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Resumen

La aplicacin tpica de agentes antioxidantes en heridas cutneas ha


llamado mucho la atencin. Las nanas partculas de oro (AuNPs),
galato de epigalocatequina (EGCG), y el cido -lipoico (ALA)
demostraron tener efectos antioxidantes y podran ser tiles en la
curacin de heridas. Se estudiaron sus efectos en la proliferacin
celular Hs68 y HaCaT y en ratn cicatrizacin de heridas
cutneas. Tanto la mezcla de EGCG + ALA (EA) y AuNPs + EGCG +
ALA (AuEA) aument significativamente la proliferacin y migracin
Hs68 y HaCaT. Aplicacin tpica AuEA aceler la curacin de heridas
en la piel del ratn. La inmunotransferencia de tejido de la herida
mostr un aumento significativo del factor de crecimiento celular
endotelial vascular y la angiopoyetina-1 expresin de la protena, pero
ningn cambio de angiopoyetina-2 o CD31 despus de 7
das. Despus del tratamiento AuEA, CD68 expresin de la protena
disminuy
y
Cu
/
Zn
superxido
dismutasa
aument
significativamente en el rea de la herida. En conclusin, AuEA
aceler significativamente ratn de heridas cutneas de curacin a
travs de efectos anti-inflamatorios y antioxidacin. Este estudio
puede apoyar futuros estudios el uso de otros agentes antioxidantes
en el tratamiento de heridas cutneas.

Introduccin
Ha pasado bastante tiempo desde que el estudio de la cicatrizacin
de heridas atrajo la atencin del pblico, sobre todo en un momento
en que la dermatologa cosmtica y cuidado de la belleza son cada
vez ms apreciados. Mala cicatrizacin de las heridas ha dado lugar a
complicaciones
graves,
incluso
la
muerte,
en
todo
el
1
mundo. reacciones biolgicas anormales a la lesin cutnea
posteriores a la enfermedad, trauma y ciruga, inevitablemente,
puede dar lugar a complicaciones graves. De hecho, el proceso de
cicatrizacin de la herida es muy complejo e involucra a ms de un
factor fisiopatolgico. 2 Como sabemos, las poblaciones de clulas
predominantes en la piel de mamferos son los fibroblastos y
queratinocitos. Aparte de esto, el mecanismo de transduccin de
seales celulares que domina la cicatrizacin de heridas es muy
complejo y todava no se entiende completamente. Recientemente se
ha encontrado que los antioxidantes tales como galato de
epigalocatequina (EGCG) pueden tener un papel importante en la
cicatrizacin de heridas. 3Adems, desde un punto de vista clnico, la
razn principal de la aplicacin tpica es popular es que puede
reducir el efecto adverso de un medicamento de la el cuerpo humano
y los rganos internos. En experimentos recientes, tanto en
animales 4 y los seres humanos, 5 la aplicacin tpica de factores de
crecimiento especficos ha demostrado ser muy eficaz.
Recientemente ha habido un gran progreso en la aplicacin de la
nanotecnologa en la ciencia de los materiales; la nanotecnologa
tambin ha sido ampliamente utilizado en la tecnologa
biolgica. 6 Debido a sus propiedades nicas, nanopartculas de oro
(AuNPs) se pueden aplicar extensamente en la transferencia de genes
y el transporte medicamento. 7 se han propuesto coloidales AuNPs
para diversas aplicaciones biomdicas debido a su superficie nica,
electrnico y propiedades pticas. 8 En los ltimos aos, como
resultado de la interaccin nano-bio con lpidos de la piel, AuNPs han
demostrado ser capaz de abrir el estrato crneo y penetrar la barrera
de la piel. 9 En consecuencia, la aplicacin tpica de antioxidantes
junto con nanogold para mejorar la absorcin es el tema principal de
este estudio.
EGCG, un compuesto que se encuentra ampliamente en el t verde,
es un antioxidante tpico.Recientemente se ha descubierto que la
catequina tiene muchos efectos biomdicos tales como antioxidantes
y propiedades anticancergenas. 10 EGCG es un polifenol que existe en
abundancia en ts no fermentados. Varios estudios epidemiolgicos
han vinculado el consumo de t con un menor riesgo de
enfermedades cardiovasculares. 11 Sin embargo, el mecanismo de

facilitacin del EGCG de cicatrizacin de heridas complicaciones


cutneas sigue siendo poco clara. Otro potente antioxidante es el
cido -lipoico (ALA), que se puede encontrar en los alimentos de
origen animal como la carne y el hgado. 12 ALA fue descubierto en
1951 como una molcula que ayuda en la transferencia de acil-grupo
y como una coenzima en el ciclo de Krebs. Adems de eliminar el
perxido, ALA es un potente antioxidante lipoflico tanto in vitro como
in vivo. 13 ALA puede interactuar con otros antioxidantes y fortalecer
sus capacidades de antioxidacin (por ejemplo, vitaminas C y
E). Como resultado, ALA ahora se utiliza como un suplemento
diettico en el envejecimiento, la diabetes mellitus, y vascular y las
enfermedades neurodegenerativas. 14Muy pocos intentos se han
hecho en la mezcla de EGCG con ALA en los estudios de los procesos
de cicatrizacin de heridas cutneas. Un estudio reciente demostr
que una formulacin liposomal AUNP mejorado la actividad
antioxidante de la vitamina C y la administracin tpica en la piel. 15
Las AuNPs combinado con EGCG y ungento ALA (AuEA) utilizado en
heridas cutneas todava no se conocen bien. Este estudio tiene como
objetivo determinar la frmula tpico ms efectivo para curar heridas
y desentraar su mecanismo mdica. En el presente estudio nos
proporcionan pruebas de que la aplicacin tpica de una mezcla de
AuNPs, EGCG, y ALA acelera la cicatrizacin de heridas en ratones
mediante un mecanismo que puede implicar acciones antiinflamatorias y antioxidacin en el rea de la herida. Adems, hemos
probado la hiptesis de que AuEA acelera la cicatrizacin de heridas,
aumentando la proliferacin y migracin de las clulas epidrmicas.

Mtodos
Preparacin y caracterizacin de AuNPs
AuNPs proporcionados desde Gold NanoTech (Taipei, Taiwn) se
prepararon por un proceso de epitaxia de haz molecular patentada
como sigue. AuNPs fueron producidos por la fabricacin fsica y no
contenan modificadores de superficie o estabilizadores. En pocas
palabras, el material a granel oro fue cortado o molido en el material
objetivo. Entonces el objetivo Au se vaporiza a nivel atmico
mediante un mtodo elctricamente gasificado al vaco. El vapor se
condensa en presencia de un gas inerte y luego aplicado para formar
AuNPs. Los tamaos AUNP pueden ser manejados de manera efectiva
en funcin
del tiempo de evaporacin y la corriente elctrica utilizada. Los AuNPs
se recogieron en una trampa fra y se centrifugaron para obtener el
producto final. La concentracin inicial de estos AuNPs se determin
mediante un espectrmetro de masas de plasma acoplado
inductivamente (PE-Sciex ELAN 6100 DRC; Perkin-Elmer, Waltham,
Massachusetts). Los tamaos de las diversas AuNPs se observaron
mediante un microscopio electrnico de transmisin JEOL JEM-1200
(Tokio, Japn) operado a 110 kV. La distribucin del tamao de la
AuNPs fue calculado por el software basado en ms de 100 partculas
en las imgenes. El (UV-VIS) absorbancia ultravioleta-visible de AuNPs
de diversos tamaos se midi por espectroscopa UV-vis (Hitachi U2000; Hitachi, Tokio, Japn). La carga superficial negativa de AuNPs
fue determinada por el potencial zeta (Zetasizer Nano-ZS, Malvern
Instruments, Worcestershire, Reino Unido). La estabilidad de las
AuNPs en el medio de cultivo celular con suero se examin por
microscopa electrnica de transmisin.Los dimetros de los AuNPs
utilizados fueron clasificados en 1-3 nm, 3-5 nm, y de 15-30 nm.

Cultivo celular
Fibroblastos de prepucio humano (Hs68) y clulas de queratinocitos
humanos (HaCaT) se cultivaron en medio Eagle modificado de
Dulbecco (Cambrex Bio Science, Walkersville, Maryland) que contena
suero bovino fetal al 20%, 100 mg / ml de penicilina, y 100 mg / ml de
estreptomicina (pH 7.6). Los cultivos se pasaron en alcanzar 80% de
confluencia, utilizando 0,05% de tripsina-EDTA (Gibco, Invitrogen,
Carlsbad, California), y el medio se cambi cada 2 das. Los

experimentos se realizaron en el paso 3-5 para los ensayos de


proliferacin celular y la migracin.

La cuantificacin de la proliferacin celular


La proliferacin de Hs68 cultivados y clulas HaCaT se midi
utilizando un ensayo colorimtrico. Las clulas fueron incubadas con
vehculo, 2,2 mM EGCG (E), 8 mM ALA (A), 2,2 mM EGCG + 8 mM ALA
(EA), AuNPs 1 ppm, o AuNPs + EGCG + ALA (AuEA) durante 48
horas. A continuacin, 10 ml de cido 3- (4, 5-dimetiltiazol-2-il) -2,5difenil-2H-tetrazolio (MTT) solucin (R & D Systems, Minneapolis,
Minnesota) se aadieron a cada pocillo, y las clulas se se incubaron
durante otras 4 horas a 37 C. Despus las clulas se lavaron tres
veces con solucin salina tamponada con fosfato (pH 7,4), el producto
de formazn insoluble se disolvi por incubacin con 100 ml de
detergente durante 2 horas. La absorbancia de cada pocillo se midi
en un lector de microplacas de ensayo de inmunoabsorcin ligado a
enzima a 570 nm.

Ensayo de la cicatrizacin de heridas cero celular

Hs68 cultivadas y clulas HaCaT se sembraron en placas de 60 mm y


se cultivaron hasta confluencia.Despus de 24 horas de privacin de
suero, la monocapa de clulas se somete a continuacin a un rasguo
herida mecnica inducida usando una punta de pipeta estril, y las
clulas se trataron con vehculo, E, A, EA, AuNPs, o AuEA durante 48
horas. Las clulas fueron fijadas en una solucin de paraformaldehdo
al 4% en tampn fosfato salino y se tieron con cristal violeta. Las
clulas en el rea de lesin se visualizaron bajo la ptica de contraste
de fase (10 objetivos), y se cont el nmero de clulas que haban
migrado a la zona cero libre de clulas inicialmente.

Heridas de grosor total y la medicin de la herida

Ratones BALB / c se obtuvieron a partir del Centro Animal


Experimental de la Universidad Nacional de Taiwn. Todos los ratones
se mantuvieron en una dieta de laboratorio y agua ad libitum
estndar. Todos los ratones fueron utilizados experimentalmente
cuando 8 semanas de edad en el momento de la herida. Los ratones

fueron anestesiados utilizando 2 a 2,5% vaporiza isoflurano inhalado,


y la piel dorsal fue limpiado con betadine. En condiciones estriles la
zona dorsal estaba totalmente depilado, y una sola herida lineal por
escisin de grosor completo (1 cm) fue creado en cada lado de la
parte trasera superior de cada ratn utilizando unas tijeras afiladas y
un bistur. La herida del lado izquierdo sirvi como control, y la herida
del lado derecho se trat con vehculo, 1 mg / g EGCG (E), 30 mg / g
de ALA (A), 1 mg / g EGCG + 30 mg / g de ALA ( EA), 0,07 mg / g
AuNPs, o AuEA pomada se aplica directamente al sitio de la herida
una vez al da en una forma ciega. Todos los ungentos se hicieron
con 2,5 ml de glicerol (Sigma-Aldrich, St Louis, Missouri), 1 ml Creagel
emulsionante (Primera Qumica, Taipei, Taiwn) y 45,5 ml de agua
bidestilada. Para determinar la eficacia de curacin diferente
ungento mediada, el tamao de la herida residual se mide desde el
rea de la herida sin cerrar despus de 3, 5 y 7 das de tratamiento
tpico utilizando software de clculo de Dino digital (AM3013T DinoLite Premier; AnMo Electrnica, Taipei, Taiwn) . Los ratones de cada
grupo fueron sacrificados en los das 1, 3, 5, y 7 despus de la herida,
y muestras de tejido de la piel de la zona de la herida fueron
extirpados en profundidad y atravesada de todos los ratones para
anlisis bioqumicos o H + E tincin histolgica. Las investigaciones
se ajustan a la "Gua para el Cuidado y Uso de Animales de
Laboratorio", publicado por los Institutos Nacionales de Salud y el
Comit de Cuidado Animal del Instituto de Ciencias Mdicas de la
Frontera, Universidad de Fu-Jen (A9658).

El anlisis de transferencia Western


Total de muestras de protena se mezclaron con tampn de muestra,
se hirvieron durante 10 minutos, separadas por 10% de sodio dodecil
sulfato de electroforesis en gel de poliacrilamida-bajo condiciones de
desnaturalizacin, y a electrotransferencia en membranas de
nitrocelulosa (Amersham Pharmacia Biotech / GE Health Care,
Buckinghamshire, Reino Unido). Las membranas de nitrocelulosa se
bloquearon en tampn de bloqueo, se incubaron con anticuerpos de
ratn a CD68, a Ang-1, Ang-2 para, a VEGF, a CD31 (Santa Cruz
Biotechnology, Santa Cruz, California), y la superxido dismutasa
(SOD) ( Abcam, Cambridge, Massachusetts), se lav, y se incubaron
con peroxidasa de rbano conjugada con anticuerpo secundario.Las
seales
se
visualizaron
por
deteccin
quimioluminiscente
intensificado.

El anlisis estadstico

Los datos se expresaron como media SEM. De Student t -test fue


utilizado para comparar las variables paramtricas entre los dos
grupos, y se utiliz el anlisis de varianza con un diseo de repeticinmedicin de los cambios de rumbo tiempo. La significacin estadstica
se evalu por Tukey-Kramer prueba de comparaciones mltiples
(GraphPad Software, San Diego, California). A P valor inferior a 0,05
fue considerado estadsticamente significativo.

Resultados
EA y AuEA mezcla se increment de queratinocitos y fibroblastos
proliferacin
Clulas HaCaT cultivadas o clulas Hs68 se trataron con vehculo,
EGCG, ALA, EA, AuNPs, o AuEA durante 48 horas. La incubacin con
EA o AuEA aument significativamente el nmero de clulas HaCaT
(Figura 1 , A ) y clulas Hs68 ( Figura 1 , B ). La incubacin con EGCG,
ALA, o AuNPs solo tambin aument la proliferacin celular pero no a
un grado estadsticamente significativo. Las tasas de proliferacin de
ambos tipos de clulas en el grupo AuEA fueron significativamente
mayores que los del grupo de EA. En la lnea celular Hs68,
encontramos que el nmero de clulas del grupo EA aument
significativamente tan pronto como 12 horas y continu aumentando
hasta 48 horas despus se sembraron clulas (datos no
presentados). Los diferentes tamaos de AuNPs no cambiaron
significativamente el efecto de la proliferacin de clulas del grupo
AuEA en cualquier lnea celular ( Figura 1 , C ). Estos resultados
sugieren que la mezcla de EA y AuEA aument la tasa de proliferacin
celular en el sistema de cultivo in vitro.

Figura 1.
EA y AuEA aumentar la proliferacin de las clulas HaCaT y Hs68. Clulas HaCaT cultivadas o clulas Hs68 se trataron con
vehculo (control), EGCG (E), ALA (A), EGCG + ALA (EA), AuNPs, o AuNPs + EGCG + Ala (AuEA) durante 48 horas. Despus
de EA y AuEA de incubacin, los nmeros de clulas HaCaT (A) Hs68 y (B) clulas aumentaron significativamente. (C) AuEA
con diferentes tamaos de AuNPs no cambi significativamente la proliferacin celular en las clulas HaCaT y Hs68. Las
barras negras indican el estudio clulas HaCaT. Las barras blancas indican el estudio clulas Hs68. Los valores se obtuvieron
a partir de seis experimentos independientes. P <0,01 en comparacin con el control

EA y AuEA aument la migracin de las clulas HaCaT y Hs68


La incubacin con EA o AuEA aument significativamente la migracin
de las clulas HaCaT ( Figura 2 , A) y clulas Hs68 ( Figura 2 , B ). El
nmero de clulas migradas inducidos por AuEA fueron
significativamente mayores que los inducidos por EA. Ni EGCG ni ALA
aumentaron la migracin celular. La incubacin con la mezcla de
AuEA (de 3 a 5 AuNPs nm) aument significativamente la migracin
de ambos tipos de clulas a un nivel superior a la observada para
cualquier otro grupo ( Figura 2 , C). Utilizamos AuNPs 5 nm para el
estudio adicional de animales. Estos datos sugieren que EA y
tratamiento AuEA no slo aumentaron significativamente de
queratinocitos y fibroblastos de la proliferacin celular, sino que
tambin aumentaron la migracin celular in vitro en sistemas de
cultivo celular.

La Figura 2.
EA y AuEA mejorar la motilidad de las clulas HaCaT y Hs68. Las monocapas de clulas cultivadas o clulas HaCaT Hs68
fueron heridos mecnicamente con una punta de pipeta de 200 ml estril despus del tratamiento con vehculo (control),
EGCG (E), ALA (A), EGCG + ALA (EA), AuNPs, o AuNPs + EGCG + ALA (AuEA). Imgenes del rea de la herida fueron
adquiridos 48 horas despus de la herida cero, y el nmero de clulas por campo que haban migrado a la zona de la herida
libre de clulas se determin para cada cultivo. Clulas HaCaT cultivadas (A) y Hs68 (B) clulas incubadas con EA y AuEA
migraron en nmeros significativos en el rea de la herida ( n = 6). (C) AuEA con de 3 a 5 nm AuNPs migraron en nmeros
ms altos que otros tamaos de AuNPs en ambos tipos de clulas. Las barras negras indican el estudio clulas HaCaT. Las
barras blancas indican el estudio clulas Hs68 ( n = 6).

Efecto de AuEA en el cierre de heridas


Para investigar el proceso de cicatrizacin en vivo, dos heridas de
espesor completo lineales fueron creadas en el dorso de los ratones
tratados con vehculo (control), AuNPs, EA, o AuEA. La aplicacin
tpica de EA y AuEA aument significativamente la tasa de
cicatrizacin de la herida sobre la de vehculo ( Figura 3 , A).La
cicatrizacin de heridas en el grupo AuEA estaba casi completo por 7
das despus de la lesin, mientras que las heridas de los ratones de
control an no se haban curado completamente. Ambos anchuras y
longitudes de heridas en ratones tratados con AuEA se redujo
significativamente en el da 7 despus de la lesin en comparacin
con los ratones control ( Figura 3 , B). No se observaron efectos
adversos del tratamiento tpico en el peso corporal, salud general, o
el comportamiento de los ratones. En las secciones histolgicas de

muestras de piel del grupo AuEA, infiltracin de neutrfilos y la


inflamacin se limitaron al sitio de herir en el da 7 ( Figura 4 ).

La

relacin

Figura 3.

entre AuEA y la
angiognesis

Figura 4.

Mediante la produccin de microvasos que proporcionan nutrientes y


oxgeno a las clulas de crecimiento drmicos, la angiognesis puede
jugar un papel crtico en la cicatrizacin de heridas. 16 VEGF ( Figura
5 , A ) y Ang-1 ( Figura 5 , B ) en los tejidos de la herida de los ratones
tratados con AuEA aumentado significativamente en el da 7 despus
de la lesin. Sin embargo, en el da 3 y 5 Ang-1 expresin de la
protena no se haba aumentado significativamente. Ang-2 de
expresin no mostr cambios significativos despus de 7 das ( Figura
5 , C). Adems, CD31 expresin de la protena se increment en 7
das tejido de la herida, pero no alcanz significacin estadstica
despus de la lesin de heridas en ratones tratados con AuEA ( Figura
6 , A).

La Figura 5.
Expresin de genes y efectos del tratamiento AuEA en rea de la herida relacionados con la angiognesis. El anlisis de
transferencia Western de tejido cutneo rea de la herida en diferentes puntos de tiempo despus del tratamiento
AuEA.Expresin de la protena VEGF (A) se increment significativamente desde el da 5 hasta el da 7 despus de la lesin
( n = 6). (B)angiopoyetina-1 (Ang-1) expresin de la protena fue significativa en el da 7 ( n = 6). (C) Angiopoyetina -2 (Ang-2)
expresin no cambi significativamente despus de la creacin de heridas cutneas ( n = 6). Las barras blancas indican el
tratamiento con vehculo. Las barras negras indican el tratamiento AuEA. P <0,01 en comparacin con el vehculo

La Figura 6.
CD31, CD68, y SOD1 expresin en tejido de la herida de ratones tratados con AuEA. Los ratones se trataron con vehculo o
AuEA para el nmero indicado de das despus de la lesin. Muestras de la herida se retir despus y se sometieron a anlisis
de inmunotransferencia. (A) la protena CD31 no difiri significativamente entre el vehculo y el tratamiento AuEA despus de la
lesin ( n = 6). (B) la protena CD68 disminuy significativamente despus del tratamiento AuEA desde el da 3 hasta el da 7
despus de la lesin ( n = 6). (C) Inmunotransferencias mostraron un aumento significativo del nivel de SOD1 en el tejido de la
piel desde el da 3 hasta el da 7 despus de la lesin ( n = 6). Las barras blancas indican el tratamiento con vehculo. Las
barras negras indican el tratamiento AuEA. P <0,01 en comparacin con el vehculo.

Los efectos de AuEA en la inflamacin de la herida y Cu / Zn


superxido dismutasa (SOD1)
Para examinar las posibles funciones de tratamiento AuEA en la
inflamacin de la herida, la expresin de CD68 se us como un
marcador de la infiltracin de monocitos. CD68 expresin de la
protena se redujo significativamente despus del tratamiento AuEA
desde el da 3 hasta el da 7 despus de la lesin ( Figura 6 , B ). La
expresin de SOD1, sin embargo, aument significativamente
despus de AuEA tratamiento (Figura 6 , C ). Estos resultados
indicaron que AuEA no slo reduce la inflamacin alrededor del rea
de la herida, sino tambin inhibi el estrs oxidativo despus de la
lesin cutnea.

Discusin
Alteracin de la cicatrizacin de heridas sigue siendo un importante
problema de salud en los pacientes de alto riesgo con diabetes,
supresin de la funcin inmune, o la vejez. Por el desarrollo de la
nanotecnologa, muchos nuevos nanomateriales con propiedades
nicas, tales como magnetismo, la electrnica y la fotnica estn
siendo cada vez ms explotados. Estudios anteriores mostraron que
AuNPs podran aplicarse teraputicamente para suministro de
frmacos o gen intravascular y percutnea. En este estudio hemos
encontrado que la aplicacin tpica de la mezcla de AuNPs, EGCG, y
ALA (AuEA) era mucho ms eficaz que el EGCG o ALA solo la
promocin de la proliferacin y la migracin de los fibroblastos
drmicos o queratinocitos. La aplicacin tpica de AuEA tambin se
aceler de manera efectiva la curacin de heridas y aumenta la
restauracin de las estructuras normales de tejido drmico y
epidrmico en las reas de heridas de ratn. Estos resultados apoyan
el papel potencial de AuNPs como un compuesto adyuvante en el
tratamiento de heridas cutneas.
El efecto de EGCG y ALA en la curacin de heridas cutneas se
demostr en estudios anteriores. EGCG induce la diferenciacin de
miofibroblastos y crecimiento de tejido conjuntivo de la expresin
gnica de los factores y reduce la expresin del gen de colgeno de
tipo I en ratn heridas cutneas. La aplicacin tpica de polifenoles
del t verde aument significativamente la curacin de las heridas
dao fotoqumico en la piel del ratn inducida por psoraleno y
radiacin ultravioleta A .ALA suplementacin en combinacin con la
terapia de oxgeno hiperbrico downregulated las citoquinas
inflamatorias en las heridas que no sanan de sujetos humanos. En
ratas con diabetes inducida por estreptozotocina, pretratamiento
intraperitoneal con 100 mg de cido / kg lipoico (LA) mejor la
cicatrizacin de heridas por abrasin posteriormente inducidos. De
acuerdo con estos hallazgos, una combinacin de EGCG y ALA
tambin mostr efectos beneficiosos sobre la curacin de heridas del
ratn en nuestros estudios. Un estudio reciente demostr que la coadministracin con AuNPs permite la entrega percutnea de frmacos
de protenas. Sugerimos que el ALA como antioxidante tambin
aumenta la actividad antioxidante de EGCG. Adems, AuNPs puede
aumentar la absorcin mezcla especfica travs de la piel mediante la
apertura de la capa crnea de forma transitoria. En consecuencia,
AuEA result en la herida beneficiosos efectos en tanto in vitro como
en estudios in vivo de curacin.
La relacin mecanicista entre la angiognesis y la curacin de la
herida ha sido el centro de muchas investigaciones. Literatura clnica
reciente mostr que la administracin de bevacizumab afecta a la

curacin de la herida de la pared torcica. Esto sugiere de nuevo que


la angiognesis tiene un papel importante en los procesos de
cicatrizacin de heridas. Sin embargo, los efectos antiangiognicos de
EGCG y ALA se muestran en los estudios anteriores. Estudios
anteriores tambin demostraron la funcin antiangiognica de EGCG
en muchas lneas celulares de cncer. EGCG inhibe la expresin de
VEGF, Ang-1, Ang-2 y protenas en clulas de carcinoma de prstata
humano.El uso tpico de EGCG disminuy la induccin de VEGF y la
expresin del factor inducible por hipoxia 1 en la piel humana.
inyeccin intraperitoneal de 60 mg / kg R - (+) -. ALA reduce Ang-2 y
VEGF expresin en la retina diabtica de rata. En ciertos estudios, las
dosis no txicas de LA no mostraron inhibicin del crecimiento en las
clulas endoteliales tumorales o Estos resultados controvertidos
pueden indicar que las dosis de EGCG y ALA determinar los efectos
antiangiognicos. Los efectos antiangiognicos de AuNPs tambin se
muestran en varios estudios. AuNPs bloqueado autofosforilacin
inducida por VEGF de los receptores de VEGF-2. La inyeccin
intravtrea de AuNPs inhibi significativamente la neovascularizacin
retinal en un modelo de ratn de retinopata del prematuro. AuNPs
tambin inhibi la proliferacin de las clulas endoteliales retinianas
tratadas con VEGF mediante el bloqueo de las vas de sealizacin
Src. Esos estudios indican que las dosis de estos compuestos
Determinar los efectos de la angiognesis o antiangiognesis. En
nuestro estudio la combinacin de EGCG, ALA, y AuNPs en
concentraciones especficas no aument significativamente la
angiognesis en el nivel molecular en el rea de la herida cutnea del
ratn.
El estrs oxidativo se ha demostrado ser perjudicial para mltiples
procesos celulares en la cicatrizacin de heridas.
Los efectos anti-inflamatorios y antioxidacin de EGCG y ALA se
demostraron en los estudios anteriores. Los datos previos han
demostrado efectos protectores de EGCG y un antioxidante natural
clsico ALA contra el estrs oxidativo y el envejecimiento.EGCG se ha
demostrado que tiene efectos antiinflamatorios potentes. La
administracin oral de 1.200 mg de LA a pacientes con esclerosis
mltiple result en anti- significativa efectos inflamatorios mediante
la activacin del monofosfato de adenosina / protena quinasa A
cclico cascada de sealizacin. Compuestos de oro tambin han
recibido mucha atencin como un agente anti-inflamatorio debido a
su capacidad para inhibir la expresin de NF-kappa B y reacciones
inflamatorias posteriores. Compuestos de oro son eficaces en temple
especies reactivas de oxgeno en una forma dependiente de la
dosis. AuNPs catalizadas oxidacin de NADH a NAD, mejoran la
actividad antioxidante de la vitamina E, disminucin de especies
reactivas de oxgeno inducidas en una lnea celular de hepatoma, y la
formacin de osteoclastos inhibe inducida por el activador del

receptor de ligando NF-kappa B en los macrfagos derivados de


mdula sea. En nuestro estudio, la disminucin de la expresin de
CD68 y el aumento de la expresin de SOD1 alrededor del rea de la
herida sugieren que los efectos anti-inflamatorios y antioxidantes de
AuEA pueden tener un papel en la cicatrizacin de heridas cutneas
de ratn.
En conclusin, hemos demostrado claramente que AuEA aument
Hs68 y HaCaT proliferacin de clulas y la migracin. Por otra parte,
nuestro estudio proporciona informacin sobre la accin molecular de
AuEA en un modelo de cicatrizacin de heridas cutneas ratn. Este
estudio mostr que AuNPs combinado con EGCG y ALA aceleran
significativamente la curacin de heridas cutneas en ratones. Las
AuNPs carga negativa acumulada en los rganos ms AuNPs carga
positiva despus de la administracin oral en un modelo de rata. Se
necesitan ms estudios sobre AuNPs carga positiva para confirmar los
efectos de la administracin percutnea. Sin embargo, nuestros
resultados proporcionan una base para el desarrollo futuro de la
mezcla AuNPs con otros agentes antioxidantes en el tratamiento
tpico de las heridas cutnea

Bibliografa
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