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UNIVERSIDAD CATLICA LOS ANGELES DE CHIMBOTE

Gua de Prctica de FARMACOGNOSIA Y FITOQUIMICA

FARMACIA Y BIOQUIMICA

MG. Q.F. MARIA ISABEL PALACIOS PALACIOS

UNIVERSIDAD CATLICA LOS NGELES DE CHIMBOTE


DEPARTAMENTO DE QUIMICA Y FARMACIA

GUA DE PRCTICAS
FARMACOGNOSIA Y FITOQUIMICA

DOCENTE:
MG. Q.F. MARIA ISABEL PALACIOS PALACIOS
Telefax: 043-3

Erythoxylon coca

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MG. Q.F. MARIA ISABEL PALACIOS PALACIOS

PRESENTACION
El presente Manual de Prcticas, est dirigido a los estudiantes de pregrado de
Farmacia y Bioqumica que cursan la asignatura de Farmacognosia y Fitoqumica de la
Universidad Los Angeles de Chimbote.

Tiene

como

objetivo facilitar

el aprendizaje

del

curso,

integrando

los

conocimientos tericos con los prcticos, siendo una herramienta adecuada de trabajo,
que le permitir desarrollar sus prcticas de laboratorio de manera adecuada y ordenada,
esta dividido en dos grandes grupos.

Espero que el presente Manual de Prcticas sea de utilidad para el estudiante de


Farmacia y Bioqumica de la ULADECH, asimismo se espera las valiosas sugerencias de
colegas y estudiantes para mejorar ediciones futuras.

Finalmente quisiera hacer un reconocimiento a mi familia por el apoyo constante


que me brindan en mi desarrollo personal y profesional.

MG. Q.F. Mara Isabel Palacios Palacios

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INDICE
1. PRACTICA N 01:
Control de calidad macroscpico y microscpico de una droga natural pruebas histolgicas:.. ..

01

2. PRACTICA N 02:
Determinacin de humedad y cenizas de una droga natural,
tamizaje fitoqumico de un extracto vegetal:

11

3. PRACTICA N 03:
Ensayos de solubilidad, preparacin y anlisis de un extracto vegetal

19

4. PRACTICA N 04:
Determinacin de azcares, polisacridos homogneos y
heterogneos: Almidones, gomas, muclagos y pectinas:. .

25

5. PRACTICA N 05:
Determinacin de glicsidos cardiotnicos y fenlicos....

37

6. PRACTICA N 06:
Determinacin de glicsidos antraquinnicos y cianogenticos.

44

7. PRACTICA N 07:
Determinacin de Saponinas:

51

8. PRACTICA N 08:
Determinacin de flavonoides:..

57

9. PRACTICA N 09:
Determinacin de e cumarinas iridoides y mtodos de extraccin: 64
10. PRACTICA N 10:
Determinacin de drogas con taninos glicos y catquicos:..

70

11. PRACTICA N 11:


Determinacin de drogas con aceites esenciales y resinas:...

77

12. PRACTICA N 12:


Determinacin de alcaloides y mtodos de extraccin:..

84

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PRCTICA N 01
CONTROL DE CALIDAD MACROSCPICO Y MICROSCPICO DE UNA DROGA
NATURAL - PRUEBAS HISTOQUIMICAS
1.1.

OBJETIVOS:

Caracterizar

una

especie

medicinal

realizando

observaciones

macroscpicas y microscpicas.

1.2.

Determinar la presencia de impurezas y agentes contaminantes

Realizar pruebas histoqumicas para identificar principios activos.

FUNDAMENTO:
En el mundo, las drogas y preparados fitoteraputicos obtenidos a partir de
plastas medicinales, ocupan un lugar importante en el comercio mundial de
medicamentos, y debido a ello, se ha enfatizado en la necesidad de garantizar su
control de calidad con la aplicacin de tcnicas modernas, uso de parmetros y
patrones adecuados.
Evaluar o valorar las drogas vegetales significa, identificar y determinar su calidad
y pureza, que se va a traducir en su valor intrnseco, es decir en su contenido de
principios activos responsable de su accin farmacolgica. Las impurezas o
materias extraas son aquellas partes de la droga que no corresponden a las
exigencias que seala la monografa en cuanto a color, tamao, estado y grado de
pulverizacin, mezclas con otras partes de la planta, polvo, arena, piedras y otras
sustancias minerales.
Las drogas deben estar libres de organismos patgenos y de microorganismos
insectos y cualquier otra contaminacin animal, incluyendo excretas. No deben de
presentar olores anormales, decoloraciones o algn signo de deterioro. Las
pruebas para contaminacin microbiana, se desarrollan bajo condiciones
diseadas para evitar la contaminacin durante la prueba.

1.3

MUESTRAS:
Planta Medicinal o mezcla de plantas medicinales de venta en mercados o centros
naturistas, tambin algunos preparados o formas farmacuticas de productos
naturales.

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1.4

MATERIALES Y REACTIVOS:

1.5.

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Placas Petri
Balanza Analtica
Microscopio, estereoscpico
Pipetas de 5y l0 ml.
Reactivos para histoqumica

Agua Destilada
Pinza
Laminas Posta y Cubre objetos
Mortero
Beaker de 250 ml.

PROCEDIMIENTO:

1.5.1 EVALUACION MACROSCOPICA Y MICROSCOPICA DE LAS DROGAS:


Como primer aspecto antes de comenzar las descripciones morfolgicas, se debe
conocer las drogas a evaluar con la siguiente informacin:
Nombre cientfico
Nombre vulgar
Familia Botnica
Uso tradicional o reconocido
Planta endmica o aclimatada
Se describir las siguientes caractersticas morfolgicas:

rgano Vegetal

rganos
Subterrneos

Corteza y leos

Caractersticas Botnicas
Tamao, color, olor, forma y consistencia.
Caracteres de Superficie:

Seccin transversal

Fractura

Otras particularidades
Forma
Superficie externa
Superficie interna

Hojas

Forma, textura, superficie, color, olor, dimensiones y


condicin.

Flores

Estado de desarrollo: Color, Olor y peculiaridades

Frutos

Pericarpio, forma, dimensiones, color y olor

Semillas

Caracteres Fsicos: Color, olor y otros.

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1.5.2

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DETERMINACION DE MATERIAS EXTRAS:


Pesar 5 gramos de muestra y colocarla sobre una lmina de vidrio de 10 x 20 cm.
una placa petri y con la ayuda de una pinza hacer un reconocimiento
organolptico de la droga de acuerdo a su morfologa: hojas, raz, tallo, flores,
frutos, etc. haciendo un esquema del mismo. Se puede apoyar con un
estereoscopio para realizar una mejor observacin.
Seguidamente homogenizar una porcin en un mortero y aadirle unas gotas de
agua destilada y observar al microscopio, describiendo y esquematizando la
presencia de partes de la droga.

1.5.3. PRUEBAS HISTOQUIMICAS:


Tomar un poco de muestra en una lmina portaobjeto en un tubo de ensayo y
hacer las siguientes pruebas histoqumica:
Contenido celular

1.6.

Reaccin histoqumica

Oxalato y Carbonato de Calcio

cido actico ( desprende CO2)

almidn

Solucin de Lugol

Alcaloides

Reactivo de Mayer (pp. blanco)

Flavonoides

Reaccin de Shinoda

Taninos

Cloruro frrico ( coloracin negruzca)

RESULTADOS

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1.7.

DISCUSION:

1.8.

CONCLUSIONES:

1.9.

CUESTIONARIO:

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Qu otras pruebas se pueden hacer para determinar las impurezas de


las drogas vegetales?
Cules

son los riesgos para la salud el uso de plantas medicinales

adulteradas o en mal estado?


Una planta medicinal puede estar contaminada con microorganismos?
Cules son los factores de riesgo de contaminacin microbiana?
Cmo determinara la presencia de materia fecal en una planta medicinal?

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1.10.

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BIBLIOGRAFIA:

10

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PRCTICA N 02
DETERMINACION DE CENIZAS, HUMEDAD Y TAMIZAJE FITOQUIMICO DE UNA
PLANTA MEDICINAL
1. OBJETIVO GENERAL:
Determinar el contenido de humedad de una droga al estado fresco y seco
Establecer el contenido de cenizas de una droga
Determinar la composicin qumica de una material vegetal
Correlacionar los parmetros fsico qumico con la calidad de la droga.
2. DETERMINACION DE CENIZAS:
Se entiende por cenizas el residuo que queda despus de la ignicin de una
droga. Su importancia radica en que por el uso inadecuado de insecticidas, la
polucin del medio ambiente por los contaminantes, que contienen sustancias
difcilmente biodegradables, como son algunos metales pesados; y tambin la
presencia de adulterantes como tierra y arcilla, tanto en las plantas medicinales o
alimenticias hacen que se manifieste un porcentaje elevado de cenizas respecto
de la muestra de referencia.
2.1.

OBJETIVOS:
Capacitar en la tcnica de determinacin de cenizas
Determinar los porcentajes de cenizas de las drogas vegetales
Relacionar el grado de contaminacin con el porcentaje de cenizas

2.2.

FUNDAMENTO:
Las cenizas son el residuo inorgnico que queda despus de la destruccin de la
materia orgnica, quedando los cationes como carbonatos, sulfatos, fosfatos
respectivamente

2.3.

CENIZAS TOTALES:
Permite determinar la cantidad de material remanente despus de la ignicin:
cenizas fisiolgicas, derivados de los tejidos de las plantas y cenizas no
fisiolgicas que son el residuo que queda despus de la ignicin de la materia
extraa (polvo, arena, tierra, etc.) adheridos a la superficie de la droga.

2.3.1. PARTE EXPERIMENTAL.


MATERIALES Y REACTIVOS:

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Crisol de porcelana
cido clorhdrico al 10%
Agua destilada
Papel de filtro libre de cenizas

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Pinza
Desecadora
Balanza analtica
Mufla

PROCEDIMIENTO:
Pesar de 2g a 3g la muestra pulverizada y tamizada con una desviacin
permisible de 0.5mg en un crisol de porcelana, previamente tarada. Caliente
suavemente la porcin de ensayo aumentando la temperatura hasta carbonizar y
posteriormente incinerar en un horno mufla a una temperatura de 700 a 750C,
sino seala otra temperatura en la norma especfica durante 2 horas.
Enfriar el crisol en una desecadora y se pesa, repitindose el proceso hasta que
dos pesadas sucesivas no difieran en ms de 0.5mg (masa constante).
RESULTADOS:

Mceniza

Mcrisol
%C

x100
Mmuestra

Mcrisol
2.4.

DETERMINACION DE HUMEDAD:
Un exceso de agua en una droga puede provocar el crecimiento microbiano, la
presencia de hongos o insectos y el deterioro, seguido de la hidrlisis de los
principios activos. Este ensayo es especialmente importante para drogas que
absorben humedad fcilmente o se deterioran rpidamente en presencia de
humedad.

2.4.1. OBJETIVOS:
Determinar el porcentaje de humedad de las drogas vegetales
Relacionar humedad con contaminacin microbiana.
2.4.2. FUNDAMENTO:
El agua contenido en los vegetales se determina por evaporacin, a una
temperatura apropiada, para que difunda por los tejidos vegetales desde los ms
interiores hasta la superficie, luego por pesada simple se determina el peso seco y
por diferencia se determina la humedad.
2.4.3. METODO DE DESECACION:

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El cual determina el agua y las sustancias voltiles ya que el mtodo plantea el


calentamiento de la droga a 100 a 105C.
Este mtodo no es recomendable, cuando la planta contiene aceites esenciales u
otras sustancias voltiles, para evitar el error que introduciran estas en el
resultado final.
2.4.4. PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL:
MATERIALES Y EQUIPOS:
Balanza Analtica

Estufa de Calentamiento

Cpsula de Porcelana

Desecador

PROCEDIMIENTO:
De la muestra de laboratorio, con el grado de trituracin que determina la norma
especfica, pesar 2g con desviacin permisible de 0.5mg y se transfieren a una
cpsula de porcelana previamente tarada y secada, se calienta y se deseca a
105C durante 2 horas. La cpsula se coloca en una desecadora donde se enfra
a temperatura ambiental y se pesa, colocndose nuevamente en la estufa durante
1 hora, volvindose a pesar hasta obtener una masa constante.
RESULTADOS:
Mmuestra
desecada
Mcpsula
%H

x
100
Mmuestra

Mcpsula

2.5.

TAMIZAJE FITOQUIMICO:
FUNDAMENTO:
Se fundamenta en la extraccin selectiva de los principios activos contenidos en
un material vegetal, aprovechando su solubilidad en diferentes solventes,
empezando la extraccin en solventes de menor polaridad como el ter etlico, un
solvente de mediana polaridad como es el alcohol etlico y finalmente con un
solvente de alta polaridad como es el agua. Cada uno de los extractos ayudados
por la microqumica permite identificarlos mediante la formacin de precipitados,
coloracin, etc.
Estas reacciones se caracterizan por ser selectivas para las clases o grupos de
compuestos que se investigan, son simples y rpidas, detectan la mnima cantidad
posible y utilizan un mnimo de equipo de laboratorio.

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2.5.1. OBJETIVOS:
Determinar mediante el tamizaje fitoqumico la presencia de metabolitos
secundarios
Verificar la presencia de sustancias conocidas en especies medicinales
conocidas.
2.5.2. MATERIALES Y REACTIVOS:
ter etlico

Papel de filtro

Alcohol etlico

Esptula pequea

Agua destilada

Embudo

Tubos de ensayo

Reactivos para Tamizaje fitoqumico

Gradillas

2.5.3. PROCEDIMIENTO:

10-20g MP+ Et2O

EXTRACTO
ETEREO

RESIDUO +EtOH

EXTRACTO
ETANOLICO

RESIDUO + H2O

EXTRACTO
ACUOSO

RESIDUO

2.5.4. EXTRACTO ETEREO:


Ensayo de Dragendorff y Mayer ara alcaloides
Ensayo de Baljet, para lactonas y/o cumarinas

Ensayo de Lieberman-Buchard, para triterpenos y/o estereoides

2.5.5. EXTRACTO ETANOLICO:


Ensayo de Fehling para azcares reductores
Ensayo de Cl3Fe para fenoles y taninos

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Ensayo de Shinoda para flavonoides


Ensayo de Dragendorff y Mayer para alcaloides
2.5.6. EXTRACTO ACUOSO:
Ensayo de Dragendorff y Mayer para alcaloides
Ensayo de Cl3Fe para fenoles y taninos
Ensayo de Shinoda para flavonoides
Ensayo de Fehling para azcares reductores
2.6.

RESULTADOS:

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2.7.

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DISCUSION:

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2.8.

CONCLUSIONES:

2.9.

CUESTIONARIO:

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Esquematice otra marcha fitoqumica, ventajas y desventajas con respecto a


la efectuada en prctica?
Qu indica la presencia elevada de cenizas en una droga vegetal?
Qu importancia tiene la determinacin de la composicin qumica de una
droga vegetal?
Qu importancia tiene la determinacin de humedad en una droga vegetal?
Qu otros ensayos fsicos se pueden hacer a una droga vegetal?

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2.10.

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BIBLIOGRAFIA:

PRACTICA N 03

ENSAYOS DE SOLUBILIDAD, PREPARACION Y ANALISIS DE UN EXTRACTO


VEGETAL

18

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3.1.

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OBJETIVOS:
Obtener un extracto vegetal utilizando un percolador
Caracterizar fsica y qumicamente el extracto
Optimizar los parmetros para obtener un mejor extracto

3.2.

FUNDAMENTO:
La lixiviacin o percolacin es un mtodo de extraccin muy relacionado al
desarrollo de la Farmacia en cuanto a la extraccin se refiere en el siglo XIX. La
importancia de ste mtodo se evidencia pues la Farmacopea de los Estados
Unidos lo acepta como procedimiento oficial desde 1840. Se utiliza para la
preparacin de uno de los extractos ms difundidos en preparaciones galnicas:
los extractos fluidos. Los extractos fluidos son extractos lquidos obtenidos a partir
de un material vegetal utilizando como solventes soluciones hidroalcohlicas.

3.3.

MUESTRA:
Se utilizar como muestra una planta medicinal previamente desecada y
pulverizada.

3.4.

3.5.

MATERIALES Y REACTIVOS:
Percolador de plstico

Reactivos de Tamizaje fitoqumico

Alcohol etlico de 40, 50, 60 y 70

Silicagel G

Papel Indicador

Acetato de Etilo

Refractmetro

cido clorhdrico

Picnmetro

cido actico glacial

Papel de filtro

Lmpara ultravioleta

PROCEDIMIENTO:

3.5.1. OBTENCION DEL EXTRACTO:


Preparar 4 percoladores para cada concentracin de alcohol, en cada uno de
ellos, colocar 100 a 250g de muestra previamente humedecida con alcohol
respectivo y luego cubrirlo con alcohol para cada una de las concentraciones de
40, 50, 60 y 70 respectivamente. Taparlo para evitar la contaminacin. Obtener
el percolado, cada 24 a 48 horas, anotando el tiempo de recoleccin. Se debe
tomar como mnimo 3 muestras de cada percolado.

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3.5.2. ANALISIS DE LOS EXTRACTOS:


Una vez obtenido los diferentes tipos de extractos, deben establecerse los
parmetros que definan la calidad de los mismos.
Determinacin de requisitos organolpticos:
Determinacin de olor: Tomar una tira de papel filtro y humedecer por un
extremo y determinar las caractersticas odorferas del extracto.
Determinacin del color: Se toma un tubo de ensayo limpio y seco y se
llena hasta las tres cuartas partes con la muestra y se observa el color,
transparencia, la presencia de partculas y la separacin de capas.
Determinacin de la densidad relativa:
Se entiende por densidad relativa a la relacin entre la masa de un volumen
de la sustancia a ensayar a 25C y la masa de un volumen igual de agua
destilada a la misma temperatura. Este trmino equivale a peso especfico.

Ppicnmetr
o
25

c Pmp
D

H
O
2
P

Picnmetro
H
O
2

Determinacin del ndice de refraccin:


Es una constante caracterstica de cada sustancia, la cual representa la
relacin del seno del ngulo de incidencia de la luz y el seno del ngulo de
refraccin cuando la luz pasa oblicuamente a travs del medio. El
refractmetro

permite la lectura de ndice de refraccin como de slidos

totales presentes.
Determinacin de pH:
La acidez o alcalinidad de las soluciones se caracterizan por el valor del ndice
de hidrgeno o pH.
Anlisis capilar:
Es un mtodo ingenioso e interesante para la caracterizacin de extractos y
tinturas. Este mtodo se basa en los fenmenos de absorcin y reparticin de
sustancias en materiales colorantes a travs de los espacios capilares del
material inerte que constituye el papel de filtro. Para el anlisis e interpretacin
de la imagen se tienen en cuenta los aspectos siguientes:
Color

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Altura
Descripcin de las diferentes partes
Cambios de coloracin con amonaco
Examen bajo la luz ultravioleta
Tamizaje fitoqumico:
Comprobar la composicin qumica del extracto realizando reacciones
qumicas especficas.
Identificacin General:
Caracterizar mediante una cromatografa la huella digital de la muestra.

3.6.

RESULTADOS:

21

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3.7

DISCUSION:

3.8

CONCLUSIONES:

3.9

CUESTIONARIO:

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Con que tipo de concentracin alcohlica se obtuvo los mejores resultados


Pueden producirse errores en la determinacin de algunos de los parmetros
Qu dificultades tuvo Ud. en la realizacin de la presente prctica
Qu aporte significativo se obtiene con esta prctica para el mejor estudio de
nuestros recursos medicinales.

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3.10

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BIBLIOGRAFIA

PRCTICA N 04

DETERMINACIN DE AZCARES, POLISACRIDOS HOMOGNEOS Y


HETEROGNEOS: ALMIDONES, GOMAS, MUCLAGOS Y PECTINAS.

4.1

DETERMINACIN DE AZCARES:

4.1.1

PRUEBAS QUIMICAS:
Determinacin cualitativa de azucares: Reacciones generales:

4.1.2 OBJETIVOS:
Determinar la presencia de carbohidratos o azcares en drogas naturales
4.1.3

MUESTRA: Miel de Apis mellfera Abeja

4.1.4

FUNDAMENTO:

24

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Se fundamenta en la deshidratacin de un azcar por la accin de un cido


mineral fuerte, formando compuestos cclicos derivados del furfural, que
reaccionan con compuestos fenlicos (-naftol, orcinol, antrona), dando origen a
compuestos coloreados.
4.1.5

MATERIALES Y REACTIVOS:
Tubos de ensayo

Reactivo de Antrona

Gradilla

H2SO4

Reactivo de Molish

4.1.6

PROCEDIMIENTO:
En un matraz preparar una solucin al 2% de Miel de Abeja y tomar una alcuota
en un tubo de ensayo limpio y seco, aadir 1 ml del reactivo de Molish o de
Antrona, agitar, deslizar por las paredes del tubo II gotas de H 2SO4 concentrado.
En la zona de contacto se observar la formacin de un anillo coloreado que
indicar reaccin positiva.

4.2

REACCIONES GENERALES PARA AZUCARES REDUCTORES

4.2.1

OBJETIVO.
Determinar el poder reductor de los azcares contenidos en drogas naturales.

4.2.2

FUNDAMENTO:
Debido a la presencia de grupos funcionales aldehdos y cetonas en las molculas
de los azcares, stos poseen un poder reductor que se manifiesta sobre ciertas
sales metlicas (Cu++, Ag+, Bi+++) y sustancias orgnicas oxidadas como el cido
pcrico, teniendo como condicin el medio alcalino y el calor.

4.2.3

4.2.4

MATERIALES Y REACTIVOS:
Reactivo de Fehling

Reactivo de Brown

Reactivo de Benedict

Tubos de Ensayo

Reactivo de Tollens

NaOH 10%

Reactivo de Nylander

Bao Mara

PROCEDIMIENTO:

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Tomar una batera de tubos de ensayo, adicionarle a todos 1mL de MP y 1mL de


la solucin reactiva. En la prueba de Brown, primero adicionarle 1mL de NaOH
10% y calentarlo hasta obtener una coloracin amarilla, luego adicionarle 1mL del
reactivo de Brown y colocarlo en BM y observar los resultados.
4.2.5

REACCIONDE DIFERENCIACION ENTRE CETOSAS Y ALDOSAS:


PRUEBA DE SELIWANOFF: En un tubo de ensayo colocar 1 ml. de la muestra
problema ms 1 ml. del reactivo de Seliwanoff, llevar a Bao Mara hasta la
aparicin de una coloracin rosada, que indicar la presencia de cetosas

4.2.6

DETERMINACION DE CONSTANTES FISICAS:


DETERMINACION DEL INDICE DE REFRACCION:
El ndice de Refraccin es una constante caracterstica de cada sustancia.
MATERIALES Y REACTIVOS:
Refractmetro de Abb
Varilla de vidrio
Muestra Problema
Solucin de EtOH:Et2O (1:1) para la limpieza del equipo
PROCEDIMIENTO:
Se coloca sobre el prisma de medicin una gota de agua destilada utilizando para
ello una varilla de vidrio, se ajusta el equipo seleccionando la zona del espectro
visible que aparece en la lnea lmite del campo visual, moviendo el compensador
cromtico y colocando la interseccin del retculo sobre la lnea de los campos
claros y oscuros.
Despus de hacer el ajuste del refractmetro, se coloca una gota de la muestra de
ensayo sobre el prisma de medicin, se cierra el termoprisma y se enfoca la luz
por medio del espejo, de modo tal que la misma incida sobre la apertura de
entrada del prisma de medicin y se proceda de la misma forma que con el agua.
Con el refractmetro se mide el ndice de refraccin y el porcentaje de solutos.

4.3

ALMIDON:
Principal sustancia de reserva de los vegetales, el almidn es una fuente
energtica indispensable en la alimentacin del hombre y de gran nmero de
animales. Presente en todos los rganos vegetales. Qumicamente esta formado

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-(1----4) que forma la amilasa,


formando con el agua soluciones de elevada viscosidad. La amilopectina, principal
constituyente de la mayora de los almidones, de estructura ramificada con
-(1----4), unidas
-(1----6).
4.3.1

OBJETIVOS:
Caracterizar el almidn por reacciones qumicas y observacin microscpica
Identificar la amilopectina y la amilasa
Hidrolizar en medio cido el almidn

4.3.2

FUNDAMENTO:
El almidn se identifica con el I2 por una reaccin de pseudoadicin dando una
coloracin caracterstica y al microscopio, se observa el hilio y las estras tpicas
de cada tipo de almidn. La hidrlisis del almidn permite identificar la amilasa y
la amilopectina; dando coloracin azul y rojo respectivamente a medida que se va
hidrolizando.

4.3.3

MUESTRA: Almidn de papa, maz arroz.

4.3.4

MATERIALES Y REACTIVOS

4.3.5

Matraz de 250 ml

Reactivo de Molish

Pipetas de 2,5 y 10 ml

Refrigerante de reflujo

Reactivo de Lugol

Pinzas

Microscopio

Soporte Universal

Lamino portaobjeto

Tubos de ensayo

HCl concentrado

Reactivo de Azcares reductores

EXTRACCION
Rallar el tubrculo sobre abundante agua, luego decantar el lquido de lavado en
recipiente apropiado. Dejar sedimentar y lavar por decantacin varias veces.
Secar si es necesario.

4.3.6

REACCIONES DE IDENTIFICACION:
Solubilidad: en agua fra insoluble y soluble en agua caliente, formando una
masa semitransparente (engrudo de almidn)

27

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Con la solucin de I2 al 2.5% da azul violeta, que desaparece con el calor y


reaparece al enfriarse.
Observacin directa al microscopio, colocando en una lmina portaobjeto una
muestra, aadirle agua destilada y observar la forma del hilio y de las estras.
Reacciones de caracterizacin con lugol observados al microscopio, tambin
observar al microscopio sin reactivo y dibujar las caractersticas de los
grnulos de almidn.
Controlar las fases de la hidrlisis cada hora con S.R. de Lugol en placa de
toques y observar las siguientes coloraciones:
Violeta
Roja

:
:

Incolora :
4.4

Amilodextrina

Eritrodextrina
Acrodextrina

INULINA:
La inulina, es un oligofructano, es un compuesto del almacenamiento principal en
muchas plantas de la familia de las Compositae. Sin embargo, en el yacon la
inulina parece ser el componente principal. Los Oligosacaridos del yacon han sido
-(21)-fructooligosaccharides con la sacarosa terminal.

4.4.1

OBJETIVOS:
Determinar la presencia de inulina en una muestra vegetal
Diferenciar la inulina del almidn
Determinar la presencia de fructosa

4.4.2

FUNDAMENTO:
La raz de Polymnia sonchifolia yacon contiene inulina que es un polisacrido
formado por unidades de fructosa, adems contiene fructosa libre y por
oligofructanos u oligosacrdios formados por fructosa.

4.4.3

MUESTRA: raz de Polymnia sonchifolia yacon

4.4.4

MATERIALES Y REACTIVOS:
Vaso de precipitados

Fenol

Pipetas

Reactivo de Seliwanoff

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4.4.5

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Cocina elctrica

Reactivo de Lugol

Alcohol absoluto

Reactivo de Molish

Fructosa

Reactivo de Benedict

EXTRACCION:
Tomar una cantidad apropiada de raz de yacon, lavarlo adecuadamente, retirar
la cscara y licuarlo, trabajar con el licuado y con el jugo.

4.4.6

REACCIONES DE IDENTIFICACION:
Tomar una alcuota en un tubo de ensayo y aadirle el Reactivo de Molish
Tomar una alcuota en un tubo de ensayo y aadirle el Reactivo de Lugol
Tomar una alcuota en un tubo de ensayo y aadirle el Reactivo de Benedict
Tomar una alcuota en un tubo de ensayo y aadirle el Reactivo de Seliwanoff
Tomar una alcuota en un tubo de ensayo, precipitar con alcohol absoluto y
observar al microscopio.

4.5

GOMAS
Son sustancias que exudas de los rganos vegetales, despus de un traumatismo
la secrecin tiende a taponar la herida, es posible tambin que esta secrecin se
relaciona con las condiciones climticas: sera en tal caso una manifestacin de
adaptacin a la sequedad. Qumicamente es un polisacrido cido, fuertemente
acetilado, por hidrlisis parcial se obtiene ramnosa, cido D-galacturnico,
galactosa, cidos aldobiurnicos y un trisacrido cido que lleva glucosa.

4.5.1

OBJETIVO
Caracterizar gomas de inters farmacutico
Diferenciar goma de un muclago.

4.5.2

FUNDAMENTO.
Las gomas se solubilizan en agua, se bincha rpidamente y da un gel viscoso. Al
calentar la viscosidad disminuye y se obtiene una dispersin translcida. Por
hidrlisis cida, produce azcares reductores.

4.5.3

MUESTRA: Polvo de Acacia senegal Goma arbiga

4.5.4

MATERIALES Y REACTIVOS

29

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4.5.5

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Tubos de ensayo

Balanza

HCl concentrado

Acetato Neutro de Plomo 5%

Beaker de 100mL.

Reactivo de Fehling, Benedict.

REACCIONES DE IDENTIFICACION
Preparar una solucin de goma arbiga al 1%, suadir 0.1 ml de HCI
concentrado. Llevar al BM por 15, neutralizar y realizar la prueba para
azcares reductores( Fehling, Benedict)
A unos 2 ml de la solucin de gomosa trtelo con la SR. Acetato Neutro de
Plomo al 5%, se ver la formacin de un precipitado.

4.6

MUCILAGOS
Los muclagos se les consideran como constituyentes celulares normales,
preexistentes en formaciones histolgicas, especializadas, frecuentes en el
tegumento externo de las semillas.

4.6.1

OBJETIVOS.
Caracterizar muclagos de inters farmacutico
Identificar los muclagos por sus reacciones caractersticas.

4.6.2

FUNDAMENTO.
Los muclagos se caracterizan por extrarseles con agua caliente, a partir de
semillas de Linaza, y se le caracteriza mediante reacciones de identificacin
propias de los muclagos.

4.6.3

MUESTRA: Semillas de Linum usitatissimun Linaza

4.6.4

MATERIALES Y REACTIVOS

4.6.5

Beaker de 100 ml

cido Tnico 5%

Tubos de ensayo

Alcohol absoluto

Gradilla

Acetona

Acetato Neutro de Plomo 5%

cido Oxlico 10%

EXTRACIN

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A unos g de semillas de Linaza, aadirle cantidad suficiente de agua destilada y


someterlo al BM hasta que exude el muclago, que se manifiesta como un lquido
viscoso.
4.6.6

REACCIONES DE IDENTIFICACIN
A 3 ml de la sol. trtelos con gotas de la SR. de acetato neutro de plomo 5% y
observar la formacin de un precipitado.
Tratar iguales volmenes de muclago con la SR. de cido tnico y observar la
formacin de un precipitado gelatinoso.
Tratar iguales volmenes de muclago con alcohol de 95 y observar la
formacin de un precipitado.
Tratar iguales volmenes de muclago con acetona Q.P. y observar la
formacin de un precipitado.
Tratar iguales volmenes de muclago con cido oxlico al 10% y observar la
formacin de un precipitado.

4.7

PECTINAS
Son macromolculas glucdicas constituyentes de la laminilla media de la pared
de las clulas vegetales, las sustancias pcticas forman un cemento que une las
clulas unas con otras. Las pectinas son abundantes en los frutos; su naturaleza
evoluciona con la edad de los tejidos: en principio insolubles, y asegurando la
rigidez de estos tejidos, se degradan durante la maduracin en azcares y cidos.

4.7.1

OBJETIVOS
Extraer pectinas de inters farmacutico
Identificar mediante reacciones qumicas a las pectinas.

4.7.2

FUNDAMENTO.
La extraccin de pectinas se realiza, primero inactivando las enzimas por
ebullicin y luego se solubilizan en caliente en soluciones acuosas cidas. Las
pectinas al hidrolizares dejan en libertad a sus componentes

H+
cido Pctico

4.7.3

Galactosa + Arabinosa

MUESTRA: Corteza de Limn o Naranja previamente rallada

31

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4.7.4

4.7.5

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MATERIALES Y REACTIVOS.
Alcohol etlico

NaOH 3N

HCl diluido

Acetona Q.P.

Equipo de BM

Tubos de ensayo

Alcohol absoluto

Vaso de precipitado

EXTRACCION
Pesar algunos gramos de corteza de limn o naranja previamente rallada, desecar
en la estufa a 105C por 15. Purificar esta corteza desecada con tres porciones
de alcohol etlico de 25mL., cada una, el residuo tratarlo con 10mL de HCl diluido
en BM hasta pequeo volumen.

4.7.6

REACCIONES DE IDENTIFICACION
Un ml de la solucin con gotas de NaOH 3N formacin de un pp
Un ml de la solucin con 5 ml de acetona, formacin de un gel incoloro
Un ml de la solucin con 5 ml de alcohol, formacin de un gel.

4.8

RESULTADOS :

32

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4.9

DISCUSION:

4.10

CONCLUSIONES:

4.11

CUESTIONARIO

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Mediante reacciones qumicas, fundamente Ud. las reacciones generales y


de azcares reductores?
Qu es el ndice de Refraccin?
Qu mtodos de cuantificacin de azcares reductores conoce?
La miel de abeja que se utiliz en prctica, es adulterada?
Cuales son los valores de azcares de una miel de abeja?
Qu usos farmacuticos tienen las gomas, mucilagos y pectinas?
Cul es el almidn aprobado por Ia USP XXIII?
A que se debe la formacin de pp. en las reacciones de las pectinas?
Cul es la importancia de los almidones modificados?
Importancia medicinal y econmica del yacon?

35

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4.12

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BIBLIOGRAFIA:

PRCTICA N 5
GLICOSIDOS CARDIOTONICOS Y FENOLICOS

5.1

GLICOSIDOS CARDIOTONICOS
Los glucsidos cardiotnicos constituyen un grupo perfectamente individualizado y
de gran homogeneidad estructural y farmacolgica. Todos de origen vegetal, son
medicamentos de eleccin en la insuficiencia cardaca, a pesar de su reducido
margen teraputico. La estructura de estos compuestos es muy homognea,
consta de una genina de naturaleza esterodica y un resto azcarado que
generalmente es un oligosacrido formado por desoxiazcares.

5.1.1

OBJETIVOS:
Identificar las drogas vegetales con aglicn esteroide

36

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Reconocer a los compuestos con glicsidos cardiotnicos


5.1.2

FUNDAMENTO:
Los glicsidos cardiotnicos, se caracterizan por tener un aglicn esteroide y un
resto azucarado, formado por tres azcares llamados digitoxosas. Las reacciones
qumicas buscan identificar el aglicn esteroide, formando acetatos con el grupo
hidroxilo que une al aglicn, con el resto azucarado, al ncleo lactnico y a las
digitoxosas mediante pruebas especficas.

5.1.3

MUESTRA: Hojas de Nerum oleander laurel rosa y tableta de dgoxina

5.1.4

MATERIALES Y REACTIVOS:
Pipeta de 10 ml.

Acetato de Plomo 5%

Beaker de 250 ml

Cloroformo

Embudo de vidrio

Anhdrido actico

Tubos de ensayo

H2SO4 concentrado

Papel de Filtro

Reactivo de Kedde

5.1.5 EXTRACCION:
A unos 2g de polvo de hojas, agregarle 10mL de alcohol de 70 y calentar
suavemente, dejndolo en contacto por 3, filtrar y a 5mL del filtrado adicionarle
10mL de agua; precipitar con V gotas de acetato de plomo 5%, agitar y filtrar. El
lquido filtrado se agita con cloroformo, decantar, separar y evaporar el solvente
con las precauciones debidas.
5.1.6

REACCIONES DE IDENTIFICACION
Ensayo de Kedde: Una alcuota de un extracto etanlico se mezcla con 1mL
del reactivo y se deja reposar durante 5 a 10 minutos. Un ensayo positivo es
en el que se desarrolla una coloracin violcea, persistente durante 1-2 horas.
Reaccin de Lieberman-Bouchard: A una alcuota del extracto etanlico
evaporar a sequedad y redisolverlo en cloroformo, aadirle anhdrido actico y
por las paredes dejar caer cido sulfrico concentrado. Observar la formacin
de un anillo o coloracin.

5.2

GLICOSIDOS FENOLICOS:
Los compuestos fenlicos sencillos son bastantes raros; probablemente,
provienen de la descarboxilacin oxidativa o no de los cidos benzoicos: as el
arbutsdo, podra ser el producto de la descarboxilacin de un glucsido del

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cido gentsico, o de la descarboxilacin de un cido para-hidroxi-benzoico


peroxidado.
Arbutina

5.2.1

Populina

Salicina

OBJETIVO:
Dar a conocer la presencia de grupos fenlicos en Plantas Medicinales
Conocerlas reacciones de identificacin para grupos fenlicos.

5.2.2

FUNDAMENTO:
Los glicsidos fenlicos se solubilizan en agua por su resto azucarado, facilitando
su extraccin en medio acuoso. La presencia de grupos fenlicos se pone en
evidencia con el F+3, por la formacin de un complejo y previa hidrlisis se detecta
los azcares reductores por la formacin de un precipitado rojo de Cu 20.

5.2.3

MUESTRA: Corteza desecada y pulverizada de Salix humboltiana Sauce

5.2.4

MATERIALES Y REACTIVOS:
Beaker de 200 ml

FeC13 1% en agua

Tubos de ensayo

FeCl3 1% en EtOH para cromatografa

Papel Filtro

Reactivo de Benedict

Embudo

Placas cromatogrficas

H2S04 concentrado

5.2.5 EXTRACCION DE LA SALICINA:


A unos 2 g de corteza de Sauce pulverizada o picada, agregarle unos 100mL de
agua y hervir una hora, filtrar y concentrar hasta una consistencia siruposa. Al
enfriar, la salicina se separa, decantar. Al residuo agregarle el doble de su
volumen de agua hirviendo y dejar que cristalice.
5.2.6

REACCIONES DE IDENTIFICACION.
Tratar mg del pp. con H2S04 concentrado y observar la formacin de color.
Tratar la muestra con FeCI3, dando una coloracin pardo violeta, pero despus
de la hidrlisis la salicina se descompone y se libera la saligenina, la cual con
el FeCl3, da una coloracin azul, por la presencia de grupo fenlico libre.

38

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Con el lquido acuoso hidrolizado, verificar la presencia de restos azucarados.


CCF:

5.3

Solvente : CHCI3 : MeOH (1:3)

Soporte

Standard : Acido Saliclico Q.P. cido acetil saliclico

Revelador : FeCl3 1% en EtOH

: Silicagel G 60

RESULTADOS:

39

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5.4

DISCUSION:

5.5

CONCLUSIONES:

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40

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5.6

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CUESTIONARIO:
Importancia teraputica de los glicsidos cardiotnicos
Esquema de la placa cromtografica de la salicina y explique el resultado
Por qu se utiliza como standard el cido salcilico?
Por qu se determina azcares reductores en la solucin hidrolizada?
Se puede determinar por cromatografa un glicsido cardiotnico. Si es
afirmativa la respuesta. Cul sera el procedimiento y que reactivos
emplearla?
Qu otras especies contienen glicsidos cardiotnicos?

41

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5.7

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BIBLIOGRAFIA:

42

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PRCTICA N 06

GLICOSIDOS ANTRAQUINONICOS Y CIANOGENETICOS

6.1.

GLICOSIDOS CIANOGENETICOS
La cianognesis es la facultad que tienen ciertos vegetales de producir cido
cianhdrico. Las sustancias ciangenas vegetales, son siempre heterosidos de 2hidroxinitrilos: los heterosidos cianogenticos.

6.1.1 OBJETIVOS:
Conocer la presencia de HCN en Plantas Medicinales
6.1.2 FUNDAMENTO:
La prunasina es el glicsido cianognetico que se encuentra en especies del
gnero Prunas y que se evidencia por la reaccin de Grignard o del papel
picrosodado y el resto azucarado del glicsido se identifica por la reaccin de
Benedict.
6.1.3 MUESTRA: Hojas de Pranus serotina Capul o Pranus cerasus Guinda
6.1.4 MATERIALES Y REACTIVOS:
Matraz con tapa esmerilada de 250 ml

Embudo

Tubos de ensayo

Papel Picrosodado

Papel filtro

Reactivo de Benedict

6.1.5 DETERMINACION CUALITATIVA


Reaccin de Grignard: Colocar unos 5 g de hojas groseramente trituradas en un
matraz con tapa esmerilada y aadirle unos 30 ml. de agua y suspender en
interior del matraz una tira de papel pcrosodado y tapar sin agitar. Calentar en
BM por 15 a 20 minutos, del cual se observar que el papel se tie de rojo,
indicando la presencia de HCN por formacin de isopurpurato de sodio.
Determinacin de azcares: Un mL del lquido de la reaccin de Grignard, se
coloca en un tubo y se le agrega 1mL de la S.R. de Benedict, luego calentar en

43

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BM hasta observar la formacin de un pp. rojo ladrillo que nos indica la presencia
de azcares reductores.
6.1.6 DETERMINACION CUANTITATIVA
Del HCN en una especie vegetal, despus de su extraccin
FUNDAMENTO.
Consiste en liberar el HCN, que se fijar en medio alcalino. Despus se
cuantificar con Ag+ hasta la formacin de un complejo de dicianoplata y el fin de
la reaccin es un precipitado opalescente de yoduro de plata.
Muestra: Hojas frescas de Prunus laurocerasus Laurel cerezo
Materiales y Reactivos:
Baln de 250mL

KI 10%

Erlenmeyer de 200mL

Bureta de 10mL

Refrigerante

Pipetas de 1mL

AgNO3 0.03N

Soporte Universal

NaOH 10%

Probeta graduada

Procedimiento
Pesar unos 5 g de laurel cerezo, colocarlas en un baln, aadirle 25mL de agua
caliente (50C). Tapar hermticamente y someterlo a BM por 10. Destapar y unirlo
al dispositivo de destilacin, con el extremo del refrigerante sumergido en un
erlenmeyer que contiene 10mL. de NaOH 10% y 1mL Kl 10%. Empezar la
destilacin con cuidado sin necesidad de una ebullicin fuerte, a fin de recoger
unos 20mL de destilado. Terminada la destilacin, el extremo del refrigerante
lavarlo con agua destilada. Valorar con NO 3Ag 0.03N hasta ligera opalescencia.
Cada ml de AgNO3 equivale a 1.62 mg de HCN.
6.2

GLICOSIDOS ANTRAQUINONICOS:
Las quinonas son compuestos oxigenados que corresponden a la oxidacin de
compuestos aromticos. Las diferentes drogas de este grupo, se caracterizan por
la presencia de compuestos fenlicos, ms o menos oxidados (antronas,
antranoles y antraquinonas), relacionados con el antraceno. El ncleo bsico,

44

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constituido en 1 y 8 por dos grupos fenlicos, generalmente, est formando parte


de una combinacin heterosdica (antracensidos).
Senosido

Antraquinonas

6.2.1 OBJETIVOS:
Determinar la presencia de antraquinonas en Plantas Medicinales
Determinar la presencia de antraquinonas en la cochinilla
Cuantificar antraquinonas por espectrofotometra
6.2.2 FUNDAMENTO
Las antraquinonas se caracterizas por sublimar, dando cristales cuya coloracin
vara en medio alcalino y por extrarseles por cambio de solvente, de orgnico a
un medio alcalino dando coloracin roja rosada.
8.2.3 MUESTRA: Hojas y flores Coccus cacti Cochinilla
8.2.4. MATERILES Y REACTIVOS:

6.2.5

Cpsula de porcelana

NaOH diluido

Luna de Reloj

HCl diluido

Tubos de ensayo

NH4OH diluido

Vaso de 250 ml

Alcohol etlico

Papel de Filtro

Erlenmeyer de 250 ml

Acido Brico

Potencimetro

Acido Ntrico

Pera de separacin

KOH alcohlica

H2SO4

REACCIONES DE IDENTIFICACION

Microsublimacin.- Un poco de polvo seco de Cochinilla se calienta en una


cpsula de porcelana y los vapores se reciben en una luna de reloj, en el cul se
observa un sublimado amarillo de agujas cristalinas de color amarillo, solubles en
potasa alcohlica al 5% dando coloracin roja.

45

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Reaccin de Brntrager.- Hervir con 10 ml de agua y III gotas de NaOH diluido


1 g de polvo seco. Filtrar el lquido y enfriar, agregar HCl diluido en exceso y
agitar con 10 ml de ter, el cul se colorea de amarillo, Separar la capa etrea y
agitarla luego con 5 ml de amoniaco diluido. Debe colorearse de rojo cereza,
quedando el ter de color amarillo.
Reaccin de Schnteten.- A 5 ml de sol. de reaccin de Brntrager aadirle
5mL de sol. saturada do borato de sodio y observar al trasluz una fluorescencia
verde.
6.3

RESULTADOS:

46

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6.4

DISCUSION:

8.4

CONCLUSION:

6.5

CUESTIONARIO

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Cules son las propiedades medicinales de las antraquinonas?

47

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En que se fundamenta Ia reaccin de Brntrager?


Represente estructuras qumicas de algunas antraquinonas, sealando la
especie vegetal que lo contiene
Por qu es tan importante el cido carmnico?
Fundamente con una reaccin qumica la cuantificacin del HCN?
Justifique el uso del NaOH y el KI en la cuantificacin del HCN?

48

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6.6

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BIBLIOGRAFIA:

PRCTICA N 07
DETERMINACION DE SAPONINAS

49

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7.1

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Drogas con saponina:


Son compuestos de naturaleza vegetal que se caracteriza por que sus
soluciones acuosas producen abundante y permanente espuma cuando son
agitadas y cuyo

aglicn es un esteroide o un triterpenoide. Adems se

caracterizan por que producen hemlisis a los glbulos rojos.


Saponina Triterpenoide

7.2

7.3

Saponina Esteroide

OBJETIVO:

Determinar la presencia de saponinas

Diferenciarlas saponinas esteroides y triterpenoides

Cuantificar las saponinas por sus Indices Afrosimtrico y Hemlitico

FUNDAMENTO:
Las saponinas se extraen en medio alcohlico y se precipitan por cambio de
solventes utilizando ter y se cuantifica teniendo en cuenta sus propiedades de
disminuir la tensin superficial de los lquidos y formar steres de colesterina con
los glbulos rojos produciendo su rompimiento y liberacin de la hemoglobina.

7.4

7.5

MUESTRA: Raz de Colletia spinossisima Gmel Taqsana

MATERIALES Y REACTIVOS

Matraz de 250 ml

50

Cocina elctrica

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7.6

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Pipetas de 1 y de 5 ml

Estufa

Eter de Petrleo

Embudo

Eter Etlico

Papel de Filtro

Alcohol absoluto

Tubos de ensayo

Refrigrante

H2SO4

Acido tricloroactico al 10%

Anhdrido actico

METODO DE EXTRACCION
Utilizar unos 100 g de droga desecada y pulverizada y hacer una lixiviacin
primero con ter de petrleo, con el objeto de eliminar las materias grasas.
Despus desecar el material y tratar con unos 300 ml de alcohol absoluto, calentar
a ebullicin al BM en un matraz con refrigerante a reflujo por 4 horas. Filtrar el
lquido extractivo y concentrarlo hasta unos 50 ml. A estos 50 ml agregar 3
volmenes de ter etlico (150 mL) con el objeto de precipitar las saponinas
extradas por cambio de solvente.

7.7

REACCIONES DE IDENTIFICACION

Prueba de la espuma: tomar unos mg de muestra y aadirle agua y agitar por un


minuto hasta la formacin de espuma persistente.
Reaccin de Lieberman: consiste en aadir sobre 1 ml de una solucin
clorofrmica de la muestra I gota de anhdrido actico y I II gotas de cido
sulfrico concentrado, con lo que se consigue coloraciones rojiza, violeta, azul
verde
Ensayo de Rosenheim.- Una solucin clorofrmica de la muestra se trata con cido
trcloroactico al 10%, obtenindose una coloracin rosada
CCF
Soporte

: Silicagel G

Sistema de solvente: n-hexano: Acetato de etilo (1:1)


Revelador : Reactivo de Lieberman (Calentar a 90 x 15)
Standard

7.8

: Colesterol Q.P.

DETERMINACION DEL INDICE DE ESPUMA O AFROSIMETRICO

51

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Definicin: Se le define como el nmero de ml. en el que se halla disuelto un


gramo de saponinas capaz de producir 1 cm de espuma estable por 30 en tubos
que contiene 10 ml de la solucin.
Reactivos: Sol. de saponinas al 1%
Materiales: tubos de ensayo, Pipetas de 1 y 10 mL, gradillas.
Procedimiento: Colocar en cada tubo de 1 a 10 ml de la solucin de saponinas y
completar la diferencia con agua destilada hasta 10 ml. Agitar fuertemente por 1 y
dejar en reposo. A los 30 hacer la lectura y anotar cul de ellos tiene 1 cm de
espuma y hacer los clculos.

7.9

RESULTADOS:

52

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7.10

DISCUSION

7.11

CONCLUSION:

7.12

CUESTIONARIO

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53

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Con los resultados obtenidos calcular el Indice de Espuma de la Taqsana

Qu otras drogas vegetales contienen saponinas triterpenoides?

Importancia teraputica de las saponinas triterpenoides y esteroidales

Qu coloraciones debe dar la reaccin de Lieberman con saponinas esteroides


y trterpenoides?

Qu cuidados se deben tener cuando se hace la reaccin de Lieberman?

54

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7.13

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BLIOGRAFIA

PRACTICA N 08

55

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DETERMINACION DE FLAVONOIDES

8.1

FLAVONOIDES:
Los flavonoides, son compuesto fenlicos y son en su mayora pigmentos
responsables de la coloracin de numerosas flores y de algunos frutos. El
elemento comn de estos compuestos se han descrito varios millares de los
mismos, esta relacionado con un ncleo bsico: el 2-fenil cromano. Los
flavonoides se encuentras ampliamente distribuidos en el reino vegetal,
generalmente en la forma soluble de glicsidos. Sus propiedades farmacolgicas
estn asociadas con la reduccin de la permeabilidad capilar. Entre estos
tenemos a la rutina, la hesperidina y la quercetina.

OBJETIVOS:
Determinar la presencia del flavonoide rutina y hesperidna
Conocer las reacciones qumicas de identificacin para flavonoides
8.2

DETERMINACION DE LA RUTINA:

8.2.1

FUNDAMENTO:
La rutina es un flavonoide que tiene una mejor solubilidad en medio alcohlico,
que se caracteriza por dar positiva la prueba de Shinoda con una variacin de
color que depende del tipo de estructura, asimismo se determina sus grupos
fenlicos con el F+3 y por dar fluorescencia frente a la luz UV.

8.2.2

MUESTRA: Hojas de Ruta graveolans Ruda

8.2.3

MATERIALES Y REACTIVOS:
ter etlico
Equipo soxhlet

HCl concentrado
FeCI3 1% y EtOH

56

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Beaker de 100 y 250mL


Mg metlico
Tubos de ensayo
Alcohol etlico
H2SO4 concentrado

Lmpara de Luz UV
Alcohol amlico
Placas cromatogrficas
Acetato de Plomo 5%

8.2.4 EXTRACCION
Fraccionar las hojas y proceder a un desengrasado en soxhlet con ter, con el fin
de eliminar las grasas, resinas y otros constituyentes. Al residuo tratarlo
posteriormente con agua caliente y decantar el lquido sobrenadante. Concentrar
el extracto acuoso y dejar en reposo por 5 das, tiempo en el cual cristalizar la
rutina. Si se desea purificar, efectuar cristalizaciones empleando alcohol y por
ltimo desecar.
8.2.5

REACCIONES DE IDENTIFICACION

Reaccin de Shinoda o Cianidina: Caracteriza compuestos de estructura


benzopirona Si la alcuota del extracto se encuentra en alcohol, se diluye con 1mL
de HCI concentrado y un pedacito de cinta de Mg. Despus de la reaccin se
espera 5 minutos, se aade 1mL de alcohol amlico, se mezclan fases y se deja
reposar hasta que se separen.
o

Si la alcuota del extracto os encuentra en agua, se procede de la misma


manera, a partir de la adicin del HCI concentrado.

El Ensayo se considera positivo, cuando el alcohol amlico se colorea de


amarillo, naranja, carmelita o rojo. Intensos en todos los casos.

Reaccin con el FeCl3 1%: Utilizar una solucin acuosa de rutina, aadirle gotas
del reactivo de FeCl3 1%.
Observar a la Luz UV con y sin vapores amonaco en un cromatograma
8.3

DETERMINACION DE LA HESPERIDINA:
La hesperidina es un complejo ctroflavonoIde que se encuentra en la porcin
blanca y coloreada de la cscara de naranja.

8.3.1

OBJETIVOS:

Determinar la presencia de hesperidina


8.3.2 FUNDAMENTO:

57

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La Hesperidina, se caracteriza por ser soluble en alcohol diluido y como todo


flavonoide tiene fluorescencia frente a la Luz UV que se acenta en medio
alcalino.
8.3.3

MUESTRA: Cscara de Citrus sinensis Naranja

8.3.4

MATERIALES Y REACTIVOS:

Alcohol diluido
NaOH 1%
Beaker de 100 y 250Ml
HCI 10%
Pipetas de 5Ml
Tubos de Ensayo
Lmpara UV
ClFe3

Embudo
H2SO4 concentrado
Papel Filtro
HNO3 concentrado
HCl concentrado
NaOH 30%
NH3 QP
Placas Cromatogrficas

8.3.4 EXTRACCION:
Tratar 5 g de la parte blanca de la cscara de naranja con una mezcla de 20 mL
de alcohol diluido y 5mL de una solucin de NaOH 10%, dejar en reposo 24 h y
aadirle HCl al 10% hasta pH 5, con lo que se consigue precipitar la hesperidina.
Dejar en reposo y filtrar, el lquido filtrado se vuelve a dejar en reposo, filtrar
nuevamente sobre el anterior y lavar el pp. hasta reaccin neutra. Posteriormente
secar el residuo, con lo que se consigue que cristalice la hesperidina.
8.3.5 REACCIONES DE IDENTIFICACION:
Tratar mg del pp. ms gotas de H. 2S04 concentrado, inicialmente da coloracin
amarillo rojizo, que por calentamiento pasa a rojo.
Tratar mg del pp. ms gotas de HCI concentrado, da coloracin amarillo intenso.
Tratar mg del pp. ms gotas de NaOH 30 %, da coloracin amarillo naranja.
Reaccin de Shinoda similar a la Rutina
Observar la Fluorescencia a la lmpara UV con y sin vapores de NH 3 en un
cromatograma
8.4

RESULTADOS:

58

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59

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8.5

DISCUSION:

8.6

CONCLUSIONES:

8.7

CUESTIONARIO:

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Color de la fluorescencia de la rutina y la hesperidina


Qu color se observa con la rutina y la hesperidina despus de hacer la reaccin
de Shinoda.

60

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Mencione otros tipos de flavonoides que existan y esquematice su estructura


qumica.
De las reacciones de identificacin del (1) al (4) explique por se producen los
cambios y/o aparicin de las coloraciones.
A que cree que se deba que los flavonoides presenten fluorescencia.
Propiedades farmacolgicas de los flavonoides.

61

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8.8

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BIBLIOGRAFIA:

PRCTICA N 9
DROGAS CON CUMARINAS E IRIDOIDES
9.1

DROGAS CON CUMARINAS

62

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-benzopirona, es una lctona cclica que se


caracteriza por que dan fluorescencia frente a la Luz UV y que se acenta en
medio alcalino. El nombre de cumarina proviene de coumarou nombre verncula
del haba tonka (Dipteryx odorata willd.), del que se aisl en 1820. Casi todas las
cumarinas se encuentran sustituidas en 7 por un hidroxilo.
Cumarina

Fraxino

9.1.1 OBJETIVO:
Determinar la presencia de cumarinas en Plantas Medicinales
Observar la Fluorescencia a la Luz UV
9.1.1

FUNDAMENTO:
Las cumarinas se extraen con acetona tambin en medio alcohlico dando
soluciones coloreadas. La Reaccin de Baljet es para detectar grupos lactnicos y
la reaccin del hidroxamato es por el grupo carbonilo y la amina formndose un
compuesto condensado.

9.1.2

MUESTRA: Cichorium intybus Achicoria y Taraxacum offinacinale Diente de Len

9.1.3

MATERIALES Y REACTIVOS:

Matraz de 250 ml
Refrigerante
Embudo
Tubos de ensayo
NaOH 5%
NO3Ag 1N en acetona
FeCl3

Acido Pcrico 1% en EtOH

NaOH 5%
HCl 0.5 mol/L
NaOH 2N
cido actico glacial
NH3

Clorhidrato de hidroxilamina en EtOH al 10%


KOH 10%

9.1.4 OBTENCION:
Se toman 5 g de raz, fresca o desecada, triturada y pulverizada y se le adiciona
50 mL de acetona ter de petrleo, se le somete a una extraccin por reflujo por
30 minutos, obtenindose una solucin de color amarillo. Filtrar.
9.1.5

REACCIONES DE IDENTIFICACION:

63

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Reaccin de Baljet: Si la alcuota no se encuentra en alcohol, debe evaporaras el


solvente en un bao de agua y redisolverse en la menor cantidad de alcohol (1 ml)
se le adiciona 1 ml del reactivo de Baijet, formado por cantidades iguales de
NaOH 10% y de Acido pcrico 1% en EtOH que se deben mezclar en el momento
del ensayo y llevar a BM hasta la aparicin de una coloracin 6 precipitado rojo
(++ y ++++) respectivamente.
Ensayo de Hidroxamato frrico: Una alcuota se coloca en un tubo y se aade 1
gota de clorhidrato de hidroxilamina en EtOH al 10%. Se aaden gotas de KOH
10% en etanol y se calienta hasta burbujeo, se aaden unas gotas de cido
clorhdrico 0.5 mol/L y una gota de FeC1 3 1%. El desarrollo de una coloracin
violeta (+), claro (++), intenso(+-H-) indica presencia de cumarinas.
Del extracto tomar unos 5 ml y aadirle 2 ml de una solucin de NaOH 5%, se
acenta la coloracin amarilla y se ve un tenue precipitado.
CCF.
o

Sistema de solvente : CHCI3: AcOH:H20 (4:1:1)

Soporte

: Silicagel G

Revelador

: Luz UV, Sol. de NO3Ag 1N en Acetona,


NaOH 2N y EtOH(5:15) y AcOH glacial.

9.2

DROGAS CON IRIDOIDES:


Son

monoterpenos

que

se

caracterizan

por

un

esqueleto

biciclico

ciclopentapirnico, los iridoides toman su nombre de unas hormigas australianas:


el iridodial, es el compuesto ms sencillo del grupo, se aisl a partir de
Iridomirmex y en estos insectos desempea un papel de defensa.

Iridoide

Valepotriato

64

Loganina

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9.2.1

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OBJETIVO

Determinar la presencia de iridoides en Plantas Medicinales


Detectar por cromatografa la presencia de iridoides
9.2.2

FUNDAMENTO:
Se fundamenta en una extraccin del iridoide en una especie vegetal fresca y su
posterior determinacin con vainillina en medio cido.

9.2.3

MUESTRA: Plantago major Llantn - Valeriana officinalis Valeriana

9.2.4

MATERIALES Y REACTIVOS

9.2.5

Matraz de 250 ml

Metanol etanol Q.P.

Capilar de vidrio

Vainillina

Papel de filtro

HCl

Alcohol de 70

Placas cromatogrficas

H2SO4 concentrado

Ans aldehdo

cido actico glacial

Lmpara UV

EXTRACCION
Macerar algunos gramos de hojas de Plantago major llantn o raz de Valeriana
0ff valeriana, recin recolectados y finamente triturados en cantidad suficiente de
alcohol de 70 para cubrir y dejar en reposo por espacio de 48 horas a
temperatura ambiente. Filtrar.

9.2.6

REACCIONES DE IDENTIFICACION

Tomar del extracto con un capilar y puntear en un papel de filtro unas 5 a 10


veces, dejando secar despus de cada adicin. Colocar en la mancha 1 II gotas
de la solucin reactivo de vainillina clorhdrica, calentar suavemente por 5 minutos

65

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y observar la coloracin persistente que oscila entre la gama del rosado al rojo en
caso positivo.
CCF

9.3

Sistema de solvente: BuOH:AcOH:H20 (63:10:27)

Soporte:

Revelador: Vainillina Clorhdrica al 2%

Silicagel G

Anisaldehdo en medio clorhdrico

AcOH:HCl (2:8)

Lmpara UV

RESULTADOS:

66

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9.4

DISCUSION:

9.5

CONCLUSION:

9.6

CUESTIONARIO:

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Qu color de fluorescencia tiene la cumarina y cuando se aade vapores de


amonaco que cambios se observa.

67

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9.7

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Qu otras especies vegetales contienen glicsidos cumarinicos e iridoides.

Importancia teraputica de las cumarinas y los iridoides

BIBLIOGRAFIA:

PRCTICA N 10

DROGAS CON TANINOS GALICOS Y CATEQUICOS

68

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OH

OG

COOH

OH

OG

OG
OG

HO

OH
cido glico
10.1

OH

HO

Tanino glico

OH
OH Catequina

OBJETIVOS:

Extraer los taninos de una droga vegetal


Caracterizar a los taninos mediante reacciones qumicas de identificacin y
diferenciacin
Cuantificar espectrofotometricamente los taninos en plantas medicinales

10.2

FUNDAMENTO:
Los taninos son sustancias de composicin qumica compleja, que al degradarse
o hidrolizarse se obtienen polifenoles relativamente simples. En general son
polmeros de alto peso molecular que forman soluciones coloidales en medio
acuoso. Por su naturaleza fenlica reaccionan con las sales de fierro dando
coloraciones azules o verdes, tienen capacidad de reducir al permanganato,
forman complejos con cationes divalentes como el Pb +2 , Hg+2.

10.3

MUESTRAS:
Vainas de Caesalpinea spinosa tara
Raz de Krameria triandra ratania del Per
Hojas de Piper elongatum matico

10.4

MATERIALES Y REACTIVOS:
Tubos de Prueba

FeCl3 1%

Matraz de 250 mL

KMnO4 1%

Refrigerante

Acetato de Pb 5%

Cocina elctrica

Acetato de Hg 5%

69

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10.5

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Papel de Filtro

Solucin de gelatina

Embudo

Solucin de alcaloides

EXTRACCION:
Preparar extractos etanlicos al 50 % de las muestras con 48 horas de
anticipacin, con agitacin permanente con la finalidad de extraer los taninos de
las muestras y puedan ser utilizadas en las determinaciones cualitativas, de
diferenciacin y de cuantificacin.
REACIONES CUALITATIVAS DE IDENTIFICACIN:
Filtrar los extractos y concentrar para reducir el volumen y preparar una batera de
tubos de prueba y realizar las siguientes reacciones:
REACCION DE COLORACION CON EL CLORURO FERRICO:
Tomar una alcuota de las muestras y aadirle gotas del reactivo de FeCl 3 1%;
observar el color que se forman:

Color azul-negruzco: Taninos glicos

Color verde-azulado: Taninos catquicos

REACCION DE OXIDO REDUCCION:


Tomar una alcuota de las muestras y aadirle gotas del reactivo de KMno 4 1%. La
reaccin es positiva si desaparece el color violeta del permanganato
REACCION DE PRECIPITACION:
Tomar una alcuota de las muestras y aadirle gotas de los reactivos de Acetato
de Plomo 5%, Acetato de Mercurio 5%, Acetato de Cu 5%. Observar la formacin
de precipitados por la formacin de complejos metlicos o tanatos de Pb, Hg y Cu;
respectivamente.
REACCION DE DIFERENCIACION: REACCION DEL FORMOL CLORHIDRICO
O REACCION DE STIASNY
Los taninos glicos o catquicos se hidrolizan en medio cido y de formol. Los
taninos glicos permanecen en solucin, mientras que los taninos catquicos se
polimerizan formando una sustancia insoluble de color rojo llamado flobafeno o
tanino rojo.
10.6

MATERIALES Y REACTIVOS:

70

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10.7

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Matraz de 250 mL

Embudo

Beaker

HCl concentrado

Refrigerante

Formol al 38-40%

Cocina elctrica

Pipetas de 5, 10 mL

Papel de Filtro

FeCl3

PROCEDIMIENTO:
Tomar unos 50 mL de la muestra problema al 40%, aadir unos 5 mL de HCl
concentrado y 10 mL de Formol al 38-40% y llevar a ebullicin por unos 30
minutos en un sistema de reflujo. Los taninos glicos no forman precipitados. Los
taninos catquicos forman precipitados insolubles de color rojo. Enfriar y filtrar la
solucin, tomar una alcuota del filtrado y aadirle gotas del reactivo de FeCl 3 en
presencia de acetato de sodio al 5%. Si se forma una coloracin azul oscura,
indica la presencia de taninos glicos o elgicos.

10.8

CUANTIFICACION DE TANINOS POR ESPECTROFOTOMETRIA: METODO


DEL ACIDO FOSFOMOLIBDICO
Se fundamenta en la capacidad reductora del tanino sobre el cido fosfomolbdico
que en medio alcalino da una coloracin azul que puede ser ledo al
espectrofotometro a 700 nm.

10.8.1 MATERIALES Y REACTIVOS:


Etanol

Equipo de reflujo

Balanza Analtica

Tungstato de sodio

Erlenmeyer

Acido fosfomolbidico

Embudo

Na2CO3

cido tnico

Papel de Filtro

Pipeta de 5mL, 1 mL y 2 mL

Fiola de 50 mL

10.8.2 PROCEDIMIENTO
Pesar 10g de la droga en polvo, se lleva a un frasco cnico de 1000 mL con 500
mL de alcohol al 50%. Mantener en agitacin durante 6 horas en un agitador
magntico, dejar en reposo por 8 horas, luego volver a agitar por 30 minutos y
filtrar. Se transfieren 3 mL del filtrado a un matraz aforado y se diluye con agua
destilada hasta enrase (SOLUCION MUESTRA).

71

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Se prepara un juego de 4 matraces aforados de 50 mL cada uno y se rotula como


B (blanco), S (referencia), M1 y M2 (muestra problema) y se procede de la
siguiente manera:
REACTIVOS

M1 y M 2

Solucin Muestra

1.0 mL

Solucin de Referencia

3.0 mL

Agua destilada

5.0 mL

2.0 mL

4.0 mL

Reactivo para taninos

2.0 mL

2.0 mL

2.0 mL

1.0 mL

1.0 mL

Se agita, se deja en reposo por 5 minutos


Solucin de Na2CO3 20%

1.0 mL

Se completa con agua destilada hasta enrase y se mezcla bien.

Leer la absorbancia de la solucin de referencia y las muestras a 700 nm en un


trmino no mayor de 2 minutos.
10.8.3 CALCULOS:

AmpxStx
1000
%
Taninos

x
100
AstxMpx
(
100

%
H
)

10.9

Amp

= absorbancia de la muestra problema

Ast

= Absorbancia del estndar

St

= masa del estndar (g)

Mp

= masa de la muestra problema (g)

%H

= porcentaje de humedad de la droga

RESULTADOS:

72

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10.10 DISCUSION:

73

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10.11 CONCLUSIONES:

10.12 CUESTIONARIO:

Reacciones qumicas de las pruebas de identificacin para los taninos.

Mencione otros mtodos de cuantificacin de los taninos

Cules son las propiedades medicinales de los taninos?

Cules son las especies medicinales que poseen taninos?

Propiedades medicinales del Piper angustifolium matico?

74

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10.13 BIBLIOGRAFIA:

PRACTICA N 11

DROGAS CON ACEITES ESENCIALES Y RESINAS

11.1

OBJETIVO GENERAL:

75

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Identificar drogas que contienen resinas de inters farmacutico

Caracterizar el material vegetal de especies que contienen aceites esenciales

Extraer aceites esenciales por arrastre de vapor

Caracterizar las propiedades fsico qumicas de los aceites esenciales.

11.2

DROGAS CON RESINAS


Las resinas son sustancias amorfas o semislidas, de composicin qumica
compleja y generalmente obtenido de exudados vegetales. Estn localizados en
casi todos los rganos de la planta. Abundan especialmente en las familias de las
Pinceas, Umbeliferas, Leguminosas, Euforbiceas, Convolvulceas.

11.2.1 OBJETIVOS:
Extraer resinas de un material vegetal
Caracterizar las resinas mediante reacciones qumicas
11.2.2

FUNDAMENTO:
Siendo las resinas compuestos complejos formados por resenos, alcoholes
resnicos, cidos resnicos, resinotanoles, se aprovecha su solubilidad en
solventes orgnicos como el alcohol etlico para su extraccin y posterior
identificacin

de

sus

componentes

mediante

reacciones

qumicas

de

identificacin.
11.2.3 DROGA : Resinas de Schinus molle molle
11.2.4 MATERIALES Y REACTIVOS:
Etanol 70%

Equipo de reflujo

Erlenmeyer

ter

Acetato de Cu 5%

Anhdrido actico

cido sulfrico Q.P.

Placas cromatogrficas

Cpsula de porcelana

11.2.5 EXTRACCION:
Tomar unos gramos de Schinus molle Molle y hacer una extraccin alcohlica
utilizando un sistema de reflujo por unos 30 minutos, luego filtrar el extracto y
dividirlo en tubos de ensayo para las reacciones de identificacin caractersticas y
cromatografa en capa fina.
11.2.6 REACCIONES GENERALES DE IDENTIFICACION

76

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Reaccin del Acetato de Cobre 5%: A unos 2 mL de la solucin alcohlica


de la resina, adicionarle 1 ml de la solucin reactivo de acetato de cobre,
dando una coloracin verde esmeralda correspondiente a las sales resinosas
de cobre.

Reaccin de Lieberman : A unos 2 ml de la solucin alcohlica de la resinas,


adicionarle anhdrido actico y por las paredes del tubo de ensayo dejar caer
gotas de cido sulfrico concentrado y observar la formacin del anillo
correspondientes

Reaccin de Morawsky: Disolver unos gramos de resina pulverizada en 5


mL de ter etlico, colocar 1 mL de esta solucin etrea en una cpsula de
porcelana y agregar 3 gotas de cido sulfrico concentrado. La solucin debe
de tomar una coloracin parda.

11.3

Cromatografa en Capa fina:

Muestra : extracto alcohlico de la resina

Soporte : Silicagel G

Solvente: Acetona : Metanol (3:1)

Revelador: Reactivo de Lieberman y Luz Ultravioleta

DROGAS CON ACEITES ESENCIALES:


Los aceites esenciales son compuestos voltiles y aromticos, de composicin
qumica compleja y son considerados como productos metablicos de los
monoterpenso, sesquiterpenos y fenilpropanos. Las esencias son voltiles por eso
son aromticas, susceptibles de ser arrastrados por el vapor de agua, por su
elevada tensin de vapor. Son insolubles en agua y solubles en solventes
orgnicos.

CH3

CH3

CH 3

OH
H 3C
CH 3
(-)-Mentol

OH
H3C
CH3
(+)-Isomentol

77

OH
H3C
CH3
(+)-Neoisomentol

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11.3.1 OBJETIVOS:

Extraer aceites esenciales por arrastre de vapor

Caracterizar fsica qumicamente a los aceites

Realizar cromatografas con el material vegetal que contiene aceite esencial

11.3.2 FUNDAMENTO:
Los aceites esenciales son sustancias que pueden ser extrados por arrastre del
vapor de agua, aprovechando su volatilidad al calor y ser separados por su
densidad y solubilidad en medio oleoso, ser identificados por su olor caracterstico
y porque impregnan de sustancia oleosa el papel de filtro.
11.3.3 DROGAS:

Hojas de Mentha piperita menta

Hojas de Schinus molle molle

11.3.4 MATERIALES Y REACTIVOS:


Equipo de arrastre de vapor

Lmina portaobjeto

Alcohol

Agua destilada

Cloroformo

Luz UV

Vainillina clorhdrica

Diclorometano

Tolueno

Acetato de etilo

Mentol

11.3.5 PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL:


Armar el equipo de destilacin por arrastre de vapor y colocar la muestra
respectiva dentro del baln y comenzar a destilar la esencia recibindolo dentro
de un matracito, y observar las caractersticas de la esencia mediante el olor.
Pesar 100 g de la droga seca y molida, se transfieren a un baln de destilacin de
1 L, se aaden 400 mL de una solucin de cloruro de sodio 1% m/v y se conecta
el equipo de destilacin de aceite esencial. Se calienta el baln a ebullicin y se
ajusta la destilacin a 2-3 mL./min. Mantener la destilacin por 2 horas o ms.
Finalizada la destilacin, dejar enfriar y aadir por el condensador pequeas
porciones de ter dietlico. Transferir el contenido a un embudo separador, aadir
de 2 3 mL ms de ter, agite y decante la fase acuosa. Al extracto etreo, aadir
0.5 g de sulfato de sodio anhidro y lavar el residuo con varias porciones de ter

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dietlico, eliminar el solvente cuidadosamente en bao de agua a temperatura no


mayor de 40 C y determine la masa del aceite voltil por la diferencia de pesada
del pesafiltro vaco y con el aceite esencia.
El aceite esencial obtenido se reserva para su anlisis correspondiente, dentro de
los que se encuentran:

Solubilidad en alcohol

Poder rotatorio

ndice de refraccin

Densidad relativa

CROMATOGRAFIA EN CAPA FINA:


Sistema de solventes: Benceno-Acetato de Etilo (95:5)
Soporte: Silicagel G
Revelador : Anisaldehdo clorhdrico
Vainillina sulfrica
Reactivo fosfomolbdico
11.4

RESULTADOS:

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11.5

DISCUSION:

11.6

CONCLUSIONES:

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11.7

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CUESTIONARIO:
Cmo se extraen los aceites esenciales por compresin y utilizando solventes
voltiles

Especies vegetales que contienen aceites esenciales. Sealar su principal


componente.

Uso de los aceites esenciales en la prctica farmacutica

Los aceites esenciales pueden ser sustancias txicas

Qu especies medicinales de la regin pueden ser materia prima potencial para


la extraccin de aceites esenciales de inters econmico y farmacutico.

81

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11.8

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BIBLIOGRAFIA:

PRCTICA N 12
METODOS DE EXTRACCION DE LOS ALCALOIDES
12.1

FUNDAMENTODE EXTRACCION DE LOS ALCALOIDES:


Al enfrentar el trabajo extractivo con alcaloides, debe tenerse en consideracin
que los mismo aparecen en la especie a investigar, juntos a otros compuestos
(terpenos, flavonoides, esteroides, lpidos, pigmentos, etc.) por ello cualquier
estrategia particular debe ir dirigida a obtener una mezcla cruda de alcaloides,
enriquecida en aquel o aquellos componentes que sean de inters ( y
eventualmente a todos los alcaloides presentes en el material vegetal ) y de la que
estn ausentes los dems metabolitos indeseables.

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CH3
N
CH3

H3C

HO
12.2

O
Morfina

OH

CH3

Cafeina

OBJETIVOS:

Obtener alcaloides a partir de las especies vegetales


Verificar la validez del proceso de extraccin, haciendo reacciones de
identificacin de los alcaloides.
Cuantificar el contenido de alcaloides en un material vegetal
12.3

FUNDAMENTO:
Se aprovecha la capacidad de los alcaloides para modificar sustancialmente su
solubilidad en agua o solventes inmiscibles, al variar la naturaleza cido base
del medio.

12.4

MUESTRA:
Hojas de Uncaria tomentosa Ua de Gato

12.4.1 MATERIALES Y REACTIVOS:

Matraz de 250 mL

Cloroformo

Solucin de HCl o H2SO4

Amoniaco

Reactivos para alcaloides

Oxido de calcio

Pera

de

decantacin

12.4.2 PROCEDIMIENTO:
12.4.3 Extraccin cida:
A Unos 2 g de polvo de una droga que contiene alcaloides, tratarla con 4 mL de
una solucin de HCl 10% o H2SO4; luego filtrar. El lquido filtrado tratarlo con
NH4OH hasta pH 10; adicionarle un solvente orgnico como ter o cloroformo y

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evaporar en bao Mara hasta sequedad. El residuo se disuelve en una solucin


de HCl 10%, verificar la presencia de alcaloides con los reactivos de identificacin
Solucin reactivo de Dragendorff
Solucin reactivo de Mayer
Solucin reactivo de Hager
Solucin reactivo de Wagner
12.4.4 Extraccin alcalina:
En un mortero colocar unos 2 g de droga en polvo, adicionar igual cantidad de
CaO, mezclar bien y adicionar gotas de amonaco concentrado hasta formar una
papilla, desecar sobre un papel, colocar dentro de un erlenmeyer y adicionarle 4
mL de cloroformo y agitar evitando la emulsificacin. Decantar la capa
clorofrmica y evaporar en bao Mara hasta sequedad. El residuo obtenido se
disuelve en agua acidulada y en esta se verifica la presencia de alcaloides con los
reactivos generales de precipitacin.
12.5

CUANTIFICACIN DE ALCALOIDES:

12.5.1 Fundamento:
Los alcaloides se extraen cuantitativamente mediante una extraccin alcalina. Se
recuperan como sulfatos y se cuantifica con NaOH 0.1N por retroceso el exceso
de cido sulfrico.
12.5.2 Materiales y Reactivos:

Equipo de Soxhlet

Embudo de separacin

H2SO4 0.1 N

NaOH 0.1N

ter de Petrleo

ter etlico

H2SO4 2 N

Hexano

Sulfato de Sodio anhidro

Indicador Rojo de metilo

12.5.3 Procedimiento:
Se pesa 10 g de muestra seca y pulverizada, se humedece con una solucin
saturada de Na2CO3 y se extrae en un soxhlet con una mezcla de EP:Et 2O (1:1),
durante 8 horas. El extracto resultante se extrae con H 2SO4 2 N (1 x 40 mL; 1 x 30

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mL; 1 x 20 mL). Los extractos cidos se renen y se alcalinizan con una solucin
saturada de Na2CO3 y se extraen con Hexano (1 x 40; 1 x 30; 1 x 25 mL).
Los extractos hexnicos que contienen los alcaloides, se renen y se secan con
sulfato de sodio anhidro y se concentran a sequedad.
La mezcla slida de alcaloides se disuelve en 30 mL de H 2SO4 0.1 N, se agrega
indicador rojo de metilo y se titula con NaOH 0.1N.
12.5.4 Clculo

Donde:

12.6

meq- cido

= 30 mL de H2SO4 0.1N

meq-base

= gasto de NaOH 0.1N

PM

= del estndar

= gramos de muestra

ALCALOIDES DE NUCLEO TROPANICO


Los alcaloides de este grupo tienen como base el sistema bicclico con puente de
tropano que en ocasiones se considera originado por la hipottica condensacin
de un anillo N-metil pirroldinico y N-metil piperdinico.

(
meqAcido

meqBase
)
%
AT

xPM
/
1000
g

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H3C
N

H3C
N

O
O CH3

OCH3

H CH2OH

O
O

OCH3

Cocana

H3C
N

Escopolamina

(-)-Hiosciamina

H CH2OH
O

12.6.1 OBJETIVOS:

Extraer alcaloides de ncleo tropnico

Caracterizar los alcaloides de ncleo tropnico mediante reacciones qumicas

12.6.2 FUNDAMENTO:
Se extraen los alcaloides tropnicos por medio de una extraccin cida y se
caracterizan mediante reacciones qumicas generales, reacciones caractersticas
y por cromatografa en capa fina
12.6.3 MUESTRA:

Hojas de Erythroxylum coca coca

Hojas desecadas de Datura stramonium chamico

12.6.4 MATERIALES Y REACTIVOS:

Matraz de 250 mL.

Tubos de Prueba

Solucin de HCl 10%

Pera de decantacin

Amonaco

Cloroformo

Reactivos generales para alcaloides

Estndar de Cocana

HNO3 concentrado

Estndar de Atropina

Solucin de Tiocianato de cobalto

Placas de cromatografas

Pulverizador

Capilares

12.6.5 EXTRACCION:
Pesar aproximadamente 10 g de droga seca y pulverizada, colocarla en un matraz
de 250 mL., aadir 100 mL. de HCl 10% y someter al calor en BM por 30 minutos,
agitando con frecuencia, enfriar y filtrar. Trasvasarlo a una pera de decantacin,
alcalinizar hasta pH 10 con amonaco y extraer con 5 mL. de cloroformo por 3

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veces. Los extractos clorofrmicos obtenidos se concentran a un tercio de su


volumen total. Con este extracto realizar las reacciones generales de
identificacin.
12.6.6 REACCIONES ESPECIFICAS PARA CARACTERIZAR ATROPINA
Reaccin de Vitaly: Tratar mg. de muestra problema con HNO 3 concentrado,
calentar en Bao Mara hasta residuo amarillo, enfriar y agregar gotas de KOH
alcohlica, dando una coloracin violeta.
Reaccin de Arnold: Colocar en una cpsula de porcelana mg. de la muestra
problema ms gotas de H2SO4 concentrado, ms cristales de NaNO 2 de color
amarillo, ms KOH alcohlica al 10%, pasa a un color violeta rojizo (fugaz)
12.6.7 REACCIONES ESPECIFICAS PARA CARACTERIZAR COCAINA

Reaccin de Young: Tratar mg de la muestra problema con una solucin de


tiocianato de cobalto, dando una coloracin azul turquesa.

12.6.8 IDENTIFICACION

CROMATOGRAFICA

DE

ALCALOIDES

TROPANICO

Muestra

: extractos concentrados de coca y chamico

Estndar

: Solucin de cocana y atropina

Solvente

: Cloroformo: Metanol: Amonaco (63:36:1)

Revelador : S.R. de Dragendorff y S.R. de Young

Soporte

12.7

: Silicagel G

RESULTADOS

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DE

NUCLEO

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12.8

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DISCUSION:

89

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12.9

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CONCLUSIONES:

12.10 CUESTIONARIO

Qu otros mtodos existen para extraer alcaloides?

Fundamento de la extraccin cida y alcalina de los alcaloides

Fundamento de las reacciones generales de identificacin

Clasificacin de los alcaloides. Ejemplos.

Rol fisiolgico de los alcaloides en los vegetales

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Esquematice las estructuras tropnicas conocidas

Propiedades teraputicas de los alcaloides tropnicos

Especies vegetales que contienen alcaloides tropnicos

Fundamento de las reacciones de identificacin de los alcaloides tropnicos.

Las pruebas cualitativas son suficientes para identificar a este tipo de alcaloides

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13.13 BIBLIOGRAFIA:

BIBLIOGRAFIA

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BRUNETON, J.

Elementos de Fitoqumica y Farmacognosia. Edit. Acribia

SA. Zaragoza-Espafta. 1991.


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CACERES, A.

Plantas medicinales de Guatemala. Editorial Universitaria.

Universidad San Carlos. Guatemala. 1996.

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Determinacin de Sapogeninas de Colletia spinosissirna

Gmel taqsana. Trabajo de Aptitud Profesional para Optar el Ttulo de Qumico


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FONT QUER, P.

Plantas Medicinales: El Dioscrides Renovado 7 edicin.

Edil. Labor. Barcelona-Espaa.1981.


5.

GIBAJA, S. Pigmentos Naturales Quinnicos. Fondo Editorial de la UNMSM.


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6.

LOCK DE UGAZ, O. Investigacin Fitoqumica: Mtodos de Estudio de los


Productos Naturales Fondo Editorial de la PUC: 1994.

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MIRANDA, M.

Mtodos de Anlisis de Drogas y extractos. Instituto de

Farmacia y Alimentos. Universidad de La Habana. Ciudad La Habana Cuba.


1996.
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Fundamentos

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10. WAGNER Y BLADT Plant Drug Analysis: A thin Layer Chromatography Atlas.
Second Edition. Springer-Verlag. 1996.

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