UNIVERSIDAD NACIONAL SANTIAGO ANTUNEZ DE

MAYOLO
FACULTAD CIENCIAS DEL AMBIENTE

ESCUELA

ACADEMICO-PROFESIONAL
INGENIERA AMBIENTAL

DE

ASIGANTURA: MICROBIOLOGA AMBIENTAL

Recuperacin de suelos Agrcolas afectados

por el Insecticida Perfekthion mediante
Microorganismos

INTEGRANTES:

AQUINO SILVA Manuel

HUAYANEY JARA Francesco

DOCENTE

POLO SALAZAR Rosario

INDICE
1. INTRODUCCION...........03
2. OBJETIVOS....04
3. MARCO TEORICO........05
3.1. CONTAMINACION DE SUELOS......05
3.2. IMPORTANCIA DE LOS MICROOGANISMOS DEL
SUELO....06
3.3. TECNICAS DE TRATAMIENTO DE
SUELOS.....09
4. MATERIALES Y METODOS....11
5. RESULTADOS E INTERPRETACIONES........12
6. DISCUCIONES...........13
7. CONCLUSIONES ...14
8. RECOMENDACIONES.........15
9. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS........16
10. ANEXOS.......17

INTRODUCCIN
El presente trabajo de investigacin acerca de Recuperacin de
Suelos Agrcolas de Carhuaz afectadas por el Insectida Perfekthion
mediante Microorganismos es un tema muy importante en la
formacin de toda carrera profesional; como la de ingeniera
ambiental. La contaminacin en el planeta es tan grande, que este
tema ya no es mbito solo de los ingenieros ambientales sino de
todas las carreras profesionales en un esfuerzo por preservar todo
tipo de ambiente donde viven animales y plantas que hacen posible
la vida en el planeta tierra.
En este proyecto se ha colocado casos prcticos como el trabajo en
laboratorio de una muestra de tierra donde fue aplicado el
insecticida, este se lleva al laboratorio y por medio de procesos
microbiolgicos se asla los diferentes tipos de microorganismos que
existen en ella, para luego someterlo a concentraciones alta del
pesticida para reconocer, cuales son los microorganismos que
pueden soportar realmente este tipo de pesticida. En una posible
solucin, es sembrar este microorganismo y luego de su crecimiento
aplicarlo a la tierra para mejorar su calidad.
2.

OBJETIVOS:

2.1.

Objetivo General

Estudio, experimentacin y recuperacin de suelos con

microorganismos resistentes al insecticida utilizado en las
actividades agrcolas.
2.2.

Objetivo Especifico

Verificar la productividad del suelo recuperado naturalmente

con microorganismos resistentes al insecticida
Identificacin de especies bacterianas que son resistentes al
insecticida.

3. MARCO TERICO
3.1.

EL SUELO Y MULTIFUNCIONALIDAD
En trminos

generales el suelo es el sustrato en el cual se

localizan y desarrollan mltiples actividades del hombre, razn por

la cual se la considera un recurso multifuncional. As, el significado
del trmino suelo puede variar de acuerdo a la utilizacin o funcin
que se considere. Desde un punto de vista profesional, ingenieros
agrnomos, forestales, civiles, geolgicos, qumicos, etc. tendrn
puntos de vista en cuanto al concepto de suelo. De aqu que el suelo
como recurso natural, usualmente se considere desde varis
dimensiones (DGMA, 1984).
3.2. CONTAMINACIN DE SUELOS
La contaminacin del suelo se define como la acumulacin
en ste de compuestos txicos persistentes, productos qumicos,
sales, materiales radiactivos o agentes patgenos, que tienen efectos
adversos en el desarrollo de las plantas y la salud de los animales
(Microsoft Encarta, 2006).
La contaminacin de los suelos se da principalmente por la
acumulacin de los metales pesados, que en pequeas cantidades
son beneficiosos y sirven como nutrientes del suelo, los metales
pesados se encuentran principalmente en la actividad minera y en
los procesos de combustin e incineracin de las refineras.
Cuando el detrimento de los suelos sobrepasa el lmite de tolerancia
del mismo, ste se sobresatura, deteriorndose y perdiendo su
capacidad de auto regenerarse y sus propiedades, las cuales directa
o indirectamente permiten la supervivencia de la flora y fauna y por
ende de los seres humanos debido a la bio- magnificacin
(acumulacin de sustancias txicas en la cadena alimentaria).
La aplicacin excesiva de fertilizantes como la urea, el nitrato de
calcio y el cloruro de potasio entre otros, producen alteraciones en

los suelos, irnicamente algunas de tcnicas usadas para la

remediacin de dichos suelos modifican tambin la estructura de los
suelos.
Aunque el suelo puede contaminarse ante la presencia de cualquier
residuo peligroso, las propiedades qumicas; como el pH, la textura
y la materia orgnica del suelo juegan un papel importante en la
absorcin del contaminante.
La dispersin de los contaminantes es otro factor de consideracin
ya que las condiciones del terreno y el clima podran hacer que la
contaminacin no slo sea en el sitio afectado sino que podra
repercutir grandes extensiones, la volatizacin de los contaminantes
constituye una de las vas de contaminacin atmosfrica, los
contaminantes acuosos por escorrenta y luego por infiltracin
puede transportar los contaminantes a las aguas subterrneas.
La mayora de los compuestos vertidos en el suelo o agua sufren
transformacin en su metabolismo llevndolas a un estado menos
contaminante, las bacterias autctonas del suelo degradan los
compuestos orgnicos en un lapso de tiempo relativamente corto
dependiendo de las caractersticas del suelo, temperatura, la
presencia de los nutrientes necesarios para su desarrollo.
La contaminacin del suelo consiste en una degradacin qumica
que provoca la prdida parcial o total de la productividad del suelo
como consecuencia de la acumulacin de sustancias txicas en
unas concentraciones que superan el poder de amortiguacin
natural del suelo y que modifican negativamente sus propiedades.
Esta acumulacin se realiza generalmente como consecuencia de
actividades humanas exgenas, aunque tambin se puede producir
de forma natural o endgena cuando los procesos de edafizacin
liberan elementos qumicos contenidos en las rocas y los concentran
en el suelo alcanzando niveles txicos. Un ejemplo de este ltimo lo

tenemos en suelos muy evolucionados formados sobre rocas

serpentinizadas con altos contenidos en metales pesados como el
Cr, Ni, Cu y Mn, entre otros, que se concentran en los suelos a
medida que la intensa edafognesis produce el lavado de otros
constituyentes esenciales como el Ca, Mg e incluso el Si. Conforme
se desarrolla esta concentracin residual metlica, estos elementos
que inicialmente eran constituyentes no asimilables de los minerales
primarios pasan a formas ms activas, solubles y biodisponibles que
influyen negativamente sobre la actividad biolgica (Macas, 1993).
Como ya se ha sealado, las propiedades fsicas, qumicas,
fisicoqumicas y biolgicas del suelo controlan en gran medida los
ciclos biogeoqumicos superficiales, en los que acta como un
reactor complejo que sirve de elemento protector de otros medios
ms sensibles frente a elementos contaminantes. As, el suelo ejerce
su labor protectora a travs de su poder de amortiguacin o
capacidad natural de depuracin de la contaminacin. Esta
atenuacin de los elementos nocivos contaminantes se realiza, entre
otras, a travs de reacciones de compleja in, reacciones de
adsorcin y desorcin, reacciones de precipitacin y disolucin,
reacciones de xido reduccin, reacciones cido-base y reacciones
derivadas de procesos metablicos. Todas estas reacciones estn
estrechamente controladas por propiedades del suelo como su
textura, estructura, porosidad, capacidad de intercambio catinico,
pH, Eh y la actividad microbiolgica. En cualquier caso, hay que
tener muy presente que el poder de amortiguacin de un suelo no es
ilimitado y cuando se rebasa, el suelo deja de ser eficaz como
sumidero de la contaminacin, llegando incluso a invertirse el
proceso y a convertirse en una fuente de contaminacin para los
organismos del suelo y para el medio circundante.
A la hora de abordar el estudio de la contaminacin de un suelo no
basta slo con detectar la presencia de la sustancia o sustancias
contaminantes sino que su concentracin debe superar la carga

crtica o mxima cantidad permitida en el suelo sin que se

produzcan efectos nocivos que no puedan ser contrarrestados por el
poder de amortiguacin del suelo. De esto se deduce que distintos
suelos van a reaccionar de forma diferente ante la presencia de un
mismo contaminante o de una misma cantidad de contaminante.
Esta

reaccin

estar

condicionada

por

factores

como

la

vulnerabilidad especfica de cada suelo, que representa el grado de

sensibilidad

del

suelo

frente

la

agresin

de

los

agentes

contaminantes y que est muy relacionada con el poder de

amortiguacin del suelo, de forma que cuanto menor sea esta
capacidad de amortiguacin, mayor ser el dao.
3.2.1. Principales Causantes De La Contaminacin De Los Suelos
Antes de que existieran las regulaciones referentes al manejo y
disposicin final de los desechos peligrosos era frecuente que las
industrias acumularan los residuos peligrosos en sus instalaciones
para luego depositarlos en tanques o contenedores

cuando eran

residuos lquidos y en caso de residuos slidos los almacenaban

generalmente a la intemperie sin protecciones (Eweis, 1999).
Factores de tipo qumico:
Carencia de nutrientes, por agotamiento o por bloqueo en el
suelo.
Contaminacin por iones fitotxicos.
Contaminacin por otro tipo de compuestos, excretados o no
por cultivos o microorganismos.
Factores de tipo biolgico:
Baja o nula actividad microbiana y de la microfauna del
suelo.
Contaminacin por organismos patgenos.
Establecimiento de competencias entre los microorganismos y
las plantas cultivadas.

 Prdida del equilibrio biolgico del suelo, por el empleo de

desinfectantes, o por cualquier otra causa.
Factores de tipo fsico:
Prdida de las propiedades fsicas del suelo, fundamentalmente,
prdida de la estructura del suelo. Este ltimo tipo de factores,
acompaados en mayor o menor medida por factores de tipo
qumico o biolgico, cobra especial relevancia en los suelos
cultivados de forma intensiva, y frecuentemente son los que
desencadenan la fatiga del suelo. Es decir, la prdida de la
estructura del suelo, generalmente, acta como catalizador para
acelerar la incidencia de factores de tipo qumico y biolgico hacia
un suelo fatigado.
Por esta razn, vamos a centrar los comentarios en la definicin de
los conceptos y procesos relacionados con la estructura del suelo, y
en qu acciones se pueden desarrollar de cara a su mantenimiento y
mejora.
3.3. CONTAMINACION DE SUELOS POR AGROQUIMICOS
Es el resultado del uso de fertilizantes, plaguicidas y
herbicidas que se aplican con el fin de aumentar la produccin de
alimentos, eliminacin de insectos, hongos y otros organismos que
disminuan el rendimiento de la produccin de alimentos.
Con esta perspectiva, habr que admitir que el principal problema
social a escala mundial es atender las necesidades alimentarias de
su poblacin y, paralelamente, controlar el impacto ambiental que el
incremento de la actividad agrcola puede causar.
Desde el punto de vista de la necesidad de aumentar la produccin
agrcola se tiende hacia una agricultura intensiva, que requiere
elevados inputs y es altamente eficiente, pero tambin muy
contaminante. Desde el punto de vista del respeto ambiental se

tiende hacia la agricultura biolgica, con menor requerimiento de

inputs pero de bajo rendimiento y altos costes de produccin. Entre
estos dos puntos de vista se sita la denominada agricultura
sostenible que es aquella que maneja y utiliza con xito los recursos
disponibles, satisface las necesidades de la poblacin, mantiene o
mejora la calidad del medio ambiente y conserva los recursos
naturales.
Para alcanzar cierta sostenibilidad en las prcticas agrcolas se
pueden aplicar diversas tcnicas que se recogen en los cdigos de
buenas

prcticas

agrarias.

Entre

estas

tcnicas

estn

la

diversificacin de cultivos, rotacin de cultivos, lucha biolgica,

ingeniera gentica, adecuado manejo del suelo, control de los
inputs, lucha integrada, mejora de las prcticas de cultivo y uso
racional del agua.
AGROQUMICOS
Los agroqumicos son sustancias ampliamente usadas en la
agricultura, como los insecticidas, herbicidas y fertilizantes. El
efecto de estos sobre el terreno sembrado se expande hacia el aire y
con mayor perjuicio se instala en el agua, contaminando las napas
subterrneas, los ros y lagos, as como los alimentos cultivados en
terrenos donde se utiliz.
CARACTERSTICAS GENERALES DE LOS AGROQUMICOS
Los

agroqumicos

son

muy

tiles

tienen

innumerables

aplicaciones. Las razones:

Sirven para exterminar plagas y enfermedades (plaguicidas y
fungicidas) que atacan nuestros cultivos. Pueden mejorar nuestros
cultivos (abonos qumicos; el boro, para evitar la cada de las flores
en

tomate)

Adems

son

extremadamente

prcticos.

Ya

no

necesitamos desgastarnos quitando las hierbas que no necesitamos,

porque tenemos los herbicidas (eliminan selectivamente ciertas

hierbas consideradas malezas).
Con ellos tambin podemos mantener y mejorar las calidades de un
producto durante periodos prolongados de tiempo (los conservantes,
colorantes y aditivos artificiales empleados en tratamientos pos
cosecha).
Son tan prcticos y eficientes, que podemos, por medios qumicos
acelerar la floracin y fructificacin (aplicacin de ciertos elementos
menores segn la planta)
Pero en los agroqumicos tambin tenemos desventajas:
El

empleo

exagerado

de

agroqumicos

genera

consecuencias

desastrosas para el ambiente, pues estos escurren a los ros de

donde se alimentan y/o viven una diversidad de seres; adems se
pulverizan al aire y son tan fuertes que pueden permanecer mucho
tiempo en los cultivos, cambiando el sabor final de algunos
productos (si podemos observar lechugas o espinacas recin
cosechadas podremos comprobarlo).
Otra cosa interesante de analizar es que los vendedores de esos
productos ganan porcentajes por la venta; es decir que para ganar
ms deben vender ms (esto ocurre en nuestro pas a nivel macro,
donde los actores son gobierno y multinacionales extranjeras); y Si
pensamos que los campesinos (que en algunos casos no quieren o
no saben leer), se guan por las indicaciones de los vendedores
inescrupulosos, hambrientos del negocio? (esto tambin ocurre en
nuestro pas y se ha manifestado ocultndose tras las ideas y
presentaciones de "Las Polticas Sectoriales de Desarrollo Rural").
Al aplicar agroqumicos, especialmente herbicidas es tan bueno el
resultado que ahora siempre queremos ver el cultivo limpio; o
nuestro cultivo florecido, debido a altas aplicaciones de fertilizantes;
o

nuestros

frutos

con

perfeccin

de

fotografa

debido

manipulaciones

genticas

en

las

que

intervienes

sustancias

qumicas. Esto genera una dependencia, en donde el campesino

requiere necesariamente insumos agroqumicos para poder cultivar.
Los agricultores, especialmente los ms viejos o con creencias ms
arraigadas, aseguran que ningn cultivo se puede manejar sin
agroqumicos (pero queda una pregunta: Cmo sera entonces, que
nuestros antepasados indgenas hicieron para vivir tanto tiempo
cultivando para mantener poblaciones pequesimas? Parece ser
que adems, esa pobrsima alimentacin influa en el desarrollo
espiritual y mental, pues crean en la sabidura de la naturaleza,
hacan mediciones de tiempo basados en los astros e incluso se
atrevan a realizar predicciones sobre las cosas que podran pasar
en el futuro y a las que hoy en da nadie quiere ni leer). Este es un
cambio cultural que es difcil de cambiar y que por supuesto es
totalmente falso.
Adems existe un enorme riesgo con estos qumicos y es que
algunos de ellos son desarrollados en pases con condiciones de
suelo, agua y clima distintos al nuestro. Realmente no sabemos que
pueda pasar si se aplica en nuestras condiciones; es el riesgo de lo
que se conoce como "mala transferencia de tecnologa"
El empleo de agroqumicos que hecho que los agricultores sean
exageradamente facilistas, pues ya ni piensan en que est pasando
en su cultivo, slo saben que si les llega algn animal o hierba
diferente a lo que sembraron, debe ser exterminado. Y adems,
como los qumicos actan rpidamente, los resultados se pueden
ver en un periodo cortsimo de tiempo y los productores comparan
los qumicos con la velocidad con que acten (esto es supremamente
grave, ya que la velocidad de accin depende de la concentracin y
la agresividad de ciertas sustancias que por supuesto, son las ms
txicas); estamos llevando las prisas de la ciudad al tranquilo y
sosegado campo

Y por ltimo, estamos ocasionando que todo ser viviente enferme y

muera por el contacto que puede tener con sustancias altamente
txicas, cancergenas, de generadoras y causantes de sntomas tan
simples como un mareo, hasta inevitables como la muerte.
Sin duda, hoy en da sigue considerado ms importante el papel que
cumple la agricultura tradicional, como aporte base del modelo
agrcola local sustentable y sostenible que otra alternativa, aun
cuando no ejerce las acciones para minimizar el riesgo e impacto
contaminante de los agroqumicos. Con ella, sigue la implicacin
irreversible y generadora de consecuencias graves en contra de la
salud humana y de la calidad de los recursos naturales en ese
desarrollo agrcola, desde la utilizacin de agroqumicos sin mtodos
y tcnicas apropiadas para el aprovechamiento ptimo de los
recursos naturales en la produccin de cultivos, y que a la vez
permitan la conservacin y la productividad del medio ambiente,
hasta el poco inters para mantener la cultura de las poblaciones
indgenas y campesinas, en procura de mejorar su calidad de vida y
su autogestin.
Esta agricultura causa una excesiva explotacin a los suelos que
estn siendo sometidos; como lo es la utilizacin de alarmantes
dosis de abonos o de agroqumicos, que ha hecho olvidar el papel
fundamental de las aportaciones orgnicas; esto ha dado lugar a un
empobrecimiento de las tierras el humus que afecta su fertilidad,
vida microbiana, estabilidad estructural, entre otros. Hay una
erosin del suelo la cual es un proceso originado por los agentes
naturales como lo son: los vientos, las lluvias, las aguas, y las
nieves; que actuando sobre aquel atacan y perjudican su integridad,
y arrebatan sus elementos constitutivos que transportan a otros
lugares. Sin embargo, tambin est la erosin inducida, la
fomentada por las actividades del hombre interfiriendo en el
equilibrio normal entre la formacin del suelo y su traslado (Abreu,
2005, p 17).

As, debido al empleo indiscriminado de fertilizantes y todo tipo de

productos agroqumicos se presentan los siguientes problemas en
las aguas tanto superficiales como subterrneas:
Acumulacin de nitritos y fosfatos, que se traducen en una prdida
de la potabilidad.
Eutrofizacin de las aguas continentales y mares costeros, al
aumentar

hasta

niveles

nocivos

los

productos

orgnicos

inorgnicos derivados de aguas residuales y fertilizantes agrcolas,

originando graves cambios en las caractersticas del medio y
desoxigenacin de las aguas profundas.
Salinizacin

de

los

acuferos

por

sobreexplotacin

de

las

aguas subterrneas.
Toda esta problemtica se extiende a los suelos de uso agrcola, ya
que si las aguas estn contaminadas y son empleadas para el riego,
terminan por contaminarse tambin el suelo de cultivo. El fenmeno
de la contaminacin atmosfrica no se puede separar de los
anteriormente mencionados, as como de los efectos de los residuos
contaminantes sobre seres animados o inanimados e incluso sobre
las propiedades de la atmosfera misma.
Prcticas habituales como la quema de rastrojos han producido y
producen impactos duraderos e irreversibles, como la destruccin de
la materia orgnica y la microestructura del suelo, la erosin y la
perdida de fertilidad en la mayor parte de los suelos del rea
mediterrnea; son 6400 millones de toneladas de suelo frtil las que
desaparecen cada ao en Europa a causa de la erosin (Toharia,
2008, p 19).

3.3.1. INSECTICIDA PERFEKTHION

Es un insecticida organofosforado, acaricida de accin sistmica y
efecto de contacto e ingestin. Controla un amplio espectro de
parsitos chupadores,

caros

tambin

algunos

insectos

masticadores y minadores en diferentes cultivos. Es compatible con

los plaguicidas de reaccin alcalina y algunas formulaciones de
azufre.
Modo de accin: Es absorbido rpidamente y translocado por la
savia vegetal a todos los rganos de la planta, protegiendo los brotes
que se desarrollan con posterioridad al tratamiento.
Ingrediente activo:
Dimetoato: (0, 0-dimetil-S-metilcarbamoil metil-fosforoditioato)
No menos de: 37.40%
(Equivalente a 400 g de I.A. /L)
Ingredientes inertes:
Disolventes, emulsificante, colorante y compuestos relacionados
No ms de:
Total:

62.60%
100.00%

INSTRUCCIONES DE USO:
Siempre calibre el equipo de aplicacin
PERFEKTHION es un concentrado emulsionable, que cuando se
diluye en agua forma una emulsin estable.
Equipo de aplicacin: Para aplicacin terrestre con bombas de
mochila usar boquillas de cono 004; con equipo areo para 25 L/ha
30 Lb de presin 24 boquillas 007 y velocidad de 90 millas/hora.

FITOTOXICIDAD: El producto no es Fito txico en ninguno de los

cultivos autorizados.
INCOMPATIBILIDAD: El producto no es compatible con plaguicidas
de reaccin alcalina.
CONTRAINDICACIONES: No mezclarlo con aceites ornamentales.

Limonero,
naranjo,
toronjo
Vid
Manzano

Plaga

Dosis
L/ha

Pulgn negro (Toxoptera aurantii),

pulgn del algodn y del meln (Aphis
gossypii),
piojo harinoso (Planococcus citri),
mosquita blanca (Dialeurodes citri),
mosquita
algodonosa (Aleurothirixus floccosus),
trips de los ctricos (Scirtothrips citri)
Chicharrita
de
la
vid
(Dikrella
cockerelli), trips (Caliotrhrips spp)
Pulgn langero (Eriosoma lanigerum),

175-200
cc/

escama de San Jos (Quadraspidiotus

perniciosus)
Fuente: AGRORURAL, 2001

100 L
de
agua

ISAC/
en
das
15
15
15

1.0-1.5
L
125
cc/10
0L
de agua

28
28

MICROORGANISMOS DEL SUELO

Bacillus brevis
Este gnero es tpico de la familia Bacillaceae, comprende ms de 40
especies de bacilos aerobios y anaerobios facultativos Grampositivos que producen endosporas y son generalmente cilndricos o
elipsoidales. La mayor parte de las especies producen catalasa
(Grimont et al. 1991). Las especies de Bacillus son de naturaleza
ubicua y habitan en el suelo, agua y polvo del aire. Bacillus brevis
mide 0.6-0.9 m x 1.5-4 m. Algunas pueden ser parte de la flora
intestinal normal del hombre y los animales. B. brevis, se ha aislado
principalmente

de

suelos,

de

agua

de

alimentos.

Este

microorganismo produce antibiticos como la gramicidina y la

tirotricina. Esta especie fue aislada a partir de suelos agrcolas con

un amplio historial de aplicaciones de plaguicidas organofosforados.
Informa que esta especie presenta una importante eficiencia en
remocin de hidrocarburos. B. brevis, result ser la cepa con mayor
capacidad de crecimiento en un medio mnimo con paratin metlico
como nica fuente de carbono.
Stenotrophomonas maltophilia
Anteriormente
Xantophomonas

conocida

como

maltophilia,

es

Pseudomonas
un

bacilo

maltophilia

Gram-negativo

o
no

fermentativo, aerobio. Mvil mediante varios flagelos polares, es un

microorganismo ubicuo que ha sido aislado en numerosas fuentes
de agua: ros, pozos, lagos, agua embotellada, y aguas negras; suelo;
animales; alimentos; plantas y residuos orgnicos, reportan a esta
especie con capacidad para degradar tolueno, benceno, etilbenzeno,
y xileno, esto permite plantear su potencial en la degradacin de
residuos de plaguicidas, suelos y aguas contaminados con estos
xenobioticos.
Flavobacterium Odoratum
Se encuentra en suelo, agua, plantas y materias del alimento. Mide
0.5 m x 1.0-2.0 m, es un cocobacilo Gram- negativo, aerobio
facultativo y presenta movilidad por flagelos peritricos. Las colonias
son generalmente de color amarillo, producen olor a frutas. Es
caracterstico que reduzcan nitritos pero no nitratos. Son no
fermentadores, indol negativo, oxidasa positiva. Algunas especies del
Flavobacterium son capaces de degradar el pentaclorofenol y otros
compuestos similares. ste es un ejemplo de las capacidades de
biodegradacin de este gnero (Korin 2004).
Burkolderia cepacia.
Pertenece a la familia Pseudomonadaceae que incluye cuatro
gneros diferentes (Pseudomonas, Santonina, Frateuria y Zooglea).
Esta especie se ubica dentro del gnero Pseudomonas. En medio

slido TS en un periodo de 24 horas a 28C se observan colonias

grandes 4-6 mm de dimetro, distribuidas por todo el medio, poseen
una forma fusiforme con bordes ondulados irregulares y una
superficie convexa, presentan un color caf claro y son opacas
(Yaez-Ocampo 1998). B. cepacia (antes denominadas Pseudomonas
cepacia)

es

un

bacilo

Gram

negativo

no

fermentador,

multiresistente. Es un reconocido patgeno en pacientes portadores

de fibrosis qustica (FQ) y neutropnicos. Descrito en 1950 como
patgeno de plantas, especialmente encontrado en cebollas y
ampliamente distribuido en el suelo, puede tambin crecer en
antispticos (Gil 2001). Burkholderia cepacia se reporta para la
biorecuperacin de suelos contaminados con residuos txicos
(Hillyard 2005).
Pseudomonas stutzeri
Es una bacteria Gram-negativa, presenta respiracin aerbica,
presenta movilidad, crece a una temperatura optima de 37C. Auto
compiten con otras bacterias a un pH 8.2. Puede crecer en niveles
bajos de hierro y degradar el tetracloruro de carbono a bixido de
carbono o a otros compuestos inertes (Dybas 1995). Secretan una
biomolcula, pyridine-2,6-bis (thiocarboxylic acid) (PDTC). Esta
biomolcula es usada en transformaciones de tetracloruro de
carbono a CO

(Lewis 1999). Es un microorganismo con una

extraordinaria variabilidad fenotpica y genotpica. Debido a esta

enorme

variabilidad

genotpica

la

especie

se

subdivide

en

genomovares, entendiendo a la genomovar como un estatus

taxonmico

provisional

que

agrupa

cepas

genotpicamente

similares dentro de una misma especie. En la actualidad se conocen

18

genomovares

diferentes

(Cladera

et al. 2005).

Son

muy

numerosas las publicaciones en las que se hace referencia a la

capacidad de Pseudomonas sp.

Para

sobrevivir

incluso

degradan

una

amplia

variedad

de

compuestos orgnicos como los plaguicidas, los hidrocarburos

derivados del petrleo y otros compuestos halogenados (Fuenmayor
y Rodrguez 1997, Lee y Kim 1997, Ashok et al. 1995, Lebkowska et
al. 1995, Chablain et al. 1997, Whyte et al. 1997, Kallastu et al.
1998, Kumasi et al. 1998, Moller et al. 1998, Bieszkiewics et al.
1998, Hubert et al. 1999, Isken et al. 1999).
Diferentes bacterias identificadas son reportadas como patgenas,
sin embargo con un manejo adecuado como el tratamiento de
residuos en reactores, o bien utilizando herramientas moleculares
como la clonacin y la transformacin, pueden ser utilizadas en el
tratamiento de residuos de plaguicidas como el paratin metlico y
cadusafos y probablemente de otros de la misma familia qumica.

3.3.2. IMPORTANCIA DE LOS MICROORGANISMOS DEL SUELO.

Los

microorganismos

importantes

de

este.

del

suelo,

Constituyen

son
su

los
parte

componentes
viva

son

ms
los

responsables de la dinmica de transformacin y desarrollo. En un

solo gramo de tierra, encontramos millones de microorganismos
beneficiosos para los cultivos.
En desinfecciones severas, como las que se realizan en cultivos bajo
plstico, anulamos muchos de estos microorganismos, que estaban
de forma natural en el suelo. En cierta medida, esta idea va paralela
a la actual medicina en el hombre; es bueno tomar un
medicamento que nos anule aquellos microorganismos perjudiciales,
pero a la vez, elimine tambin aquellos que nos son beneficiosos?
Estos microorganismos beneficiosos que se encuentran en el suelo,
son bacterias, actinomicetos, hongos, algas y protozoarios. Un suelo
frtil es aquel que contiene una reserva adecuada de elementos

nutritivos disponibles para la planta, o una poblacin microbiana

que libere nutrientes que permitan un buen desarrollo vegetal.
3.4. TECNICAS DE TRATAMIENTO DE SUELOS
La recuperacin de suelos contaminados est regulada por la ley
10/1998 (Ttulo V). Se indica que las comunidades autctonas
deben realizar un inventario de suelos contaminados, el cual consta
de las siguientes fases principales.

Identificacin

de

los

emplazamientos

que

pudieron

estar

contaminados.

Jerarquizacin de los espacios contaminados en base a los

riesgos existentes en propia emplazamiento y la afeccin que
genera

en

su

entorno,

considerando

tambin

criterios

hidrogeolgicos, el uso de s terrenos y la toxicidad y movilidad

de ,os contaminantes.

Caracterizacin

de

los

suelos

contaminados:

dimensiones

concretas del rea afectada y magnitud de la contaminacin.

Normalmente se contempla cuantificacin de 7 grandes grupos
de contaminantes: metales compuestos inorgnicos, compuestos
aromticos,

hidrocarburos

aromticos

policiclicos,

hidrocarburos clorados, plaguicidas y oro compuestos.

Tratamiento

suelo

contaminado:

recuperacin

descontaminacin del espacio contaminado.

TECNOLOGIA BIOLOGICAS.
Se basa en tcnicas de biodegradacin mediante microrganismos,
aplicables a compuesto orgnicos (Pesticidas, Gasoleo, Gasolina,
aceites, Etc.) Las principales tcnicas disponibles son:
andfarming: Es una tcnica basada en la extraccin del suelo
contaminado y su extensin en espacios areas para que sea aireado
mediante

volteo.

Se

pueden

gestionarse correctamente.

generar

Lixiviados

que

deben

Compostaje:

El

suelo

contaminado

se

mezcla

con

material

altamente Biodegradable (Paja, Astillas de madera; etc.) y se procede

a su degradacin Biolgica aerobia en condiciones controladas. El
compostaje pude realizarse de 3 maneras: en pilas de volteo, en
pilas con sistema automtico de aireacin y en reactor.
Biorestauracin o Biorremediacin: consiste en promover la
biodegradacin de los contaminantes orgnicos del suelo mediante
la estimulacin de poblaciones microbianas presentes en el suelo
(Autctonas)

externas

(Aloctonas).

Dichas

estimulacin

se

consigue mediante la inyeccin de nutrientes (N y P) y Oxigeno (el

oxgeno necesario se puede suministrar mediante ventilacin con
aire o mediante la aplicacin de reactivos qumicos, como perxido
de hidrogeno).
Cuando la limpieza del suelo contaminado es inviable o innecesaria
la actuacin se pude limitar a prevenir o reducir los riesgos
plantados por el mismo, normalmente, las medidas correctoras se
basan en prevenir la migracin de los contaminantes y el contacto
directo con estos en lugar afectado. Una manera habitual de
conseguir dicho objetivo es la utilizacin de distintos tipos de
recubrimiento de la superficie del sitio (Asfalto, arcillas, plsticos),
generalmente en forma de barreras, asi se consigue confinamiento
de los contaminantes en la zona recubierta.
Estructura

qumica

del

hidrocarburo:

la

inherente

biodegradabilidad de un Hidrocarburo depende, en gran medida, de

su estructura molecular. Siendo los Parmetros que ms van a
afectar la halogenacin, la existencia de ramificaciones, la baja
solubilidad en el agua y la diferente carga atmica.
Nmero aproximado de organismos comnmente encontrados en
suelos (Martnez 1997).

4.

MATERIALES Y METODOS

MATERIALES

Matraz

Placas

Probeta

Pipeta

Gradillas

Esptula

EQUIPOS

Incubadora

Mechero Bunsen

Autoclave

Balanza

microscopio

INSUMOS

Agar Nutritivo

Agua destilada

Muestra de tierra sin pesticida

Muestra de tierra con pesticida

4.1. MTODOS.
Preparacin del Agar Nutritivo

Se pes 1.8 gr de Agar Nutritivo, que se mezcl en 90 mL de

agua destilada en un matraz y se llev al A 121C a 15 Libras
de presin por 20 min para esterilizar.

Se

saca

el

matraz

del

autoclave

se

verti

15

mL

aproximadamente de Agar Nutritivo en 6 placas, cerca de un

mechero y sin hablar para esterilizar el ambiente. Se dej
enfriar que el agar se ponga slido.

Siembra de las muestras de tierra pura mediante diluciones:

Se llen 10 gramos de la muestra tierra pura a la primera

dilucin.
Sucesivamente se sac 10 ml de esa dilucin y se pas a la

segunda dilucin, y se hizo lo mismo de esta dilucin al resto

de diluciones; utilizando una pipeta diferente para cada
dilucin y dejndola en el frasco de la dilucin respectiva.

De las 5 diluciones se cogi las diluciones -1, -3 y -5 y se

procedi a sembrar 3 gotas de estas en 3 placas con Agar
nutritivo y 3 con A. Sabouraud cerca al mechero y evitando
hablar

Siembra De Las Muestras De Tierra Con Insecticida Mediante

Diluciones:

Se llen 10 gramos de la muestra tierra con insecticida a la

primera dilucin.

Sucesivamente se sac 10 ml de esa dilucin y se pas a la

segunda dilucin, y se hizo lo mismo de esta dilucin al resto
de diluciones; utilizando una pipeta diferente para cada
dilucin y dejndola en el frasco de la dilucin respectiva.

De las 5 diluciones se cogi las diluciones -1, -3 y -5 y se

procedi a sembrar 3 gotas de estas en 3 placas con Agar
nutritivo y 3 con A. Sabouraud cerca al mechero y evitando
hablar.

Siembra De Microorganismos Con Insumo Qumico

Se escoge las diluciones 1-, -3 y -5, y lo sembramos en 3

placas rotuladas con 1-, -3 y -5.

Verter 3 gotas de la dilucin -1 en la placa -1 con agar,

usando

una

esptula

drigalski

para

esparcir

homogneamente la dilucin en toda la placa cerca de un

mechero. Repetir los mismos pasos para las placas -3 y -5.

Una vez sembrado se envuelven con papel kraft y se guarda a

temperatura ambiente por 24 horas en un lugar y fresco.

Siembra De Microorganismos Sin Insumo Qumico

Se escoge las diluciones 1-, -3 y -5, y lo sembramos en 3

placas rotuladas con 1-, -3 y -5.

Verter 3 gotas de la dilucin -1 en la placa -1 con agar,

usando

una

esptula

drigalski

para

esparcir

homogneamente la dilucin en toda la placa cerca de un

mechero. Repetir los mismos pasos para las placas -3 y -5.

Una vez sembrado se envuelven con papel kraft y se guarda a

temperatura ambiente por 24 horas en un lugar y fresco.

Pesamos 0.6 gr de agar nutritivo, disolver en un matraz con

20 mL de pesticida, ms 10ml de agua destilada. Se lleva al
autoclave a 121 C por 15 Lb de presin.

Sacamos el matraz, y vertimos en 2 placas aproximadamente

15 mL, y dejamos enfriar para que se vuelva slido.

De las placas con insumo qumico tomamos el -3 y -5

seleccionamos 25 microorganismos diferentes para realizar a
siembra.

 En las 2 placas preparadas con agar nutritivo se rotula con

cuadros enumerndolas del 1 al 25 para realizar la siembra
por trasplante.
Sacamos una muestra del microorganismo nmero 1 de la
placa con sembrada y trasplantamos en el cuadro nmero 1
de la placa con agar nutritivo con insumo.
Se realiza la misma accin para los 25 microrganismos, se
envuelve con papel kraft y se guarda a temperatura en un
lugar seco y fresco.
RECONOCIMIENTO DE MICROORGANISMOS

De las placas se toman el microorganismo que crecieron en el

agar con insumo qumico las cuales fueron 14.

Se realiz la coloracin gran para cada uno de los 14

microorganismos, y se observa al microscopio.

4.2. RESULTADOS E INTERPRETACIN

Conteo de microorganismos en las placas:
Hacemos el conteo de los microorganismos de las placas -3 con y sin
insumo, porque el -1 tena muchos microorganismos y la -5 tiene
poca cantidad de microorganismos.
MUESTRA

-1

-3

-5

235

604

Agar Nutritivo
sin insumo
qumico
Agar Nutritivo
con Insumo
qumico

De la placa fueron:
Con insumo: Los resultados 235*103 ufc/gr
Sin insumo: 604*103 ufc/gr
INTERPRETACIN:
Notamos que en el agar nutritivo sin insecticida o tierra pura
tenemos menos colonias formadas con 235*103 ufc/gr.
El agar nutritivo con insecticida sea tierra con insumo
tenemos ms colonias formadas con 604*103 ufc/gr o ml
El insecticida utilizado no afecta a la flora microbiana, porque
aun con el insumo creci muchas ms colonias.
RECONOCIMIENTO DE MICROORGANISMOS ENCONTRADOS

MICROORGANISMOS

CANTIDAD

COCOS GRAM +

COCOS GRAM -

COCOS ESPORULADOS +

COCOS ESPORULADOS -

BACILOS GRAM +

BACILOS GRAM -

BACILOS ESPORULADOS GRAM +

BACILOS ESPORULADOS GRAM -

INTERPRETACIN.
En la muestra de tierra se encontraron microorganismos; como
Cocos Gram positivos y negativos, bacilos Gram positivos y
negativos, cocos esporulados Gram positivos y negativos y
bacilos esporulados Gram positivos y negativos.

5.

CONCLUSIONES
Se determin que el insecticida no afecta a la flora microbiana de
la tierra de cultivo.
Se

puedo identificar microorganismos como. Cocos Gram

positivos y negativos, bacilos Gram positivos y negativos, cocos

esporulados Gram positivos y negativos y bacilos esporulados
Gram positivos y negativos.se pudo encontrar hongos en las
placas cuando se sembraron las bacterias.
6.

RECOMENDACIONES
La muestra de tierra debe estar con presencia del insecticida
para el tratamiento en el laboratorio, para lo cual debe recogerse
la muestra de tierra una semana despus del uso del pesticida
en el campo.
La muestra recogida solo debe tener el insecticida y no otros, ya
que nuestro objetivo es verificar si existen microorganismos que
son capaces de resistir ese tipo de insecticida.
Para el momento de las siembras, debe realizarse con sumo
cuidado,

porque

solo

queremos

el

crecimiento

de

microorganismos del suelo y no ajenos a ello.

Si se cuenta con suficiente tiempo y material este procedimiento
de laboratorio se puede realizar ms de una vez para obtener
mejores resultados.

7.

REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

Contaminacin y depuracin de suelos. Instituto tecnolgico

geominero de Espaa.

Orozco C, Perez A, Nieves m. 2003. Contaminacin AmbientalUna visin desde la Qumica. Editorial Thomson. Espaa.
Primera Edicin. Pag. 631

Pelczar M, Reid r, Chan E. 1991. Microbiologa. Editorial

McGRAW-Hill. Mxico. Segunda Edicin. Pag. 632.

Manahan S. Introduccin a la Qumica Ambiental. 2007.

Editorial Revert UNAM. Segunda edicin. Pag. 303.

Collazos J. Manual de Evaluacin Ambiental de Proyectos. 2005.

Editorial San Marcos. Segunda Edicin. Pag. 99.

Martnez, J. 1997. Importancia de la identificacin de los

microorganismos

que participan en

la biodegradacin de

compuestos xenobioticos. Symposium.

Koneman,

Allen,

Dowell,

Janda,

Sommers,

Winn.

1992.

Diagnostico icrobiolgico. Tercera edicin. Editorial medica

panamericana. Pp. 203-268.

http://www.lavanguardia.com/20120723/54328578565/mcrean-un-producto-con-bacterias-que-facilita-la-recuperacionde-suelos-incendiados-en-pocos-meses.html

http://www.manualdelombricultura.com/foro/mensajes/17244
.html.

http://www.agro.unalmed.edu.co/publicaciones/revista/docs/3
.Evaluaciondetecnologiaparalarecuperacion.pdf

Contaminacin del suelo: Estudios, tratamientos y gestion, Dr.

Ing. De Montes, Mariano Seonez Calvo, Ediciones MundiPrensa, 1999.

Alexander, M. 1977. Introduccin to soll Microbiology.2da Edition

John. Wiley & Sons, New York,USA

ANEXOS

Cocos esporulados Gram

(positivos y negativos)

bacilos