MATERIALES:

*Medios de cultivo: placas petri de agar almidon, agar gelatina, agar casena,
agar grasa.
*asa kolle
*mechero
*cultivos de microorganismos ( staphilococus, bacillus, echirichia coli), de 18
horas.
PROCEDIMIENTO:
*Con un plumn marcador dividir la base de la placa en cuatro secciones,
enumerarlos como I, II, III, IV.
*Utilizando la aguja de kolle, colocar una estria de cada cultivo en un
cuadrante. Dejar el primer cuadrante como control.
*Invertir las placas e incubar a 37C por 18 a 24 horas.

Para poder mejor , la parte metabolizada del microorganismo en las placas

petri podemos
ayudarnos de contrastes.
agar

sustrato

Agar
almidon
Agar
gelatina
Agar
casena
Agar grasa

Almidon
Colgeno
Casena
Triglicrid
os

solucion de
revelado
Lugol

RX halo de
hidrolisis
Transparente

Regin no
hidrolizada
Azul

HgCl2 ac.
Actico(3%)
HgCl2, ac
actico(3%)
CuSO4

Transparente

Opaco
blanquesino
Opaco
blanquesino
Sin cambios

Transparente
Turquesa

RESULTADOS:
Resultados Teoricos:
microorganis
mo
Staphylococ
cus aureus
(gram+)
Escherichia
coli
(gram-)
Bacillus sp.
(gram+)

Agar almidon

Agar caseina

Agar gelatina

Agar grasa

No produce
amilasa

Produce
caseina

Producen
proteasas

Produce
lipasa

No produce
amilasa

No produce
caseina

No produce
proteasa

No produce
lipasa

Produce
amilasa

Produce
caseina

Producen
proteasas

No produce
lipasa

Resultados experimentales:
microorganis
mo
Staphylococ
cus aureus
Escherichia
coli

Agar almidon

Agar caseina

Agar gelatina

Agar grasa

1mm

Muestra
contaminada
Muestra
contaminada

1cm

5mm

No presenta

Muestra
contaminada

Bacillus sp.

1cm

Muestra

2cm

Muestra

3mm

Control

No presenta
contaminacio
n

contaminada
Muestra
contaminada

No presenta

contaminada
Muestra
contaminada

DISCUSIN DE LOS RESULTADOS:

Hidrlisis del almidn:
Se inocularon con la placa con Agar y almidn al microorganismo, estos fueron
uno gram positivo y negativo.
El gram negativo Escherichia Coli y positivo el Bacillus Cereus y
Staphylococcus aureus , a ambos se le agreg una solucin de lugor, estos
despus de haberla incubado a temperatura de 37 C, en ambos lados hubo
desarrollo de la placa.
La solucin de Lugr se le agrega para observar la reaccin de ambos
microorganismos y la capacidad que estos microorganismos tienen para
producir una enzima que hidrolice al almidn. La observacin fue que el bacilo
cereus fue resistente al colorante o sustancia y pudo hidrolizar al almidn
formndose un halo transparente alrededor del almidn.
Mientras que el Escherichia Coli y Staphylococcus aureus reaccionaron
con la sustancia agregada (lugor), por lo que podemos deducir que al momento
de la inoculacion se contaminaron, y hubo una degradacin de almidon
minima como se observa en los resultados.
Hidrlisis de la Leche:
Despus de inocular los microorganismos Staphylococcus aureus, Bacilo
Cereus y Escherichia Coli, lo incuban a 37 C, aqu se emple una placa de
agar con leche y se dividi en dos, uno con microorganismo gram positivo(B.
Cereus , Staphylococcus aureus ) y otro con gram negativo (E. Coli).
Despus de pasadas las 24 horas, se observ una transparencia alrededor del
microorganismos (Bacilo Cereus, Staphylococcus aureus) o de la colonia
que hidrolizan la casena.
Una vez hidrolizada, la casena se convierte en sus aminocidos componentes,
los cuales transmiten la luz en vez de reflejarla como la casena coloidal, este
ltimo es caso del microorganismo negativo E. Coli que no hubo reaccin de
desclarificacin con la protena, por que no produce la caseasa.

Tericamente debi ocurrir pero por un mal manejo en la inoculacion de los

cultivos, dejar expuesto el agar a la interperie, etc. Se contamin y no dieron
los resultados esperados

Hidrlisis de la Gelatina:
En este experimento se inocularon tres microorganismos. Escherichia Coli
(gram -) y bacilo Cereus, Staphylococcus aureus (gram +), despus se
colocaron a temperatura ambiente.
En los resultados a las 24 horas, el tubo que contena la siembra de E. Coli no
hidroliz, el gel se mantuvo gelificado.
El que contena la siembra de Bacilo cereus y Staphylococcus aureus , si
hidrolizaron y dieron d positivo.
Tericamente y en la practica los resultados concuerdan por lo que se puede
decir que se hiz con el cuidado debido.

Hidrlisis de grasa:
El microorganismo Staphylococcus aureus(gram+), Escherichia Coli (gram
-) y bacilo Cereus se inoculan en el agar grasa, pasadas las 24 horas los
resultados sn los siguientes
Staphylococcus aureus(gram+), degrad el sustrato grasa formando un halo
de color turquesa gracias al contraste CuSO4, en la practica ocurri lo mismo,
ms las dems muestras se contaminaron posiblemente por un mal manejo a
la hora de inocular las muestras

CONCLUCIONES:

Concluimos que el microorganismo Staphylococcus aureus , puede

degradar la leche(casena), gelatina u otros productos que tengan como
fuente protenas(proteasas) y lipasas.
En caso de la Escherichia coli tiene como enzima lactasa, mas no
casena, proteasas o lipasas por tal motivo en el desarrollo del
experimento ninguno de los sustratos debi ser metabolizado, pero por
malos manejos en el momento de la inoculacion se contaminron.
Bacillus sp. puede metabolizar leche, gelatina y almidon. Para obtener
su fuente de energa.
El desarrollo del experimento, puede darse casi con exactitud si se
mantienen los estndares y cuidados de higiene respectivos.
Para una mejor observacin de los halos, podemos obtener ayuda las
sustancias
Contrastantes.

BIBLIOGRAFIA:
Introduccin a la microbiologa, John L. Ingraham, Harriet Prentiss - 1998 - 751
pginas
Introduccin a la microbiologa, Gerard J. Tortora, Berdell R. Funke, Christine L.
Case-Ed. Mdica Panamericana - 2007 - 959 pginas