TEMA 1. Introducción A La BQ

CFGS LABORATORIO DE DIAGNSTICO CLINICO. TECNICAS DE ANALISIS BIOQUIMICO.
TEMA 1. INTRODUCCION A LA BIOQUMICA.
TEMA 1. INTRODUCCIN A LA BIOQUMICA
ESQUEMA:
1.
2.
3.
4.
Concepto de Bioqumica Clnica.

Etapas de un Anlisis Bioqumico.
Tcnicas y mtodos de Anlisis Bioqumico.
Control de Calidad en el Laboratorio.
1. CONCEPTO DE BIOQUMICA CLNICA.

La
bioqumica es una ciencia muy joven que deriva de 2 lneas matrices:
1- De la medicina y fisiologa (investigacin de sangre, tejidos y orina).

2- De la qumica orgnica (estudio a cerca de la estructura de los compuestos orgnicos).
Las molculas halladas en la materia viva o biomolculas contienen compuestos orgnicos de
carbono en los cuales el elemento carbono se halla relativamente reducido o hidrogenado. Los compuestos
orgnicos presentes en la materia viva presentan enorme variedad y la mayor parte son extraordinariamente
complejos.
An las clulas ms sencillas (bacterias) contienen un elevado nmero de diferentes molculas
orgnicas; as por ejemplo la Escherichia Coli contiene aproximadamente 5.000 compuestos orgnicos diferentes
y entre ellos 3.000 clases diferentes de protenas y 1.000 diferentes tipos de cido nucleicos.
Estas molculas son macromolculas (porque tienen un peso molecular muy grande) que
paradjicamente estarn construidas con pilares o molculas sencillas, cada una de las cuales desempean ms
de una funcin en las clulas vivientes.
Ejemplo: los aminocidos son pilares de molculas proteicas pero tambin son
precursores de hormonas.
La bioqumica clnica se ocupa del estudio de los aspectos qumicos de la vida humana, en la
salud y en la enfermedad, mediante la aplicacin de los mtodos qumicos de laboratorio para el diagnstico, el
seguimiento, el control del tratamiento, la prevencin y la investigacin de la enfermedad. Los aspectos
qumicos de la vida humana comprenden el estudio de los procesos metablicos en relacin a los cambios
fisiolgicos, patolgicos y a los inducidos por maniobras teraputicas.
Los objetivos son:
Diagnstico: es una hiptesis que se confirma en funcin de los resultados obtenidos en una
analtica de laboratorio: un aumento de la enzima GOT indica, por lo general, afectacin del hgado.
Seguimiento y evolucin: se establecen valores de referencia a los que se les hace un control
peridico.
Control del tto: valorar la eficacia de determinados frmacos segn sus niveles en sangre, su
toxicidad, efectos secundarios etc.
Prevencin de enfermedades: se establecen seales de alarma que suelen preceder a los
signos y sntomas clnicos; tambin los programas de deteccin precoz de enfermedades como la
diabetes, la fenilcetonuria etc.
Investigacin de enfermedades: imprescindibles!
El futuro de la bioqumica clnica pasa por:
Disminucin de la demanda de anlisis generales y aumento de los especficos.
Aumento de los programas de deteccin precoz de enfermedades sobre todo en el recin

nacido.
Aumento de la automatizacin de los laboratorios.
Aumento de las analticas a la cabecera del enfermo con el avance de la llamada qumica seca
mediante el uso de tiras reactivas.
Para los anlisis clnicos es muy importante disponer de valores de referencia para cada prueba
bioqumica que se solicita. Antes se utilizaba el trmino valores normales y actual/ usamos el de valores de
referencia, de los que existen dos tipos:
1. Basados en un individuo: son datos previos del mismo individuo obtenidos cuando se encontraba en un
determinado estado de salud y que sirven para valorar la evolucin de ese paciente.

2. Basados en una poblacin: se obtienen por procedimientos estadsticos a partir de una poblacin de sujetos
bien definidos (edad, sexo, estado de salud establecido mediante determinados criterios, etc).
Estos son los valores a los que se alude en las tcnicas de laboratorio como ndices de intervalo en el q se
considera q los individuos son saludables con respecto a ese dato clnico.
Es importante q el TEL realice su trabajo con:

ciencia: para la comprensin suficiente del trabajo y su disciplina, es necesario formacin terico-prctica.
conciencia: los tubos son pacientes y de un resultado puede depender su salud.
Paciencia: ser meticulosos y crticos con el mtodo clnico.
Instrumentacin: desarrollando un conocimiento bsico de aparatos e instrumentos cada vez ms
sofisticados acortando el tiempo y aumentando la sensibilidad.
2. ETAPAS DE UN ANLISIS BIOQUMICO.
Peticin de pruebas
Toma de Muestras
Transporte
Procesamiento o manipulacin de la muestra
Realizacin del anlisis
Deteccin de la respuesta analtica
Clculo de resultados
Informe de los resultados
Repasar los apuntes de MBH; aquello de peticin de pruebas y su documentacin, la extraccin de sangre,
los colores de los tubos, la toma de muestras de orina, etc.
3. TCNICAS Y MTODOS DE ANLISIS BIOQUMICOS.

En el laboratorio clnico se realizan diferentes tipos de anlisis en diferentes muestras biolgicas para
detectar la presencia de determinadas sustancias (llamadas analitos) y establecer siempre que sea posible su
cuantificacin; como los resultados se aplican a un paciente han de ser estudiados antes de implantar un
determinado mtodo, para tener la garanta de que los datos que proporciona son fiables.
Tcnica analtica: es el principio cientfico, ya sea qumico, fsico, fsico-qumico, etc que nos
proporciona informacin sobre la presencia o ausencia, concentracin, actividad o cualquier otra
magnitud de un determinado parmetro (ej glucosa) en una muestra biolgica.
Absorcin de luz
Dispersin de la luz
Distribucin de los componentes de una mezcla entre dos fases
Mtodo analtico: es la adaptacin de una tcnica para la medida concreta de un parmetro en una
muestra biolgica. Las instrucciones para la realizacin del mtodo se conocen como PROTOCOLO.
Cules son esos mtodos y sus caractersticas?

1.
Por el tipo de medida que realizan:
1.1.
Mtodos cualitativos: solo detectan la presencia o no del analito; por ej: sangre oculta en heces.
1.2.
Mtodos semicuantitativos: indican el rango aproximado de concentracin del analito; ej: tiras reactivas
de orina q utilizan una escala de color.
1.3.
Mtodos cuantitativos: expresan la concentracin con > o < exactitud del analito en la muestra; ej:
determinacin de glucosa en suero.
2.
Por el procedimiento Fsico-Qumico que utilizan:
2.1.
M. mecnicos: algunos de ellos son:
1. Filtracin, ultrafiltracin y dilisis: dependen de la exclusin por el tamao a travs de los poros de
determinadas membranas.
2. Centrifugacin y ultracentrifugacin, flotacin y decantacin: se separan las sustancias segn el tamao, la
masa, la densidad.
3. Destilacin: separa por evaporacin.

4. Electroforesis: las partculas segn su carga elctrica y su masa, emigran cuando son sometidas a un
campo elctrico.
5. Cromatografa: los componentes de la muestra, son separados entre dos fases.
6. Extraccin con disolventes, etc.
2.2.
Tcnicas pticas: detectan la radiacin lumnica y entre ellas estn las de uso ms comn:
1. Espectrofotometra o espectroscopia de emisin: cuando un tomo es excitado por una fuente de

energa, sus electrones pueden alcanzar niveles orbitales de energa mayor; cuando el electrn vuelve a su
estado de reposo emite una REM.
Dentro de ella tenemos:
Espectroscopia de emisin atmica o fotometra de llama: determina Na, K y Li en lquidos biolgicos; se

basa en la emisin de luz; cuando se ponen en contacto con la energa calorfica de una llama cada
elemento de una muestra, desprende una luz con una longitud de onda diferente, tpica de cada uno, y con
una intensidad luminosa directa/ proporcional al n d tomos, lo que es proporcional a la concentracin en
la muestra.
Espectroscopia de fluorescencia o fluorimetra: la fluorescencia es la capacidad q tienen las sustancias de

emitir una luz visible cuando se las iluminan con radiacin UV; una molcula absorbe luz de una
determinada longitud de onda (energa) y emite luz de una longitud de onda superior (< E); la intensidad
de la radiacin es % a la cantidad absorbida que a su vez es % a la cantidad de molculas que absorben.
Quimioluminiscencia: emisin de luz de diferentes sustancias al oxidarse; no precisan aporte externo de

luz.
Espectroscopia de fosforescencia o fosforimetra, espectroscopia de rayos X etc.

2. Espectroscopia de absorcin: se usa para Ca, Mg, Zn, Cu, Pb y otros metales y gran cantidad de
compuestos biolgicos y se basa en la absorcin de luz por lo que la radiacin emitida ser de < intensidad que
la inicial y % a la concentracin de la sustancia en la muestra.
Dentro de ella tenemos:
E. d absorcin molecular UV-V e IR, segn la zona del espectro de REM en la q trabaje.
E. d absorcin atmica.
Resonancia magntica Nuclear: se coloca la muestra en un campo magntico externo y se irradia con
determinada radiofrecuencia; parte de los ncleos de E inferior la absorben; el aparato de Resonancia
magntica Nuclear detecta esta absorcin de E.
Etc.
3. Espectrofotometra de dispersin: son principalmente dos tcnicas que se basan en el hecho de que
cuando un haz d luz choca con una partcula en suspensin, parte de la luz es dispersada, parte reflejada, parte
absorbida y parte transmitida.
Turbidimetra: disminucin de la intensidad de un haz de luz incidente cuando pasa a travs de una
suspensin de partculas; se usa sobre todo para la determinacin de proteinas en orina.
Nefelometra: medida de la luz dispersada en ngulos diferentes al de incidencia; uso principal es en

determinacin de protenas especficas.
4. Espectroscopia de reflexin o reflexometra: es la llamada qumica seca.
5.
de refraccin o refractrometra, de difraccin (difraccin de Rayos X) etc.

2.3.
Tcnicas imnunoqumicas: siempre sobre la base d una reaccin Ag-Ac detectan seales d color, d
radioactividad etc. Las + importantes: RIA, EIA, Inmunofluorescencia, inmunonefelometra etc.
2.4.
Mtodos trmicos: como la osmometra, que detecta cambios en el punto de congelacin de una
solucin.
2.5.
Tcnicas electroqumicas: detectan seales elctricas, como la Potenciometra, Conductimetra, etc.
2.6.
Tcnicas de Biologa molecular: basadas en tcnicas de hibridacin de bandas de ADN, por ej, o
tcnicas de amplificacin, mediante PCR (Reaccin en Cadena de la Polimerasa).
3.
Por el uso al que se destinan:
3.1.
Mtodos definitivos: se usan para calibrar materiales; tienen un error sistemtico muy bajo (gran
exactitud) y alta precisin.
3.2.
Mtodos de referencia: son realizados por personal altamente cualificado en laboratorios clnicos o
industriales y con materiales calibrados para obtener valores estndar con los que comparar resultados
obtenidos con otros mtodos.
3.3.
Mtodos de eleccin: son los que utiliza un laboratorio determinado para su trabajo de rutina.

4. CONTROL DE CALIDAD EN EL LABORATORIO:

4.1. Conceptos relacionados con el Control de Calidad.
Se entiende por Control de Calidad a un conjunto de medidas sistemticas encaminadas a observar
y a conservar la fiabilidad d un mtodo analtico. Esto incluye una deteccin de los errores cometidos y una
prevencin de la aparicin de los mismos; su objetivo principal, es asegurar que los valores obtenidos con un
determinado mtodo, presentan una adecuada exactitud y precisin y que por tanto, son cientficamente
vlidos.
Algunos conceptos relacionados con el mismo son:
1. Exactitud: es el grado de concordancia entre el valor de concentracin de la sustancia problema, que se
ha determinado con una tcnica analtica, y el valor real (el obtenido con una tcnica de referencia) de
esa concentracin.
Puede calcularse mediante la siguiente frmula:
E %= V VR / VR
. 100
E %= Exactitud en %; V= el valor q yo obtengo; VR= Valor real. A + cerca d 0 + exacta.

Suele aceptarse una E % < 10% para sustancias no enzimticas y < 20% para las enzimticas; de todos
modos en los protocolos, vienen indicados dichos lmites.
Cuando la inexactitud es constante y de similar cuanta, se conoce como sesgo.
2. Precisin: es el grado de dispersin encontrado entre los valores obtenidos al repetir una misma
determinacin sobre la misma muestra; en el laboratorio clnico se usa mas el trmino contrario, es
decir, imprecisin, q se define como la variabilidad q se obtiene al repetir las medidas de una muestra.
Para calcularla se utiliza principalmente el Coeficiente de Variacin.
CV = DE / X x 100 de unas 20 o 30 determinaciones de la misma muestra y que no debe ser > del 5%.
3. Sensibilidad: es la capacidad para diferenciar dos seales muy parecidas del mismo analito; tambin se
define como la capacidad de un mtodo para producir un cambio en la seal ante un cambio definido d
la cantidad. No solo depende de la tcnica sino del equipo instrumental, del tipo de analito y de la
muestra.
Relacionado con este concepto:
Lmite de deteccin: es la ms pequea concentracin de analito que puede ser detectada por un
mtodo.
Lmite de cuantificacin: es el resultado ms pequeo que puede diferenciarse del blanco.
Tambin es sensibilidad la capacidad que tiene un mtodo analtico para detectar el analito (o sea, dar un
resultado positivo verdadero) en todas las muestras que realmente lo contengan.
Si con 2 mtodos representamos de manera grfica la variacin de la seal que se detecta al analizar
una solucin patrn, el mtodo mas sensible es el que da lugar a una recta de calibracin de mayor pendiente;
esto significa, que con la misma concentracin, un mtodo de mayor sensibilidad registra una seal de valor
superior y tambin, que con soluciones de concentracin similares, es capaz de detectar la diferencia que existe
entre ellas.
La ecuacin de la recta viene definida por la frmula:
y = a + bx
donde b es la pendiente de la recta, a es el punto donde la recta corta al eje Y denominndose ordenada en
el origen, y es la variable dependiente y x la variable independiente.
Esta ecuacin nos permite predecir los valores de una variable (y), en funcin de otra con la que est
relacionada (x).
4. Especificidad o Selectividad: es la capacidad de un mtodo para determinar exclusiva/ el analito en cuestin
sin reaccionar con otras sustancias similares que se pueden encontrar en la mezcla; por ej, un mtodo para
determinar glucosa, ser especfico si solo determina glucosa aunque en la muestra se encuentren otras
hexosas.
Las tcnicas inmunoqumicas, son las + especficas, siempre y cuando el Ac no de reacciones cruzadas
apreciables con molculas parecidas.

La especificidad analtica puede verse afectada x sustancias que se encuentran normal/ en suero o plasma,
como bilirrubina, Hb, lpidos etc que pueden interferir por su color, turbidez o por sus caractersticas fisicoqumicas.
5. Rango analtico o linealidad: es el valor mximo de la concentracin de un analito para el que la seal
registrada x el aparato y la concentracin son directa/ proporcionales; es el rango de concentracin de
las muestras sobre el q se puede aplicar el mtodo, sin tener que hacer ninguna modificacin.
Para determinar el rango, se analizan una serie de muestras normal/ patrones de varias concentraciones y
determinamos la curva de calibracin correspondiente.
El ICA o intervalo de concentracin aplicable o intervalo de medicin, es el intervalo de valores en el que el

procedimiento de medida se aplica sin modificaciones y est comprendido entre el Lmite de deteccin o
cuantificacin y el Lmite de Linealidad.
6. Medidas del blanco: son seales o lecturas (cantidad de absorbancia) observadas durante el proceso de
medida del analito, que se deben al reactivo o a los componentes de la muestra que se est
observando, pero no al analito. En espectrofotometra UV-V estas medidas pueden anularse utilizando
los blancos para calibrar la absorbancia a valor cero, o utilizndolos en un sistema de doble haz.
Pueden obtenerse experimental/ midiendo lo siguiente:
Un blanco de reactivo: es decir, los reactivos sin la muestra y hacemos una lectura inicial as
eliminamos las interferencias propias del reactivo.
Un blanco de muestra: la lectura inicial se hace con el suero diluido en la misma proporcin que se le
va a echar al reactivo y as eliminamos las interferencias de la muestra antes de q se produzca la
reaccin.
Como es de esperar, cuanto + bajos sean los valores del blanco de un mtodo, mejor ser la exactitud y la
precisin q se obtienen con ese mtodo.
Es importante que el TEL tenga en cuenta la magnitud de las medidas del blanco ya que stas contribuyen al
error total del proceso de medida.
7. Interferencias: son el efecto producido por uno o ms compuestos sobre un analito, alterando la
exactitud de su medida.
Cuanto mayor es la especificidad de un mtodo o tcnica, menos se ve afectado por

las interferencias que daran lugar a una lectura errnea del parmetro que se est
analizando.
Es prcticamente imposible determinar todas las interferencias posibles para un

determinado mtodo, de manera que en la prctica, slo se tienen en cuenta las
interferencias significativas
4.2. Lquidos de referencia:

Son aquellas soluciones que contribuyen a asegurar la calidad de un procedimiento analtico; pueden
presentarse de forma lquida o liofilizado (ha de reconstituirse).
Suelen tener las siguientes funciones:
1. Calibrar los instrumentos de medida.
2. Obtener resultados analticos, como las curvas de calibracin, sobre las que extrapolar nuestros resultados.

3. Demostrar y controlar la fiabilidad d los resultados obtenidos en el lab, por ej, al ser analizadas junto con
las muestras.
4. Evaluar la validez de los procedimientos de medida.
Puede ser destinado a diferentes usos:
1. Como patrn o estndar: se usa para obtener resultados analticos ya que contiene el analito a una
concentracin conocida; se usa sobre todo en las determinaciones espectrofotomtricas a punto final, para
calcular la concentracin de los analitos en las muestras, por comparacin de las diferentes absorbancias
obtenidas en stas y en el estndar.
Tambin se pueden utilizar varios patrones, que contienen el analito a diferentes concentraciones de valor
conocido, para construir curvas patrn que sirvan posteriormente para interpolar los valores de absorbancia
medidos en las muestras y determinar las concentraciones que les corresponden.
2. Como calibrador: se emplea para ajustar los resultados proporcionados por los aparatos de medida a los
que terica/ debieran dar, segn la informacin facilitada por el laboratorio comercial que prepara el
calibrador utilizado; esta calibracin debe hacerse diaria/ y antes de comenzar las determinaciones de las
muestras.
3. Como control: es un lquido biolgico (suero, plasma o sangre total) procesado por un laboratorio comercial
y del que se conocen las concentraciones de cada uno de los analitos que contiene; puede ser normal si
contiene los analitos a unas concentraciones fisiolgicas, o patolgico si estn x encima o x debajo de lo
que se considera fisiolgico.
Puede ser utilizado para las siguientes funciones:
Evaluar la validez de un procedimiento de medida.
Validar los resultados obtenidos en el control de calidad interno del laboratorio; para ello se introducen
junto con las muestras y se procesan igual que estas; as verificamos los resultados, ya que si los ofrecidos
por el control son precisos y exactos, los de las muestras procesadas con el, tambin.
Estudiar comparativa/ los resultados obtenidos en el control de Calidad externo en diferentes laboratorios.
4. Pool: consiste en la mezcla de diversos sueros o plasmas, realizada en el propio laboratorio analtico; los
valores son desconocidos, pero se aproximan a los que se consideran normales; es el lquido de referencia
mas parecido a las muestras.
4.3. Grficas de control:
Para hacer el seguimiento de la precisin en el laboratorio de Qumica Clnica se utilizan
fundamentalmente procedimientos estadsticos que se reflejan en tres tipos de grficas: de Levey-Jennings, de
Youden y las CuSum.
1. Grfica de Levey-Jennings: consiste en una curva de distribucin normal dibujada de lado, en la que se
marcan puntos especficos correspondientes a los valores de la media ms y menos una, dos y tres
desviaciones estndar, que se prolongan hacia la derecha formando la grfica en la que se representarn ms
tarde los valores obtenidos cada da para el control:
Cuando se utilizan estas grficas para el control de calidad, hay que preparar una para cada control y
para cada parmetro bioqumico.
En una hoja de papel milimetrado, dispuesta de forma apaisada, se traza un eje de coordenadas, de
manera que en el eje de ordenadas se sitan los valores de concentracin del analito y en abscisas los das
correspondientes al periodo de seguimiento.
La escala de unidades de concentracin se traza de manera que queden dentro del ancho del papel los
valores comprendidos entre la media (que se sita en el centro de la hoja) y cuatro desviaciones estndar por
arriba y por debajo del valor de la media.
Se marcan los trazos correspondientes a los valores de la media, en lnea continua, y 1DE, 2DE,
3DF, -1DE, -2DE y -3DE, en lneas discontinuas.
Una vez que se ha preparado la grfica, se anota el resultado del control diario y se aplican los criterios
que haya adoptado el laboratorio para aceptar o rechazar los resultados del anlisis.
2. Grfica de Youden: es el resultado de superponer dos grficas de Levey-Jennings de forma
perpendicular entre s.
En este tipo de grficas se pueden reflejar los valores de dos controles de diferente concentracin de un
mismo analito, utilizando, por ejemplo, el grfico horizontal para valores clnicamente normales y el vertical
para valores patolgicos.

3. Grfica Cusum: se llama as porque en ella se representan sumas acumuladas de las diferencias entre
los valores obtenidos cada da y el valor medio calculado a partir de determinaciones previas
Para construir este tipo de grfica se marca en el centro del eje de ordenadas el punto cero y se traza
una lnea horizontal. Por encima y por debajo de esta lnea se disponen los valores positivos y negativos
respectivamente. En el eje de abscisas se marca el tiempo
(das, nmeros de lotes analizados, etc).
Los datos que se sealan en la grfica corresponden a
las sumas acumuladas, que se obtienen restando el
resultado del control obtenido cada da del valor de la media
y acumulando a este valor la diferencia obtenida el da
anterior.
La interpretacin de los resultados se basa en el tipo
de curva que traza la lnea Cusum, con respecto a una curva
tipo sealada en una plantilla, o puede establecerse un valor
numrico lmite llamado Limite de decisin Cusum .
En este caso, la interpretacin es similar a la que se
realiza con las grficas de Levey-Jennings, y tiene la ventaja
de que el control puede programarse en los analizadores
para que se realice de forma automatizada.
Cuando se establece en un laboratorio clnico un programa de control de calidad, lo que se pretende es
tener un instrumento que haga posible tomar decisiones inmediatas con respecto a la validez de los resultados
obtenidos para las muestras de los pacientes, basndose en la observacin de que los valores del control
permanecen dentro de unos lmites previamente establecidos. Si el valor del control se encuentra dentro de
esos lmites, se supone que los resultados de las muestras de los pacientes que se analizaron en el mismo lote
que ste, son valores correctos.
El lmite que se acepta con ms frecuencia es que los valores del control han de encontrarse
comprendidos dentro del intervalo de confianza del 95,5%, es decir, estos valores han de ser prcticamente
iguales al 95,5 % de los datos obtenidos con el control durante el periodo en el que se estableci el valor
medio.
De acuerdo con este criterio se considera que un valor de control es aceptable si se encuentra dentro del
rea comprendida entre la media y 2DE en la grfica de LeveyJennings, o en la de Youden. Si un valor del
control no cumple esta condicin, los resultados de los anlisis del lote no se aceptan.
Aunque las grficas de Levey-Jennings son fciles de interpretar y proporcionan una buena
representacin visual de la precisin, tienen el inconveniente de que se necesita mucho tiempo para anotar
todos los resultados da a da en ellas, ya que son necesarias dos o tres para cada parmetro bioqumico (una
por control).

Modificaciones frecuentes en los grficos de control:

Dispersin: cuando los errores aleatorios o la imprecisin aumentan
Tendencia: es la desviacin sistemtica de los valores observados cuando el mtodo analtico
sufre un problema en desarrollo progresivo.
Desviacin: es una modificacin abrupta o brusca con respecto al valor medio establecido.
Para hacer de forma ms prctica la toma de decisiones, se han ideado otras alternativas. La ms
utilizada es el sistema de reglas mltiples de Westgard
1: 3 SD una observacin supera la media el lmite de 3SD
2: 2 SD dos observaciones consecutivas superan la misma media 2SD
R: 4 SD dos observaciones consecutivas se diferencian ms de 4SD
4: 1 SD cuatro observaciones superan la media 1SD
10: MEDIA diez observaciones caen a un mismo lado de la media.
Las reglas 1:3SD y R: 4SD generalmente sugieren un error aleatorio. Las reglas 2:2SD, 4:1SD y 10:
MEDIA suele ser un error sistemtico.
4.4. Protocolo de bsqueda de errores.
Hasta en los laboratorios ms experimentados y capacitados se producen en ocasiones, situaciones en
las que los resultados de los controles se encuentran fuera de los lmites permitidos. En estos casos lo
importante es averiguar las causas y resolverlas rpidamente, por lo que si se tiene establecido un protocolo de
bsqueda de errores la tarea se facilita considerablemente.
A continuacin, de forma esquemtica y sin pretensiones de haber abarcado todas las situaciones
posibles se indica un ejemplo de cmo se puede establecer una pauta a seguir en estas situaciones que en la
prctica, no resultan nada fciles de investigar. El ejemplo se centra en la preparacin y desarrollo tcnicas
espectrofotomtricas U V V:
1. Bsqueda de errores en la preparacin del anlisis:
1.1. Reactivos:
en la conservacin: se ha sobrepasado la fecha de caducidad o la estabilidad? se han guardado

hermticamente cerrados, en ausencia de luz y a la temperatura adecuada? si no se est seguro de que todo
esto se ha hecho bien, desechar el kit y coger uno nuevo.
en el tratamiento: se ha utilizado agua de calidad apropiada para su preparacin? los reactivos

preparados han pasado x material volumtrico sucio? se han diluido con la cantidad correcta de diluyente?
dejan residuo slido? se han disuelto sin prdida de sustancia?
1.2. Controles:
en la conservacin: lo mismo que en los reactivos.
en el tratamiento: se ha utilizado agua de calidad apropiada para su preparacin? se han

disuelto con la cantidad adecuada de agua? se han disuelto sin prdida de sustancia? se ha esperado el
tiempo de reactivacin antes de usarlos? se han congelado correctamente las fracciones? se han congelado y
descongelado reiteradamente? se ha evitado la formacin de espuma?
2. Bsqueda de errores en la realizacin del anlisis:
2.1. Uso de pipetas: se han utilizado pipetas sucias o desportilladas? se han utilizado pipetas demasiado
grandes para volmenes muy pequeos? (por ej, pipetas de 5 ml para medir 500 microlitros) se han utilizado
pipetas hmedas?era correcto el nivel del menisco observado a la altura de los ojos?se han vaciado o llenado
demasiado deprisa las pipetas automticas?se ha ajustado correctamente el volumen en los dosificadores?
2.2. Temperatura y tiempo. se han atemperado suficientemente los reactivos, controles y muestras?se ha
colocado correctamente la temperatura en el bao mara?se ha tenido en cuenta que las cubetas de plstico
necesitan ms tiempo para atemperarse que las de vidrio?se ha medido bien el tiempo de incubacin?
2.3. Fotmetro: se ha ajustado bien el cero?ha estado la lmpara encendida el tiempo suficiente?ha habido
fallos en el suministro de corriente elctrica?ha entrado luz en el compartimento de pruebas?ha envejecido la
lmpara?hace mucho tiempo que no ha sido revisado por el servicio tcnico?

2.4.-Cubetas: se han utilizado cubetas sucias o rayadas?se han situado por los lados correctos en el paso de
luz?han estado hmedas por fuera?han estado suficientemente llenas?haba burbujitas en la cubeta?
2.5.-Clculos: se han hecho correctamente las operaciones con decimales?se ha utilizado correctamente el
factor?se ha tenido en cuenta la dilucin?se ha calculado en las unidades adecuadas?se ha tenido en cuenta
el blanco de reactivo o de prueba?
En ocasiones, aunque los controles dan resultados correctos, el valor encontrado para la muestra de un
paciente es incomprensible. Las causas suelen estar fuera del propio laboratorio, pero es a ste al que le
corresponde establecer relaciones con los dems servicios del hospital o de la institucin sanitaria en la que se
encuentra ubicado, de manera que se puedan organizar programas conjuntos de garanta de calidad que
aseguren que la obtencin, traslado, conservacin y preparacin de las muestras se han hecho correctamente.
4.5. Validacin de resultados:
Consiste en la revisin global de los resultados, encaminada a comprobar que el sistema analtico est
bajo control y que los resultados obtenidos con l, son coherentes o congruentes con las caractersticas clnicas
del paciente.
Para realizarla:
1 se ha constatado que el control interno de la calidad y la validacin tcnica no ha detectado anomalas
analticas y esto se hace en base a los intervalos de decisin fijados para cada analito y en:
Informacin acerca del paciente: se conoce su procedencia (Atencin Primaria o Atencin
Especializada), su diagnstico y sus datos de filiacin, as como si hubo incidencias en la toma de la
muestra.
Informacin acerca de la muestra: el TEL revisa la muestra antes de introducirla en el analizador y
conoce los ndices sricos y por tanto el grado de ictericia, hemlisis o lipemia de la muestra.
Informacin acerca del mtodo: diariamente se calibran los aparatos al comienzo de la jornada
estableciendo el control de calidad analtico para todos los componentes.
2 se procede a la revisin de todos los informes de resultados que realiza el facultativo responsable del
laboratorio, mediante un programa informtico; se clasifican en tres grupos:
Grupo I: informes estrictamente normales: todos los resultados de los parmetros estudiados estn
comprendidos en los lmites considerados normales y, adems, corresponden a sujetos que no padecen una
enfermedad conocida que pueda alterar estos parmetros.
Grupo II: informes anormales pero coherentes: los resultados estn fuera de los lmites normales pero
son coherentes con el estado de salud del paciente.
Grupo III: informes incoherentes: contienen resultados que por alguna razn no parecen tener
conexin con el estado de salud del paciente.
Terminado el proceso, el informe es enviado al peticionario.
Preguntas de repaso:
Concepto y objetivos de la bioqumica clnica.
Valores de referencia.
Concepto de control de calidad.
Exactitud, precisin, sensibilidad y especificidad: aplicaciones a protocolos de trabajo
Rango analtico o linealidad.
Medidas del blanco e interferencias.
Lquidos de referencia: tipos, funciones, caractersticas y usos.
Criterios de seleccin de una muestra control.
Resolver e interpretar una grfica de Levey-Jennings.
Resolver problemas de diluciones/disoluciones.

REPASO DE CONCEPTOS BASICOS DE DISOLUCIONES Y DILUCIONES.

1
2
3
1
UNIDADES Y FACTORES DE CONVERSION. EL SISTEMA INTERNACIONAL.

DISOLUCIONES.
DILUCIONES.
UNIDADES Y FACTORES DE CONVERSIN. EL SISTEMA INTERNACIONAL
Los resultados de las pruebas, procedimientos y tcnicas realizadas en el laboratorio deben ser expresados en
unidades bsicas inteligibles para todos los pases del mundo, son las unidades del Sistema Internacional
(SI), creado con el objetivo de unificar las unidades de los resultados obtenidos en el laboratorio.
El SI asigna la unidad madre de medida por cada una de las diferentes magnitudes: longitud, peso, masa,
cantidad de materia y volumen; cada una de estas unidades madre tiene un smbolo y diferentes mltiplos y
submltiplos designados por un prefijo, la conversin de stos en la unidad madre se realiza mediante los
factores de conversin.
Las unidades madre son: de longitud el metro (m); de peso (masa sometida a la fuerza de la gravedad) el
kilogramo (Kg); de tiempo el segundo (s), de temperatura el kelvin (K) y de cantidad de sustancia el mol.
Las unidades derivadas son aquellas que se obtienen mediante la combinacin de dos o ms unidades madre a
travs de operaciones matemticas; las de uso ms comn en el laboratorio son el m para el volumen, el m
para la superficie y las unidades de concentracin que veremos ms adelante.
10

DISOLUCIONES.
Una de las prcticas ms corrientes en el laboratorio es la preparacin de disoluciones generalmente lquidas, a

partir de productos comerciales. Una disolucin es una mezcla homognea de dos o ms componentes slidos,
lquidos o gaseosos. El componente que determina el estado de la disolucin, y que est en mayor proporcin,
es el disolvente. La sustancia dispersada en el disolvente y que se encuentra en menor proporcin se llama
soluto. Tanto el disolvente como el soluto pueden ser lquidos, slidos o gaseosos, pero las disoluciones ms
utilizadas en el laboratorio tienen como disolvente un lquido.
Segn el tamao del soluto o fase dispersada en el disolvente, las disoluciones se clasifican en:
Tamao fase dispersada

Superior a 0,1 m
Entre 0,1 y 0,001 m
Inferior a 0,001 m
Clase de disolucin
Disolucin grosera
Disolucin coloidal
Disolucin verdadera
Las disoluciones groseras tambin se llaman dispersiones, ya que las partculas dispersadas se ven
a simple vista, por lo que pueden separarse del disolvente por decantacin o filtracin. Las disoluciones
coloidales tambin llamadas coloides forman emulsiones. Las partculas slo se ven con el ultramicroscopio y
para poder separarlas del disolvente hay que utilizar ultrafiltros con tamao de poro no superior a 0,001
micras. Las disoluciones verdaderas son las ms utilizadas en el laboratorio, las partculas dispersadas no se
pueden visualizar ni con el ultramicroscopio; para separarlas del disolvente hay que utilizar tcnicas de
separacin complejas como la cromatografa o la destilacin.
En general, cuando se habla de disoluciones, no referimos a las disoluciones verdaderas, stas son las
que trataremos en esta unidad.
2.1.
Forma de expresar la composicin de las disoluciones:
La relacin numrica entre los componentes de la disolucin es la concentracin. Existen diferentes mtodos
de expresar la concentracin de una disolucin:
1. g/l. Gramos de soluto por litro de disolucin.
2. M. Molaridad: moles de soluto, por litro de disolucin.
M= n moles/ litro
nmoles = gramos/pm
3. N. Normalidad. Equivalentes- gramo de soluto, por litro de disolucin.
N= Equivalente gramo/litro
Eg = n moles/ valencia
4. m. Molalidad. Moles de soluto por kilo de disolvente.
m= n moles de soluto/ Kg disolvente
5. % P/P. Tanto por ciento peso - peso. Gramos de soluto por cada 100 g de solucin.
6. %P/V. Tanto por ciento peso - volumen. Gramos de soluto por cada 100 ml de disolucin.
7. %V/V. Tanto por ciento volumen - volumen. Mililitros de soluto por cada 100 ml de disolucin.
11

2.2.
Preparacin de soluciones:
1.
Clculo de la cantidad de soluto necesario: estos clculos se pueden hacer partiendo de las
frmulas de concentracin antes citadas o bien a partir de otras frmulas que lo hacen ms fcil:
Vi x Ci = Vf x Cf
(V1 C1) + (V2 C2) = (V1 + V2) Cf
Se usa para calcular concentraciones de mezclas de dos soluciones de un mismo producto o de una disolucin
con agua. Hay que tener en cuenta la pureza o riqueza del reactivo empleado, ya que muchos no vienen
comercializados con una pureza del 100%.
Si no est puro, hay que hacer la correccin correspondiente y ha de salir mas cantidad a tomar que si
estuviese puro; por ejemplo, el HCl del laboratorio est al 35%; si necesito 10 ml de HCl habra de tomar 28,57
ml del reactivo al 35%, que son los que contienen 10 ml de HCl.
100 ml contienen 35 ml de HCL 100 ml he de tomar para tener 35 ml de HCL
x ml contendrn 10 ml de HCl x ml habr de tomar para tener 10 ml de HCl
x= 10.100/35
x= 28,57 ml
Muchas veces el soluto no est en forma slida y pesarlo es complicado. Para transformar masas en volmenes
o viceversa usaremos la densidad de dicho compuesto, d=m/v y que expresa el peso en gramos de un ml de
disolucin.
Por ejemplo obtienes un peso en gramos (por cualquiera de las otras frmulas de hallar la concentracin) del
reactivo anterior y 7 gramos de HCl es lo que te hace falta para preparar tu disolucin; el HCl est liquido y al
35% y de densidad 0 1,080 g/ml; los pasos correctos son:
1. Corriges los gramos totales que necesitas del reactivo impuro:
100 g contienen 35 g de HCl
x g he de tomar para tener 7 g de HCl
x = 700/35
x= 20 g
2. Como el reactivo est liquido, usas la frmula de la densidad para saber cuntos ml de la disolucin impura
tienes que tomar que pese los 20 g (que tiene 7 g puros)
1,080= 20/ x ml
x= 18,51 ml
y sa es la cantidad lquida que contiene 7 g puros de HCl
2.
Pesamos el soluto en un vidrio de reloj, si es slido, o bien medimos su volumen si es lquido.
3.
Lo echamos en un vaso de precipitado y enjuagamos el vidrio con un poco de disolvente para que
no quede en l nada de soluto.
4.
Aadimos un poco mas de disolvente y con ayuda de una varilla de vidrio, lo disolvemos agitando
suavemente. En ocasiones hay que calentar la mezcla para favorecer la disolucin completa del soluto.
5.
La mezcla, perfectamente disuelta, la transvasamos con ayuda de un embudo a un matraz aforado
de capacidad igual al volumen total de la disolucin a preparar.
6.
Aadimos disolvente, enjuagando el embudo, la varilla y el vaso de precipitado.
7.
Enrasamos el matraz con ayuda de una pipeta.
8.
Tapamos el matraz y mezclamos por inversin.
9.
Trasladamos la solucin a su recipiente definitivo, lo etiquetamos y lo guardamos si no se va a usar
inmediatamente.
A veces, las instrucciones de algn producto dan volumen total de disolvente y no de disolucin, en estos
casos, se mezcla todo el soluto con todo el disolvente (previamente medidos) en un vaso de precipitado, se
disuelve y se traslada al recipiente definitivo.
12

3.
DILUCIONES:
Una operacin frecuente en el laboratorio, es la preparacin de soluciones de baja concentracin (diludas), a

partir de soluciones concentradas a las que se aade ms disolvente; ste proceso, se conoce como dilucin y
al diluyente como disolvente (g/ agua).
Estos procesos quedan justificados porque es ms fcil medir volmenes pequeos de lquidos que pesar
exctamente pequeas cantidades de slidos.
3.1.
Modo de expresar las diluciones:
Para expresar las diluciones tenemos muchas formas, pero las ms utilizadas en los laboratorios son:
Como una fraccin o factor de dilucin, donde el numerador corresponde al nmero de partes iniciales a
diluir y el denominador representa las partes totales de la dilucin final.
m = partes de muestra a diluir
d = partes de diluyente
T = partes totales (m + d)
Generalmente el resultado de esta fraccin se deja indicado con la unidad en el numerador, es decir como 1/a,
para realizar esta transformacin dividiremos el numerador y el denominador por el numerador.
Al
diluir
disminuye siempre la concentracin del producto, de tal forma que si sabemos la concentracin inicial del
mismo y la cantidad de diluyente aadida, podemos calcular la concentracin final ayudndonos de la regla de
las mezclas vista anteriormente.
A 3 ml de suero se aaden 6 ml de agua destilada; cul es la dilucin resultante?
C= 3/3+6; 3/9; 1/3
C= 1/3
Como cifras que representan las partes de muestra a diluir y las partes de diluyente, estas dos cifras se
separan por dos puntos y nos indican las proporciones relativas de muestra y de diluyente:
m:d
En el ejemplo anterior 1:2
Como porcentaje, de las partes iniciales a diluir respecto a 100 partes totales de solucin final. En el caso
anterior 33,33%
3.2.
Preparacin de las diluciones:
Los pasos son:

1. Clculo del volumen de solucin inicial y disolvente.
2. Tcnica de dilucin.
3. Clculo de las concentraciones de las diluciones resultantes.
Cf = Ci x 1/D
1/D= 1/a x 1/b x 1/c etc
3.3
Diluciones seriadas o banco de diluciones:
Cuando el factor de dilucin buscado es muy grande (para obtener soluciones muy diludas) no se debe realizar
la dilucin directamente, pues pueden cometerse grandes errores, debido al pequeo volumen que hay que
tomar de solucin inicial frente al de disolvente a aadir. Lo que se hace son una serie de diluciones sucesivas;
a estas diluciones en cadena, se las denomina diluciones seriadas. El procedimiento es estndar para todas
ellas y hacerlo de manera ordenada y sistemtica, facilita mucho el trabajo; el procedimiento sera:
1. Hacer los clculos pertinentes en papel; la cantidad de lquido a trasvasar depende del factor de dilucin y
del volumen que hayan de tener los tubos, que puede venir limitado a un determinado volumen (lo mas
corriente) o ser a eleccin del tcnico.
13

Las frmulas son:

Volumen final no limitado:
C (a/b) = m/T
C= concentracin pedida, m= muestra, d= diluyente, T= total (m+d)
Ejemplo: Realiza un banco de diluciones a razn 1/3 con 5 ml en cada tubo.
1/3 = m/5; m=5/3; m= 1,666
1,66 es el volumen a trasvasar de un tubo a otro
Volumen final limitado:
C (a/b)=x/x+Vf
x= volumen a trasvasar
Ejemplo: Preparar un banco de diluciones a razn geomtrica 1/3 limitando el Vf de cada tubo a 5 ml.
1/3= x/x+5; 3x-x =5; 2x= 5; x= 2,5 ml
Como vemos, siendo la dilucin 1/3, no es lo mismo que limiten o no el volumen final. Lo usual es limitar el
volumen de los tubos pues se limita el nmero de manipulaciones.
2. Preparar la mesa de trabajo con el material necesario segn hemos diseado en papel. Se pone el papel de
filtro, las gradillas con los tubos ordenados en filas, agua destilada en vaso de precipitado, pipetas o
micropipetas y puntas ordenadas, reactivos y material para la disolucin madre, parafilm si procede, etc..
3. Echar primero el disolvente en cada uno de los tubos de la dilucin seriada.
4. Hacer el trasvase del mas concentrado al menos concentrado, homogeneizando con cuidado y desechando
del ltimo la misma cantidad trasvasada y as todos los tubos de la serie, tienen los mismos ml.
5. Si hay que hacer medidas en espectrofotmetro, el orden en que se leen es del menos al ms concentrado.
En ellas hay que distinguir el factor de dilucin de la primera dilucin o disolucin madre y el factor de dilucin
de las restantes diluciones, que pueden o no coincidir.
14

PRCTICAS.
P1. CONTROL DE CALIDAD DE UN PIPETEO (con el Espectrofotmetro)
NOMBRE:
1. Preparar 100 ml de una disolucin madre de cloruro sdico 0,17 M (pm: 58,5) a
la que aadimos 200 l de azul de metileno de concentracin mayor a 1:1000.
Explica el procedimiento:
2. Colocar la DM en un vaso de precipitado. Todas las personas de la misma mesa

usarn la misma pipeta para las dos mediciones,
estableced el turno y
organizaros.
3. En una cubeta de espectrofotmetro verter 1 ml de agua destilada.
4. En la cubeta anterior verter 1 ml de DM y mezclar con el agua destilada.
5. Medir en el Espectrofotmetro a una = 650 nm (a la que mas absorbe la DM) y
anotar la medida de Absorbancia que resulte.
6. Repetir la operacin 10 veces, tirando el contenido de la cubeta y repitiendo de
nuevo todo el proceso.
A1
A2
A3
A4
A5
A6
A7
A8
A9
A10
Hallar el CV y sacar conclusiones al comparar tus resultados con los del resto de
la mesa/clase:
Fecha y firma de la entrega:

15

P2. CONTROL DE CALIDAD DE UN PIPETEO (usando la balanza de

precisin).
NOMBRE:
1. Preparar 100 ml de una disolucin madre de glucosa al 25 %.
2. Colocar la DM en un vaso de precipitado. Todas las personas de la misma

mesa usarn la misma pipeta para las dos mediciones, estableced el turno y
organizaros.
3. En una cubeta de espectrofotmetro verter 1 ml de agua destilada con una
pipeta automtica.
4. Succionar con una pipeta automtica 1ml de DM y mezclar con el ml anterior.
5. Pesar en la balanza de precisin y anotar los resultados.
6. Repetir la operacin 10/15 veces, tirando el contenido de la cubeta y
repitiendo de nuevo todo el proceso.
P1
P2
P3
P4
P5
P6
P7
P8
P9
P10
la mesa/clase:
.

16

P3. CONTROL DE CALIDAD DE UN ESPECTROFOTMETRO.

NOMBRE:
1. Prepara 100 ml de una disolucin madre de Na Cl 0,17 M a la que aadimos 300
l de metileno.
2. Llenar con 2 ml de la DM una cubeta de espectrofotmetro para hacer un

patrn.
3. Llenar con agua destilada otra cubeta, para hacer el blanco.
4. Seleccionamos de 650 nm.
5. Introducimos el blanco y hacemos el 0.
6. Introducimos el patrn y anotamos la medida de Absorbancia que resulte.
7. Repetimos 15 veces, anotando las medidas de Absorbancia.
A1
A2
A3
A4
A5
A6
A7
A8
A9
A10
la mesa/clase:
.

17

P4. PREPARACIN DE UN POOL DE SUEROS.

NOMBRE:
Haz un resumen de la preparacin de la prctica y de su desarrollo y comenta si
hubo incidencias.
18

P5. RESUELVE LOS SIGUIENTES SUPUESTOS PRCTICOS:

NOMBRE:
1. El mtodo que se vigila es un anlisis de glucosa oxidasa que se pasa dos o
tres veces al da; se analiza durante 30 das para establecer el rango blanco
(media y DE).
Media= 100 mg/dl
DE= 2 mg/dl
Intervalo de confianza del 95,5% (X 2DE) fue de 96 a 104 mg/dl.
Los datos de los 10 primeros das fueron los siguientes:
Fecha
7-14
7-15
7-16
7-17
N de ensayo
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
Valor
101 mg/dl
100 mg/dl
98 mg/dl
99 mg/dl
102 mg/dl
103 mg/dl
98 mg/dl
100 mg/dl
101 mg/dl
100 mg/dl
Construye la grfica de Levey-Jennings. Utiliza papel milimetrado.

Haz una interpretacin razonada de los datos.
19

2. Se recogen en la siguiente tabla los resultados del control de calidad de un

laboratorio para la Glucosa con 2 sueros control, uno normal (en el lmite
superior del valor de referencia) y otro patolgico.
Da
2
3
6
7
8
9
10
13
14
15
16
17
20
21
22
23
24
25
26
29
30
Normal
120
123
119
123
120
121
122
123
117
119
126
124
125
123
123
120
120
117
117
120
119
Patolgico
241
246
242
246
243
241
246
253
237
244
253
250
253
248
250
245
246
237
237
245
249
Haz los clculos estadsticos y la grfica de Youden. Haz una interpretacin

razonada de los datos. Utiliza papel milimetrado.
20

3. A continuacin se presentan los resultados de 10 valores de un ensayo

consecutivo para el control de potasio en unidades mmol/l.
Media: 6,6 mmol/l
Orden
consecutivo de
controles
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
DE: 0,1 mmol/l
Valor
Seal de alarma
Regla Westgard
que se incumple
6,4
6,5
6,7
6,4
6,3
6,6
6,5
6,8
6,9
6,9
Razona tus conclusiones:
21

4. Utilizamos dos niveles de controles para el potasio; los valores de ambos

niveles, se dan segn se analizaron.
Valores Blanco (control alto)

media:6,6 mmol/l
DE: 0,1 mmol/l
Orden
consecutivo
controles
Valor
1 bajo
2 alto
3 bajo
4 alto
5 bajo
6 alto
7 bajo
8 alto
9 bajo
10 alto
11 bajo
12 alto
13 bajo
14 alto
3,6
6,7
3,3
6,4
3,7
6,3
3,5
6,6
3,4
6,5
3,7
6,8
3,7
6,9
Valores Blanco (control bajo)

media:3,5 mmol/l
DE: 0,1 mmol/l
Seal
Regla Westgard
que se incumple
Razona tus conclusiones:
22

5. Aplicando las reglas de Westgard interpreta las siguientes grficas:
23

24

Conclusiones:

25

26

P6. RESUELVE LOS SIGUIENTES SUPUESTOS PRCTICOS DE

DISOLUCIONES Y DILUCIONES.
27

P7. CON EL PROTOCOLO ADJUNTO, EXPLICA EL CONTROL DE CALIDAD
28

TEMA 1. Introducción A La BQ

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TEMA 1. Introducción A La BQ

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CFGS LABORATORIO DE DIAGNSTICO CLINICO. TECNICAS DE ANALISIS BIOQUIMICO.

TEMA 1. INTRODUCCION A LA BIOQUMICA.

TEMA 1. INTRODUCCIN A LA BIOQUMICA

Concepto de Bioqumica Clnica.

1. CONCEPTO DE BIOQUMICA CLNICA.

bioqumica es una ciencia muy joven que deriva de 2 lneas matrices:

1- De la medicina y fisiologa (investigacin de sangre, tejidos y orina).

Disminucin de la demanda de anlisis generales y aumento de los especficos.

Aumento de los programas de deteccin precoz de enfermedades sobre todo en el recin

Aumento de la automatizacin de los laboratorios.

CFGS LABORATORIO DE DIAGNSTICO CLINICO. TECNICAS DE ANALISIS BIOQUIMICO.

Es importante q el TEL realice su trabajo con:

3. TCNICAS Y MTODOS DE ANLISIS BIOQUMICOS.

Cules son esos mtodos y sus caractersticas?

Por el tipo de medida que realizan:

Por el procedimiento Fsico-Qumico que utilizan:

M. mecnicos: algunos de ellos son:

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1. Espectrofotometra o espectroscopia de emisin: cuando un tomo es excitado por una fuente de

Espectroscopia de emisin atmica o fotometra de llama: determina Na, K y Li en lquidos biolgicos; se

Espectroscopia de fluorescencia o fluorimetra: la fluorescencia es la capacidad q tienen las sustancias de

Quimioluminiscencia: emisin de luz de diferentes sustancias al oxidarse; no precisan aporte externo de

Espectroscopia de fosforescencia o fosforimetra, espectroscopia de rayos X etc.

Nefelometra: medida de la luz dispersada en ngulos diferentes al de incidencia; uso principal es en

de refraccin o refractrometra, de difraccin (difraccin de Rayos X) etc.

Por el uso al que se destinan:

CFGS LABORATORIO DE DIAGNSTICO CLINICO. TECNICAS DE ANALISIS BIOQUIMICO.

4. CONTROL DE CALIDAD EN EL LABORATORIO:

E %= Exactitud en %; V= el valor q yo obtengo; VR= Valor real. A + cerca d 0 + exacta.

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El ICA o intervalo de concentracin aplicable o intervalo de medicin, es el intervalo de valores en el que el

Cuanto mayor es la especificidad de un mtodo o tcnica, menos se ve afectado por

Es prcticamente imposible determinar todas las interferencias posibles para un

4.2. Lquidos de referencia:

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Modificaciones frecuentes en los grficos de control:

en la conservacin: se ha sobrepasado la fecha de caducidad o la estabilidad? se han guardado

en el tratamiento: se ha utilizado agua de calidad apropiada para su preparacin? los reactivos

en la conservacin: lo mismo que en los reactivos.

en el tratamiento: se ha utilizado agua de calidad apropiada para su preparacin? se han

CFGS LABORATORIO DE DIAGNSTICO CLINICO. TECNICAS DE ANALISIS BIOQUIMICO.

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REPASO DE CONCEPTOS BASICOS DE DISOLUCIONES Y DILUCIONES.

UNIDADES Y FACTORES DE CONVERSION. EL SISTEMA INTERNACIONAL.

CFGS LABORATORIO DE DIAGNSTICO CLINICO. TECNICAS DE ANALISIS BIOQUIMICO.

Una de las prcticas ms corrientes en el laboratorio es la preparacin de disoluciones generalmente lquidas, a

Tamao fase dispersada

Forma de expresar la composicin de las disoluciones:

CFGS LABORATORIO DE DIAGNSTICO CLINICO. TECNICAS DE ANALISIS BIOQUIMICO.

Pesamos el soluto en un vidrio de reloj, si es slido, o bien medimos su volumen si es lquido.

CFGS LABORATORIO DE DIAGNSTICO CLINICO. TECNICAS DE ANALISIS BIOQUIMICO.

Una operacin frecuente en el laboratorio, es la preparacin de soluciones de baja concentracin (diludas), a

Modo de expresar las diluciones:

Preparacin de las diluciones:

Los pasos son:

Diluciones seriadas o banco de diluciones:

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Las frmulas son:

CFGS LABORATORIO DE DIAGNSTICO CLINICO. TECNICAS DE ANALISIS BIOQUIMICO.

2. Colocar la DM en un vaso de precipitado. Todas las personas de la misma mesa

Fecha y firma de la entrega: