Prctica # 3: ACTIVIDAD DEL

COMPLEMENTO

Materia: Inmunologa Bsica

Maestro: Patricia Margarita Garma Quen

Grado: 5to. Semestre

Grupo: B

Equipo #1 Integrantes: Ayanegui Robles Estephanie

Cahuich Espinosa Keila Patricia
Crdenas Garca Zelyna Kassandra
Rosado Morales Jorge Alejandro

Tovar Len Rosita Marlene

Vzquez Mian Erika

Objetivo:
Comprender la actividad biolgica del complemento y saber interpretar
los resultados de la medicin de su actividad in vitro.

Introduccin:
El sistema del complemento es parte de la inmunidad innata y
constituye uno de los principales mecanismos efectores de la inmunidad
mediada por anticuerpos. El complemento constituye un puente entre la
inmunidad innata y la adaptativa, ofrece proteccin contra la infeccin
por bacterias pigenas y favorece la eliminacin de complejos inmunes y
de productos de la inflamacin. (Berrn Perez, Penagos-Paniagua,,
Zaragoza Bentez, Rodriguez lvarez, & Blancas Galicia, 2003)
La funcin del complemento frente a infecciones son la opsonizacin,
quimiotaxis y activacin de leucocitos y lisis de bacterias y clulas.
Frente a la mediacin entre inmunidad innata y adquirida son: aumento
de la respuesta de Ac y aumento de la memoria inmunolgica. Por
ultimo cuando hay disposicin de residuos realizan eliminacin de
complejos inmunes de los tejidos y eliminacin de clulas apoptoicas.
(Kunzle)
Se conocen ms de 30 protenas que se activan secuencialmente unas
con otras a travs de tres vas fundamentales de activacin: va de las
lecitinas, va clsica y va alternativa. Entre sus funciones est la lisis de
bacterias y virus, participar en los procesos inflamatorios, facilita la
quimiotaxis
y la vasodilatacin, opsonizacin de antgenos,
neutralizacin de virus, y solubilizacin de inmuno-complejos. Como
toda respuesta inmunolgica, los efectos benficos de la va del
complemento pueden convertirse en adversos y peligrosos dependiendo
del sitio donde se ejerzan y la duracin de la activacin del
complemento. (Jimenez Pardo, Perez Espinosa, ALberro Fernandez, &
Camejo Perez, 2013)

 Metodologa:
Extraccin de
sangre.
Sin anticoagulante
(tubo tapa Roja) dejar
coagular
Dividir en 2 tubos
Centrifugar 5 min a
3000 rmp

Separar el suero

El volumen de
suero
Obtenido

El otro tubo no se incuba

(suero complementado)
Dilucin 1: 100 de
suero complementado
y solucin salina 1 ml

Incubar un tubo a 56
C durante 30 min
(suero
descomplementado)

Tcnica:
Ensayo hemoltico de la va clsica
1.-Colocar 200 L de la solucin problema (concentraciones de o.01 a
1.0 mg mL-1) 1000 L de la dilucin del complemento y 100 L de
eritrocitos sensibilizados (2..5x108cel mL-1) incubar a 37 C por 45
minutos. Obtener el suero de donadores humanos sanos (DHS) y
diluir 1:250.

2.-Detener la reaccin en un bao de hielo y centrifugar a 480xg por

5 minutos.
3.-Medir la absorbancia del sobrenadante a 412 nm. Comparar con
un control de 100% de hemlisis, un control negativo de actividad de
complemento y un blanco de reactivos

Ensayo hemoltico va alterna

1. Preincubar los Polisacridos con el suero (DHS) concentrado a
37C por 30 minutos. Despus detener la reaccin y diluir con una
solucin tamponada pH=7.2 de Mg (EDTA) 0.01M.
2. Colocar 200 L de la solucin problema (concentraciones de
0.01 a 1.0mg
mL-1), 1000 L de la dilucin del complemento (DHS 1:16) y 100
L de eritrocitos sensibilizados (1.0x108cl mL-1) incubar a 37 C
por 60 minutos.
3. Detener la reaccin en un bao de hielo y centrifugar a 480xg
por 5 minutos.
4. Medir la absorbancia del sobrenadante a 412 nm. Comparar con
un control de 100% de hemlisis, un control negativo de actividad
de complemento y un blanco de reactivos.

Resultados:
La prctica no se pudo terminar por falta de tiempo.
Se empezaron a observar pequeas aglutinacin tanto con el
suero complementado, como en el suero descomplementado.

Complementado 10
ml-suero 990 mlsolucin salina 100
ml G.R lavados tipo
A Anti A.

Patrn.

Descomplementado 10suero 990 ml-solucin

salina 100 ml G.R
lavados tipo A Anti
A.

 Interpretacin:
La actividad de complemento (CH50 o las protenas individuales de
complemento) se miden para determinar si el complemento est
involucrado en el origen o en el proceso de diferentes enfermedades. La
actividad de complemento se mide tambin para controlar la gravedad o
evolucin de una enfermedad, tanto como diagnstico como para
comprobar la eficacia del tratamiento.
Por ejemplo, los pacientes con Lupus Eritematoso Sistmico activos
pueden tener niveles bajos de C3 y C4, y estos niveles del Complemento
pueden seguirse como un ndice de la actividad de la enfermedad.
La actividad de complemento puede variar en partes diferentes de
cuerpo. Por ejemplo, actividad de complemento en la sangre de
pacientes con Artritis Reumatoide puede ser normal o aumentada, pero
en el lquido articular se encuentra muy baja.
Valores normales del complemento:

CH 50
C1 Inhibidor
C3 Hombres
C3 Mujeres
C4 Hombres

75 a 160 U/ml
16 a 33 mg/ dl
88 a 252 mg/ dl
88 a 206 mg/ dl
12 a 72 mg/ dl

C4 Mujeres

13 a 75 mg/ dl

Conclusiones:
Se pudo determinar la importancia que posee el sistema de
complemento, ya que desempea un papel importante en las
enfermedades, neurolgicas infecciosas, autoinmunes y
degenerativas, donde se encuentra involucrado en su fisiopatologa.
Adems se pudo determinar que el complemento ofrece proteccin
contra la infeccin por bacterias pigenas y favorece la eliminacin
de complejos inmunes y de productos de la inflamacin.

En el proceso del sistema del complemento existen cuatro vas

importante, las cuales son: la va clsica de activacin, que es
estimulada por complejos inmunitarios antgeno-anticuerpo, la va de
activacin de la lecitina fijadora de manosa estimulada por los
microorganismos con grupos terminales de manosa, la va alterna de
activacin, que es estimulada por microorganismos o clulas
tumorales, y la va terminal, que es comn para las tres primeras vas
y origina el complejo de ataque de la membrana que lisa a las clulas

Observaciones recomendadas:
Material limpio.
Realizar bien la dilucin del complemento, para obtener resultados
correctos.
Monitorear la temperatura y el tiempo.

Cuestionario:
1. Por qu se denomin Complemento (desde el punto de
vista histrico-cientfico)?
Ehrlich usaba el trmino complemento para designar la actividad del
suero que poda complementar la capacidad de los anticuerpos
especficos de lisar bacterias.
2.En qu consiste y cules son las ventajas de un sistema
biolgico tipo cascada?
La ventaja es la rapidez con la que acta, ya que como lo dice el
nombre es una reaccin continua a la anterior. Sin embargo las
desventajas recaen en lo mismo ya que la velocidad y agresividad de
dicha activacin puede provocar daos en el organismo.
3. Mencione un ejemplo de respuesta en cascada, adems del
complemento, en el organismo.
Inmunidad humoral, cascada de coagulacin.
4. Cmo se inactiva el complemento?

Una vez que se han logrado los niveles necesarios de actividad, el

sistema del complemento es inactivado por una serie de mecanismo
enzimticos de donde destacan la enzima inactivadora del C1,
inactivadoras de las anafilotoxinas, protenas reguladoras del
complemento, etctera.

5. Elabore un cuadro de las caractersticas fsicas y qumicas

de las protenas del complemento.

6.Dibuje un diagrama que muestre los cuatro segmentos del

sistema de complemento (reconocimiento, activacin,
amplificacin y efectora).

7.
Elabore un cuadro en el que se indique
brevemente los productos del sistema de complemento y su
funcin biolgica.

8. Cul es la funcin biolgica del complemento y qu

repercusiones ocasionara al organismo una falta del mismo?

Eliminar microorganismos patgenos extracelulares e inducir

inflamacin. La falta de este provocara una infeccin en el
organismo a causa de los microorganismos patgenos.
Activacin de leucocitos.
Contraccin del musculo liso.

9. Cul sera la importancia clnica de la evaluacin del

complemento y cul sera la importancia de investigacin
farmacolgica de sustancias que acten sobre el
complemento?
La evaluacin del complemento permite identificar la forma en que
acta en el organismo y como acta ante un agente adverso.
La importancia refirindose a la investigacin de sustancias
farmacolgicas sobre el sistema de complemento, permite determinar
la forma en que estas sustancias inhiben o aceleran la accin, as
como determinar si estas son peligrosas al organismo.

Referencias:
Berrn Perez, R., Penagos-Paniagua,, M. J., Zaragoza Bentez, J. M., Rodriguez
lvarez, J., & Blancas Galicia, L. (Mayo- Agosto de 2003). Medigraphic.
Recuperado
el
6
de
Octubre
de
2015,
de
Medigraphic:
http://www.medigraphic.com/pdfs/alergia/al-2003/al032b.pdf
Jimenez Pardo, M. L., Perez Espinosa, L. M., ALberro Fernandez, M., & Camejo
Perez, Y. M. (19 de Enero de 2013). Mediagraphic. Recuperado el 6 de 10 de
2015, de Mediagraphic: http://www.medigraphic.com/pdfs/mediciego/mdc2013/mdc131p.pdf
Kunzle, C. R. (s.f.). Institute of Management Technology. Obtenido de Institute
of
Management
Technology:
http://www.imt.edu.py/admin/uploads/Documento/complemento.pdf
http://www.ugr.es/~eianez/inmuno/cap_16.htm
epidemiologiamolecular.com_/efectos-biologicos-sistema-complemento/
Introduccin a la inmunologa humana. Fainboin.
http://www.microbiologybook.org/Spanish-immuno/imm-chapter2.htm