Академический Документы
Профессиональный Документы
Культура Документы
FARMACIA Y BIOQUIMICA
GUA DE PRCTICAS
FARMACOGNOSIA Y FITOQUIMICA
DOCENTE:
MG. Q.F. MARIA ISABEL PALACIOS PALACIOS
Telefax: 043-3
Erythoxylon coca
FARMACIA Y BIOQUIMICA
PRESENTACION
El presente Manual de Prcticas, est dirigido a los estudiantes de pregrado de
Farmacia y Bioqumica que cursan la asignatura de Farmacognosia y Fitoqumica de la
Universidad Los Angeles de Chimbote.
Tiene
como
objetivo facilitar
el aprendizaje
del
curso,
integrando
los
conocimientos tericos con los prcticos, siendo una herramienta adecuada de trabajo,
que le permitir desarrollar sus prcticas de laboratorio de manera adecuada y ordenada,
esta dividido en dos grandes grupos.
FARMACIA Y BIOQUIMICA
INDICE
1. PRACTICA N 01:
Control de calidad macroscpico y microscpico de una droga natural pruebas histolgicas:.. ..
01
2. PRACTICA N 02:
Determinacin de humedad y cenizas de una droga natural,
tamizaje fitoqumico de un extracto vegetal:
11
3. PRACTICA N 03:
Ensayos de solubilidad, preparacin y anlisis de un extracto vegetal
19
4. PRACTICA N 04:
Determinacin de azcares, polisacridos homogneos y
heterogneos: Almidones, gomas, muclagos y pectinas:. .
25
5. PRACTICA N 05:
Determinacin de glicsidos cardiotnicos y fenlicos....
37
6. PRACTICA N 06:
Determinacin de glicsidos antraquinnicos y cianogenticos.
44
7. PRACTICA N 07:
Determinacin de Saponinas:
51
8. PRACTICA N 08:
Determinacin de flavonoides:..
57
9. PRACTICA N 09:
Determinacin de e cumarinas iridoides y mtodos de extraccin: 64
10. PRACTICA N 10:
Determinacin de drogas con taninos glicos y catquicos:..
70
77
84
FARMACIA Y BIOQUIMICA
PRCTICA N 01
CONTROL DE CALIDAD MACROSCPICO Y MICROSCPICO DE UNA DROGA
NATURAL - PRUEBAS HISTOQUIMICAS
1.1.
OBJETIVOS:
Caracterizar
una
especie
medicinal
realizando
observaciones
macroscpicas y microscpicas.
1.2.
FUNDAMENTO:
En el mundo, las drogas y preparados fitoteraputicos obtenidos a partir de
plastas medicinales, ocupan un lugar importante en el comercio mundial de
medicamentos, y debido a ello, se ha enfatizado en la necesidad de garantizar su
control de calidad con la aplicacin de tcnicas modernas, uso de parmetros y
patrones adecuados.
Evaluar o valorar las drogas vegetales significa, identificar y determinar su calidad
y pureza, que se va a traducir en su valor intrnseco, es decir en su contenido de
principios activos responsable de su accin farmacolgica. Las impurezas o
materias extraas son aquellas partes de la droga que no corresponden a las
exigencias que seala la monografa en cuanto a color, tamao, estado y grado de
pulverizacin, mezclas con otras partes de la planta, polvo, arena, piedras y otras
sustancias minerales.
Las drogas deben estar libres de organismos patgenos y de microorganismos
insectos y cualquier otra contaminacin animal, incluyendo excretas. No deben de
presentar olores anormales, decoloraciones o algn signo de deterioro. Las
pruebas para contaminacin microbiana, se desarrollan bajo condiciones
diseadas para evitar la contaminacin durante la prueba.
1.3
MUESTRAS:
Planta Medicinal o mezcla de plantas medicinales de venta en mercados o centros
naturistas, tambin algunos preparados o formas farmacuticas de productos
naturales.
FARMACIA Y BIOQUIMICA
1.4
MATERIALES Y REACTIVOS:
1.5.
Placas Petri
Balanza Analtica
Microscopio, estereoscpico
Pipetas de 5y l0 ml.
Reactivos para histoqumica
Agua Destilada
Pinza
Laminas Posta y Cubre objetos
Mortero
Beaker de 250 ml.
PROCEDIMIENTO:
rgano Vegetal
rganos
Subterrneos
Corteza y leos
Caractersticas Botnicas
Tamao, color, olor, forma y consistencia.
Caracteres de Superficie:
Seccin transversal
Fractura
Otras particularidades
Forma
Superficie externa
Superficie interna
Hojas
Flores
Frutos
Semillas
FARMACIA Y BIOQUIMICA
1.5.2
1.6.
Reaccin histoqumica
almidn
Solucin de Lugol
Alcaloides
Flavonoides
Reaccin de Shinoda
Taninos
RESULTADOS
FARMACIA Y BIOQUIMICA
FARMACIA Y BIOQUIMICA
1.7.
DISCUSION:
1.8.
CONCLUSIONES:
1.9.
CUESTIONARIO:
FARMACIA Y BIOQUIMICA
FARMACIA Y BIOQUIMICA
1.10.
BIBLIOGRAFIA:
10
FARMACIA Y BIOQUIMICA
PRCTICA N 02
DETERMINACION DE CENIZAS, HUMEDAD Y TAMIZAJE FITOQUIMICO DE UNA
PLANTA MEDICINAL
1. OBJETIVO GENERAL:
Determinar el contenido de humedad de una droga al estado fresco y seco
Establecer el contenido de cenizas de una droga
Determinar la composicin qumica de una material vegetal
Correlacionar los parmetros fsico qumico con la calidad de la droga.
2. DETERMINACION DE CENIZAS:
Se entiende por cenizas el residuo que queda despus de la ignicin de una
droga. Su importancia radica en que por el uso inadecuado de insecticidas, la
polucin del medio ambiente por los contaminantes, que contienen sustancias
difcilmente biodegradables, como son algunos metales pesados; y tambin la
presencia de adulterantes como tierra y arcilla, tanto en las plantas medicinales o
alimenticias hacen que se manifieste un porcentaje elevado de cenizas respecto
de la muestra de referencia.
2.1.
OBJETIVOS:
Capacitar en la tcnica de determinacin de cenizas
Determinar los porcentajes de cenizas de las drogas vegetales
Relacionar el grado de contaminacin con el porcentaje de cenizas
2.2.
FUNDAMENTO:
Las cenizas son el residuo inorgnico que queda despus de la destruccin de la
materia orgnica, quedando los cationes como carbonatos, sulfatos, fosfatos
respectivamente
2.3.
CENIZAS TOTALES:
Permite determinar la cantidad de material remanente despus de la ignicin:
cenizas fisiolgicas, derivados de los tejidos de las plantas y cenizas no
fisiolgicas que son el residuo que queda despus de la ignicin de la materia
extraa (polvo, arena, tierra, etc.) adheridos a la superficie de la droga.
11
FARMACIA Y BIOQUIMICA
Crisol de porcelana
cido clorhdrico al 10%
Agua destilada
Papel de filtro libre de cenizas
Pinza
Desecadora
Balanza analtica
Mufla
PROCEDIMIENTO:
Pesar de 2g a 3g la muestra pulverizada y tamizada con una desviacin
permisible de 0.5mg en un crisol de porcelana, previamente tarada. Caliente
suavemente la porcin de ensayo aumentando la temperatura hasta carbonizar y
posteriormente incinerar en un horno mufla a una temperatura de 700 a 750C,
sino seala otra temperatura en la norma especfica durante 2 horas.
Enfriar el crisol en una desecadora y se pesa, repitindose el proceso hasta que
dos pesadas sucesivas no difieran en ms de 0.5mg (masa constante).
RESULTADOS:
Mceniza
Mcrisol
%C
x100
Mmuestra
Mcrisol
2.4.
DETERMINACION DE HUMEDAD:
Un exceso de agua en una droga puede provocar el crecimiento microbiano, la
presencia de hongos o insectos y el deterioro, seguido de la hidrlisis de los
principios activos. Este ensayo es especialmente importante para drogas que
absorben humedad fcilmente o se deterioran rpidamente en presencia de
humedad.
2.4.1. OBJETIVOS:
Determinar el porcentaje de humedad de las drogas vegetales
Relacionar humedad con contaminacin microbiana.
2.4.2. FUNDAMENTO:
El agua contenido en los vegetales se determina por evaporacin, a una
temperatura apropiada, para que difunda por los tejidos vegetales desde los ms
interiores hasta la superficie, luego por pesada simple se determina el peso seco y
por diferencia se determina la humedad.
2.4.3. METODO DE DESECACION:
12
FARMACIA Y BIOQUIMICA
Estufa de Calentamiento
Cpsula de Porcelana
Desecador
PROCEDIMIENTO:
De la muestra de laboratorio, con el grado de trituracin que determina la norma
especfica, pesar 2g con desviacin permisible de 0.5mg y se transfieren a una
cpsula de porcelana previamente tarada y secada, se calienta y se deseca a
105C durante 2 horas. La cpsula se coloca en una desecadora donde se enfra
a temperatura ambiental y se pesa, colocndose nuevamente en la estufa durante
1 hora, volvindose a pesar hasta obtener una masa constante.
RESULTADOS:
Mmuestra
desecada
Mcpsula
%H
x
100
Mmuestra
Mcpsula
2.5.
TAMIZAJE FITOQUIMICO:
FUNDAMENTO:
Se fundamenta en la extraccin selectiva de los principios activos contenidos en
un material vegetal, aprovechando su solubilidad en diferentes solventes,
empezando la extraccin en solventes de menor polaridad como el ter etlico, un
solvente de mediana polaridad como es el alcohol etlico y finalmente con un
solvente de alta polaridad como es el agua. Cada uno de los extractos ayudados
por la microqumica permite identificarlos mediante la formacin de precipitados,
coloracin, etc.
Estas reacciones se caracterizan por ser selectivas para las clases o grupos de
compuestos que se investigan, son simples y rpidas, detectan la mnima cantidad
posible y utilizan un mnimo de equipo de laboratorio.
13
FARMACIA Y BIOQUIMICA
2.5.1. OBJETIVOS:
Determinar mediante el tamizaje fitoqumico la presencia de metabolitos
secundarios
Verificar la presencia de sustancias conocidas en especies medicinales
conocidas.
2.5.2. MATERIALES Y REACTIVOS:
ter etlico
Papel de filtro
Alcohol etlico
Esptula pequea
Agua destilada
Embudo
Tubos de ensayo
Gradillas
2.5.3. PROCEDIMIENTO:
EXTRACTO
ETEREO
RESIDUO +EtOH
EXTRACTO
ETANOLICO
RESIDUO + H2O
EXTRACTO
ACUOSO
RESIDUO
14
FARMACIA Y BIOQUIMICA
RESULTADOS:
15
FARMACIA Y BIOQUIMICA
2.7.
DISCUSION:
16
FARMACIA Y BIOQUIMICA
2.8.
CONCLUSIONES:
2.9.
CUESTIONARIO:
17
FARMACIA Y BIOQUIMICA
2.10.
BIBLIOGRAFIA:
PRACTICA N 03
18
FARMACIA Y BIOQUIMICA
3.1.
OBJETIVOS:
Obtener un extracto vegetal utilizando un percolador
Caracterizar fsica y qumicamente el extracto
Optimizar los parmetros para obtener un mejor extracto
3.2.
FUNDAMENTO:
La lixiviacin o percolacin es un mtodo de extraccin muy relacionado al
desarrollo de la Farmacia en cuanto a la extraccin se refiere en el siglo XIX. La
importancia de ste mtodo se evidencia pues la Farmacopea de los Estados
Unidos lo acepta como procedimiento oficial desde 1840. Se utiliza para la
preparacin de uno de los extractos ms difundidos en preparaciones galnicas:
los extractos fluidos. Los extractos fluidos son extractos lquidos obtenidos a partir
de un material vegetal utilizando como solventes soluciones hidroalcohlicas.
3.3.
MUESTRA:
Se utilizar como muestra una planta medicinal previamente desecada y
pulverizada.
3.4.
3.5.
MATERIALES Y REACTIVOS:
Percolador de plstico
Silicagel G
Papel Indicador
Acetato de Etilo
Refractmetro
cido clorhdrico
Picnmetro
Papel de filtro
Lmpara ultravioleta
PROCEDIMIENTO:
19
FARMACIA Y BIOQUIMICA
Ppicnmetr
o
25
c Pmp
D
H
O
2
P
Picnmetro
H
O
2
totales presentes.
Determinacin de pH:
La acidez o alcalinidad de las soluciones se caracterizan por el valor del ndice
de hidrgeno o pH.
Anlisis capilar:
Es un mtodo ingenioso e interesante para la caracterizacin de extractos y
tinturas. Este mtodo se basa en los fenmenos de absorcin y reparticin de
sustancias en materiales colorantes a travs de los espacios capilares del
material inerte que constituye el papel de filtro. Para el anlisis e interpretacin
de la imagen se tienen en cuenta los aspectos siguientes:
Color
20
FARMACIA Y BIOQUIMICA
Altura
Descripcin de las diferentes partes
Cambios de coloracin con amonaco
Examen bajo la luz ultravioleta
Tamizaje fitoqumico:
Comprobar la composicin qumica del extracto realizando reacciones
qumicas especficas.
Identificacin General:
Caracterizar mediante una cromatografa la huella digital de la muestra.
3.6.
RESULTADOS:
21
FARMACIA Y BIOQUIMICA
22
FARMACIA Y BIOQUIMICA
3.7
DISCUSION:
3.8
CONCLUSIONES:
3.9
CUESTIONARIO:
23
FARMACIA Y BIOQUIMICA
3.10
BIBLIOGRAFIA
PRCTICA N 04
4.1
DETERMINACIN DE AZCARES:
4.1.1
PRUEBAS QUIMICAS:
Determinacin cualitativa de azucares: Reacciones generales:
4.1.2 OBJETIVOS:
Determinar la presencia de carbohidratos o azcares en drogas naturales
4.1.3
4.1.4
FUNDAMENTO:
24
FARMACIA Y BIOQUIMICA
MATERIALES Y REACTIVOS:
Tubos de ensayo
Reactivo de Antrona
Gradilla
H2SO4
Reactivo de Molish
4.1.6
PROCEDIMIENTO:
En un matraz preparar una solucin al 2% de Miel de Abeja y tomar una alcuota
en un tubo de ensayo limpio y seco, aadir 1 ml del reactivo de Molish o de
Antrona, agitar, deslizar por las paredes del tubo II gotas de H 2SO4 concentrado.
En la zona de contacto se observar la formacin de un anillo coloreado que
indicar reaccin positiva.
4.2
4.2.1
OBJETIVO.
Determinar el poder reductor de los azcares contenidos en drogas naturales.
4.2.2
FUNDAMENTO:
Debido a la presencia de grupos funcionales aldehdos y cetonas en las molculas
de los azcares, stos poseen un poder reductor que se manifiesta sobre ciertas
sales metlicas (Cu++, Ag+, Bi+++) y sustancias orgnicas oxidadas como el cido
pcrico, teniendo como condicin el medio alcalino y el calor.
4.2.3
4.2.4
MATERIALES Y REACTIVOS:
Reactivo de Fehling
Reactivo de Brown
Reactivo de Benedict
Tubos de Ensayo
Reactivo de Tollens
NaOH 10%
Reactivo de Nylander
Bao Mara
PROCEDIMIENTO:
25
FARMACIA Y BIOQUIMICA
4.2.6
4.3
ALMIDON:
Principal sustancia de reserva de los vegetales, el almidn es una fuente
energtica indispensable en la alimentacin del hombre y de gran nmero de
animales. Presente en todos los rganos vegetales. Qumicamente esta formado
26
FARMACIA Y BIOQUIMICA
OBJETIVOS:
Caracterizar el almidn por reacciones qumicas y observacin microscpica
Identificar la amilopectina y la amilasa
Hidrolizar en medio cido el almidn
4.3.2
FUNDAMENTO:
El almidn se identifica con el I2 por una reaccin de pseudoadicin dando una
coloracin caracterstica y al microscopio, se observa el hilio y las estras tpicas
de cada tipo de almidn. La hidrlisis del almidn permite identificar la amilasa y
la amilopectina; dando coloracin azul y rojo respectivamente a medida que se va
hidrolizando.
4.3.3
4.3.4
MATERIALES Y REACTIVOS
4.3.5
Matraz de 250 ml
Reactivo de Molish
Pipetas de 2,5 y 10 ml
Refrigerante de reflujo
Reactivo de Lugol
Pinzas
Microscopio
Soporte Universal
Lamino portaobjeto
Tubos de ensayo
HCl concentrado
EXTRACCION
Rallar el tubrculo sobre abundante agua, luego decantar el lquido de lavado en
recipiente apropiado. Dejar sedimentar y lavar por decantacin varias veces.
Secar si es necesario.
4.3.6
REACCIONES DE IDENTIFICACION:
Solubilidad: en agua fra insoluble y soluble en agua caliente, formando una
masa semitransparente (engrudo de almidn)
27
FARMACIA Y BIOQUIMICA
:
:
Incolora :
4.4
Amilodextrina
Eritrodextrina
Acrodextrina
INULINA:
La inulina, es un oligofructano, es un compuesto del almacenamiento principal en
muchas plantas de la familia de las Compositae. Sin embargo, en el yacon la
inulina parece ser el componente principal. Los Oligosacaridos del yacon han sido
-(21)-fructooligosaccharides con la sacarosa terminal.
4.4.1
OBJETIVOS:
Determinar la presencia de inulina en una muestra vegetal
Diferenciar la inulina del almidn
Determinar la presencia de fructosa
4.4.2
FUNDAMENTO:
La raz de Polymnia sonchifolia yacon contiene inulina que es un polisacrido
formado por unidades de fructosa, adems contiene fructosa libre y por
oligofructanos u oligosacrdios formados por fructosa.
4.4.3
4.4.4
MATERIALES Y REACTIVOS:
Vaso de precipitados
Fenol
Pipetas
Reactivo de Seliwanoff
28
FARMACIA Y BIOQUIMICA
4.4.5
Cocina elctrica
Reactivo de Lugol
Alcohol absoluto
Reactivo de Molish
Fructosa
Reactivo de Benedict
EXTRACCION:
Tomar una cantidad apropiada de raz de yacon, lavarlo adecuadamente, retirar
la cscara y licuarlo, trabajar con el licuado y con el jugo.
4.4.6
REACCIONES DE IDENTIFICACION:
Tomar una alcuota en un tubo de ensayo y aadirle el Reactivo de Molish
Tomar una alcuota en un tubo de ensayo y aadirle el Reactivo de Lugol
Tomar una alcuota en un tubo de ensayo y aadirle el Reactivo de Benedict
Tomar una alcuota en un tubo de ensayo y aadirle el Reactivo de Seliwanoff
Tomar una alcuota en un tubo de ensayo, precipitar con alcohol absoluto y
observar al microscopio.
4.5
GOMAS
Son sustancias que exudas de los rganos vegetales, despus de un traumatismo
la secrecin tiende a taponar la herida, es posible tambin que esta secrecin se
relaciona con las condiciones climticas: sera en tal caso una manifestacin de
adaptacin a la sequedad. Qumicamente es un polisacrido cido, fuertemente
acetilado, por hidrlisis parcial se obtiene ramnosa, cido D-galacturnico,
galactosa, cidos aldobiurnicos y un trisacrido cido que lleva glucosa.
4.5.1
OBJETIVO
Caracterizar gomas de inters farmacutico
Diferenciar goma de un muclago.
4.5.2
FUNDAMENTO.
Las gomas se solubilizan en agua, se bincha rpidamente y da un gel viscoso. Al
calentar la viscosidad disminuye y se obtiene una dispersin translcida. Por
hidrlisis cida, produce azcares reductores.
4.5.3
4.5.4
MATERIALES Y REACTIVOS
29
FARMACIA Y BIOQUIMICA
4.5.5
Tubos de ensayo
Balanza
HCl concentrado
Beaker de 100mL.
REACCIONES DE IDENTIFICACION
Preparar una solucin de goma arbiga al 1%, suadir 0.1 ml de HCI
concentrado. Llevar al BM por 15, neutralizar y realizar la prueba para
azcares reductores( Fehling, Benedict)
A unos 2 ml de la solucin de gomosa trtelo con la SR. Acetato Neutro de
Plomo al 5%, se ver la formacin de un precipitado.
4.6
MUCILAGOS
Los muclagos se les consideran como constituyentes celulares normales,
preexistentes en formaciones histolgicas, especializadas, frecuentes en el
tegumento externo de las semillas.
4.6.1
OBJETIVOS.
Caracterizar muclagos de inters farmacutico
Identificar los muclagos por sus reacciones caractersticas.
4.6.2
FUNDAMENTO.
Los muclagos se caracterizan por extrarseles con agua caliente, a partir de
semillas de Linaza, y se le caracteriza mediante reacciones de identificacin
propias de los muclagos.
4.6.3
4.6.4
MATERIALES Y REACTIVOS
4.6.5
Beaker de 100 ml
cido Tnico 5%
Tubos de ensayo
Alcohol absoluto
Gradilla
Acetona
EXTRACIN
30
FARMACIA Y BIOQUIMICA
REACCIONES DE IDENTIFICACIN
A 3 ml de la sol. trtelos con gotas de la SR. de acetato neutro de plomo 5% y
observar la formacin de un precipitado.
Tratar iguales volmenes de muclago con la SR. de cido tnico y observar la
formacin de un precipitado gelatinoso.
Tratar iguales volmenes de muclago con alcohol de 95 y observar la
formacin de un precipitado.
Tratar iguales volmenes de muclago con acetona Q.P. y observar la
formacin de un precipitado.
Tratar iguales volmenes de muclago con cido oxlico al 10% y observar la
formacin de un precipitado.
4.7
PECTINAS
Son macromolculas glucdicas constituyentes de la laminilla media de la pared
de las clulas vegetales, las sustancias pcticas forman un cemento que une las
clulas unas con otras. Las pectinas son abundantes en los frutos; su naturaleza
evoluciona con la edad de los tejidos: en principio insolubles, y asegurando la
rigidez de estos tejidos, se degradan durante la maduracin en azcares y cidos.
4.7.1
OBJETIVOS
Extraer pectinas de inters farmacutico
Identificar mediante reacciones qumicas a las pectinas.
4.7.2
FUNDAMENTO.
La extraccin de pectinas se realiza, primero inactivando las enzimas por
ebullicin y luego se solubilizan en caliente en soluciones acuosas cidas. Las
pectinas al hidrolizares dejan en libertad a sus componentes
H+
cido Pctico
4.7.3
Galactosa + Arabinosa
31
FARMACIA Y BIOQUIMICA
4.7.4
4.7.5
MATERIALES Y REACTIVOS.
Alcohol etlico
NaOH 3N
HCl diluido
Acetona Q.P.
Equipo de BM
Tubos de ensayo
Alcohol absoluto
Vaso de precipitado
EXTRACCION
Pesar algunos gramos de corteza de limn o naranja previamente rallada, desecar
en la estufa a 105C por 15. Purificar esta corteza desecada con tres porciones
de alcohol etlico de 25mL., cada una, el residuo tratarlo con 10mL de HCl diluido
en BM hasta pequeo volumen.
4.7.6
REACCIONES DE IDENTIFICACION
Un ml de la solucin con gotas de NaOH 3N formacin de un pp
Un ml de la solucin con 5 ml de acetona, formacin de un gel incoloro
Un ml de la solucin con 5 ml de alcohol, formacin de un gel.
4.8
RESULTADOS :
32
FARMACIA Y BIOQUIMICA
33
FARMACIA Y BIOQUIMICA
4.9
DISCUSION:
4.10
CONCLUSIONES:
4.11
CUESTIONARIO
34
FARMACIA Y BIOQUIMICA
35
FARMACIA Y BIOQUIMICA
4.12
BIBLIOGRAFIA:
PRCTICA N 5
GLICOSIDOS CARDIOTONICOS Y FENOLICOS
5.1
GLICOSIDOS CARDIOTONICOS
Los glucsidos cardiotnicos constituyen un grupo perfectamente individualizado y
de gran homogeneidad estructural y farmacolgica. Todos de origen vegetal, son
medicamentos de eleccin en la insuficiencia cardaca, a pesar de su reducido
margen teraputico. La estructura de estos compuestos es muy homognea,
consta de una genina de naturaleza esterodica y un resto azcarado que
generalmente es un oligosacrido formado por desoxiazcares.
5.1.1
OBJETIVOS:
Identificar las drogas vegetales con aglicn esteroide
36
FARMACIA Y BIOQUIMICA
FUNDAMENTO:
Los glicsidos cardiotnicos, se caracterizan por tener un aglicn esteroide y un
resto azucarado, formado por tres azcares llamados digitoxosas. Las reacciones
qumicas buscan identificar el aglicn esteroide, formando acetatos con el grupo
hidroxilo que une al aglicn, con el resto azucarado, al ncleo lactnico y a las
digitoxosas mediante pruebas especficas.
5.1.3
5.1.4
MATERIALES Y REACTIVOS:
Pipeta de 10 ml.
Acetato de Plomo 5%
Beaker de 250 ml
Cloroformo
Embudo de vidrio
Anhdrido actico
Tubos de ensayo
H2SO4 concentrado
Papel de Filtro
Reactivo de Kedde
5.1.5 EXTRACCION:
A unos 2g de polvo de hojas, agregarle 10mL de alcohol de 70 y calentar
suavemente, dejndolo en contacto por 3, filtrar y a 5mL del filtrado adicionarle
10mL de agua; precipitar con V gotas de acetato de plomo 5%, agitar y filtrar. El
lquido filtrado se agita con cloroformo, decantar, separar y evaporar el solvente
con las precauciones debidas.
5.1.6
REACCIONES DE IDENTIFICACION
Ensayo de Kedde: Una alcuota de un extracto etanlico se mezcla con 1mL
del reactivo y se deja reposar durante 5 a 10 minutos. Un ensayo positivo es
en el que se desarrolla una coloracin violcea, persistente durante 1-2 horas.
Reaccin de Lieberman-Bouchard: A una alcuota del extracto etanlico
evaporar a sequedad y redisolverlo en cloroformo, aadirle anhdrido actico y
por las paredes dejar caer cido sulfrico concentrado. Observar la formacin
de un anillo o coloracin.
5.2
GLICOSIDOS FENOLICOS:
Los compuestos fenlicos sencillos son bastantes raros; probablemente,
provienen de la descarboxilacin oxidativa o no de los cidos benzoicos: as el
arbutsdo, podra ser el producto de la descarboxilacin de un glucsido del
37
FARMACIA Y BIOQUIMICA
5.2.1
Populina
Salicina
OBJETIVO:
Dar a conocer la presencia de grupos fenlicos en Plantas Medicinales
Conocerlas reacciones de identificacin para grupos fenlicos.
5.2.2
FUNDAMENTO:
Los glicsidos fenlicos se solubilizan en agua por su resto azucarado, facilitando
su extraccin en medio acuoso. La presencia de grupos fenlicos se pone en
evidencia con el F+3, por la formacin de un complejo y previa hidrlisis se detecta
los azcares reductores por la formacin de un precipitado rojo de Cu 20.
5.2.3
5.2.4
MATERIALES Y REACTIVOS:
Beaker de 200 ml
FeC13 1% en agua
Tubos de ensayo
Papel Filtro
Reactivo de Benedict
Embudo
Placas cromatogrficas
H2S04 concentrado
REACCIONES DE IDENTIFICACION.
Tratar mg del pp. con H2S04 concentrado y observar la formacin de color.
Tratar la muestra con FeCI3, dando una coloracin pardo violeta, pero despus
de la hidrlisis la salicina se descompone y se libera la saligenina, la cual con
el FeCl3, da una coloracin azul, por la presencia de grupo fenlico libre.
38
FARMACIA Y BIOQUIMICA
5.3
Soporte
: Silicagel G 60
RESULTADOS:
39
FARMACIA Y BIOQUIMICA
5.4
DISCUSION:
5.5
CONCLUSIONES:
40
FARMACIA Y BIOQUIMICA
5.6
CUESTIONARIO:
Importancia teraputica de los glicsidos cardiotnicos
Esquema de la placa cromtografica de la salicina y explique el resultado
Por qu se utiliza como standard el cido salcilico?
Por qu se determina azcares reductores en la solucin hidrolizada?
Se puede determinar por cromatografa un glicsido cardiotnico. Si es
afirmativa la respuesta. Cul sera el procedimiento y que reactivos
emplearla?
Qu otras especies contienen glicsidos cardiotnicos?
41
FARMACIA Y BIOQUIMICA
5.7
BIBLIOGRAFIA:
42
FARMACIA Y BIOQUIMICA
PRCTICA N 06
6.1.
GLICOSIDOS CIANOGENETICOS
La cianognesis es la facultad que tienen ciertos vegetales de producir cido
cianhdrico. Las sustancias ciangenas vegetales, son siempre heterosidos de 2hidroxinitrilos: los heterosidos cianogenticos.
6.1.1 OBJETIVOS:
Conocer la presencia de HCN en Plantas Medicinales
6.1.2 FUNDAMENTO:
La prunasina es el glicsido cianognetico que se encuentra en especies del
gnero Prunas y que se evidencia por la reaccin de Grignard o del papel
picrosodado y el resto azucarado del glicsido se identifica por la reaccin de
Benedict.
6.1.3 MUESTRA: Hojas de Pranus serotina Capul o Pranus cerasus Guinda
6.1.4 MATERIALES Y REACTIVOS:
Matraz con tapa esmerilada de 250 ml
Embudo
Tubos de ensayo
Papel Picrosodado
Papel filtro
Reactivo de Benedict
43
FARMACIA Y BIOQUIMICA
BM hasta observar la formacin de un pp. rojo ladrillo que nos indica la presencia
de azcares reductores.
6.1.6 DETERMINACION CUANTITATIVA
Del HCN en una especie vegetal, despus de su extraccin
FUNDAMENTO.
Consiste en liberar el HCN, que se fijar en medio alcalino. Despus se
cuantificar con Ag+ hasta la formacin de un complejo de dicianoplata y el fin de
la reaccin es un precipitado opalescente de yoduro de plata.
Muestra: Hojas frescas de Prunus laurocerasus Laurel cerezo
Materiales y Reactivos:
Baln de 250mL
KI 10%
Erlenmeyer de 200mL
Bureta de 10mL
Refrigerante
Pipetas de 1mL
AgNO3 0.03N
Soporte Universal
NaOH 10%
Probeta graduada
Procedimiento
Pesar unos 5 g de laurel cerezo, colocarlas en un baln, aadirle 25mL de agua
caliente (50C). Tapar hermticamente y someterlo a BM por 10. Destapar y unirlo
al dispositivo de destilacin, con el extremo del refrigerante sumergido en un
erlenmeyer que contiene 10mL. de NaOH 10% y 1mL Kl 10%. Empezar la
destilacin con cuidado sin necesidad de una ebullicin fuerte, a fin de recoger
unos 20mL de destilado. Terminada la destilacin, el extremo del refrigerante
lavarlo con agua destilada. Valorar con NO 3Ag 0.03N hasta ligera opalescencia.
Cada ml de AgNO3 equivale a 1.62 mg de HCN.
6.2
GLICOSIDOS ANTRAQUINONICOS:
Las quinonas son compuestos oxigenados que corresponden a la oxidacin de
compuestos aromticos. Las diferentes drogas de este grupo, se caracterizan por
la presencia de compuestos fenlicos, ms o menos oxidados (antronas,
antranoles y antraquinonas), relacionados con el antraceno. El ncleo bsico,
44
FARMACIA Y BIOQUIMICA
Antraquinonas
6.2.1 OBJETIVOS:
Determinar la presencia de antraquinonas en Plantas Medicinales
Determinar la presencia de antraquinonas en la cochinilla
Cuantificar antraquinonas por espectrofotometra
6.2.2 FUNDAMENTO
Las antraquinonas se caracterizas por sublimar, dando cristales cuya coloracin
vara en medio alcalino y por extrarseles por cambio de solvente, de orgnico a
un medio alcalino dando coloracin roja rosada.
8.2.3 MUESTRA: Hojas y flores Coccus cacti Cochinilla
8.2.4. MATERILES Y REACTIVOS:
6.2.5
Cpsula de porcelana
NaOH diluido
Luna de Reloj
HCl diluido
Tubos de ensayo
NH4OH diluido
Vaso de 250 ml
Alcohol etlico
Papel de Filtro
Erlenmeyer de 250 ml
Acido Brico
Potencimetro
Acido Ntrico
Pera de separacin
KOH alcohlica
H2SO4
REACCIONES DE IDENTIFICACION
45
FARMACIA Y BIOQUIMICA
RESULTADOS:
46
FARMACIA Y BIOQUIMICA
6.4
DISCUSION:
8.4
CONCLUSION:
6.5
CUESTIONARIO
47
FARMACIA Y BIOQUIMICA
48
FARMACIA Y BIOQUIMICA
6.6
BIBLIOGRAFIA:
PRCTICA N 07
DETERMINACION DE SAPONINAS
49
FARMACIA Y BIOQUIMICA
7.1
7.2
7.3
Saponina Esteroide
OBJETIVO:
FUNDAMENTO:
Las saponinas se extraen en medio alcohlico y se precipitan por cambio de
solventes utilizando ter y se cuantifica teniendo en cuenta sus propiedades de
disminuir la tensin superficial de los lquidos y formar steres de colesterina con
los glbulos rojos produciendo su rompimiento y liberacin de la hemoglobina.
7.4
7.5
MATERIALES Y REACTIVOS
Matraz de 250 ml
50
Cocina elctrica
FARMACIA Y BIOQUIMICA
7.6
Pipetas de 1 y de 5 ml
Estufa
Eter de Petrleo
Embudo
Eter Etlico
Papel de Filtro
Alcohol absoluto
Tubos de ensayo
Refrigrante
H2SO4
Anhdrido actico
METODO DE EXTRACCION
Utilizar unos 100 g de droga desecada y pulverizada y hacer una lixiviacin
primero con ter de petrleo, con el objeto de eliminar las materias grasas.
Despus desecar el material y tratar con unos 300 ml de alcohol absoluto, calentar
a ebullicin al BM en un matraz con refrigerante a reflujo por 4 horas. Filtrar el
lquido extractivo y concentrarlo hasta unos 50 ml. A estos 50 ml agregar 3
volmenes de ter etlico (150 mL) con el objeto de precipitar las saponinas
extradas por cambio de solvente.
7.7
REACCIONES DE IDENTIFICACION
: Silicagel G
7.8
: Colesterol Q.P.
51
FARMACIA Y BIOQUIMICA
7.9
RESULTADOS:
52
FARMACIA Y BIOQUIMICA
7.10
DISCUSION
7.11
CONCLUSION:
7.12
CUESTIONARIO
53
FARMACIA Y BIOQUIMICA
54
FARMACIA Y BIOQUIMICA
7.13
BLIOGRAFIA
PRACTICA N 08
55
FARMACIA Y BIOQUIMICA
DETERMINACION DE FLAVONOIDES
8.1
FLAVONOIDES:
Los flavonoides, son compuesto fenlicos y son en su mayora pigmentos
responsables de la coloracin de numerosas flores y de algunos frutos. El
elemento comn de estos compuestos se han descrito varios millares de los
mismos, esta relacionado con un ncleo bsico: el 2-fenil cromano. Los
flavonoides se encuentras ampliamente distribuidos en el reino vegetal,
generalmente en la forma soluble de glicsidos. Sus propiedades farmacolgicas
estn asociadas con la reduccin de la permeabilidad capilar. Entre estos
tenemos a la rutina, la hesperidina y la quercetina.
OBJETIVOS:
Determinar la presencia del flavonoide rutina y hesperidna
Conocer las reacciones qumicas de identificacin para flavonoides
8.2
DETERMINACION DE LA RUTINA:
8.2.1
FUNDAMENTO:
La rutina es un flavonoide que tiene una mejor solubilidad en medio alcohlico,
que se caracteriza por dar positiva la prueba de Shinoda con una variacin de
color que depende del tipo de estructura, asimismo se determina sus grupos
fenlicos con el F+3 y por dar fluorescencia frente a la luz UV.
8.2.2
8.2.3
MATERIALES Y REACTIVOS:
ter etlico
Equipo soxhlet
HCl concentrado
FeCI3 1% y EtOH
56
FARMACIA Y BIOQUIMICA
Lmpara de Luz UV
Alcohol amlico
Placas cromatogrficas
Acetato de Plomo 5%
8.2.4 EXTRACCION
Fraccionar las hojas y proceder a un desengrasado en soxhlet con ter, con el fin
de eliminar las grasas, resinas y otros constituyentes. Al residuo tratarlo
posteriormente con agua caliente y decantar el lquido sobrenadante. Concentrar
el extracto acuoso y dejar en reposo por 5 das, tiempo en el cual cristalizar la
rutina. Si se desea purificar, efectuar cristalizaciones empleando alcohol y por
ltimo desecar.
8.2.5
REACCIONES DE IDENTIFICACION
Reaccin con el FeCl3 1%: Utilizar una solucin acuosa de rutina, aadirle gotas
del reactivo de FeCl3 1%.
Observar a la Luz UV con y sin vapores amonaco en un cromatograma
8.3
DETERMINACION DE LA HESPERIDINA:
La hesperidina es un complejo ctroflavonoIde que se encuentra en la porcin
blanca y coloreada de la cscara de naranja.
8.3.1
OBJETIVOS:
57
FARMACIA Y BIOQUIMICA
8.3.4
MATERIALES Y REACTIVOS:
Alcohol diluido
NaOH 1%
Beaker de 100 y 250Ml
HCI 10%
Pipetas de 5Ml
Tubos de Ensayo
Lmpara UV
ClFe3
Embudo
H2SO4 concentrado
Papel Filtro
HNO3 concentrado
HCl concentrado
NaOH 30%
NH3 QP
Placas Cromatogrficas
8.3.4 EXTRACCION:
Tratar 5 g de la parte blanca de la cscara de naranja con una mezcla de 20 mL
de alcohol diluido y 5mL de una solucin de NaOH 10%, dejar en reposo 24 h y
aadirle HCl al 10% hasta pH 5, con lo que se consigue precipitar la hesperidina.
Dejar en reposo y filtrar, el lquido filtrado se vuelve a dejar en reposo, filtrar
nuevamente sobre el anterior y lavar el pp. hasta reaccin neutra. Posteriormente
secar el residuo, con lo que se consigue que cristalice la hesperidina.
8.3.5 REACCIONES DE IDENTIFICACION:
Tratar mg del pp. ms gotas de H. 2S04 concentrado, inicialmente da coloracin
amarillo rojizo, que por calentamiento pasa a rojo.
Tratar mg del pp. ms gotas de HCI concentrado, da coloracin amarillo intenso.
Tratar mg del pp. ms gotas de NaOH 30 %, da coloracin amarillo naranja.
Reaccin de Shinoda similar a la Rutina
Observar la Fluorescencia a la lmpara UV con y sin vapores de NH 3 en un
cromatograma
8.4
RESULTADOS:
58
FARMACIA Y BIOQUIMICA
59
FARMACIA Y BIOQUIMICA
8.5
DISCUSION:
8.6
CONCLUSIONES:
8.7
CUESTIONARIO:
60
FARMACIA Y BIOQUIMICA
61
FARMACIA Y BIOQUIMICA
8.8
BIBLIOGRAFIA:
PRCTICA N 9
DROGAS CON CUMARINAS E IRIDOIDES
9.1
62
FARMACIA Y BIOQUIMICA
Fraxino
9.1.1 OBJETIVO:
Determinar la presencia de cumarinas en Plantas Medicinales
Observar la Fluorescencia a la Luz UV
9.1.1
FUNDAMENTO:
Las cumarinas se extraen con acetona tambin en medio alcohlico dando
soluciones coloreadas. La Reaccin de Baljet es para detectar grupos lactnicos y
la reaccin del hidroxamato es por el grupo carbonilo y la amina formndose un
compuesto condensado.
9.1.2
9.1.3
MATERIALES Y REACTIVOS:
Matraz de 250 ml
Refrigerante
Embudo
Tubos de ensayo
NaOH 5%
NO3Ag 1N en acetona
FeCl3
NaOH 5%
HCl 0.5 mol/L
NaOH 2N
cido actico glacial
NH3
9.1.4 OBTENCION:
Se toman 5 g de raz, fresca o desecada, triturada y pulverizada y se le adiciona
50 mL de acetona ter de petrleo, se le somete a una extraccin por reflujo por
30 minutos, obtenindose una solucin de color amarillo. Filtrar.
9.1.5
REACCIONES DE IDENTIFICACION:
63
FARMACIA Y BIOQUIMICA
Soporte
: Silicagel G
Revelador
9.2
monoterpenos
que
se
caracterizan
por
un
esqueleto
biciclico
Iridoide
Valepotriato
64
Loganina
FARMACIA Y BIOQUIMICA
9.2.1
OBJETIVO
FUNDAMENTO:
Se fundamenta en una extraccin del iridoide en una especie vegetal fresca y su
posterior determinacin con vainillina en medio cido.
9.2.3
9.2.4
MATERIALES Y REACTIVOS
9.2.5
Matraz de 250 ml
Capilar de vidrio
Vainillina
Papel de filtro
HCl
Alcohol de 70
Placas cromatogrficas
H2SO4 concentrado
Ans aldehdo
Lmpara UV
EXTRACCION
Macerar algunos gramos de hojas de Plantago major llantn o raz de Valeriana
0ff valeriana, recin recolectados y finamente triturados en cantidad suficiente de
alcohol de 70 para cubrir y dejar en reposo por espacio de 48 horas a
temperatura ambiente. Filtrar.
9.2.6
REACCIONES DE IDENTIFICACION
65
FARMACIA Y BIOQUIMICA
y observar la coloracin persistente que oscila entre la gama del rosado al rojo en
caso positivo.
CCF
9.3
Soporte:
Silicagel G
AcOH:HCl (2:8)
Lmpara UV
RESULTADOS:
66
FARMACIA Y BIOQUIMICA
9.4
DISCUSION:
9.5
CONCLUSION:
9.6
CUESTIONARIO:
67
FARMACIA Y BIOQUIMICA
9.7
BIBLIOGRAFIA:
PRCTICA N 10
68
FARMACIA Y BIOQUIMICA
OH
OG
COOH
OH
OG
OG
OG
HO
OH
cido glico
10.1
OH
HO
Tanino glico
OH
OH Catequina
OBJETIVOS:
10.2
FUNDAMENTO:
Los taninos son sustancias de composicin qumica compleja, que al degradarse
o hidrolizarse se obtienen polifenoles relativamente simples. En general son
polmeros de alto peso molecular que forman soluciones coloidales en medio
acuoso. Por su naturaleza fenlica reaccionan con las sales de fierro dando
coloraciones azules o verdes, tienen capacidad de reducir al permanganato,
forman complejos con cationes divalentes como el Pb +2 , Hg+2.
10.3
MUESTRAS:
Vainas de Caesalpinea spinosa tara
Raz de Krameria triandra ratania del Per
Hojas de Piper elongatum matico
10.4
MATERIALES Y REACTIVOS:
Tubos de Prueba
FeCl3 1%
Matraz de 250 mL
KMnO4 1%
Refrigerante
Acetato de Pb 5%
Cocina elctrica
Acetato de Hg 5%
69
FARMACIA Y BIOQUIMICA
10.5
Papel de Filtro
Solucin de gelatina
Embudo
Solucin de alcaloides
EXTRACCION:
Preparar extractos etanlicos al 50 % de las muestras con 48 horas de
anticipacin, con agitacin permanente con la finalidad de extraer los taninos de
las muestras y puedan ser utilizadas en las determinaciones cualitativas, de
diferenciacin y de cuantificacin.
REACIONES CUALITATIVAS DE IDENTIFICACIN:
Filtrar los extractos y concentrar para reducir el volumen y preparar una batera de
tubos de prueba y realizar las siguientes reacciones:
REACCION DE COLORACION CON EL CLORURO FERRICO:
Tomar una alcuota de las muestras y aadirle gotas del reactivo de FeCl 3 1%;
observar el color que se forman:
MATERIALES Y REACTIVOS:
70
FARMACIA Y BIOQUIMICA
10.7
Matraz de 250 mL
Embudo
Beaker
HCl concentrado
Refrigerante
Formol al 38-40%
Cocina elctrica
Pipetas de 5, 10 mL
Papel de Filtro
FeCl3
PROCEDIMIENTO:
Tomar unos 50 mL de la muestra problema al 40%, aadir unos 5 mL de HCl
concentrado y 10 mL de Formol al 38-40% y llevar a ebullicin por unos 30
minutos en un sistema de reflujo. Los taninos glicos no forman precipitados. Los
taninos catquicos forman precipitados insolubles de color rojo. Enfriar y filtrar la
solucin, tomar una alcuota del filtrado y aadirle gotas del reactivo de FeCl 3 en
presencia de acetato de sodio al 5%. Si se forma una coloracin azul oscura,
indica la presencia de taninos glicos o elgicos.
10.8
Equipo de reflujo
Balanza Analtica
Tungstato de sodio
Erlenmeyer
Acido fosfomolbidico
Embudo
Na2CO3
cido tnico
Papel de Filtro
Pipeta de 5mL, 1 mL y 2 mL
Fiola de 50 mL
10.8.2 PROCEDIMIENTO
Pesar 10g de la droga en polvo, se lleva a un frasco cnico de 1000 mL con 500
mL de alcohol al 50%. Mantener en agitacin durante 6 horas en un agitador
magntico, dejar en reposo por 8 horas, luego volver a agitar por 30 minutos y
filtrar. Se transfieren 3 mL del filtrado a un matraz aforado y se diluye con agua
destilada hasta enrase (SOLUCION MUESTRA).
71
FARMACIA Y BIOQUIMICA
M1 y M 2
Solucin Muestra
1.0 mL
Solucin de Referencia
3.0 mL
Agua destilada
5.0 mL
2.0 mL
4.0 mL
2.0 mL
2.0 mL
2.0 mL
1.0 mL
1.0 mL
1.0 mL
AmpxStx
1000
%
Taninos
x
100
AstxMpx
(
100
%
H
)
10.9
Amp
Ast
St
Mp
%H
RESULTADOS:
72
FARMACIA Y BIOQUIMICA
10.10 DISCUSION:
73
FARMACIA Y BIOQUIMICA
10.11 CONCLUSIONES:
10.12 CUESTIONARIO:
74
FARMACIA Y BIOQUIMICA
10.13 BIBLIOGRAFIA:
PRACTICA N 11
11.1
OBJETIVO GENERAL:
75
FARMACIA Y BIOQUIMICA
11.2
11.2.1 OBJETIVOS:
Extraer resinas de un material vegetal
Caracterizar las resinas mediante reacciones qumicas
11.2.2
FUNDAMENTO:
Siendo las resinas compuestos complejos formados por resenos, alcoholes
resnicos, cidos resnicos, resinotanoles, se aprovecha su solubilidad en
solventes orgnicos como el alcohol etlico para su extraccin y posterior
identificacin
de
sus
componentes
mediante
reacciones
qumicas
de
identificacin.
11.2.3 DROGA : Resinas de Schinus molle molle
11.2.4 MATERIALES Y REACTIVOS:
Etanol 70%
Equipo de reflujo
Erlenmeyer
ter
Acetato de Cu 5%
Anhdrido actico
Placas cromatogrficas
Cpsula de porcelana
11.2.5 EXTRACCION:
Tomar unos gramos de Schinus molle Molle y hacer una extraccin alcohlica
utilizando un sistema de reflujo por unos 30 minutos, luego filtrar el extracto y
dividirlo en tubos de ensayo para las reacciones de identificacin caractersticas y
cromatografa en capa fina.
11.2.6 REACCIONES GENERALES DE IDENTIFICACION
76
FARMACIA Y BIOQUIMICA
11.3
Soporte : Silicagel G
CH3
CH3
CH 3
OH
H 3C
CH 3
(-)-Mentol
OH
H3C
CH3
(+)-Isomentol
77
OH
H3C
CH3
(+)-Neoisomentol
FARMACIA Y BIOQUIMICA
11.3.1 OBJETIVOS:
11.3.2 FUNDAMENTO:
Los aceites esenciales son sustancias que pueden ser extrados por arrastre del
vapor de agua, aprovechando su volatilidad al calor y ser separados por su
densidad y solubilidad en medio oleoso, ser identificados por su olor caracterstico
y porque impregnan de sustancia oleosa el papel de filtro.
11.3.3 DROGAS:
Lmina portaobjeto
Alcohol
Agua destilada
Cloroformo
Luz UV
Vainillina clorhdrica
Diclorometano
Tolueno
Acetato de etilo
Mentol
78
FARMACIA Y BIOQUIMICA
Solubilidad en alcohol
Poder rotatorio
ndice de refraccin
Densidad relativa
RESULTADOS:
79
FARMACIA Y BIOQUIMICA
11.5
DISCUSION:
11.6
CONCLUSIONES:
80
FARMACIA Y BIOQUIMICA
11.7
CUESTIONARIO:
Cmo se extraen los aceites esenciales por compresin y utilizando solventes
voltiles
81
FARMACIA Y BIOQUIMICA
11.8
BIBLIOGRAFIA:
PRCTICA N 12
METODOS DE EXTRACCION DE LOS ALCALOIDES
12.1
82
FARMACIA Y BIOQUIMICA
CH3
N
CH3
H3C
HO
12.2
O
Morfina
OH
CH3
Cafeina
OBJETIVOS:
FUNDAMENTO:
Se aprovecha la capacidad de los alcaloides para modificar sustancialmente su
solubilidad en agua o solventes inmiscibles, al variar la naturaleza cido base
del medio.
12.4
MUESTRA:
Hojas de Uncaria tomentosa Ua de Gato
Matraz de 250 mL
Cloroformo
Amoniaco
Oxido de calcio
Pera
de
decantacin
12.4.2 PROCEDIMIENTO:
12.4.3 Extraccin cida:
A Unos 2 g de polvo de una droga que contiene alcaloides, tratarla con 4 mL de
una solucin de HCl 10% o H2SO4; luego filtrar. El lquido filtrado tratarlo con
NH4OH hasta pH 10; adicionarle un solvente orgnico como ter o cloroformo y
83
FARMACIA Y BIOQUIMICA
CUANTIFICACIN DE ALCALOIDES:
12.5.1 Fundamento:
Los alcaloides se extraen cuantitativamente mediante una extraccin alcalina. Se
recuperan como sulfatos y se cuantifica con NaOH 0.1N por retroceso el exceso
de cido sulfrico.
12.5.2 Materiales y Reactivos:
Equipo de Soxhlet
Embudo de separacin
H2SO4 0.1 N
NaOH 0.1N
ter de Petrleo
ter etlico
H2SO4 2 N
Hexano
12.5.3 Procedimiento:
Se pesa 10 g de muestra seca y pulverizada, se humedece con una solucin
saturada de Na2CO3 y se extrae en un soxhlet con una mezcla de EP:Et 2O (1:1),
durante 8 horas. El extracto resultante se extrae con H 2SO4 2 N (1 x 40 mL; 1 x 30
84
FARMACIA Y BIOQUIMICA
mL; 1 x 20 mL). Los extractos cidos se renen y se alcalinizan con una solucin
saturada de Na2CO3 y se extraen con Hexano (1 x 40; 1 x 30; 1 x 25 mL).
Los extractos hexnicos que contienen los alcaloides, se renen y se secan con
sulfato de sodio anhidro y se concentran a sequedad.
La mezcla slida de alcaloides se disuelve en 30 mL de H 2SO4 0.1 N, se agrega
indicador rojo de metilo y se titula con NaOH 0.1N.
12.5.4 Clculo
Donde:
12.6
meq- cido
= 30 mL de H2SO4 0.1N
meq-base
PM
= del estndar
= gramos de muestra
(
meqAcido
meqBase
)
%
AT
xPM
/
1000
g
85
FARMACIA Y BIOQUIMICA
H3C
N
H3C
N
O
O CH3
OCH3
H CH2OH
O
O
OCH3
Cocana
H3C
N
Escopolamina
(-)-Hiosciamina
H CH2OH
O
12.6.1 OBJETIVOS:
12.6.2 FUNDAMENTO:
Se extraen los alcaloides tropnicos por medio de una extraccin cida y se
caracterizan mediante reacciones qumicas generales, reacciones caractersticas
y por cromatografa en capa fina
12.6.3 MUESTRA:
Tubos de Prueba
Pera de decantacin
Amonaco
Cloroformo
Estndar de Cocana
HNO3 concentrado
Estndar de Atropina
Placas de cromatografas
Pulverizador
Capilares
12.6.5 EXTRACCION:
Pesar aproximadamente 10 g de droga seca y pulverizada, colocarla en un matraz
de 250 mL., aadir 100 mL. de HCl 10% y someter al calor en BM por 30 minutos,
agitando con frecuencia, enfriar y filtrar. Trasvasarlo a una pera de decantacin,
alcalinizar hasta pH 10 con amonaco y extraer con 5 mL. de cloroformo por 3
86
FARMACIA Y BIOQUIMICA
12.6.8 IDENTIFICACION
CROMATOGRAFICA
DE
ALCALOIDES
TROPANICO
Muestra
Estndar
Solvente
Soporte
12.7
: Silicagel G
RESULTADOS
87
DE
NUCLEO
FARMACIA Y BIOQUIMICA
88
FARMACIA Y BIOQUIMICA
12.8
DISCUSION:
89
FARMACIA Y BIOQUIMICA
12.9
CONCLUSIONES:
12.10 CUESTIONARIO
90
FARMACIA Y BIOQUIMICA
Las pruebas cualitativas son suficientes para identificar a este tipo de alcaloides
91
FARMACIA Y BIOQUIMICA
13.13 BIBLIOGRAFIA:
BIBLIOGRAFIA
1.
BRUNETON, J.
CACERES, A.
92
FARMACIA Y BIOQUIMICA
3.
CARRASCO, E.
FONT QUER, P.
6.
7.
MIRANDA, M.
SHARAPIN, N.
Fundamentos
de
Tecnologa
de
productos
VALENCIA, C.
1 edicin.
10. WAGNER Y BLADT Plant Drug Analysis: A thin Layer Chromatography Atlas.
Second Edition. Springer-Verlag. 1996.
93