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Areia, 2014
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Vacutainer;
Antes de se realizar a colheita de sangue, o ideal seria que o animal estivesse 12 horas de jejum, o
que auxiliaria na dosagem de glicose e evitaria hiperlipidemia. Se o animal for de pequeno porte e for
realizar apenas o hemograma, o vacutainer pode ser utilizado, mas se for necessrio um volume bem
maior de sangue ou se quiser fracionar o volume do sangue em vrios tubos diferentes, utiliza-se a
seringa. Algumas observaes devem ser levadas em considerao:
-Se o animal fez algum tipo de exerccio repentino antes de colher o sangue, ir ter uma resposta
esplnica (ao da adrenalina), onde ao contrair, o bao libera o seu estoque de hemcias e plaquetas
(promovendo uma eritrocitose e trombocitose relativas, ou seja, no verdadeira, pois no momento em
que o animal se acalmar as taxas voltaro ao normal). A adrenalina tambm aumenta a frequncia
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Colheita de amostras
Quanto aos locais de venopuno, as veias jugulares (Fig. 2) so as melhores para colheita de
sangue, pois vem um maior volume de uma s vez, diminuindo os riscos de perder a veia, vir lquido
tissular e consequentemente ocorrer coagulao da amostra. As ceflicas (fig. 1) e safenas podem ser
utilizadas tambm, mas de preferncia em ces de grande porte.
(Fig.1)
(fig.2)
A coleta de urina pode ser feita por mico espontnea, aguardando o animal urinar. Se for para
realizar cultura microbiolgica essa tcnica no adequada, pois h contaminao da urina no decorrer da
uretra. Cistocentese a tcnica de colheita por puno direta da bexiga com uma agulha e seringa, sendo
o melhor mtodo para cultura (deve-se fazer uma antissepsia prvia). O responsvel por fazer a colheita
deve informar ao laboratrio se o sangue presente na amostra proveniente de algum vaso atingido
durante a puno.
Processamento da amostra
Deve ser feita uma homogeneizao cuidadosa, principalmente de amostras sanguneas para evitar
que ocorra hemlise.
HEMOGRAMA
Aps ser colhido, o sangue deve ser armazenado em frasco de plstico (as plaquetas se aderem aos
de vidro), devendo respeitar a proporo sangue/anticoagulante. 1,5ml de sangue j o suficiente para o
hemograma. O sangue pode ficar em temperatura ambiente por at 3 horas, aps isso comea a ter
alteraes leucocitrias, e sob refrigerao, 4C (para reduzir a proliferao bacteriana e evitar hemlise)
por 24 horas ir sofrer mnimas alteraes. O plaquetograma deve ser feito em at 2 horas da coleta.
Os tipos de anticoagulantes:
EDTA: na concentrao de 10% para sangue de mamferos e 3-5% para aves e rpteis. o
anticoagulante de eleio para a maioria dos exames hematolgicos, no devendo nunca ser
congelado ou submetido temperaturas maiores que 37C, pois a amostra ficar totalmente
invivel. A exposio prolongada provoca alteraes nos neutrfilos e moncitos (vacuolizao);
CITRATO DE SDIO: o ideal para os testes de coagulao na concentrao de 3,8%;
FLUORETO DE SDIO: o mais adequado para a dosagem da glicemia, pois atuam impedindo
que as hemcias consumam a glicose presente na amostra (a dosagem deve ser feita em at 6 horas
da colheita).
HEPARINA: o de eleio para aves e rpteis, no sendo recomendado para as outras espcies
por causar alteraes morfolgicas das clulas sanguneas. utilizada quando quer dosar clcio,
pois diferente dos anteriores, ela no quelante do clcio e sim evita a converso de pr-trombina
em trombina na cascata de coagulao.
Ao receber a amostra de sangue para realizao do hemograma, a primeira coisa a ser feita o
esfregao sanguneo (em at 30 minutos), para evitar que ocorram alteraes na morfologia dos
leuccitos. Pode ser corado em at 48 horas, desde que esteja fixada com o metanol.
Passo a passo: antes de confeccionar o estirao, preciso que a lmina esteja limpa, sem gordura dos
dedos (passando lcool 70%).
A- Coloca-se uma pequena gota de sangue em umas das extremidades da lmina que est na
horizontal (sobre a bancada); a segunda lmina ou extensora posta sobre a primeira frente da
gota de sangue (formando um ngulo de 30-45);
B- Vai deslizando a extensora para trs, at que encoste no sangue e ele se espalhe por sua borda;
C- Em seguida, sem exercer fora, desliza a extensora pra frente at a outra extremidade de forma
rpida e nica (sem pausas);
D- O esfregao contendo uma poro mais espessa, uma boa rea para observao e a franja que
serve mais para pesquisa de hemoparasitos.
O esfregao sanguneo importante para poder fazer o diferencial dos leuccitos (podendo contar 50
leuccitos na borda superior e 50 na inferior, seguindo o sentido da linha amarela, andando dois campos
pra frente, dois pra dentro, etc. pode ser feita em diagonal, ilustrada pelas setas vermelhas, indo de uma
borda a outra at que se conte 100 leuccitos) e avaliar importantes alteraes que podem estar presentes
nos leuccitos, hemcias e plaquetas. Quando o animal tiver leucopenia (poucos leuccitos) deve-se
realizar a contagem dos leuccitos na objetiva de 40x, mas se tiver leucocitose, conta-se 100 clulas em
linha reta em cada lateral da lmina, soma e tira uma mdia.
Para a Bioqumica utiliza-se o soro sanguneo, ou seja, colhe-se o sangue sem anticoagulante, deixa o
tubo inclinado (podendo por em banho-maria 37C para acelerar a coagulao) e espera coagular, em
seguida centrifuga o tubo e separa o soro do cogulo que ir se formar no fundo do frasco. A presena de
hemlise ou hiperlipidemia pode interferir nos resultados quando se dosa atividade de algumas enzimas.
A hiperlipidemia pode ser corrigida ao administrar heparina por via IV (100UI/kg).
*HEMATOPOIESE
a produo de clulas do sangue, compreendendo a eritropoiese (hemcias), leucopoiese (leuccitos) e
trombocitopoiese (plaquetas), podendo ser dividida em duas fases:
Pr-natal: o sangue e vasos sanguneos comeam a se formar no saco vitelnico, sendo primeiro
formado os vasos por diferenciao das clulas mesodrmicas. Depois dos vasos as clulas
mesenquimais vo formar as clulas sanguneas primitivas, chamada de ilhotas sanguneas. As
clulas comeam a e multiplicar dentro dos vasos e migram para o fgado, que se torna um rgo
hematopoitico, ou seja, produtor de clulas, seguido pelo bao, medula ssea, timo e linfonodos.
Ps-natal: antes do nascimento a medula ssea passa a ser exclusivamente produtora de clulas,
com exceo dos camundongos, onde o fgado continua sendo rgo hematopoitico.
Eritropoiese
Rubroblasto
>
Prorrubrcito >
rubrcito >
Rubroblasto ou rubriblasto: uma clula grande, com o ncleo bem redondo, cromatina frouxa
e granular, nuclolos bem proeminentes, citoplasma azul-escuro;
Rubrcito ou rubrcito: menor que o seu antecessor, ncleo redondo, sem nuclolos e sim
aglomerados de cromatina e o citoplasma predominantemente azul, com maior quantidade de
vermelho.
Reticulcito: so eritrcitos imaturos, azulado, pouco maior que as hemcias devido quantidade
de organelas presentes em seu citoplasma. Organelas estas produtoras de protenas, como a
hemoglobina. Quando so observados na colorao do pantico rpido na lmina de sangue total,
so chamados de eritrcitos policromatoflicos, ou pode-se dizer que h presena de policromasia
na lmina.
Hemcia: aps a expulso das organelas, o reticulcito torna-se hemcia, com sua quantidade
normal de hemoglobina. Por perderem suas organelas, no produzem mais protenas, sendo
incapazes de reparar qualquer dano sua membrana, morrendo rapidamente.
Morfologia das hemcias: as hemcias de mamferos so anucleadas, diferentemente dos rpteis, peixes,
anfbios e aves. A hemcia dos mamferos possui um halo central plido devido forma bicncava, com
menor teor de hemoglobina nessa rea (isso confere uma flexibilidade maior para passar nos capilares e
uma troca melhor troca de oxignio). Nas espcies com hemcias pequenas, como os gatos, ruminantes e
equinos, esse halo central plido no notado.
Eritropoiese o processo de produo de hemcias, medida que as clulas precursoras das hemcias
vo amadurecendo vai ocorrendo: perda de organelas, diminuindo de tamanho, ncleo vai se
condensando, e aumentando a sntese de hemoglobina. A Eritropoiese dividida em duas fases, sendo a
primeira de diviso celular e a segunda de sntese de hemoglobina. Os nutrientes necessrios na primeira
fase so: nessa fase ocorre a sntese do material gentico e bases nitrogenadas, sendo necessrio de
vitamina B12 e cido Flico (maturadores). Ento, se h falta dessas substncias, no ir ocorrer a
maturao (diviso) das hemcias e sero liberadas grandes na circulao, adquirindo uma anemia
(porque uma hemcia jovem que iria dar origem a 16-32 hemcias, no vai se dividir) macroctica (pois
vo ser grandes, mas no indicativo de regenerao). Na segunda fase ocorre sntese da hemoglobina,
so necessrios: ferro, aminocidos para sntese de globina, cobre em pequena quantidade, vitamina B6
um cofator enzimtico e traos de cobalto e nquel.
Formao de hemoglobina: 5-ala-sintetase (B6 um cofator enzimtico que atua sobre a 5-alasintetase) uma enzima necessria para produo de aminolevulinato que leva a formao de
porfobilinognio, que dar origem protoporfirina, que junto ao ferro formam-se 4 hemes, se unindo a
globina e formando hemoglobina.
Para que ocorra a produo de hemcias deve haver um estmulo, que feito atravs da
eritropoietina, uma citocina eritropoitica produzida nos rins (clulas justaglomerulares) e no fgado
(15%), com exceo dos ces, que restrito aos rins. Quando o animal est anmico, ocorre um dficit na
oxigenao do organismo levando a uma hipxia tissular, isso estimula a liberao de um fator induzido
pela hipxia (HIF-1) que fator de transcrio, ou seja, ele vai se ligar fita de DNA e fazer com que a
RNApolimerase transcreva um RNAmensageiro da eritropoietina. Ento, toda vez que h hipxia
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produzido o HIF-1, que adentra na clula justaglomerular (rins) ou de Kupffer (fgado), vai at o ncleo
induzir a produo de eritropoietina, que cai na corrente sangunea e vai at a medula ssea atuar:
Diminuindo a apoptose das clulas progenitoras eritride, ento uma clula que entraria em
apoptose, ir continuar a se desenvolver e dar origem a mais 16-32 novas clulas.
Aumentando o nmero de unidades formadoras de colnias (UFC);
Diminuindo o tempo de liberao de hemcias da medula ssea, ento as clulas jovens mesmo
sem receptores de membrana saem da medula por estmulo da eritropoietina (fisiologicamente as
hemcias maduras possuem receptores de membrana, onde se ligam citocinas e fazem com que
elas deixem medula).
1- Quais os corantes utilizados para visualizao dos reticulcitos?
So os chamados corantes supravitais, o NAM (normo azul de metileno) e o ACB (azul de cresil
brilhante). Esses corantes promovem uma agregao nas organelas, formando redes (retculos da o
nome) de organelas condensadas sendo facilmente visualizadas. Quando se cora com o pantico, no
ocorre essa agregao, as organelas ficam espalhadas e ficam de cor azul-acinzentada, devendo ser
chamado de policromasia/policromatoflia.
transforma a biliverdina em bilirrubina, que cai na corrente sangunea, se une albumina ficando na
forma no-conjugada (indireta), segue para o fgado pelo sangue. No fgado a BI se desprende da
albumina e se liga ao cido glicurnico, tornando-se conjugada (direta). Segue para vescula biliar e
eliminada no intestino, sofrendo ao da microbiota se transformando em urobilinognio. Cerca de 10%
reabsorvido, parte ir formar mais sais biliares e o resto eliminado na urina na forma de urobilina. Os
90% so eliminados nas fezes na forma de estercobilina.
Um insuficiente heptico no consegue converter com eficcia a BI em BD, ocorrendo o seu
aumento no sangue, sendo possvel dosar. Nos casos de Colestase, obstruo biliar, onde no elimina a
BD ela ir aumentar na circulao sangunea.
2- Explique como podemos diferenciar laboratorialmente as causas pr-heptica, heptica e
ps-heptica de ictercia.
Na prtica conseguimos dosar Bilirrubina Total (BT) e bilirrubina Direta/conjugada, ento para obterse a bilirrubina indireta s: BT-BD = BI
Na ictercia pr-heptica: ocorre uma intensa destruio de hemcias, e a grande concentrao de
bilirrubina liberada se ligam albumina, mas o fgado no d conta de converter a BI em BD. Ao dosar
bilirrubina haver aumento da BI. Alm de outros sinais de hemlise encontrados ao se fazer um
hemograma (esferocitose, reticulocitose, etc.), alm do aumento das atividades enzimticas (ALT; AST);
Na heptica: o fgado o responsvel por converter BI em BD e produzir albumina, que por sua vez
responsvel por carrear a bilirrubina no sangue. Ao dosar, ir ter aumento de BI e hipoalbuminemia.
Na ps-heptica: a bilirrubina no-conjugada j foi convertida em conjugada, e quando h Colestase por
exemplo, a BD no consegue ser eliminada, tornando circulao. Ao dosar ter aumento de BD, urina
mais amarelada (eliminao aumentada pelos rins), aumento da atividade da Fosfatase Alcalina.
O Hemograma dividido em eritrograma (srie vermelha), Leucograma (srie branca) e
plaquetograma (plaquetas).
ERITROGRAMA
Devemos quantificar:
Volume Globular (VG) ou Hematcrito (Hct);
Concentrao de Hemoglobina (tcnica de cianometahemoglobina);
Hematimetria (Nmero de hemcias por Litro);
ndices de Wintrobe (VGM e CHGM);
Contagem de Reticulcitos;
*Volume Globular (Hematcrito)
O VG corresponde porcentagem de hemcias presentes no sangue, um mtodo confivel que possui
maior reprodutibilidade com menor erro. utilizado como base pra outros exames, mas quando se tem
hemlise o exame confivel passa a ser a [Hemoglobina], que no se altera.
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Preenchendo o capilar;
centrfuga;
aps centrifugao:
Plasma;
Papa de
leuccitos
Papa de
hemcias
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estiver acima MACROCTICA. Esses ndices s so utilizados pra classificar as anemias, se o animal
no apresentar anemia no hemograma no necessrio classificar, apenas calcular.
Microcitose: a principal causa de microcitose por deficincia de ferro por m nutrio ou hemorragias
crnicas, onde o organismo vai perdendo o estoque de ferro.
Macrocitose: a principal causa o aumento de clulas imaturas (reticulcitos), ou por liberao de
clulas mais jovens ainda (rubrcitos, rubroblastos, etc). Pode ocorrer nos casos de deficincia de
vitaminas (B12 e cido flico), as hemcias jovens sofrem uma maturao do citoplasma, mas um atraso
na maturao do ncleo e no conseguem se dividir, tornando-se hemcias grandes (megaloblastos).
Normocitose: pode ocorrer em hemorragias agudas. Quando ocorre uma hemorragia ou hemlise, a
medula s ir responder produzindo e liberando reticulcitos em 2-4 dias, e at que isso ocorra, a anemia
ir continuar sendo Normoctica Normocrmica. Ainda pode no ter dado tempo de responder, ou ela no
ir responder nos casos de hipoplasia e aplasia de medula.
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VGx10
hipercromia no levada em considerao, pois s haver quando o animal tiver uma eritrocitose
(aumento de hemcias). Mas, se a amostra estiver lipmica, ou com hiperbilirrubinemia,
hiperproteinemia, vai d um aumento de hemoglobina e consequentemente com CHGM. Pipetar sangue
demais na hora de diluir para dosar hemoglobina, ou reagente de menos. Deve-se justificar o aumento de
CHGM no exame, caso consiga identificar a causa.
Normocrmica: mais comum quando a medula ainda no respondeu perda de hemcias (no deu 2-4
dias da hemorragia ou hemlise).
Hipocrmica: geralmente so macrocticas por aumento de reticulcitos (ainda no sintetizou toda a
hemoglobina); se for microctica, pode ser por deficincia de ferro.
4- Os cavalos tem uma particularidade, no liberam reticulcitos na corrente sangunea,
sabendo disso, qual a forma de saber se est ocorrendo regenerao pela medula ssea?
Por no apresentar macrocitose ou reticulocitose, devem ser feitos vrios hemogramas seriados a cada 4
ou 5 dias para avaliar essa regenerao a partir dos valores da hematimetria (nmero de hemcias).
5- Quais so as formas que temos de saber se a medula ssea est respondendo?
Atravs da quantificao de reticulcitos, observao de clulas nucleadas (metarrubrcito, rubrcito,
etc.) e policromasia na lmina, alm de corpsculos de Howell Jolly, ponteado basfilo (mais comum em
hemcias de bovinos).
Exemplos:
O animal que apresenta uma reticulocitose:
Ter aumento do VGM devido ao nmero de hemcias grandes, porm os reticulcitos
possuem a concentrao menor de hemoglobina. Portanto, classifica-se: Anemia
macroctica hipocrmica regenerativa. Ao olhar na lmina ir ter policromasia
acentuada. Ex.: Um animal saudvel sofre uma perda excessiva de sangue repentinamente, obteve uma
anemia. Ocorrer uma hipxia tissular que far com que seja liberado o HIF-1, produo de
eritropoietina, que atua na medula para aumentar a produo de hemcias, diminuir apoptose, liberar
clulas jovens na circulao, e tudo isso ir ocasionar em: Anemia (perda grande de hemcias)
Macroctica (aumento de clulas jovens sendo produzidas, principalmente reticulcitos) hipocrmica (os
reticulcitos ainda esto sintetizando hemoglobina, portanto possuem um teor menor) regenerativa.
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RC= 1,17
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Obs.: A contagem de reticulcitos til em ces e gatos, e tem uma aplicao de vacas, porm os equnos
no liberam reticulcitos na circulao.
Se o animal est com o VG muito baixo e os reticulcitos esto em quantidades normais, significa
dizer que ou ocorreu uma perda aguda de sangue e a medula ainda no respondeu (precisa de 2-4 dias) ou
ela no est respondendo (hiporresponsiva), sendo uma anemia Arregenerativa.
INFORMAES
ADICIONAIS
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Inanio: o fgado utiliza aminocidos para a sntese de albumina, e quando h inanio ocorre a
diminuio na produo.
Parasitismo gastrointestinal: os parasitas podem consumir os aminocidos intestinais e diminuir a
absoro, com isso no se formar albumina. Caso os parasitas se liguem mucosa e ingiram
sangue por longos perodos, ir ocorrer a perda de albumina e tambm globulinas.
M absoro intestinal: sndrome da m absoro intestinal, menor absoro de aminocidos e
menor formao de albumina. Esses animais geralmente apresentam fezes diarreicas crnicas;
Insuficincia pancretica excrina (IPE): com a deficincia na liberao de enzimas digestivas
pelo pncreas, no ocorrer digesto de protenas em aminocidos, que no sero absorvidos e
consequentemente no ter produo de albumina. Os animais apresentam sinais tpicos, com
fezes em grandes volumes e amolecidas.
Doena que provoca uma perda acentuada de albumina
Doenas renais/glomerulares: a albumina menor que a globulina, ento em leses glomerulares
graves ocorrem o extravasamento proteico para a urina, ocasionando em hipoalbuminemia com
globulinas normais.
Causas de aumento da concentrao de protena
Hiperalbuminemia e hiperglobulinemia: aumenta apenas em casos de desidratao. Nota-se o
hematcrito aumentado ou prximo ao limite superior.
Hiperglobulinemia (gamaglobulina, betaglobulina e alfaglobulina): a alfa e beta aumentam em
doenas inflamatrias, na fase aguda.
Causas de aumento de fibrinognio
Desidratao: aumenta junto com outras protenas;
Inflamao: um importante componente do hemograma de ruminantes, pois sua concentrao de
eleva muito nos processos inflamatrios, enquanto nas outras espcies inespecfico.
Doena renal: a glomerulonefrite promove o aumento de fibrinognio em ces e ruminantes;
Nas hemorragias crnicas, onde o fgado aumenta a produo e quando h fraturas (calo fibroso),
piometra (gatas), cinomose, parvovirose, enterites, erliquiose, peritonite sptica;
ANEMIAS
a diminuio da massa eritride (srie vermelha), so classificadas como regenerativas ou
arregenerativas baseando-se na resposta da medula ssea.
Anemia Regenerativa
Ocorre uma perda acentuada de hemcias, entretanto a produo se mantm aumentada com a
finalidade de retornar a massa eritride ao valor basal. A anemia regenerativa pode ser causa por:
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Hemorrgica: aguda quando ocorrem traumas com rupturas de grandes vasos e perda intensa
de sangue, o hematcrito fica normal, devido perda de hemcias e plasma na mesma proporo,
porm, com o tempo o lquido intersticial comea a ser deslocado para o plasma a fim de tentar
reduzir as perdas (hipovolemia) e aumentar o volume sanguneo, com isso o hematcrito comea a
reduzir (diluio do sangue) e a anemia comea a ficar evidente. Aps 2-4 dias os reticulcitos
comeam a ser liberados em quantidade maior, tornando uma anemia Macroctica hipocrmica
que vai variar de acordo com o grau de anemia com a resposta da medula. A reticulocitose
aumenta o VGM, pois so hemcias de maior tamanho, porm diminui o CHGM por possurem
uma menor quantidade de hemoglobina sintetizada em seu citoplasma. Causas = procedimentos
cirrgicos, traumas, desordens de coagulao e deficincia de vit K (ingesto de dicumarnicos,
warfarin, etc.).
Com a cronicidade da hemorragia e perda constante de ferro, a anemia passa a ser
Microctica hipocrmica. O ferro essencial para formao de hemoglobina, com sua deficincia
as hemcias sofrem uma ou mais divises adicionais para conseguir atingir uma concentrao
adequada de hemoglobina em seus citoplasmas, ficando pequenas ou microcticas (Micrcitos).
Causas = leses gastrointestinais, neoplasias sangrantes (hemangiossarcoma), trombocitopenias,
parasitas (pulgas, carrapatos, parasitas intestinais, etc.).
Quando a hemorragia interna (em cavidades), as hemcias so destrudas e o ferro reutilizado.
Hemoltica: a hemlise, ou destruio dos eritrcitos pode ocorrer intravascular, onde ocorre
dentro dos vasos, havendo um aumento na hemoglobina circulante, que pode passar a ser
eliminada pela urina (hemoglobinria). Causada por Clostridium perfringens tipo A, Leptospira
spp.,Mycoplasma haemofelis (gatos) agentes que provocam a formao de metahemoglobina
(alho, cebola, paracetamol, etc.), imunomediada (transfuso incompatvel ou isoeritrlise
neonatal), medicamentos (cefalosporinas, penicilinas, levamisol, etc.).
A hemlise extravascular ocorre no bao, mediada por clulas do sistema mononuclear fagocitrio
(macrfagos), que removem as hemcias danificadas que vo passando, doenas imunomediadas
(transfuso), ingesto de substncias oxidantes (alho, cebola, etc.), hemoparasitas. So as mesmas causas.
Os animais com anemia hemoltica possuem uma alta regenerao medular, com a concentrao de
reticulcitos muito superior s causadas por hemorragias, pois as hemcias destrudas liberam seu
contedo na circulao, sendo utilizados para formao de novos eritrcitos, portanto uma resposta
medular mais rpida e exacerbada.
(cloranfenicol), insuficincia renal crnica (diminuio de eritropoietina), agentes infecciosos (FIV, Felv,
cinomose, erliquiose), qualquer doena crnica inflamatria. Secundria tem como principal causa a
falta de nutrientes essenciais para produo de hemcias.
Anemia por defeito na maturao de ncleo: so as anemias megaloblsticas j comentadas
anteriormente. Causa uma Anemia Macroctica (podendo ser normoctica) Normocrmica
Arregenerativa. So mais comuns em gatos que em ces, onde o vrus da leucemia felina (Felv)
est envolvido.
Anemia por defeito na maturao do citoplasma: a principal caracterstica dessa anemia um
defeito na sntese de hemoglobina, ento a maturao do ncleo da hemcia continua, mas o
citoplasma no. As principais causas so por deficincia de ferro ou B6 e intoxicao por chumbo.
A deficincia de ferro = o ferro essencial para a sintetizao de hemoglobina, sendo ela responsvel
por cessar a diviso das hemcias quando sua concentrao citoplasmtica est ideal. Se a hemoglobina
no est sendo formada ou em pouca quantidade, isso promove uma diviso a mais nas hemcias
(duplicao adicional) ficando menores, Microcticas e Hipocrmicas/Normocrmica. Acometem
principalmente neonatos de todas as espcies, sendo a anemia Ferropriva dos sunos comum em recmnascidos que ficam privados de locais que contenham terra (ferro). Em adultos mais comum por
hemorragias crnicas.
Anemia das doenas crnicas inflamatrias: a forma mais comum nos animais domsticos. Os
achados compreendem uma Anemia (hematcrito de 17-35%) Normoctica Normocrmica e a
presena de Leucograma inflamatrio (ocorre a liberao de citocinas que inibem a proliferao
eritride). Doenas neoplsicas, distrbios imunomediados e infeces tambm podem estar
envolvidos com esse tipo de anemia.
Hipoplasia eritride seletiva: ocorre apenas a diminuio na produo de hemcias, estando os
leuccitos e plaquetas normais. Pode ser causada por deficincia de eritropoietina nas IRC.
Hipoplasia medular generalizada: anemia, leucopenia e trombocitopenia severa. Em alguns casos
de Erliquiose, Felv, animais submetidos quimioterapia, endrocrinopatias, AIE, etc.
Obs.: Deficincias nutricionais: o ferro, o cido flico e B12 j foram comentados anteriormente. A
deficincia de cobalto nos ruminantes faz com que a vitamina B12 no se forme no rmen por ao dos
microrganismos levando tambm a uma Anemia Normoctica Normocrmica Arregenerativa.
A intoxicao por cobre em ruminantes, especialmente em ovinos resulta em uma anemia
regenerativa hemoltica por formao de corpsculos de Heinz. O cobre fica acumulado no fgado e em
situaes estressantes liberado, resultando em uma crise hemoltica. A deficincia do mesmo tambm
leva formao de corpsculos de Heinz.
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ERITROCITOSE
definida pelo aumento da massa de eritrcitos circulantes, sendo encontrada em livros como
policetemia, porm esse termo designado para o aumento de todos os componentes do sangue
(leuccitos, hemcias e plaquetas). Ocorre o aumento dos valores de hematcrito, contagem de hemcias
e concentrao de hemoglobina. Pode ser classificada em:
Relativa: um falso aumento devido hemoconcentrao ou esplenocontrao;
Absoluta: pode ser dividida em primria ou secundria (apropriada ou inapropriada);
Eritrocitose Relativa
Hemoconcentrao: a mais comum e ocorre quando h perda de volume plasmtico causada
por desidratao, deixando as clulas concentradas. Ento ao se fazer o hemograma e observar
eritrocitose, deve-se avaliar sinais de desidratao no animal (turgor da pele, enoftalmia, TPC,
histrico de vmitos e diarreia).
Achados: PPT aumentadas (podendo estar normais); pode ocorrer um aumento discreto de leuccitos
(nem perceptvel); azotemia pr-renal pode estar presente (aumento de creatinina e uria), pois se h
desidratao, consequentemente diminui a taxa de filtrao pelos rins e acmulos desses metablitos.
Esplenocontrao: em animais que realizam exerccios antes da colheita do sangue ou aqueles
que passam por um estresse intenso antes da coleta ocorre uma liberao de adrenalina que atua
sobre o bao provocando sua contrao, liberando hemcias e plaquetas na circulao. um efeito
transitrio e aps 20-60 minutos o bao relaxa e os glbulos vermelhos e plaquetas que haviam
sido liberados retornam para seu interior. bem comum em gatos e equnos.
Histrico: Animal agitado, taquicrdico, taquipnico, sinais de medo antes da colheita.
Eritrocitose Absoluta
Primria: causada por um distrbio mieloproliferativo raro, no qual ocorre a proliferao
desordenada de eritrcitos e consequentemente o aumento de hematcrito. Clulas eritride
neoplsicas que independem de eritropoietina para proliferar.
Secundria: Apropriada: ocorre o aumento da produo de hemcias devido ao aumento da
liberao de eritropoietina induzido pela hipxia, ou seja, o nmero de eritrcitos mesmo estando
normal ocorre uma hipxia e aumento da liberao e Epo. As causas mais comuns de hipxia
sistmica so as doenas pulmonares crnicas, as insuficincias pulmonares, hipoperfuso renal,
Tetratologia de Fallot, tromboses e animais que moram em locais de alta altitude com baixo teor
de oxignio. Inapropriada: ocorre um aumento na liberao de eritropoietina, porm no est
relacionado com hipxia e sim devido a cistos, neoplasias encontradas nos rins e fgado, que
promovem essa liberao excessiva de Epo e consequentemente aumento de hemcias.
7- Sabendo das causas de eritrocitose, como se deve proceder em caso de um animal com
aumento de VG/HCT?
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Primeiramente deve-se analisar se o animal fez algum exerccio antes da colheita, se estava estressado e
se apresenta algum sinal de desidratao, caso haja sinais de excitao, deve-se esperar o animal se
acalmar para proceder com a colheita e fazer o hemograma confirmatrio. Se caso haja aumento de PPT
devido desidratao, porm em doenas gastrointestinais a PPT podem estar normais ou diminudas.
Aps excluir a eritrocitose relativa deve-se levar em conta a absoluta secundria apropriada, decorrente de
uma insuficincia cardaca ou pneumonias (h hipxia), podendo pedir raio X de trax, ECG, Eco. Se no
houver indcio de hipxia sistmica a sim a inapropriada deve ser levada em considerao, devendo
buscar por cistos, neoplasias renais ou hepticas. A possibilidade de uma eritrocitose primria deve ser
avaliada (distrbio mieloproliferativo), mesmo sendo rara.
8- Quais so os sinais clnicos da eritrocitose e os tratamentos estabelecidos?
Mucosas congestas, dispneia, o volume de hemcias muito grande e o sangue no circula direito.
-Relativa por hemoconcentrao: fluidoterapia;
-Absoluta primria: feito atravs de flebotomias (sangrias) para manter o VG na normalidade, e tambm
com o uso da quimioterapia para reduzir as taxas eritrocitrias.
-Absoluta secundria apropriada e inapropriada: tratar a causa base e fazer flebotomia em casos de VG
muito alto.
CASOS CLNICOS
1) Cadela de 9 semanas, aptica, com melena, sem vacinao e vermifugao, palidez de
mucosa. Foi solicitado o hemograma para saber se realmente h anemia. No esfregao
sanguneo observou-se: policromasia moderada e anisocitose.
Variveis
Valor observado
Valor de referncia
Hematimetria (x1012/L)
1,59
5,5 8,5
Hemoglobina (g/L)
39
120 180
0,13
0,37 0,55
VGM (fL)
81
60 77
CHGM (g/L)
30
32 36
PPT (g/L)
40
57 77
Fibrinognio (g/L)
15
Reticulcitos (%)
0,5 - 1,5
Plaquetas (x109/L)
10,6 relativo
2,99 corrigido
750
200 500
ndice ictrico
normal
Valor observado
Valor de referncia
2,52
5,5 8,5
70
120 - 180
0,24
0,37 0,55
VGM (fL)
95
60 - 77
CHGM (g/L)
29
32 - 36
PPT (g/L)
88
57 - 77
Fibrinognio (g/L)
1-5
Reticulcitos (%)
Corrigido: 12
0,5 - 1,5
Plaquetas (x109/L)
100
200 - 500
Hematimetria (x1012/L)
Hemoglobina (g/L)
Volume globular (L/L)
ndice ictrico
aumentado
21
*Por que no caso anterior (hemorragia crnica) o animal possua 3 de reticulcitos corrigidos e nesse caso
de anemia hemoltica tem reticulcito de 12?
Na hemorragia ocorre a perda de todos os componentes do sangue, hemoglobina e ferro, enquanto na
hemlise no, o que permite uma melhor resposta na regenerao pela medula ssea. Ento nesses casos a
anemia vai ser Extremamente regenerativa.
*Por que nesse caso no indicado o uso da transfuso sangunea?
Como geralmente no se utiliza a tipagem sangunea em rotina nos animais, faz-se a primeira transfuso e
sensibiliza o animal caso o sangue seja incompatvel. Se o animal vier a precisar futuramente de uma
segunda transfuso e receber o sangue com o qual foi sensibilizado, ir adquirir uma anemia hemoltica
autoimune. Ento, s se faz a transfuso em casos realmente necessrios, de hematcrito 0,10, casos
graves.
Discusso: a AHIM ocorre quando h produo de acs contra ags eritrocitrios, hipersensibilidade tipo
II ou citotxica (transfuso de sangue), hipersensibilidade tipo III (quando se formam imunocomplexos
de antgenos ligados a anticorpos, que se depositam na superfcie das hemcias, plaquetas, clulas
endoteliais, rins, articulaes desencadeando uma resposta dos macrfagos que vo fagocitar essas
hemcias e plaquetas, e alm disso, as clulas granulocticas vo degranular nas articulaes, rins e vasos
(pode ter hemorragia) provocando um processo inflamatrio nesses locais.
9- Por que um animal que sofreu uma hemlise intensa (aguda) ficando com VG de 0,15
apresenta sinais clnicos diferentes (mais graves) de um animal com uma alta carga
parasitria (ascardeos) e que perdeu sangue lentamente (crnico) e tambm est com o VG
0,15?
Os sinais clnicos vo variar de acordo com a velocidade de instalao da anemia, quando o animal perde
sangue de forma brusca, repentina, aguda (hemorragia aguda ou hemlise), o organismo sofre um grave
dano, no estando preparado para essa queda brusca do VG. Quando o animal tem uma babesiose,
mycoplasmose, hemorragia crnica, o VG vai reduzindo lentamente (dias) o organismo se adapta a essa
condio e os sinais no se tornam to exacerbados.
10- Um gato atropelado, com suspeita de hemorragia interna. No hemograma todos os valores
estavam dentro da normalidade, com exceo do fibrinognio e plaquetas que estavam
reduzidos. Explique o porqu da suspeita de hemorragia mesmo os valores do hemograma
estando normais.
O animal com uma hemorragia aguda vai ter perda de hemcias, plasma, leuccitos tudo na mesma
proporo, ento, se colher sangue momentos aps a hemorragia no ir ter alteraes. No levar em
considerao o hemograma, mas sim presso arterial, TPC, mucosas hipocoradas ou cianticas, distenso
22
Valor observado
Valor de referncia
Hematimetria (x1012/L)
2,0
5,5 8,5
Hemoglobina (g/L)
59
120 -180
0,16
0,37 0,55
80
60-77
36,8
32-36
PPT (g/L)
81
57-77
Fibrinognio
1-5
ndice ictrico
2-5
23 (ret. Corrigido= 8)
0,5 1,5
Reticulcitos (%)
23
eliminao na urina (hemoglobinria), ou pode estar com leptospirose que tambm provoca
hemlise e aumento do ndice ictrico.
c) Policromasia, corpsculos de Howell Jolly e esfercitos;
d) O animal possui uma anemia severa causada de forma hemoltica, onde no houve perda
sangunea pra o meio externo, propiciando assim uma regenerao eficiente da medula ssea
(justificado pela reticulocitose, presena de hemcias nucleadas e aumento do VGM). Com a
hemlise ocorreu liberao de hemoglobina e formao de bilirrubina aumentando o ndice
ictrico, e tambm o CHGM de forma discreta. O aumento de protena pode ter ocorrido devido
liberao de hemoglobina na circulao (que uma protena) ou at mesmo devido produo
aumentada de anticorpos.
Obs.: A hemoglobina se liga a uma protena chamada Haptoglobina, para ser carreada na circulao.
Quando a concentrao de Hb liberada muito alta ocorre uma ocupao de todas as haptoglobinas, e a
Hb restante que no se liga vai se depositar nos glomrulos (glomerulonefrite) e uma parte sair na urina
(que fica escura / castanho).
12- Quais as principais causas de aumento de hemoglobina e CHGM? Por que na hemlise
ocorre o aumento do CHGM?
Hiperproteinemia, hiperlipidemia, hiperbilirrubinemia e hemlise. E a hemlise aumenta o CHGM
porque a concentrao de hemoglobina continua igual, mesmo tendo hemlise, porm o nmero de
clulas destrudas alto, ento o VG diminui (muita hemoglobina pra pouca clula), por isso que o
CHGM aumenta.
Ex.: CHGM = _ Hb__ (fica normal)
VG(diminudo)x 10
PROTENAS DO SANGUE
- fibrinognio
- imunoglobulinas
Se suspeitar de insuficincia heptica deve-se dosar Albumina;
As imunoglobulinas aumentam em doenas infecciosas crnicas;
A dosagem de fibrinognio importante para identificar processos inflamatrios nos ruminantes;
24
4 Metarrubrcitos (precursores dos reticulcitos): indicam regenerao, porm a presena deles sem que
haja policromasia indica distrbio mieloproliferativo (leucemia eritride);
5 Reticulcitos: colorao com azul de cresil brilhante;
6 Ponteado basoflico: so agregados de ribossomos em forma de pequenos grnulos no citoplasma das
hemcias. Em ruminantes est associado hemcias imaturas. Em ces e gatos pode ser visto em anemias
extremamente regenerativas. Tambm ocorre em intoxicao por chumbo;
7 Corpsculo de Howell-Jolly: esto presentes em anemias regenerativas;
8 Corpsculo de Lentz: incluses virais caractersticos da infeco pelo vrus da Cinomose canina;
9 Leishmania spp;
10 Ehrlichia canis: aspecto granular dentro de um moncito;
11 Hepatozoon canis;
12 Anaplasma platys
13 Agregao plaquetria: deve ser anotada tambm ao fazer a anlise do esfregao sanguneo. Indica
que o anticoagulante est inadequado, ou a colheita foi estressante (lquido tissular na seringa);
14 e 14* Babesia canis;
15 Mycoplasma haemofelis: Ficam na membrana das hemcias de felinos;
10
13
14
11
14*
25
12
15
LEUCOGRAMA
Os leuccitos so as clulas de defesa do organismo. Sua contagem no sangue auxilia a
compreender as possveis disfunes que os pacientes apresentam. Os valores relativos e absolutos
associados s informaes sobre a morfologia dos leuccitos conhecido como Leucograma.
So divididos em dois grupos:
Granulcitos (polimorfonucleares):
Neutrfilos;
Eosinfilos;
Basfilos;
Agranulcitos (mononucleares):
Linfcitos;
Moncitos;
Neutrfilos (N)
So produzidos pela medula ssea e em algumas situaes como no caso de infeces crnicas
podem ser originados tambm do bao, so liberados na corrente sangunea, circulam um breve intervalo
de tempo e depois migram para os tecidos. O tempo de produo at a liberao de 4-6 dias, porm a
medula ssea possui um estoque de neutrfilos maduros que podem suprir o sangue por 5 dias (caso a
medula pare de produzir).
As clulas-tronco diferenciam-se em mieloblastos que so as clulas mais jovens da srie
granuloctica. Com a sua diferenciao ocorre formao de progranulcitos (promielcito) e mielcito
que ainda tem a capacidade de sofrer diviso.
O mielcito dar origem ao metamielcito (ncleo com formato retiniforme), neutrfilo bastonete
(ncleo com formato de ferradura, sem nenhuma constrio), neutrfilo segmentado e hipersegmentados,
que possuem capacidade fagoctica e microbicida. Os neutrfilos apresentam diversos grnulos que so
discretamente corados em algumas espcies (um roxo claro) e incolores em outras.
De mieloblasto at segmentado tem um tempo de 7 dias, entretanto, quando ocorre uma estimulao por
uma resposta inflamatria esse tempo reduz para 2 ou 3 dias.
26
Mielcito
Metamielcito
N Bastonetes
N Segmentado
N hipersegmentados
Eosinfilos (E)
Eles possuem protenas que se ligam e lesionam as membranas de parasitas (helmintos), alm
disso, tambm esto envolvidos em alguns mecanismos das alergias inflamatrias (quando os mastcitos
degranulam liberam histamina que possui efeito quimiottico sobre os eosinfilos). A presena de
grnulos vermelho-alaranjados em seu citoplasma caracterstico desses leuccitos. Os grnulos dos
eosinfilos de felinos so uniformes, enquanto os dos equinos so arredondados e muito grandes
deixando a clula com aspecto de framboesa (chegam a sobrepor o ncleo).
Gato;
-Cavalo;
Basfilo (B)
Sobre a funo fisiopatolgica na circulao desconhecida. Acredita-se que possuam uma
funo semelhante aos mastcitos, onde esto presentes histamina e heparina em seus grnulos. A
histamina tem papel fundamental nas reaes de hipersensibilidade imediata (urticria, alergia aguda e
anafilaxia), enquanto a heparina tem funo anticoagulante. Os basfilos so maiores que os neutrfilos,
com ncleo segmentado, e os grnulos que variam de acordo com a espcie: os ces possuem poucos
grnulos (violeta-escura); os gatos possuem grandes grnulos (ligeiramente acinzentados); os dos grandes
animais possuem tantos grnulos que chegam a sobrepor o ncleo.
B de jumentos (3 e 4);
Moncitos (M)
So produzidos na medula ssea, caem na circulao, migram para os tecidos onde continuam um
processo de maturao para se transformar em macrfago (alguns autores falam que a partir do momento
em que o moncito ativado e passa a fagocitar, torna-se macrfago). Tem inmeras funes e dentre
elas: fagocitar microrganismos, destruio de hemcias no bao e reciclagem do ferro, fazem a limpeza
tecidual nos processos inflamatrios, fagocitando restos celulares e partculas estranhas.
27
(Fonte: pessoal) A presena de moncitos (setas vermelhas) em um co com erliquiose (seta azul
mrula de Ehrlichia canis). Reparar na colorao azul-acinzentada dos moncitos em relao aos
neutrfilos (setas amarelas), ncleo no segmentado e o tamanho que chega a ser 4 vezes maior. Aumento
de 100x.
(Fonte: pessoal imag. 1 e 2) Macrfagos com presena de vacolos (setas pretas). Na segunda imagem
notar a diferena de tamanho e morfologia entre os neutrfilos vizinhos. Na terceira imagem esto
presentes pequenos grnulos no citoplasma.
Linfcitos (L)
Os linfcitos so originados do timo e medula ssea, vo para circulao sangunea, em seguida
passam para os tecidos. Os L possuem uma capacidade de retornar ao sistema vascular para
recirculao. Esta propriedade dos linfcitos torna difcil e imprecisa a estimativa de sua meia vida. O
fenmeno de recirculao de suma importncia biolgica porque proporciona um mecanismo de
distribuio generalizada de clulas linfoides ocupadas com a resposta imune sistmica. Como resultado,
um grande nmero de linfcitos podem ser expostos a um antgeno depositado localmente no tecido.
Estas clulas antigenicamente expostas podem ser transportadas por vrios lugares no corpo para
propagar e montar uma vigorosa resposta imune (sangue ->linfonodos ->linfa ->sangue).
28
(Fonte: pessoal) Na primeira imagem, um linfcito tpico, normal, ncleo arredondado e excntrico,
pouco citoplasma de colorao azul clara. Na segunda imagem h um linfcito reacional, ou ativado, com
o citoplasma azul intenso. Na terceira imagem, tm-se um plasmcito (seta preta) que um LB, em seu
citoplasma esto presentes os corpsculos de Russel, que so vacolos de cor azul-claro, indicam que h
produo de imunoglobulinas. Ao lado do LB temos um moncito. Aumento de 100x.
Leucometria global: o nmero de leuccitos por litro de sangue = x109/L;
Diferencial de leuccitos: contagem de 100 leuccitos no esfregao sanguneo. A maneira da contagem
j foi descrita anteriormente, devendo ser feita em torre e anotando todas as alteraes morfolgicas,
hemoparasitas, etc.
13- Quais so os mtodos que determinam a concentrao de leuccitos?
- Contagem na cmara de Neubauer;
- Contagem no esfregao sanguneo (lmina corada);
- Aparelhos semiautomticos (atravs de diluies);
- Aparelhos automticos (pe o sangue direto no aparelho);
Nomenclatura
Citose: aumento do nmero;
Filia: aumento do nmero;
Penia: diminuio do nmero;
LEUCOCITOSE
LEUCOPENIA
LINFOCITOSE
LINFOPENIA
NEUTROFILIA
NEUTROPENIA
EOSINOFILIA
EOSINOPENIA
BASOFILIA
MONOCITOSE
MONOCITOPENIA
*basopenia no existe, pois o valor normal 0, ou seja, raro de ser
encontrado.
29
Clculos:
Aps contar 100 leuccitos no esfregao sanguneo deve-se calcular os valores absolutos, exemplo:
Leucometria global: 30,0 x109/L
Diferencial de leuccitos:
N = 70;
Valor absoluto:
Se em 100 leuco ________ 70 N
E = 5;
em 30,0 LG_________X
L = 14;
X = 21,0
B= 0;
M= 11;
Total: 100
OBS.: os aparelhos semiautomticos e automticos contam as hemcias nucleadas (metarrubrcitos)
como leuccitos, ento, mesmo fazendo no aparelho, deve-se fazer o diferencial olhando a lmina no
microscpio e contando o nmero de metarrubrcitos para fazer o clculo de Leuccitos Corrigidos.
Lcorrigido = LG x (100)
100+HN
Ex.: 4 metarrubrcitos (HN)
Lc = 30,0 x (100) = 100/104 x 30,0 = 28.8 x109/L
100+4
Leucocitose
Os neutrfilos esto em maior nmero que os outros leuccitos, e pra entender as respostas
neutroflicas s doenas, importante considerar os compartimentos onde estes leuccitos se distribuem:
Medula ssea;
Compartimento marginal;
Compartimento circulante;
Tecidos;
A capacidade de estocagem de neutrfilos nos ces mxima, nos ruminantes mnima e
intermediria em felinos e equnos.
A leucocitose definida pelo aumento de leuccitos acima dos valores de referncia. A leucocitose
pode ser fisiolgica, reativa e proliferativa. As mudanas na contagem dos leuccitos podem envolver
anormalidades de produo, liberao, distribuio intravascular, vida mdia e ingresso tecidual de vrios
leuccitos. Por exemplo: os neutrfilos circulantes esto num equilbrio dinmico com os do
compartimento marginal e o de reserva na medula ssea. Quando ocorre uma demanda funcional imediata
de neutrfilos, ocorre uma mobilizao das clulas dos compartimentos circulantes e marginal, depois
pela reserva na medula ssea e por fim pelo aumento da proliferao e liberao de clulas jovens pela
medula, sendo observado pelo desvio esquerda que ser falado posteriormente.
30
Comp.
De
proliferao
Comp.
reserva
De
Mieloblastos
Promielcito
Mielcitos
Metamielcito;
N bastonete;
Segmentados
TECIDOS
MEDULA SSEA
DIAPEDESE
Leucocitose Fisiolgica: quando o animal passa por um estresse repentino, por uma emoo
muito forte, ocorre a liberao de adrenalina que aumenta a frequncia cardaca e respiratria,
aumentando o fluxo sanguneo, que retira os neutrfilos e linfcitos que estavam no
compartimento marginal e liberam no circulante, ento, ao colher o sangue vai ter um aumento
relativo dos leuccitos. Sabe-se que os ces, cavalos e bois possuem uma proporo de 1:1 de
clulas nos dois compartimentos (circulante e marginal), ento, se as clulas do marginal forem
pra o circulante pode ocorrer do valor de leuccitos chegar a dobrar (mximo). Os gatos possuem
de 1:3, podendo triplicar em situaes de estresse.
Leucocitose Reativa: ocorre em resposta s doenas, certas doenas podem induzir uma resposta
especfica, mas usualmente um padro geral de resposta dos leuccitos evidente, independente
da doena. Pode ter desvio esquerda ou no. O grau de leucocitose varia entre as espcies e
relativa para relao neutrfilos:linfcitos (N:L). Em animais com N:L alta, possuem uma maior
resposta imune que os de baixa relao N:L. A maneira de se diferenciar uma leucocitose
verdadeira de uma induzida por adrenalina ou corticoide observando: desvio esquerda;
hiperfibrinogenemia; monocitose em outras espcies que no seja o co; ausncia de linfopenia ou
eosinopenia; [perguntar]
Compartimento de reserva:
Co: 1N:3,5L
Gato: 1,8N:1L
Cavalo: 1,1N:1L
Boi: 0,5N:1L
Leucopenia
A leucopenia ocorre por conta da neutropenia e linfopenia, sendo a neutropenia a causa primria
em animais com relao N:L maior que 1, e linfopenia em animais que a relao N:L menor que 1. A
neutropenia inicialmente em infeces bacterianas graves nos ruminantes (0,5N:1L) e a linfopenia ocorre
em casos virais. Uma acentuada linfopenia ocorre tambm em casos de cinomose, devido atrofia e
necrose do tecido linfide, produzido pelo vrus.
31
Mielcito
Metamielcito
N bastonete
32
N segmentado
26
Mielcitos: 1
2- Degenerativo: quando o nmero de N segmentados for menor que o somatrio das formas
imaturas. Ex.:
N segmentados: 30
N bastonetes: 25
Metamielcitos: 10
40
Mielcitos: 5
Isso significa dizer que o organismo no est conseguindo combater a infeco, que as clulas
adultas esto sendo destrudas e forando a medula a aumentar muito a produo e liberao de clulas
jovens > bastonetes > Metamielcitos > Mielcitos. Casos comuns de ocorrer a Leucocitose com
neutrofilia e desvio nuclear de neutrfilos esquerda (DNNE) Acentuado Degenerativo acompanhado de
uma anemia arregenerativa dos processos inflamatrios em cadelas e gatas com piometra.
15- O que so, quais so os GRAUS DE TOXEMIA e as clulas envolvidas?
Quando o animal possui um processo infeccioso que estimula muito a produo de neutrfilos, a medula
libera muitas clulas com sinais de imaturidade do citoplasma, que so os chamados Graus de Toxemia.
So eles:
Basofilia Citoplasmtica: o citoplasma (segmentados, bastonetes, Metamielcitos e Mielcitos)
corado levemente de azul, fica parecendo um moncito. o mais comum.
Vacuolizao Citoplasmtica: so vacolos no citoplasma dos neutrfilos. o segundo mais
comum.
Granulaes txicas: os grnulos dos neutrfilos ficam cidos e acabam sendo corados pelo
pantico vermelho (eosina). 3 mais comum.
Corpsculos de Dohle: incluses intracitoplasmticas irregulares e basoflicas (azuil-escuro);
Outras alteraes apresentadas pelos leuccitos:
33
Chdiaki-Higashi
Perger-Hut
mucopolissacaridose (L e N)
34
pela
seta
menor.
No
Existem animais que ao ficarem estressados, agitados, adquirem uma leucocitose fisiolgica
(falada anteriormente), devido ao aumento da frequncia cardaca, fluxo sanguneo responsvel pela
liberao de adrenalina. Essa leucocitose se d pela diminuio da marginao de leuccitos e pela
retirada dos leuccitos que esto marginados no endotlio vascular. Os ces possuem uma proporo de
neutrfilos no compartimento circulante e marginal de 1:1, ento, quando a leucocitose pode chegar a
dobrar. O valor de referncia para os leuccitos de ces de 6.000 -17.000, se o animal possui um valor
leucocitrio fisiolgico prximo ao valor inferior de 6 mil, quando passar por uma situao estressante
esse nmero pode chegar em at 12 mil, o que no leucocitose. Entretanto, quando o animal possui o
valor leucocitrio prximo ao limite superior, 15 mil, por exemplo, ao se estressar, esse valor pode dobrar
chegando prximo aos 30 mil = leucocitose fisiolgica. Para saber se esse aumento de leuccitos
devido a algum processo inflamatrio deve-se procurar no esfregao por bastonetes, mesmo sabendo que
o nmero na circulao de at 3%, se o animal tem 2% e aps o estresse esse valor dobrar pra 4%, vai
ter aumento, ento continua a busca por metamielcito e mielcito para saber se realmente a leucocitose
verdadeira, alm dos graus de toxemia. A leucocitose pode ser com DNNE discreto (4% de bastonetes) ou
sem DNNE, neutrofilia madura.
Leucograma Inflamatrio: nos ces, na fase aguda sempre h uma leucocitose, pois o
compartimento de reserva grande, tem muitas clulas para enviar. Nos bovinos sempre h leucopenia,
pois o compartimento de reserva pequeno. Nos ces a Leucopenia com DNNE Acentuado Degenerativo
de prognstico desfavorvel, enquanto nos bovinos no, pois sempre na fase aguda ter a leucopenia
com DNNE podendo ser at acentuado e degenerativo, ento deve-se acompanhar com leucogramas
frequentes para ver se o valor dos leuccitos esto aumentando.
Na recuperao o DNNE vai de acentuado > moderado > discreto, e de Degenerativo >
Regenerativo. Ocorre aumento de linfcitos (aps infeco deixam os rgos linfides) e
moncitos/macrfagos (limpeza tecidual ps-inflamao).
clulas deve-se considerar uma possvel leucemia linfoctica (linfoma), claro que devendo antes repetir
nos dias seguintes o hemograma. Um conceito muito errado que as pessoas tm a possibilidade de haver
linfocitose nas doenas inflamatrias como uma resposta inflamao, igual aos neutrfilos. A
proliferao linfide at ocorre, mas restrita aos rgos linfides e raramente se manifesta como
linfocitose no Leucograma. Rebar (2003), fala que uma das causas de linfocitose a estimulao por
presena de antgenos, como uma infeco, aps vacinao, com presena de clulas reacionais (ativadas)
com o citoplasma azul escuro. Os linfcitos podem aumentar no final de um processo inflamatrio (saem
dos rgos linfides para o sangue = recirculao).
Linfopenia: as principais causas so:
Resposta aos esteroides (glicocorticoides): cortisol induz a apoptose, diminuio da produo,
reduz a recirculao;
Infeces virais agudas: reduz linfcitos e podem reduzir neutrfilos tambm;
Interrupo da recirculao linftica nos casos de efuso quilosa: as gorduras e algumas protenas
so absorvidas por via linftica, ento quando h ruptura de vasos linfticos e extravasamento para
uma cavidade, ocorrendo diminuio dos linfcitos tambm, pois a via pela qual utilizam para
retornar ao sangue.
PLAQUETAS OU TROMBCITOS
Hemostasia: o conjunto de todos os fenmenos envolvidos na manuteno do sangue em seu estado
lquido dentro dos vasos sanguneos e na formao do tampo hemosttico no vaso lesado, para impedir o
extravasamento de sangue.
Trombose: ativao inapropriada dos processos hemostticos normais quando no ocorre o
funcionamento dos fatores antitrombticos.
Produo de plaquetas: so provenientes dos 0,1-0,5% de megacaricitos presentes na medula ssea.
Esses megacaricitos emitem projees para os capilares sinusides da medula ssea, onde ocorre a
fragmentao do citoplasma liberando as plaquetas na corrente sangunea.
18- Como ocorre a regulao do nmero de plaquetas no sangue?
A trombopoietina um citocina de origem incerta (provavelmente do endotlio vascular, fgado ou
fibroblasto) que produzida em concentraes normais e degradada pelas plaquetas. Quando o nmero de
plaquetas est normal, elas consomem toda a trombopoietina, que deixa de estimular a produo de
plaquetas (diferenciao de clulas-tronco em megacaricitos), mas quando as plaquetas esto
diminudas, h menos consumo de trombopoietina e aumento de sua concentrao, que passa a estimular
os megacaricitos para aumentar a produo de plaquetas.
38
Cerca de 30-40% das plaquetas ficam armazenadas no bao, elas possuem uma sobrevida de 5-10
dias. Algumas alteraes apresentadas pelas plaquetas so:
Megaplaquetas: quando h um estmulo para aumentar a produo plaquetria (hemorragias),
essas plaquetas gigantes so liberadas na circulao, ento sua visualizao significa reposio;
Grnulos Citoplasmticos grandes que podem confundir com Anaplasma platys;
Anaplasma platys;
Corpsculo de Lentz podem estar presentes, mas raro;
Agregao plaquetria (Fig. 1): Os aparelhos semiautomticos e automticos no contam essas
plaquetas agregadas, e consequentemente o animal ter trombocitopenia, ento a importncia em
fazer a leitura da lmina, realizar o diferencial leucocitrio e observar as alteraes;
ser
adquiridas:
caracterizada
como
uma
diminuio
da
funo
plaquetria
tem como causas a uremia (IRC), o uso de Aines, autoimunes e alguns antibiticos (penicilina,
cefalotina). As causas de hiperresponsividade (formao de trombos) so o Diabetes mellitus,
hiperadreno, peritonite infecciosa felina, dirofilariose, e algumas neoplasias.
Podem ser hereditrias: Doena de von Willebrand, trombastenia de Glanzmann, Sndrome de
Barnard Soulier.
Na doena de von Willebrand (dvW): o fator de vW responsvel por se ligar ao colgeno
subendotelial (1) exposto durante a leso vascular, permitindo que as plaquetas (4) se liguem atravs da
glicoprotena GpIb (3) e forme-se o cogulo. Nesta doena no h o fator de vW, que consequentemente
no se liga ao colgeno e no permite a ligao das plaquetas, no formando o
trombo/cogulo (imagem inferior).O diagnstico dado atravs da contagem de
plaquetas, TTPA (tempo de tromboplastina parcial ativada) e TP (tempo de
protrombina) que esto todos normais, porm o tempo de sangramento de mucosa
(gengiva) est bem aumentado.
Na Trombastenia de Glanzmann h uma deficincia na glicoprotena de
membrana das plaquetas Gp2b-3, que no permite com que o fibrinognio se ligue para unir as plaquetas
e formar o cogulo.
Na Sndrome de Bernard Soulier no ocorre a formao de
Glicoprotenas Gp Ib que so responsveis por se ligar ao fator de vW e permitir a
formao do cogulo, ento sem ela no haver essa ligao e coagulao.
Sndrome BS
42
44
BIOQUMICA SRICA
Variveis
Valor
Valor de
observado
referncia
Albumina (g/L)
25-40
Hemoglobina
(120-180)
Globulinas
25-45
Hema x1012/L
(5,5-8,5)
Glicose (mg/dL)
60-100
VGM
(60-77)
Uria (mg/dL)
15-40
CHGM
(32-36)
Creatinina
0,5-1,5
PPT
(60- 75)
ALT (UI)
10-88
Plaquetas
(200-500)
FA (UI)
20-150
I.Ict.
(2-5)
GGT (UI)
1-10
fibrinognio
(1-5)
Amilase (UI)
300-2.000
Reticulcitos
(0,5-1,5)
Variveis
Valor relativo
(%)
Valor de
referncia (%)
Leuccito Global
Valor absoluto
(x109/L)
Valor de
referncia
6.000-17.000
Neutrfilos seg.
60-80
3.000-11.500
Bastonetes
0-3
0-300
Metamielcitos
Mielcitos
Linfcitos
10-34
1.000-4.800
Moncitos
1-11
150-1.350
Eosinfilos
2-10
100-750
Basfilos
raros
raros
45
Observaes:
1) Um co de 6 anos, castrado da raa Dachshund chegou clnica com histrico de dor na coluna,
com paresia posterior durante 2 dias. No exame fsico observou-se uma protruso do disco
intervertebral em T13-L1. Assim que apresentou esse quadro o veterinrio por telefone prescreveu
dexametasona 3mg/kg 1 vez ao dia.
HEMOGRAMA
Valor observado
Variveis
Hematcrito
0,40
Valor de
referncia
(0,37-0,55)
Hemoglobina
133
(120-180)
Hemat. x10 /L
(5,5-8,5)
VGM
66
(60-77)
CHGM
33
(32-36)
PPT
75
(60- 75)
Plaquetas
Adequado
(200-500)
I.Ict.
(2-5)
fibrinognio
(1-5)
12
Variveis
Valor relativo
(%)
Valor de referncia
(%)
Leuccito Global
Valor absoluto
(x109/L)
28.000
Valor de referncia
6.000-17.000
Neutrfilos seg.
89
60-80
25.000
3.000-11.500
Bastonetes
0-3
0-300
Metamielcitos
Mielcitos
Linfcitos
10-34
840
1.000-4.800
Moncitos
1-11
1.960
150-1.350
Eosinfilos
2-10
100-750
Basfilos
raros
raros
2) Uma Cadela castrada, Sheepdog, 5 anos, chegou clnica apresentando um quadro de anorexia
parcial, vmitos intermitentes, e o proprietrio relata que o seu animal no vem sendo o mesmo
durante as ltimas duas semanas. No exame clnico no foi notada nenhuma anormalidade.
Variveis
Hematcrito
Valor observado
0,35
Valor de referncia
(0,37-0,55)
Hemoglobina
119
(120-180)
Hemat x1012/L
5,3
(5,5-8,5)
VGM
66
(60-77)
CHGM
33
(32-36)
PPT
73
(60- 75)
Plaquetas
231
(200-500)
I.Ict.
(2-5)
46
fibrinognio
(1-5)
reticulcitos
0,4
(0,5-1,5)
Variveis
Valor relativo
(%)
Valor de referncia
(%)
Leuccito Global
Valor absoluto
(x109/L)
22.700
Valor de referncia
6.000-17.000
Neutrfilos seg.
86
60-80
19.522
3.000-11.500
Bastonetes
0-3
227
0-300
Metamielcitos
Mielcitos
Linfcitos
10-34
1.362
1.000-4.800
Moncitos
1-11
1.589
150-1.350
Eosinfilos
2-10
100-750
Basfilos
raros
raros
HEMOGRAMA
Valor
observado
0,10
Variveis
BIOQUMICA SRICA
Valor observado
Valor de
referncia
(0,37-0,55)
Albumina (g/L)
Valor de
referncia
25-40
Hemoglobina
29
(120-180)
Globulinas
25-45
Hema x1012/L
1,43
(5,5-8,5)
Glicose (mg/dL)
60-100
VGM
70
(60-77)
Uria (mg/dL)
15-40
CHGM
29
(32-36)
Creatinina
0,5-1,5
PPT
45
(60- 75)
ALT (UI)
Plaquetas
35
(200-500)
FA (UI)
20-150
I.Ict.
10
(2-5)
GGT (UI)
1-10
fibrinognio
(1-5)
Amilase (UI)
300-2.000
47
156
10-88
Reticulcitos
Variveis
10,2
(0,5-1,5)
Valor relativo
(%)
Parasitolgico
Valor de referncia
(%)
Leuccito Global
Ovos de ancilstomo
Valor absoluto
(x109/L)
33.000
Valor de referncia
6.000-17.000
Neutrfilos seg.
82
60-80
27.000
3.000-11.500
Bastonetes
10
0-3
3.500
0-300
Metamielcitos
Mielcitos
Linfcitos
10-34
800
1.000-4.800
Moncitos
1-11
1.700
150-1.350
Eosinfilos
2-10
100-750
Basfilos
raros
raros
No esfregao sanguneo: anisocitose (+++), policromasia (+++), macrocitose (+++), Babesia canis (++).
Discusso: O animal apresenta uma Anemia Normoctica Normocrmica Regenerativa, com
reticulocitose, aumento do ndice ictrico, esplenomegalia, fezes alaranjadas e ausncia de hemorragia
indicam doena hemoltica. A causa foi a Babesiose, que promove a destruio das hemcias (lise).
Outras causas de hemlise so: corpsculo de Heinz, intoxicaes, leptospirose, etc. A ausncia de
aumento do VGM e a hipoproteinemia devem-se perda de sangue e depleo de ferro ancilostomose
(parasitas intestinais que se alimentam de sangue).
FUNO ENDCRINA
A maioria das clulas s consegue adquirir glicose a partir da ligao da insulina em seus
receptores de membrana, permitindo o influxo de glicose para o meio intracelular. Quando aumenta a
glicose no sangue (hiperglicemia) a insulina liberada em maior concentrao para permitir a
48
do SNC (no dependentes da ligao insulina) e tambm pela eliminao renal. Porm, a glicemia
demora muito mais pra baixar, pois no h estoque na forma de glicognio.
Animal com Insulinoma: Ocorre uma queda brusca da glicemia para baixo do valor basal (hipoglicemia),
onde se mantm.
Diabtico
Saudvel
Teste da tolerncia Glicose Intravenosa: mais confivel que a tcnica anterior, pois no
depende da absoro intestinal.
Metodologia: fazer o jejum de 12 horas, colher o sangue para verificar a glicemia basal e deixar a veia
canulada. Faz a administrao de 0,5 g/kg de glicose intravenoso, e colhe sangue com 5-15-25-35-45-60
minutos e faz um grfico.
Interpretao:
410
205
15
25 35
45 55
60
FUNO EXCRINA
A principal funo do pncreas excrino a produo de enzimas digestivas tais como
tripsinognio e quimotripsinognio que iro degradar protenas em peptdeos, a Amilase que degradar
amido e glicognio em maltose (que sofrer ao da maltase tornando-se glicose) e a Lipase que atua
sobre os triglicerdeos, convertendo-os em AGL+glicerol.
Atravs do exame laboratorial podemos diagnosticar a leso do parnquima pancretico, no caso
das pancreatites, ou a produo e secreo insuficiente de enzimas pancreticas, nos casos de
Insuficincia Pancretica Excrina (IPE).
As principais doenas que acometem a funo excrina do pncreas so:
50
PANCREATITE AGUDA
Pode
ser
causada
por
traumas,
manuseio
inadequado
durante
cirurgias,
obstrues,
inflamaes/infeces.
Os cinos produzem enzimas digestivas, quando h inflamao pancretica as clulas aumentam a
produo dessas enzimas que acabam extravasando para o interstcio e caindo na cavidade abdominal at
atingir a circulao sangunea, havendo aumento da atividade enzimtica no sangue. A pancreatite aguda
costuma evoluir para crnica e depois para uma insuficincia pancretica.
O diagnstico de Pancreatite no fcil, pois se devem levar em conta os sinais clnicos que muitas
vezes so inespecficos (dor abdominal aguda, inapetncia, vmitos, apatia, anorexia), um hemograma
pode mostrar um processo inflamatrio, a ultrassom, e os exames laboratoriais que servem como auxlio.
Os mais utilizados so os que determinam as atividades sricas das enzimas pancreticas Amilase e
Lipase.
Amilases: a dosagem da atividade pode ser feita, porm um teste de baixa especificidade e
sensibilidade, visto que ela pode aumentar por outras causas, tais como:
Disfuno renal: animais que possuem a reduo da filtrao glomerular, ou seja, possuem azotemia
(acmulo de uria e creatinina) deixam de eliminar a amilase inativada, ocorrendo o seu acmulo no
sangue.
Doenas gastrointestinais: a amilase est presente no epitlio da mucosa, ento nos casos de enterite,
obstruo intestinal ou perfurao (a amilase extravasa para o peritnio).
Doena heptica: o fgado responsvel por metabolizar a amilase, transformando de ativa para inativa,
para que possa ser excretada, sem a funo normal heptica ocorre esse comprometimento.
Neoplasias: no se sabe a causa, mas em ces com linfomas ou hemangiossarcoma ocorre o aumento da
atividade de amilase (hiperamilasemia) no sangue.
Lipases: igual a lipase, tambm um teste de baixa sensibilidade e especificidade, pois essa
enzima costuma aumentar sua atividade em animais com disfunes:
Renais: pelo mesmo motivo da amilase, os rins deixam de excretar e ocorre o aumento srico de lipase.
Doena heptica: o mecanismo desconhecido.
Terapia com corticosteride: no se conhece o mecanismo, mas em ces tratados com dexametasona a
atividade de lipases chegam a ser 5 vezes maior, e com prednisona duas vezes. Porm aumenta apenas
lipases enquanto a amilase se mantm normal, sendo uma forma de diferenciar. Ento, em animais
submetidos ao tratamento com corticoide e que se deseja dosar as enzimas pancreticas, a amilase a
mais sensvel nessa situao.
Doenas gstricas e duodenais;
Neoplasias: idem anterior.
51
Costumam considerar algum grau de leso pancretica quando a lipase est 2x maior que o limite
superior, isso em ces que no esto sendo tratados com dexametasona ou prednisona.
Lipase e amilase no Fluido Peritoneal: em animais normais uma pequena quantidade dessas
enzimas podem ser dosadas no lquido peritoneal, mas quando h leso pancretica com grande
quantidade de extravasamento dessas enzimas para o peritnio, ocorre o aumento da atividade
enzimtica no lquido peritoneal, bem superior encontrada no sangue (soro).
Imunorreatividade Semelhante Tripsina Srica; um teste que identifica e quantifica a
atividade de tripsina no sangue, o teste mais sensvel e especfico dos citados.
Coproparasitolgico: vrios testes parasitolgicos diretos (esfregao direto das fezes para
observar ovos e vermes), preparao mida, tcnica de flutuao de ovos (Willis), Tcnica de
Bearmann (pesquisa de larvas), sedimentao;
Pesquisar Sangue oculto nas fezes: feito atravs de uma fita reagente posta em contato com as
fezes, se alterar a cor indica a presena de sangue;
Citologia fecal: um esfregao fino de fezes corado com o pantico rpido para buscar clulas ou
algum agente patognico (girdia).
Testes de Digesto e Absoro:
Amido: se no produz enzimas pancreticas, a amilase no ir digerir o amido, que sai nas fezes,
sendo identificado ao adicionar algumas gotas de lugol sobre uma pequena quantidade de fezes
em uma lmina com uma lamnula por cima. Observa-se grnulos de amido de colorao azul
escura a pretas. Se o animal tiver ingerido muito amido, uma parte vai ser eliminada nas fezes
mesmo sem ter IPE.
Gordura: se no produz lipase no h quebra da gordura, que sair nas fezes, sendo identificada ao
adicionar algumas gotas na lmina sobre as fezes do corante Sudan (amarelo-alaranjado). Caso o
animal ingira muita gordura, ir sair nas fezes mesmo sem possuir IPE.
Fibras musculares: no produz quimotripsinognio e tripsinognio, no ocorre a degradao das
protenas musculares, que so encontradas ntegras nas fezes ao corar com lugol. Tambm deve-se
levar em considerao a dieta do animal, se for de grande quantidade de carne, ir sair nas fezes
mesmo se haver IPE.
Teste da Digesto do RaioX: Faz uma mesma soluo com bicarbonato e fezes frescas do animal,
homogeneza e adiciona um pedao do filme de raio x no revelado (ainda com a pelcula
protica), leva ao banho-maria por 1 hora. Se ocorrer a degradao dessa pelcula significa que h
ao proteoltica e consequentemente no h IPE.
Teste da Turvao Plasmtica: esse teste serve para avaliar a capacidade de digesto e absoro
dos lipdeos. Deixa o animal em jejum por 12 horas, colhe sangue para saber o valor basal. Em
seguida administra-se 3ml/kg de leo de milho por via oral, colhendo o sangue com 1-2-3 horas
aps. Se ocorrer a turvao plasmtica significa que ocorreu a digesto e a absoro, portanto, no
h IPE ( feito comparando a colorao do plasma colhido antes do teste e os colhidos aps a
administrao do leo). Se no turvar h problemas na absoro ou digesto, devendo diferenciar
53
21- Voc atendeu uma cadela da raa poodle com 5 anos de idade. A queixa da proprietria era
de que o animal apresentava um aumento de volume abdominal e diarreia persistente h 1
ms, apresentando emagrecimento progressivo desde ento. O apetite estava aumentado. No
exame clnico constatou que o volume abdominal de tratava de ascite. Avalie os resultados
dos exames realizados abaixo e:
a) Calcule o VGM, CHGM e os valores absolutos do Leucograma, classificando-o;
b) D o provvel diagnstico e explique quais resultados o fizeram chegar a este diagnstico;
Variveis
HEMOGRAMA
Valor
observado
0,38
BIOQUMICA SRICA
Valor observado
Valor de
referncia
(0,37-0,55)
Albumina (g/L)
10
Valor de
referncia
25-40
125
(120-180)
Globulinas
24
25-45
Hema x10 /L
5,7
(5,5-8,5)
Glicose (mg/dL)
75
60-100
VGM
66,7
(60-77)
Uria (mg/dL)
37
15-40
CHGM
32,8
(32-36)
Creatinina
1,2
0,5-1,5
PPT
34
(60- 75)
ALT (UI)
91
10-88
Plaquetas
Normais
(200-500)
FA (UI)
20-150
I.Ict.
(2-5)
GGT (UI)
1-10
fibrinognio
(1-5)
Amilase (UI)
1.300
300-2.000
Reticulcitos
1,0
(0,5-1,5)
Parasitolgico
Ovos de ancilstomo
Negativo
Hematcrito
Hemoglobina
12
Variveis
Exame
Resultado
Coproparasitolgico
Negativo
Sem colorao
Negativo
Urinlise
Sem alteraes
Ultrassom abdominal
Sem alteraes
Transudato puro
Leucograma
Variveis
Valor relativo
(%)
Valor de referncia
(%)
Leuccito Global
Valor absoluto
(x109/L)
12.400
Valor de referncia
6.000-17.000
Neutrfilos seg.
92
60-80
11.400
3.000-11.500
Bastonetes
0-3
0-300
Metamielcitos
Mielcitos
54
Linfcitos
10-34
620
1.000-4.800
Moncitos
1-11
124
150-1.350
Eosinfilos
2-10
100-750
Basfilos
raros
raros
desencadeiam a insuficincia heptica (IH), onde o fgado lesionado perde cerca de 70-80% de sua massa
funcional, deixando de produzir substncias, metabolizar e excret-las. A DH nem sempre desencadeia a
insuficincia, pois o fgado um rgo com grande capacidade de regenerao, podendo as leses ser
reversveis ou no.
Existem alguns testes que avaliam a doena heptica ou a insuficincia heptica:
Determinao da atividade de enzimas que indicam que h leso de hepatcitos
(integridade): so as chamadas enzimas de extravasamento (ALT e AST) e enzimas de induo
(GGT e FA);
Dosar substncias que esto relacionadas com a funo de secreo do fgado: Bilirrubina
Total e Direta;
Testes Relacionados com o clearence portal: cidos biliares, amnia;
Testes que avaliam a capacidade de sintetizao heptica (funo de hepatcitos): dosagem
de albumina, ureia (metabolismo da amnia), fatores de coagulao (fibrinognio);
As funes de avaliar bioquimicamente o fgado so de revelar hepatopatia subclnicas (sem
manifestao dos sinais ou sinais inespecficos), saber se o tratamento est surtindo efeito, se h evoluo
do quadro/doena e para classificar as doenas hepticas (leso hepatocelular, colestase ou insuficincia
heptica).
A leso hepatocelular: com a leso aos hepatcitos (podendo ter at necrose) ocorre o
extravasamento de enzimas que ficam no interior de organelas ou no citoplasma para o espao
extracelular (interstcio) e em seguida atingem o sangue, apresentando-se como aumento da atividade.
Podem apresentar atividade aumentada em horas aps a leso. ALT em ces e gatos, e AST em
ruminantes e equdeos.
A Colestase/doenas obstrutivas: as enzimas de induo esto presentes na membrana das clulas
epiteliais dos canalculos, portanto sua atividade no aumenta quando h leso, mas sim quando h um
estmulo indutor, que faz com que aumente a produo e liberao no sangue, ocorrendo em dias.
Insuficincia Heptica: ocorre a perda de mais de 75% da massa funcional do fgado, ocorrendo
perda de funes como sntese, secreo, metabolismo e armazenamento.
Quais so os sinais clnicos de um animal com:
*Leso hepatocelular: vmitos, dor abdominal, hepatomegalia, sinais de hepatite.
*Colestase: ictercia, dor, colorao das fezes alteradas (bile no liberada e no emulsifica as gorduras),
diminuio na consistncia, aumento de volume e gordura nas fezes.
*IH: funo de sntese de albumina vai estar comprometida, vai ter uma ascite, acmulo de amnia, nos
estgios finais aparece ictercia e depois as hemorragias por dficit dos fatores de coagulao.
56
57
Localizao da enzima dentro da clula: existem enzimas que esto na membra das clulas e de
suas organelas, e as que esto livres no citoplasma. As que esto na membrana das organelas vo
demorar mais pra aumentar que s presentes no citoplasma.
O que interfere na velocidade de extravasamento enzimtico?
Enzimas de extravasamento como j foi dito, so aquelas que saem para o meio
extracelular/interstcio aps ocorrer uma leso s clulas produtoras (onde se destacam pedaos de
citoplasma, organelas), e vo parar no sangue, havendo aumento de suas atividades.
O 1 fator o Grau de Leso: se for muito grave as clulas iro morrer e liberar todo o seu
contedo (enzimas) que esto na membrana, organelas e citoplasma. importante levar em conta
que o aumento da atividade de uma enzima no proporcional gravidade da leso, por exemplo,
a leso que provoca a morte de clulas hepticas faz com que ela libere todo o contedo e no
produza mais determinada enzima. Quando h leso subletal, aquela em que a clula continua viva
ocorre perda de parte das enzimas, porm a clula continua produzindo enzimas, portanto essas
clulas parcialmente lesadas podem provocar um aumento maior do que as necrosadas.
Ex.: Se todo o fgado sofre uma isquemia temporria, e todos os hepatcitos sofrem uma leso subletal,
ocorre o extravasamento de uma parte de suas enzimas para o sangue, aumentando muito a atividade
enzimtica, porm o insulto foi removido e o fgado se regenerou. Mas se caso ocorra uma trombose em
um pequeno vaso que irriga uma pequena poro do fgado, essa regio deixa de receber sangue e morre,
necrosa, ocorrendo o extravasamento de todo o contedo enzimtico para o sangue, porm, por ser uma
pequena poro, no ocorreu um aumento intenso da atividade enzimtica. Ento, ao compararmos os
dois casos, o segundo foi mais grave, pois houve morte celular, enquanto o primeiro houve regenerao.
Entretanto, ao dosar atividade enzimtica, no primeiro caso houve um aumento bem mais considervel
que o segundo, portanto no se deve considerar como mais grave aquele animal que possui um maior
aumento de atividade de enzimas hepticas no sangue.
Concentrao intracelular;
Localizao intracelular: as que esto no citoplasma extravasam mais rpido que s presentes
nas membranas das organelas;
Vias de acesso ao sangue (as enzimas pancreticas demoram bem mais pra aumentar, pois caem
na cavidade abdominal para depois serem reabsorvidas pelo sistema linftico e atingir o sangue);
58
A fosfatase alcalina proveniente dos rins, placenta e intestino (gastroenterites podem provocar o
aumento) nos ces tem meia-vida de 6 minutos, e nos gatos de 2 minutos, portanto no so consideradas
fontes importantes de aumento de atividade.
As causas de aumento so: atividade osteoblstica aumentada (ces em fase de crescimento,
quando h fraturas, cnceres sseos (osteossarcoma)), Colestase, gastroenterites e uso de algumas drogas
(fenobarbital e glicocorticides).
O aumento da presso no lmen de ductos biliares nos casos de Colestase induz o aumento da
produo de FA pelas clulas epiteliais dos ductos (leses em nvel de membrana celular). O aumento nos
casos de Colestase distinguvel do aumento por leses sseas, pois quando h a Colestase tambm
aumenta as enzimas presentes no parnquima heptico, as de extravasamento (AST e/ou ALT).
No utilizada em ruminantes por possuir um valor de referncia muito amplo, nem em equdeos.
GLUTAMILTRANSFERASE (GGT)
uma enzima de induo, que aumenta nos casos de obstruo biliar intra ou extra-heptica.
sintetizada em quase todos os tecidos corporais, sendo que em maior concentrao pelos rins e pncreas,
mas a de origem renal grande parte sai na urina (atividade de GGT urinria), e a do pncreas, grande parte
sai junto com as outras enzimas digestivas. A maior parte da GGT srica (do sangue) vem do fgado,
ocorrendo tambm o aumento da sntese nos casos de Colestase. Aumenta tambm com o uso de
glicocorticides.
A dosagem da atividade de GGT para diagnosticar colestase utilizada em gatos, equnos e
ruminantes (tem maior especificidade e sensibilidade para as doenas hepatobiliares, exceto quando h
lipidose, onde a FA que estar aumentada).
A GGT tambm aumenta em neonatos aps a ingesto do colostro, se elevando em at 200 vezes
do limite superior da referncia.
BILIRRUBINA
A bilirrubina no uma enzima, mas sim um subproduto da degradao da hemoglobina celular
pelos macrfagos, sua dosagem serve para identificar se o fgado consegue converter a BI (indireta ou
no-conjugada) em BD (direta ou conjugada), ou seja, avalia a funo de metabolizao heptica, e se
est sendo excretada (nos casos de colestase a BD no excretada, se acumula e acaba indo para o
sangue). possvel dosar Bilirrubina Total (BT) e Bilirrubina Direta (BD), e a subtrao das duas d
origem ao valor de Bilirrubina indireta (BI).
BT-BD = BI.
59
A bilirrubina fotossensvel, ento se quer solicitar a dosagem, deve envolver o tubo com papel
alumnio e ser o primeiro teste a ser realizado.
Quando o fgado perde mais de 75% de sua massa funcional e torna-se insuficiente, existem outros
testes para diagnosticar a Insuficincia Heptica:
Dosar Albumina: geralmente no se observa hipoalbuminemia at que o fgado perca mais de 7075% de sua funo.
sangue, podendo desencadear a encefalopatia heptica (amnia txica em altas concentraes para
o SNC).
Fatores de coagulao: o fgado sintetiza a maior parte dos fatores de coagulao (I, II, V, IX e X),
se estiver insuficiente ocorrer diminuio dos mesmos. A obstruo biliar pode causar menor
absoro de vitamina K e menor produo dos fatores que dependem dessa vitamina (II, VII, IX e
X).
Glicose: o fgado tem um importante papel no metabolismo da glicose, pois aquela que
absorvida armazenada na forma de glicognio (gliconeognese), e quando o organismo necessita
ela liberada na circulao atravs da glicogenlise. Animais com IH podem ter aumento ou
diminuio da glicemia, como nos casos em que a glicose absorvida no armazenada na forma
de glicognio nos hepatcitos, ocorrendo uma hiperglicemia prolongada.
61
protenas presentes nos vasos (meio mais concentrado) que segura o lquido nos capilares, ento o
resultado dessas foras que promove a filtrao glomerular.
Os fatores que vo interferir para que uma molcula consiga passar do sangue para cpsula de
bowman so: -tamanho, as clulas so muito grandes; -peso molecular, protenas acima de 70 kDa no
passam pelas fenestras dos capilares (albumina 69 kDa tem uma pequena passagem de 0,2-0,3% da
quantidade que estiver no sangue; hemoglobina 67kDa 5% da hemoglobina livre no sangue filtrada,
aquela hemoglobina que no est ligada Haptoglobina (protena plasmtica)); - carga eltrica, a carga
eltrica da membrana basal negativa, ento as molculas que possuem carga positiva so filtradas.
Reabsoro tubular: o filtrado comea a sofrer alteraes, parte dele sai do tbulo para as clulas
tubulares, em seguida para o interstcio e depois atingem os
vasos sanguneos.
O lquido pode acompanhar a reabsoro de algumas molculas,
como de aminocidos (reabsoro passiva de gua), ou pode ser
reabsorvido devido ao meio hiperosmtico presente na ala de henle
dos nfrons justamedulares (nfrons que vo at a regio medular
renal). Em uma condio normal ir ocorrer reabsoro de toda a
glicose filtrada, a no ser que exceda a capacidade/limiar de
reabsoro (nos casos de Diabetes mellitus), o sdio e os aminocidos tambm vo ser reabsorvidos.
Secreo tubular: substncias que esto no interstcio vo ser secretadas na luz tubular;
63
URIA
proveniente do metabolismo da amnia, que vem da degradao de protenas ingeridas ou dos
prprios tecidos (catabolismo). Uma pequena parte uria que est na corrente sangunea vai ser eliminada
por difuso pelo intestino (que pode ser degradada pela flora em amnia novamente e ser reabsorvida), e
a maior parte vai ser eliminada pelos rins.
A uria contribui com cerca de 50% do meio hiperosmtico na poro medular dos rins, na
insuficincia heptica ocorre diminuio da uria e perda da hiperosmolaridade renal, havendo um dficit
na reabsoro de gua.
Foi visto anteriormente que nos rins a uria reabsorvida junto com a gua no tbulo contorcido
proximal e tbulo coletor, e secretada na ala de henle descendente.
A Uria pode estar aumentada nos casos de Azotemia pr-renal (azotemia: aumento dos
metablitos que so eliminados pelos rins, mas o animal no tem sinais de IR; -Uremia: o animal tem
sinais clnicos de IR): os rins esto funcionando normalmente mas houve aumento de uria no sangue,
seja por aumento da ingesto de protenas (muita amnia convertida em uria pelo fgado), pode aumentar
devido degradao tecidual (catabolismo);
Causas Renais: A excreo da uria vai depender:
Taxa de filtrao glomerular: Se diminuir a taxa de filtrao glomerular (animais com ICC,
desidratao, neoplasias que comprimem vasos que irrigam os rins) diminuir a excreo de uria.
% de Reabsoro (em mdia 60%) que ocorre no TCP: se diminuir a reabsoro aumenta a
excreo;
Secreo que ocorre na Ala de Henle: se diminui a secreo aumenta uria no sangue
Reabsoro no ducto e tbulo coletor sob efeito do ADH: Nos casos de falta do hormnio ADH
(Diabetes insipidus), no ocorrer reabsoro de gua e consequentemente tambm de uria.
Causa Ps-Renal:
Obstrues por clculos, mais comuns em gatos (DTUIF);
Em alguns livros internacionais eles no falam em uria e sim nitrognio urico sanguneo
(NUS), ento para converter o valor dado em NUS deve-se multiplicar por 0,357.
A uria tem uma estabilidade no soro em temperatura ambiente de 1 dia, refrigerada vrios dias e
congelada de 2-3 meses;
Os Yorkshires, os ces adultos e idosos possuem uma concentrao de uria um pouco superior
aos demais, chegando at 90mg/dL sem que o animal tenha algum problema.
64
Pode ser fisiolgica, por aumento da ingesto de protenas de origem animal (mais amnia > mais
uria);
Terapia com corticides aumentam a quebra de protenas para que sejam transformadas em
glicose pelo fgado (gliconeognese), aumentando a glicemia e uria;
Terapia com tetraciclinas pode agravar a uremia ao inibir a sntese de algumas protenas e
provocar efeito catablito;
inflamatrias,
amiloidose,
nefrite,
pielonefrite,
glomerulonefrite,
isquemia,
CREATININA
Tem origem da degradao no-enzimtica da fosfocreatina dos msculos, ocorre de forma lenta,
constantemente e espontaneamente, e essa degradao no se altera com o aumento da intensidade de
exerccios, com o desgaste muscular (diferente da uria, que sofre aumento devido o aumento do
catabolismo muscular). Dependendo da quantidade de msculo que o animal possua pode sim ter um
valor basal mais alto, pois quanto mais massa muscular, mais fosfocreatina sendo degradada lentamente e
espontaneamente, formando mais creatinina. A creatinina encontrada no sangue, eliminada uma
pequena parte pelo trato digestrio (difuso), e a maior parte pelos rins.
A sua excreo influenciada apenas pela taxa de filtrao glomerular, no h reabsoro e
secreo (alguns autores dizem que uma pequena parte secretada no TCP) como a uria. A unidade
internacional de medida em mol/L, para transformar de mg/dL para mol/L deve-se multiplicar por
88,4.
65
Tcnica de Cianometa-Hemoglobinemia.
Determinar a concentrao de hemoglobina, ou hemoglobinemia. A hemoglobina reage com o
reagente de cor de hemoglobina. O reagente vem em frascos de 10 ml para serem diludos em 1 litro de
gua destilada e postos em um frasco de colorao mbar, pois degradado se exposto luz. Tendo assim
um prazo de 6 meses de validade, devendo ficar explcito no frasco sua validao.
Material necessrio: 1 tubo de ensaio; reagente de cor de hemoglobina; sangue do paciente; pipeta;
ponteiras; pipeta de vidro; pra pipetadora de borracha; microtubo (eppendorf); espectrofotmetro semiautomtico;
Procedimento: Separou-se a quantidade do reagente que seria utilizado em outro frasco, para que em
caso de contaminao no comprometesse todo o litro do reagente, sendo descartado o que restou. Em um
tubo de ensaio posto 2,5 ml do reagente de cor com o auxilio de uma pipeta de vidro. Em seguida o
sangue foi homogeneizado por inverso, aberto o eppendorf com ajuda do papel toalha, pipetado 10 L
de sangue e posto dentro do tubo de ensaio, homogeneizando novamente para que todas as hemcias
fossem destrudas/rompidas e liberassem a hemoglobina na soluo.
66
Quando essa tcnica realizada em sangue de aves, rpteis, anfbios, peixes, onde as hemcias
contm o ncleo, ao romp-las, eles so liberados na soluo, e se a soluo for posta no
espectrofotmetro sem uma centrifugao prvia, ir promover resultados errneos (falsos). O aparelho
de espectrofotmetro emite um foco de luz que atravessa a amostra, que caso esteja muito escura, pouca
luz atravessar, indicando que a amostra est com um alto teor de hemoglobina. Porm, em casos que a
amostra estiver lipmica (turva), com hiperproteinemia ou at mesmo hiperbilirrubinemia tambm iro
deix-la escura, e o espectrofotmetro traduzir como um aumento de hemoglobina, dando um falso
positivo. Por isso toda vez que uma amostra estiver com tais alteraes no se deve confiar no resultado
do exame, pois ser invlido.
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A cmara de Neubauer foi levada ao microscpio para realizar a contagem dos eritrcitos, iniciouse com a objetiva de 10x, diminui o foco de luz, e aps focalizar, aumentou para objetiva de 40x. A
contagem foi feita no quadrado central da rea de contagem, onde possui 25 quadrados grandes, sendo
contados apenas 5 destes. No interior de cada um dos 5, existem 16 quadrados menores. As hemcias que
chegaram (tocaram) at a segunda linha superior e/ou esquerda foram inclusas na contagem, enquanto as
que estiveram na primeira linha inferior e/ou direita estavam fora da contagem. Aps contar os 16
quadrinhos do 1 quadrado maior, passou para o do lado direito e em seguida para o de baixo, pois a
contagem dos 5 quadrados maiores deve ser feita em sentido diagonal.
Aps a realizao da contagem dos 5 quadrados, os valores foram somados e dividido por 100,
sendo dado o resultado em x10/L.
Os valores de referncia para os animais domsticos (x10/L):
Ces: 5,5-8,5
Gatos: 6-10
Cavalos: 6,8-12,9
Bovinos: 5-10
limpas com auxlio do papel toalha, e logo aps as laterais da rea de contagem foram umedecidas com
gua (retirando o excesso). A lamnula foi posta em cima dessa rea e esfregada sobre a cmara at que
fixasse (A lamnula ficando em cima das reas de contagem). A cmara de Neubauer foi posta sobre a
bancada e em seguida a diluio foi homogeneizada e pipetada uma quantidade necessria para preencher
as duas reas de contagem da cmara (foram preenchidos os dois retculos da cmara de contagem,
evitando excesso de lquido e bolhas de ar sob a lamnula).
Dois pedaos de papel toalha foram molhados e amassados, sendo colocados nas laterais da
cmara de Neubauer, foi posta uma tampa (da prpria caixa da cmara) sobre a mesma, cronometrando 3
minutos, pois vai proporcionar umas espcie e cmara mida, evitando que o diluente evapore. Os 3
minutos so essenciais para que os leuccitos sedimentem.
A cmara de Neubauer foi levada ao microscpio para realizar a contagem dos leuccitos, iniciouse com a objetiva de 4x, aps focalizar passou para de 10x, diminui o foco de luz, aumentou para objetiva
de 40x. A contagem de leuccitos feita nas quatro extremidades, ou seja, nas reas encontradas ao redor
da rea central.
Os Leuccitos que chegaram (tocaram) at a segunda linha superior e/ou esquerda foram inclusos
na contagem. Aps contar os 16 quadrinhos do 1 quadrado superior do canto esquerdo, passou para o do
lado direito (fez a contagem), em seguida para o de baixo, e por ltimo o inferior do canto esquerdo.
Aps a realizao da contagem dos 4 quadrados, os valores foram somados, o resultado foi
multiplicado por 0,5 e dado em x109/L.
Resultados e Discusso
Valores de referncia para Ces: 6,0-17,0 (x109/L);
Felinos: 5.5-12,5;
Equinos: 5,5-12,5;
Bovinos: 4,0-12,0;
As principais causas de aumento de Leuccitos (leucocitose)
Fisiolgica: ocorre como uma resposta adrenalina (excitao, medo, exerccio extremo, gestao e
parto), no qual o compartimento marginal de neutrfilos e/ou linfcitos so mobilizados para a circulao
geral, aumentando a contagem total de leuccitos e o nmero de neutrfilo absoluto e/ou linfcitos
(tambm conhecida como pseudo-neutrofilia j que o compartimento de neutrfilos circulantes totais,
na verdade, mantm-se inalterado). Assim uma neutrofilia ou linfocitose transitrias, ou ambas, podem se
manifestar. Esta condio comum em animais jovens e geralmente desencadeada por distrbios
emocionais e fsicos. (KERR, 2003).
Reativa: ocorre em resposta s doenas. Certas doenas podem induzir uma resposta especfica,
mas usualmente um padro geral de resposta dos leuccitos evidente, independente da doena. A
leucocitose reativa pode ocorrer com ou sem desvio esquerda (KEER, 2003).
69
realizando o mesmo com o sangue do receptor. Ambos foram levados centrfuga por 1 minuto a 3.500
rpm, em seguida removeu-se o sobrenadante com o auxlio de uma pipeta, e preencheu novamente os
tubos com soluo fisiolgica, homogeneizando para lavar as hemcias e centrifugando (esse
procedimento foi repetido por mais duas vezes). Os tubos foram identificados para no serem trocados na
hora de ir para centrfuga.
Feita a lavagem das hemcias, removeu-se 20l das hemcias e adicionou 980l de soluo
fisiolgica tamponada em um microtubo (eppendorf), produzindo uma soluo de hemcias lavadas.
Ento, em 4 tubos de ensaios fora adicionados:
TUBO A- Prova Maior: 50l da soluo de hemcias do doador + 100l do soro do receptor;
TUBO B- Prova Menor: 50l da soluo de hemcias do receptor + 100l do soro do doador;
TUBO C- Controle negativo do doador: 50l da soluo de hemcias do doador + 100l do soro tambm
do doador;
TUBO D- Controle negativo do receptor: 50l da soluo de hemcias do receptor + 100l do soro do
receptor;
Aps realizar o cruzamento das amostras, os tubos de ensaio foram levados ao banho-maria
37C por 10 minutos (podendo ficar em temperatura ambiente por 30 minutos). Os sangues presentes nos
interiores de cada tubo foram pipetados e postos sobre as lminas de vidro e cobertos por lamnulas, para
observao das reaes de compatibilidade no microscpio (objetiva de 40x).
RESULTADOS E DISCUSSO
Ao retirar os tubos de ensaio do banho-maria, foram observados os aspectos das amostras em seus
interiores. Onde no ocorreu reao de compatibilidade a amostra ficou turva, com as hemcias intactas
(ocorre quando h compatibilidade ou nos tubos controles). Onde ocorreu a reao, o sangue ficou
translcido (avermelhado), um sinal de que ocorreu a destruio das hemcias (hemlise).
Na prova de reao cruzada maior, as hemcias do doador so testadas com o plasma do receptor
para verificar se h presena de anticorpos no receptor contra as hemcias do doador. Esta prova a mais
importante, devendo ser sempre compatvel, pois em uma reao incompatvel todas as hemcias
transfundidas sero destrudas. Na menor, cruza-se hemcias do receptor com plasma do doador para
verificar a existncia de anticorpos no plasma do doador contra as hemcias do receptor. usada
concomitantemente com a anterior, principalmente na segunda transfuso, porm menos importante
devido diluio do plasma do doador no paciente (MORRIS, 1998).
Na prova maior ocorreu incompatibilidade, ou seja, ocorreu a destruio das hemcias por uma
reao imunolgica exacerbada. Na prova menor, no ocorreu incompatibilidade, porm de menor
importncia, visto que os doadores geralmente nunca recebem nenhuma transfuso ( o indicado), sendo
normal a ausncia de anticorpos anti-eritrocitrios (contra as hemcias do receptor). Com base nas
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reaes ocorridas, o receptor no deve receber sangue do doador, pois so incompatveis, e ocorreria uma
destruio de todas as hemcias transfundidas.
Outras respostas que poderiam ocorrer a hemaglutinao, quando os sangues so incompatveis,
os anticorpos do receptor aglutinam as hemcias do doador, visveis na microscopia, e no tubo de ensaio
aparecem como pequenos grnulos vermelhos. Outra reao que pode ocorrer quando o sangue controle
negativo do receptor apresenta hemlise. Isto se deve produo prvia de anticorpos contra as prprias
hemcias devido a uma resposta autoimune estimulada por hemoparasitas ou imunocomplexos.
Urinlise
A urina um lquido formado pelos rins, como resultado da filtrao do plasma. Suas principais
funes so: eliminao de substncias produzidas pelo catabolismo e indesejveis ao organismo,
eliminao de medicamentos e drogas ingeridas e manuteno da homeostasia do plasma. O rim
formado por milhares de nfrons, que so unidades morfofuncionais capazes de formar urina (GARCIANAVARRO, 1996).
Segundo GARCIA-NAVARRO (1996), a urinlise compe-se de trs etapas, o exame fsico, o
qumico e a anlise microscpica do sedimento. Esses exames fornecem informaes sobre o
funcionamento do sistema urinrio, no entanto, outros rgos tambm podem ser avaliados, como o
pncreas endcrino e o fgado. A urinlise fornece ainda informaes preliminares no que diz respeito a
distrbios como hemorragia glomerular, hepatopatias, erros inatos do metabolismo e infeces do trato
urinrio. A aferio da densidade urinria ajuda na avaliao da funo dos tbulos renais. Os resultados
do exame fsico da urina tambm podem ser utilizados para confirmar ou explicar achados do exame
qumico e microscpico.
MATERIAL NECESSRIO
Fita reagente de urinlises; tubo de ensaio tipo falcon; refratmetro; centrfuga; lmina de
vidro; lamnula; microscpio; Urina do paciente; Luvas;
PROCEDIMENTO
Primeiramente necessrio que a urina seja colhida, que pode ser por mico espontnea
(devendo descartar os 3 primeiros jatos, pois conter detritos, leuccitos, exsudatos provenientes da
uretra, prepcio, etc.), cateterismo ou cistocentese.
Segundo Lopes & Cunha (2002), A urina deve ser colhida em recipiente limpo, podendo ser de
vidro ou plstico. Se a amostra de urina no for analisada imediatamente aps a colheita, os frascos
escuros so preferveis, pois a luz solar pode causar a degradao de certos constituintes da urina, tais
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como bilirrubina e urobilinognio, em menos de uma hora. Pode-se fazer o exame em at 12 horas com a
amostra refrigerada.
Quando a urina chega ao laboratrio faz-se o exame fsico que divido em:
Volume da amostra, no tem importncia saber o volume de apenas uma mico, mas o
interessante mensurar a quantidade de urina produzida em 24 horas. Como em animais a
obteno de urina padro de 24 horas muito difcil, o volume na verdade a quantidade de urina
recebida pelo laboratrio. O volume mnimo para a realizao adequada do exame de 10 ml
(LOPES & CUNHA, 2002).
Cor, pode ser amarelo-clara (urina com baixa densidade associada poliria); amarelo-escura
(urina com alta densidade associada oligria); castanha/marrom (mioglobinria ou
hemoglobinria); avermelhada (presena de sangue); azul-esverdeada (pode ser devido ao azul de
metileno, que comumente encontrada na composio de antisspticos urinrios);
O Aspecto pode ser lmpido/translcido ou turvo. Segundo Lopes & Cunha, 2002, a turbidez da
urina pode representar uma grande quantidade de leuccitos, eritrcitos, clulas epiteliais de
descamao, muco e bactrias do trato urinrio.
Odor, no mais utilizado esse mtodo de inalao de amostra biolgica.
PH e Densidade so mtodos fsicos que so avaliados atravs de uma fita reagente (pH) e
refratometria (densidade);
Aps avaliar volume, cor e aspecto, faz-se o exame qumico, que consiste em imergir rapidamente
(por alguns segundos) uma fita reagente na urina do paciente, retirar o excesso de urina com o auxlio
do papel toalha e realizar a leitura em at 1 minuto aps a emerso da fita, e leuccitos em 2 minutos.
Esta fita de urinlise nos informa a presena, ausncia e quantidade de substncias (ou clulas)
presentes na urina, tais como: sangue, bilirrubina, urobilinognio, cetonas, nitrito, glicose, protenas,
leuccitos, pH, densidade especfica e cido ascrbico.
Em seguida a urina deve ser centrifugada por 10 minutos a 1500 rpm, cerca de 5 a 10 ml de urina,
para que os sedimentos decantem no fundo do tubo. A calibrao do aparelho de refratometria deve
ser realizada para avaliar a densidade urinria (outra forma de avaliao, alm da fita reagente),
pipetando cerca de 30-50 l da urina centrifugada.
Descarta a maior parte da urina, deixando apenas uma quantidade suficiente para cobrir os
sedimentos no fundo do tubo falcon. Suspende os sedimentos, pipeta uma quantidade suficiente para
formar uma gota espessa e pe na lmina de vidro cobrindo com uma lamnula. Leva ao microscpio,
diminui o foco de luz e pesquisa a presena de hemcias, leuccitos, bactrias, clulas epiteliais, de
transio, escamosas, os diversos tipos de cristais, cilindros (hialino, hemtico, leucocitrio, granuloso, de
clulas renais, etc). A objetiva de 10x para ver cilindros e a de 40x para leuccitos, hemcias e cristais.
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RESULTADOS E DISCUSSO
Os resultados avaliados da amostra de urina processada em laboratrio foram:
Exame fsico:
Exame qumico:
Volume: 65 ml;
Bilirrubina: ++
Cor: amarelo-ouro;
Sangue: ausente
Aspecto: lmpida;
Ph: 6,0;
Cetonas: negativo
Glicose: negativo
Nitrito: negativo
Leuccitos: negativo
cido Ascrbico: +20(1.2)
Hemlise: negativo
Na microscopia foi observada a presena de clulas escamosas, so grandes, com bordas angulares
e ncleos pequenos (figura 1), poucas clulas de transio (com bordas arredondadas, um formato de
raquete) e cristais de amonaco magnesiano (figura 2). Todos os valores encontrados no exame de
urinlise estavam dentro da normalidade.
Figura 1. Foto de microscopia ptica de clulas escamosas presentes no sedimento urinrio (setas pretas).
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MATERIAL NECESSRIO: fezes frescas do paciente; tubo de ensaio; pipeta; balana analtica de
preciso; bicarbonato de sdio; gelatina sem sabor; becker;
PROCEDIMENTO
Pesou-se 1g de fezes em uma balana de preciso;
Soluo de Gelatina 7,5%, foi posta em um Becker 0,75g de gelatina sem sabor, adicionado a 10
ml de gua aquecida.
Soluo de bicarbonato 5%, em um Becker foi adicionado 0,5g de bicarbonato, junto a 100ml de
gua destilada;
Em um tudo de ensaio foram adicionas 1 parte de fezes e 9 partes de bicarbonato de sdio (1 grama de
fezes e 9ml de bicarbonato), alm de 0,5 ml de gelatina.
Essa mistura foi levada ao banho-maria 37C por uma hora e em seguida para o refrigerador por
aproximadamente o mesmo tempo, onde depois foi observado o resultado.
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RESULTADOS E DISCUSSO
Observou-se que a gelatina se manteve amolecida (no endureceu), mostrando que ocorreu a ao
das enzimas proteolticas liberadas pelo pncreas (tripsina e quimotripsina), degradando o colgeno e no
permitindo seu endurecimento.
Nem toda vez que amostra endurecer significa que o animal tem IPE, pois a dieta pode interferir
no resultado. Em casos em que o animal ingere uma dieta muito rica em protenas, ocorre uma utilizao
maior da quimotripsina e tripsina pra degrad-las, e as enzimas acabam ficam ausentes nas fezes (falsonegativo). Deve-se fazer o mesmo teste por cerca de trs dias consecutivos para obter resultados mais
confiveis.
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FALTANDO:
AVALIAO DOS TRIGLICERDEOS
ANLISE DOS LQUIDOS CAVITRIOS
URINLISE
HEMOPARASITAS
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