Abstracto

Diferentes tcnicas de biorremediacin (atenuacin natural, bioestimulacin y

bioaumentacin) en suelos contaminados con dos concentraciones de lodos aceitosos
(1,5% y 6,0%) en microcosmos abiertos y cerrados sistemas fueron evaluados durante
90 das. Los resultados mostraron que las tasas de biodegradacin ms altos fueron
obtenido en suelos contaminados con 6% en el microcosmos cerrados. La adicin de
consorcios microbianos y nutrientes en diferentes concentraciones mostraron una
mayor tasa de biodegradacin de hidrocarburos totales de petrleo (TPH) que los del
tratamiento de atenuacin natural. Los suelos tratados en microcosmos cerrados tasa
mostr ms alta de eliminacin (84,1 0,9%) cuando se contamina en el 6% y el
consorcio bacteriano y se aadieron nutrientes en cantidades bajas. En microcosmos
abiertas, el suelo contaminado en un 6% el uso de bioestimulacin con las mayores
cantidades de nutrientes (C: N: P de 100: 10: 1) present la mayor degradacin tasa
(78,7 1,3%). Estos resultados demuestran que la aplicacin de consorcio microbiano
y nutrientes biodegradacin favorecida de TPH presentes en lodos aceitosos,
indicando sus aplicaciones potenciales para el tratamiento de los suelos impactados
con este importante residuos peligrosos.
Introduccin
Procesamiento de petrleo genera cantidades considerables de un residuo nombrado
lodo aceitoso. Uno de los problemas principales que enfrentan los re-refineras y las
industrias petroqumicas se relaciona con la eliminacin segura de este residuo, ya
que su destino y / o el tratamiento inapropiado Puede causar graves consecuencias
para el medio ambiente y el riesgo potencial de la salud humana (Cameotra y Singh,
2008; Xu y Lu, 2010). Aceite lodos ha sido clasificado por los Estados Unidos del
Medio Ambiente Agencia de Proteccin (US EPA) como un complejo orgnico
peligrosos (Ubani et al., 2013). Por lo general, el lodo aceitoso contiene agua, arena,
aceites, grasa, compuestos orgnicos, elementos qumicos, y metales. En medio de
los compuestos orgnicos presentes, los ms comunes son los alquenos, alquenos
cclicos, benceno, tolueno, etil- benceno, xilenos y policclicos hidrocarburos
aromticos policclicos (HAP) y fenoles (Kriipsalu et al., 2008). Los hidrocarburos
aromticos policclicos (HAP) consisten en un Seria preocupacin ambiental, ya que
muchos de ellos son citotxicos, mutagnicos y potencialmente cancergenos (Ubani
et al., 2013). Biorremediacin de suelos contaminados con hidrocarburos, que explota
la capacidad de los microorganismos para degradar y / o desintoxicar contaminantes
orgnicos, se ha establecido como un eficiente, econmica, tratamiento verstil y
seguro para el medio ambiente (Singh y Lin, 2008). En las plantas de procesamiento
de petrleo, en el tratamiento de residuos, principalmente lodos aceitosos, el proceso

landfarming es una frecuencia mtodo elegido, debido a su simplicidad operacional,

bajo costo (cuando en comparacin con otras tcnicas), alto potencial de
contaminante remocin y alta tasa de aplicacin residuo, variando de 83 a 252 m3 / ha
/ ao (Marn et al., 2005; Jacques et al., 2007). Sin embargo, el mtodo todava
muestra varias limitaciones especialmente a lo que respecta a las grandes
necesidades de reas de gestin y control apropiado, las desfavorables condiciones
ambientales de los microbios el crecimiento y la ineficiencia en la reduccin de los
contaminantes inorgnicos nivel (Khan et al., 2004).
Eficiencia de los procesos de biorremediacin de reas contaminadas depende de
varios factores; los ms importantes son la presencia de microorganismos con
capacidad catablica apropiada en el sitio contaminado, favorable ambiental y
nutricional condiciones para el crecimiento microbiano y el metabolismo, contaminante
composicin y la concentracin y la biodisponibilidad de contaminantes a ataque
microbiano. Se han propuesto dos tcnicas para aumentar la eficiencia de proceso de
biorremediacin: bioestimulacin y / o bioaumentacin. La bioestimulacin proceso
consiste en la introduccin de nutrientes, principalmente nitrgeno y fsforo bajo la
forma de orgnico y / o fertilizantes inorgnicos, en el sistema contaminado para
estimular la actual crecimiento de la poblacin microbiana y la actividad. La
bioaumentacin proceso consiste en la introduccin de microorganismos, previamente
caracterizado como potenciales degradadores para apuntar contaminante, en el
ambiente contaminado con miras a un aumento en la poblacin microbiana y, como
consecuencia, un aumento de la tasa de biodegradacin (Das y Chandran, 2011;
Tyagi et al., 2011; Taccari et al., 2012). El objetivo del presente trabajo fue evaluar la
biorremediacin potencial en suelos contaminados con diferentes lodos aceitosos
concentraciones en abierto y microcosmos cerrado utilizando bioestimulacin y las
tcnicas de bioaumentacin.
2. Material y mtodos
2.1. Muestreo
Muestras de suelo distrfica Red Argisoil (profundidad de 0e30 cm) fueron recogido al
azar en 5 puntos en las clulas landfarming, que tienen recibida petroqumica lodos
aceitosos durante tres dcadas. El muestreo se hizo al final del perodo de tratamiento
y antes de aplicar lodos ms aceitosos. Las muestras fueron enviadas al laboratorio,
homogeneizaron y los suelos tamizaron a 2 mm. Las muestras representativas de
suelo y lodo aceitoso se presentaron a la caracterizacin qumica fsica (Mesa 1).
2.2. Experimentos Biorremediacin

Para la biorremediacin de suelos, dos niveles de contaminacin (1,5% y 6%) de

lodos aceitosos fueron probados en microcosmos abiertos y cerrados. El suelo
contaminacin fue ejecutado en el laboratorio en el experimento Empezar. Para cada
combinacin diferente de nivel de contaminacin y condicin microcosmos, los
siguientes tratamientos se llevaron a cabo en por triplicado:
1) La atenuacin natural (NA): lodos aceitosos suelo
2) La bioestimulacin BS (NP): aceitosas nutrientes con lodos de suelos alta
concentracin Aceitosas nutrientes lodos de suelo con:
3) Bioaumentacin BA (NP) consorcio bacteriano alta concentracin
4) La bioestimulacin BS (NEP): aceitosas nutrientes con lodos de suelos baja
concentracin Aceitosas nutrientes lodos de suelo con:
5) Bioaumentacin BA (NP) consorcio bacteriano baja concentracin
2.3. Consorcio bacteriano
En los experimentos bioaumentacin un consorcio bacteriano de 5 bacterias con
potencial de biodegradacin de lodos aceitosos y produccin de biosurfactantes
aislado directamente desde el lodo aceitoso (Stenotrophomonas acidaminiphila,
Bacillus megaterium y Bacillus cibi) y el suelo (Pseudomonas aeruginosa y Bacillus
cereus) era utilizado. Se identificaron las cepas basado en la secuenciacin parcial del
gen 16S rRNA (Cerqueira et al., 2011). El inculo bacteriano fue preparado a travs de
la transferencia con un hilo de platino del aislado (cultivo madre) a matraces que
contiene el caldo nutritivo estril, que se mantuvieron en un orbital agitador a 100 rpm,
30 C durante 24 h. A partir de entonces las clulas se centrifug a 4 C, 9.000 rpm
durante 15 min, se lav con estril solucin salina (0,85%) y los procesos se repiti 3
veces. Los las clulas se suspendieron en solucin salina estril (0,85%). El inculo
de cada aislado fue estandarizada y el consorcio aade a los suelos de cada unidad
experimental con el fin de inocular 108 clulas / g del suelo.
2.4. Diseo experimental
Los experimentos se llevaron a cabo durante 90 das en 1.0 L microscoms (frascos de
vidrio). En experimentos con microcosmos cerrado el matraces se mantuvieron bien
cerrado y en experimentos de microcosmos abiertos los matraces se mantuvieron sin
tapas. Los experimentos en microcosmos abiertos se realizaron para representar las
condiciones de campo, donde la humedad el ajuste fue ms frecuente. La cantidad de

suelo en cada matraz se calculado en base seca (200 g). Los suelos estaban
contaminados con 1,5% y 6% w / w de petroqumica lodo aceitoso.
En los experimentos de bioestimulacin y bioaumentacin, nitrgeno y el fsforo se
aadieron utilizando soluciones de (NH4) 2SO4 y KH2PO4 respectivamente. El C: N:
P se ajust a 100: 10: 1 y 100: 0,4: 0,2 para los experimentos que corresponden a alta
y baja cantidades de nutrientes. Los experimentos de control se llevaron a cabo con
suelo sin aplicar contaminantes y tratamientos.
La humedad del suelo se ajusta peridicamente aadiendo estril agua destilada,
despus de la ponderacin de los frascos, con el fin de mantener la capacidad de
campo en el 70%. La capacidad de campo se determin de acuerdo Silva et al.
(2007). Los suelos se giraron peridicamente para aumentar la velocidad de aireacin.
Se mantuvieron los matraces cubierta y expuesto a las variaciones de temperatura
para representar campo condiciones. La temperatura ambiente se control como una
funcin de hora.
2.5. Anlisis del suelo
Los suelos fueron muestreados a 0 y 90 das para la cuantificacin del total
hidrocarburos de petrleo (TPH) y despus de 7, 14, 30, 60 y 90 das para los anlisis
microbiolgicos.
2.5.1. Recuento de microorganismos que degradan hidrocarburos y totales
heterotrophics
El recuento de microorganismos en los suelos se realiz en cada de las muestras por
triplicado para cada tratamiento en el correspondiente muestreo momento por el
mtodo del Nmero Ms Probable ( NMP) ( Braddock y Catterall , 1999). Inicialmente,
se present la muestra de suelo a decimal de la dilucin con una solucin salina (0,85
%) en tubo de prueba y se homogeneizaron en un vrtice durante 30 s. Las diluciones
de microtitulacin de 24 pocillos a continuacin, se hicieron placas.
Para determinar el total de microorganismos hetertrofos 250 ml de medio de caldo de
soja trptico (TSB) se dispens en 96-as placas de microtitulacin, se le aadi 10 ml
de cada dilucin. Las placas se incubaron a 30 C durante 14 das y el microbiano
crecimiento se determin por turbidimetra. Para la determinacin de degradantes
hidrocarburos microorganismos mineral mnimo medio (MM1) se utiliz (composicin
en g / L: KCl, 0,7; KH2PO4, 3,0; NH4NO3, 1,0; solucin de micronutrientes, 1 mL / L
(MgSO4, 4,0; FeSO4, 0,2; MnCl2, 0,2; CaCl2, 0,2)) (Richard y Vogel, 1999) y una
solucin de cloruro de 2.3.5-tripheniltetrazolium (TTC) como indicador (Bento et al,

2005; Cerqueira y Costa, 2009). Despus de la inoculacin de cada dilucin de las

placas se inocularon con 1% de los lodos aceitosos. Las placas se incubaron a 30 C
durante 14 das y el microbiano crecimiento se determin por el desarrollo de un color
violeta (sealizacin reduccin del indicador a travs de la respiracin microbiana).
Los luego poblacin microbiana estimativa se determin utilizando MPN tablas (APHA,
1995).
2.5.2. La actividad respiratoria
La actividad respiratoria microbiana en microcosmos cerrado que contiene lodos
aceitosos suelo contaminado se evalu por el acumulativa liberacin de CO2 (Stotzky,
1965). Un sistema de captura de CO2 fue montado en cada microcosmos. El sistema
de captacin consista en un vaso de plstico que contiene 20 ml de NaOH 0,5 mol / L
suspendido en una marco de metal. Frascos sin suelo se utilizaron como blanco a fin
de cuantificar el CO2. Los matraces se mantenindose bien cerrado y slo abri
peridicamente para la determinacin de la respiracin basal. Actuar el anlisis, 1 ml
de BaCl2 30 % y 3 gotas de fenolftalena al 1% se aadieron a la NaOH. La cantidad
residual de NaOH se titul con HCl 0,5 mol / L. El gas carbnico producido se calcul
la ecuacin:
C-CO2 generated mg =Kg soil = (VB- VA)* MC/2 * M HCl - FC/m
Dnde: VB es el volumen en ml de HCl 0,5 mol / l utilizado para valorar el espacio en
blanco la prueba; VA es el volumen en ml de HCl 0,5 mol / L utilizado para valorar la
tratamiento; MC es la masa molar de carbono en g / mol; MHCl es la a concentracin
en mol / L de la solucin de HCl estandarizado; FC es el factor de correccin para la
molaridad (MHCl / MNaOH) y m es la masa en kg de suelo seco en el frasco.
2.5.3. Total de los anlisis de hidrocarburos derivados del petrleo
El Petrleo Hidrocarburos total se determinaron por la EPA 8015B mtodo / 3540. Las
muestras de suelo se extrajeron con hexano y diclorometano en 1 : 1,5 proporcin y
una alcuota del extracto ( 2 ml) se inyect en un cromatgrafo de gases ( Dani
GC1000) con detector de ionizacin de llama (FID) y una columna capilar VF- 5MS
( 30 m 0,53 mm 1,5 mm). Se utiliz nitrgeno como gas portador y la concentracin de
hidrocarburos se cuantific usando externa estandarizacin. El lmite de deteccin del
mtodo era 0,05 mg / kg.

2.5.4. Anlisis estadstico

Los resultados obtenidos se analizaron mediante la prueba de Tukey (comparacin
entre los valores medios) a un nivel de confianza del 95 % utilizando el programa
Statistica 7.1.
3. Resultados y discusin
3.1. Evaluacin El crecimiento microbiano
La poblacin de microorganismos hetertrofos totales (TH) y hidrocarburos degradar
microorganismos ( HD ) se cuantificaron como en funcin del tiempo en los
experimentos de biodegradacin de suelos contaminados con 1,5% y el 6% de los
lodos aceitosos realizado en microcosmos abiertas (Fig. 1) y en el microcosmos
cerrados (Fig. 2). La bioestimulacin (BS) y bioaumentacin (BA) experimentos en
sistemas abiertos con la contaminacin de 1,5% y 6% mostr que se logr la mxima
poblacin de microorganismos TH y HD en un mximo de 30 das despus de su
procesamiento. La poblacin mxima de Se logr HT (10,3 0,0 log NMP / g) en 30
das en el experimento BS (NP) en suelos contaminados con un 6%. El mximo
poblacin de HD (8,6 0,0 log NMP / g) se logr en los experimentos: BS (NP) y
BA (NP) en suelos contaminados con 1,5% en 14 das y en el BA experimento (NP)
en contaminado suelos con 6% tambin en 14 das.
Los experimentos de bioestimulacin y bioaumentacin en cerrada microcosmos con
una contaminacin de 1,5% mostraron que el se logr poblacin mxima de
microorganismos TH y HD en un mximo de 30 das despus de su procesamiento.
En los suelos contaminados en 6%, el Adems de los nutrientes en cantidades
superiores mostr poblaciones mayores de TH en 60 y 90 das y de alta definicin en
30 y 90 das. En el Por otro lado, la aplicacin inferior de nutrientes mostr mximo de
TH y HD en un mximo de 30 das. El BA experimento (NP) en el 6% contaminacin
fue el que present la mayor poblacin de Microorganismos TH (10,54 0,0 log NMP /
g) en 30 das de procesamiento.
La poblacin mxima de microorganismos HD (9,38 0,0 log NMP / g) se logr en
experimentos BS (NP) en suelos en la contaminacin 6% en 7 das de procesamiento.
En todos los tratamientos aplicados a los microorganismos mostraron capacidad de la
tolerancia y el crecimiento en lodo aceitoso. En hidrocarburos contaminados
ambientes, la supervivencia de microorganismos despus de la inoculacin, el
contenido y la diversidad de las comunidades microbianas autctonos y el

agotamiento de los nutrientes son factores importantes que afectan a la tasa de

biodegradacin de contaminantes. La adicin de nutrientes puede afectar tanto la
velocidad y de la extensin de la biodegradacin de contaminantes orgnicos ya que
alteran la dinmica de la comunidad de las poblaciones microbianas heterotrficas
(DAS y Mukherjee, 2007; Machn-Ramrez et al., 2008).
Otro factor importante que afecta el metabolismo microbiano es la temperatura.
Condiciones de temperatura desfavorables pueden retrasar o inhibir el crecimiento y el
metabolismo de la microbiota locales resultantes en la eficiencia reducida del proceso
de biodegradacin y, por consiguiente la permanencia de este residuo por perodos
ms largos. En esto trabajo, la temperatura ambiente se control como una funcin
del tiempo y present una media de 27,5 C con un mnimo de 19,1 C entre 17 y 21
das y un mximo de 37,3 C entre 42 y 46 das (Fig. 3). Estos valores estn dentro del
rango ideal considerado para la efectividad de Landfarming que es 10e45 C (EPA,
2004).
3.2. La actividad microbiana Respiratorio
La actividad metablica de microorganismos se control por la medicin de la
respiracin microbiana en los suelos contaminados en el 1,5% y 6% con lodo aceitoso
se trat en microcosmos cerrados (Fig. 4). Todos los tratamientos aplicados en los
suelos contaminados en el 1,5% mostraron mayor produccin de CECO2 en la
primera transformacin de 30 das. Los altas tasas de mineralizacin diarias
ocurrieron en los tratamientos BA (NP) (282,4 8,8 mg / kg) y BS (NP) (305,9
8,5 mg / kg) en 10 das. En los tratamientos con menor tasa de nutrientes, la ms alta
la produccin se logr en el procesamiento de 3 das. Probablemente, en la inicial
perodo de proceso, las fracciones ms lbiles presentes en el lodo aceitoso puede
haber sido utilizado fcilmente como una fuente de carbono y energa para el
microbiota, ya que las poblaciones microbianas y mximos HD altas tasas de
mineralizacin se observaron en ese perodo. Tiene ha informado de que los
compuestos orgnicos con bajo peso molecular y las estructuras moleculares ms
simples se degradan preferentemente por muchos microorganismos, mientras que los
que tienen estructuras ms complejas como hidrocarburos policclicos aromticos con
ms de cinco benceno anillos presentan mayor resistencia al ataque microbiano
(Lpez et al.,2008). Marn et al. (2005) demostraron que las emisiones de CO 2
gradualmente disminuir mientras que las fracciones de hidrocarburos ms lbiles
desaparecen, restante slo la fraccin ms recalcitrante. Se verific que despus de
que el trigsimo da del acumulado Produccin C-CO 2 haba empezado a estabilizarse
para todos los tratamientos evaluados. Esto indica que la mineralizacin del lodo

aceitoso ocurrido notablemente en un perodo de 30 das. Ms all de procesamiento

de 70 das se observ una reduccin en la produccin de C-CO 2 en todos probados
tratamientos, indicando una posible inhibicin de la actividad catablica de los
microorganismos locales. Bioestimulacin y bioaumentacin tratamientos en
contaminados suelos en 1.5% presentaron valores de mineralizacin superior a la
tratamiento atenuacin natural al final del perodo. Mayor producciones de
acumulacin de C-CO2 despus del tratamiento 90 das ocurrido en el BA
experimentos (NP) (3010,1 63,9 mg / kg) y BS (NP) (2.825,9 55,7 mg / kg),
que difieren estadsticamente valores el tratamiento de la atenuacin natural (2014,5
36,7 mg / kg).
El perodo de produccin de alta C-CO2 en experimentos con suelos contaminados en
6% lodo aceitoso fue mayor que la de suelos contaminados en el 1,5%,
probablemente debido a la mayor cantidad de hidrocarburos para ser metabolizados y
competencia microbiana en la metabolizacin de los hidrocarburos.
La atenuacin natural, bioestimulacin y bioaumentacin tratamientos con menores
cantidades de nutrientes mostraron alta produccin durante 90 das. La produccin
mxima diaria C-CO2 ocurrido despus de un experimento BA 10 das (NP) (332,9
6,9 mg / kg) y en 7 das BS experimento (NP) (285,9 14,9 mg / kg). Los poblacin
mxima de microorganismos HD (MPN 9,38 0,0 log / se logr g) en suelos
contaminados en el 6% despus del procesamiento 7 das en el experimento BS (NP).
La adicin de nutrientes en cantidad inferior favorecido la mineralizacin durante todo
el proceso degradante mostrando una mayor produccin diaria en los pasos iniciales
del proceso. Probablemente, el paso inicial de CECO2 liberacin est relacionada con
la aliftico fraccin de hidrocarburos que corresponde a la fraccin ms lbil
presentado en el lodo aceitoso donde la mineralizacin mximo se verific. En estos
experimentos, es probable que la presente microbiota era capaz de degradar en
mayor cantidad del hidrocarburo aromtico fraccin que se caracteriza por ser
recalcitrante. Como seala Tahhan et al. (2011), a pesar de la degradacin alcano
partiendo casi de inmediato a la incubacin del suelo del aromtico compuestos se
degradan activamente en una etapa posterior en una escenario de la degradacin de
hidrocarburos mixta, probablemente porque alcanos son fuentes de carbono
preferenciales hasta que los microorganismos se capaces de utilizar ambos alcanos y
compuestos aromticos. Adems, aromtico compuestos son ms fuertemente
adsorbidos por el suelo que alcano, lo cual hace que su degradacin ms lenta. Debe
tenerse en cuenta que junto con la sorcin, la baja solubilidad y por lo tanto la baja

biodisponibilidad constituye un paso limitante en la biodegradacin de HAP (Tahhan et

al., 2011).
En tratamientos en los que se aadieron cantidades ms altas de nutrientes, una se
observ una reduccin en la produccin de C-CO2 despus de 54 das cuando se
compara a la atenuacin natural. Producciones diarias mximas para la BS
tratamientos (NP) (271,2 36,7 mg / kg) e BA (NP) (266,5 14,0 mg / kg) se
produjo en 38 y 33 das, respectivamente. Adems se observ que la atenuacin
natural mostr mayor tasa de mineralizacin de que los tratamientos donde
cantidades de nutrientes ms altos fueron agregados (p <0,05). Un comportamiento
similar se observ para la tasa de mineralizacin en el trabajo realizado por Tahhan y
Abu-Ateih (2009), donde se observ efecto inhibitorio de los nutrientes aadidos
(NH4NO3 y KH2PO4) en la mineralizacin de TPH del lodo aceitoso. Desde nutrientes
se aadieron como relacin del carbono aadido, la inhibicin fue el ms grande con
el ms alto de tratamiento TPH. Esto podra atribuirse a una posibilidad de inhibicin
de la biodegradacin por altas concentraciones de nutrientes, donde los nutrientes
pueden inhibir los microorganismos que se adaptan a una ambiente del suelo
originalmente oligotrfico.
La adicin de consorcio bacteriano mostr una mayor mineralizacin las tasas en
comparacin a los tratamientos de bioestimulacin. Esta muestra la capacidad de los
microorganismos aadidos para contribuir a la aumento de la tasa de mineralizacin
en diferentes fracciones de hidrocarburos presentes en el lodo oleoso. Las bacterias
en el consorcio eran aislado del suelo landfarming y desde el lodo aceitoso estudiado
y seleccionado en medio lquido de acuerdo con el hidrocarburo capacidad de
degradacin y produccin biotensioactivo. Los aislamientos mostr la capacidad de
crecimiento y mineralizacin en contaminados suelos en 1,5% y 6%. Segn Nasseri et
al. (2010) el uso de se prefiere microbiota nativa para bioaumentacin ya que estos
microorganismos tienen una mayor capacidad de adaptacin a los contaminantes de
microorganismos exgenos y microorganismos modificados genticamente que puede
conducir a la transferencia de genes, lo que es indeseable (Nasseri et al., 2010). El
uso de consorcios microbianos puede ser interesante cuando un aumento de la tasa
de biodegradacin y la extensin de los hidrocarburos que constituyen el lodo aceitoso
se requiere, en vista de su compleja composicin de alcanos, compuestos aromticos,
fracciones de resina y asfltenos. Poblaciones mixtas con un Se requiere amplia gama
de capacidades enzimticas y co-metabolismo para la mineralizacin del lodo aceitoso
a diferencia de microorganismos individuales, que son capaces de mineralizar slo un
rango limitado de sustratos de hidrocarburos (Gallego et al, 2007;.. Lpez et al, 2008).

El nivel de contaminacin y de los tratamientos, as como la interaccin de estos

factores, mostr influencia en la produccin C-CO2 tarifa. En promedio, se obtuvieron
mayores tasas de mineralizacin en suelos contaminados en el 6%. Se puede
observar que la mejor condicin para obtener las tasas de mineralizacin de lodos
aceitosos ms altos en microscoms cerrados corresponde a bioaumentacin y
bioestimulacin tratamientos con la concentracin de nutriente menor en suelos
contaminados con el 6% de los lodos aceitosos.
3.3. La degradacin de hidrocarburos de petrleo totales
La tabla 2 muestra las tasas de biodegradacin alcanzado en diferentes tratamientos
en microcosmos abiertos y cerrados en los suelos contaminados con 1,5 % y el 6 %
de los lodos aceitosos. El anlisis de los sistemas, se puede observar que el aumento
de la biodegradacin las tasas se obtuvieron utilizando los microcosmos cerrados (p <
0,05). Los microcosmos cerrados presenta el mejor control de prdidas abiticos, as
como un mejor control de la humedad del suelo como algunas ventajas. Durante el
periodo experimental se ha verificado que los microcosmos abiertos presentan una
mayor tasa de evaporacin del agua, requieren perodos ms frecuentes de
correccin de humedad con el fin de mantener el suelo con 70 % de la capacidad de
campo. En una biorremediacin procesar la humedad del suelo debe mantenerse
entre 50 % y 80 % de la capacidad de campo a fin de obtener las tasas de
degradacin ptimas (Rizzo et al., 2006). La biorremediacin en microcosmos
abiertos, como en el caso de landfarming, tiene como principal desventaja la influencia
de las condiciones ambientales tales como la temperatura y la humedad, que limitan
las condiciones para la actividad microbiana. Considerando que en el sur de Brasil, las
estaciones se caracterizan por grandes climtica variaciones, que muestran extremos
de temperatura y perodos con predominio de lluvias o sequas, es posible decir que el
sistema abierto no muestra regularidad en la eficiencia degradante durante todo el
ao. Debe tenerse en cuenta que la reduccin de la humedad afecta negativamente el
metabolismo microbiano, el microorganismo el movimiento y el transporte de
nutrientes en el suelo. Por otro lado, una exceso de humedad limita el transporte de
oxgeno en el suelo (Rizzo et al., 2006).
El nivel de contaminacin aplicado mostr influencia en el aceitoso velocidad de
biodegradacin de lodos (p <0,05) con la contaminacin 6% mostrando en promedio
una tasa de biodegradacin superior en comparacin con La contaminacin 15%.
Teniendo en cuenta los dos sistemas y dos contaminacin niveles, en promedio, la
mayor degradacin se produjo en Tratamientos BS (NP) y BA (NP), seguido por los
tratamientos de BA (NP) y BS (NP) en sistema cerrado y la contaminacin del

6%. Se observ que las proporciones de nutrientes de C: N: P de 100: 0,4: 0,2

favorecido, en promedio, el TPH lodos aceitosos tasa de degradacin. El radio C: N: P
de 100: 10: 1 tambin mostr ser eficaz para hidrocarburos degradantes. Segn Adoki
y Orugbani (2007), la bacteria requiere aproximadamente 10 partes de carbono y 1
parte de nitrgeno durante un crecimiento eficiente. Si esta relacin se hace ms alta,
por ejemplo, 100: 1 o 1000: 1 como resultado de la contaminacin ambiental por el
petrleo productos, el crecimiento y la utilizacin de fuente de carbono sern
retardados. Este hecho no se evidenci en el presente estudio. La introduccin de
microorganismos mostr, en promedio, inferior las tasas de biodegradacin que los
tratamientos que contienen slo en la adicin de nutrientes, sin embargo no hubo
diferencia significativa entre tratamientos. En estudios realizados por Mariano (2006),
la bioaumentacin con el consorcio bacteriano fue la variable presentando el efecto
positivo ms pequeo en las tasas de biodegradacin. Segn este autor, la
bioaumentacin podra no presentar efectos positivos o efectos marginales poco
presentes en los hidrocarburos biodegradacin ya que la inhibicin puede ocurrir entre
las cepas utilizadas en el consorcio integrado artificialmente. De acuerdo con Hamed
et al. (2010), la inhibicin de las cepas inoculadas en ambientes naturales puede
ocurrir porque son susceptibles a los competidores presentes en el medio ambiente,
Adems de los efectos txicos causados por los metabolitos intermedios producida
por algunas cepas. Adems, los microorganismos pueden metabolizar otros
compuestos orgnicos en detrimento del contaminante o ser incapaz de percolacin
del suelo hasta llegar a la puntos de contaminacin (Mariano, 2006). El xito a
microbiana inculos uso requiere que los microorganismos alcancen los
contaminantes, sin embargo, la adsorcin fsica de las partculas de suelo o la
filtracin a travs de pequeos poros puede limitar el microorganismo transporte. En
estudios realizados por Machn-Ramrez et al. (2008), donde los diferentes
tratamientos de biodegradacin de lodos aceitosos contaminados Se estudiaron los
suelos, la eliminacin de TPH fue mayor cuando aplicado a la bioestimulacin de la
atenuacin natural y la bioaumentacin con consorcios endgenas y exgenas, siendo
la concentracin de TPH inicial reducido de 133.000 a 93.000 mg / kg de suelo en 15
das de tratamiento de bioestimulacin.
El porcentaje de biodegradacin vari de 52,7 0,5 % (NA en microcosmos abiertas
contaminadas en el 1,5%) a 84,1 0,9 % (BS (NP) en microcosmos cerrados
contaminado en 6 %). La adicin de nutrientes y microorganismos a los suelos
contaminados en el 1,5 % de los lodos aceitosos, en microcosmos abiertas y cerradas
mostraron a favor de biodegradacin, cuando en comparacin con los tratamientos de
atenuacin naturales. Esto evidencia que la deficiencia de nutrientes y / o baja

actividad de degradacin de lo local microbiota fueron en parte responsables de la

persistencia de aceite en el suelo contaminado. Teniendo en cuenta la tasa de
reduccin de TPH de cada bioestimulacin y tratamiento bioaumentacin en relacin
con la atenuacin natural tratamiento dentro de cada bloque experimental, el
degradante superior las tasas se observan para los suelos contaminados con la ms
baja ensayada concentracin (1,5%) en microscoms cerrados, siendo el mximo
alcanzado de 15.2% en BS (NP). Un comportamiento similar fue observado por
Tahhan y Abu-Ateih (2009), quien comprob que la eficiencia en Eliminacin TPH de
lodos aceitosos en diferentes concentraciones (44.2, 22.2, 11.1 g / kg de TPH) en
suelos durante 120 das fue mayor para el menor tasa de lodos aceitosos aplicada.
Por otro lado, contaminado suelos en el 6% de lodos aceitosos en sistema cerrado
mostraron una mayor reduccin tasa (9,3%) en la concentracin de TPH en
comparacin con la atenuacin natural ocurrido en el BS (NP). El BS (NP) y BA
(NP) Tratamientos en suelos contaminados en el 6% en sistemas cerrados
mostraron menor tasa de reduccin (3,9% y 4,7%, respectivamente) en la
concentracin de TPH, as como una menor tasa de mineralizacin.
3.4. Comportamiento de las tasas de actividad de degradacin microbiana
En los suelos contaminados en el 1,5% de los tratados en microcosmos abiertos, el
Adems de los nutrientes en cantidades inferiores favoreci el crecimiento de HD
microorganismos, tanto en experimentos BS y BA despus de 2 semanas, restante en
un mayor nmero hasta el final del cultivo cuando en comparacin con los
experimentos que mostraban ha favorecido la TH poblacin. La tratamientos BS (NP)
y BA (NP) mostraron mayores tasas de degradacin, llegando a 67,2 4,2% y 58,7
0,3% de los TPH reduccin, respectivamente. En este caso, se produjo la degradacin
probablemente durante todo el perodo experimental como se indica por la predominio
de HD despus de 30 das. Por otra parte para la BS (NP) y BA (NP), la
degradacin de los TPH podra haber ocurrido en el primeros pasos fueron la
poblacin de HD fue mayor. La condicin de mayores cantidades de nutrientes
favorecido el desarrollo de TH que muy probablemente compitieron por la fuente de
carbono y nutrientes disponible con el HD, terminando por predominando en el medio
ambiente. Como consecuencia de ello, una velocidad de biodegradacin menor era
TPH obtenido. Uno de los principales temas de la mayora de los aislados utilizado en
la biorremediacin de suelos contaminados con petrleo es su incapacidad de
competir con la poblacin autctona del suelo cuando aplicada en el campo (Adoki y
Orugbani, 2007). En el suelo contaminado en el 1,5% de los tratados en sistemas
cerrados, la Adems de los nutrientes en cantidades inferiores favoreci el crecimiento

de la HD en tratamiento con el consorcio (BA (NP) restante con una mayor nmero
despus de 30 das. La adicin de grandes cantidades de nutrientes promueve una
cada a lo largo del tiempo de tratamiento con BA y favoreci el crecimiento en los
pasos iniciales con BS. Se obtuvieron los ms altos ndices de degradacin en BS
(NP) (74,9 2,5%) y BA (NP) (74,3 0,0%), que no mostr ninguna diferencia
significativa entre los tratamientos, pero mostr diferencias significativas con la
atenuacin natural. Tratamiento con variaciones en cantidad de nutrientes mostraron
mineralizacin similares tasas (p> 0,05). Segn los anlisis de la liberacin que C-CO 2
se observ que con las cantidades de nutrientes probados Este estudio No mostrar
diferencia estadstica en la tasa de mineralizacin. En los suelos contaminados en el
6% tratada de microcosmos abiertos, el Adems de los nutrientes en cantidades
inferiores favoreci el crecimiento de HD hidrocarburos en el perodo inicial. Sin
embargo, para la BA (NP) una disminucin del crecimiento sostenido se verific, en
especial despus de 8 semanas, lograr el mismo nmero de microorganismos
presentes en el HD NA tratamiento. En este tratamiento, la tasa de biodegradacin
TPH ms pequea se observ, sin embargo no haba diferencia significativa en
comparacin con el otro. Los nutrientes como el nitrgeno y el fsforo fueron
probablemente limitando debido a la presencia de una mayor cantidad de
microorganismos y degradar carbono aadido. La adicin de ms grande
Cantidades de nutrientes mostraron pequea variacin en la poblacin HD en BA
tratamiento (NP). Sin embargo, con BS (NP) un crecimiento sostenido en HD
poblacin ocurri alcanzando un mximo en 30 das. En los suelos contaminados en
el 6% de los tratados en sistemas cerrados de la adicin de baja de nutrientes
cantidades favorecieron el crecimiento de HD llegar poblaciones mximas de 9,38
0,0 log NMP / g y 8,38 0,0 log MP / g en 7 y 14 das de tratamiento BS (NP) y BA
(NP), respectivamente. La adicin de grandes dosis de nutrientes muestra, en
promedio, poblaciones HD ms pequeos en comparacin con los experimentos con
dosis ms bajas de nutrientes. En estos tratamientos el mximo HD poblaciones se
obtuvieron en 90 das para BS (NP) (5,9 0,0 log NMP / g) y en 30 das para BA
(NP) (7,38 0,10 log NMP / g). Esta efecto inhibidor tambin se evidenci en la
medicin de la actividad microbiana que se produjo una menor tasa de CECO2
liberacin en comparacin con NA, BS (NP) y BA (NP). Sin embargo, segn a los
anlisis cromatogrfico, no hubo diferencia significativa fue observada entre las tasas
de biodegradacin en tratamientos BS (NP) BA (NP) en comparacin con el BS
(NP) y BA (NP), que present las tasas de biodegradacin de 84,1% y 81,3%
respectivamente. Chaneau et al. (2005) comprob que el nivel de fertilizacin
adecuada aumento de las tasas de biodegradacin de petrleo crudo en los suelos

durante 150 da, mientras que la fertilizacin excesiva tuvo un efecto negativo. Los
mxima biodegradacin alcanzado fue del 62% en suelos con baja tasa de fertilizacin
(850 mg N / kg de NH 4NO3, 450 mg P / kg de Na 2HPO4 y KH2PO4 y 1500 mg / kg de
KH2PO4), mientras que la atenuacin natural contribuido a 47% de degradacin
(Chaneau et al., 2005).
En este trabajo, el uso de nutrientes y consorcio bacteriano dado lugar a un
incremento de la tasa de biodegradacin de lodos aceitosos en suelos alcanzando un
mximo de 84,1 0,9% y la degradacin de TPH en 90 procesamiento de das en los
suelos contaminados en el 6% y el 74,9 2,5% en suelos contaminados en el 1,5%.
Los valores ms bajos de la biodegradacin eran encontrados en otros trabajos. En
las obras realizadas por Vasudevan y Rajaram (2001), estudiando el efecto de aadir
los nutrientes y la consorcio microbiano formado por Acinetobacter, Pseudomonas,
Bacillus, Flavobacterium, Corynebacterium y Aeromonas, en el degradacin de suelos
contaminados con 5% de lodos aceitosos durante 90 da se encontr un mximo de
65% de la degradacin en el tratamiento que contiene nutrientes inorgnicos y
consorcio microbiano. Liu et al. (2010) estudiaron la bioestimulacin con
microorganismos endgenos en suelos contaminados con 241 000 mg / kg de lodos
aceitosos durante 360 das, alcanzando un mximo de 58,2% de degradacin en el
contenido de TPH del lodo aceitoso. Marn et al. (2005), el estudio de la
biorremediacin de refinera de lodos aceitosos por landfarming, observ que la
degradacin de hidrocarburos de 80% se produjo en 11 meses siendo la mitad de esta
reduccin durante los primeros tres meses.
4. conclusin
La bioaumentacin y bioestimulacin mostraron un incremento sobre la degradacin
de TPH de lodos aceitosos. Biodegradacin Superaron las tasas que se obtuvieron
usando un microcosmos cerrado y 6 % de la contaminante. Los nutrientes aadidos
no mostraron efecto sobre la biodegradacin tarifa. Sin embargo, el exceso caus la
inhibicin de hidrocarburo la mineralizacin en comparacin con otros tratamientos.
Por lo tanto, el estudio demostr la posibilidad de tratar ms grande cantidades de
lodos aceitosos utilizando menores cantidades de nutrientes y consorcio bacteriano
pre- seleccionada. La posibilidad de tratamiento de lodos aceitosos en condiciones
cerradas puede considerarse, de acuerdo con nuestros resultados, el que mostr
mayor degradacin de TPH y mejor control de las condiciones ambientales.