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Qualidade da gua e Sade Pblica

Principais doenas de origem microbiana difundidas atravs de guas contaminadas

Doena

Agente

Causa da doena

Origem

Bactrias
Clera
Febres entricas
(Fbre tifide )
Gastroenterites
Disenteria bacilar

Vibrio cholerae
Salmonella paratyphi
Salmonella typhi
Campylobacter sp.
Escherichia coli O157:H7
Shigella sp.

Pneumonia

Legionella pneumophila

Enterotoxina
Endotoxinas
Enterotoxinas, septicmia
Enterotoxinas
Endotoxina, enterotoxina

.ingesto gua contamin


.consumo de alimentos
crus lavados com gua
contaminada
.gelo contaminado
.prtica sanitria
deficiente
.Contacto com aerossis
contaminados (rega); ar
condicionado;
acumuladores para
aquecimento de gua;
piscinas

Protozorios
Disenteria
Infeco intestinal

Entamoeba histolytica
Giardia lamblia
Cryptosporidium sp.

. ingesto gua contaminada.

Virus
Hepatite infecciosa
Poliomielite
Diarreia

Virus hepatite A
poliovrus
Virus de Norwalk

. ingesto de gua contaminada; alimentos crus


prtica sanitria defici
ente

(ver Laboratrio de Microbiologia Anlise bacteriolgica de guas em www.e-escola.pt)


Principais fontes de contaminao microbiolgica da gua: esgotos (matria fecal humana
ou animal), matria fecal de aves, animais etc.; tratamento deficiente dos esgotos e da gua de consumo.

1999-2000

1989-2000

Doenas transmitidas atravs da gua

Riscos para a Sade Pblica

1. Tratamento dos efluentes tratamento fisico + biolgico remove compostos


orgnicos e inorgnicos a nveis que j no permitem o crescimento microbiano e
eliminam compostos potencialmente txicos

2. Purificao da gua para consumo humano

3. Monitorizao microbiolgica das guas de abastecimento


(realizada em rotina nos pases desenvolvidos)

Efeito da purificao da gua na incidncia de doenas infecciosas


(ex. febre tifide)

PURIFICAO DA GUA PARA CONSUMO HUMANO

Tratamento com cloro (mais comum):


 Cl2 (gas)
Cl2 + H2O
HOCl + HCl
 Hipoclorito de sdio ou clcio
Ca(OCl)2 + 2H2O
Ca(OH)2 + 2 HOCl
Oxidao de macromolculas
cido hipoclrico
(HOCl)

Morte celular
Rpido (30 min)

*adio de polmeros aninicos e


alum (sulfato de alumnio)
partculas grandes com
os slidos em suspenso
FLOCULAO;
flocos adsorvem matria orgnica
e retm microrganismos.

PESQUISA DE ORGANISMOS INDICADORES


DE CONTAMINAO FECAL
Monitorizao microbiolgica das guas de abastecimento

A gua pode conter:


- vrios tipos de microrganismos saprfitas, cujo habitat
natural o solo, a gua ou o ar
- microrganismos patognicos em resultado de contaminao
com esgotos domsticos contendo matrias fecais. Os agentes
causadores de muitas doenas veiculadas pela gua so de
origem fecal.

Normalmente, a pesquisa directa de microrganismos patognicos


no realizada por rotina:
- dispendiosa
- alguns microrganismos patogognicos esto presentes na gua
contaminada em pequeno nmero
(p.ex. Giardia 1 em cada 400 litros gua).
- microrganismos patognicos permanecem viveis por perodos
curtos fora do organismo hospedeiro.
- estes microrganismos sofrem frequentemente transio para formas
viveis mas no cultivveis, estado resistente em que podem persistir
por longos periodos
(p.ex cistos de Giardia ou Cryptosporidium, endosporos de bactrias,
etc.)

Critrios que definem um microrganismo


indicador de contaminao fecal da gua:
- deve estar presente na gua sempre que existam microrganismos
patognicos
- habitante usual do intestino de animais e do ser humano
- existir em nmero superior aos organismos patognicos presentes
- a sua concentrao em guas contaminadas deve ser proporcional
ao nvel de poluio de origem fecal
- pesquisa e identificao por tcnicas laboratoriais de fcil execuo,
rpidas e inequvocas, e aplicveis a todo o tipo de guas
- no deve ser nocivo para os seres humanos

Tcnica das membranas filtrantes


na anlise bacteriolgia de guas

Figure 6.6
(In Prescott, harley, Kline, Microbiology, 5th edition, Mc GrawHill)

(In Prescott, harley, Kline, Microbiology, 5th edition, Mc GrawHill)

Pesquisa de coliformes
-Bactrias aerbias facultativas
- Oxidade negativas
Membros da famlia
Enterobacteriaceae

- Gram negativa
- Fermenta a lactose, em 48 horas, a 37C
com produo de cidos orgnicos e gases (CO2, H2)

Acidificao do meio de cultura

Meio de cultura selectivo para isolamento de coliformes deve conter:


Fonte de Carbono e energia Lactose
 Fontes nutricionais adicionais petona; extracto de levedura
Composto que iniba crescimento de bactrias Gram positivas
(ex. lauril-sulfato de sdio)
 Indicador de pH

Colnias de coliformes
em meio ENDO

Colnias de coliformes
fecais em m-FC agar

Colnias de coliformes
em meio m-lauryl sulphate
(contm indicador de pH)

Coliformes fecais - coliformes provenientes do intestino de animais


de sangue quente.
A sua presena na gua indica a ocorrncia de contaminao fecal
recente.

Os coliformes fecais so termotolerantes.


Ex: Escherichia coli
A Escherichia coli fermenta a lactose a 35-37C e a 44,5C

Coliformes atpicos- bactrias que no esto limitadas a origens


fecais, pois podem ser saprfitas que proliferam no solo ou associadas a
plantas.

Ex: Enterobacter aerogenes, Erwinia Sp., Klebsiella


Fermentam a lactose a 35-37C (raramente a 44,5C)
Coliformes totais = coliformes fecais + coliformes atpicos

Mtodos de deteco de coliformes: fermentao em tubos mltiplos

Teste presumptivo

(In Prescott, harley, Kline, Microbiology, 5th edition, Mc GrawHill)

Teste presumptivo- enumerao do nmero mais provvel de


coliformes/ 100 ml de amostra.
Baseia-se no n de tubos com meio de lactose onde produzido
gs (37 C) em resultado da fermentao deste acar por coliformes
existentes em diferentes volumes de amostra

(In Prescott, harley, Kline, Microbiology, 5th edition, Mc GrawHill)

Teste confirmativo- em meio selectivo que inibe o crescimento de


bactrias Gram-positivas e diferencia E. coli de outros coliformes
(por exemplo atpicos) por incubao a 37 C e a 44,5 C.

(In Prescott, harley, Kline, Microbiology, 5th edition, Mc GrawHill)

Teste completo- inoculao de um meio selectivo para coliformes,


a partir de amostras que deram resultados positivos no teste
confirmativo. Observao de colnias, teste de colorao
de Gram, testes bioqumicos

(In Prescott, harley, Kline, Microbiology, 5th edition, Mc GrawHill)

Teste completo requere pelo menos 4 dias

Outros mtodos para deteco de coliformes


 Colilert
100 ml de amostra de gua + meio selectivo para crescimento de coliformes
contendo substratos cromognicos (ONPG, o-nitrofenil--D-galacto
piransido; MUG, 4- metilumbelifenil-b-D-galactsido) 35C, 24 h

ONPG

- galactosidase

MUG

-glucuronidase

produto amarelo (coliformes totais)


produto fluorescente sob radiao ultravioleta
(E. coli)

 MTODOS MOLECULRES

- Sondas de cidos nucleicos (hibridao; FISH Fluorescent in


situ hybridization)

- PCR (Polymerase chain reaction) amplificao e deteco de


genes especficos

- Anticorpos monoclonais (imunofluorescncia)

Limitaes ao uso dos coliformes fecais como indicadores


de contaminao fecal da gua
- Alguns microrganismos patognicos so mais resistentes que
os coliformes aos tratamentos de desinfeco da gua
(cistos de Giardia e Cryptosporidium e vrus)
- Os coliformes podem crescer em biofilmes nas paredes das
tubagens usadas na distribuio de gua (E. coli 2400x
mais resistente ao cloro)
- A concentrao de coliformes pode aumentar na gua, em resultado de
alteraes nas condies ambientais (temperatura, presena de matria
orgnica, etc.)

Outros microrganismos indicadores de contaminao fecal


 Estreptococos ou enterococos fecais
so ndicadores de poluio recente (poucos dias ou semanas)
So isolados com base na utilizao de meios selectivos (meio nutriente
com azida de sdio que inibe as bactrias Gram-negativas)
Ex. Meio KF
Enterococcus faecalis- predomina em fezes humanas
Streptococcus bovis, S. equinus- animais

Estreptococos fecais
em KF agar

Razo coliformes fecais/estreptococos ou enterococos fecais


> 4 poluio de origem humana
< 0,7 poluio de origem animal (pocilgas)

 Clostridium (C. perfringens)


- Habitam o intestino do homem e animais (embora em pequeno n)
- Gram-positivos e anaerbios obrigatrios
-Formam endoesporos
- Os esporos persistem durante perodos longos na gua e
resistem ao tratamento com cloro
- Presena na gua indica poluio antiga (na ausncia de outros ndices)
 Pseudomonas aeruginosa
- Patognio oportunista
- ocorre frequentemente em guas de recreio (p.ex. piscinas)
 Vrus entricos
- habitantes transitrios do tracto intestinal

 Pesquisa de protozorios (Giardia, Cryptosporidium)

Quistos do protozorio Giardia sp.


(contaminante de gua) em matria fecal
(por IMUNOFLUORESCNCIA)

(http://www.epa.gov/nerlcwww/gda_seq1.htm)

GUA POTVEL - Parmetros microbiolgicos da gua


para consumo humano*
Organismo Indicador

Valor mximo admissvel

gua da torneira
Coliformes fecais (E. coli)
Enterococos fecais

0 / 100 mL gua
0 / 100 mL

gua engarrafada
Coliformes fecais (E. coli)
Enterococos fecais
Pseudomonas aeruginosa

0 / 250 mL
0 / 250 mL
0 / 250 mL

*Em vigor em Portugal (Dec-lei n 306/2007)

Psquisa de outros parmetros, no biolgicos:


produtos qumicos potencialmente perigosos (p.exemplo, pesticidas,
ies de metais pesados, adubos artificiais, etc,); cor, cheiro ou sabor, etc..

Portugal
Decreto-lei n236/98

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