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ROGER STRAPAZZON

CARACTERIZAO GENTICA DO CARO Varroa destructor EM


COLNIAS DE ABELHAS Apis mellifera (AFRICANIZADA) NO ESTADO DE
SANTA CATARINA

Monografia apresentada Universidade


Regional de Blumenau como parte das
exigncias do Curso de Cincias
Biolgicas, para a obteno do grau de
Bacharel.

Orientador
Prof. Dr. Geraldo Moretto

BLUMENAU
SANTA CATARINA BRASIL
2008

ROGER STRAPAZZON

CARACTERIZAO GENTICA DO CARO Varroa destructor EM


COLNIAS DE ABELHAS Apis mellifera (AFRICANIZADA) NO ESTADO DE
SANTA CATARINA

Monografia apresentada Universidade


Regional de Blumenau como parte das
exigncias do Curso de Cincias
Biolgicas, para a obteno do grau de
Bacharel.

APROVADA em 26/02/2008
Prof. Ms. Andr Paulo Nascimento
Prof. Dr. Sidney Luiz Sturmer

Prof. Dr. Geraldo Moretto


FURB
(Orientador)

BLUMENAU
SANTA CATARINA BRASIL

AGRADECIMENTOS

A Deus, pelo dom da vida.


minha famlia: minha me, meu pai e minhas irms. Que durante esses anos
foram alicerces, lutando e vencendo batalhas.
A todos os mestres, que durantes estes anos souberam despertar o anseio pelo
conhecimento, em especial os professores Alexandre, Rosete, Herclio, David, Daniela,
Cludio, Juarez, Rudi, Berteli, Vnia, Andr, Zelo, Zelinda...
Aos meus colegas de turma, que tornaram os momentos de estudos muito mais
agradveis.
Aos amigos de turma: Rbia, Rejane, Valle, Fernanda, Mi, Glauco, Fabi,
Carlinha, Andressa, Eder, Fernanda, Josias e Helo. Obrigado pelas risadas, pela
sabedoria e exemplo.
As vrias geraes de companheiros de laboratrios, que foram muito alm de
meros colegas de trabalhos, sendo co-responsveis por esse trabalho: Alisson, Arno,
Bruno, Carol (Xu), Chico, Diego, Elen, Fabi, Grazi, Gustavo, Marcelo, Mariah, Mary
Susan, Morgana, Rogelio, Sabri, Tati e Testoni. Muito obrigado pela amizade, pelos
ensinamentos, dicas e ajuda na rotina diria do laboratrio.
Aos meus amigos de laboratrio: Sabrina, pela pacincia, serenidade e
cumplicidade nos trabalhos, pelos inmeros PCR e gels de poliacrilamida errados, que
nunca foram motivos para desnimo; Diego, exemplo na organizao e percia,
companhia em centenas de extraes, acompanhadas de saudosas conversas; Chico,
parceiro-irmo para todas as horas, seja final de semana ou feriado, fiel companhia de
apirio e bancada, na caminhada FURB ou no papo furado. Obrigado pelos
memorveis momentos, desde j muitas saudades.
As amizades que surgiram nos corredores, onde nasceu grande admirao e
carinho: Fernanda Andrade, Fran Durda, Cris, Gasper, Lpis Creme, Bruna, Dai, Rafael,
e tantas outras.
Ao Celso, tcnico do laboratrio de Bioqumica, que sempre nos socorreu,
sobretudo naquilo que se referia a qumica das coisas.
Aos laboratrios vizinhos, que sempre estiveram de portas abertas, fornecendo
condies para que o nosso trabalho pudesse ser realizado, em especial: Biotecnologia,
Imunologia, Parasitologia, Botnica e Bioqumica.
Aos vrios apicultores, que forneceram material biolgico, essencial para a
execuo deste trabalho. Em especial ao professor David De Jong, que por intermdio
do Jos Carlos V. Guerra Jr., forneceu amostras de Fernando de Noronha (PE).
As diversas pessoas que passaram pela minha vida nestes ltimos anos, sejam
voluntrios, funcionrios e outros coadjuvantes, que diretamente ou indiretamente
contriburam minha formao.
Ao Prof. Geraldo Moretto, que no foi apenas um exemplo de profissional, mas
um grande exemplo de pessoa. Professor dotado de com inmeras qualidades, entretanto
com uma sbia simplicidade. Obrigado pela confiana, pelos inmeros conselhos,
conversas e exemplos de vida.
FURB, CCEN e DCN, que permitiram e deram suporte a este trabalho.
Ao Governo do Estado de Santa Catarina, que concedeu bolsas de Iniciao
Cientfica atravs do Programa Pipe/Art. 170.

SUMRIO
Resumo .............................................................................................................................2
1. Introduo.....................................................................................................................3
2. Material e mtodos .......................................................................................................6
2.1. Coleta do caro Varroa destructor ............................................................................6
2.2. Extrao do DNA ......................................................................................................7
2.3. Amplificao do DNA (PCR) ...................................................................................7
2.3.1. Determinao dos hapltipos .................................................................................7
2.3.2. Determinao dos microssatlites ..........................................................................8
3. Resultados.....................................................................................................................9
4. Discusso ....................................................................................................................10
5. Agradecimentos ..........................................................................................................13
6. Referncias .................................................................................................................14
Anexos ............................................................................................................................19

Roger Strapazzon
Rua Antnio da Veiga, 140 - Victor Konder
89012-900 - Blumenau SC
roger_bio@yahoo.com.br

Caracterizao Gentica do caro Varroa destructor Anderson & Trueman (Acari:


Varroidae) em Colnias de Abelhas Apis mellifera Linnaeus (Hymenoptera, Apidae)
no Estado de Santa Catarina

Roger Strapazzon e Geraldo Moretto


Depto.Cincias Naturais, Univ. Regional de Blumenau, 89010-971, Blumenau, SC
genetica@furb.br

RESUMO - O caro Varroa destructor um ectoparasita de abelhas que atualmente atinge,


sobretudo as colnias de abelhas Apis mellifera sendo uma das principais pragas causadoras
de prejuzos apicultura comercial mundial. Entretanto, no Brasil, a varroatose no tem
sido diagnosticada como sria ameaa as populaes de abelhas. Entre alguns fatores, temse destacado o biotipo Japons de Varroa que colonizou a partir de 1971 as colnias de
abelhas do Brasil. Entre os diferentes biotipos do caro, observa-se diferenas
comportamentais, o qual caracterizado por maior virulncia do hapltipo Coreano (K) em
relao o Japons (J). Os resultados obtidos atravs de RFLP permitiram identificar apenas
indivduos Coreanos no estado de Santa Catarina. J dados obtidos atravs de marcadores
microssatlites, apenas 2,77% dos indivduos coletados em Santa Catarina possuam alelos
especficos para o gentipo Japons. A baixa freqncia de indivduos com material
gentico Japons, provavelmente est relacionada ao menor sucesso reprodutivo que este
caro possui em relao ao tipo Coreano. Entretanto, apesar desta possvel mudana no
hapltipo/gentipo, o ndice de infestao do caro em abelhas adultas tem se mantido
estvel. Isso demonstra que outros fatores, como o comportamento higinico e de
grooming, so eficientes nas abelhas africanizadas e mantm o equilbrio entre parasitahospedeiro.
PALAVRAS-CHAVES - varroosis, abelha africanizada, hapltipo, microssatlites,
mtDNA

1. Introduo

O caro Varroa jacobsoni um ectoparasita natural da abelha asitica Apis cerana


(Oudemans, 1904 apud Solignac et al. 2003). Nesta abelha observa-se um equilbrio
populacional entre parasita/hospedeir o qual est relacionado ao longo tempo de
coexistncia entre as duas espcies, que permitiu o desenvolvimento de mecanismos de
defesa por parte das abelhas (Peng et al. 1987).
Entretanto, em virtude da alta adaptao da abelha Apis mellifera e o indiscriminado
movimento internacional de rainhas e colnias de abelhas, principalmente devido a
polinizao dirigida, ocorreu de forma rpida a disseminao da Varroa pelo planeta,
transformando-se em um dos principais problemas na apicultura mundial (Botta et al.
2004). Alm dos altos ndices de infestaes, a Varroa tornou-se um vetor para diversas
doenas infecciosas, como o vrus de paralisia aguda de abelhas (ABPV), o vrus de abelhas
Kashmir (KBV) e o vrus que deforma a asa (DWV) (Bakonyi et al. 2002, Chen et al. 2004,
Tentcheva et al. 2006). O caro chegou ao Brasil provavelmente em 1971, quando o
Paraguai importou abelhas e rainhas do Japo (Stort et al. 1981). Desde a dcada 70,
quando iniciaram os monitoramentos para varroatose, os nveis de infestao no Brasil se
demonstraram estveis (3 varroas por 100 abelhas) (Moretto & Mello Jr. 2001)
Durante vrias dcadas o caro V. jacobsoni foi considerado uma nica espcie. No
entanto, com o avano das tcnicas moleculares, Anderson & Trueman (2000) revelaram
atravs de estudos baseados no DNA mitocondrial a existncia de duas espcies: o V.
jacobsoni sensu stricto, encontrado na Indonsia e Malsia, e o V. destructor, facilmente
encontrado na parte continental da sia e, atualmente, disperso pelo mundo inteiro.

O combate varroatose tem sido diferente em vrias regies do mundo, variando


conforme os seus nveis de infestaes. A utilizao de produtos qumicos como:
fluvalinato, flumethrina e o cido frmico, tem sido comum em pases onde os danos so
mais severos (Manrique 2001). Entretanto, no foi comprovada total eficcia destes
produtos que, alm de poderem prejudicar a qualidade do mel e outros produtos das
abelhas (deixam resduos qumicos, que leva uma rejeio destes produtos contaminados
no mercado internacional), tornam a prtica apcola muito dispendiosa (pelos altos custos
destes produtos). Muitos pesquisadores, no entanto, constataram que o uso prolongado de
acaricidas nas colnias de abelhas provoca riscos substanciais, pelo desenvolvimento
eventual de resistncia dos caros aos produtos qumicos utilizados (Milani 1999).
No Brasil, devido o baixo nvel de infestao alcanado por este parasita, no
necessrio qualquer tratamento base de produtos qumicos. Vrios fatores foram
interpretados como relevantes na dinmica populacional do caro V. destructor. O clima e
a raa das abelhas influenciam sensivelmente o nvel de infestao alcanado pelo caro
(De Jong 1984, Moretto et al. 1991). Em condies de clima temperado (inverno mais
rigoroso) ocorrem taxas de infestao altas, o que requer um combate qumico constante,
entretanto, em condies de clima tropical (inverno mais ameno), como o caso do Brasil,
os nveis de infestao alcanados por este parasita junto s abelhas africanizadas so
baixos, sem causar srios prejuzos apicultura (Gonalves 1987, Moretto et al. 1991,
Silva et al. 1992, Moretto & Mello, 2000).
Diversos fatores foram relacionados aos diferentes nveis de infestao na abelha A.
mellifera. Segundo Moretto et al. (1991) a ocorrncia de mecanismos de defesa, como o
grooming e o comportamento higinico, exibidos pelas abelhas africanizadas seriam uma
das causas dos baixos nveis que a praga alcana nessas abelhas. Vrios pesquisadores
4

sustentam a hiptese de que a variao da capacidade reprodutiva das fmeas do caro V.


destructor junto crias de operrias de diferentes raas de abelhas A. mellifera, seja o
principal fator da diferena nos nveis de infestao. Em crias de operrias de abelhas
africanas e seus hbridos, o sucesso reprodutivo da varroa seria menor do que em crias de
operrias de abelhas europias - isso justificaria o baixo nvel de infestao alcanado pelo
caro V. destructor nas abelhas africanizadas no Brasil e outros pases (Medina & Martin
1999; Rosenkranz 1999; Martin & Kryger 2002; Calderon et al. 2003; Martin & Medina
2004).
Estudos da variabilidade do DNA do caro V. destructor revelaram a existncia de
diferentes haplotpos e gentipos da praga relacionados a sua virulncia (Kraus & Hunt
1995; Anderson & Fuchs 1998; Guzman & Rinderer 1999; Solignac et al. 2003, Warrit et
al. 2004; Solignac et al. 2005). Anderson & Treuman (2000) baseados na variabilidade no
gene COI do DNA mitocondrial (DNAmt) identificaram a existncia dos hapltipos J
(Japons) e K (Coreano), nomeados dos pases asiticos onde foram primeiramente
detectados em seu hospedeiro nativo, a A. cerana. Segundo esses autores, os dois
hapltipos estariam dispersos em diferentes regies do planeta - lugares onde a praga
alcana elevados nveis de infestao como o caso da Europa, haveria predominncia do
hapltipo K, enquanto em outras partes onde o varroa encontrado com baixos nveis de
infestao, como acontece no Brasil, predominaria o hapltipo J.
A anlise do genoma nuclear atravs da utilizao de microssatlites tem sido
utilizado tambm na caracterizao das populaes de varroa. Os microssatlites, tambm
conhecidos como SSR (Simple Sequence Repeats - Seqncias simples repetidas)
correspondem a seqncias de DNA com poucos pares de bases de comprimento (2-6),
repetidas in tandem, tais como (AT)n, (ATT), etc. A variao no nmero (n) desses
5

elementos repetidos pode gerar grande quantidade de polimorfismos (Ferreira &


Grattapaglia, 1998). Embora Solignac et al. (2005) tenham verificado baixa variabilidade
nos 20 loci de microssatlites analisados em V. destructor, foram identificados alelos
especficos para cada tipo de varroa o J e o K.
Apesar dos baixos nveis de infestao do caro em colmias de abelhas
africanizadas no Brasil serem atribudos, entre outros fatores, ao hapltipo Japons de
varroa que aqui colonizou (Anderson e Treuman, 2000). Carneiro et al. (2007) verificaram
que a taxa de reproduo do caro V. destructor em clulas de operrias tem sido
atualmente de 1,37 deutoninfas por adultas. Isso representa quase o dobro quando
comparado com a taxa de reproduo de vinte anos atrs. Este aumento significativo no
nmero de descendentes por adulto da varroatose pode estar associado substituio do
hapltipo Japons pelo Coreano - que de fato caracterizado por uma maior capacidade
reprodutiva (Delphinado-Baker, 1988). Portanto, o presente trabalho procurou determinar a
ocorrncia do tipo de varroa (Japons ou Coreano) que parasita os apirios de Santa
Catarina e relacionar com a atual situao patolgica em que se encontra no estado.

2. Material e mtodos

2.1 Coleta do caro Varroa destructor


Para caracterizao gentica dos genomas nuclear e mitocondrial, amostras de
fmeas adultas de V. destructor foram coletadas de apirios da regio de Blumenau,
Joinville, So Joaquim, Mafra, Caador, no estado de Santa Catarina, e Fernando de
Noronha, em Pernambuco. As amostras eram constitudas de 30 caros para cada apirio,

coletadas em crias de operrias e/ou crias de zanges e/ou em operrias e zanges adultos.
Os caros foram acondicionados em etanol 70% no momento da coleta e posteriormente
armazenados a -20o C.

2.2 Extrao do DNA


O DNA total foi extrado individualmente para cada fmea de V. destructor
utilizando o mtodo rpido adaptado de Anderson & Fuchs (1998). Aps ser lavado em
etanol 70%, cada caro foi colocado em um vidro relgio e com auxlio de uma lupa de
dissecao, foi dilacerado. Este foi transferido para um tubo de microcentrfuga contendo
40 l de tampo de lise 2x (120 g /ml de Proteinase K, 0,1M KCl, 0,02 M Tris-HCl pH
8,3, 5mM MgCl2, 0,9% Tween 20, 0,9% NP40 e 0,02% de gelatina) e incubado
primeiramente a 65 C por 30 minutos, depois entre 95-100 C por 10 minutos e finalmente
realizou-se uma diluio com 20 l de dH2O. O DNA extrado foi estocado 20C.

2.3 Amplificao do DNA (PCR)


2.3.1 Determinao dos hapltipos
Para a amplificao, via PCR, da regio gnica Citocromo C Oxidase I (COI) do
genoma mitocondrial do caro V. destructor foi utilizado os primers COXF
[5GG(A/G)GG(A/T)GA(C/T)CC(A/T)ATT(C/T)T(A/T)TATCAAC3]

COXRa

[5GG(A/T)GACCTGT(A/TA(A/T)AATAGCAAATAC 3] descritos por Anderson &


Fuchs (1998). As reaes de PCR foram processadas utilizando 2-10 l da extrao de
DNA obtida pelo mtodo descrito no item anterior: 12,2l de gua destilada e deionizada;
1,8l de tampo de PCR; 1,8l de dNTPs 2 mM; 0,55 de MgCl2 50 mM; 0,55 l de cada

primer 20 mM e 2,5 U de Taq DNA Polimerase. As condies de amplificao utilizadas


foram: desnaturao inicial por 5 minutos a 94o C, seguida por 35 ciclos de: desnaturao a
94o C por 1 minutos, anelamento a 42 C por 1 minutos e 20 segundos e uma elongao a
64o por 2 minutos. Um passo extra de extenso a 64o C por 10 minutos foi realizado. Os
produtos amplificados foram analisados atravs de eletroforese em gel de agarose 0,8%,
corado com brometo de etdeo e visualizados atravs de luz ultravioleta (UV). A
identificao dos hapltipos, J (Japons) e K (Coreano), do caro V. destructor, foi
realizada atravs dos produtos de digesto com as enzimas de restrio Xho I e Sac I, como
descrito por Anderson & Fuchs (1998). Ambos os hapltipos possuem o stio de clivagem
para a enzima Xho I, entretanto apenas o padro J possui o stio para a enzima Sac I. A
visualizao dos produtos de digesto foi realizada em gel de agarose 1%, corado com
brometo de etdeo.

2.3.2 Determinao dos microssatlites


A anlise do genoma nuclear foi efetuada atravs da amplificao de quatro loci de
microsstlites, utilizando quatro pares de primers desenhados por Solignac et al. (2003).
Cada reao de PCR foi processada utilizando-se: 3,8l de gua destilada e deionizada;
0,6l de tampo de PCR; 0,3l de dNTPs 2mM cada; 0,18 de MgCl2 50 mM; 0,12l de
cada primers 20M; 1,5l da extrao de DNA e 1U de Taq DNA Polimerase. O primeiro
passo para amplificao consistiu em uma desnaturao por 3 minutos a 94C. Em seguida
as amostras foram condicionadas por 35 ciclos constitudos de 30 segundos de desnaturao
a 94C, 30 segundos para anelamento a 55C e 30 segundos de elongao a 72. Para

finalizar, um ciclo extra de 10 min a 72C. A visualizao dos alelos dos microssatlites foi
realizada em gel de poliacrilamida 12%, corado com nitrato de prata.

3. Resultados
A amplificao via PCR da regio COI do genoma mitocondrial do caro V.
destructor, gerou um segmento de aproximadamente 570 pares de bases (pb) em todas as
amostras coletadas em Santa Catarina e Fernando de Noronha-PE. As digestes desses
produtos de PCR com as endonucleases Xho I e Sac I geraram padres polimrficos entre
as amostras de Santa Catarina e Fernando de Noronha. Em todas as amostras das duas
localidades, a digesto do produto de PCR com a enzima Xho I, resultou em fragmentos de
300 e 270 pares de bases. Entretanto, quando submetidas a enzima Sac I as 160 amostras de
Santa Catarina no apresentaram o stio de clivagem caractersticos do hapltipo Coreano.
Para esta mesma enzima, as 30 amostras originrias de Fernando de Noronha apresentaram
o padro hapltipo Japons, com produtos de digesto de 340 e 230 pb (Fig. 1).
Analisando o genoma nuclear nas quatro regies de microssatlites estudadas, as 30
amostras de Fernando de Noronha apresentaram gentipos homozigotos, caractersticos do
padro Japons. Foram observados apenas 2,77% indivduos com alelos especficos para o
gentipo Japons nas amostras do estado de Santa Catarina. Dentre as quatro regies de
microssatlites analisadas, apenas a regio VD112 no apresentou alelos caractersticos do
padro Japons, sendo todas classificadas como gentipo Coreano.
Na regio VD119, em apenas uma amostra obtida do apirio de So Joaquim foi
verificada a presena do gentipo homozigoto para o padro Japons, sendo as restantes
homozigotas para o padro Coreano (Fig. 2).

Na regio de microssatlites VD126 foram observados polimorfismos em dois


caros de Blumenau e uma da regio de So Joaquim, onde foi verificada a presena do
gentipo homozigoto do bitipo Japons, enquanto todas as outras amostras apresentaram o
padro tpico Coreano (Fig. 3).
Entretanto, na regio VD152 observamos uma amostra coletada em um apirio da
regio de Blumenau heterozigota para os dois gentipos, isto , neste caro uma banda
pertencia ao gentipo Coreano e a outra ao gentipo Japons (Fig. 4). Todas as demais
amostras apresentaram gentipo homozigoto para o bitipo Coreano.

4. Discusso
O caro V. destructor uma espcie invasora que rapidamente se difundiu na
espcie A. mellifera causando grande impacto em colnias desta abelha espalhadas pelo
mundo. Nos pases localizados nas regies tropicais e subtropicais, sobretudo na Amrica
do Sul e Central, o parasita tem causado menores danos s abelhas africanizadas (Moretto
et al. 1991, De Jong & Soares 1997). Alguns fatores so relacionados a este baixo impacto
sobre as abelhas, como a maior resistncia das raas Africanas sobre as Europias (Moretto
et al. 1991, Medina & Martin 1999), as condies climticas (Moretto et al. 1991), e a
diferena do gentipo do Varroa que infesta os apirios (Guzman et al. 1998).
Guzman et al. (1997) utilizando marcadores RAPD diferenciaram os dois bitipos
de varroa, sendo o Russo (R) para as populaes dos Estados Unidos, Rssia Marrocos,
Alemanha, Itlia, Espanha e Portugal e o Japons (J) para as populaes do Japo, Brasil, e
Porto Rico. Anderson & Trueman (2000), utilizando marcadores de DNA mitocondrial,
tambm classificaram o bitipo em hapltipo Coreano (= Russo) e Japons.

10

Os resultados da anlise do genoma mitocondrial obtidos a partir das amostras de


Santa Catarina, corroboram Garrido et al. (2003), que verificaram menos de 2% de varroas
com hapltipo Japons em amostras coletadas em 1996 e 2001 nas cidades de Ribeiro
Preto (SP), Florianpolis (SC) e Estrela (RS). Em todas as amostras desse trabalho
coletadas no estado de Santa Catarina tambm no se verificou a presena do hapltipo
Japons.
Todas as amostras de Fernando de Noronha revelaram o padro Japons. Um padro
que pode talvez ser explicado devido s condies de isolamento geogrfico em que se
encontram as colnias de abelhas. Tal fato corrobora a teoria de que o Varroa, do bitipo
Japons, que chegou ao Brasil atravs de uma importao de abelhas do Japo pelo
Paraguai (Jong & Gonalves 1981). Como a introduo de matrizes ou enxames na ilha
controlado desde 1984 (Guerra Jr et al. 2000) e com a criao do Parque Nacional Marinho
de Fernando de Noronha a partir de 1988, foi vedada qualquer importao de animais para
a ilha, evitando uma possvel reintroduo de caros com hapltipo Coreano.
Dados de microssatlites revelaram uma baixa variabilidade e heterozigosidade nos
quatro loci estudados. Solignac et al. (2005) em seu estudo com 11 regies de
microssatlites verificaram a heterogozidade menor que 1,3%. Esta baixa variabilidade
observada bastante comum em espcies invasoras em razo da freqente ocorrncia do
efeito fundador (Tsutsui et al. 2000). Outro fator importante na estrutura gentica das
populaes do caro seu sistema de reproduo. A determinao do sexo baseado no
sistema haplo-diplide (De Ruijter & Papas 1983 apud Martin et al. 1997) e pseudoarrenotoquia (Martins et al. 1997). Desta forma, uma fmea fundadora adulta diplide ao
entrar em uma clula de cria de abelha para se reproduzir, deposita ovos haplides, que
geraro machos. A condio de pseudo-arrenotoquia se caracteriza pelo conjunto de
11

cromossomos que constitui o vulo no fecundado ser exclusivamente de origem materna.


As ovoposies que originaram fmeas so constitudas de vulos fecundados (diplides).
Como a clula est operculada, o macho gerado dentro da clula acabar fecundando suas
irms. A ocorrncia de uma ou mais fmeas fundadoras, que permitiria mais de um macho,
de menor freqncia, favorecendo desta forma a alta taxa de endogamia e a baixa
variabilidade gentica (Donze et al. 1996).
A ocorrncia de alelos especficos, embora baixa, para o bitipo Japons no estado
de Santa Catarina demonstrou a possvel existncia no passado de caros do bitipo
Japons, e sua substituio atualmente pelo gentipo/hapltipo Coreano. O bitipo Japons,
caracterizado por possuir menor virulncia quando comparado o bitipo Coreano
(Delfinado-Baker 1988), foi um dos fatores sugerido por Anderson & Trueman (2000)
baixa virulncia do caro no pas. Outra evidncia que justifica a alterao do bitipo do
caro foi obtida por Carneiro et al. (2007), que verificaram um incremento na habilidade
reprodutiva do caro quando comparado com dados obtidos da dcada de 1980. Os
resultados de fertilidade demonstraram que naquele perodo, quando possivelmente as
populaes de caros eram constitudas por bitipos Japoneses, cada fmea fundadora
produzia uma mdia de 1,3 deutoninfas, quanto atualmente esta mdia de 1,7 deutoninfa
por varroa. Este aumento significativo de descendentes similar ao encontrado em abelhas
europias no Reino Unido (Medina & Martin 1999), onde o padro Coreano determinado
desde 1997 (Anderson & Trueman 2000).
Contudo, apesar desta possvel mudana de gentipo/hapltipo do varroa no estado
de Santa Catarina, o nvel de infestao do parasita em abelhas adultas ainda considerado
baixo, aproximadamente 4% (Carneiro, comunicao pessoal). Este valor similar ao
encontrado no incio da dcada de 1990 (Moretto et al. 1991). Alguns fatores tm
12

contribudo para a maior tolerncia da abelha A. mellifera (africanizada) ao parasita. O


comportamento higinico e o grooming tm sido relatados como importantes
mecanismos de resistncia ao caro (Boecking & Spivak 1999). Moretto et al. (1993)
demonstrou que abelhas africanizadas possuem 38% da capacidade de limpeza, enquanto
abelhas italianas possuem apenas 5%. Moretto et al. (2006) verificaram que a taxa diria de
clulas desoperculadas foi 3,5 vezes maior em favos infestados com varroa comparados
com favos no infestados. Isso demonstra que as abelhas africanizadas possuem uma
sensibilidade em reconhecerem e removerem crias parasitadas naturalmente com o caro.
Na atividade de grooming, Junkes et al. (2007) verificaram um aumento significativo de
caros no fundo da colmia medida que diminui a quantidade de crias de operrias das
colnias de abelhas. Este resultado sugere que a atividade seja incrementada medida que
aumenta a concentrao de caros na populao de abelhas adultas, resultando em uma
maior mortalidade de caros.

5. Agradecimentos
Ao todos os apicultores que forneceram o material biolgico para realizao deste
trabalho e em especial ao professor David De Jong pela amostras de oriundas de Fernando
de Noronha (PE).

13

6. Referncias

Anderson, D.L & J.W.H Trueman, (2000). Varroa jacobsoni (Acari:Varroidae) is more
than one species. Exp. Appl. Acarol. 24: 165-189.
Anderson, D.L. & S. Fuchs (1998). Two genetically distincts populations of Varroa
jacobsoni with contrasting reproductive abilities on Apis mellifera. J. Apic. Res. 37: 69-78.
Anderson, D.L. & J.W.H. Trueman (2000). Varroa jacobsoni (Acari: Varroidae) is more
than one species. Exp. Appl. Acarol., 24: 165-189.
Bakonyi, T., R. Farkas, A. Szendroi, M. Dobos-Kovcs & M. Rusvai (2002) Detection of
acute bee paralysis virus by RT-PCR in honey bee and Varroa destructor field samples:
rapid screening of representative Hungarian apiaries. Apidologie 33, 6374.
Boecking, O. & M. Spivak (1999) Behavioral defenses of honey bees against Varroa
jacobsoni Oud. Apidologie 30: 141-158.
Botta, E., H. Carmenate & P.E. Torre (2004). Varroasis, peligrosa enfermidad de la abeja
melfera. Fitosanidad, 8: 73-79.
Calderon, R.A., M. J. Sommejer & J.W. Van Veen (2003). The reproductive ability of
Varroa destructor in worker brood of Africanized and hybrid honey bees in Costa Rica. J.
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Fig. 1. Eletroforese em gel de poliacrilamida 12% da digesto do fragmento da regio


gnica COI do DNA mitochondrial do caro Varroa destructor com as endonucleases Xho I
(X) e Sac I (S). M: Marcador de 100pb; 1 e 2: Amostras do estado de Santa Catarina; 3 e 4:
Amostras de Fernando de Noronha (PE).

Fig. 2. Eletroforese em gel de poliacrilamida 12% da regio de microssatlites VD119 do


caro Varroa destructor. M: Marcador de 10pb; 1 e 2: Amostras do estado de Santa
Catarina; 3: Amostra de So Joaquim; 4 e 5: Amostras de Fernando de Noronha (PE).

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Fig. 3. Eletroforese em gel de poliacrilamida 12% da regio de microssatlites VD126 do


caro Varroa destructor. M: Marcador de 10pb; 1 e 2: Amostras do estado de Santa
Catarina; 3 e 4: Amostras de Blumenau; 5: Amostra de So Joaquim; 6 e 7: Amostras de
Fernando de Noronha (PE).

Fig. 4. Eletroforese em gel de poliacrilamida 12% da regio de microssatlites VD152 do


caro Varroa destructor. M: Marcador de 10pb; 1 e 2: Amostras do estado de Santa
Catarina; 3: Amostra de Blumenau; 4 e 5: Amostras de Fernando de Noronha (PE).

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