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EXTRAO CASEIRA DE DNA MORANGO

Organizao: Eliana Maria Beluzzo Dessen e Jorge Oyakawa


Diagramao: Regina de Siqueira Bueno

Selecionar 3 morangos e tirar os


seus cabinhos verdes.

Em outro copo
misturar 150 ml de
gua, uma colher
(sopa) de detergente
e uma colher (ch)
de sal de cozinha.
Mexer bem com
o basto de vidro,
porm devagar para
no fazer espuma.

Incubar em temperatura
ambiente por 30 minutos.
Mexer de vez em quando
com o mesmo basto.

DETERGENTE

Colocar os morangos dentro de um saco


plstico e macer-los pressionando os
morangos com os dedos at obter uma
pasta quase homognea. Transferir a pasta
de morango para um copo.

Colocar cerca de 1/3 da mistura


de gua, sal e detergente
sobre o macerado de
morango. Misturar
levemente com o
basto de vidro.

Colocar uma peneira


sobre um copo limpo
e passar a mistura
pela peneira para
retirar os pedaos
de morango que
restaram.

Despejar delicadamente no tubo


(pela parede do mesmo), sobre
a soluo, dois volumes de
lcool comum. No misturar
o lcool com a soluo.
Aguardar cerca de
3 minutos para o DNA
comear a precipitar
na interfase.

SAL

150 ml
GUA

Incubar por
30 minutos

Colocar metade do lquido


peneirado em um tubo de
ensaio. Colocar apenas
cerca de 3 dedos no
fundo do tubo.

Passo opcional. Usar um palito


de vidro, plstico ou madeira
para enrolar as molculas de
DNA. Gire o palito na interface
entre a soluo e o lcool.

oo

lc

Aguardar
3 minutos

ETAPAS PREPARATRIAS:
Se voc professor e deseja aplicar esse protocolo em sala de aula
siga as seguintes etapas preparatrias:

Antes da aula:

Providenciar morangos maduros. Polpa de morango congelado


tambm pode ser usada.

Comprar lcool comercial comum 98% (sem gel).

Material suficiente para 3 grupos de at 10 estudantes.

Morangos maduros
3 sacos plsticos para macerao dos morangos
3 colheres de sopa
3 colheres de ch
9 copos de vidro transparente
3 recipientes contendo sal de cozinha
3 frasco com detergente (sem cor) de lavar loua.
3 frasco com lcool comercial 98%
3 provetas ou 3 frasco contendo 150 mL de gua
3 peneiras ou coadores de ch
6 tubos de ensaio grandes
3 bastes de vidro, plstico ou madeira
3 protocolos com os procedimentos

Observaes:

aconselhvel realizar a prtica, antes da aula, para ajustar as quantidades relativas


de tecidos a partir dos quais o DNA ser extrado e a relao entre os volumes do
macerado e do lcool.

aconselhvel usar gua quente na mistura com sal e detergente (cerca de 65oC),
uma vez que o tempo de incubao est reduzido.

Outras frutas podem ser usadas aplicando-se o mesmo protocolo: tomate bem
maduro (meio tomate por extrao) ou banana (meia banana por extrao). Catalos
de cebola sem a casca tambm apresentam bom resultado. Se usar cebola pique-a
em pedaos bem pequenos em vez de macera-la (meia cebola por extrao).

Durante o perodo da incubao, o professor pode conduzir uma discusso sobre a


localizao do DNA no ncleo, a composio da membrana plasmtica e a ao do
detergente sobre a membrana.

Antes da aula prtica importante que os alunos j tenham os seguintes conceitos:


o O DNA est no ncleo da clula
o As membranas celulares so formadas por uma dupla camada lipdica.

ANEXO 1
PREPARATRIAS:
Sugesto deETAPAS
questes para
serem respondidas pelos grupos de
estudantes aps (ou durante) a realizao da extrao de DNA.
1. Por que necessrio macerar o morango?
2. Em que etapa do procedimento ocorre o rompimento das membranas das clulas do
morango? Explique.
3. Qual a funo do sal de cozinha?
4. Qual o papel do lcool?
5. Por que voc no pode ver a dupla hlice do DNA extrado?
6. Considerando os procedimentos da extrao do DNA genmico, voc espera obt-lo sem
quebras mecnicas e/ou qumicas?

Respostas para as questes:


1. O morango precisa ser macerado para que os produtos qumicos utilizados para a extrao
cheguem mais facilmente em todas as suas clulas.
2. Na etapa 4. Os detergentes so normalmente empregados para dissolver gorduras ou lipdios.
Como a membrana celular tem em sua composio qumica uma grande quantidade de lipdios,
sob a ao do detergente, estes se tornam solveis e so extrados junto com as protenas que
tambm fazem parte das membranas.
3. O sal de cozinha ou NaCl (cloreto de sdio) fornece ons que so necessrios para a fase de
precipitao do DNA (veja complementao na resposta seguinte).
4. O DNA extrado das clulas do morango encontra-se na fase aquosa da mistura, ou seja, dissolvido
na gua. Na presena de lcool e de concentraes relativamente altas de Na+ (fornecidas pelo sal
de cozinha) o DNA sai de soluo, isto , ele precipitado. O precipitado aparece na superfcie da
soluo, isto , na interface entre a mistura aquosa e o etanol.
5. A molcula de DNA pode ser extremamente longa, mas seu dimetro de apenas 2 nanmetros,
visvel apenas em microscopia eletrnica. Assim sendo, o que se v aps a precipitao um
emaranhado formado por milhares de molculas de DNA.
6. O DNA genmico formado por molculas muito longas (lembre-se que cada cromossomo
formado por uma nica molcula de DNA). Por exemplo, o maior cromossomo humano possui
263 milhes de pares de bases. Assim sendo, praticamente impossvel extrair o DNA sem que
inmeras quebras mecnicas ocorram durante os procedimentos de extrao.

Sugestes de atividades correlatas


Durante o perodo de incubao discutir o protocolo com os estudantes usando uma gura de uma
clula vegetal e solicitar a eles que apontem as membranas da clula e do ncleo que estariam sendo
rompidas pela ao do detergente. Neste momento, rever a composio qumica das membranas
celulares. Rever o conceito de protena e no que estas diferem das enzimas capazes de acelerar as
reaes qumicas que ocorrem durante o metabolismo celular.

Aplicar,

com

os

alunos

jogo

Cara

cara

com

clula,

disponvel

em

www.genoma.ib.usp.br/educacao/materiais_didaticos.php. Chamar a ateno dos alunos sobre a

localizao do DNA nos diferentes tipos de clula.

Rever, com os alunos os diferentes tratamentos capazes de promover a lise mecnica ou


qumica da clula para a liberao do seu contedo. Comentar sobre o tratamento utilizado no
procedimento apresentado e compar-lo com tratamentos com enzimas ou mesmo autlise
espontnea ou induzida.

Solicitar aos alunos que tragam para a sala de aula fotos ou guras de um ambiente qualquer.
Na foto pedir que marquem com um X os locais em que o DNA encontra-se contido dentro do
ncleo de uma clula. Resgatar alguns dos trabalhos realizados e discutir com toda a classe a
correo ou no dos itens assinalados.