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TTULO DEL ARTCULO. MXIMO 15 PALABRAS. TIMES NEW ROMAN 12 PUNTOS.

MAYSCULAS.
Ttulo en Ingls, Times New Roman 11 puntos (centrado, minsculas)
RESUMEN
La cromatografa es un mtodo de anlisis qumico que agrupa un conjunto de
tcnicas de separacin a mezclas homogneas, este mtodo se utilizar para
separar de manera acertada cada uno de los compuestos que estn presenten en
la especie vegetal Spinacia oleracea (espinaca), se realizarn tres tcnicas
diferentes (Cromatografa en capa fina, cromatografa en columna y
Cromatografa de mediana precisin), con las cuales se analizaran las
variaciones de resultados que se encuentren.
PALABRAS CLAVES: Cromatografa en capa fina, cromatografa en columna,
fase normal.
ABSTRACT
Chromatography is a method of chemical analysis includes a set of separation
techniques to homogeneous mixtures, this method is used to separate rightly
each of the compounds that are present in the plant species Spinacia oleracea
(spinach), will perform three different techniques (thin layer chromatography,
column chromatography and chromatography middle precision), with which the
variations of results found are analyzed.

BLANCA AURORA MARTINEZ

Cdigo20142010056
Universidad Distrital FJC
bamartinezh@correo.udistrital.edu.c
o
ANA MARIA CUBILLOS
Cdigo 20142010072
Universidad Distrital FJC
Anacubillosl13@gmail.com
KAREN VANEGAS
Cdigo20142010068
Universidad distrital FJC
ksvanegasc@gmail.com

KEYWORDS: thin layer chromatography, column chromatography, normal

phase.
1. INTRODUCCIN
Al estudiar una especie vegetal, es importante conocer
los usos y potenciales que tiene, para poder sacarle el
mayor provecho posible, ya sea para la industria,
alimentacin, medicinal, entre otros. Para esto se utiliza
la cromatografa que nos permite separar compuestos y
as poderlos conocer de qu naturaleza qumica son.

ser inmiscibles entre s y los componentes de la mezcla

que deben separarse han de ser solubles en la fase mvil.
Las tcnicas cromatogrficas se basan en las diferencias
de afinidad qumica o de solubilidad de los componentes
de la mezcla respecto a la fase mvil y la fase
estacionaria[1].

Para esta ocasin se trabaj con la Spinacia oleracea

(espinaca), con la cual se realiz una extraccin de la
misma con el fin de separar cada uno de los compuestos
presentes, a travs de la cromatografa teniendo con
principio la polaridad de cada uno de ellos.

Para el desarrollo del laboratorio se tuvo 5 g de espinaca

(Spinacia oleracea), la cual se macer y se le agregaron
20 ml de etanol (C2H6O); se procedi a realizar un
filtrado indirecto y se separ en dos partes, con las cuales
se procedi a realizar una cromatografa en papel y otra
en capa fina.

2.1.1 CROMATOGRAFIA EN PAPEL (CP)

2. RESULTADOS Y ANLISIS DE RESULTADOS

La primera tcnica de separacin de compuestos que se

utilizo fue la cromatografa en papel, para llevarla a cabo
se tom una de las partes del extracto de espinaca y se
llev a una caja Petri, en la cual se ubic de manera
vertical un cuadrado de papel filtro sumergido en el
solvente. Esta se dej en reposo durante
aproximadamente dos horas para conseguir el ascenso de
los pigmentos fotosintticos presentes en el extracto a
travs de la superficie del papel.

2.1
TCNICA
DE
SEPARACIN
COMPUESTOS EN UNA MEZCLA

DE

La cromatografa es un mtodo de anlisis qumico que

agrupa un conjunto de tcnicas de separacin a mezclas
homogneas. Se basan en la circulacin de una fase
mvil a travs de una fase estacionaria. Estas fases deben

2
En la cromatografa en papel el borde del papel es
sumergido en un solvente, el cual migra a lo largo de l
por capilaridad, desplazando los componentes presentes
a velocidades que dependen de sus solubilidades
(polaridades) relativas en el solvente. Los componentes
de la mezcla de la muestra, visibles como manchas
separadas, son identificados comparando las distancias
que han recorrido con aquellas de los materiales de
referencia conocidos. [3]
Al cabo de aproximadamente dos horas se pudo observar
la presencia de cuatro bandas de colores, en las que cada
una de ellas describe un tipo de pigmento diferente; estos
fueron en orden descendente:

Al respecto, la clorofila presenta un

comportamiento doble, ya que la cola de fitol es
insoluble en agua, hidrfoba y el ncleo de la
porfirina tiene un carcter hidrfilo, es decir es
afn al agua.
4.

Clorofila B: es ms polar que la clorofila A, se

diferencia de esta solamente por estar sustituido
el grupo metilo (--CH3) del carbono 3 en el
segundo anillo pirrlico, por un grupo aldehdo
(--CHO). Esta diferencia es suficiente para
causar un cambio notable en la coloracin como
tambin en la polaridad de la molcula.
H3C

CH2

H3C

1.

Carotenos: cuya coloracin es naranja y es

perteneciente a los terpenos, su polaridad es la
mas baja por lo cual fueron los primeros en
subir en la capa.

N
N

CH3

2-N

Mg

H3C

CH3

H3C

HO
H3C

CH3

H3C

H3C

H3C

CH3

O
O

CH3

CH3

CH3

O
H3C

H3C

H3C

fig 4. Clorofila b

CH3

fig. 1 caroteno

2.

3.

Xantofilas: cuya coloracin es amarilla, son

derivados de los carotenoides y tienen una
polaridad baja, sin embargo es superior a la de
los carotenos.

Clorofila A: cuya coloracin es verde; Las

Clorofilas son compuestos del tipo tetrapirrol,
Constan de cuatro anillos de pirrol unidos por
medio de puentes de metilo (--CH=) lo que
constituye una porfirina. El tetrapirrol es el
cuerpo bsico de las porfirinas. [5]
En el centro del sistema de anillos se halla un
tomo metlico, para las clorofilas es el
magnesio. El anillo de pirrrol III tiene una
estructura isociclica adicional, el anillo de la
ciclopentanona. El anillo IV esta esterificado
con un alcohol, el fitol, que representa una
cadena de 20 tomos de carbono con un doble
enlace, esta "cola" de fitol le da a la clorofila
pura una naturaleza cerosa que explica la
insolubilidad del pigmento en agua y su buena
solubilidad en solventes orgnicos. [5]

2.1.2 CROMATOGRAFIA EN CAPA DELGADA

(CCD)
la segunda tecnica de separacion de compuestos que se
uso fue la CCD, para el desarrollo de esta tecnica se
tomaron 5g de hoja de espinaca a los cuales se les agreg
tolueno acetona 7:3 (solvente de baja polaridad),
tambien se hizo un extracto de zanahoria al cual se le
agreg hexano (solvente de baja polaridad).
La cromatografa en capa fina (TLC) es una tcnica de
adsorcin lquido-slido. En este caso, la separacin se
produce a travs de las diferencias de afinidad de los
constituyentes de una mezcla de una fase estacionaria.
El parmetro ms importante a considerar en el CCD es
el factor de retencin (Rf), que es la relacin de la
distancia recorrida por la sustancia en cuestin y la
distancia recorrida por la fase mvil. L. [5]
En esta cromatografia se hizo uso de una placa de
cromatografia de fase estacionaria Silica gel (polar)y un
frente de solvente de 4.5 cm, en esta placa se realiz la
siembra de extracto de espinaca, zanahoria y extractos de
dos organos de la planta asignada al grupo de trabajo
(cotoneaster pannosus); y se procedio a observar el
ascenso de estos compuestos, desde la linea de sembrado
hasta el fin del frente de solvente.Se observaron las
siguientes distancia de ascenso del compuesto sobre la
distancia del solvente (Rf) [5]

H3C

Scientia et Technica Ao XIII, No x, Mes de 200x. Universidad Tecnolgica de Pereira.

Organo
Rf
(cm)

Hojas
coneaster
1

Fruto
cotoneaster
0

Hoja
espinaca
1

Zanahoria
1

Tabla 1. Rf de compuestos

De acuerdo a la tabla anterior podemos que la polaridad

de los compuestos presentes en los frutos del cotoneaster
es mayor a la de los otros compuestos, cabe resaltar que
el fruto no presenta pigmentos clorofilicos.

Se realiz un montaje, en el cual la columna contena

silica gel que funcionaba como fase estacionaria, a la que
se le agrego solvente durante todo el experimento, al
mismo se le golpe por aproximadamente 15 min. Se
agreg el extracto de espinaca y comenzamos el proceso
de cromatografa, cada vez que cambiaba la tonalidad de
las muestras, se recoga en un recipiente, se lograron
recoger 10 muestras, en el cual se tomaba el tiempo en
cada cambio de color.(Tabla 2)

CROMATOGRAFA EN COLUMNA
Tiempo

2.1.3 CROMATOGRAFA EN COLUMNA

Emplean como fase mvil un lquido adems esta se hace
pasar por medio de un lecho cromatogrfico mediante la
gravedad [2].
Esta tcnica es utilizada para el aislamiento y
purificacin de productos naturales. Las fases
estacionarias ms utilizadas son slice y almina. Fases
estacionarias slidas conducen a la separacin por
adsorcin y fases estacionarias lquidas para la particin.
[4]
En la cromatografa de adsorcin en columna, la fase
estacionaria es un slido adsorbente empaquetado en una
columna. La muestra disuelta se introduce por la parte
superior de la columna, y sus componentes se eluyen
utilizando una fase mvil lquida apropiada. La
separacin cromatogrfica tiene lugar por la distinta
capacidad de adsorcin de los componentes de la muestra
respecto a la fase estacionaria. Para conseguir una
separacin efectiva es necesario que la velocidad de cada
uno de los componentes sea suficientemente diferente y
que la columna sea de una longitud adecuada.[1]
La cromatografa de reparto en columna es similar a la
anterior a diferencia de que la fase estacionaria es un
lquido, poco miscible con la fase mvil, soportado por
partculas de un slido inerte.
El nivel de disolvente nunca debe cae por debajo del
nivel de adsorbente, lo que podra dar lugar a grietas,
comprometiendo la eficiencia de la columna, es
conveniente pasar una cantidad de eluyente (dos a tres
veces el volumen de la columna) para ser utilizado a
travs de la columna antes de probar introduccin. [4]
El volumen de las fracciones para ser recogidos depende
del tamao de la muestra y el grado de dificultad de la
separacin. Para la consideracin de los mismos, se
refiere a cualquier herramienta de apoyo, por lo general
CCD. [4]

T0
T1
T2
T3
T4
T5
T6
T7
T8
T9
T10

7:05
7:28
9:06
11:16
15:37
22:06
24:08
26:40
28:32
33:03
39:24

Volumen
0ml*
1.6ml
5,2ml
6,4ml
0ml**
20ml
5,7ml
7,2 ml
7,9 ml
14,8ml
21,6ml

Tabla 2. Datos cromatografa en columna

CROMATOGRAFA DE MEDIANA PRECISIN
1. Encender el equipo (Isolera Spektra Systems with
ACI)
2. Elegir cada uno de los parmetros
A. Elegir el tamao de la columna. (10g)
B. Caudal: Cantidad de solvente (12ml/min)
C. Tipo de bastidor: 16 x 150 mm
D. Volumen mximo que recoge cada tubo de
ensayo: 15 ml
E. Orden de transferencia: S

F. Solventes:
Lnea 1: Acetona
Lnea 2: Hexano
G. Elegir la longitud de onda que va a detectar:
Todas
H. Longitud del segmento inicial:10vc
I. Longitud del segmento medio:10vc
J. Longitud del segmento final:2vc
K. Correccin de base: NO recoger solvente
L. Remojar la columna en el extracto.

M. Conectar a la columna las dos lneas.

N. Dar inicio a la cromatografa

http://moderna.eb.com.bdigital.udistrital.edu.co:
8080/ee/article-9411368

MARCO TEORICO

Referencias de publicaciones peridicas:

[4] G. Degani, A. L., C. Vieira, P., & B. Cass, Q. (1998).
Cromatografia um berve enasio. Sociedade

Tabla 2: Datos cromatografa en columna 1

Brasileira de Qumica, Brasil. Qumica Nova na

Escola.

-Anlisis:

[5]
Universidad nacional de Colombia. (agosto de
2009). Recuperado el 15 de septiembre de 2015, de
http://www.virtual.unal.edu.co/cursos/ciencias/2000051/l
ecciones/cap02/02_04.htm

CROMATOGRAFA DE MEDIANA PRESICION

Grafica 2. Concentracion de compuestos encontrados.

-Anlisis:
3. CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES

1. REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS
Referencias de libros:
[1] Saber, H. (2014). Gran Enciclopedia Hispnica
edicin en Red. Barcelona, Espaa: Editorial
Planeta S.A.
[2] Garca, G., Jess, M., Quintana, M., & del Carmen,
M. (2009). Introduccin a la cromatografa
lquida en alta resolucin. (U. Universidad
Autonoma de Madrid, Ed.) Madrid, Espaa:
Digitalia Hispanica.
[3] Enciclopedia Moderna. (2015). Cromatografia en
Papel. (E. Britannica, Editor) Recuperado el 12
de
1

septiembre

de

2015,

*Tiempo en el que an no bajaba ningn compuesto

** tiempo muerto( tiempo en el cual bajo el solvente)

de