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SECCIÓN SUMARIO

2 Genética Bovina Colombiana


PUNTO DE VISTA

Edición Nº 16 Enero - Febrero 2010

No todo es culpa
ISSN 1909 – 8723

Edición
Santacruz Editores E.U.

del “Niño”
NIT: 900 130 461 - 4
Avda. Cra. 72 Nº 152B-90 Int. 2 Apto. 902
Teléfono 3562713 - 310 8692372
geneticabovina.fer@gmail.com
Bogotá – Colombia

Director

D
Fernando Santacruz Hoyos
esde estás páginas resulta demasiado fácil plantear alternativas de
Colaboración Técnica solución a los diversos problemas que frecuentemente se viven en
Henry Grajales L. el sector ganadero. No obstante, bien dicen los sabios que se debe
Nestor Tovias Luna ahorrar en periodos de bonanza para sacar cuando no se tenga. Este co-
Facultad de Medicina Veterinaria mentario se debe a la difícil situación que atraviesan ellos por “culpa del
y de Zootecnia,
Universidad Nacional de Colombia
fenómeno del Niño”, que ha generado enormes pérdidas en todo nivel.
Sin embargo, respetuosamente creemos que no todo lo que está pasando
Carlos Alberto Martínez Niño es su culpa. Acaso será responsable el “Niño” que Colombia no tenga una
Carlos Manrique Perdomo política agropecuaria para proteger a los productores a cambio de beneficiar
Universidad Nacional de Colombia a los industriales y comerciantes. Acaso es responsable que no funcione la
Rodríguez M.
cadena láctea y su famoso Consejo que buscada, en teoría equidad en los
Carlos Giraldo precios. Acaso es responsable que los insumos de la canasta agropecuaria
Susana Castañeda P. valgan hasta tres veces más acá que en el exterior. Acaso es responsable que
Tatiana Ruiz los industriales dejen de pagar las bonificaciones a la calidad de la leche
Martha Olivera disque porque hay demasiada guardada y que frente a ello el gobierno se
Universidad de Antioquia
quede mudo. Acaso es responsable que el laboratorio independiente donde
Marco González T. se tomaban las muestras de calidad a la leche fuera cerrado y los ganaderos
MVZ, M.Sc. queden al libre criterio de los industriales. Acaso es responsable que el cré-
Juez Grado A dito gubernamental llegue a quien no lo necesita. Acaso es valido que una
Asodoble de las salidas para afrontar la crisis sea precisamente entregar una nueva
Universidad de Córdoba
tarjeta bancaria a los ganaderos para que supuestamente tengan más acceso
Julio César Olaya a recursos y se modernicen. Acaso tiene la culpa que el gobierno no haga
Lino Andrés Oyuela nada por proteger los recursos hídricos y permita la deforestación de los
Embriogen S.A. páramos. Acaso tiene la culpa que sea más rentable cultivar una hectárea
de coca que cien de pasto y forraje, etc.
Fotografía Portada
Toro El Carrizal Dynasty Spiderman
Mientras no se solucionen tantos “acasos” no se puede exigir a nadie que
Cortesía Asociación Pardo Suizo sea más competitivo. De qué le sirve matarse a un ganadero para producir
un litro de leche o un kilo de carne si toda la utilidad se la llevan hoy las
Fotografías Internas grandes cadenas comerciales sin mover un dedo.
María Teresa Barreneche, Fedegan exige ahora competitividad a sus ganaderos. Por qué no exige
cortesía Alianza Trascender
Jaime Ramírez
reglas claras para ellos. Por qué no exige soluciones estructurales y no
Fernando Santacruz Hoyos coyunturales. Este es un sector que no puede estar al vaivén de las cir-
cunstancias si quiere ser competitivo. La ganadería es un negocio de largo
Diseño y Diagramación plazo y necesita que el Estado le brinde un horizonte claro. Con los precios
Alonso Romero Torres con los que se está produciendo actualmente el ganado y la leche, jamás
Tel. 757 7149
llegaremos a los mercados internacionales. La única alternativa sólo es a
Preprensa e Impresión través de material genético.
Legis S.A. El deterioro creciente del planeta es culpa del hombre. De nadie más. Lo
que se está viviendo hoy no es nada comparado con lo que vendrá mañana
Comercialización si no hacemos nada por solucionarlo. De ahí que el mensaje es aprovechar el
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agua cuando vuelva para producir y almacenar el alimento del mañana.
geneticabovina.fer@gmail.com
Bogotá – Colombia Fernando Santacruz Hoyos
Director
Revista Genética Bovina Colombiana
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SANTACRUZ Editores 5
PIONEROS

■■Ricardo y Mauricio Reyes Duarte junto a la vaca El Carrizal Preston Sophie EX 93, Gran Campeona y Campeona Suprema de todas las razas, en Agroexpo
2007 y 2009; se vendió por $60 millones convirtiéndose en la vaca de mayor valor en remate publico de cualquier raza lechera en Colombia.

El Carrizal
El hato Pardo Suizo de
mejor genética en Colombia
Diez ocho años ganando los grandes campeonatos en Agroexpo.

E
ste record muy pocos gana- nacieron alrededor de la ganadería. ganaderías de Estados Unidos dando
deros lo pueden contar. Sin De ahí su amor, conocimiento y inicio a un núcleo genético de la más
embargo para los hermanos pasión por los animales. alta calidad, capaz de transmitir
Ricardo y Mauricio Reyes Duarte es Animales de la raza Pardo Suizo leche, grasa, sólidos y proteína, que
un tema de genética ya que lo llevan los cuales fueron importados a prin- gozaran de una perfecta conforma-
desde pequeños en la sangre pues cipios de los setentas de las mejores ción y que fueran capaces de ganarse

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las ferias, al igual que lo hacían sus Manejo de la genética “sacando” a todos sus animales de la
madres y padres en las mejores ferias finca ubicada en Villeta, Cundinamar-
americanas. Es decir, producir anima- Su negocio es vender genética a ca para enviarlos a fincas de terceros
les “completos”, pero que además sean través de toros para reproducción, (tipo hotel) tal como lo hacen los me-
fértiles y tengan excelentes ubres. novillas para reemplazo, embriones jores criaderos de genética del mundo.
Una década después, en los ochen- congelados y preñeces. Pero como la Este modelo de negocio les permitió
ta, el fruto de esta selección genética genética sola no lo hace todo, monta- quitarse los problemas de manejo dia-
empieza a dar cosecha y son reconoci- ron programas sanitarios enfocados rio que surgen en las fincas. Ya no están
dos a nivel nacional por la calidad de en prevenir las enfermedades y no en pendientes si hay o no comida, droga,
sus animales. Por aquellos días inician curarlas. Durante más de veinte años etc. De esto se encargan sus nuevos
programas de transferencia de em- fueron certificados como hato libre de aliados estratégicos quienes reciben
briones, con métodos no tan sencillos brucela, tuberculosis y leucosis. Este parte de las ganancias como medio
como los manejados en la actualidad, plan sanitario se complementó con de pago, el cual puede ser en plata,
pues las receptoras debían ser abiertas uno nutritivo buscando brindar al ani- embriones, novillas, semen, etc.
quirúrgicamente por un costado para mal desde su nacimiento un perfecto
implantarles el embrión. Curiosamen- balance metabólico para que sean Cruces
te hace poco nacieron embriones que productivos, eficientes y fértiles.
estaban guardados en termos desde Pero para que estos programas Pese a ser criadores de genética
esa época; luego con el pasar del tiem- rindan sus frutos adecuados, existió pura están totalmente de acuerdo con
po y con los avances de la tecnología un riguroso manejo administrativo los programas de cruces entre diferen-
pasaron a transferir sus animales con donde se llevó un control de produc- tes razas. Según Mauricio Reyes la ten-
embriones in vitro, constituyéndose ción en plata por vaca, pero de venta dencia mundial del ganado comercial
en una de las empresas ganaderas en genética, no de venta en leche, ni es cruzado; ejemplifica este comentario
pioneras en Pardo Suizo y en general de grasa o proteína. Obviamente sí anotando que recientemente estuvie-
de todas las razas, en emplear estas les interesaba la producción, pero su ron visitando fincas al norte de Texas
herramientas de biotecnología al igual objetivo primordial era ó es que la en Estados Unidos totalmente tecnifi-
que la del semen sexado en programas vaca produzca ganancias mediante la cadas con 14.000 animales cruzados
de inseminación de novillas. venta de embriones, novillas, preñe- entre Holstein y Pardo Suizo ó Hols-
Estos programas requieren el uso ces, etc; es decir, mediante genética. tein y Jersey. Dice que esta tendencia
del mejor semen del mundo disponi- De ahí que el año pasado decidie- se da pues el animal resultante es un
ble comenta Mauricio Reyes Duarte, ron darle un vuelco total a su negocio ejemplar con mayor vigor híbrido,
al igual de un horizonte de trabajo
claro, que en su caso, es producir ani-
males “completos” con un alto énfasis
en las ubres de las vacas. No por nada
durante las últimas diez ocho versio-
nes de Agroexpo, considerada como
la mejor feria ganadera del país, han
ganado los grandes campeonatos
nacionales y tres Campeonatos Su-
premos, ya sea con animales de su
propiedad o vendidos por ellos. Este
record les permitió que en el mes
de noviembre de 2009 el señor Dan
Gilbert, dueño de la casa New Gene-
ration Genetics, líder a nivel mundial
en venta del mejor semen de Pardo
Suizo, los honrara con el siguiente
comentario. “Nunca en Latinoamérica
había visto una empresa ganadera como
el Carrizal que produjera tantas y tan
buenas vacas”. No por nada, hoy su
hato tiene una clasificación de 90.1, ■■El Carrizal Dynasty Spiderman, es tal vez el toro genéticamente más valioso nacido en Colombia.
cifra que seguramente la ubica como Su padre aparte de ser altamente positivo en leche y tipo es el padre del toro No 1 en leche
Alloy y del toro No 1 en tipo Dragon. Su familia materna es la de La Priscila, la más influyente
el mejor hato clasificado, en cual- en la raza en los últimos 20 años. Spiderman tiene la misma combinación de sangres que el
quier raza, de Colombia. toro No 1 en leche (Dynasty x Collection).

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PIONEROS

más fuerte, más productivo y que se


enferma menos. Además su leche es
de mejor calidad. Agrega al respecto
que curiosamente en Colombia los
criadores de Holstein son los mayo-
res compradores de semen de Pardo
Suizo y Jersey por la funcionalidad y
productividad de sus cruces.

Selección genómica,
la verdadera revolución
Nadie mejor para explicar el
fenómeno genético que está su-
cediendo en el mundo lechero en
los últimos dos años, gracias a la
implementación de la selección ■■El Carrizal Jetway Cogñac Gran Campeón Agroexpo 2007 y 2009. Propiedad de Hacienda Las Aguas.
genómica que un ganadero como
Mauricio Reyes, quien además de
ser junto con su hermano Ricardo
los mejores criadores de Pardo Suizo
en Colombia, posee una empresa
comercializadora de semen y em-
briones representando a las mejores
casas de Estados Unidos y Canadá.
Para él la selección genómica es un
cambio histórico trascendental en la
ganadería mundial, que solo se puede
comparar con el fenómeno vivido en
su tiempo, con la llegada del hombre
a la luna o la televisión a color.
Gracias al descubrimiento del ADN
del hombre se analizó el de las vacas
y se encontró que está compuesto por
tres billones de caracteres diferentes
■■El Carrizal Jetway Shakira, Ex 93. Gran Campeona y mejor ubre Agroexpo 2009, Su padre Jetway y
y de éstos, 60 caracteres pueden dar su madre hija de Pete Rose. El Carrizal Emory Carla EX 92. Gran Campeona Reservada de Agroexpo
la confiabilidad de poder prever si 2007 y 2009, Su padre Emory y su Madre hija de Ensing, propiedad de Hacienda Chapetes.
un ternero recién nacido será o no
mejorante en leche, grasa, proteína, lecheras serán increíbles, pues se como si fuera la primera vez porque es
ubres, fortaleza, en patas. Antes de va a pensar en mejorar ciertas ca- el triunfo de un equipo integrado con
este desarrollo científico se necesitaban racterísticas como fortaleza, cascos, su hermano Ricardo, de la persistencia,
siete años para tener una prueba con ubres, composición de la leche, etc. del empeño, de la visión plasmada
una confiabilidad del 56%. Hoy en una Este fenómeno no sólo sirve para sobre un animal y la emoción es in-
hora y con US$250 dólares se puede los toros pues se podrá predecir si descriptible y dice que disfrutan no
saber con una certeza del 76% si ese una ternera será una gran vaca. En por el ego personal sino por el aporte
animal será mejorante en la raza. otras palabras, en vez tener muchas que le brindan a Colombia. Precisa-
Antes para sacar 10 toros buenos vacas de reemplazo y esperar a ver mente Mauricio comenta que para él
había que probar 100. De éstos, 50 no cuál será la sobresaliente, se puede su hermano Ricardo, presidente de la
eran mejorantes, 40 eran promedio hacer un programa de mejoramien- Asociación Pardo Suizo durante cuatro
y 10 lo eran. Esto quiere decir que to mucho más rápido empleando los años y vicepresidente por otros seis
la mitad de las hijas de los toros animales verdaderamente valiosos años, es el mejor conductor de vacas
probados no fueron mejores que sus y probados genómicamente. lecheras en el país.
madres. Hoy con la prueba genómi- Finalmente al preguntarle sobre
ca ese problema se acabó; todos los cuál de los 18 logros de Agroexpo fue Mayores informes:
toros serán mejorantes de raza. La más significativo, responde sin titubear (1) 2154606 – (1)7028601.
revolución y el avance de las vacas que todos pues cada vez la alegría es mreyes@columbhouse.com

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MEJORAMIENTO GENETICO

Evaluación genética
en bovinos de carne
El producto final de la evaluación genética es la predicción de los valores genéticos
de los animales.

D
Carlos Alberto Martínez Niño. e acuerdo con Ruales y col. tico y descartar los peores. Permite
Carlos Manrique Perdomo. (2007) la evaluación genética separar los efectos genéticos de los
Zootecnista Universidad es un proceso cuyo objetivo no genéticos, ya que el fenotipo
Nacional de Colombia. es identificar genéticamente los indi- depende del genotipo y el entorno
Estudiante de maestría. viduos existentes en una población y en donde se desempeña el indivi-
Zootecnista MSc PhD. Profesor así seleccionar como reproductores duo, esto se representa como sigue:
asociado Universidad Nacional. aquellos con el mayor mérito gené- F=G+E (Falconer y Mckay, 1996).

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GBC  Edición 16

tantes, mientras la descendencia del


macho B lo hace en condiciones muy
favorables; en este orden de ideas la
descendencia del macho B tendrá
un mejor desempeño productivo,
pero como se evidencia claramente
sería un error afirmar que median-
te la evaluación fenotípica de sus
descendientes el macho B tiene un
mayor mérito genético para las ca-
racterísticas estudiadas, puesto que
se presenta lo que estadísticamente
se denominan efectos confundidos
entre la genética y el entorno.
Por este motivo, un gran avance
se dio con el desarrollo teórico y
posterior implementación de la me-
todología BLUP (Best Linear Unbiased
Prediction) o MPLI (Mejor Predicción
Lineal Insesgada) que permite separar
los efectos genéticos de los no gené-
ticos (Manrique, 1995). Durante los
últimos 30 años el adelanto en meto-
dologías estadísticas y computación
ha sido vertiginoso (Elzo y Cerón,
2009), este hecho ha permitido un
rápido avance en el desarrollo e
implementación de modelos estadís-
ticos para la evaluación genética de
animales (Bullock y Pollak, 2009). La
evaluación genética en ganado de
carne continua mejorando la habi-
lidad de los productores para tomar
decisiones de selección acertadas
(Bullock y Pollak, 2009).

Algo de historia
Los trabajos de Juan Gregorio
Mendel mediante los cuales se
definieron los mecanismos de la
herencia fueron publicados en
1865 (Ossa, 2003), este hecho marca
el inicio del estudio de la genéti-
ca. Posteriormente el matemático
ingles Goldfrey Harold Hardy y
■■Foto: Jaime Ramírez, cortesía Ganadería Santa Helena. el médico alemán Wilhelm Wein-
berg establecieron en 1908 la ley
de Hardy-Weinberg (Ruales y col.,
El producto final de la evalua- y un toro B, se obtiene un número 2007), Sir Ronald Fischer y Sewall
ción genética es la predicción de los igual de descendientes de cada uno Wright desarrollaron la genética
valores genéticos de los animales, la en hembras de genética muy similar, de poblaciones basada en las leyes
necesidad de la correcta identifica- los cuales crecen en zonas comple- de Mendel, aplicada a caracteres
ción genética de los mismos se pue- tamente diferentes, de manera tal económicos y cuantitativos, es de
de ilustrar con un ejemplo sencillo. que la progenie del macho A se destacar el aporte que realizó J. L.
Suponiendo que se tiene un toro A desarrolla en ecosistemas muy limi- Lush, quien en los 40 creó las teorías

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MEJORAMIENTO GENETICO

de selección (Galeano, 2004), además separa los efectos genéticos, de los estructura de los datos y de los efec-
trabajo de manera notable en el es- efectos no genéticos (Manrique, 1995) tos genéticos a estimar, se pueden
tablecimiento de metodologías para y las predicciones del valor genético hacer diferentes agrupamientos:
calcular los parámetros genéticos y tienen la propiedad de no depen- padre (modelo de padre o de toro), in-
estableció la importancia del cálculo der de los efectos de entorno (Elzo, dividuo (modelo animal propiamente
de los mismos en los programas de 1996b), por lo tanto es herramienta dicho), padre y abuelo materno,
mejoramiento genético (Lush, 1940), eficiente y confiable para la selección padre y madre, entre otros.
en sus trabajos Lush empezó a direc- de reproductores en los diferentes
cionar y estructurar los programas sistemas de producción, siendo Modelo animal reducido
de mejora genética, discutió aspec- utilizada actualmente en todo el
tos importantes como la interacción mundo para dicha labor. En eva- Este es un método que permite
genética-medio ambiente, destacó la luaciones unirraciales se obtienen obtener los BLUP de los valores
importancia de la estadística en el predicciones de efectos genéticos genéticos bajo modelo animal, el
mejoramiento animal y trabajó en aditivos (Manrique, 1995; Henderson, cual considera padres y madres
la implementación de los índices de 1988), en el caso de un modelo de solamente ya que las ecuaciones de
selección como herramienta para la padre en el cual se estiman efec- los hijos se escriben en términos de
identificación genética de los repro- tos genéticos aditivos directos, se los padres, luego mediante técnicas
ductores potenciales (Lush, 1951); obtiene la predicción del posible estadísticas se obtienen los valores
fueron Lush y Michael Lerner los comportamiento de la progenie de genéticos de los descendientes, esta
pioneros en la aplicación de los prin- un semental en relación con la pro- metodología fue propuesta por
cipios de la genética cuantitativa en genie de sementales de referencia o Quass y Pollak (Henderson, 1988).
mejoramiento animal (Ossa, 2003). al promedio de todos los sementales
En 1974 el doctor C.R. Henderson incluidos en la prueba (base genética) Modelos de evaluación
publicó una completa base teórica (Legates y Warwic, 1990). multirracial
en la cual exponía la implemen- El valor genético de un animal
tación de modelos estadísticos en se expresa en las evaluaciones de En zonas tropicales y subtropica-
la evaluación genética de anima- bovinos para carne, como la dife- les se ha hecho uso del cruzamiento
les (Manrique, 1995). En 1983 Elzo rencia esperada de progenie DEP, como herramienta de mejora gené-
desarrolló una metodología para se debe tener presente que los catá- tica explotando la heterosis o vigor
evaluar animales en poblaciones logos generados en otros países no híbrido (Peacock y col., 1979), Elzo y
multirraciales dentro de un país y pueden ser utilizados en nuestras Wakeman (1998) comentan que buena
entre países (Elzo, 2006), sus trabajos condiciones debido a la existencia parte de la carne producida en los
permitieron la evaluación genética de la interacción genotipo-entorno, estados unidos se obtiene de animales
de animales cruzados (Ossa, 2003). puesto que el ordenamiento de los cruzados. La heterosis se define como
Según Bullock y Pollak (2009), a animales puede cambiar y por lo la superioridad que presenta la des-
partir de finales de la década de tanto la selección se estaría reali- cendencia con respecto al promedio
1980, se han dado grandes avances zando de manera sesgada, nace en- de los padres (Ruales y col., 2007). En
en biología molecular, se pensó que tonces la necesidad de efectuar las el país lo que generalmente se hace es
las predicciones del mérito genético evaluaciones y estimar los paráme- cruzar animales de razas europeas es-
basadas en evaluación molecular tros genéticos en el área (país, región, pecializadas para carne, con animales
reemplazarían las metodologías etc.) en la cual se desea establecer un de razas adaptadas como los cebuinos
clásicas de evaluación genética, sin programa de mejora genética. o criollos, de manera tal que mediante
embargo ahora se sabe que se deben la complementariedad entre los dos
integrar las dos tecnologías. Modelo animal grupos de animales se obtenga una
progenie resistente a las condiciones
Características de la evaluación De acuerdo con lo propuesto por adversas que se presentan en trópico
Henderson el modelo animal no es bajo y que presenta buena capacidad
genética de animales a través uno solo, existen diferentes tipos de productiva (Fedegan, 2006).
de la metodología BLUP o MPLI modelo según la situación biológica De acuerdo con Fedegan (2006)
y estructura de los datos (Kennedy los cruzamientos selectivos o la pre-
Como se discutió previamente y col.,1988). Es así como se puede ferencia por una u otra raza pura,
la importancia de esta metodología, ver al modelo animal como un set deben obedecer a las exigencias de
que permite obtener los mejores pre- de diferentes modelos estadísticos los mercados más que a la tradición
dictores lineales insesgados del va- utilizados para la estimación del u otras consideraciones y este es
lor genético de un animal para una o mérito genético de los animales en un concepto que debe primar, por
varias características radica en que una población, dependiendo de la lo tanto en condiciones limitantes

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MEJORAMIENTO GENETICO

como las de trópico medio y bajo el como por ejemplo el desarrollado Wild en 1950 (Houghton y Turlington,
uso del cruzamiento, teniendo en por Odenya y col. (1992) donde se 1992), además de estas dos caracte-
cuenta el tipo de razas a emplear compararon los cambios en las pre- rísticas, al aplicar el ultrasonido en
para satisfacer el mercado, junto con dicciones genéticas al incluir en el mejoramiento genético se evalúan
un programa de apareamientos y modelo multirracial niveles séricos cantidad de grasa, (en porcentaje y
evaluación genética bien estableci- de algunos minerales, mediante una en unidades de peso), rendimiento en
dos, resultan de gran utilidad y se alianza entre Corpoica, la Universi- cortes minoritarios (en unidades de
hacen cada vez más necesarios. dad Nacional de Colombia y la Uni- peso y como porcentaje), el espesor de
Como se menciono previamen- versidad de la Florida se efectuaron grasa dorsal y del anca, el área del
te, Elzo (1983) generó el modelo trabajos de estimación de parámetros músculo Longissimus entre la do-
multirracial desde el punto de vista genéticos en los hatos multirraciales ceava y treceava costilla (área del ojo
teórico y además planteo estrategias Romosinuano-Cebú en 1998 (Elzo del lomo) y el puntaje de marmoreo,
para su implementación con datos a y col. 1998a) y San Martinero-Cebú características para las cuales se han
campo (Elzo, 2006). en 1999 (Elzo y col. 1999). Reciente- encontrado heredabilidades medias
Esta metodología permite obte- mente investigadores de Corpoica a altas (Wilson, 1992).
ner la predicción de valores gené- y las universidades de la Florida, de Otras características como por
ticos de animales en poblaciones Antioquia y de Córdoba, condujeron ejemplo la palatabilidad de la carne
multirraciales, de acuerdo con Elzo estudios sobre el efecto de la heteci- y la terneza de la misma medida
y Wakeman (1998) una población gozidad y efectos genéticos directos mediante Warner-Bratzler y peso
multirracial se define como aquella y maternos en rebaños multirraciales de la canal caliente y fría, han sido
en la cual se tienen animales puros Angus, Romosinuano, Cebú y Blanco estudiadas. Peacock y col. (1979) es-
y animales cruzados los cuales se Orejinegro (Vergara y col. 2009). tudiaron los efectos de grupo racial
aparean entre sí. En este tipo de y de heterosis en animales Angus,
poblaciones los efectos aditivos y no Características evaluadas Brahman, Charolais y sus cruces, en
aditivos son una importante fuente características de calidad de canal
de variación (Elzo y Wakeman, 1998), La mayoría de los trabajos des- (grado de calidad), peso de la canal y
en ese orden de ideas el valor gené- critos previamente se centran en producción de cortes minoristas, un
tico de un toro perteneciente a una características de crecimiento, por estudio similar fue conducido por
población multirracial depende de ejemplo en Brasil se evalúan pesos Bidner y col. (2002), quienes evalua-
estos dos tipos de efectos (Elzo, 1983, al nacimiento, destete, año, y ga- ron el efecto de 4 razas sintéticas (en
citado por Manrique y col., 1998), por nancias de peso pre y pos-destete cuya composición genética está presente
lo tanto en esta clase de evaluacio- (Fries y Ferraz, 2006). En cuanto a el Brahman) y la raza Angus, para
nes se estiman diferencias aditivas variables reproductivas se trabaja características de la canal, composi-
esperadas de progenie (DAEP) y en caracteres como edad al primer ción y palatabilidad de la carne. Elzo
diferencias no aditivas esperadas parto, intervalo entre partos y y col. (1998b), investigaron la varia-
de progenie (DNEP) y mediante perímetro escrotal (Fries y Ferraz, bilidad genética de 6 características
la suma de estos dos valores se 2006). Vargas y col. (1998), estimaron de canal (peso de la canal caliente,
obtienen diferencias multirraciales parámetros genéticos para el perí- área del ojo del lomo, espesor de grasa
esperadas de progenie (DMEP) metro escrotal y edad a la pubertad subcutánea en la doceava costilla, grasa
(Manrique y col., 1998), Manrique en novillas Brahman. De acuerdo pélvica, renal y del corazón, puntaje de
y col. (1997) demostraron como las con Houghton y Turlington (1992), marmoreo y fuerza de corte medida por
predicciones genéticas se alteran al debido a la migración de la indus- Warner-Bratzler) en una población
comparar evaluaciones multirra- tria ganadera hacia el concepto de multirracial Angus-Brahman.
ciales con evaluaciones genéticas mercado basado en el valor, los pro- La eficiencia en la utilización
que involucran solamente efectos ductores cada vez se muestran más del alimento se ha convertido en
genéticos aditivos. interesados en las características un componente esencial en los
Una gran utilidad de este mé- de canal ya que se dan cuenta de la sistemas de producción de carne y
todo de evaluación genética es que importancia que tiene la predicción últimamente se ha puesto particular
permite recomendar un semental de las características relacionadas atención al consumo residual de
en particular teniendo en cuenta el con la calidad de la misma y los alimento, el cual se calcula como la
grupo racial de la vacada en la cual rendimientos pos-sacrificio. diferencia entre el consumo real de
se piensa emplear como reproductor El ultrasonido es una técnica no alimento y el consumo esperado.
(Manrique, 1998).Desde la implemen- invasiva que permite determinar el Recientemente se llevó a cabo un es-
tación de esta metodología se han espesor de grasa y la cantidad de tudio en la Florida, Estados Unidos,
generado varios trabajos de aplica- músculo in vivo, el primer reporte el cual fue conducido por Elzo y col.
ción del modelo con datos a campo, de su utilización fue hecho por (2009), quienes estimaron los efectos

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MEJORAMIENTO GENETICO

■■El valor genético de un animal se expresa en las evaluaciones de bovinos para carne, como la diferencia esperada de progenie DEP.

de la composición racial sobre el con- comerciales y de investigación con el gías estadísticas y computacionales
sumo de alimento residual, además fin de obtener suficiente información que permitan realizar evaluaciones
de esta característica se estudiaron para la implementación de modelos genéticas en grandes conjuntos de
otras variables relacionadas como la apropiados para cada población datos involucrando la información
conversión alimenticia y variables multirracial. Gianola (2006) comenta proveniente de la genotipificación
inherentes al comportamiento de que se requiere la implementación de los individuos.
los animales: velocidad de salida y de diferentes tipos de modelos que La evaluación genética de ani-
puntaje en el brete. permitan una evaluación más ade- males se vuelve cada vez más sofis-
cuada para características en las que ticada y específica, los desarrollos
Perspectivas de las evaluaciones se cuente con grandes cantidades teóricos y computacionales permi-
genéticas en bovinos de datos genómicos, la selección ten el uso de modelos que describen
para resistencia a mastitis y datos mejor los fenómenos biológicos es-
En cuanto a las evaluaciones ge- cuantificados como conteos, ade- tudiados, como resultado se logran
néticas multirraciales Elzo (2006), co- más resalta la necesidad de crear e predicciones de valores genéticos
menta que se tiene enfrente un largo implementar software para aplicar y estimaciones de componentes de
camino hacia la implementación de estos modelos en evaluaciones ge- varianza cada vez más confiables.
sistemas multirraciales cuyo objetivo néticas nacionales. La emergente Para seguir avanzando se requiere
sea la predicción del producto del y poco costosa biotecnología de de cooperación entre la comunidad
apareamiento individual de ani- genotipificación para SNP ha traído científica y los productores y de la
males de diferentes razas o grupos un nuevo paradigma en la evalua- formación de investigadores en esta
raciales en términos de valores ge- ción genética basada en selección área del conocimiento.
néticos totales (aditivos + no aditivos), genómica o selección amplia del
también resalta la necesidad de una genoma (Legarra y Miztal, 2008), por Bibliografía disponible en gene-
estrecha colaboración entre sectores lo tanto se deben generar metodolo- ticabovina.fer@gmail.com

16 Genética Bovina Colombiana


GBC  Edición 16

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INVESTIGACION

Análisis de las tasas


de preñez en programas
de TE en Colombia
Las variables analizadas en las receptoras fueron los niveles de progesterona sérica,
tamaño del cuerpo lúteo y el grupo genético. Las variables analizadas en los embriones
fueron estadio de desarrollo, la calidad y si se transfería fresco o congelado.

18 Genética Bovina Colombiana


GBC  Edición 16

Rodríguez M, zoot. Carlos Giraldo sobre el endometrio que conlleva espacio perivitelino, (f) Presencia de
E, M, Sc. Susana Castañeda P, a la inactivación de la producción blastómeras sueltas, degeneradas, o
mvz. Tatiana Ruiz, Phd. Martha de prostaglandina F2α (PGF2α) detritus celular, (g) Presencia, nú-
Olivera, Sci. Agr. Universidad de de forma prematura evitando la mero y tamaño de vesículas (indican
Antioquia. Facultad de Ciencias formación cuerpos lúteos de corta degeneración), (h) Apariencia de la
Agrarias. Grupo Fisiología y duración. zona pelúcida.
Biotecnología Animal. Por otra parte, la raza (cruzamien- Los embriones de calidad 1
to), ejerce algún tipo de efecto con fueron congelados de forma lenta

E
n Colombia, la transferencia de respecto al tamaño del cuerpo lúteo en un congelador de nitrógeno
embriones ha cobrado gran im- (por el tamaño del folículo ovulatorio y líquido (Freeze Control®, Cryologic,
portancia en las últimas dos dé- el número de células de la granulosa), referencia CL2000) usando Ethylene
cadas, en procura de obtener animales lo cual puede estar ejerciendo un Glycol 1.5M (Vigro Ethilene Glycol
de alto valor genético, incrementando efecto positivo o negativo sobre las Freeze Plus®) y posteriormente
la progenie de vacas élite. tasas de concepción, o la raza estar a transferidos; los de calidad 2 y 3 se
Las tasas de preñez por transfe- su vez actuando directamente sobre transfirieron en fresco.
rencia de embriones, reportadas en las tasas de preñez, como lo reporta Medición de variables: El día
Colombia no superan el 50 %, com- Olson (1993). de la transferencia se determinó el
paradas con porcentajes de EEUU El objetivo del presente trabajo diámetro (mm) del cuerpo lúteo con
y Europa del 80%. Se presume que fue determinar si existe un efecto ultrasonografía transrectal (Aloka
las bajas tasas de preñez, cuando se sobre la tasa de preñez por parte del SSD–500V, transductor lineal 7.5 Mhz,
transfieren embriones de buena ca- tamaño del CL (diámetro en mm), la Japón). Se usaron solamente recepto-
lidad frescos o congelados, podrían concentración de progesterona cir- ras que tuviesen Cl > 14 mm. Inme-
estar relacionadas con la calidad del culante (ng/mm de sangre) y la raza de diatamente antes de la transferencia,
cuerpo lúteo (tamaño y concentración la receptora el día de la transferencia se tomó una muestra de sangre por
de progesterona), el grado de sincro- embrionaria. punción de la vena caudal media
nía y, la raza (o cruzamiento) de la (Becton Drive Vacutainer® FERUM,
receptora. Materiales y métodos NY, US) con el fin de determinar
Según Chagas e Silva, y col P4. El suero se separó por medio de
(2002), las concentraciones bajas Grupo genético de las recep- centrifugación y se congeló a -20ºC
de progesterona (P4) en plasma, al toras: Se evaluaron ciento setenta y hasta su procesamiento. La concen-
momento de la transferencia, son cuatro receptoras entre 2 y 6 años, tración de P4 fue determinada por
un reflejo de una función lútea con las siguientes conformaciones radioinmunoensayo (RIA).
subnormal, que puede estar influen- raciales: Brangus (n=20), Romo/ A los 60 días postransferen-
ciada por una asincronía debida Angus/Cebú (n=30), Cebú/Angus cia se determinó la gestación por
a la mala detección de calores y/o (n=6), Blanco orejinegro/Angus/ ecografía.
inadecuada sincronización de los Cebú (n=24), ¾Angus (n=5); Angus/ Análisis estadístico: Las va-
animales, o por folículos ovulatorios Cebú (n=59); Otros (n=30). riables determinadas fueron: con-
de menor tamaño del normal, lo que Lugar: Las receptoras se encon- centración de P 4 sérica (ng/ml),
produce un cuerpo lúteo de baja traban localizadas en la Hacienda tamaño del CL (diámetro en mm),
funcionalidad. Río Piedras (Jericó, Antioquia, Colom- tasas de preñez (%), la raza (grupo
Para el reconocimiento materno- bia), temperatura promedio de 25˚C, genético), calidad del embrión (1=
embrionario, el embrión debe en- a 750 msnm, zona de vida de Bosque Excelente; 2= Bueno; 3= Regular),
contrar un medio uterino apropiado, Húmedo Seco Tropical y en la Ha- estadío embrionario (4= Mórula
influido por la P4 lútea, ya que esti- cienda Cuba (Montelíbano, Córdoba, compacta; 5= Blastocisto tempra-
mula la producción de una variedad Colombia), temperatura promedio no; 6= Blastocisto; 7= Blastocisto
de secreciones endometriales tales de 28˚C, a 50 msnm, zona de vida compacto) (Cuadro 1). Se realizó un
como el MUC-1(mucin glycoprotein-1), Bosque Seco Tropical. análisis de regresión logística te-
lactógeno placentario, osteoponti- Clasificación y evaluación de niendo como variable dependiente
nas, necesarias para el adecuado los embriones: Los embriones el estado reproductivo del animal
desarrollo de los embriones. Por fueron calificados basándose en (vacía-preñada), siendo dicha va-
lo tanto, debe detenerse el proceso sus características morfológicas: (a) riable de tipo binario, de acuerdo
luteolítico mediante la expresión Forma del embrión, (b) Color y tex- con la siguiente ecuación:
de interferón-tau (int-τ) por parte tura de la masa celular, (c) Número Ln(p/q)= α0 + α1 (concentración
del embrión, evitando la muerte y grado de compactación de las blas- P4) + α2 (mm CL) + α3(calidad del
embrionaria temprana, o favore- tómeras, (d) Diferencia de tamaño embrión) + α4(estadío del embrión) +
ciendo la acción de la progesterona entre blastómeras, (e) Tamaño del α5(raza)

SANTACRUZ Editores 19
INVESTIGACION

■■Es cinco veces más probable que un animal quede preñado cuando se le transfiere un embrión de calidad excelente.

Donde: Posteriormente se realizó una restantes (n=123) transferidas con


Ln(p/q)= probabilidad de que el prueba de Tukey entre los estadíos embriones congelados de calidad
animal quede preñado embrionarios (mórula compacta, bla- 1. Se transfirieron embriones en
α0 = intercepto de la regresión. tocisto temprano, blastocisto compacto, estadío 4 (n=44) y estadío 5 (n=6) en
α1 = efecto de la concentración blastocisto expandido), tanto de los fresco y, en estadío 4 (n=42), estadío
sérica de progesterona (ng/ml ). embriones frescos como los con- 5 (n=38), estadío 6 (n=27) y estadío
α2 = efecto del tamaño del cuer- gelados, al igual que fue aplicada 7 (n=16) congelados. La tasa de pre-
po lúteo (mm). la misma prueba entre los tipos ñez total, teniendo en cuenta tanto
α3 = efecto de la calidad del em- de embrión (frescos y congelados), frescos como congelados, fue de
brión (excelente; bueno; regular). como se muestra en la tabla 2. 42% (73 de 174). La tasa de preñez
α4 = efecto del estadío del em- La relación de probabilidad o con embriones frescos (31%, 16 de
brión (mórula compacta, blastocisto grado de probabilidad de que las varia- 51) fue menor que con embriones
temprano, blastocisto, blastocisto bles independientes tengan un efecto congelados (46%, 57 de 123; Tabla
compacto). sobre la variable dependiente: esta- 1). Con respecto al estadío embrio-
α5 = efecto de la raza: Brangus do reproductivo del animal (vacía- nario, la tasa de preñez en general
(n=20), Romo/Angus/Cebú (n=30), preñada), también fue calculado fue mayor en los estadíos 5, 6 y 7,
Cebú/Angus (n=6), Blanco orejine- como el Odds Ratio (OR). oscilando alrededor del 50%.
gro/Angus/Cebú (n=24), ¾Angus El análisis estadístico fue realiza- Se realizó una correlación (no mos-
(n=5); Angus/Cebú (n=59); Otros do en el programa SAS versión 9.1. trada) entre todas las variables inde-
(n=30). pendientes (concentración de P4 sérica
También se determinó la media, Resultados (ng/ml), tamaño del CL (diámetro en
desviación estándar y coeficiente de mm), la raza (grupo genético), calidad
variación a todos los datos de las dos Se usaron 174 receptoras, de las del embrión, estadío embrionario,
variables cuantitativas existentes, cuales (n=51) fueron transferidas para determinar la existencia de un
tamaño del cuerpo lúteo (mm) y con embriones frescos, (n=46) con efecto de colinealidad entre dichas
concentración de progesterona (ng/ embriones calidad 2 (n= 5) y con em- variables y así de este modo evitar
ml de sangre). briones de calidad 3; las receptoras interferencias dentro del modelo

20 Genética Bovina Colombiana


GBC  Edición 16

SANTACRUZ Editores 21
INVESTIGACION

■■Los embriones de calidad 1 fueron congelados de forma lenta en un congelador de nitrógeno líquido y posteriormente transferidos; los de
calidad 2 y 3 se transfirieron en fresco.

estadístico por dicho efecto. No se Con respecto al Odd Ratio (OR) bles en forma independiente, sin
halló correlación alguna. , las variables independientes que embargo la calidad del embrión
La media para los valores del obtuvieron los valores más elevados y el diámetro del cuerpo lúteo se
diámetro del CL (mm) fue de 19.6 fueron las calidades de embrión destacan sobre las otras variables
± 1.8 mm con un coeficiente de Excelente (Calidad 1= Congelado, OR= con un P= 0.1778 y 0.1755 respec-
variación bajo (9%), mientras que 5.100) y Bueno (Calidad 2 = Frescos , tivamente (Tabla 3), inclusive, ni la
la media de la P4 fue de 3.6 ± 2.6 ng/ OR= 4.180), seguidos finalmente por concentración de P4 en este estudio
ml de sangre con un coeficiente de uno de los grupos genéticos (TC = mostró ser determinante para el
variación bastante elevado (74%). ¾Angus, OD =2.945). establecimiento de la preñez en las
No se halló diferencia signifi- receptoras, lo cual va en contravía
cativa entre los diferentes estadíos Discusión de numerosos estudios, que repor-
embrionarios (Mórula compacta; tan la importancia de la secreción
Blastocisto temprano; Blastocisto La preñez de las receptoras no de P4 postovulatoria proveniente de
compacto; Blastocisto expandido) al depende de ninguna de las varia- un cuerpo lúteo en desarrollo sobre
igual que tampoco entre el tipo de
embrión (Frescos Vs. Congelados)
de acuerdo a la prueba de Tukey
realizada. (Tabla 2).
Como se aprecia en la tabla 3,
ninguna de las variables indepen-
dientes fue significativa (P≤0.05)
con respecto al estado reproductivo
de los animales (Preñada-Vacía),
aunque fue mayor con los embriones
congelados (Calidad 1, P= 0.1778) que
con los embriones transferidos en
fresco (Calidades 2 y 3, P= 0.2597 ).

22 Genética Bovina Colombiana


GBC  Edición 16

SANTACRUZ Editores 23
INVESTIGACION

el resultado de una preñez tem- tiva, por ende, dicha variable no está la raza, específicamente a través del
prana. De hecho, la concentración ejerciendo algún tipo de efecto sobre grupo genético ¾Angus (TC), el cual
de progesterona al momento de la la tasa de preñez. indica que es 2, 945 tres veces más
transferencia es una de las variables De todos modos, la existencia probable que una receptora quede
consideradas como determinantes de un umbral en los niveles de preñada cuando su conformación
para que se dé el establecimiento de progesterona para evitar que se dé racial es de este tipo, de hecho Olson
la preñez, como lo reporta Chagas e la muerte embrionaria es contro- y col (1993), en su trabajo Rendi-
Silva, donde bajas concentraciones versial, ya que algunos estudios miento Reproductivo y Materno de
de P 4 posterior a la ovulación o reportan preñeces en receptoras con Tres Tipos de Cruces (Rotacional,
un retraso en el incremento de la concentraciones de P4 sérica <1 ng/ Tres Razas e Inter se) de Vacas en la
P4 fueron asociadas con un pobre ml al momento de la transferencia, Florida, utilizando animales Angus,
desarrollo embrionario y posterior y tal es el caso del presente estudio. Brahman y Charolais reportó que de
sobrevivencia de los mismos, de Además, valores de progesterona acuerdo a la conformación racial que
igual manera, dicho autor postula bajos al momento de la transferen- se tenga se podría aumentar o dis-
como punto de partida la existencia cia podrían estar reflejando no solo minuir la tasa de preñez y algunas
de una relación entre una concentra- una función lútea anormal sino otras características.
ción de P4 por encima de lo normal también inexactitud en la detección En conclusión, hemos encontra-
al día de la transferencia y la tasa de de calores. do que de todas las variables inde-
preñez como de gran importancia Por otra parte, es cinco veces pendientes utilizadas en nuestro
para la selección de receptoras. Sin más probable que un animal quede estudio, las más determinantes para
embargo, los niveles de P4 séricos o preñado cuando se le transfiere un que se dé el suceso de la preñez son
en plasma al momento de la trans- embrión de calidad excelente, de la calidad del embrión, partiendo
ferencia de embriones fueron rela- igual forma sucede con un embrión de un embrión calidad excelente
cionados hasta cierto punto con la de calidad buena, es cuatro veces (Congelados) y pasando a uno de ca-
tasa de preñez en algunos estudios, más probable que una hembra lidad buena (Frescos), al igual que la
mientras que otros no encontraron quede preñada con este tipo de raza, pero en menor grado, a través
relación alguna, como es el caso del embrión, a que ocurra el evento con del tipo de grupo genético estaría
presente trabajo, donde se obtuvo alguna de las demás variables. Por jugando un papel importante en
que la P4 (p= 0.25) no fue significa- otra parte, se evidencia el efecto de dicho suceso.

24 Genética Bovina Colombiana


GBC  Edición 16

SANTACRUZ Editores 25
FISIOLOGIA

Aspectos
relacionados a la dinámica
folicular de la vaca
26 Genética Bovina Colombiana
GBC  Edición 15
16

Los mecanismos por los


cuales se da la selección
folicular no están aún
completamente claros,
pero se conoce que
involucra complejas
relaciones entre
hormonas, péptidos y
factores de crecimiento,
entre otros.

Henry Grajales L.1; Néstor Tovío L.2


Grupo de Investigación en
1, 2,

Biología de la Adaptación de los


Animales al Trópico, Facultad
de Medicina Veterinaria y de
Zootecnia, Universidad Nacional
de Colombia sede Bogotá.
1
Zootecnista, MSc., PhD.
Profesor Asociado DCPA, FMVZ,
UNAL sede Bogotá; 2 Zootecnista,
MSc. (c)., Investigador vinculado
DCPA, FMVZ, UNAL sede
Bogotá. nitoviol@unal.edu.co;
hagrajalesl@ual.edu.co

G
racias al uso de la ultraso-
nografía como herramienta
efectiva para realizar el se-
guimiento y la evaluación de las
estructuras a nivel ovárico, diversos
investigadores han confirmado la
presencia de ondas y patrones de
crecimiento folicular en el ovario.
Una onda de desarrollo folicular
podría definirse como el desarrollo
armónico y simultaneo de varios fo-
lículos ováricos antrales pequeños,
de los cuales debido a mecanismos
moleculares se seleccionará el folí-
culo ovulatorio.
De acuerdo a lo anterior, se ha
verificado que en cada ciclo estral
el número de ondas de crecimiento
folicular varía de 1 a 4, presentán-
dose en la mayoría de las vacas 2 a
3 ondas. En un ciclo con 2 de estas
ondas, la maduración del segundo
folículo ovárico dominante coincide
■■Foto Jaime Ramírez, Hacienda Bruselas GX3. con la regresión del cuerpo lúteo y

SANTACRUZ Editores 27
FISIOLOGIA

■■El 80% de las vacas en lactancias tempranas tienen un balance de energía negativo, pierden peso, disminuyen la producción láctea y deprimen
la función reproductiva. Foto: María Teresa Barreneche, cortesía Alianza Trascender. Ganadería La Giralda.

culmina con la ovulación folicular. fluido folicular, especialmente fac- El Control endocrino de la ma-
Cuando se presentan 3 y 4 ondas de tores de crecimiento, tales como el duración folicular se basa en las
crecimiento folicular se evidencia Factor Insulínico de Crecimiento células de la granulosa y de la teca.
un ciclo estral de mayor duración, (IGF) y sus proteínas transportado- Si los folículos alcanzan su fase de
debido a que se posterga el celo al ras, igualmente hormonas como la desarrollo reactivo a las gonadotro-
no ovular el segundo o tercer folí- inhibina y activina, que juegan un pinas, las células de la granulosa
culo dominante, en consecuencia papel importante en la regulación presentan receptores para FSH y
el tercero o cuarto folículo requiere del crecimiento, diferenciación y LH, y las células de la teca presentan
de un tiempo para madurar y poder función folicular. La variación en- receptores para LH. Esta última al
ovular. tre cualquiera de estas sustancias unirse a los receptores tecales esti-
Los mecanismos por los cuales determinara cual será el folículo mula la síntesis de androsteniedio-
se da la selección folicular no están dominante en cada onda de creci- na a partir de la progesterona y esta
aún completamente claros, pero miento folicular. a partir del colesterol, fenómeno en
se conoce que involucra complejas El IGF actúa en la diferenciación, el cual intervienen principalmente
relaciones entre hormonas, pépti- crecimiento y proliferación de las las enzimas P450 ssc y 3 βHSD. Los
dos y factores de crecimiento entre células foliculares, siendo la más andrógenos sintetizados pasan a
otros. Estos factores probablemente importante función el sinergismo través de la membrana basal hacia
interactúan constantemente, así el con las gonadotropinas para cum- las células de la granulosa en donde
balance entre la acción estimuladora plir variadas funciones, entre ellas son convertidos en estrógenos, esto
e inhibidora dentro del folículo en la mitogénesis y la esteroidogénesis. debido a la aromatización causada
sus diferentes estadios determinará Este sinergismo es logrado gracias a por las enzimas P450 arom y P450
el desarrollo y ovulación o la atresia la habilidad del IGF para incremen- 17 – α.
folicular. tar el número de receptores para las El número cada vez mayor de
gonadotropínas y el incremento de células de la granulosa provoca la
Factores que controlan el receptores de los segundos mensa- síntesis continuamente creciente
desarrollo folicular jeros. Al mismo tiempo las gonado- de estrógenos y la secreción del
tropinas incrementan la expresión folículo en fase de maduración. Los
Factores endocrinos de receptores para IGF, igualmente estrógenos segregados tienen dos
Se ha descrito la existencia de incrementan su síntesis en las célu- efectos muy importantes a nivel
factores que se encuentran en el las de la granulosa. folicular e hipofisiario. A nivel foli-

28 Genética Bovina Colombiana


GBC  Edición 16

cular inducen la invasión de vasos


sanguíneos (angiogénesis); de esta
manera el folículo seleccionado
recibe más cantidad de sangre que
el resto de folículos de su oleada
de desarrollo. A nivel de hipófi-
sis, la concentración creciente de
estrógenos junto con el aumento
simultáneo de inhibina (segregada
por las células de la granulosa) im-
pide que siga incrementándose la
secreción de FSH (feed back negativo).
Esto mejora las probabilidades de
desarrollo del folículo que llegará
a ser dominante frente a los otros
folículos competidores de la cohor-
te, ejerciendo dominancia pasiva
sobre ellos, impidiendo que a sus
receptores se una la FSH cada vez
más escasa, gracias a su mejor riego del pico de LH, esto acompañado relacionado con el inicio de la lutei-
sanguíneo y a su número mucho con descenso en la concentración de nización de las células tecales y de
mayor de receptores. androstenediona y de 17 β estradiol la granulosa.
La expresión de enzimas este- y con el incremento en la concentra- Factores exógenos
roidogénicas y de los genes recepto- ción de P4 (progesterona) en el fluido Existen factores que aunque son
res de gonadotropinas desciende en folicular. El aumento de P4 posterior independientes de la función ovárica
los folículos preovulatorios después del pico preovulatorio de LH estaría pueden llegar a alterar de manera di-

SANTACRUZ Editores 29
FISIOLOGIA

recta su normal funcionamiento. La


nutrición juega un papel importante
en la reproducción. Se establece que
el 80% de las vacas en lactancias tem-
pranas tienen un balance de energía
negativo, pierden peso, disminuyen
la producción láctea y deprimen la
función reproductiva.
Las vacas con severo estrés nu-
tricional fallan en la ovulación del
primer folículo dominante, posible-
mente debido a que la frecuencia
en el pulso de LH es reducida para
estimular la suficiente secreción de
estrógenos por parte del folículo,
por lo cual no se induce el pico pre-
ovulatorio de LH.
En novillas de carne se evidencia
que la restricción nutricional aguda
actúa tanto a nivel ovárico como del
eje hipotalámico – hipofisiario, dis-
minuyendo la tasa de crecimiento
del folículo dominante que parece
estar suprimida por la declinación
en la concentración de IGF.
La condición corporal (CC) es un
factor el cual se puede ver afectado
ya sea por condiciones del periodo
posparto, lactancia, estrés calórico, ■■El conocimiento de la dinámica folicular ha permitido el desarrollo de procesos como protocolos
nutrición, patológias etc. Las vacas de sincronización, superovulación, transferencia de embriones, inseminación artificial, etc.
que sufren pérdida de CC desde
el parto hasta el servicio tienen los El hipotálamo convierte las seña- desarrollo. Los niveles circulantes
índices de concepción más bajos; en les de la leptina en respuestas neuro- de FSH antes del reclutamiento de
relación con lo anterior, se ha podido nales sobre el consumo de alimento. un grupo de folículos aumentan
apreciar que el balance de energía Parece ser que la leptina inhibe la transitoriamente y esto se carac-
está directamente relacionado con biosíntesis del neupeptido Y (NPY) teriza por la expresión de mRNA
la CC, y esta a su vez con el número el cual es un neurotransmisor que se (RNA mensajero) que codifica para
de folículos pequeños presentes en encuentra en el núcleo arquato y que la elaboración de las enzimas aro-
el ovario, siendo mayor en número afecta la secreción de las hormonas matasas P450 arom y P50 scc en las
en vacas con condición corporal hipofisiarias especialmente la LH. células foliculares.
entre 3 y 5. De acuerdo a esto, se El desarrollo folicular desenca-
ha determinado que las vacas que Fases de la dinámica folicular dena el inicio de la primera onda
mantienen el peso y la CC, poseen de crecimiento folicular, estimulada
mayor concentración de LH basal Durante el crecimiento de una por el segundo pico de FSH el cual
y gran liberación de esta hormona onda folicular se podrían describir ocurre posterior a la ovulación.
inducida por la GnRH. claramente cuatro fases: Selección
La leptina, una hormona que Reclutamiento Durante los días 2, 3 y 4 del ciclo
recientemente se ha propuesto Durante el ciclo estral un grupo estral, se detectan por medio de ul-
como modulador del eje hipota- de 3 a 6 folículos (de 2 a 4 mm.) trasonografía varios folículos de un
lámico – hipofisiario, es secretada comienzan a desarrollarse a partir tamaño de 6 a 9 mm., con lo cual la
principalmente por los adipositos de una cohorte de folículos antra- fase selección comienza a ejercerse.
y su concentración plamática se re- les pequeños que maduran bajo A medida que los folículos madu-
laciona con la CC. Se ha encontrado un aporte adecuado de hormonas ran, comienzan a depender de la
que la concentración de la leptina gonadotropicas, especialmente de LH (hormona luteinizante), lo cual
en plasma disminuye durante el FSH (hormona foliculoestimulante), puede ser parte del mecanismo de
balance energético negativo. lo cual permite que avancen en su selección del folículo dominante.

30 Genética Bovina Colombiana


GBC  Edición 15
16

Los cambios en el patrón de ex- alcanza un tamaño marcadamente


presión del mRNA que codifica para superior a los demás (diámetro ma-
los receptores de la gonadotropinas yor a 10 mm) y es responsable de la
(FSH y LH) y enzimas que actúan secreción de estradiol.
con las hormonas esteroidales Para explicar la causa por la cual
dentro de las células foliculares, el folículo dominante de las prime-
parecen estar muy ligados a las mo- ras ondas (1 de 2 ondas, 2 de 3 ondas
dificaciones en las concentraciones y 3 de 4 ondas) sufre regresión, se
sanguíneas de gonadotropinas. ha propuesto que se debería a una
Dominancia disminución en la frecuencia de los
La fase de dominancia, es el pulsos de LH debido a los altos nive-
proceso por el cual el folículo selec- les de P4 (progesterona) circulante.
cionado ejerce un efecto inhibitorio Ello provocaría una menor síntesis
sobre el reclutamiento de una nueva de andrógenos y en consecuencia
cohorte de folículos. Los estímu- de estradiol.
los hormonales se dirigen hacia Atresia
el folículo dominante con lo cual La gran mayoría de los folículos
aumenta su irrigación sanguínea presentes al nacimiento degeneran
determinando de esta manera su a través del proceso conocido como
maduración, lo cual se relaciona atresia, la cual ha sido descrita para
directamente con la síntesis de diversas especies mamíferas. Esta
receptores para FSH y LH en el fo- fase consiste en la desaparición del
lículo, así como la elaboración de las folículo dominante el cual no llega
aromatasas. El folículo dominante a ser ovulado.

SANTACRUZ Editores 31
FISIOLOGIA

■■Quisqueya 019 E. Veronica 68/73. Ganadería Hacienda Del Río S.A. Foto: María Teresa Barreneche, cortesía Alianza Trascender.

Durante este periodo se destacan etapa, entre ellos, el de la glico- la actividad de la enzima aromatasa
algunos cambios morfológicos e his- proteína -2-sulfatada (TRPM-2), el y en consecuencia una menor sínte-
tológicos, como son: núcleos picnó- de una aspartil endopeptidasa, la sis de estrógenos.
ticos y fragmentación nuclear en las catepsina-D y el del receptor para
células de la granulosa, desprendi- la angiotensina II. Además, en la Comentarios finales
miento de las células de la granulosa atresia participan enzimas lisoso-
por la pérdida de la matriz interce- males (fosfatasa ácida y glucosami- El modelo que explica la dinámi-
lular, desprendimiento del complejo nidasa) con actividad anti-tripsina, ca de desarrollo folicular es eviden-
cumulus-ovocito y en algunos casos las involucradas en la remodelación temente complejo; este determina la
hipertrofia de las células de la teca. tisular como colagenasas, gelatina- interacción de una variedad de fac-
Además, ocurren procesos bioquí- sas, Pz-peptidasa y el activador del tores que conducen a su desarrollo
micos como la reducción en síntesis plasminógeno entre otras. (nivel de subordinación o dominancia)
y consecuentemente cantidad de Se sugiere que la atresia del y/o atresia. El conocimiento de los
ADN en células de la granulosa, folículo dominante estaría relacio- fenómenos involucrados durante
pérdida de uniones comunicantes, nada con una menor actividad de este proceso ha sido determinante
pérdida de receptores de gonado- las aromatasas en las células de la en el desarrollo de los métodos para
tropinas, así como la disminución granulosa y no por falta de sustrato el manejo y control reproductivo,
en la síntesis y expresión de mRNA (andrógenos). Igualmente se puede como lo son los protocolos de sincro-
para la expresión de aromatasas. El determinar que existe un aumento nización del celo, superovulación,
conocimiento en profundidad de de IGFBPs (Proteína fijadora del programas de transferencia de
todos estos factores ha servido para Factor de Crecimiento similar a la embriones, inseminación artificial,
evidenciar que la apoptosis es el tipo Insulina IGF) con una consecuente entre otros.
de muerte preponderante durante la disminución en la disponibilidad de
atresia folicular. IGF – I y II (Factor de Crecimiento Bibliografía disponible en: ge-
Es importante resaltar la expre- similar a la Insulina tipo I y II) lo neticabovina.fer@gmail - nitoviol@
sión de otros genes durante esta cual provocaría una disminución de unal.edu.co; hagrajalesl@ual.edu.co

32 Genética Bovina Colombiana


GBC  Edición 15
16

SANTACRUZ Editores 33
MEJORAMIENTO GENETICO

El nuevo índice de
rendimiento total (TPI)
Nuestra base genética se actualiza cada cinco años, lo cual hace de este instante un
momento excelente para revisar las mejoras del pasado e identificar aquellas áreas
donde un mayor énfasis pueda ser necesario.

Tom Lawlor, Director de énfasis a las características de salud mejorar aun más las características
Investigación, Asociación y fertilidad. Así que estamos com- de salud y fertilidad. La oportuni-
Holstein USA. placidos de ver algunas mejoras dad de mejorar estas características
en ellas y, en particular, a una de- de baja heredabilidad es mayor

L
a población Holstein de EEUU tención del descenso a largo plazo ahora que en el pasado debido a
ha realizado otra vez un muy en fertilidad (DPR). Sin embargo, la introducción de información
buen progreso genético para todavía tenemos la necesidad de genómica.
producción y conformación. Con
las mejoras más recientes, añadidas
a una ya sólida fundación genética,
tenemos una raza con una gran
voluntad de dar leche y la confor-
mación para sostener su rigurosa
demanda.
En años recientes, hemos diri-
gido nuestros esfuerzos a algunas
áreas de interés poniéndole más

34 Genética Bovina Colombiana


GBC  Edición 14

Reconociendo las necesidades,


fortalezas y oportunidades que
tenemos por delante, la Asociación
Holstein de EEUU ha modificado
ligeramente nuestra formula del
TPI. El cambio conduce a un incre-
mento en el énfasis puesto a vida
productiva y a tasa de preñez en
hijas; mantiene el énfasis actual en
ubres y patas y pezuñas; aminora
el incremento en tamaño corporal y
reduce ligeramente el énfasis en pro-
ducción. Estos cambios coinciden
con las opiniones expresadas por los
productores lecheros comerciales
a través de los Estados Unidos y
en el extranjero. Por consiguiente,
ayudando a asegurar que el TPI
continúa siendo el índice preferido
alrededor del mundo.
La Tasa de Preñez en Hijas
(DPR) mide el porcentaje de vacas
elegibles que se preñan durante un
período de 21 días. La documenta-
ción comienza 50 días después de
parir, proporcionándonos así una
buena medida de la habilidad de
la vaca de retornar a su disposición
para ser servida y su habilidad
de concebir. Vida Productiva (PL)
mide el número de meses-en-leche
en una manera que imita las curvas
de lactación. Por ejemplo, los meses
alrededor del pico de producción,
temprano en la lactación, reciben
más crédito que los meses al final
de la lactación; una tercera lactación
recibe una ponderación más alta que
una primera lactación, etc. La carac-
terística PL es una buena medida de
la habilidad de la vaca de preñarse
rutinariamente, de que tiene buena
conformación para permanecer libre
de problemas y de producir a un
nivel aceptable.

Concurrencia entre índices


El Departamento de Agricultura
de los EEUU (USDA) también reali-

SANTACRUZ Editores 35
MEJORAMIENTO GENETICO

zó un cambio a su fórmula de Mérito


Neto $ (NM$), y su implementación
tuvo lugar en enero 2010. Ellos des-
criben sus cambios explicando que
pondrán una menor ponderación
a los componentes de producción,
conteo de células somáticas y a
habilidad de parto; y mayor énfasis
a vida productiva, tasa de preñez anteriores y los nuevos índices. Los anteriores y los nuevos presentan
en hijas y tamaño corporal (favore- índices anteriores del TPI y NM$ una correlación de 0.97 y 0.98 para
ciendo a las vacas más pequeñas). tienen una correlación moderada- TPI y NM$, respectivamente.
Coordinar los cambios a las fórmu- mente alta de 0.85. Si no se efectua-
las con el cambio de la base genética ran cambios al TPI, esa correlación Análisis de los cambios a la
ayuda los esfuerzos educacionales caería de 0.85 a 0.78. Los cambios
de la industria lechera y minimiza implementados por los nuevos fórmula en los promedios de
las molestias. Aunque los dos mayo- índices del TPI y NM$ son simi- los 100 Mejores Toros
res índices de selección de Estados lares en naturaleza, manteniendo
Unidos, TPI y NM$, no necesitan nuestra correlación moderadamente Debajo encontrarán una tabla con
estar en completo acuerdo, existen alta (0.88). También debe notarse el valor promedio de los 100 Mejores
beneficios en que ambos ranquean a que los cambios efectuados por la Toros utilizando los cuatro índices.
los animales similarmente. Asociación Holstein y el USDA no Para ser considerado, un toro debe
A continuación encontrarán deben causar mucha confusión a tener una confiabilidad en EEUU de
las correlaciones para los índices los productores, ya que los índices por lo menos 85% para producción

36 Genética Bovina Colombiana


GBC  Edición 14

y tipo. La nueva fórmula del TPI a. El nuevo TPI enfatizará MÁS


cumple varias de sus metas. producción que el nuevo NM$.
1. Gran mejoramiento en las ca- b. La nueva fórmula del TPI re-
racterísticas de salud y fertilidad. sulta en componentes ligeramente
a. La nueva fórmula del TPI es más altos que la fórmula anterior
superior a las dos fórmulas anterio- del TPI.
res del TPI y NM$. La nueva fórmula del TPI cumple
2. La nueva fórmula del TPI varias metas:
continúa identificando superior • Las características de salud y
conformación. fertilidad son mejoradas en com-
a. Tipo general (PTAT), Com- paración al TPI anterior.
puesto de Ubre y Compuesto de Pa- • Los valores de producción del
tas y Pezuñas son mucho más altos nuevo TPI son mayores que los
con el nuevo TPI que con cualquiera del nuevo índice NM$.
de las dos fórmulas de NM$. • Las características de tipo de los
b. El incremento en estatura se mejores animales ranqueados
dará a un ritmo más lento con la con la nueva fórmula del TPI su-
nueva fórmula del TPI que con la peran altamente a los de NM$.
fórmula anterior. La nueva y mejorada fórmula
3. Aunque hay un reducido én- del TPI asistirá a los criadores a
fasis en producción, podemos aun identificar animales superiores con
esperar un crecimiento continuo en la correcta combinación de alta
las características de producción a producción, buena conformación y
través del tiempo. deseable salud y fertilidad.

SANTACRUZ Editores 37
SANIDAD

La FPA se realizará
a nivel nacional
exclusivamente en
la red de laboratorios
de diagnóstico
veterinario del ICA.

E
l Instituto Colombiano Agro-
pecuario, ICA, replanteó el
proyecto de erradicación de
la brucelosis bovina, una enferme-
dad que pone en riesgo la sanidad
pecuaria y la salud pública, cuya
presencia reduce el número de
terneros por año en 350.000 aproxi-
madamente, teniendo en cuenta el
porcentaje de incidencia.
Esta decisión va acompañada
del compromiso de implementar
nuevas técnicas diagnósticas que
ofrezcan mayor agilidad y economía
para el productor.  Por este motivo,
mediante resolución 4166 de 2009
el ICA ordenó que a partir del 1° de
abril del 2010 iniciará la utilización
de la prueba de Fluorescencia Pola-
rizada (FPA) para el diagnóstico de
la brucelosis, la cual es una técnica
que toma sólo 10 minutos para ob-
tener resultados y está autorizada
para el comercio internacional de
animales y subproductos según  la
Organización Mundial de Sanidad
Animal, OIE.
La prueba de Fluorescencia Pola-
rizada es un complemento adicional
a las ya existentes en el país para el
diagnóstico de brucelosis, es una
técnica más sencilla y rápida de

Aprobada prueba
realizar y con un costo menor con
relación a las utilizadas hasta el
momento como la ELISA indirecta
y ELISA competitiva.

FPA para control


Con esta prueba se disminuirá
de manera significativa el tiempo
para el diagnóstico de la condición
sanitaria de los hatos y por ende

de Brucelosis
la declaratoria de zonas libres de
brucelosis, las cuales se defini-
rán de manera conjunta con las
gobernaciones.

38 Genética Bovina Colombiana


GBC  Edición 16

El ICA convocará a los goberna- nacional exclusivamente en la red heces, descargas vaginales, orina,
dores, Secretarios de Agricultura y de laboratorios de diagnóstico vete- fetos abortados, placentas y terne-
comités de ganaderos a suscribir un rinario del ICA. ros aparentemente sanos de vacas
convenio en el que se asignen recur- infectadas.
sos para la compra de los reactivos García Rovira primera zona Esta enfermedad afecta a bo-
que permitan adelantar los estudios libre de brucelosis vinos, en especial los dedicados a
que   apuntan a declarar la ganade- la producción lechera, porcinos,
ría del país libre de brucelosis. El ejemplo más claro de los avan- equinos, caprinos, ovinos; esporádi-
Ante esta iniciativa el ICA fir- ces que se pueden obtener trabajan- camente caninos, búfalos, camellos,
mó un convenio con el Comité de do bajo el concepto de zonas libres ratas del desierto, liebre, zorro y
Ganaderos del Tolima y la Empresa de brucelosis es el de la Provincia de mamíferos marinos, entre otros. 
AngloGold Ashanti de Colombia, García Rovira en el departamento La brucelosis es de curso crónico
con el que se dio inicio al trabajo de de Santander, en donde 4.949 ga- y se disemina fácilmente debido al
certificación del Cañón de Anaime naderos que se han beneficiado al contacto de los animales sometidos
como zona libre de brucelosis y tener la oportunidad de ampliar a concentración permanente en las
tuberculosis bovina, a través del los mercados nacionales e interna- explotaciones intensivas; afecta
cual se realizarán pruebas diagnós- cionales para la comercialización de comúnmente a los trabajadores de
ticas de brucelosis y tuberculosis a sus productos, especialmente carne mataderos y de las fincas, consti-
310 ganaderías con una población y leche. tuyéndose en una enfermedad que
aproximada de 6.500 bovinos y  afecta la salud pública.  La enferme-
con niveles de producción diaria de Qué es la brucelosis dad también se puede transmitir por
6.000 litros de leche así como deriva- el consumo de leche cruda produci-
dos lácteos que son comercializados La brucelosis o aborto infeccioso da por vacas enfermas.
en el departamento.      es producida por la bacteria Brucella Una ganadería adquiere la bru-
  Por ser una prueba confirma- abortus, microorganismo que puede celosis al ingresar animales infec-
toria la FPA se realizará a nivel ser eliminado en la leche, en las tados.  El principal síntoma de la

SANTACRUZ Editores 39
SANIDAD

■■La prueba FPA será aplicada en bovinos, bufalinos, caprinos, equinos, ovinos y porcinos.

brucelosis es el aborto, aunque a esa reducción teniendo en cuenta que conocer la condición de la población
veces no se produce, ocasiona el en ese año la positividad en predios en el predio.
nacimiento de teneros débiles o fue de 25% y en bovinos de 6.5%. Adicionalmente dentro de este
muertos. proceso se deben identificar los
Datos de interés animales confirmandos como po-
Situación de la brucelosis sitivos a brucelosis; implementar
en Colombia El proceso de certificación de medidas de desinfección; restringir
zonas libres involucra una serie la entrada de personas; usar semen
Los resultados de los diagnósticos de acciones dentro de las cuales se certificado libre de enfermedades
serológicos de los últimos años mues- encuentra el saneamiento de hatos y procedentes de toros serológica-
tran una disminución en la proporción que involucra: no ingresar ni sacar mente negativos; eliminar los ani-
de bovinos  y predios positivos a la animales; aislar los animales positi- males brucelósicos y revacunar las
enfermedad, arrojando para el año vos y los que tengan cuadro clínico hembras a los 15 meses de edad y las
2008 una positividad del 3.8% en bo- compatible con la brucelosis; tomar hembras adultas que resulten nega-
vinos y 17.25% en predios. Estas cifras pruebas serológicas y remitirlas  al la- tivas a las pruebas serológicas con la
comparadas con las de 2.002 dejan ver boratorio autorizado por el ICA para vacuna, entre otras medidas.

40 Genética Bovina Colombiana


GBC  Edición 16

SANTACRUZ Editores 41
BIOTECNOLOGIA

■■Foto Jaime Ramírez, cortesía Ganadería Santa Helena.

42 Genética Bovina Colombiana


GBC  Edición 16

Transferencia
nuclear:
“Clonación”
Permite la producción de “copias” de otros animales
de alta productividad, promoviendo el mejoramiento
genético por medio del “in vitro” en un corto plazo.

*Julio Cesar Olaya Oyuela, DMV,


Gerente Técnico Embriogen S.A.
**Wilson Pardini Saliba, DMV,
Director Científico Cenatte Embrioes (Brasil)
***Lino Andres Oyuela Echavarria, DMV.
Director Científico Embriogen S.A.

SANTACRUZ Editores 43
BIOTECNOLOGIA

E
n lo concerniente a las activi- un pedazo pequeño de piel que se guardaron el potencial llevar el de-
dades de producción pecuaria quita del animal. Se cultivan estas sarrollo del clon a término, así mis-
el uso de biotecnologías ha células para más adelante ser conge- mo demostró que células totalmente
promovido el aumento de la pro- ladas de modo que haga posible la diferenciadas tenían el mismo po-
ductividad y la disminución de los producción de clones, creándose así tencial abriéndose la posibilidad
costos de producción. En el campo una póliza de seguro de los mejores para ser usadas para la clonación.
de la reproducción animal, ha de- animales que podrían asegurar la Esta hipótesis fue confirmada por
mostrado ser de importancia básica diversidad genética de una raza; Wilmut (1997) con el nacimiento de
para el aumento de la eficiencia en es decir, se crea un banco de líneas Dolly, clon proveniente del núcleo
los rebaños. Actualmente, aún en celulares congeladas que garantizan de una célula de tejido mamario de
el área de la reproducción animal, que la diversidad será mantenida en un animal adulto.
la transferencia nuclear, es una téc- el caso de que la población se torne
nica que despierta un gran interés más consanguínea. Cultivo primario de células
de los ganaderos de todo el mundo, La transferencia nuclear fue pro- somáticas “banco genético”
debido a que permite la producción puesta inicialmente por Spermann
de “copias” de otros animales de (1938) para determinar si la cromati- Para el procedimiento de la trans-
alta productividad, promoviendo na sufría algún tipo de modificación ferencia nuclear o de la clonación es
el mejoramiento genético por medio durante la diferenciación celular. necesaria, la colecta, proceso, culti-
del “in vitro” en un corto plazo; este Briges y King (1952) realizaron con vo y congelación del material ge-
mejoramiento puede ser potencia- éxito con la primera transferencia nético a través del cultivo primario
lizando con el uso de la genética nuclear en anfibios. Estos experi- de células somáticas. Estas células
molecular, que usando marcadores mentos han contribuido en el escla- contienen todo el material genético
genéticos puede identificar anima- recimiento de los fundamentos de la (DNA) del animal que será clonado
les de alta productividad en la fase técnica. En mamíferos los primeros y después de que estén congeladas
embrionaria. reportes de transferencia nuclear constituirán un banco genético para
Estas técnicas están obteniendo fueron realizados en ratones de las clonaciones futuras.
resultados promisorios. Vale la pena laboratorio por Illmensee y Hoppe Se retira un pedazo pequeño de
anotar que la clonación no solo se (1981). Para 1986 Willadsen reporta piel (biopsia) del animal a ser clona-
dirige al mejoramiento genético sino el primer nacimiento exitoso de do y es llevado bajo refrigeración al
que también esta siendo usada en la mamíferos clonados; éstos fueron laboratorio. Esta biopsia es procesa-
biomedicina y en diversas áreas de el producto de la transferencia de da para realizar un cultivo primario
la investigación fundamental. embriones de 6 a 8 células de corde- de fibroblastos en cajas de cultivo
El proceso de clonación comien- ro. Los estudios de Campbell et.al., celular dentro de una incubadora
za con la “preservación genética” (1996) demostraron que los núcleos con ambiente controlado, posterior
que se hace a través del cultivo de de líneas celulares embrionarias a esto son congeladas. La conge-

44 Genética Bovina Colombiana


GBC  Edición 16

SANTACRUZ Editores 45
BIOTECNOLOGIA

lación es realizada usando como


crioprotector DMSO o glicerol y el
almacenamiento es en pajillas de
0.5 ml, con una cantidad de células
aproximada de 500.000 cada una. La
descongelación es realizada en agua
tibia y posteriormente se realiza un
nuevo cultivo de las células para
posteriormente realizar en proce-
dimiento de clonación.

Clonación
Los clones son copias idénti-
cas de animales que pueden ser
producidos gracias a la evolución
de la tecnología de transferencia
nuclear. La clonación consiste de
las siguientes etapas: maduración
de oocitos receptores, enucleación
o del retiro de la cromatina de los

46 Genética Bovina Colombiana


GBC  Edición 16

oocitos receptores, preparación y del conforme a la especie (39°C en bo- mayor elasticidad a los oocitos. Para
transferencia de las células donan- vinos). En los rumiantes el período la visualización de la cromatina de
tes del núcleo y fusión de éstas con de la maduración in-vitro es de 18 a los oóctios y certificar el enuclea-
los oócitos receptores, activación 24 horas. ción, se utiliza el colorante Hoescht
y cultivo in-vitro de los embriones (5 105µg/ml) y con la exposición
reconstituidos. Todas estas etapas 1.2. Enucleación la luz ultravioleta se hace visible
son necesarias para la clonación y la cromatina, este procedimiento
existen diversos protocolos. Estas El procedimiento más común es se debe hacer con un mínimo de
etapas se describen en la figura 1. la micro-aspiración de una porción exposición posible para reducir el
del citoplasma con la ayuda de efecto dañino del la ultravioleta
1. Preparación de los oocitos micro-manipuladores y de micro- al oocito. La tasa de enucleación
receptores - Maduración In Vitro pipetas. Los oocitos son preparados exitosa es de 60 a 70% en oocitos de
para la aspiración quitando las los bovinos.
La maduración consiste en llevar células del cúmulus con hialuro- Otra técnica de enucleación de
los oocitos hasta la fase de Metafase nidasa, se seleccionan de acuerdo los oocitos en el estadio de Metafase
II. La maduración se hace general- a la calidad del citoplasma y a la II, sin el uso de Hoescht, es el uso
mente con medios del tipo TCM presencia del primer corpúsculo de Demecolcina (0,45µg/ml) por un
199, suplementado con suero fetal polar. La enucleación es realizada período de 1 a 2 horas. La Demecol-
bovino (SFB) y hormonas. Este pro- en presencia de citocalasina B (5µg/ cina promueve la formación de una
ceso se lleva dentro de incubadoras ml), desestabilizador reversible de pequeña protrución de la membra-
de CO2 con temperatura ajustada los filamentos del actina para dar na en los oocitos (pseudo-corpúsculo

SANTACRUZ Editores 47
BIOTECNOLOGIA

polar), donde se aloja la cromatina


( figura 2).
Vatja et.al., adaptaron un proto-
colo que permite la enucleación y
la transferencia nuclear sin el uso
de micro-manipuladores, conocido
como método de clonación manual.
Después de la preparación de los
oocitos como se describe anterior-
mente, éstos pasan para un trata-
miento para la digestión de la Zona
Pelúcida (pronase, 1 los 5 µg/ml).
Los citoplasmas de los oocitos se
dividen con la ayuda a una micro-
lamina a mano libre, de manera
que el corpúsculo polar quede en
una de las mitades. Utiliza también
el Hoescht y Citocaliza B para la
enucleación y la verificación de la
presencia del material nuclear, los
oocitos enucleados se utilizan para
la reconstrucción de los embriones.
Una célula donante de núcleo es
adherida a la superficie del oócito
con Fitohemaglutinina (50 los 500
µg/ml) y electro-fusión. En la etapa
siguiente, el oocito que se fundió a
la célula es otra vez adherido a la
otra mitad de citoplasma enucleado,
permitiendo que el volumen total
del oocito reconstituido sea igual al
original. Para las etapas siguientes
del cultivo in-vitro se hace necesario
que los oocitos reconstituidos se
guarden por separado para evitar
la segregación de los blastómeros y
la agregación de los embriones. El
cultivo se hace en microcavidades
preparados en placas (figura 3).
Otro método adaptado por
Oback et.al., también conocidos
como zone-free, donde la mayoría
de las etapas usadas en este proto-
colo son idénticas al las descritas
para Vatja para el método de clona-
ción manual. La diferencia principal
se relaciona al proceso de enuclea-
ción. Además, no es necesaria la
fusión de más de un citoplasma.
La enucleación se realiza con una
micropipeta del cristal sin bisel para
quitar una pequeña porción del
citoplasma que contiene la cromati-
na. La visualización de la cromatina
se puede hacer con Hoescht y luz
ultravioleta o con el tratamiento con

48 Genética Bovina Colombiana


GBC  Edición 16

SANTACRUZ Editores 49
BIOTECNOLOGIA

Demecolcina previamente descrito


(Figura 4).

1.3. Preparación de células


donadoras de núcleo
La preparación de las células do-
nadoras depende del tipo de célula
que se utilizará. Para las células del
origen embrionario se retira la zona
pelúcida y se separan las blastomeras
por medio de pipeteo o mediante el
uso de una solución sin calcio y mag-
nesio. En cuanto a las células somáti-
cas deben ser cultivadas previamente
de modo que en el día de la transfe-
rencia nuclear tengan confluencia y
estén en fase celular de G0 y de G1. La
solución de Tripsina (EDTA 0.25%) se
utiliza normalmente para separar las
células. Se lava la placa con la mono-
camada con buffer de fosfato salino
(PBS) sin calcio y magnesio, se adicio-
na la Tripsina durante 1 a 2 minutos
y se inactiva utilizando medio con el
10% de SFB. Las células en suspensión
son centrifugadas y resuspendidas en
medio de cultivo.
Todavía no es posible identificar
a cuál es el tipo celular más apro-
piado para la clonación. Aunque las
células fibroblásticas y de la granu-
losa son de preferencia, debido a su
facilidad de obtención.

1.4 Transferencia del núcleo


para los oocitos receptores (re-
construcción de los embriones)
La micro-inyección y la fusión
entre las membranas plasmáticas
de la célula donadora y el oocito
receptor son los métodos princi-
pales para la transferencia nuclear.
La fusión celular se puede llevar a
cabo mediante impulsos eléctricos
(electrofusión o electroporación), éste es
el método preferido para uso en la
mayoría especies. La electrofusión
se hace en un medio de baja con-
ductividad eléctrica para prevenir la
producción y la dispersión de calor
(solución de 0.28 a 0.3 M de manitol;
µM 100 de MgSO4; CaCl2 de 50 µM; ■■Los clones son copias idénticas de animales que pueden ser producidos gracias a la evolución
0.01 mg/ml de BSA; pH 7.2). de la tecnología de transferencia nuclear.

50 Genética Bovina Colombiana


GBC  Edición 16

SANTACRUZ Editores 51
BIOTECNOLOGIA

La electrofusión consiste un pulso


de corriente alterna, para la alineación
del oocito reconstituido en posición
paralela a los electrodos (célula dona-
dora y oócito) y uno o más pulsos de co-
rriente son aplicados, éstos inducen la
formación de poros en las membranas
que causan la fusión entre las células.
Los parámetros de la electrofusión
son: duración, intensidad y cantidad
de pulsos, estos pueden variar de
acuerdo al equipo usado. En general
la corriente alterna es aplicada con
una frecuencia de 600 a 1000kHz, el
voltaje de 5 a 6 V y la duración de 10
a 5 µs. La corriente directa varía de 1
a 3 pulsos con intensidad de 0,6 a 3,6
kV/cm y duración de 30 a 250µs. Los
buenos resultados de la fusión se re-
lacionan directamente con el contacto
estrecho entre la célula y el oocito y
la alineación perfecta paralela a los
electrodos (figura 5).

1.5 Activación
La activación se relaciona con la
inducción de la degradación de los
complejos enzimáticos responsables intracelulares. Los principales agentes embrionario y trofectodermo con
para mantener los oocitos en el es- para la activación de los oocitos son: formación deficiente del uso mitótico.
tadio del Metafase II y finalizar el etanol, impulsos eléctricos, ionóforos En bovinos los resultados obtenidos
proceso meiotico, iniciando el desa- y el cloruro de estroncio. Otra opción en 2170 transferencias de embriones
rrollo embrionario. El bloqueo de los para la activación es el uso de agentes por clonación demostró que existen
oocitos en la Metafase II se debe la inhibidores de la síntesis proteica, pérdidas de las gestaciones de hasta
acción de un complejo de proteínas, como la Cicloexamida, o inhibidores el 75% antes de los seis meses de
llamada factor intracelular promotor de de enzimas kinasas (6-dimetilpu- gestación. Estas pérdidas pueden ser
de la fase M (MPF) que activa mu- rina, roscotivina, butirolactona). Estos debidas a deficiencias placentarias
chas otras proteínas en el proceso elementos evitan el restablecimiento (aumento del tamaño de los placentomas,
de fosforilación. Estas proteínas son de la actividad del MPF. reducción del número de placentomas,
responsables de la condensación de la deficiencia en circulación sanguínea,
cromatina y del bloqueo de los oocitos Problemas asociados a la clo- formación de hidroalantoide). Problemas
en la Metafase II. En la fecundación, nación por transferencia nuclear perinatales como mortinatos y muerte
el espermatozoide es el responsable en los primeros días de vida son bas-
de la señal que activa la degradación El éxito de la clonación es todavía tante comunes y demanda cuidados
del MPF que los desencadena la fina- muy bajo, aunque existen muchos especiales de neonatología para los
lización de la meiosis, y es el principio clones nacidos vivos de diversas recién nacidos. Los problemas perina-
de los primeros clivages. El proceso especies. Por otra parte, existen gran- tales son: disfunciones respiratorias,
depende de varias ondas de liberación des variaciones en los resultados en defectos cardiacos y circulatorios,
de calcio dentro del oocito. Diferentes función del tipo de célula donante deficiencias inmunológicas, hepáti-
procedimientos químicos y físicos del núcleo, preparación de los oocitos, cas, renales, problemas umbilicales
fueron desarrollados basados en activación y del cultivo. Las anoma- y disfunciones sistémicas, así como,
este principio como: la exposición de lías en los embriones que afectan el síndrome del ternero grande.
oocitos reconstituidos a soluciones de desarrollo y la viabilidad después
calcio, el uso de agentes responsables del nacimiento de los animales clo- Bibliog raf ia dispon ible en:
de la entrada extracelular de calcio, o nados son: anomalías cromosomicas, geneticabovina.fer@gmail.com –
la liberación de calcio de las reservas organización anormal del botón linodmv@embriogen.com

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