INHIBICION ENZIMATICA

La actividad enzimtica se puede inhibir, es decir, reducir o eliminar la actividad

enzimtica o cataltica de enzimas especficas.
La inhibicin puede ser:
A) Irreversible - el inhibidor se une covalentemente a la enzima, casi siempre a un grupo
de la cadena lateral de los amino cidos en el foco activo. La enzima queda inactiva
permanentemente.
Por ejemplo, la aspirina o cido acetilsaliclico (ASA) inhibe irreversiblemente la accin de
la sintetasa de prostaglandina:

Algunas prostaglandinas producen dolor e inflamacin. Al quedar bloqueada su sntesis se

reduce la inflamacin y se alivia el dolor.
B)
Reversible: el inhibidor puede disociarse de la enzima porque no se une por enlaces
covalentes. Esta inhibicin puede ser competitiva o no-competitiva.
(a)Inhibicin Competitiva - el inhibidor competitivo es muy similar al sustrato normal de la
enzima. Dada esa similitud estructural, este tipo de inhibidor se une reversiblemente al foco
activo de la enzima.

El inhibidor forma un complejo enzima-inhibidor equivalente al complejo enzima-sustrato:

Como hay un equilibrio, la rapidez de las reacciones de formacin y separacin del

complejo EI se igualan:
r[EI] = k1*[E]*[I]-k-1*[EI]
por lo que:
k1[E][I] = k-1[EI]
de aqu que:

donde KI es la constante de disociacin (o constante de inhibicin) de EI. Esta constante se

usa para describir cun fuerte se une el inhibidor a la enzima.
De acuerdo a esta expresin,
3
por lo que [ EI ] es directamente proporcional a [ I ] e inversamente proporcional a KI.
O sea, a mayor valor de KI , ms dbil la unin del inhibidor con la enzima, el complejo EI
se disocia fcilmente, y el sitioo activo vacante puede estar disponible para unirse a su
sustrato.
No hay reaccin productiva mientras el inhibidor se une a la enzima, por lo que la actividad
de la enzima declina.
El efecto del inhibidor competitivo en la actividad enzimtica se revierte por un aumento en
la concentracin del sustrato: a altas concentraciones todos los focos activos se combinan
con el sustrato y la actividad enzimtica se normaliza.
El balance de enzima en el medio es:
ET = [E]+[ES]+[EI]

3 []
=
[] + [] + []

3
=
[] [] []

+
+
[] [] []
Sustituyendo [EI] en la ecuacin de rp/ET

3
3
=
=
[]
[][]
[]

+1+
(1 + ) + 1
[]
[]
[]

sustituyendo el valor de [E]/[ES] y multiplicando por S y por ET ambos trminos de la

ecuacin

3
=
(1 + ) + 1

(1 + ) +

La rPmax se mantiene constante con o sin inhibidor competitivo. Sin embargo, cuando est
presente el inhibidor KM aumenta y rPmax nunca se alcanza:

A baja [S] ([S] <<Km), la enzima est predominantemente en la forma libre, E. El inhibidor
competitivo puede combinarse con E, por lo que la presencia del inhibidor disminuye la
rapidez cuando [S] es baja. A estas condiciones la expresin de rapidez es:
ro = rPmaxS/Km.
Tambin hay un aumento en Km segn aumenta [I]. Por lo tanto, en la inhibicin
competitiva se afecta la pendiente pero no hay efecto en rPmax.
(b) Inhibicin No-Competitiva: el inhibidor se combina con la enzima en un lugar distinto
al sitio activo. Tanto EI como EIS se forman:

La unin del inhibidor afecta la configuracin tridimensional de la enzima y bloquea la

reaccin. Este tipo de inhibidor no compite directamente con el sustrato para unirse a la
enzima (no afecta la unin ES), por lo tanto, este tipo de inhibicin no es reversible cuando
aumenta la concentracin del sustrato.
Esta inhibicin disminuye la Vmax segn aumenta [ I ], pero no afecta Km (la enzima
puede unirse al sustrato):

Inhibicin Incompetitiva o Acompetitiva: el inhibidor se combina slo con ES (no con la

enzima), por lo que el inhibidor ejerce su efecto slo a altas concentraciones de sustrato en
las que hay gran cantidad de complejo enzima-sustrato (ES). Por lo tanto, variando la [S]
no afecta o evita la unin con el inhibidor. Por otro lado, es evidente que el sustrato y el
inhibidor se combinan con la enzima en lugares diferentes.

A bajas concentraciones de sustrato ( [S]--->0), la enzima est libre (E). Como el inhibidor
no se combina con E, ste no afecta la velocidad.
Las ecuaciones cinticas que describen las inhibiciones no competitiva y a competitiva son:
k1
k3
E + S === ES --- E + P
k2
k6
I + ES===IES
k7

r[IES] = k6*[ES]*[I]-k7*[IES]

por lo que:
k6[ES][I] = k7[IES]
y la constante de disociacin es:
7
6

[][]
[]

De acuerdo a esta expresin,

[] =

[][]

por lo que [IES] es directamente proporcional a [I] e inversamente proporcional a KII.

O sea, a mayor valor de KII , ms dbil la unin del inhibidor con la enzima, el complejo
IES se disocia fcilmente, y el sitio activo vacante puede estar disponible para unirse a su
sustrato.
El balance de las formas en las que se encuentra la enzima es:
ET = [E] + [ES] + [EI] + [IES]
Dividiendo la velocidad de formacin de producto entre la enzima total

3 []
=
[] + [] + [] + []

3
=
[] [] [] []

+
+
+
[] [] [] []
Sustituyendo los valores de {E]/[ES] y de [EI]/[ES] de la ecuacin 3 y [IES]/[ES] de la
ecuacin 9

3
=
(1 + ) + 1 +

Multiplicando por S y por ET

K M (1 + ) + (1 + )

Dividiendo entre (1+ I/KII) tenemos la ecuacin general de la cintica enzimtica

3

1+

1+

KM
+
1+

10
Que podramos simplificar como
=

1+

KM
+
1+

k3*ET = rpmax
que es la velocidad mxima de reaccin enzimtica porque ocurre con el total de la enzima
convertida a complejo ES y no hay inhibidor.
=

= K M

1+

1+

1+

Que representan la velocidad mxima y la constante de afinidad en presencia de inhibidor.

Ntese que si no hay inhibidor (I = 0) o su efecto es muy pequeo (I/Ki 0)
=
KM = KM

CONCLUSIONES
a. Si KII es muy grande tenemos la inhibicin competitiva
b. Si KII = KI tenemos la inhibicin no competitiva
c. Si KII < KI Qu tenemos?
Ejercicio:
1. demuestre las conclusiones a. y b. y conteste la c.
2. Complete el siguiente cuadro de resumen
Resumen:
Efecto cintico en reaccin con inhibicin relativa a la reaccin sin inhibir:

Tipo de Inhibicin
Sin inhibicin
Competitivo
No competitivo
A competitivo

KM
No cambia
Aumenta

rmax
No cambia
No cambia