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Madera y Bosques

vol. 21, nm. 2 : 159-164

Verano 2015

Extractos crudos de Magnolia

schiedeana Schltdl. para el control de


bacterias fitopatgenas
Crude extracts of Magnolia schiedeana Schltdl. for the control of
phytopathogenic bacteria
Thala Ramrez-Reyes1*, Norma Flores-Estvez1, Mauricio Luna-Rodrguez2, Juan Carlos Noa-Carrazana1,
Lzaro R. Snchez-Velsquez1 y ngel Trigos-Landa2.
1

Instituto de Biotecnologa y Ecologa Aplicada. Universidad Veracruzana. Xalapa, Veracruz, Mxico.

 aboratorio de Alta Tecnologa de Xalapa. UniversiL


dad Veracruzana. Xalapa, Veracruz, Mxico.

Autor de correspondencia. tiramirez1906@gmail.com

Resumen

Se evalu el efecto bactericida de extractos crudos de diferentes tejidos de Magnolia schiedeana sobre las bacterias fitopatgenas Pectobacterium carotovorum y Pseudomonas cichorii. Los tejidos estudiados fueron polifolculo, semilla, corteza (proveniente de especmenes
adultos y de especmenes jvenes), flor y hoja (proveniente de especmenes adultos y de especmenes jvenes), utilizando como disolventes
acetato de etilo y de etanol. Los efectos bactericidas de los extractos fueron comparados con el efecto de un antibitico comercial (tetraciclina, 5 g/l). Los extractos que mostraron inhibicin bacteriana fueron, el obtenido con acetato de etilo a partir de tejido floral, el cual
no igual la inhibicin del antibitico comercial sobre P. cichorii ( p < 0.001) y el extracto etanlico floral, que inhibi el crecimiento de
P. carotovorum en la misma proporcin que el antibitico (p = 0.079).
Palabras clave: bacterias fitopatgenas, fenologa, magnolia, Pectobacterium carotovorum, Pseudomonas cichorii.

Abstract

Bactericidal effect was assessed in crude extracts of different tissues of Magnolia schiedeana about the phytopathogenic bacteria Pectobacterium carotovorum and Pseudomonas cichorii. The tissues studied were polifolicule, seed, bark (obtained from adult specimens
and young specimens), flower and leave (from both adult and young specimens as well), using as solvents ethyl acetate and ethanol. The
extracts that showed bacterial inhibition were obtained one with ethyl acetate from floral tissue, which did not equaled the inhibiting
properties of a commercial antibiotic (tetracycline, 5 g/l) on P. cichorii (p < 0.001); and the other was floral ethanol extract that inhibited P. carotovorum in the same proportion as the antibiotic (p = 0.079).
Key words: phytopathogenic bacteria, phenology, magnolia, Pectobacterium carotovorum, Pseudomonas cichorii.

Introduccin

enfermedades respiratorias, malformaciones congnitas,

La seguridad ambiental se ha convertido en una gran

entre otras (Ziga et al., 2007; Teng et al., 2010).

preocupacin para muchos pases debido, entre otros

Aunado a ello, el incremento de multirresistencia en

aspectos, al empleo de agroqumicos, los cuales pueden

organismos fitopatgenos est impulsando la bsqueda

causar daos ambientales severos, tanto al suelo y ani-

de nuevos agentes biocidas de fuentes alternativas, desta-

males, como a la salud humana, provocando distintos

cando entre estos a las plantas medicinales (Roy et al.,

tipos de cnceres, linfomas, asma, dermatitis alrgica,

2010; Vukovic et al., 2007).


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Ramrez-Reyes et al. Control de bacterias fitopatgenas

Las magnolias han sido ampliamente utilizadas en

Materiales y mtodos

la medicina tradicional oriental; especies como Magnolia officinalis, M. obovata, M. grandiflora y M. liliflora

Muestras vegetales

presentan actividades antibacterial y antifngica, por

El material vegetal de Magnolia schiedeana se colect en

contar con una amplia variedad de compuestos biolgi-

el rea Natural Protegida de La Martinica, Banderilla,

camente activos obtenidos de tejidos como corteza,

Veracruz, Mxico (19 35 N, 95 56 O). Se evalu la

raz, hojas, flores y semillas, destacando los fenilpropa-

influencia del estado fenolgico sobre la actividad antimi-

noides magnolol y honokiol (Bae et al., 1985; Song y

crobiana de extractos crudos, para lo cual se tomaron

Fischer, 1999; Wang et al., 2000). Pocos estudios han

muestras aleatorias de diez individuos sin estructuras

demostrado la capacidad antibacteriana de las especies

reproductivas, con dimetro a la altura del pecho (DAP)

de magnolia endmicas de Mxico. Recientemente,

menor a 10 cm y altura menor a 1.5 m, considerados jve-

Jacobo-Salcedo et al. (2011), observaron que extractos

nes; as como diez individuos que contaron con estructu-

etanlicos de semilla de M. dealbata presentaron efec-

ras reproductivas, DAP mayor a 10 cm y altura mayor a

tos antimicrobianos sobre la bacteria fitopatgena Cla-

1.5 m, considerados adultos. Para evaluar la influencia de

vibacter michiganensis subsp. michiganensis, as como

los periodos estacionales sobre la actividad antibacte-

en algunas cepas de bacterias y hongos patgenos de

riana, se colectaron muestras de hoja, corteza, flor, polifo-

humanos.

lculo y semillas iniciando en otoo de 2009 hasta verano

Otra especie endmica de Mxico es Magnolia schiedeana Schltdl, un rbol perenne y de reproduccin anual

de 2010. El muestreo de hojas y corteza se realiz para los


dos grupos de edad definidos.

que habita en el bosque mesfilo de montaa y en el bos-

El material vegetal se lav con agua destilada, se pes

que caducifolio; esta especie se restringe a 14 poblaciones

y almacen a -20 C por 5 das. Posteriormente se liofiliza-

dispersas, catalogndose as como especie amenazada

ron con un equipo

(Cicuzza, 2007; Dieringer y Espinoza, 1994; Newton et

hasta su utilizacin.

LABCONCO

y se almacenaron a -4 C

al., 2008; Vzquez, 1994). Aunque poco estudiada, M.


schiedeana cuenta con informacin sobre aspectos ecol-

Preparacin de extractos

gicos en torno a su conservacin, sin embargo escasos

El material vegetal liofilizado fue triturado en una licua-

estudios abordan su aprovechamiento en fitosanidad, tal

dora industrial (Fisher, 3BL52). Posteriormente, de cada

como ocurre con otras especies de magnolia (Jacobo-Sal-

tejido triturado se prepararon extractos crudos de acetato

cedo et al., 2011; Mori et al., 1997). No hay informacin

de etilo y de etanol (25 g de tejido y 250 ml de disolvente),

sobre sus propiedades antimicrobianas, ni el estado feno-

los cuales se maceraron por 72 h, a una agitacin de 175

lgico de la planta o la posible influencia de los periodos

min-1 (agitador orbital

estacionales sobre dichas propiedades.

en tres ocasiones.

LAB-LINE).

Este proceso se realiz

Los extractos se filtraron y se concentraron a presin

Objetivos

reducida en un evaporador rotatorio (BUCHI); los extrac-

El presente trabajo tuvo como objetivo evaluar el efecto

tos fueron almacenados en frascos de vidrio a -4 C hasta

antimicrobiano de extractos crudos de diferentes tejidos

su uso.

de individuos jvenes y adultos de M. schiedeana y el posible efecto de las estaciones del ao, sobre el desarrollo in

Pruebas de actividad antibacteriana

vitro de las bacterias fitopatgenas Pectobacterium caro-

Los organismos de prueba fueron cepas de P. cichorii y P.

tovorum y Pseudomonas cichorii.

carotovorum, aportadas por el Laboratorio de Alta Tecnologa de Xalapa, S. C. (LATEX), Xalapa, Veracruz,

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Mxico. Para su uso, los cultivos bacterianos se activaron

Anlisis estadsticos

en medio B de King a 27 C 2 C por 35 h. Para la reali-

Para la evaluacin de la capacidad antibacteriana, se

zacin de los bioensayos se utilizaron soluciones bacteria-

registraron los dimetros de la zona de inhibicin del cre-

nas con 1.5 x 10 ufc/ml, segn la escala de turbidez

cimiento bacteriano alrededor de los crculos de papel.

McFarland (NCCLS , 1994).

Aquellos tratamientos que no tuvieron efecto fueron eli-

La actividad antibacteriana de los extractos vegetales

minados del anlisis. Se realiz un anlisis de varianza no

previamente obtenidos, fue evaluada por el mtodo de

paramtrico de Friedman, adems de comparaciones

difusin en disco, como se describe a continuacin: Los

pareadas para muestras dependientes utilizando la prueba

extractos fueron resuspendidos en una porcin suficiente

de Wilcoxon entre tratamientos y con respecto a los con-

del disolvente correspondiente; posteriormente crculos de

troles. Para ello se utiliz el software

papel de filtracin media estriles (7 mm de dimetro) fue-

(StatSoft 2002 Inc. STATISTICA).

STATISTICA

v.8

ron impregnados por inmersin en cada extracto (extracto:


35 mg, un antibitico comercial -tetraciclina, 0.325 mg-,

Resultados

disolventes acetato de etilo o etanol, y un disolvente como

Los extractos acticos y etanlicos obtenidos a partir de

control) y dejados secar sobre un papel aluminio estril,

flores de M. schiedeana, tejido primaveral propio de rbo-

con la finalidad de que se volatilizara el disolvente

les adultos, tuvieron un efecto inhibitorio sobre las cepas

empleado. Adicionalmente, 100 l de solucin bacteriana

evaluadas (Tabla 1). El resto de los extractos no mostra-

mezclada con 18 ml de medio B de King, fueron vaciados

ron inhibicin sobre las bacterias de prueba, no impor-

en cajas Petri (cinco cajas por tejido estudiado). Posterior-

tando el tejido vegetal, estado de desarrollo del rbol,

mente, en cada caja se colocaron cuatro crculos de papel

disolvente empleado, ni la temporada del ao en que se

de filtracin grado medio, estriles (7 mm de dimetro),

colectaron dichos materiales.

uno impregnado con cada tratamiento. En total fueron

El extracto floral etanlico inhibi a P. carotovorum

cuatro tratamientos por caja, con cinco rplicas por expe-

en la misma proporcin que la tetraciclina (p = 0.079),

rimento. Las cajas se incubaron a 27 C 2 C por 48 h

mientras que P. cichorii no se vio afectada en su creci-

(Pereira et al., 2006; Vukovic et al., 2007).

miento colonial, en tanto que el extracto floral de acetato

Tabla 1. Actividad antibacteriana de extractos crudos de Magnolia schiedeana sobre las bacterias fitopatgenas Pectobacterium
carotovorum y Pseudomonas cichorii.

D= dimetros de la zona de inhibicin (mm), incluyendo el dimetro del crculo (7 mm), DS= desviacin estndar, P= polifolculo, S= semilla, CA= corteza adultos, CJ= corteza
jvenes, F= flor, HA= hoja adultos, HJ= hoja jvenes, AcOEt= acetato de etilo, EtOH= etanol.
-No mostr actividad antibacteriana.

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Ramrez-Reyes et al. Control de bacterias fitopatgenas

de etilo si bien inhibi el crecimiento de P. cichorii, no

R. solani, F. oxysporum, Alternaria alternata, Botrytis

logr igualar la capacidad inhibitoria de tetraciclina (p <

cinrea (Ahmed y Abdelgaleil 2005; Choi et al., 2009;

0.001). Sin embargo, este mismo extracto no tuvo efecto

Mori et al., 1997). De lo anterior se puede suponer que las

inhibitorio frente a P. carotovorum.

magnolias son capaces de presentar actividad biolgica en


distinta intensidad, ante diversos microorganismos fitopa-

Discusin

tgenos, con extractos obtenidos a partir de diferentes

Las especies pertenecientes al gnero Magnolia cuentan

tejidos y diferentes polaridades de disolventes. De este

con una gran variedad de compuestos biolgicamente

modo, la actividad antibacteriana observada en este estu-

activos, incluyendo lignanos, neolignanos, terpenoides y

dio dependi del tejido vegetal y del tipo de disolvente, por

alcaloides. Estos presentan un amplio espectro de activi-

lo que es probable que algunos grupos qumicos afines a

dad biolgica, destacndose su capacidad mosquiticida,

un tipo de disolvente pudieran ser los causantes de la acti-

antifngica y antimicrobiana, lo que ha impulsado el estu-

vidad antibacteriana especfica por extracto observada.

dio para evaluar la actividad de extractos vegetales de

Para el caso de P. cichorii, no se encontr informa-

diversas especies de este gnero (Bang et al., 2000; Clark

cin de actividad antimicrobiana empleando extractos

et al.,1981; Kelm et al., 1997).

crudos de magnolias ni de alguna otra especie vegetal, por

En este trabajo se observ una inhibicin del creci-

lo que cabe destacar que haber obtenido actividad biol-

miento bacteriano de P. carotovorum por la accin de

gica empleando extracto de flor con acetato de etilo,

extractos etanlicos florales de M. schiedeana; est docu-

representa un elemento promisorio en la bsqueda de

mentado que extractos etanlicos de diversos tejidos de

agentes antimicrobianos, cuyos resultados podran ser

magnolias han mostrado inhibicin sobre diversas bacte-

extrapolados a otros agentes infecciosos ampliamente ubi-

rias, como C. michiganensis y E. coli, atribuyendo dicha

cuos del grupo de las Pseudomonas.

actividad a metabolitos pertenecientes al grupo de los


fenoles (Bae et al., 1985; Clark et al., 1981; Jacobo-Sal-

Conclusiones

cedo et al., 2011). Se ha determinado la presencia de feno-

Los extractos crudos obtenidos de flores de M. schiedeana

les en flores de magnolias, como en M. grandiflora, segn

poseen compuestos que, diferencialmente al ser extrados

investigaciones de Huang et al. (2012). Para M. schie-

con etanol o acetato de etilo, poseen actividad antimicro-

deana no se encontr informacin sobre los compuestos

biana ante P. carotovorum o P. cichorii, por lo que se

qumicos presentes en flores, por lo que el realizar estu-

sugiere determinar los metabolitos secundarios responsa-

dios qumicos de esta especie orientar en sus aplicaciones

bles de la actividad biolgica observada, ya que puede tra-

biolgicas.

tarse de compuestos distintos al magnolol y honokiol,

Est ampliamente documentado que aceites esencia-

ambos obtenidos con disolventes polares. Esto aporta

les y compuestos fenlicos, obtenidos a partir de extractos

mayor sustento al estudio de extractos, as como a los

de plantas, pueden presentar diversas actividades antimi-

compuestos qumicos obtenidos de magnolia para el con-

crobianas, dependiendo de las tcnicas de separacin y de

trol de bacterias fitopatgenas Gram negativas, con miras

las polaridades de los disolventes utilizados sobre el

a otorgar a esta especie vegetal elementos adicionales para

mismo extracto vegetal (Bajpai et al., 2008).

su aprovechamiento y conservacin.

Investigaciones relacionadas con el empleo de extractos de diversas especies de magnolias, como M. obovata,

Reconocimientos

M. kobus, M. grandiflora, han mostrado que dependiendo

Al Consejo Nacional de Ciencia y Tecnologa (CONACyT)

del disolvente es la capacidad de inhibicin sobre hongos

por la beca otorgada para realizar estudios de doctorado

de importancia agrcola como Pythium aphanidermatum,

(Registro No. 214331). Se Agradece al Laboratorio de

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Madera y Bosques

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Alta Tecnologa de Xalapa (LATEX) por el uso de sus ins-

pounds.

talaciones as como a todo el personal que ah labora.

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Natural

Product

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Manuscrito recibido el 22 de marzo de 2013.


Aceptado el 31 de agosto de 2014.
Este documento se debe citar como:
Ramrez-Reyes. T., N. Flores-Estvez, M. Luna-Rodrguez, J.C. NoaCarrazana, L.R. Snchez-Velsquez y . Trigos-Landa. 2015. Extractos crudos de Magnolia schiedeana Schltdl. para el control de
bacterias fitopatgenas. Madera y Bosques 21(2):159-164.

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