CLASE #14

METABOLISMO, NUTRICIN Y GENTICA BACTERIANA

Caractersticas metablicas generales de las bacterias:

Es un metabolismo adaptado a un rpido crecimiento, es decir, un metabolismo

bastante activo; esto debido a un perodo de crecimiento bastante corto.
Las bacterias tienen una gran diversidad metablica, por que poseen diferentes
estrategias para obtener energa; tomando como base los diferentes tipos de
oxidacin: respiracin aerbica, respiracin anaerbica y fermentacin, y estos
tres tipos son llevados a cabo en las bacterias.
Tienen agentes oxidantes distintos del O2: en la respiracin aerbica el ltimo
aceptor de electrones de la cadena respiratoria es el O2, pero en la respiracin
anaerbica son sulfatos y nitratos los aceptores electrnicos. Y as tambin en
la fermentacin no participa el O2 como aceptor de electrones. Contribuyendo de
esta manera a la diversidad metablica.
Sntesis de macromolculas a travs de medios ms directos: esto es debido a
que poseen una gran especificidad enzimtica.
Procesos de biosntesis
exclusivos en bacterias:
como es el caso de
Murena (un
pptidoglicano y
polisacrido), el
Lipopolisacarido (LPS)
presente en la
membrana externa de
las bacterias Gram
negativas, el cido
Teicoico; siendo todos
estos compuestos
exclusivos de las bacterias.

 Degradan la glucosa por varias rutas: por va glucoltica (tambin llamada Ruta de
Embden-Meyerhof-Parnas), por la va de las pentosas o hexosas
monofosfato, y por la va de Entner-Doudoroff; de acuerdo a las necesidades
metablicas de las bacterias as, si necesita el NADPH utilizara la va de las
pentosas fosfato, pero si solo necesita glucosa como fuente de energa ser por
medio de la va glucoltica.
Llevan a cabo un metabolismo secundario: las bacterias poseen una unidad
bioqumica idntica a la de las clulas eucariotas (procesos de catabolismo y
anabolismo similares), es decir, ambos necesitan degradar compuestos para
obtener energa y utilizar los monmeros del catabolismo en el anabolismo para
el proceso de biosntesis y utilizar de la misma manera la energa generada por el
catabolismo para el proceso anablico, todos los procesos mencionados son
conocidos con el nombre de METABOLISMO INTERMEDIARIO. Pero adems las
bacterias llevan a cabo un METABOLISMO SECUNDARIO, en el cual pueden
reducir compuestos exclusivos como los antibiticos: como es el caso del
Streptomyces del cual se obtiene la Estreptomicina, la Penicilina que se obtiene
del hongo Penicillium notatum.

Patrones de metabolismo de las bacterias para la sntesis de energa:

Fotosinteticas (no patgenas): el ATP es producido por una cadena
transportadora de electrones; la fotosntesis bacteriana se asemeja a la
fotosntesis de las plantas, pero las bacterias no tienen como producto el O2. Aun
as, se utiliza siempre pigmentos fotosintticos como los carotenoides y
bacterioclorofila, y las plantas utilizan la clorofila A para realizar la fotosntesis. La
molcula de clorofila tiene en su centro de reaccin un tomo de magnesio, y al
incidir la luz sobre estos pigmentos el electrn sale del tomo de magnesio y
empieza a transferirse a travs de una serie de aceptores, as por ejemplo al salir
un electrn de la bacterioclorofila, y al transferirse a travs de transportadores de
electrones se crea un gradiente de energa para la generacin de ATP (hiptesis
quimiosmtica).
Aerbicas y anaerbicas: En la glucolisis y en el ciclo de Krebs puede llevarse
a cabo una fosforilacin a nivel de sustrato (consiste en agregar un grupo fosfato
al ATP a partir de compuestos con alta transferencia de grupo fosfato, siendo el
sustrato quien dona su grupo fosfato para generar ATP) Ej. En glucolisis (fase de
oxidacin): El difosfoglicerato y el fosfoenolpiruvato.

 Produccin de ATP por Fosforilacin Oxidativa: La glucosa pasa por una serie
de reacciones en las cuales son liberados H y electrones que son tomados por el
NAD o por el FAD. Estas coenzimas llevan un alto contenido de energa que se
procesa en la cadena transportadora de electrones; que es donde se genera la
mayor cantidad de ATP (32) en la respiracin (no as el ciclo de Krebs (2 ATP)).
La oxidacin de estas 2 coenzimas en el ciclo de Krebs, y a medida que sus H y
electrones van pasando a travs de la cadena transportadora de electrones se
genera un gradiente de energa suficiente para fosforilar el ADP. Este proceso es
llevado a cabo en la membrana citoplasmtica (ya que es semejante a la
membrana interna de la mitocondria)
Todas las vas metablicas son llevadas a cabo en el citoplasma.
En el laboratorio la fermentacin es detectada por todos los sistemas de prueba
bacteriolgico por medio de indicadores de pH que viran de color de acuerdo a
los productos que se estn produciendo. Ej. Cuando la bacteria realiza
fermentacin degrada la glucosa a acido pirvico y este a cido lctico, etanol,
cido propionico, butrico, butanodiol, etc.
FERMENTACIN ACIDA MIXTA. En un caldo glucosado se siembra un
microorganismo, luego de incubacin y la presencia de turbidez (crecimiento
bacteriano), se le agrega ROJO DE METILO; si toma un color rojo entonces
decimos que la bacteria realizo una fermentacin acida mixta, porque degrado la
glucosa a piruvato y luego este a productos cidos. (Prueba del rojo de Metilo).
Los fermentadores cido mixtos producen 4 veces ms productos cidos que
neutros.
FERMENTACIN BUTANODIOLICA. Degradan la glucosa a piruvato, este a 2,3butanodiol, luego a acetilmetilcarbinol o acetona y por ultimo a diacetilo. La
deteccin de la fermentacin se realiza siempre utilizando un caldo glucosado que
se incuba, y se le agrega el indicador, el O2 y KOH y virara a color rojo: PRUEBA
DE VOGES-PROSKAUER. Y su producto final es acetilmetilcarbinol o
acetona.

Valoraciones de las bacterias de acuerdo a su metabolismo y su fuente de

energa y carbono:

Metabolismo Quimiorganotrofo: Utilizan como fuente de energa los

compuestos orgnicos y como fuente de carbono el CO2. Estos organismos
respiran aerbicamente o anaerbicamente.

Metabolismo quimiolitrotofo: Utilizan como fuente de energa los compuestos

inorgnicos y como fuente de carbono el CO2. Estos organismos respiran
aerbicamente o anaerbicamente.

Metabolismo fototrofico: Son bacterias fotosintticas porque utilizan como fuente

de energa la luz solar y pueden ser:
Fotohetertrofos: Fuente de carbono son los compuestos orgnicos.
Fotoauttrofos: Fuente de carbono es el CO2.

TEMPERATURA PTIMA
Todas las bacterias poseen una temperatura ptima, esto debido a que ciertos procesos
debajo y sobre esa temperatura ptima no se pueden desarrollar.
Si una bacteria se encontrase a una temperatura menor que la ptima no crecer porque
se le puede gelificar la membrana, su transporte puede hacerse lento, etc. Pero si se
encontrara a una temperatura arriba de la ptima se van a desnaturalizar sus protenas,
un colapso de la membrana o una lisis trmica.

 Cicrofilos: su temperatura optima es de 4C

Mesofilas: a este grupo pertenecen las bacterias patgenas cuya T es de 37C
(temperatura del cuerpo) Ej. Escherichia coli
Termofilos: Crecen a una T ptima de 62C, por ejemplo Bacillus
stearothermophilus, quien se utiliza como control biolgico.

pH ptimo
La mayora de bacterias patgenas son neutrfilas (y en menor proporcin alcalofilas).

CONCENTRACIN DE SALES
Bacterias Halfilas: requieren altas concentraciones de sal para crecer (NaCl).
Ej. V. cholerae
Bacterias halotolerantes: no requieren sal para crecer pero si est presente la
ocupan.

NECESIDADES DE O2
Aerobios estrictos: Crecen en la superficie del tubo donde concentraciones de
O2 son altas. Estos microorganismos requieren de enzimas para destruir o
degradar las especies toxicas que se producen como producto de la utilizacin
del O2, como el H2O2 y el anin superoxido (radicales libres). Ej. Catalasa:
degrada H2O2 en agua y O2; Peroxidasa: en presencia de NADH degrada H2O2
en agua y NAD; Superoxido dismutasa: degradan anin superoxido en H2O2 y
en O2; y combinacin de Superoxido dismutasa y catalasa.
Microaerofilico: Parte del tubo donde empieza a escasear el O2
Anaerobio estricto: no hay O2 suficiente

 Anaerobio facultativo: crecen en todo el tubo de ensayo, en presencia o

ausencia de O2.

CURVA DE CRECIMIENTO
El crecimiento en las bacterias es el aumento del nmero de clulas microbianas en
una poblacin o incremento en su masa.
Generacin: es el intervalo para la formacin de dos clulas a partir de una.
Y al tiempo transcurrido se le denomina tiempo de generacin o duplicacin (tiempo
que se requiere para que una poblacin se duplique).

Al colocar una poblacin de bacterias en un medio de cultivo cerrado (monofsico) las

bacterias experimentaran una curva de crecimiento y muerte bacteriana. Las bacterias
experimentaran una fase de latencia o rezago, una exponencial o logartmica, una fase
estacional y por ultimo una de declinacin o muerte.
El color de los tubos de ensayo indica el crecimiento o muerte de la bacteria. Ej. El azul
indica crecimiento, quiere decir que en la fase exponencial o logartmica el crecimiento
es mayor que la muerte de las bacterias; en la fase estacionaria, el crecimiento y la
muerte es igual; y en la fase de declinacin hay ms muertas que vivas.
El perodo de tiempo de la fase de latencia depende del tipo y procedencia de bacteria,
de las condiciones y tipo del medio de cultivo. Por ej. Al inocular una bacteria que est
en fase exponencial o logartmica (estado fisiolgico ms sano, ya adaptada y con
todo lo necesario para crecer) en un medio de cultivo, la fase de latencia (o rezago) ser
corta, porque se siembra una bacteria que ya ha crecido y ya tiene todo lo necesario.
Pero al sembrar una bacteria en fase estacionaria (se da cuando un nutriente esencial
del medio empieza a escasear o debido a una acumulacin de desechos txicos a niveles
tales que inhiben su crecimiento) por lo tanto su fase de latencia ser larga; porque la
bacteria debe adaptarse otra vez, volver a sintetizar lo que ya se le haba acabado y
reparar daos por sustancias txicas o por radiacin.
1. Fase de latencia: Perodo de ajuste metablico en el cual la bacteria est
sintetizando compuestos para adaptarse al medio de cultivo.

2. Fase exponencial o logartmica: Fase en la cual la bacteria empieza a

duplicarse y a crecer a intervalos regulares hasta alcanzar el mximo nivel posible
de crecimiento.
3. Fase estacionaria: se da cuando un nutriente esencial del medio empieza a
escasear o debido a una acumulacin de desechos txicos a niveles tales que
inhiben su crecimiento.
4. Fase de declinacin: Se agotan todos los nutrientes y reservas de energa que
tienen; lo que provoca muerte de bacterias, se hacen bastantes grandes y se
convierten en esporas.

TAREA
MUERTE BACTERIANA:
Desde el punto de vista microbiolgico, un microorganismo muere cuando pierde de
forma irreversible la capacidad de dividirse. El fundamento de esta definicin es que si
un microorganismo ha perdido la capacidad de dividirse no podr formar una colonia
sobre un medio de cultivo y no ser posible detectar su presencia por los mtodos
microbiolgicos tradicionales. Es decir: cuando no se produce aumento en el nmero de
microorganismos no hay crecimiento. Sin embargo, un microorganismo puede estar
muerto desde el punto de vista microbiolgico y continuar desarrollando una actividad
metablica que se traduzca, por ejemplo, en liberacin de toxinas.

Por otra parte, hay que considerar que la capacidad de multiplicacin (crecimiento) de
un microorganismo puede verse transitoriamente afectada por lesiones o por las
condiciones fsicas o qumicas del entorno. En estos casos, podramos considerar como
muertos microorganismos que pueden reanudar su crecimiento si las condiciones son de
nuevo favorables.

GENETICA BACTERIANA
El material gentico de la bacteria se encuentra en dos lugares:
-

En el cromosoma propio de la bacteria: ubicado en una zona nuclear llamado

nucleoide, contiene los genes esenciales para el crecimiento y supervivencia de
una bacteria.

En plsmidos: contienen DNA extracromosomal, constituyen un genoma

accesorio porque se encuentran solo genes con funciones especializadas, es
decir, no existen genes para la supervivencia de la bacteria.

Ambos tipos de material gentico son replicones (pueden replicarse por si solos).

Caractersticas generales del genoma bacteriano:

Genoma: Totalidad de la informacin gentica que tiene un individuo, constituido
en bacterias por todos los genes que tienen en los cromosomas y en los
plsmidos.
DNA: circular cerrado y desnudo (no posee histonas, protenas que intervienen en
el empaquetamiento del DNA). Poseen un DNA superenrrollado.
Son organismo haploides (poseen un solo juego de cromosomas). Por esta razn
las mutaciones en estos son mucho ms severas. Y es debido a esto que las
bacterias forman cepas y todas estas variedades que existen.
Genes de virulencia: estn en islotes de patogenicidad y pueden ser
transportados del genoma al plsmido o del plsmido al genoma a travs de
transposones (son genes saltarines, segmentos de DNA que pueden trasladarse
de un sitio a otro del genoma generando los polimorfismos genticos, variando las
caractersticas del DNA). Los transposones mueven genes de un sitio a otro del
genoma.
Solo existen exones: no existen intrones (segmentos de DNA que no codifican a
productos genticos). Por lo tanto el proceso de la replicacin y traduccin es
ms rpido en bacterias.
Replicacin: Ori c constituye el inicio de la replicacin; adems es semiconservativa, tambin existe complementariedad de bases. Participan enzimas
como poliaminas, esperminas, helicasas, polimerasas y topoisomerasas.
Regulacin gentica: A travs de operones que tienen genes estructurales,
genes de promotores o inductores, en el cual ese operon se expresa si su sustrato
se encuentra presente en el medio. Ej. En presencia de lactosa, el operon se
enciende y echa andar todos sus genes estructurales y operativos para poder
degradar al sustrato.

PLSMIDOS
La mayora de plsmidos son circulares pero existen algunos lineales.
Son episomas: tienen la capacidad de integrarse al cromosoma bacteriano. Ej.
Cuando las bacterias llevan a cabo la recombinacin gentica a travs del proceso
de la conjugacin el plsmido puede pasar de una bacteria a otra y no quedarse
como independiente, integrndose al cromosoma de la otra bacteria.
Genes con funciones especializadas: Ej. Genes de resistencia a antibiticos
quienes pueden ser transferidos a otras bacterias; pueden producir bacteriocinas
(sustancias que daan a las bacterias), toxinas, siderforos o compuestos que
puedan capturar el hierro.
Son vectores de clonacin (puede introducirse un gen extrao para clonar ese
gen).

TRANSFERENCIA DE MATERIAL GENTICO DE BACTERIAS

1. Conjugacin:
Apareamiento casi sexual pero no es sexual, se refiere a una bacteria que
funciona como macho (F+) que ser capaz de transferir su plsmido a otra
bacteria (F-), los plsmidos que ms se transfieren son aquellos que tienen genes
de transferencia para la formacin del Pili sexual, es a travs de este que se pasa
una cadena monocatenaria del plsmido y luego se sintetiza toda la cadena
complementaria y la otra adquiere el plsmido. La bacteria receptora se convierte
en
F+.
En el caso que el plsmido quede integrado en el cromosoma (episoma), la
bacteria que adquiere este plsmido se convierte en un donador de alta
frecuencia (HFF).
2. Traduccin:
El material gentico pasa a una bacteria a travs de un bacterifago (virus que
parasita a las bacterias que porta material gentico de otra bacteria que ha

parasitado

ha

adquirido

caractersticas

de

la

otra

bacteria).

Virus Templados: estos son aquellos que hacen un proceso ltico en una bacteria
que ha parasitado, significa que este virus templado cuando se incorpora su
material gentico en la clula bacteriana hace que esta clula bacteriana se
rompa.
Virus Temperados: se quedan en un estado lisognico, dentro del cromosoma
de la bacteria, y que si bien es cierto se rompe la bacteria, pero queda en un
estado
lisognico
adentro
primero.
Traduccin especializada: Los genes que va a inyectar el virus a la bacteria son
genes que estn cerca de su genoma, lo que ocurre es que el virus puede
transferirle solamente DNA bacteriano (no viral) que ha quedado introducido en su
cpsula generalizada a la bacteria.

3. Transformacin:
Es un intercambio gentico en el cual la bacteria es capaz de captar DNA desnudo;

es decir, es la captacin de DNA desnudo liberado por una bacteria y captado por
otra. Este proceso es utilizado en ingeniera gentica, sometiendo a shock trmico
a la bacteria para que pueda captar el DNA desnudo. Las bacterias que captan
ese DNA se dice que son competentes y lo realizan en una fase logartmica de
crecimiento.