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INFORME DE MICROBIOLOGIA

PRUEBAS DE FILTRACION Y PETRIFILM (COLIFORMES TOTALES)

EVELIS GUTIERREZ RODRIGUEZ


LILIANA CASTRO BELTRAN
PAOLA PATRICIA PEA G
VANESSA ESCORCIA ORDOEZ
YEISON FRANCISCO DAZA CEBALLOS
JHOANA DOMINGUEZ SALAS
YOLIBETH MONTERO H.

INS. ANA CRISTINA CARRILLO

FICHA 723821 C.C.A.

SENA

2015

INTRODUCCION
el agua es una de las principales fuentes de vida en nuestro planeta son
infinitos los usos del agua para consumo humano, para labores domesticas y
en la industria de alimentos y farmacuticas; as mismo puede ser unos de los
principales transmisores de enfermedades entricas si se llegara a consumir en
estado contaminado entre los microorganismos indicadores de agua potable se
puede encontrar las bacterias del grupo coliformes perteneciendo al genero: e.
coli, enterobacter spp, klebsiella, spp y cicrobacter spp. es por esto que los
laboratorios microbiolgicos buscan validar las tcnicas para el anlisis de este
tipo de aguas que en la mayora buscan detectar coliformes fecales y totales
mediante la tcnica de filtracin por membrana. Actualmente los requisitos de
calidad en seguridad alimentaria son ms exigentes y se requiere que el
laboratorio proporcione pruebas ms rpidas, fiables y precisas. Desde hace
ms de 30 aos, los profesionales de la seguridad alimentaria en todo el
mundo han puesto su confianza en las Placas 3M Petrifilm. Esto se debe a
que estos ingeniosos pequeos puntos rojos han simplificado y estandarizado
el proceso de anlisis microbiolgico, para mejorar la productividad y ayudar a
garantizar los ms altos niveles de calidad de los productos.

TECNICA DE FILTRACION

Material

Recipiente estril para toma de muestras


Sistema de filtracin y fuente de vaco
Membranas de filtracin de 0.45 micras de dimetro de poro.
Pinzas de acero con bordes biselados
Placas Petri.
Mechero
Agar Chromocult Coliform (Merck: 1.0426.0100) para anlisis de E. coli y
Coliformes.

Preparacin del medio de cultivo Chromocult.

Este medio se emplea para la deteccin simultnea de coliformes totales y E.


coli en agua y alimentos
Disolver en 35 ml 26,5 gr de agua calentando en agua hirviendo o en
autoclave con corriente de vapor
Agitar aproximadamente durante 35 min. (Puede quedar turbio pero no tiene
efectos significativos)
No introducir en autoclave.
Dispensar en placas de petri.
Procedimiento

Limpiar con alcohol la superficie del portafiltros.


Colocar un filtro de membrana sobre el soporte con la ayuda de unas pinzas de
acero previamente flameadas con alcohol.
Situar un embudo sobre el soporte hasta que est fijo.
Verter la muestra de agua problema en el embudo (100ml) y aplicar el vaco
hasta que el lquido se haya filtrado.
Romper el vaco y extraer el embudo. Con las pinzas flameadas se extrae el
filtro del soporte.
Se coloca el filtro dentro de una placa Petri sobre el medio de cultivo, con la
cuadricula hacia arriba, procurando que no se formen burbujas entre la
membrana y el medio de cultivo.

Las placas se llevan a incubar a 45 C para coliformes fecales; por no estar en


funcionamiento la incubadora se llevo a 37 C para coliformes totales durante
48hrs.

METODO PETRIFILM
Las placas Petri film HSCC contienen un medio de cultivo selectivo listo para
usar: Violeta Rojo Bilis (VRB), un agente gelificante soluble en agua fra y un
indicador de tetrazolio que facilita la enumeracin de colonias. El film superior
atrapa el gas producido por la fermentacin de la lactosa por los coliformes. El
tiempo y la temperatura de incubacin, as como la interpretacin, vara segn
el mtodo seguido.
Las Placas 3M Petrifilm para recuento de E. coli y Coliformes proporcionan
resultados confirmados en un plazo de 24 a 48 horas. Al eliminar los pasos de
confirmacin, aumenta la productividad y disminuyen los costos generales de
laboratorio. Resultados rpidos y precisos en 24 o 48 horas
materiales:

pipeta
frascos Scott
Baker
tubos
placas Petri film
puntas
micro pipetas
gradillas

procedimiento:

diluciones: tomar 1 ml de la muestra y realizar las diluciones hasta 10 -3


en 9 ml de cloruro de sodio en cada tubo.
Inocular: las Placas 3M Petri film son fciles de inocular. Levante la
pelcula superior y agregue la muestra.
Incubar: su diseo maximiza el espacio requerido en la incubadora.

Enumerar: los coliformes confirmados son las colonias rojas y azules


asociadas con burbujas de gas. Los coliformes E. col confirmados son
las colonias azules asociadas con burbujas de gas.

RESULTADOS

METODO

AGAR

petrifilm

VRB

filtracin

chromocult.

RECUENTO
C.T.
10-1 : 118 Ufc/ ml
______________
C.F.
10: ausencia
C.T.
> 1600 Ufc/ ml
______________
C.F.
29*10 Ufc/ ml

RESULTADO
>3

>3

CONCLUSIONES
podemos concluir mediante los resultados arrojados por la metodologa de petriflim y
filtracin empleada para determinar carga microbiana y la recoleccin de muestras de
agua no potable tomada a las 10:15 am de la piscina 19 del rea de acuicultura de cbc
siendo la responsable Paola pea de la ficha 723821. determinamos que cuenta con
un alto contenido de coliformes fecales la cual puede tener como causa que algunos
animales que estn en el rea toman aguan del estanque , y se encontr contenido de
coliformes fecales lo cual indica que es un agua no apta para el consumo humano
porque pondra en riesgo la salud publica

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