ANLISIS COMPARATIVO ENTRE PLANTAS CON METABOLISMO C3, C4 Y

CAM

Barajas-Daniel, Christian Fernando

Universidad de Guadalajara / barajas_christian@hotmail.com

Resumen.
La fotosntesis es el proceso mediante el cual las plantas obtienen energa a
partir de la luz solar, mediante la produccin de molculas energticas que
participan en el proceso de fijacin de CO2 para generar carbohidratos.
Las plantas presentan 3 tipos de metabolismos que afectan su distribucin:
metabolismo C3, C4 y CAM. Se realiz un estudio de la distribucin a travs del
conteo de organismos con estos tipos de metabolismo y se analizaron las
estructuras fotosintticas. Esto con la finalidad de reconocer las diferencias
anatmicas, como son la determinacin de orgnulos fotosintticamente activos,
conteo de estructuras encargadas del intercambio de gases (estomas) y distribucin
de tejidos. Tambin para determinar el porcentaje de distribucin entre las plantas
con los diferentes metabolismos fotosintticos.
Las plantas C3 presentan parnquima en empalizada (fotosinttico) y esponjoso
(difusin de gases). Las plantas C4 presentan anatoma de Kranz para separar la
captacin de CO2 con el ciclo de Calvin. Las plantas CAM fijan el CO2 durante la
noche y el ciclo de Calvin durante el da.
La distribucin entre los tipos C3 y C4 es similar debido a que hay caractersticas
ambientales que benefician a ambas, pero la mayora de las C4 estaban secas.
El nmero de estomas no slo depende del metabolismo fotosinttico, sin embargo
en plantas CAM es muy notable la reduccin del nmero de estos, as como el
aumento del grosor de la cutcula.
Palabras clave: Fotosntesis C3, fotosntesis C4, fotosntesis CAM, anatoma de
Kranz, estomas, parnquima en empalizada, parnquima esponjoso, cutcula.

Introduccin.
Las hojas constituyen uno de los tres rganos bsicos de las plantas
superiores. Las principales funciones de las hojas son la fotosntesis y la
transpiracin. La funcin dominante de las hojas es la fotosntesis, proceso en el
cual la hoja captura luz y fija CO2 del aire. Al igual que la raz y el tallo, la hoja est
formada por tejido vascular, parenquimatoso y drmico. La epidermis protege la hoja
de prdidas de agua y contra daos causados por factores ambientales, asimismo
permite el intercambio de vapor de agua, CO2 y O2 por los estomas.
Podemos definir a la fotosntesis como un proceso mediante el cual las plantas usan
energa solar para producir materiales orgnicos (carbohidratos) a partir de
elementos inorgnicos (CO2, agua y minerales). La energa producida durante este
proceso es empleada para el mantenimiento de las funciones celulares, crecimiento

y para la sntesis de nuevas estructuras. La fotosntesis se lleva a cabo en dos

fases: 1. Fase luminosa o reacciones fotodependientes, y 2. La fase oscura o
reacciones de fijacin de carbono, en la que el bixido de carbono es transformado
en carbohidratos; en esta ltima fase los procesos bioqumicos se llevan a cabo a
travs de tres vas metablicas: metabolismo C3 (primitivo), C4 y CAM (mecanismos
de concentracin de CO2). Por lo general las plantas de climas templados frescos
usan la va fotosinttica C3, plantas de climas relativamente secos- clidos muestran
fotosntesis C4 y las plantas que crecen en ambientes secos (ridos) muestran
fotosntesis CAM (metabolismo cido de las crasulceas).
La toma de CO2 ocurre a travs de los estomas, los cuales pueden encontrarse en
la epidermis inferior (hipostomticas), o en la epidermis superior (hiperestomticas),
como es el caso de las hojas de plantas acuticas, pero en muchos casos los
estomas ocurren en ambos lados (anfiestomticos).
Una vez dentro de la hoja, el CO2 se difunde de los espacios areos intercelulares a
los sitios de carboxilacin en el cloroplasto de plantas C3 o el citosol en plantas C4 y
CAM. En el cloroplasto se lleva a cabo la fijacin y reduccin del CO2 para producir
energa reductora (azcares).
El tejido fotosintticamente activo de la hoja se llama mesfilo, ste se localiza entre
la epidermis superior y la inferior. El mesfilo est formado por el parnquima de la
hoja y los espacios intercelulares. En la mayora de las plantas C3 (como en las
dicotiledneas) el mesfilo esta diferenciado en parnquima de empalizada y
parnquima esponjoso. En las hojas de plantas C4 el mesfilo es un tejido
homogneo, y se observa que las clulas del mesfilo y las del haz de vaina, forman
capas concntricas alrededor de los haces vasculares. Estas clulas compactas en
forma de vaina son grandes clulas parenquimticas que contienen cloroplastos
grandes. Esta disposicin concntrica se denomina anatoma Kranz.
Las plantas CAM se caracterizan porque sus rganos fotosintticos son tallos u
hojas suculentas, tienen cutculas gruesas y densidad baja de estomas. Los tallos de
cactceas tienen dos regiones principales de tejidos. Al realizar un corte transversal
de un tallo cilndrico se nota que en la parte externa de ambos tipos de tallos se
encuentra el clornquima fotosinttico, y en la parte interior de estos el parnquima
medular. El tejido de clornquima se distingue por su color verde. Este tejido puede
ser de 3 a 5 mm de grueso, y contiene las enzimas del metabolismo CAM. El tejido
interno blanco es un parnquima especializado en el almacenamiento de agua, el
cual vara de 0.3 cm en grosor en Opuntia fragilis hasta cerca de 45 cm en
Ferocactus acanthodes. Durante la sequa, el agua se mueve fuera de este tejido de
almacenamiento haca el clornquima, donde el agua ayuda a mantener las
reacciones bioqumicas y la apertura de estomas para la asimilacin de CO2.

Objetivos.
-

Reconocer las diferencias anatmicas entre plantas tipo C3, C4 y CAM, como
son la determinacin de orgnulos fotosintticamente activos, conteo de
estructuras encargadas del intercambio de gases (estomas) y distribucin de
tejidos.
Determinar las diferencias en porcentaje sobre la distribucin de plantas
segn el tipo de metabolismo: C3, C4 y CAM.

Materiales y mtodos.
Materiales: Hojas milimtricas, cordn de hilo, portaobjetos, cubreobjetos, navajas
para rasurar, gotero con agua, pegamento de contacto transparente (Kola-Loka),
vernier, azul de toluidina, lugol, vernier.
Equipo: Microscopio compuesto.
Metodologa:
Se marcaron dos reas de 1.5 m^2 para tomar datos del porcentaje de
plantas C3, C4 o CAM localizadas y se utiliz una hoja de papel milimtrico para
sealar la ubicacin del porcentaje de los tipos de plantas, de las cuales, se
colectaron 3 monocotiledneas y 3 dicotiledneas, esto con la finalidad de analizar
su histologa a travs de cortes y tincin para determinar su tipo de metabolismo, al
igual que hacer un conteo de los estomas tanto en el haz, como el envs. Debido a
que no se identific en la zona alguna planta con metabolismo CAM, se utilizaron
muestras de Opuntia colectadas previamente para la observacin del tejido.
Se realizaron cortes transversales con una navaja de rasurar slo en una hoja de
monocotilednea, una de dicotilednea y en el tallo de Opuntia. Se tieron las
muestras con azul de toluidina y se coloc el cubreobjetos para posteriormente
observar con el objetivo de 10X y 40X. Esta tcnica histoqumica permiti de una
manera rpida diferenciar entre plantas con metabolismo C3 y C4, debido a que se
pudo identificar la organizacin de las clulas del haz de vaina, alrededor de las
venas, y cmo se encuentra distribuido el mesfilo.

Igualmente se tieron con azul de toluidina los cortes trasversales de Opuntia, con el
fin de diferenciar el tejido fotosinttico (clornquima) y de almacenamiento de agua
(parnquima medular).
Para hojas de plantas C3 y C4, se coloc una gota de pegamento Kola-Loka sobre
el portaobjetos y luego se aadi sobre l, un trozo del haz de la hoja. Se dej unos
minutos hasta que se secara y despus se retir la hoja, dejando el patrn que tiene
la hoja marcado en el pegamento. Se realiz el mismo procedimiento en el envs.
Para la planta CAM, se despeg la cutcula y, aadiendo una gota de agua, se
coloc sobre un portaobjetos.
Se observ al microscopio a 40x todas las muestras y se cont el nmero de
estomas en 3 campos distintos por muestra.
Se utiliz Microsoft Office Excel para transferir los datos y generar las grficas.

Resultados.
Distribucin de las plantas:

Figura 1. Conteo de plantas con metabolismo C3 y C4. Las C3 estn representadas

con un tringulo y las C4 con un crculo.

En el rea 1 se obtuvo un porcentaje de 61.11% para plantas C3 y 38.88% para

plantas C4; en el rea 2 se obtuvo un porcentaje de 40% para plantas C4 y 60%
para plantas C4.
Esto dio como resultado un total de 50% de plantas C3 y plantas C4. En ninguna de
las dos reas se encontr plantas tipo CAM.
Un gran porcentaje de plantas C4 estaban secas, por lo que result difcil contar
algunas.

Conteo de estomas:
En el haz de las hojas donde se contaron estomas, se obtuvieron un promedio de 26
en la planta tipo C3 y 26 en la tipo C4.
En el envs se obtuvo un promedio de 41 estomas para la tipo C3 y 66 para la tipo
C4.
En la planta tipo CAM (Opuntia), el promedio fue de 9 estomas, y este dato fue
representado en ambas grficas.

35
30
25
C3

20

C4
15

CAM

10
5
0

Grfica 1. Estomas contados en el haz.

80
70
60
50

C3

40

C4

30

CAM

20
10
0

Grfica 2. Estomas contados en el envs.

Se present una mayor cantidad de estomas en el envs tanto en la planta C3 como

en la C4. En la planta C4 se encontraron ms estomas en el envs, seguida la C3 y
por ltimo la CAM.
La planta CAM presenta mayor uniformidad en cuanto a distribucin de estomas, ya
que entre una zona del tallo y otra en la que se contaron, se present muy poca
variacin en el nmero de estos. La planta CAM presenta considerablemente menos
estomas que los otros dos ejemplares.

Observacin de tejido:

Figura 2. Anatoma de la hoja de la planta C3 observada a 10x. 1.- Epidermis. 2.Clulas parenquimatosas. 3.- Parnquima en empalizada. 4.- Parnquima
esponjoso.
En la planta con metabolismo C3 fue posible identificar el parnquima en empalizada
y parnquima esponjoso. La tincin del almidn con lugol fue posible observarla en
la zona del parnquima en empalizada, la zona donde se realiza la fotosntesis.

Figura 3. Anatoma de la hoja de la planta C4 observada a 10x. 1.- Clorenquima.

2.- Fibras. 3.- Xilema. 4. Floema. 5.- Haz de vaina.
En la planta C4 se observ la anatoma de Kranz, en la que al agregarse lugol, se
ti el almidn en la zona del haz de vaina. Esta planta no se divide en parnquima
en empalizada ni esponjoso y el clornquima se distribuye alrededor de los haces
vasculares como se muestra en la Figura 3.

Figura 4. Anatoma del tallo de Opuntia. 1.- Tricoma. 2.- Epidermis. 3.Colnquima. 4.- Clornquima. 5. Mdula (Hidrnquima)
En el tallo de la planta CAM se observa un parnquima fotosinttico cerca de la
superficie de ambos lados de tallo y en el centro, un hidrnquima que sirve como
almacenamiento de agua de mayor grosor que el clornquima. En la zona nmero 4
fue donde pudo observarse la tincin del almidn con lugol.

Discusin.
A pesar de que en este trabajo se considere suficiente el hecho de que las
plantas sean monocotiledneas para presentar metabolismo C4 y dicotiledneas
para presentar metabolismo C3, algunos autores sealan la presencia de
metabolismo C4 en algunas dicotiledneas, en la que su abundancia se correlaciona
con la aridez, as como metabolismos intermedios, por ejemplo las C3-C4, en el que
algunas especies contienen cantidades sustanciales de enzimas C4 pero no
presentan la anatoma tpica de stas (Pimienta-Barrios, 2003).
Tambin el metabolismo C3-CAM, en el que sus representantes poseen una
capacidad inherente para la induccin de CAM en dependencia de condiciones
ambientales, en especial la disponibilidad de agua. Tambin se relaciona la
prosperidad de las C3 en temporadas de fro y las C4 en verano (Pimienta-Barrios,
2003).
De acuerdo a lo esperado, Opuntia es la planta que tiene menor nmero de
estomas. Las otras dos (C3 y C4) presentan una densidad similar, por lo que el
metabolismo parece no ser el factor determinante para el nmero de estomas.
Pimienta-Barrios (2003) seala que el nmero o densidad de estomas es una
caracterstica especfica de las especies, aunque los nmeros varan de acuerdo al
hbitat en el cual las plantas crecen.
Tambin la temperatura es considerada un limitante para el crecimiento vegetal y
por ende, para la distribucin de las diferentes especies. La adaptacin a los
cambios de temperatura es importante y la presencia de las diferentes rutas
fotosintticas mencionadas en este trabajo, es un factor que influye en cmo los
organismos se comportan en funcin de la temperatura.

La adaptacin a las bajas temperaturas est relacionada con la presencia de ms

enzimas fotosintticas y mayor cantidad de cidos saturados en las membranas
tilacoidales. A altas temperaturas se afecta el fotosistema I, aumenta la tasa de
fotorrespiracin y decrece el estado de activacin de Rubisco. Tanto las plantas C3
como las C4 responden a este cambio de temperatura. Las C4 presentan un punto
mayor de temperatura ptima al que pueden realizar la fotosntesis, pero las C3 son
consideradas con mayor adaptabilidad para modular su temperatura ptima de
crecimiento, a otro rango diferente. (2)
Con lo mencionado anteriormente acerca de las plantas CAM, existe una correlacin
igualmente con la temperatura. Las plantas CAM durante el da, que es cuando
generalmente se presentan temperaturas ms altas en los lugares donde stas se
distribuyen, tienen mayor actividad en la cadena de transporte de electrones,
aumentando sta con la temperatura. Sin embargo durante la noche, la fijacin de
CO2 se realiza a una temperatura que oscila entre los 20 - 30. Esto indica que la
temperatura ayuda a estas plantas en sus mecanismos de adaptacin para realizar
el ciclo de Calvin durante el da y la fijacin de CO2 durante la noche a travs de los
estomas. (2)
Los datos obtenidos en el trabajo se correlacionan con algunos datos obtenidos en
el artculo y en la literatura, sin embargo algunos no concuerdan. Por ejemplo, el que
una planta sea monocotilednea o dicotilednea no representa directamente el tipo
de metabolismo que realiza. Se recomienda que en campo, cuando se analice la
distribucin de plantas con diferentes metabolismos, no se llegue a una conclusin
determinada solamente con la intuicin, sino que a travs de anlisis histolgicos y
de estructuras fotosintticas, se aproxime un resultado. Por ejemplo, falt analizar
cortes de algunas plantas colectadas, por lo que puede ser necesario recapitular ese
punto.
De igual manera, otro ejemplo, como el nmero de estomas en C3 y C4 requieren
una atencin especial, pues el metabolismo fotosinttico no resulta ser el nico
factor que influye en su comportamiento. Es recomendable tambin que el conteo de
estomas se realice en ms reas de la misma hoja e incluso entre diferentes hojas
del mismo individuo para que las medidas dispersivas de los datos no se vuelvan
grandes.
Por ltimo, considero que los resultados obtenidos en Opuntia presentan mayor
homogeneidad y se correlacionan con lo mencionado en la literatura.

Conclusiones.
La distribucin de las plantas C3 y C4 resulta similar en las zonas que se
escogieron, esto parece ser posible gracias a que hay caractersticas ambientales
que benefician tanto a una como a la otra. Para ambos tipos existe una considerable
exposicin de luz, relacionada con la ausencia de rboles que podran obstrurla,
tambin hay agua suficiente y, las temperaturas diferenciales de las estaciones
explican por qu prosperan las especies C3 en Febrero sobre las C4, de las que se
encuentra un gran porcentaje en estado seco.
Las plantas tipo C3 estn adaptadas a ambientes donde existe poco estrs
hdrico, presentan parnquima en empalizada para realizar la fotosntesis y
parnquima esponjoso para una mayor difusin de gases. Las C4 con su anatoma

de Kranz pueden reducir la tasa de fotorrespiracin gracias a la separacin espacial

de los procesos de fijacin de CO2 y ciclo de Calvin. Las CAM tienen su mayor
accin en ambientes ridos, realizando la fijacin de CO2 durante la noche y el ciclo
de Calvin durante el da. Esto explica el fenmeno de la cutcula, en la que su grosor
est correlacionado con la prdida de agua a travs de la estructura fotosinttica,
que es mayor para plantas CAM.
Otra forma que tienen las plantas CAM de reducir su prdida de agua es el
nmero de estomas que presentan en la estructura fotosinttica, de las cuales en el
caso de Opuntia, son mucho menores que las contadas en el haz y el envs de las
plantas C3 y C4. Los tipos de metabolismo (C3, C4 y CAM) no son suficientes para
explicar la diversidad estomtica presente en las hojas de las diversas plantas,
tambin puede estar relacionado con la exposicin a luz solar. En las plantas C3 y
C4 de este trabajo no existen diferencias significativas entre su nmero estomtico,
esto puede deberse a que ambas especies son herbceas con una exposicin de luz
similar.
Los tres tipos de plantas presentan una distribucin y adaptacin ptima diferente
ante diversas condiciones. Esto por ende, representa un ejemplo de la enorme
plasticidad que tienen las plantas y su capacidad para adaptarse a los cambios que
han vivido los organismos en la historia evolutiva.

Comentario personal.
Me hubiera gustado tener un mejor desempeo durante el desarrollo de la
prctica, la falta de integrantes en mi equipo tuvo influencia en cuanto a las
actividades que alcanzamos a realizar. El diseo de la prctica es bueno y
desarrollndose adecuadamente es posible obtener mucho provecho de ella.
El conteo de plantas C4 nos pareci algo complicado debido a que no fue posible
algunas veces distinguir entre un organismo y otro, pues los pastos estaban secos.

Referencias:
[1] Pimienta-Barrios, E. (2003). Ecofisiologa de la fotosntesis: temas selectos en
ecologa y fisiologa vegetal. Primera edicin, Universidad de Guadalajara. Zapopan,
Jalisco, Mxico. Pp. 15-91
[2] Yamori, Wataru; Hikosaka, K; Way, D. A., (2014). Temperature response of
photosynthesis in C3, C4, and CAM plants: temperature acclimation and temperature
adaptation. Photosynthesis Research 119 (1-2), pp. 101-117.

Cuestionario.
1. Mencione en qu consiste la anatoma de Kranz, qu plantas la presentan, y
cul es su funcin? En plantas con metabolismo CAM en qu tejido se encuentran
los cloroplastos?
La anatoma de Kranz es la disposicin de clulas parenquimticas en forma
de corona que rodea a los haces vasculares y contiene varios cloroplastos.

sta disposicin concntrica es tpica de hojas con metabolismo C4 y es una

adaptacin a ambientes ridos.
En plantas con metabolismo CAM, los cloroplastos se encuentran en el
clornquima.

2. Entre plantas C3 y C4 existe una gran diferencia en la distribucin de los tejidos

de la hoja, mencione cual es, y como se relaciona con el fenmeno fotosinttico?
El mesfilo de las plantas que tienen un metabolismo C3 se puede diferenciar
en dos tipos: el de empalizada contiene clulas parenquimticas muy
alargadas y apiladas, sin espacios intercelulares y con numerosos
cloroplastos, por lo que es donde se lleva a cabo la fotosntesis; el esponjoso
tiene clulas isodiamtricas con grandes espacios entre ellas, no contienen
muchos cloroplastos y es donde se lleva a cabo el intercambio gaseoso.
En plantas C4 el parnquima no est diferenciado y se dispone alrededor del
tejido vascular, el cual se encuentra rodeado por la anatoma de Kranz.

3. Por qu las observaciones en esta practica estn enfocadas principalmente a la

hoja?
La fotosntesis se realiza principalmente en las hojas y dependiendo de la
manera en que stas realizan la fijacin de carbono, podemos clasificarlas en
tres grupos (C3, C4 y CAM) y de sta manera, compararlas.

4. Mencione el nombre de la estructura por la cual se lleva a cabo el intercambio de

gases?
El intercambio de gases se realiza a travs de los estomas, que se
encuentran en la epidermis (ya sea abaxial o adaxial, dependiendo del
metabolismo de la planta) y estn formados por las clulas oclusivas y las
clulas acompaantes.

5. Explique la funcin del parnquima y su localizacin?

El parnquima es un tejido que se encuentra en toda la planta, tomando parte
en funciones metablicas, fotosintticas, respiratorias, estructurales y de
almacenamiento.

6. La fotosntesis se lleva a cabo en: rgano: la hoja tejido: parenquimtico y

organelo: cloroplasto.