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Clasificacin y calificacin embrionaria

La clasificacin y evaluacin de los embriones son sin duda los procedimientos ms difciles
para aquellos tcnicos y profesionales que comienzan a trabajar con esta biotecnologa
reproductiva. En realidad no es algo muy complicado pero requiere habilidad y experiencia. A
continuacin expongo para los interesados los aspectos ms relevantes de estos dos
procedimientos.
Los embriones se buscan con un estereomicroscopio en magnificacin 10-15X. Teniendo el
medio en una caja de petri se pone una placa cuadriculada bajo esta para facilitar la bsqueda
y clasificacin. Luego de haber encontrado el ltimo embrin se busca una o dos veces ms
para descartar que alguna futura cra se nos haya quedado en el medio.
Un oocito mide aproximadamente 150-190m y tiene una zona pelcida de aproximadamente
12-15m. Este dimetro permanece sin variaciones considerables desde que tiene una clula
hasta que se encuentra en fase de blastocisto expandido. El tcnico puede contar las clulas
del embrin sin dificultad hasta que este tiene 16 clulas, luego de esto, las clulas se dividen
asincrnicamente e identificarlas se hace un poco difcil. Cuando las clulas comienzan a
adherirse entre ellas y comienzan a perder su forma esfrica el embrin recibe el nombre
de mrula.
La zona pelcida se observa como una estructura transparente que rodea a las clulas. Entre
la zona pelcida y las clulas existe un espacio llamado espacio perivitelino. Este espacio
perivitelino es identificable hasta que el embrin se encuentra en estado de blastocisto.

En la imagen anterior vemos: 1. Zona pelcida; 2. Masa celular; 3. Espacio perivitelino.


Los estados de desarrollo del embrin se identifican, despus de tener 16 clulas, de acuerdo
al desarrollo morfolgico.
Mrula (Estadio 4): Las clulas (blastmeras) son difciles de distinguir unas de otras. El
embrin tiene aproximadamente 5 das.
Mrula compacta: Las blastmeras se juntan y forman una masa celular slida. El embrin
ocupa aproximadamente un 60% del espacio perivitelino.

En la imagen anterior vemos una mrula (Estado 4)


Blastocisto temprano (Estadio 5): Presenta una cavidad en donde se encuentra un fluido
llamadoblastocele. El embrin ocupa el 70-80% del espacio perivitelino. Se puede diferenciar
el trofoblasto y el macizo celular interno. Luego de esta etapa viene el Blastocisto (Estadio 6)
propiamente dicho. La nica diferencia entre estos dos estados es bsicamente el tamao de la
cavidad.

En la imagen anterior vemos un Blastocisto. Ntese la cavidad y el fluido (1).


Blastocisto expandido (Estadio7): El dimetro aumenta hasta en un 150%. La zona pelcida
se adelgaza hasta un 66% con respecto al grosor que tena en el Estado 4. Estos embriones
tienen una edad estimada de 8 a 9 das.

Ntese en esta imgen el adelgazamiento de la zona pelcida


Blastocisto eclosionado (Estadio 8): La masa celular puede estar por fuera de la zona
pelcida o en proceso de salir. Luego viene un estado llamado Blastocisto eclosionado
expandido (Estadio 9).
El grado de desarrollo de un embri se determina por nmeros en donde el nmero 1 identifica
un oocito sin fertilizar, el nmero 2 nos identifica un embrin con hasta 16 clulas (2 a 5 das).
El nmero 3 identifica una mrula temprana y los nmeros del 4 al 9 nos identifican embriones

que ya presentaron compactacin. En un lavado convencional los embriones son colectados


entre los das 6 y 8, o sea entre mrula y blastocisto.
En resmen los estadios del embrin son los siguientes:
Estado 1: Infertilizado
Estado 2: de 2 a 16 clulas
Estado 3: Mrula temprana
Estado 4: Mrula
Estado 5: Blastocisto temprano
Estado 6: Blastocisto
Estado 7: Blastocisto expandido
Estado 8: Blastocisto eclosionado
Estado 9: Blastocisto eclosionado en expansin

En la imagen anterior vemos: 1. Mrula compacta; 2. Infertilizados; 3. Mrulas


tempranas; 4.Infertilizado.
Ntese en la imagen anterior que en la mrula compacta no podemos diferenciar bien las
clulas mientras que en las mrulas tempranas s. Los infertilizados los identificamos porque su
interior es un valo bien delimitidado y al observarlo detenidamente vemos que se interior esta
compuesto no por bordes (segmentos) sino por grnulos (estructura de puntillismo).
Hasta aqu hemos visto a grosso modo la clasificacin de los embriones segn su estado.
Ahora veamos la calificacin que le damos a los embriones de acuerdo a su calidad.
La evaluacin la damos de acuerdo a sus caractersticas morfolgicas. Estas caractersticas
son subjetivas y pueden variar de un tcnico a otro. Las caractersticas que debemos tener en
cuenta para calificar un embrin son:
1.
Forma del embrin
2.

Color y textura de la masa celular

3.

Diferencia de tamao entre las blastmeras

4.

Numero y nivel de compactacin de las blastmeras

5.

Tamao del espacio perivitelino

6.

Presencia de blastmeras sueltas o separadas

7.

Presencia o ausencia de vesculas

8.

Forma y estado de la zona pelcida

Si en la clasificacin utilizbamos una escala numrica del 1 al 9 en la calificacin vamos a


utilizar una escala numrica que va del 1 al 4:
Calidad 1: Embriones excelentes y buenos. Son embriones esfricos, simtricos con clulas de
tamao, color y texturas uniformes. Puede haber pequeas imperfecciones como algunas
blastmeras sueltas, tamao irregular o algunas vesculas. Estos embriones son los ideales
para congelar.
Calidad 2: Embriones regulares. Tienen problemas ms definidos incluyendo blastmeras
sueltas, vesculas o clulas degeneradas. Estos embriones pueden ser congelados pero se
obtendrn resultados bajos. Sin embargo son embriones aceptables para ser transferidos en
fresco (de donadora a receptora directamente sin congelacin).

Calidad 3: Embriones malos. Numerosas blastmeras sueltas, clulas degeneradas. Clulas


de distinto tamao, color y textura, formas irregulares. Numerosas vesculas. No se deben
congelar y al ser transferidos en fresco nos dan resultados pobres.
Calidad 4: Muertos o degenerados. Son embriones cuyas blastmeras se encuentran en
desorden y sueltas. Hay muchas vesculas. Puede tener un aspecto granular como los
infertilizados y tener un crecimiento retardado con respecto a los otros embriones de la colecta.
No se congelan ni se transfieren en fresco.

En la imagen anterior vemos diferentes estructuras dentro de las cuales se identifican mrulas,
blastocistos, infertilizados y degenerados. Que el estudiante determine cual es cual en la
imagen.
Teniendo en cuenta lo visto en cuanto a clasificacin y calificacin en la prctica podemos
encontrarnos, entre otros, con los siguientes embriones:

4:1 mrula de excelente calidad. Transferible y congelable.

4:2 mrula regular. Resultados bajos al congelar y resultados buenos al transferir en


fresco.

4:3 mrula mala. No congelable y resultados bajos al transferir en fresco.

4:4 muerto o degenerado. No congelable y no transferible.

5:1 blastocisto de excelente calidad. Transferible y congelable.

5:2 blastocisto regular. Resultados bajos al congelar y buenos al transferir en fresco.

5:3 blastocisto malo. No congelable y resultados bajos al transferir en fresco.

5:4 muerto o degenerado. No congelable y no transferible.


Tambin podemos encontrar embriones de otro tipo como 6:1 7:3 pero el ejemplo aplica para
todos.
http://jairoserrano.com/2009/12/calificacion-y-clasificacion-embrionaria/

Blastocisto
El blastocisto es una estructura embrionaria presente en las etapas
tempranas del desarrollo durante el embarazo de mamferos
(embriognesis), que ocurre unos 4 o 5 das despus de la fecundacin y
antes de la implantacin al endometrio.

Est compuesta por una prominente cavidad, el blastocele, y entre 70-100


clulas, llamadas blastocitos. Las clulas del blastocisto son pluripotentes,

es decir las clulas de la masa celular interna pueden convertirse en


cualquier tipo de tejido, excepto la placenta.

Ocasionalmente se usa el trmino blstula como sinnimo de blastocisto.

Desarrollo

Despus de las divisiones mitticas por las que pasa el cigoto y que originan
un incremento celular, se forma una estructura redondeada compacta
llamada mrula.

Al poco tiempo de la formacin de la mrula, las clulas que la constituyen


ms de 12 clulas llamadas blastmeros se desplazan por la aparicin de un
lquido que forma la cavidad del blastocisto llamado blastocele. Por ende, la
mrula se desarrolla como una cavidad llena de lquido, transformndose en
blastocisto.

Desde el punto de la aparicin de este espacio se comienza a hablar de


blastocisto y no de mrula. Para entonces, unos 4 o 5 das despus de la
fecundacin y todava en la tuberosidad del Oviducto, el blastocisto tiene
una capa de clulas externas, muy delgada llamado trofoblasto, el cual
nutre al blastocisto y formar la parte embrionaria de la placenta.

Un grupo de blastmeros se concentra en el centro de uno de los polos del


blastocisto formando una masa de clulas internas que originarn al
embrin y es llamado embrioblasto.

Esta masa de clulas internas termina proyectandose hacia el centro del


blastocele, mientras que el blastocisto llega al tero y flota en sus
secreciones alrededor de 2 das.

Gradualmente la zona pelcida alrededor del da cinco se va degenerando


hasta desaparecer en preparacin para la implantacin, por medio de una
serie de ciclos de expansin y contraccin.

Este proceso es apoyado por un grupo de enzimas que disuelven la zona


pelcida del lado del polo no-embrionario. A partir de este momento se
comienza a hablar de un embrin.

Implantacin

Aproximadamente 2 das despus de llegar el blastocisto al tero entre 6 y 7


das despus de la fecundacin el blastocisto se aposiciona y adhiere al
epitelio endometrial del tero, por lo general en el polo ms cercano a la
masa celular interna.

Tan pronto se fija al tero, el trofoblasto comienza rpidamente a proliferar


formando, gradualmente, dos capas: el citotrofoblasto hacia adentro y el
sincitiotrofoblasto del lado externo.

Fuentes

William D. Larsen, William J. Larsen. Embriologa humana. 3a ed.


Elsevier Science, 2003.
http://www.salud180.com/salud-z/blastocisto

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