cuando
sale al exterior, arrastra partculas extraas que proceden de las vas respiratorias altas y,
en determinadas circunstancias, contiene microorganismos cuya deteccin reviste inters
semiolgico. El esputo esta constituido por las secreciones de las vas respiratorias
inferiores que llegan a la boca mediante la expectoracin.
El estudio microbiolgico del esputo es un tema totalmente sometido a discusin y
revisin, y que muchos autores afirman que no tiene prcticamente valor alguno, mientras
que otros, sobre todo los de la escuela inglesa, mantienen que se puede obtener una
informacin muy til si se toman las medidas adecuadas para su recoleccin. De todas
maneras, el cultivo del esputo es una practica habitual que, si no se efectua con sumo
cuidado y se valora con extremado rigor, puede ser fuente de errores y rara vez ofrece
informacin de inters.
Desde el punto de vista microbiolgico, el esputo puede aportar datos para el diagnostico
de infecciones del tracto respiratorio inferior, tales como neumona, bronquitis crnica y
tuberculosis pulmonar. El esputo, sin embargo, no es valido para el estudio de algunos
procesos respiratiorios especficos: difteria, tosferina, tonsilitis, angina de Plaut Vicent,
gonococia farngea y abscesos pulmonares; tampoco en el esputo se deben investigar
anaerobios, por la posibilidad de encontrarlos como parte de la flora anaerobia comensal
del tracto respiratorio alto
FLORA NORMAL Y PATOLOGICA DEL ESPUTO
Los microorganismos comensales que suelen aparecer en el esputo son los mismos del
tracto respiratorio alto, pues la traquea, bronquios y pulmones son normalmente esteriles.
Esta flora esta constituida principalmente por:

Cocos grampositivos: diversas especies de estreptococos saprofito, Streptococcus

pneumoniae hasta en un 20-40% de la flora, Staphylococcus aureus, estafilococos
coagulasa negativa y micrococos.
Cocos gramnegativos: neisserias saprofitas, Neisseria meningitidis hasta en un 520% de la flora, sobre todo en poca de epidemia, especies de Veillonella.
Bacilos grampositivos: corinebacterias saprofitas, Lactobacillus y Actinomyces.
Bacilos
gramnegativos:
Haemophilus,
enterobacterias,
Bacteroides
y
Fusobacterium.
Levaduras: varias especies del genero Candida, incluida C. albicans.

Los microorganismos que se asocian frecuentemente con neumona son:

Streptococcus pneumoniae, Klebsiella pneumoniae y Staphylococcus aureus, a
consecuencia de su capacidad para resistir la fagocitosis por la produccin de capsula
o la elaboracin de enzimas que destruyen se puede encontrar Haemophilus
influenzae y Moraxella Catarrhalis, aprovechando la alteracin previa de los tejidos.
Estos ltimos se aslan con frecuencia en la exacerbacin de la bronquitis crnica en

adultos, en algunos casos de bronconeumona y como causantes de bronquitis

esptica en nios.
Las neumonas se suelen clasificar desde el punto de vista etiolgico en dos grandes
grupos, que implican distintas actitudes teraputicas: de adquisicin estrahospitalaria,
con una etiologa similar a la que hemos descrito, y de adqusicion nosocomial, donde
predominan los bacilos gramnegativos. En pacientes sometidos a tratamiento
inmunosupresor, esteroidico, o a terapia antimicrobiana intensa y prolongada, el
esputo ofrece una orientacin sobre el asentamiento de flora potencialmente
patgena, con el consiguiente desplazamiento de la flora saprofita normal. En el
esputo de estos pacientes se aslan cultivos puros o predomienantes de diversas
enterobacterias, Pseudomonas aeruginosa, Candida albicans, Acinetobacter y otros
microorganismos oportunistas. En los pacientes hospitalizados sometidos a
respiracin aisistida(ventilacin mecnica) son frecuentes las neumonas por
aspiracin, cuya etiologa es muy variada, incluyendo anaerobios. En el esputo de los
pacientes con fibrosis qustica pancretica ( mucoviscidosis) es muy comn el
aislamiento de Pseudomonas aeruginosa ( colonias mucoides) y Staphylococcus
aureus, como colonizadores respiratorios.
Excepto Mycobacterium tuberculosis, todos los patgenos pulmonares pueden
aislarse del tracto respiratorio alto de individuos sanos, por lo que su presencia en
escasa cantidad en el esputo no es, pues, evidencia suficiente de que estn causando
infeccin. En la mayora de los procesos infecciosos la sospecha de algn patgeno
guarda casi siempre relacin con su abundancia, por lo que, a veces, es interesante
cuantificar la flora por tcnicas especiales de cultivo.
A pesar de todo lo expuesto, la mayora de las infecciones respiratorias estn
causadas por virus ( virus respiratorio sincitial, virus de la influenza) y bacterias
difciles de cultivar, como Legionella pneumophila, Mycoplasma pneumoniae, Coxiella
burnetii, Chlamydia pneumoniae, Chlamydia psittaci; en ocasiones, estn implicados
agentes de diagnostico complicado (Pneumocystis carinii) o raros
(Nocardia
asteroides, Cryptococcus neoformans). En estos casos el cultivo del esputo no aporta
datos para el diagnostico y es mas aconsejable el uso de mtodos inmunolgicos.
RECOLECCION DEL ESPUTO
Existen diversas metodologas para la recogida del esputo, las cuales se emplean
dependiendo de cada situacin clnica. En cualquier caso, una vez obtenida la
muestra, esta debe procesarse lo mas rpidamente posible por el deterioro celular que
conlleva su retraso. Unicamente el examen directo para investigacin de M.
tuberculosis puede dilatarse 24horas si la muestra ha sido refrigerada.

Expectoracion: El esputo expectorado se contamina a menudo en la orofaringe

y es difcil determinar cual de los muchos patgenos potenciales aislados es
responsable de la posible infeccin respiratoria. Por ello, la recogida del esputo

por expectoracin espontanea ha de hacerse cuidadosamente, siguiendo las

recomendaciones que exponemos a continuacin:
Recoger los esputos matinales, en ayunas, pues son los mas concentrados y
representativos.
Enjuagar la boca con agua, previamente a la recogida, para eliminar la flora
acumulada en la cavidad oral. No usar para el enjuague liquidos que
contengan antispticos.
Provocar la expectoracin mediante tos profunda.
Depositar las secreciones expectoradas en un recipiente esteril de boca ancha
y cierre hermtico.
Enviar al laboratorio con rapidez o refrigerar.

En aquellos paciente, mujeres y nios, cuya expectoracin es nula o poco

productiva, puede estimularse esta colocando al paciente en una postura que
facilite el drenaje y golpeando suavemente el torax en la zona que se sospecha la
infeccin. Tambien es til obtener la muestra mediante previa inhalacin de un
aerosol tibio nebulizado que contenga un agente mucolitico (N-acetil-L-cisteina al
20% o el compuesto por glicerol al 1% en solucin salina calentada a 37C) con el
fin de humedecer el aire que llega al tracto respiratorio inferior y aumentar la
capacidad de los cilios para ascender las secreciones deshidratadas y viscosas.
No son validos los vapores de glicol utilizados en la obtencin de muestras para
estudios citolgicos, ya que son bactericidas. La muestra asi obtenida se conoce
como esputo inducido.
En casos especiales, sobre todo en nios pequeos, puede recurrirse a la toma
directa de las secreciones a nivel de la laringe, ayudadose de un esobillon larngeo
especial, o bien practicar un escobillonaje nasofarngeo.
2. Broncoscopia
Consiste en la toma directa por aspiracin a nivel de los bronquios con la ayuda de un
fibrobroncoscopio. El fibroncoscopio es una canula que se introduce por la boca, a
travs de la traquea, hasta los bronquios. La broncoscopia siempre ser efectuada por
un especialista ya que supone una agrasion. Esta operacin tiene menos posibilidades
de contaminar la muestra, pero el aspirado no siempre contiene la flora del tracto
respiratorio inferior, que puede contaminarse por la introduccin del catter de forma
inadecuada. Esta indicada en pacientes inmunodeprimidos y ante sospecha de
nocardiosis, micosis o neumona atpica, asi como para el diagnostico de neumona
por Legionella y Pneumocystis. Para la neumona bacteriana tiene un valor muy
controvertido; pero cuando se acompaa de cultivo cuantitativo adquiere una buena
sensibilidad y especificidad.
El material tomado por broncoscopia se denomina aspirado broncoalveolar (BAS); si
se favorece la formacin de secreciones por la introduccin previa de soluciones, el
material obtenido se denomina lavado broncoalveolar (BAL).

Otra modalidad de broncoscopia utiliza el llamado cepillo telescopado ocluido (CTO),

que efectua un arrastre selectivo de las secreciones bronquiales.
3. Aspiracion o puncion transtraqueal (PTT)
La aspiracin transtraqueal se realiza por puncion con aguja fina (PAF) o introduccin de
un catter a travs de la traquea (PAT); su fin es aspirar secreciones libres de
contaminacin orofaringea, aun que en bronquticos crnicos y pacientes hospitalizados
se pueden arrastrar patgenos que colonizan el rbol bronquial. Este mtodo solamente
se emplea en infecciones graves, cuando la muestra obtenida por otros medios no ofrece
resultados fiables, o cuando se sospecha infeccin por anaerobios; esta contraninidcado
en pacientes con ditesis hemorrgica, tos incontrolable o hipoxemia aguda. El
procedimiento no es totalmente inofensivo, las posibles complicaciones influyen enfisema
subcutneo y mediatinico, hemorragia e infeccin de pared.
4. Aspiracion o puncion transpulmonar
Se utiliza cuando fallan los dems mtodos, en enfermos con fracaso teraputico y
procesos cavitados. La muestra obtenida carece de posible contaminacin con las
secreciones de todo el tracto respiratorio. La tcnica debe realizarse bajo gua radiolgica,
con anestesia local; su principal complicacin es el neumotrax.
En determinados casos, cuando la vida del paciente depende de un diagnostico correcto,
la puncin pulmonar se sustituye por toracotoma a cielo abierto para obtener una biopsia
del parnquima pulmonar.
CARACTERISTICAS MACROSCOPICAS DEL ESPUTO
1. Aspecto
El esputo puede presentar aspecto mucoso o vtreo, casi transparente. Este esputo se
expulsa con dificultad, se adhiere al recipiente donde ha sido recogido y suele contener
escasas clulas y croorganismos, pues corresponde al comienzo de un proceso
inflamatorio limitado a las capas superficiales de la mucosa.
El esputo purulento presenta un aspecto mas o menos fluido y su coloracin es amarilloverdosa. Es rico en clulas, leucocitos y microorganismos, indicativos de la existencia de
un proceso supurado.
El esputo mucopurulento es opaco, amarillento o amarillento-verdoso y mal trabado. Su
maor o menor fluidez o viscosidad depende de las proporciones de pus y moco.
Generalmente ofrece aspecto numular o globuloso, y nada entre la serosidad. Este esputo
es tambin rico en clulas y microorganismos procedentes del periodo final de un proceso
inflamatorio y del vaciamiento de cavidades patolgicas.
El esputo seroso o seroalbuminoso ofrece aspecto de clara de huevo. Se elimina en los
procesos inflamatorios muy agudos y, en grandes cantidades, en el edema del pulmn.

El esputo sanguinolento es muy variado, segn su origen. La sangre procedente de

hemoptisis puede formar estras o estar mas o menos entremezclada.
CARACTERISTICAS MICROSCOPICAS DEL ESPUTO
La observacin microscpica del esputo puede ofrecer una orientacin valiosa y es de
gran inters en la valoracin de la calidad de la muestra.
Mediante tincin de Giemsa o cualquiera de sus varientes, y rutinariamente con la tincin
de Gram, podemos observar: fibras y retculos de moco, cristales, clulas de descamacin
del epitelio de la boca y tracto respiratorio, hemates, leucocitos, bacterias, hongos y
parasitos. El esputo que no presenta contaminacin manifiesta del epitelio bucal puede
contener un aumento de clulas polinuclears en los procesos inflamatorios, o de
eosinofilos en los cuadros alrgicos.
Aparte de los casos aislados en los que se visualizan elementos anormales que ayudan a
establecer el diagnostico, o en el caso particular de Mycobacterium tuberculosis, la
microscopia del esputo es importante para la valoracin clnica de las muestras en base a
su contenido y proporcin de leucocitos y clulas epiteliales. Usando el objetivo de 100x
podemos establecer la siguiente clasificacin:

En los tres ltimos casos, la muestra se considera inadecuada para el cultivo y debe
solicitarse una nueva muestra.
CULTIVO DEL ESPUTO
El cultivo del esputo debe practicarse a partir de las porciones purulentas o mas
sospechosas, despreciado la saliva y el moco, En el caso de esputos demasiado
consistentes es aconsejable una fluidificacin previa, aadiendo N-acetil-cisteina. Una vez
fluidificados, no debe dilatarse el cultivo para impedir el sobrecrecimiento de bacterias no
deseables.
La inoculacin se hace directamente sobre placas de agar sangre, agar chocolate y un
medio para enterobacterias (agar de Mac Conkey); algunos autores aaden una placa de
agar manitol salado. En determinados casos, segn la sospecha clnica, pueden
inocularse medios para Legionella (agar CYE) y para levaduras (agar de Sabouraud),

aunque el esputo no es una muestra idnea para la investigacin de estos patgenos. La

siembra se hace por tcnicas de aislamiento.
Las placas se incuban segn el medio: 24-48 horas en atmosfera de CO2, las que
contienen sangre; 24 horas en atmosfera ambientales las de agar de Sabouraud.
1. Crecimiento en agar sangre
En medio tiene por objeto la valoracin global de la flora y la diferenciacin de los cocos
grampositivos, segn las caractersticas de las colonias y las propiedades hemolticas; la
valoracin de un aislalmiento como patgeno debe hacerse con suma precaucion. Como
norma general, solo debe considerarse el crecimiento en cultivo puro o predominante
( superior a los 2/3 de la flora total) de un patgeno potencial, en estrecha asociacin con
leucocitos polimorfonucleares. En otros casos, se tendr en cuenta la situacin clnica del
paciente o la conveniencia de conocer la flora que coloniza el tracto respiratorio.
Se deben diferenciar las colonias alfahemoliticas, puntiformes o pequeas, secas y
opacas, pertenecientes a especies de estreptococos del grupos viridans, de las colonias
pequeas o medianas, lisas, brillantes, hmedas y con tendencia a la autolisis,
correspondientes a Streptococcus pneumoniae. La prueba de la optoquina nos ayuda a
establecer la diferenciacin. Es muy importante detectar la resistencia a penicilina en S.
pneumoniae por las implicaciones teraputicas comprende el examen microscpico y el
cultivo: las pruebas de hipersensibilidad y la inoculacin a animales, son pruebas
complementarias.
Las muestras para el diagnostico de tuberculosis pulmonar pueden ser variadas:

El esputo se recoge de la manera usual, pero conviene analizar hasta tres

muestras matinales, tomadas en das consecutivos o alternos, con el fin de
aumentar las posibilidades de detectar la emisin de bacilos. Si la observacin
microspica es positiva, el cultivo es opcional para el diagnostico.
En nios o en pacientes cuya expectoracin no es productiva se recurre al lavado
gstrico donde se encuentran los bacilos deglutidos. En estos casos, se procede a
la realizacin del cultivo pues la observacin microscpica puede evidenciar
micobacterias saprofitas (M. gastri) indistinguibles morfolgicamente de M.
tuberculosis. La muestra debe procesarse con rapidez para que los bacilos no
pierdan viabilidad: si no es posible, es conveniente neutralizar la acidez aadiendo
un volumen igual de fosfato trisodico al 10% o 1,5ml de fosfoto disodico por cada
40ml de jugo gstrico.
Si existe derrame pleural se puede efectuar cultivo del mismo tras concentracin,
teniendo en cuenta que esta muestra es muy pobre en bacilos y que al laboratorio
solamente llega una parte de la cantidad extraida. Es necesario procesar al
menos 50ml para que los resultados sean representativos. El cultivo de la biopsia
pleural es mas efectivo.

El hallazgo de bacilos en una muestra de heces sugiere la posibilidad de que

puedan proceder de la deglucin de esputos, aunque el analaisis de esta muestra
es preferible para el diagnostico de tuberculosis intestinal.

El manejo de estas muestras debe hacerse con rigurosas medidas de prevencin

para evitar el contagio. Si es posible, en un reciento cerrado, bajo compana o cabina
de seguridad y con mascarilla.

1. Examen microscpico
El examen microscpico no permite ms que la apreciacin de bacilos, su cantidad y, en
ningn caso, su identificacin a nivel de especie. La negatividad de un examen no excluye
la existencia de la enfermedad.
El examen microscpico se efecta tras tincin de Ziehl-Neelsen, a partir de las porciones
ms purulentas del esputo y del concentrado del lquido pleural. La bsqueda de bacilos
debe ser exhaustiva a lo largo de toda la extensin del frotis, e incluso conviene examinar
dos frotis de la muestra. El resultado suele expresarse de forma cuantitativa,
contabilizando el nmero de bacilos por lnea del frotis si estos son abundantes (por
ejemplo, 32 BAAR/1L =32bacilos de media en cada lnea), otras veces, se informa el
nmero de bacilos por campo o nmero de campos (por ejemplo, 3BAAR/campo, 3
BAAR/100 campos), o simplemente como abundantes o escasos BAAR; est extendido
reflejar el resultado negativo como: no se observan BAAR.
Cuando el nmero de muestras a examinar es elevado resulta ms rentable realizar una
tincin de fluorescencia con auramina O. La tincin fluorescente tiene la ventaja de una
mayor rapidez y sensibilidad pero requiere microscopio especial y cierta experiencia del
analista. Se busca la fluorescencia llamada secundaria, producida por un reactivo
fluorocromo que impregna las micobacterias. En caso de positividad, puede aplicarse una
tincin de cido-alcohol resistencia sobre el mismo frotis sometido a tincin de
fluorescencia.
GARCIA MARTOS y colaboradores, Microbiologa Clnica y prctica, 5ta Edicin,
Editorial Daz de Santos S.A., Espaa, 2010. Pg. 165-170
ESPUTO
Es el exceso de secreciones traqueobronquiales. Una persona adulta, en condiciones
normales produce en promedio 100ml de secreciones, que pueden ser deglutidas o
expectoradas. El esputo puede estar compuesto de saliva, moco o pus y contener
microorganismos, sangre o partculas inhaladas. Al examinar el esputo debe tener en
cuenta el color, consistencia, la cantidad y la fuente (via area superior o via area
inferior). En algunas personas con absceso pulmonar, el olor del esputo es ftido.

En pacientes con sospecha de tuberculosis y en aquellos en los cuales se quiere aclarar

el microorganismo que est produciendo la infeccin, es necesario analizar la muestra de
esputo; esta se toma preferiblemente en las horas de la maana. El usuario debe lavarse
la boca y despus de toser se recoge la expectoracin en un recipiente esterilizado
(frasco) que, luego, es enviado a bacteriologa para su anlisis respectivo.

LESMES, DAZA; Evaluacin Clnico-funcional del Movimiento Corporal Humano,

Editorial Medica Panamericana, Colombia Bogot 2009, pg. 79-80.
COLOR ESPUTO
En condiciones patolgicas el esputo puede ser:
Amarillo: Nos indica que contiene una gran cantidad de clulas epiteliales y con
frecuencia pus. Se observa en las bronquitis crnicas y en el fumador.
Marron: El esputo herrumbroso se debe a la hemoglobina descompuesta. Se
observa en la neumona producida por el neumococo o en la gangrena pulmonar
(o gaseosa).

 Rosado: Aparece en el edema agudo de pulmn, en un constipado comn (debido

a un golpe de tos fuerte se produce la rotura de algn vaso o capilar sanguineo).
Rojo Brillante: Se denomina tambin hemoptisis; se detecta en hemorragia
reciente, secundaria a diversas enfermedades como la tuberculosis o el cncer de
pulmn. Siempre que en un paciente aparezca este tipo de esputo es necesario
averiguar la causa.
Gris negruzco: Aparece en cualquier tipo de neumoconiosis (silicosis, siderosis,
etc.)
OLOR
Generalmente en los esputos normales y patolgicos no se detecta ningn olor; pero si se
ha producido una descomposicin bacteriana tanto dentro del cuerpo como despus de la
expectoracin pueden presentar diferentes olores. La gangrena pulmonar y los abscesos
pulmonares pueden presentar un olor putrefacto.
MASAS GASEOSAS
Estan constituidas por fragmentos de tejido pulmonar necrtico, observado principalmente
en enfermedades como el cncer de pulmn, la gangrena pulmonar y, aveces, en la
tuberculosis.
BRONCOLITOS
Generalmente se forman por calcificacin del tejido infectado o necrtico en el interior de
un bronquio. Son mas frecuentes en el cncer de pulmn y en la tuberculosis.
CUERPOS EXTRANOS
En algunos casos se pueden expulsar cuerpos extraos durante un ataque violentos de
tos. En los nios puede ser cualquier objeto (botones, frutos secos) que se hayan
llevado a la boca o inhalado. En adultos los cuerpos extraos mas frecuentes son
partculas de alimentos y contenido gstrico aspirados durante convulsiones o anestesia
quirrgica.
ESPUTO
Cualquier alteracin en aparato respiratorio puede dar lugar a un aumento de estas
secreciones (traqueo-bronquiales), que se eliminan al exterior (fuera de las vas areas
inferiores) mediante un golpe de tos o con la expectoracin; a estas secreciones se les
denomina esputos.
COMPOSICION QUIMICA
La composicin qumica del esputo muestra que esta formado aproximadamente de un
95% de agua y un 5% de solidos. Los solidos son principalmente hidratos de carbono,
protenas, lpidos y ADN.
ANALISIS MICROSCOPICO

Los anlisis microscpicos mas frecuentes que se realizan en el esputo son: anlisis
citolgico y microbiolgico.
Preparacion de la muestra para el anlisis citolgico y microscopia directa del anlisis
microbiolgico.

Para el examen en fresco:

Poner la muestra (pequea cantidad de esputo) en el centro de un
portaobjeto con un asa de platino o siembra.
El porta debe estar limpio y seco.
Anadir una gota de acido actico diluido.
Poner suavemente sobre el porta un cubreobjeto, procurando evitar
las burbujas de aire. En algunos casos, las muestras se pueden
colorear con azul de metileno, aadiendo una gota del mismo antes
de colocar el cubre.
Para el examen con tincin:
Diluir la muestra (esputo) si es muy espesa con una gota de agua
destilada estril, colocada en el porta.
Llevar la muestra con el asa de platino extendindolo sobre la
superficie del porta, consiguiendo una capa fina (frotis por
estiramiento).
Dejar secar a temperatura ambiente o con la estufa a 37oC.
Fijar con calor en el mechero Bunsen (lmpara de alcohol).
Colorear o teir con el reactivo ms adecuado.

ANALISIS CITOLOGICO
La muestra debe ser reciente para evitar la citolisis; a ser posible la obtencin de la misma
debe hacerse mediante broncoscopia, en especial para la determinacin de clulas
neoplsicas. Las clulas qu se analizan son;
Clulas neoplsicas:
Para la determinacin de tumores. El hallazgo de estas clulas es positivo en el
75% de los casos y permiten un diagnostico precoz del cncer. Tenir la muestra
con el mtodo de Papanicolau.
Un aumento de clulas epiteliales nos indica infecciones del aparato respiratorio.
Tenir la muestra con Panoptico rpido o Papanicolau.
Clulas hemticas:
La determinacin de eritrocitos tiene importancia en las hemoptisis; la de
leucocitos en todas las enfermedades infecciosas y la de eosinofilos en el asma
bronquial (alergias).
Como mtodo de tincin se utilizan: el mtodo Panoptico, Giemsa, etc.
ANALISIS MICROBIOLOGICO
Microscopia directa

Para la determinacin de neumococos, estreptococos y estafilococos, tenir la muestra con

la tincin diferencial de Gram. Su determinacin tiene importancia para hallar el
microorganismo patgeno especifico causante de las infecciones del aparato respiratorio,
en especial de la neumona.
El bacilo de Koch (BK) tiene importancia para el diagnostico de la tuberculosis pulmonar;
el BK presente en el esputo indica tuberculosis abierta. La tincin utilizada es la de Ziehl
de hongos; tiene importancia para determinar la micosis pulmonares. Se puede analizar
con tincin Gram o preparar la muestra en fresco. Es necesario que el paciente, adems
de cepillarse los dientes y enjuagarse la boca, realice gargarismos con lugol
(antimicotico), para evitar la contaminacin con los hongos de la boca.
Para la determinacin del equinococo causante del quiste hidatdico, se hace un examen
en fresco. La presencia de los mismos en la muestra es un valor importante para el
diagnostico.
CULTIVO
El mas usual es el de Lowenstein para determinar el BK
PREPARACION DE LA MUESTRA
Homogeneizar: Es necario homogeneizar el esputo antes de la siembra. Existen
diferentes tcnicas. Una de las mas utilizadas es la fluidificacin del esputo con
Fluimicil (expectorante) u otro mucolitico, agitacin y centrifugacin de la muestra
a poca velocidad y poco tiempo.
Descontaminar: Es necesario mezclar igual volumen de reactivo de
descontaminacin (contiene citrato sdico al 2,94% e hidrxido sdico al 4%) que
esputo (a partes iguales). Agitar durante 20 segundos en Mixer y centrifugar 15
minutos a 4000rpm (las revoluciones pueden variar en funcin del radio de la
centrifuga).
Sembrar: dos tubos Lowenstein con tres gotas de la muestra (se puede recoger en
una jeringa). Tambien se siembra en agar sangre y agar chocolate. De la muestra
homogeneizada se puede utilizar para hacer un examen en fresco y tincin para la
microscopia directa del BK.
Incubar: Se incuba durante 8 semanas a 37oC.
SILVA MARIA DEL CARMEN Y COLABORADORES, Tcnicos Especialistas de
Laboratorio del Servicio Vasco de Salud Osakidetza, Editorial MAD, Espaa 2008
pg. 450-452
ESPUTO
Las normas de recogida se detallan en el apartado siguiente de estudio de micobacterias.
Es preferible realizar la toma antes de instaurar tratamiento antibotico. No es til para
estudio de anaerobios. La expectoracin debe rechazarse hasta obtener un esputo de

calidad suficiente. En nios pequenos o pacientes que no expectoran o tragan sus

esputos, puede realizarse una asipiracion gatrica tras un periodo de ayuno de ocho horas.
Esputo inducido: De no producirse la expectoracin espontanea puede inducirse el esputo
con nebulizaciones de suero fisiolgico esteril (15ml durante 10 minutos). El esputo que
se recoja debe enviarse rpidamente al laboratorio antes de dos horas. Si no es posible,
conservar en frigorfico a 4 C.
Es la muestra mas numerosa y epidemiolgicamente mas importante que se remite para
estudio de micobacterias.
TOMA DE LA MUESTRA
Obtener esputo tras expectoracin profunda, preferentemente matinal, y despus
de haberse enjuagado la boca con agua. No cepillar los dientes.
Se recoger en envase esteril de boca ancha.
Se realizaran tres tomas, recogidas en das consecutivos (cada dia una), y se
enviaran inmediatamente al laboratorio para su procesamiento si el paciente esta
ingresado, si es ambulante guardara las dos primeras tomas en nevera a 4oC, no
congelador, y al tercer dia las traer todas juntas.
A la recepcin de la muestra debemos:
o
o

Verificar la existencia de muestra en el frasco.

Que no sea saliva pues disminuye la calidad y rentabilidad de la muestra.

La buena calidad de las muestras de esputo depende de una cuidadosa

instruccin del paciente, para que proporcionen un espcimen despus de una
expectoracin profunda.
En esta muestra se pueden encontrar fases larvarias de Ascaris, ancilostomas y
Strongiloides o huevos de Paragonimus Westermani. La sensibilidad para detectar
Pneumocystis carinii es baja y es preferible recurrir a la broncoscopia. El
diagnostico se realiza mediante la observacin del fresco o con la ayuda de
tinciones permanentes (Giemsa o metenamina de plata).
MUESTRA RESPIRATORIAS
Puncin de senos, aspirado transtraqueal, puncin pulmonar directa.
Cultivo: Agar sangre, Agar chocolate para la deteccin de Neumococo,
Haemophilus spp y hongos; el resto de bacterias que forman parte de la flora
normal del tracto respiratorio superior y de la boca.
ESPINA FERNANDEZ Y COLABORADORES, Gestin de la calidad en el
Laboratorio Clnico, Editorial Panamericana, Buenos Aires 2008, pg. 452453.
ESPUTO

PROCEDIMIENTO DE OBTENCION
EXPECTORACION ESPONTANEA:
1. Indicar al paciente que se ponga de pie.
2. Solicitar que haga un movimiento inspiratorio profundo, llenando de aire los
pulmones.
3. Indicar al paciente que vacie los pulmones con una sola espiracin, tosiendo al
mismo tiempo tan fuerte y profundamente como pueda.
4. Solicitar que escupa en el interior del recipiente rotulado.
5. Tapar el recipiente y en una bolsa plstica llevarla al laboratorio
inmediatamente.
EXPECTORACION INDUCIDA
Cuando el paciente no logra expectorar y es necesario el examen de esputo, se puede
inducir la obtencin de la muestra de la siguiente manera:
1. Acostar al paciente boca abajo sobre una camilla o cama, haciendo que su
cabeza rebase el borde.
2. Colocar una almohada doblada doblada debajo del torax para lograr un plano
inclinado, de modo que la base del torax quede mas alto que la boca,
asimismo pedir que deje caer ambos brazos y la cabeza hacia el piso.
3. Indicar al paciente que inspire, retenga el aire y luego lo expulse con fuerza
hasta obtener la expectoracin.
4. Espcupira en el recipiente rotulado que deber estar sobre un papel peridico
en el piso.
REFERENCIA BIBLIOGRAFICA
http://bvs.minsa.gob.pe/local/PSNB/704_MS-PSNB459-2.pdf
Hernndez, R., Fernndez, C. y Baptista, P, Metodologa de la Investigacin. Editorial
McGraw-Hill Interamericana, Mxico, 2006