SEPARACIN CROMATOGRFICA DE LOS PIGMENTOS DE LA CROLOFILA

Y ANLISIS DEL CRECIMIENTO DE SEMILLAS DE FRIJOL ROJO BAJO LA

INFLUENCIA DE DIFERENTES LONGITUDES DE ONDA
Lpez Vlez, Felipe1; Lorduy Hernndez, Sara2; Muoz Londoo, Melissa3;Toro
Giraldo, Juanita4.
1
2
flopezv@eafit.edu.co, slorduy@eafit.edu.co,3mmunozl@eafit.edu.co,4jtorogi@
eafit.edu.co
Universidad EAFIT, Escuela de ciencias bsicas y humanidades
Departamento de ciencias bsicas, Laboratorio de Biologa.
Medelln agosto 2014
RESUMEN: El estudio del mundo microscpico ha sido de gran
inters para conocer y entender el mundo que nos rodea. Se
muestran los resultados de un estudio realizado para conocer
los diferentes tipos de microorganismos que habitan en
utensilios de uso diario en la universidad EAFIT, tales como
sillas, trapeadoras, bebederos, etc. Para esto se realizaron
sembrados en dos medios de cultivo, PDA y TSA,
posteriormente se procedi a analizar en un microscopio el
tipo de organismos que crecieron. Despus de realizar las
tinciones correspondientes se encontraron diferentes tipos de
bacterias, como bacilos, y hongos de la familia zygomycota y
levaduras.
ABSTRACT: This article shows the results of a study made to
know the diverse types of microorganisms that inhabit utensils
used on daily basis at Eafit University, just like chairs, mops,
etc. For this, plantings in two different growth medium were
performed, PDA and TSA. Subsequently, the samples were
observed on a microscopy and separated into their
taxonomical realm. After making the corresponding staining
different kinds of bacteria were described, such as bacillus,
and zygomycota and yeast fungi.
PALABRAS CLAVE: Microorganismo, bacteria, hongo, tincin,
Gram, PDA, TSA, microscopio, anlisis microbiolgico.

1. INTRODUCCIN
La fotosntesis es un proceso
esencial para la vida en la tierra,
puesto que este permite la creacin
de glucosa y dems compuestos
energticos que sern utilizados por
cada uno de los organismos
vivientes en la tierra. Consiste en la
transformacin de energa lumnica
en energa qumica, por organismos

auttrofos, es decir, organismos

capaces
de
generar
materia
orgnica a partir de inorgnica
como una parte de su metabolismo.
La fotosntesis en las plantas se
lleva a cabo en una organela
especializada llamada cloroplasto,
compuesto de la figura 1.
Figura 1. Estructura del cloroplasto.

forman glucosa y ribulosa para

repetir el ciclo, que se muestra en la
figura 3.
Figura 3. Ciclo de Calvin.

La fotlisis o fase lumnica se da en

el tilacoide, ms especficamente en
la membrana, en una unidad
conocida como cuantosoma. El
cuantosoma est formado por 2
unidades, fotosistema 2 (PS2) y
fotosistema 1 (PS1), adems de una
cadena
transportadora
de
electrones. En la fase lumnica
llegan 2 fotones al PS2 que se
transmiten por esta estructura y
esta energa causa la liberacin de 2
electrones que se transmiten a la
cadena de electrones, al finalizar se
genera un ATP. En el PS1 se recogen
estos electrones que al final de la
cadena transportadora reducen un
NAD y lo convierten en NADH2.
Durante esta fase los productos son
ATP y NADH2. En la figura 2 se
puede observar el proceso de la
fotlisis.
Figura 2. Fotlisis o fase lumnica.

La fase oscura produce PGA, PGAL,

glucosa y energa, a partir del ciclo
de Calvin Benson. [1]. Donde la
ribulosa
al
capturar
CO2
se
transforma en 3 molculas de PGA,
que gracias al ATP y el NADH2 forma
el PGAL y luego por el ATP se

La clorofila se encuentra en
diferentes concentraciones en las
hojas de las plantas, con la
cromatografa de capa delgada se
puede conocer cules son las
sustancias que se encuentran en
una hoja, los tipos de clorofila y la
proporcin
entre
estas.
La
importancia de esto radica en que la
capacidad de realizar fotosntesis de
una planta y generar distintas
sustancias orgnicas se basa en la
cantidad de cloroplastos que tenga
y por lo tanto en su cantidad de
clorofila. Es por esto que la
cromatografa
es
un
paso
importante en el estudio descrito a
lo largo del artculo.
Esta es una tcnica analtica
utilizada
especialmente
para
separar molculas relativamente
pequeas, adems para identificar y
determinar la pureza de algunos
compuestos. La fase estacionaria es
una capa fina, soportada en una
superficie plana, que se encarga de
la absorcin. Esta tcnica se basa
en la distribucin de la fase
estacionaria y la mvil que es la
manera como se separan los
pigmento, donde la fase mvil

asciende reteniendo de forma

significativa los componentes.
El solvente en est cumple una
funcin importante, puesto que se
encarga de subir por la capilaridad,
arrastrando las molculas que se
movern por la fase estacionaria.
Adems se busca entender como la
fotosntesis, descrita anteriormente,
puede ser alterada segn la longitud
de onda con la que se realice y
analizar cmo esta afecta el
crecimiento de una planta de frijol
con relacin a la luz blanca.

2. OBJETIVOS
2.1.

OBJETIVO GENERAL

Comprender lo visto en clase acerca

de la fotosntesis, y como esta se ve
afectada por la longitud de onda y
frecuencia incidentes. Esto se logra
usando papel celofn como filtro
interferencial para que solo una o
un rango de longitudes de onda
incidan en la semilla. Adems
aprender a hacer una Cromatografa
de capa fina y as poder observar
los pigmentos que componen el
extracto vegetal.
2.2.

OBJETIVOS
ESPECFICOS

Aprender
y
conocer
los
diferentes
pigmentos
que
componen el extracto vegetal a
travs de la cromatografa de
capa fina.

Usar papel celofn como filtro

interferencial para hacer incidir
un cierto rango de frecuencias
seleccionadas.

Usar papel craft para cubrir las

semillas y observar como la falta
de luz afecta el proceso de
fotosntesis.

Sembrar semillas sin ningn

papel y que les incidan todo el
rango de longitudes de onda
para usar de referencia y
comprar.

Tomar medidas despus de 2

semanas y comparar las semillas
del papel celofn y el craft con
las de referencia y as poder
concluir.

3. METODOLOGA
3.1 CROMATOGRAFA DE
CAPA FINA PARA
CLOROFILA
En primera instancia, en un mortero
con 1 ml de etanol se macer trozos
de espinaca. En 4 tubos de ensayos
se agregaron 1.8 ml de ter de
petrleo y 0.2 ml de acetona. Aparte
se recort 4 tiras de papel filtro apto
para entrar en los tubos de ensayo,
donde en cada una se agreg una
gota del extracto, con ayuda de un
gotero, a 2 cm del extremo de una
de las puntas del filtro de papel,
cuando se sec se introdujo en los
tubos de ensayo, sumergidos a 1 cm
por el lado donde se aplic la gota,
previniendo que la mezcla tocara la
muestra. Al identificar los pigmentos
que componen el extracto vegetal
de la espinaca en cada filtro de
papel, como se muestra en la figura
4, se da por terminada la
cromatografa y se procedi a retirar
los papeles filtro.
Figura 4. Pigmentos que componen
el extracto vegetal.

4. RESULTADOS
4.1 CROMATOGRAFA
Para la cromatografa de capa fina
de la clorofila, pigmento vegetal en
las plantas que ayuda a convertir la
energa lumnica en energa qumica
usada en la fotosntesis y que da el
color caracterstico, se observan los
diferentes
pigmentos
que
lo
componen como se ilustra en la
figura 5.
3.2
FOTOSNTESIS

EXPERIMENTO

En 8 vasos plsticos se adiciono la

misma cantidad de suelo estril,
aproximadamente a de cada
vaso. Primeramente se desinfect
16 semillas de frijol con 70 % de
etanol por un minuto, hipoclorito de
sodio 1% por 5 minutos y lavado 3
veces con agua, que posteriormente
con ayuda de unas pinzas se
introdujo, sin profundizar, 2 semillas
de frijol en cada vaso. Cada vaso se
incub en distintas condiciones: 2
fueron expuestas a la oscuridad, por
tanto se envolvieron con papel
peridico, otras 2 se dejaron
expuestas a la luz normal (sin
envoltura) y las otras 4 se
envolvieron en papel globo de color
(2 de color rojo y 2 de color azul).
Los vasos se incubaron durante 2
semanas y media, humedeciendo 1
vez a la semana con 12 ml de
hoagland. Terminado el tiempo de
crecimiento se midieron varias
variables como: peso fresco areo,
peso fresco radicular, peso fresco
total, nmero de hojas y longitud
area. Adems del correcto lavado
de las races y las hojas en el
momento de cosechar las plantas.

Figura
5.
Resultado
de
la
cromatografa de capa fina de la
clorofila.

En la figura se pueden apreciar

claramente los carotenoides de
colores amarillento y anaranjado y
la clorofila como tal, con su
caracterstico color verde.
4.2 FOTOSNTESIS
Para
el
experimento
de
la
fotosntesis se evidencia el efecto
que tiene la incidencia de la luz en
el crecimiento de la planta. Esto se
pudo observar en los 16 frijoles
expuestos a diferentes longitudes
de onda del espectro de la luz
blanca por un periodo de 2 semanas
y media. En la figura 1 (exposicin a
todas las longitudes de onda), se
observa una planta con buen
crecimiento y un color verde

brillante. En la figura 2 (exposicin a

longitudes de onda entre 400 a 460
nm) se aprecia un crecimiento
menos pronunciado que en la figura
1 y color menos brillante. En la
figura 3 (exposicin a longitudes de
onda entre 600 a 700 nm) de los 4
frijoles, solo uno pudo crecer en
menor medida, con un verde plido.
En la figura 4 (ninguna exposicin a
longitudes de onda), el crecimiento
es poco y el color es de un amarillo
verdoso.

5. DISCUSIN Y ANLISIS DE
LOS RESULTADOS
REFERENCIAS
[1]
[https://www.uam.es/personal_pdi/ci
encias/jsatrust/Tema24-2009.pdf]