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CUADERNO DE

PRCTICAS DE BIOLOGA
1 GRADO DE FARMACIA
CURSO 2015-2016

NDICE

Normas para la realizacin de las prcticas de Biologa ................................................... 2


Prctica 1A: El microscopio .............................................................................................. 3
Prctica 1B: Aislamiento de microorganismos de muestras ambientales ....................... 10
Prctica 2: Preparaciones en fresco y tincin simple ...................................................... 14
Prctica 3: Niveles morfolgicos de organizacin y Divisin celular (mitosis) ............. 19
Prctica 4: Morfologa y anatoma de Cormofitos .......................................................... 30

DISTRIBUCIN DE LAS PRCTICAS DE LA ASIGNATURA BIOLOGA POR


DAS
PRCTICA 1

DA 1
LUNES

DA 2
MARTES

DA 3
MIRCOLES
DA 4
JUEVES
DA 5
VIERNES

PRCTICA 2

PRCTICA 3

PRCTICA 4

- Descripcin del
microscopio.
- Observacin de
preparaciones de
microorganismos,
cortes y tejidos fijadas
y teidas.
- Aislamiento de
microorganismos de
muestras ambientales.
- Observacin de
preparaciones en
fresco.
- Tincin simple de
muestras de boca y de
yogur y de colonias
desarrolladas en
placas.
Niveles de
organizacin
vegetal.
Mitosis. Cariotipo
y cariograma.
Morfologa y
anatoma de plantas
vasculares.

EXAMEN

NORMAS PARA LA REALIZACIN DE LAS PRCTICAS DE BIOLOGA


1.

Preste atencin a las explicaciones de los profesores antes de comenzar el trabajo de


laboratorio. La mayora de las veces, sus comentarios son complementarios a la informacin
que se incluye en el cuaderno. Tome las notas que crea necesarias y, si lo considera oportuno,
realice dibujos que le ayuden a comprender mejor lo explicado.

2.

Lea cuidadosamente el cuaderno de prcticas antes de realizarlas y trate de comprender cada


una de ellas. Si tiene alguna duda, pregunte a los profesores.

3.

Planifique el trabajo antes de realizarlo. Antes de iniciar una prctica compruebe que dispone
de todo el material necesario.

4.

Mantenga la mesa de trabajo libre de objetos personales (ropa, carpetas, bolsos, telfonos
mviles, etc.). Coloque dichos objetos en las zonas indicadas por los profesores.

5.

Utilice siempre bata de laboratorio. La bata protege sus ropas de una contaminacin
accidental y de las salpicaduras de los colorantes que se utilizan en el laboratorio o de otros
compuestos.

6.

No fume ni ingiera alimentos en el laboratorio. No se aproxime pinzas, lpices, papeles u


otros utensilios a la boca. No beba agua contenida en material del laboratorio.

7.

Procure que su zona de trabajo est lo ms limpia posible. Para ello, trabaje siempre sobre
los papeles de filtro dispuestos sobre las mesas. Sintese para trabajar, saldr todo mejor.

8.

El material de desecho debe disponerse en recipientes adecuados para su posterior


descontaminacin y limpieza. Es muy importante que coloque cada tipo de material en su
contenedor (material biolgico, lquidos, vidrio, etc.). No debe tirar por el desage los
colorantes utilizados en las tinciones sino verterlos en los bidones preparados para tal fin.

9.

Tanto en caso de accidente personal (cortes, quemaduras, etc.), como en el caso de rotura de
algn cultivo, cada de ste al suelo o sobre la mesa de trabajo, debe comunicrselo
inmediatamente a los profesores responsables de las prcticas.

10. Al finalizar el trabajo, deje recogido todo el material. Compruebe que quedan cerrados
mecheros, grifos y rotuladores y, por ultimo, cada da, antes de abandonar el laboratorio, es
aconsejable que se lave, cuidadosamente, las manos con jabn.

PRCTICA 1A: EL MICROSCOPIO


1. Material
- Microscopio.
- Aceite de inmersin (aceite de cedro).
- Solucin desengrasante.
- Preparaciones de microorganismos, clulas y cortes de tejidos, fijadas y teidas.
2. Objetivos de la prctica
1. Conocer los nombres y la funcin de cada uno de los componentes del microscopio de campo claro,
as como su manejo.
2. Comprender cmo funciona un microscopio de campo claro.
3. Aprender a enfocar con los dos ojos abiertos puesto que los microscopios son binoculares.
4. Enfocar preparaciones de microorganismos, clulas o cortes de tejidos, utilizando los objetivos
secos (4X, 10X, 40X).
5. Enfocar preparaciones teidas de bacterias con el objetivo de inmersin (100X).
3. El microscopio
La Microbiologa se ocupa generalmente de organismos tan pequeos que el ojo humano no
los puede ver a simple vista. Debido a la naturaleza de esta disciplina, el microscopio tiene una
importancia crucial; la mayor parte de los conocimientos sobre los microorganismos se han
descubierto con microscopios. Por ello, es necesario comprender cmo funciona un microscopio y
la forma de preparar adecuadamente las muestras para su examen.
Hay dos tipos fundamentales de microscopio: ptico y electrnico. Dentro del primer tipo,
se encuentran entre otros, los microscopios de campo claro, campo oscuro, contraste de fases y
fluorescencia. En las prcticas se utilizar nicamente el microscopio ptico de campo claro.
3.1. Microscopio ptico
Los microscopios creados por los primeros microscopistas
eran todos sencillos, es decir, constituidos por una sola lente,
denominndose por ello microscopios simples. Los microscopios
modernos son todos compuestos, lo que significa que tienen ms
de una lente, de manera que la imagen aumentada que forma la
lente del objetivo es ampliada por la lente del ocular.
3.1.1. Lentes y desviacin de la luz
Para comprender cmo funciona un microscopio ptico,
es preciso entender la forma en la que las lentes desvan y
enfocan la luz para formar imgenes.
Cuando un rayo de luz pasa de un medio a otro, se
produce el fenmeno conocido como refraccin de la luz, es
decir, el rayo se desva en la interfase. Debido a este fenmeno,
cuando introducimos un lpiz en un vaso con agua, da la
impresin de que el lpiz est doblado. Cada medio tiene un
ndice de refraccin determinado. El ndice de refraccin es una
medida de la intensidad con que una sustancia disminuye la
3

velocidad de la luz; la direccin y la magnitud de la desviacin se determinan por los ndices de


refraccin de los dos medios que forman la interfase.
As, cuando la luz pasa del aire al vidrio, un medio con un ndice de refraccin superior,
disminuye su velocidad y se desva hacia la
Rayo de luz
Aire
normal, una lnea imaginaria perpendicular a la
emergente
Vidrio
superficie. A medida que la luz deja el vidrio
para volver al aire, un medio con un ndice de
Normal
Normal
refraccin inferior, acelera su velocidad y se
Aire
n = 1,52
desva de la normal. En consecuencia, un prisma
desva la luz porque la luz incide sobre su
Rayo de luz
n = 1 (n = ndice de refraccin)
incidente
superficie en ngulo y el vidrio tiene un ndice
de refraccin diferente al aire.
Las lentes actan como un conjunto de prismas que funcionan como una unidad. Cuando la
fuente de luz est alejada, de
forma que los rayos de luz
inciden paralelos sobre la
lente, una lente convexa
enfocar estos rayos en un
punto especfico, llamado
foco o punto focal (F). La
Lente 1
distancia entre el centro de la lente y el punto focal se
denomina distancia focal (f). La potencia de una lente est
F1
relacionada con la distancia focal. Una lente con una distancia
focal corta
Lente
Foco o
aumentar
f1
punto focal
ms
un
Lente 2
objeto que
otra lente
F
con una
distancia
f2
Distancia focal
focal ms
f
larga. La lente 1 producir ms aumento.

F2

3.1.2. Microscopio de campo claro


Se denomina as a este microscopio porque
forma una imagen oscura sobre un fondo claro. Est
formado por un cuerpo o soporte de metal compacto,
compuesto por una base y un brazo, donde se fija el
resto de las partes. En la base se sita la fuente de luz.
Idealmente, un microscopio debe ser parafocal,
es decir, que mantenga la imagen enfocada al cambiar el
objetivo.
3.1.2.1. Componentes del microscopio de campo claro
Ocular: lente situada cerca del ojo del observador que ampla la imagen del objetivo (10 15
aumentos 10X 15X).
Cabezal: contiene los sistemas de lentes oculares; aunque puede ser monocular la mayora son
binoculares.
4

Ocular

Cabezal

Portaobjetivos

Objetivos
Brazo

Pinzas
Platina
Condensador
Diafragma

Macromtrico
Micromtrico

Tornillo para mover el condensador


Foco (lmpara)

Pie o base
Conexin
elctrica

Microscopio ptico (vista lateral izquierda)

Tornillos para mover las pinzas

Microscopio ptico (vista lateral derecha)

Portaobjetivos (revlver): contiene los sistemas de lentes objetivos (de 3 a 5); al girar permite
cambiar los objetivos.
Objetivo: lente situada cerca de la preparacin ampliando la imagen de sta (4X, 10X, 40-45X, 90100X).
Platina: lugar donde se deposita la preparacin; est situada hacia la mitad del brazo.
Condensador: lente que concentra los rayos luminosos sobre la preparacin, enfocando un cono de
luz sobre el portaobjetos. Se monta dentro o por debajo de la platina y puede ser fijo o ajustarse
verticalmente.
Diafragma: regula la cantidad de luz que entra en el condensador.
Fuente de luz: lmpara o foco que dirige los rayos luminosos hacia el condensador.
Soporte: mantiene la parte ptica; tiene dos partes, el pie o base y el brazo.
Tornillos de enfoque: de ajuste grueso o macromtrico, que aproxima el enfoque y de ajuste fino o
micromtrico, que consigue nitidez. Los tornillos se sitan en el brazo y pueden mover la platina
hacia arriba y hacia abajo para enfocar la imagen.
Tornillo para desplazar verticalmente el condensador (en aquellos microscopios que lo
poseen): permite acercar o alejar el condensador de la preparacin.
Pinzas: sujeta el portaobjetos.
Tornillos para mover las pinzas: permiten desplazar las pinzas junto con el portaobjetos hacia
adelante, atrs, izquierda o derecha.
3.1.3. Aumento y resolucin de un microscopio
El aumento total se calcula multiplicando los aumentos del objetivo y del ocular. Por
ejemplo, un objetivo de 40X y un ocular de 10X dan un aumento de 400. El aumento mximo que
consigui Leeuwenhoek fue de unos 270.
La resolucin o poder de resolucin es la capacidad de una lente para separar o distinguir
entre objetos pequeos que estn muy prximos.
La distancia mnima (d) entre dos objetos que
permite distinguirlos como entidades separadas, est
determinada por la ecuacin de Abb: d = /2 AN, donde
es la longitud de onda de la luz empleada y AN es la
apertura numrica.
Al disminuir d, aumenta la resolucin y el detalle
con el que se distingue una muestra. La luz del espectro
visible con una longitud de onda menor es la azul (400-500
nm). Normalmente, se emplean microscopios con luz azul o
azul-verdosa (450-530 nm).
La apertura numrica es una caracterstica propia de
la lente y viene definida en funcin del ndice de refraccin
del medio en que se encuentra la lente (n) y del ngulo ,
que se define como la mitad del ngulo del cono de luz que entra en un objetivo, segn la frmula
AN = n sen . Como el ndice de refraccin del aire es 1 y sen no puede ser superior a 1 (el
7

mximo de es 90, y sen 90 es 1), ninguna lente que funcione en el aire puede tener una apertura
numrica superior a 1. La nica forma de incrementarla por encima de 1 y conseguir una resolucin
mayor, es aumentando el ndice de refraccin del medio (el aire en este caso).
3.1.3.1. Objetivo de inmersin en aceite
Si se sustituye el aire por aceite de inmersin, generalmente aceite de cedro, un lquido
viscoso e incoloro con el mismo ndice de refraccin del vidrio (1,52), muchos rayos de luz que no
pueden penetrar el objetivo debido a la reflexin y refraccin en la superficie de la lente del
objetivo, podran hacerlo. Con ello se consigue aumentar la apertura numrica y la resolucin.
El mximo poder de resolucin de un microscopio con un objetivo de inmersin en aceite
(AN = 1,25) y con luz azul (450 nm) sera de 180 nm.
Esto quiere decir que, en el mejor de los casos, un microscopio de campo claro puede
distinguir entre dos puntos separados por,
aproximadamente, 0,2 m, el tamao de
una bacteria pequea (micoplasma).
La distancia de trabajo de un
objetivo es la distancia entre la superficie
frontal de la lente y la superficie del
cubreobjetos o de la muestra cuando est
bien enfocada. Los objetivos con una
apertura numrica y un poder de resolucin
elevados tienen distancias de trabajo cortas.
La mayora de los microscopios pticos de campo claro actuales consiguen aumentos de
1.000 1.500 con aceite de inmersin. Cualquier aumento superior a ste no ofrece una observacin
ms detallada. Se podra construir un microscopio ptico para producir un aumento final de
10.000X, pero sera simplemente como aumentar un borrn.
En la siguiente tabla se comparan las propiedades de los objetivos del microscopio de campo
claro:
Objetivo
Propiedad

De rastreo
o lupa

Bajo
aumento

Aumento

X4

X10

X40-45

X90-100

Apertura numrica

0,1

0,25

0,55-0,65

1,25-1,4

Distancia focal (f)

40 mm

16 mm

4 mm

1,8-2 mm

Distancia de trabajo

17-20 mm

4-8 mm

0,5-0,7 mm

0,1 mm

Poder de resolucin
con luz azul (450 nm)

2,3 m

0,9 m

0,35 m

0,18 m

Gran
aumento

De inmersin
en aceite

4. Observacin al microscopio
El microscopio ptico de campo claro permite examinar los microorganismos sin teir,
normalmente vivos, en las denominadas preparaciones en fresco, en las que se reduce la
luminosidad del campo de visin para aumentar el contraste, con la ayuda del condensador y el
diafragma, o bien teidos mediante colorantes, normalmente muertos tras el proceso de fijacin, en
lo que se denominan tinciones.
8

5. Normas generales para la observacin de las preparaciones con el microscopio ptico


1.

Encender el microscopio y colocar la preparacin sobre la platina sujetndola con las pinzas.
Con ayuda de los tornillos, desplazar la preparacin hasta que la extensin se site en el centro
de la luz concentrada por el condensador.

2.

Si se va a observar una preparacin teida, comprobar que el condensador est elevado y el


diafragma abierto. Si se va a observar una preparacin en fresco, el condensador debe estar
bajo y el diafragma semicerrado.

3.

Como el microscopio es binocular, ajustar la distancia entre ambos oculares de manera que la
visin sea cmoda utilizando ambos ojos. Para compensar las diferencias pticas entre el ojo
izquierdo y el derecho, girar los oculares hasta que la imagen sea ms clara. Se aconseja a
aquellas personas que llevan gafas, se acostumbren a prescindir de ellas para enfocar las
preparaciones.

4.

Si va a utilizar el objetivo de inmersin, mirando el microscopio de frente, subir la platina hasta


que el objetivo de inmersin se sumerja en el aceite de cedro y tome contacto con la
preparacin. Hay que ser extremadamente cuidadoso al realizar esta operacin ya que algunos
microscopios no tienen tope y se puede romper el portaobjetos y daar la lente del objetivo.

5.

Enfocar la preparacin bajando lentamente la platina (nunca enfocar subiendo la platina).


Utilizar el tornillo macromtrico para el ajuste grosero (rpido) y llevar la preparacin al
enfoque final con el tornillo micromtrico. El micromtrico debe emplearse nicamente para
conseguir nitidez una vez enfocada la preparacin con el macromtrico.

6.

Visualizar distintos campos de la preparacin, hasta encontrar uno que sea adecuado. Observar
cuidadosamente cada preparacin realizando las anotaciones y dibujos que considere
necesarios.

7.

Una vez finalizada la observacin, debe retirarla cuidadosamente y depositarla en la caja


correspondiente.

8.

Desconectar el microscopio, limpiar el objetivo de inmersin si lo ha utilizado (y todas las


zonas que hayan quedado manchadas con aceite de inmersin) empleando un papel suave
impregnado en solucin desengrasante y cubrir el microscopio con su funda.

PRCTICA 1B: AISLAMIENTO DE MICROORGANISMOS DE MUESTRAS


AMBIENTALES (SUELO, AIRE Y DE DISTINTAS ZONAS DEL LABORATORIO)
1. Material
- Placas de Petri con Agar comn.
- Hisopos estriles.
- Tubos con solucin salina estril.
- Rotulador.
- Una muestra de suelo.
2. Objetivos de la prctica
1.
2.
3.
4.

Aprender tcnicas de aislamiento de microorganismos.


Poner de manifiesto la presencia de microorganismos en ambientes diversos y objetos inanimados.
Observar el crecimiento de los microorganismos en medio de cultivo slido.
Establecer diferencias en cuanto a cantidad de microorganismos presentes en diferentes ambientes u
objetos segn el mayor o menor trnsito de personas.
5. Constatar que muchos de los microorganismos que se encuentran sobre objetos inanimados,
proceden de la microbiota humana, especialmente la de la piel.
6. Comparar la abundancia y diversidad de microorganismos de estas muestras de objetos
frecuentemente tocados por las personas con las de otras muestras ambientales, como el suelo y el
aire.
3. Los microorganismos en el medio ambiente
Los microorganismos ocupan prcticamente todos los hbitats del planeta, incluyendo
sistemas de agua dulce, mares, suelos, aire, otros organismos vivos (plantas y animales), objetos
inanimados, etc. Sin embargo, en los ambientes naturales no es frecuente encontrar un solo tipo de
microorganismo. Por el contrario, lo que encontramos frecuentemente son comunidades
microbianas. En particular, es interesante conocer qu microorganismos estn presentes en un
hbitat determinado, cultivarlos y aislarlos -cuando sea posible-, e identificarlos.
En sitios con una gran actividad humana, especialmente en aquellos lugares donde se
concentra o transita un elevado nmero de personas, resulta relativamente fcil detectar la presencia
de microorganismos. Si la bsqueda se realiza a partir de objetos o sitios que son tocados por
seres humanos, es muy probable que se puedan detectar y aislar microorganismos que forman parte
de la microbiota humana, ya sea de forma permanente o transitoria. Se denomina microbiota
humana al conjunto de microorganismos que se establecen en alguna localizacin del cuerpo
humano ya sea de forma permanente, durante muchos meses o aos, o de forma transitoria, durante
das, semanas o algunos meses.
No obstante, no todos los microorganismos que se encuentran formando parte de esta
microbiota son capaces de resistir y multiplicarse en cualquier ambiente, por lo que no siempre es
posible aislarlos. Algunos de estos microorganismos requieren unas condiciones de cultivo
especiales, bien sea por su dependencia del oxgeno o por su intolerancia al mismo o por los
requerimientos nutritivos que necesitan para su metabolismo. Sin embargo, muchos de ellos son
capaces de crecer en medios de cultivo sencillos que pueden preparase en cualquier laboratorio de
microbiologa bsico.
En esta prctica, se pretende detectar la biodiversidad y ubicuidad de los microorganismos
en diferentes muestras ambientales, concretamente, muestras de aire, suelo y de zonas del
laboratorio frecuentemente tocadas por las personas. Para ello se van a sembrar estas muestras en un
medio de cultivo slido (agar comn), y tras la incubacin correspondiente, se van a ver los
distintos tipos de microorganismos que aparecen en las placas.
10

4. Lugares y objetos del laboratorio donde se recogern las muestras


1. Superficie de las mesas del laboratorio
2. Grifos del laboratorio
3. Telfono
4. Ordenadores (ratn, espaciador del teclado, etc.).
5. Tirador de la puerta.

4.1. Procedimiento para la toma de muestra


Los alumnos dispondrn de una placa con medio de cultivo estril, un tubo con solucin
salina estril, un hisopo tambin estril y un rotulador. Tomarn la muestra de la siguiente manera:
1. Una vez en el lugar exacto donde se ha de tomar la muestra, se proceder a destapar el tubo con
solucin salina y el hisopo.

2. A continuacin, se introducir el hisopo en la solucin salina y se empapar, escurrindolo


despus ligeramente sobre la pared del tubo.
3. Seguidamente, se pasar el hisopo por la superficie elegida, rotando el hisopo por la misma a
medida que se va extendiendo y tomando la muestra.
4. Por ltimo, se proceder a sembrar la placa, que ser abierta exclusivamente en este momento y
tapada de nuevo en cuanto finalice este proceso. La tapa de la placa debe permanecer siempre en la
mano de uno de los alumnos y sin tocar la parte interna de la misma.
5. Para realizar la siembra
adecuadamente, basta con pasar
el hisopo por la superficie del
agar repetidas veces, rotando el
mismo para descargar toda la
muestra recogida.

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Se recomienda realizar tres siembras (tomando inculo una sola vez) rotando la placa 60 grados,
aproximadamente cada vez, segn indica el esquema.
6. Una vez sembrada, se rotular la placa en el borde de la base con las iniciales del nombre y
apellidos de alguno de los miembros del grupo a fin de que pueda ser identificada tras la
incubacin.
7. Las placas sern incubadas a 37 C durante 24 horas.
5. Muestra de aire
El procedimiento para sembrar la muestra consiste simplemente en dejar expuestas las placas de
medio agar comn al aire durante un tiempo determinado, con el objeto de que los microorganismos
que se encuentran en las partculas de polvo o en aerosoles en el ambiente, entren en contacto con la
placa, efectundose as la siembra de la misma.
1. Abrir la placa de agar comn y dejarla expuesta al aire durante 1-2 horas (hacerlo al principio de
la prctica para poder exponerlas al ambiente durante al menos 2 horas).
2. Cerrar la placa. Rotular la placa en el borde de la misma con las
iniciales del nombre y apellidos de alguno de los miembros del grupo
a fin de que pueda ser identificada tras la incubacin.
3. Incubar en la estufa a 37C durante 24 horas.
6. Muestra de suelo
El suelo alrededor de las plantas tiene gran cantidad de microorganismos, como consecuencia de
que las races de las plantas exudan sustancias (azcares, aminocidos, cidos grasos, compuestos
aromticos, etc.), que se denominan exudados radiculares. Estos compuestos atraen una gran
poblacin microbiana, ya que pueden ser utilizados por las bacterias como nutrientes.
El procedimiento para la preparacin de la muestra de suelo se indica a continuacin.
1. Tomar una cucharada de suelo y
colocarlo en un tubo estril.
2. Aadir 10 mL de solucin salina.
3. Agitar vigorosamente durante al
menos 15-20 segundos con objeto de
disgregar las partculas de suelo y
liberar los microorganismos adheridos
a las mismas.
4. Dejar decantar la suspensin
durante unos 10 minutos.
5. Tomar un hisopo estril, abrir el precinto e introducir el hisopo en la suspensin del suelo (en el
lquido superior sin tocar el fondo). Sembrar la muestra en una placa de agar comn, para lo cual se
12

desliza el hisopo por toda la superficie del medio haciendo muchas estras muy juntas. Girar el
hisopo y la placa unos 60 y repetir la siembra. Volver a girar la placa y hacer las estras una tercera
vez.

6. Una vez sembrada, se rotular la placa en el borde de la base con las iniciales del alumno.
7. Cerrar la placa en incubar en la estufa a 37C durante 24 horas.
7. Lectura de las placas
Transcurrido el periodo de incubacin, se observarn las placas detectando la presencia de
colonias o crecimiento de microorganismos. Es probable la observacin de colonias de bacterias y
levaduras y el crecimiento de hongos. Observar las diferentes morfologas obtenidas a partir de las
diferentes muestras, comparando los microorganismos de las muestras ambientales (de aire y suelo)
con los que aparecen en las zonas del laboratorio frecuentemente tocadas por personas, y que deben
corresponder a microbiota normal humana.

suelo

aire

ordenador

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PRCTICA 2: PREPARACIONES EN FRESCO Y TINCIN SIMPLE


1. Material
- Microscopio.
- Cultivo bacteriano.
- Suspensin de yogur.
- Cristal violeta.
- Asa de siembra estril.
- Portaobjetos.
- Cubreobjetos.
- Pinzas.
- Bote con agua de grifo.
- Cristalizador y paralelas.
- Aceite de inmersin (aceite de cedro).
- Solucin desengrasante.
- Rotulador.
2. Objetivos de la prctica
7. Aprender a montar preparaciones en fresco de bacterias.
8. Enfocar preparaciones en fresco de bacterias con el objetivo 40X.
9. Distinguir el pequeo tamao de las bacterias (y si es posible su movimiento) en las preparaciones
en fresco en comparacin con las preparaciones teidas.
10.
Aprender la tcnica de las tinciones mediante el empleo de la tincin simple.
11.
Observar bacterias y clulas epiteliales a partir de una preparacin teida de una muestra de
boca.
12.
Observar bacterias a partir de una preparacin teida de una muestra de yogur.
13.
Observar bacterias a partir de muestras ambientales (aire y suelo) y de la mucosa farngea.
3. Preparaciones en fresco
Las preparaciones en fresco (sin teir) se utilizan para la observacin de la movilidad
bacteriana, as como para la observacin de la morfologa de otros microorganismos de mayor
tamao, tales como levaduras, mohos, protozoos o algas microscpicas.
3.1. Observacin de la movilidad bacteriana entre porta y cubre
3.1.1. Tcnica
1.

Utilizar un cultivo bacteriano lquido.

2.

Con la ayuda de un asa de plstico estril, depositar una gota del cultivo sobre el portaobjetos.
No hacer nunca una extensin, pues las clulas pueden perder sus flagelos. Evitar las
agitaciones vigorosas de los cultivos.

3.

Colocar sobre la preparacin un cubreobjetos


perfectamente limpio. Apoyar un lado del
cubreobjetos sobre el portaobjetos. Ir inclinndolo
hacia la preparacin hasta dejarlo caer suavemente
sobre la muestra. No comprimir.
14

4.

Inmediatamente, observar con objetivo de 40X (a veces es conveniente comenzar con un


objetivo de menor aumento, 4X 10X, y pasar luego al de 40X). El condensador debe estar
bajo y el diafragma semicerrado (al no estar las clulas teidas y debido al poco contraste que
hay entre dichas clulas y el medio, la observacin resulta difcil y un exceso de luz la hace an
ms ardua).

5.

Si es posible, distinguir el movimiento debido a flagelos (catico e irregular), del movimiento


debido a las corrientes (todas las clulas se desplazan en la misma direccin) y del movimiento
browniano que toda partcula de pequeo tamao presenta cuando se encuentra en suspensin
(movimiento vibratorio e irregular alrededor de un punto).

Al concluir, depositar la preparacin en los contenedores destinados al material de vidrio.


4. Recomendaciones generales para realizar una tincin
1.

Marcar con un rotulador cada portaobjetos a fin de identificar la tincin. Marcar por el lado
opuesto a la preparacin, para evitar que las letras se borren durante la tincin.

2. La extensin se har directamente de los cultivos lquidos. Con la ayuda de un asa de plstico
estril, tomar una gota o dos del
cultivo lquido y extenderlas
sobre
la
superficie
del
portaobjetos. La extensin debe
2
tener aproximadamente 1 cm .
3.

Dejar secar totalmente las extensiones, preferiblemente a temperatura ambiente.

4.

Las clulas teidas deben parecerse lo ms posible a las vivas. Por ello, deben fijarse. La
fijacin es el proceso por el que se conservan y mantienen (fijan) en su posicin las estructuras
internas y externas de las clulas microbianas; adems, inactiva enzimas que podran alterar la
morfologa celular y endurece las estructuras celulares
para que no cambien durante el proceso de tincin ni
de observacin. Durante la fijacin el microorganismo
se destruye y se adhiere (fija) firmemente al
portaobjetos.

5.

Existen dos formas de realizar la fijacin: mediante


calor (llama de mechero) o con productos qumicos.

6.

Para fijar una preparacin con calor, se pasa el


portaobjetos, por el lado opuesto a la preparacin, por
encima de la llama de un mechero. Son suficientes dos
o tres pases rpidos. Para evitar quemaduras se pueden
utilizar las pinzas.

7.

Una vez fijada, colocar la preparacin en las paralelas sobre el cristalizador. Aadir el colorante
a los portaobjetos de uno en uno.

8.

Los colorantes empleados en microbiologa tienen dos caractersticas en comn: poseen grupos
cromforos (grupos con dobles enlaces conjugados que dan el color) y pueden unirse a las
clulas mediante enlaces inicos, covalentes o hidrfobos.

15

9.

Los colorantes ionizables se pueden dividir en dos clases en funcin de su grupo cargado:
bsicos (son catinicos o tienen grupos cargados positivamente por lo que se unirn a
molculas o estructuras celulares cargadas negativamente como cidos nucleicos, protenas, o
la superficie bacteriana). Ejemplos: cristal violeta, azul de metileno, fucsina bsica, safranina,
verde malaquita; y cidos (son aninicos o poseen grupos cargados negativamente por lo que se
unen a molculas o estructuras cargadas positivamente). Ejemplos: eosina, rosa de bengala,
fucsina cida.

10. En la tincin, los colorantes deben


cubrir slo la superficie de la extensin.
Los lavados con agua (de grifo) deben
ser abundantes. Los secados finales
deben realizarse al aire colocando el
portaobjetos verticalmente (apoyado en
alguna superficie) sobre el papel de
filtro.
11. Comprobar que los rtulos no se han
borrado. Observar al microscopio con
objetivo de inmersin (100X).
5. Tincin sencilla o simple
Se denomina as porque se emplea un nico colorante. Permite determinar el tamao, la
forma y las agrupaciones a las que de lugar la bacteria. Tambin se utiliza para teir otros
microorganismos o clulas.
5.1. Tcnica
1.
2.
3.
4.
5.
6.

Extensin.
Desecacin.
Fijacin con calor.
Colorante: cristal violeta u otro colorante bsico, 1 minuto.
Lavado con agua de grifo.
Dejar secar y observar al microscopio con objetivo de inmersin (100X).

6. Observacin de bacterias y clulas epiteliales en muestras de boca


En la boca existe una microbiota muy abundante tanto cualitativa como cuantitativamente.
Hay microorganismos en la saliva, en los dientes, en la lengua, en el paladar, etc. Algunos de estos
microorganismos intervienen en la formacin de la placa dental, produciendo, en ocasiones, caries.
Esto se debe a que tienen la capacidad de adherirse
firmemente al esmalte dental y una vez que colonizan
la superficie del diente son muy difciles de erradicar.
Una de estas bacterias, Streptococcus mutans,
se encuentra en la boca de casi todas las personas y se
convierte en un potente inductor de caries porque
degrada la sacarosa de la dieta en glucosa y fructosa.
La fructosa la utiliza para su propio crecimiento, pero
la glucosa la emplea para sintetizar un polmero
(glucano). El glucano constituye una especie de red o
Placa dental
malla que junto con la gran poblacin de bacterias que
16

hay en la boca y los residuos orgnicos, forman la placa dental que se adhiere tan firmemente a la
superficie de los dientes que la saliva no puede eliminarla.
Por otra parte, como producto final de la fermentacin de la glucosa, se forma cido lctico
que daa el esmalte del diente. Cuando la sacarosa se agota, la saliva neutraliza la acidez, pero si
sta persiste o es muy frecuente, el dao no puede reparase de forma eficaz y se produce la caries.
Si la caries afecta al interior del diente ste se pudre a menos que se empaste.
6.1. Procedimiento
1. Con la ayuda de un asa de plstico estril raspar la superficie de los dientes y depositar la
muestra en un portaobjetos. Opcionalmente, se pueden tomar tambin otros tipos de muestras:
raspado de lengua, raspado del paladar, saliva o raspado de cara interna de las mejillas.
2. Si la muestra es lquida no es necesario aadir agua al portaobjetos. Si no es as, extender la
muestra sobre una gota pequea de agua (la gota se recoge vertiendo agua del bote sobre el asa
encima del cristalizador).
3. Dejar secar y realizar una tincin simple.
4. Observar al microscopio con objetivo de inmersin (100X).
6.2. Resultado
En la tincin sencilla de la muestra de boca se comprobar la presencia de clulas epiteliales
y de bacterias (bacilos y cocos).
7. Deteccin de la presencia de bacterias lcticas en muestras de yogur
El yogur es una leche fermentada obtenida por la accin de dos bacterias lcticas sobre la
leche, a la temperatura de 45C, Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus y Streptococcus
thermophilus.
Las caractersticas propias del yogur se deben al crecimiento en la leche de estas dos
bacterias, que son responsables de la acidificacin del medio, las propiedades organolpticas y el
desarrollo de la textura adecuada.
Segn la legislacin espaola (Real Decreto 874/87, de 30 de abril de 1987), y al igual que
ocurre en el resto de Europa, el yogur debe estar producido por L. delbrueckii subsp. bulgaricus y S.
thermophilus, y no es slo por una cuestin legal, sino porque los compuestos que condicionan el
sabor son el resultado del metabolismo de estos microorganismos sobre la lactosa: la fermentacin
lctica homofermentativa, en la que un 90% del producto de la fermentacin de la lactosa es el
cido lctico. A consecuencia de la acidificacin de la leche se produce la coagulacin (pH 4,6).
Este proceso se detiene por enfriamiento del producto a una temperatura inferior a los 10C.
7.1. Procedimiento
1. A partir de una muestra homogeneizada de yogur (presentada en una placa Petri) hacer una
extensin con un asa sobre un portaobjetos.
2. Dejar secar y realizar una tincin simple.
3. Observar al microscopio con objetivo de inmersin (100X).
17

7.2. Resultado
En la tincin sencilla de la muestra de yogur se comprobar la presencia de Lactobacillus y
Streptococcus, bacilos y cocos en cadena, respectivamente.

Lactobacillus bulgaricus

Streptococcus thermophilus

8. Observacin de bacterias a partir de colonias aisladas en medios de cultivo con agar (de
muestras ambientales de aire, suelo y zonas transitadas de la facultad)
8.1. Procedimiento
Realizar una tincin sencilla a partir de colonias morfolgicamente diferentes de las muestras
ambientales. Para ello, utilizar el mismo procedimiento que se ha descrito en el apartado 5.1.
8.2. Resultado
Observar las tinciones al microscopio con el objetivo 100x y aceite de inmersin. En la tincin
sencilla de las muestras ambientales observar los tipos de morfologas y agrupaciones que aparecen
(cocos, bacilos, levaduras) en las diferentes muestras, y comparar las muestras de suelo y aire con
las muestras que pueden contener microbiota normal humana.

18

PRCTICA 3: NIVELES MORFOLGICOS DE ORGANIZACIN Y


DIVISIN CELULAR (MITOSIS)
1. OBJETIVOS DE LA PRCTICA:
Conocer la complejidad de los organismos vegetales, desde los ms
sencillos, que estn formados por una sola clula, hasta los Cormofitos que
son las plantas mas complejas.
Observar los principales tipos morfolgicos que existen.
Observar las distintas fases de la mitosis.
Aprender a estudiar un cariotipo y realizar un cariograma.

2. NIVELES MORFOLGICOS DE ORGANIZACIN


Los organismos vegetales
egetales ms simples estn constituidos
constit idos por una
na sola clula
cl la (son
unicelulares) y los ms complejos por millones de clulas (son pluricelulares). Entre
unos y otros hay muchos tipos morfolgicos, unos son muy sencillos, microscpicos
y normalmente acuticos y a partir de ellos, y en el transcurso de la evolucin, se
han ido complicando hasta formarse otros muchos ms complejos, macroscpicos y
terrestres, que son los vegetales superiores (los que normalmente vemos en el
campo o en los jardines).
jardines)
Vamos a ver dentro de cada uno de los niveles de organizacin, los principales tipos
morfolgicos:
2.1 NIVEL 1 - PROTOFITOS. Organismos generalmente acuticos, formados por
una sola clula o por varias unidas por una especie de gelatina, donde cada una de las
clulas funciona independiente de las otras.
Podemos distinguir los siguientes tipos
morfolgicos:
A) Unicelulares Procariotas: formados
por una sola clula, sin ncleo, ni
orgnulos citoplasmticos (cloroplastos, mitocondrias, retculo
endoplasmtico, etc.).

B) Unicelulares Eucariotas: formados por una sola clula, con ncleo y orgnulos
citoplasmticos (cloroplastos, mitocondrias, etc.).
19

C) Cenobios: formados por varias


clulas unidas ppor ggelatina. Cada
clula funciona independiente del
resto, pudiendo disgregarse.

2.2 NIVEL 2 - TALOFITOS. Organismos ms complejos, generalmente acuticos,


constituidos por 2 ms clulas, entre las cuales hay intercambio de sustancias a
travs de plasmodesmos, y por ello funcionan todas como una unidad.

Son pues seres PLURICELULARES.


Las clulas pueden ser todas iguales y
con las mismas funciones o bien estn
diferenciadas, unas forman el cuerpo
del organismo (clulas vegetativas) y
otras se especializan en la reproduccin
(clulas reproductoras). Generalmente
al cuerpo de estos organismos se le
llama TALO.
TALO

20

Podemos distinguir los siguientes tipos morfolgicos:


D) Colonias: formadas por 2 a 50.000 clulas. Pueden ser planas o esfricas. Son
microscpicas.

E) Filamentos celulares tabicados y


simples: cadenas de clulas situadas unas a
continuacin de otras, todas en un plano.
Son microscpicos.

F) Filamentos celulares tabicados y ramificados: Son cadenas de clulas en


un plano, de las que salen cadenas laterales. Son microscpicos.

G) Filamentos cenocticos o sifonados: Son como


tubos alargados con muchos ncleos, cada uno de
ellos tiene sus correspondientes orgnulos
citoplasmticos, pero no hay tabiques que los
separen Son planos y pueden ser simples o
separen.
ramificados. Son microscpicos.

21

H) Lminas u organismos laminares:


organismos planos formados por muchos
filamentos celulares paralelos y unidos
lateralmente.
Son
microscpicas
o
macroscpicas.

I) Plectnquima: organismos con distintas formas, con volumen, formados


por filamentos dispuestos en las tres direcciones del espacio, entrelazados y
unidos por una sustancia compactante. Son macroscpicos.

J) Pseudoparnquima: organismos ms complejos, con distintas formas, con


p
en las tres direcciones del espacio,
p
,
volumen,, formados ppor filamentos dispuestos
entrelazados y soldados por las paredes celulares. Tienen siempre las clulas
diferenciadas en C. vegetativas y C. reproductoras. Adems en las C. vegetativas
aparece otra diferenciacin celular, las clulas externas son de pequeo tamao,
tienen las paredes muy gruesas y son protectoras y las clulas internas son de
mayor tamao y acumulan sustancias de reserva. Son macroscpicos.

22

K) Talos Hsticos: son los talofitos ms complejos


que existen. Pueden tener distintas formas, son
organismos con volumen, formados por muchas
clulas dispuestas en las tres direcciones del
espacio que todas se forman por divisin de una o
varias clulas iniciales y estn diferenciadas en C.
vegetativas y C reproductoras. Las C. vegetativas
p distintos, clulas
estn diferenciadas en varios tipos
protectoras, clulas de almacenamiento, y a veces
tambin clulas conductoras. Externamente estn
divididos en tres partes, una que esta dentro del
substrato y ancla el organismo que son los
RIZOIDES (formados por una clula o por un
filamento de clulas), y dos partes fuera del substrato,
ell CAULOIDE que es ms o menos cilndrico
il d i y ell
FILOIDE que es aplanado y est a continuacin del
cauloide. Son macroscpicos.

Filidios

Caulidio
Rizoides

2.3 NIVEL intermedio entre Talofitos y


Cormofitos (los veremos a continuacin) BRIOFITOS Organismos
BRIOFITOS.
O
i
t
terrestres,
t
pluricelulares,
l i l l
de pequeo tamao, macroscpicos. Son muy
parecidos a los talos hsticos en cuanto a
constitucin, diferenciacin celular y forma externa.
Externamente tambin estn divididos en tres parte:
RIZOIDES (formados por una clula o por un
filamento de clulas) que sirven para sujetarse al
substrato, CAULIDIO parte cilndrica y area sobre
la que se disponen los FILIDIOS (estructuras
planas, verdes, formadas por una capa de clulas).
Tambin al cuerpo de estos organismos se le llama
TALO.

2.4 NIVEL 3 - CORMOFITOS. Organismos terrestres, pluricelulares, de tamaos


diferentes (hasta de ms de 100 m de longitud), macroscpicos, con volumen, que
estn divididos externamente en tres RGANOS: RAZ, TALLO Y HOJA. Estos
tres rganos constituyen el CORMO. La raz es un rgano vegetativo y subterrneo,
sirve para anclar la planta y absorber agua y sales minerales del suelo. El tallo es un
g
vegetativo
g
y areo,, sostiene las hojas,
j , normalmente se divide en ramas,,
rgano
algunas de ellas se especializan en la reproduccin (FLORES). Las hojas son
vegetativas y planas, realizan la fotosntesis y la transpiracin. Estos tres rganos
estn formados por TEJIDOS.
23

UN TEJIDO es un conjunto de clulas que tienen una morfologa


d fi id y una funcin
definida
f
i especial
i l
Estos organismos presentan dos grandes grupos de tejidos: Los Meristemos o
Tejido meristemtico (que se encuentran en el pice de la Raz y del Tallo) y
los Tejidos Adultos (que forman el resto de la raz, tallo y hoja). Los
Meristemos estn formados por clulas vivas, ms o menos esfricas, pequeas,
d paredes
de
d delgadas,
d l d situadas
it d unas all lado
l d de
d otra,
t con ncleos
l
grandes,
d que
tienen gran capacidad de divisin. Al dividirse cada una de las clulas
meristemticas por mitosis, forman 2 clulas hijas, una sigue meristemtica y la
otra se diferencia (adquieren otra forma y una funcin especifica) y constituyen
los tejidos adultos. Estos Tejidos Adultos estn formados por clulas vivas o
muertas, polidricas, grandes, con paredes normales o gruesas y estn separadas
dejando entre ellas espacios intercelulares.
intercelulares Las clulas de los tejidos adultos se
dividen poco o no se dividen.
Los principales tejidos adultos son: el tejido fundamental o PARNQUIMA
que forma la mayor parte de los tres rganos; Los tejidos PROTECTORES
que recubren cada uno de los rganos; los tejidos CONDUCTORES (Floema
y Xilema) que transportan sustancias desde la raz hasta las hojas y viceversa;
los tejidos MECNICOS

o de SOSTN
que dan consistencia y resistencia al
vegetal.

2.5 APLICACIN DE LOS CONOCIMIENTOS ADQUIRIDOS


Analizar las muestras 1-11 y decir de cada una de ellas: si son
microscpicas
i
i
o macroscpicas,
i
unicelulares
i l l
o pluricelulares,
l i l l
sii son planos
l
o tienen volumen, el nivel de organizacin al que pertenecen y el tipo
morfolgico de organismo.
24

3. DIVISIN CELULAR: MITOSIS


observar la mitosis?
En qu
q clulas se pueden
p
En las clulas de los meristemos (tejidos
de crecimientos) que tienen una alta
capacidad de dividirse mediante mitosis.
Como se ha mencionado anteriormente,
estos tejidos estn formados por clulas
isodiamtricas con paredes delgadas,
ncleos
grandes,
nucleolos
bien
desarrollados y orgnulos citoplasmtico
poco diferenciados.
3.1
3 1 LA MITOSIS
Es la divisin del ncleo que origina dos ncleos hijos idnticos genticamente,
e iguales al ncleo de la clula original. A continuacin se divide el citoplasma, por
lo que se obtienen dos clulas.

25

3.2 METODOLOGA

Vais
V
i a realizar
li
una preparacin
i utilizando
ili d meristemos
i
apicales
i l de
d
races de Allium cepa (cebolla). Una vez realizada deberis buscar e
identificar clulas en las distintas fases de la mitosis. Para ello deberis
seguir los siguientes pasos:
1.-Teir varias races con Carmn nacarado
2 - Cortar 2 mm de una raz sobre un portaobjetos
2.3.- Inmediatamente poner una gota de cido actico al 45%
4.- Colocar encima un cubreobjeto
5.- Calentar en la bombilla del flexo sin sobrepasar los 37C (repetir varias veces)
6.- Con cuidado, golpear sobre la preparacin con un palillo
7.- Eliminar el exceso de cido actico con papel de filtro
8.- Observacin al microscopio

Aunque la mayora de las clulas estarn en interfase, busca e identifica


las restantes fases de la mitosis

PROFASE

METAFASE

ANAFASE

TELOFASE

3.3 CARIOTIPO Y ELABORACIN DE UN CARIOGRAMA


El CARIOTIPO es el conjunto de cromosomas que tienen los ncleos
somticos de las clulas de una planta (en plantas superiores son diploides).
Para el estudio del cariotipo y la elaboracin de un cariograma se deben
examinar los cromosomas con ms detalle.

26

Partes de un cromosoma
Satlites

Brazo corto
BC

ADN
Centrmero

Brazo largo
BL

Cromtidas

En el estudio del cariotipo de una especie determinada hay que tener en cuenta:
Nmero de cromosomas (hay que contarlos en varias clulas y asegurarse de que
es constante.
Tamao de los cromosomas.
Morfologa. La forma se define por la posicin del centrmero que divide al
cromosoma en dos partes o brazos que pueden ser iguales o desiguales. Si los dos
brazos son ms o menos iguales porque el centrmero est situado en la regin
mediana se les llama METACNTRICOS (la relacin entre los brazos es de 1, ); si el centrmero est en la regin
g
submedia,, SUBMETACNTRICOS ((la
1,7);
relacin entre los brazos vara entre 1,8 y 3); si el centrmero est en la regin
subterminal, SUBTELOCNTRICOS (la relacin entre los brazos es de 3,1-7); y
si el centrmero est en la regin terminal TELOCNTRICOS (la relacin entre
los brazos es mayor de 7).

Submetacntrico (sm)
Metacntrico (m)
1 1,7
17

1,8 3

Subtelocntrico (st)
3,1 7

Telocntrico (t)
>7

27

Presencia o ausencia de estrechamientos o constricciones en los cromosomas y


la posicin dentro del cromosoma.
cromosoma A veces una porcin del cromosoma est
separada del resto por un filamento ms o menos largo de ADN, a esta porcin
se le llama SATLITE.
Asimetra del cariotipo. Depende simultneamente del tamao y la morfologa
de los cromosomas. Cuando todos los cromosomas son ms o menos del mismo
tamao y ppredominan los cromosomas metacnticos o submetacnticos,, se dice
que el cariotipo es simtrico. Si por el contrario hay diferencia en el tamao de
los cromosomas y hay predominio de cromosomas telocntricos o
subtelocntricos, se dice que el cariotipo es asimtrico.
EJEMPLO DE LA ELABORACIN DE UN CARIOGRAMA
Una vez que se ha verificado que el nmero de cromosomas es igual en todas las
clulas examinadas, se proceder a la elaboracin del cariograma.
1.- Numerar cada cromosoma por detrs
POR DETRS

2.- Medir con un trozo de papel milimetrado o con una regla los brazos largos
(BL) y cortos (BC) de todos los cromosomas,
cromosomas y se elabora una tabla aadiendo la
longitud total (LT), la relacin brazo largo/brazo corto (BL/BC) y el tipo de
cromosoma (m, sm, st, t). El satlite (en el caso que aparezca) no contabilizar en
la medida del cromosoma.

1
2
3
4
5
6
7
8

LT BL BC BL/BC Tipo
21 13,5 7,5
1,8
sm
57 30 27
1,1
m
54 30 24
1,3
m
54 31 23
1,4
m
59 31 28
1,1
m
32 27
5
5,4
st
32 25
7
36
3,6
st
22 15
7
2,1
sm

28

3.- Recortar cada cromosoma


4.-- Emparejar cada cromosoma teniendo en cuenta la longitud total de los
4
cromosomas y el tipo (m, sm, st, t).
Parejas de cromosomas
1
2
3
4
5
6
7
8

LT BL BC BL/BC Tipo
21 13,5 7,5
1,8
sm
57
30
27
1,1
m
54
30
24
1,3
m
54
31
23
14
1,4
m
59
31
28
1,1
m
32
27
5
5,4
st
32
25
7
3,6
st
22
15
7
2,1
sm

18

6-7
25

34

5.- Alinear las parejas de cromosomas por el centrmero,


5
centrmero empezando
empe ando por la pareja
ms grande hasta la ms pequea (independientemente del tipo de cromosoma).
Siempre se pone el brazo largo hacia abajo.

6.- Poner de forma abreviada el tipo de cromosoma debajo de cada pareja. Los
satlites se indican con superndices.

msat

st

sm

Por lo tanto, un cariograma es la disposicin ordenada (de mayor a menor) de los


cromosomas emparejados que se obtiene con el estudio del cariotipo.

3.4. APLICACIN DE LOS CONOCIMIENTOS ADQUIRIDOS

Realiza el estudio del siguiente cariotipo y elabora su correspondiente


cariograma siguiendo las indicaciones anteriores.

29

PRCTICA 4: MORFOLOGA Y ANATOMA DE CORMOFITOS


1. OBJETIVOS DE LA PRCTICA
Conocer qu es un Cormofito y qu grupos de plantas incluye.
Familiarizarse con la morfologa y anatoma de los rganos caractersticos
de los Cormofitos (raz, tallo y hojas).
Comprender la utilidad de los caracteres morfolgicos y anatmicos en la
id tifi i de
identificacin
d plantas.
l t
Iniciar el manejo de claves dicotmicas utilizando los caracteres aprendidos.
Reconocer diversas adaptaciones de la raz, el tallo y las hojas, as como
comprender su finalidad.

Como se ha indicado en la prctica anterior, los Cormofitos son aquellos vegetales que
generalmente tienen una parte subterrnea (raz), y una parte area diferenciada en tallo
y hojas. Estos tres rganos estn formados por distintos tipos de tejidos especializados.
Adems, la raz, el tallo y/o las hojas pueden sufrir modificaciones dependiendo de las
condiciones en las que vivan estas plantas.

30

En los Cormofitos se agrupan los helechos y las plantas con semillas.

CORMOFITOS
Helechos
(Pteridofitas y plantas afines)

Plantas con semillas


(Espermatofitas)

Gimnospermas

Angiospermas

M
Monocotiledneas
il d

E di til d
Eudicotiledneas

31

2. LA RAZ (MESA 1)
La raz fija la planta al substrato, y absorbe agua y substancias nutritivas
disueltas que sern transportadas por toda la planta.
2.1. MORFOLOGA
Lo habitual, es que crezca bajo el suelo, y desde un punto de vista
morfolgico, se pueden diferenciar dos tipos de races:
Axonomorfa: Constituida por una raz principal bien desarrollada, a partir de la
cual se producen races laterales o secundarias ms pequeas. Es tpica de
Dicotiledneas y Gimnospermas.
Fasciculada: Constituida por numerosas races, ms o menos de la misma longitud
y grosor, que se originan en la parte inferior del tallo. Es tpica de
Monocotiledneas.

En la muestra 1 y 2 se observan estos dos tipos de races. Especifica cul es


cada una y realiza un esquema de ellas.

Muestra 1:

2.2. ANATOMA
En una raz tpica se observan las
siguientes partes:

Muestra 2:

Muestra 3: Observa al microscopio el


corte longitudinal del extremo de una
raz. Identifica las tres zonas sealadas.

32

Si se da un corte transversal a una raz tpica con crecimiento primario se


pueden observar los tejidos que la forman y cmo se disponen.
Como se puede observar a continuacin, la estructura primaria de una raz de
dicotilednea y la de una monocotilednea presentan algunas diferencias.
CORTE TRANSVERSAL DE UNA RAZ PRIMARIA DE UNA EUDICOTILEDNEA
Parnquima cortical (Tejido
parenquimtico). Es el tejido

Endodermis (Tejido protector). Es comn en


rganos subterrneos. Est formada por una capa
de clulas vivas pequeas que presentan paredes
gruesas (Bandas de Caspary). Esta capa asla la
zona exterior de la raz de la zona interior.

localizado entre la epidermis y la


endodermis. Est formada por
numerosas capas de clulas vivas
ms grandes y de paredes
delgadas.

Epidermis (Tejido protector).


Es la capa ms externa, formada
por clulas vivas pequeas de
paredes delgadas.

Xilema (Tejido conductor).

Est

formado por clulas muertas ms


grandes y de paredes gruesas que se
encargan de transportar el agua y las
sales minerales.

Floema (Tejido conductor). Est


f
formado
d por clulas
l l vivas
i
pequeas de
d
paredes delgadas que se encarga de
transportar las sustancias elaboradas en
la fotosntesis.

33

CORTE TRANSVERSAL DE UNA RAZ PRIMARIA DE UNA


MONOCOTILEDNEA

Endodermis

(Tejido

protector).

Es

comn en rganos subterrneos. Est


formada por una capa de clulas vivas
pequeas que presentan paredes gruesas
(Bandas de Caspary). Esta capa asla la zona
exterior de la raz de la zona interior.

Parnquima cortical (Tejido


parenquimtico). Es el tejido
localizado entre la epidermis y la
endodermis. Est formada por
numerosas capas de clulas vivas

grandes
d
y de
d
paredes
d
ms
delgadas.

Epidermis (Tejido protector).


Es la capa ms externa, formada
por clulas vivas pequeas de
paredes delgadas.

Xilema (Tejido conductor).

Est

formado por clulas muertas ms


grandes y de paredes gruesas que se
encargan de transportar el agua y las
sales minerales.

Mdula (Tejido parenquimtico).

Floema (Tejido conductor). Est

Es el tejido fundamental que est


formado por numerosas capas de
clulas vivas de paredes delgadas que
pueden acumular sustancias de reserva.
j
puede
p
terminar
Este
tejido
desapareciendo.

formado por clulas vivas pequeas de


paredes delgadas que se encarga de
transportar las sustancias elaboradas en
la fotosntesis.

34

Muestra 4: Observa el corte transversal de la raz con crecimiento primario que est
en el microscopio. Identifica los tejidos que la forman con ayuda del esquema
anterior y selalos en la siguiente fotografa.
fotografa Indica si pertenece a una
eudicotilednea o monocotilednea.

Muestra 5: Observa el corte transversal de la raz con crecimiento primario que est
en el microscopio. Identifica los tejidos que la forman con ayuda del esquema
anterior y selalos en la siguiente fotografa. Indica si pertenece a una
eudicotilednea o monocotilednea.
monocotilednea

35

Indica la diferencia entre el corte transversal de la raz primaria de una


dicotilednea y la de una monocotilednea.

3. EL TALLO (MESA 2)

3.1. MORFOLOGA

El tallo, generalmente es la parte


area de la planta que sirve de
soporte a hojas, flores y frutos, y
permite la conduccin del agua y las
sales minerales procedentes de la
raz, as como los productos
sintetizados tras la fotosntesis en las
partes verdes. En l se diferencian
nudos (punto en el que se insertan
las hojas) y entrenudos (zona
situada entre cada dos nudos).

entrenudo
nudos

Tallo

Los tallos de las plantas arbreas y arbustivas son leosos (duros),


mientras que los de las plantas herbceas son blandos y verdes. Aunque
los tallos son generalmente cilndricos, tambin se pueden encontrar de
seccin cuadrada o triangular.
Muestra 6 (A-C): Indica en cada caso si el tallo es herbceo o leosos y su seccin
(cilndrico, cuadrado o triangular).

6A:
6B:
6C:

36

3.2. ANATOMA

Si se da un corte transversal a un tallo tpico con crecimiento primario se


pueden observar los tejidos que la forman y cmo se disponen.
disponen
Como se puede observar a continuacin, la estructura primaria de un tallo de
dicotilednea y el de una monocotilednea presentan algunas diferencias.
CORTE TRANSVERSAL DE UN TALLO PRIMARIO DE UNA EUDICOTILEDNEA

Epidermis (Tejido protector). Es


la capa ms externa, formada por
clulas vivas pequeas de paredes
delgadas.

Esclernquima
(tejido
mecnico). Est formado por
clulas muertas pequeas con
paredes muy gruesas.

Floema (Tejido conductor).

Colnquima (tejido mecnico). Est formado por varias


capas de clulas vivas pequeas
y con las paredes algo ms
gruesa que en la epidermis.

Formado por clulas pequeas


de paredes delgadas que se
encargan de transportar las
sustancias elaboradas en la
fotosntesis.

Xilema (Tejido conductor).


Formado por clulas ms
grandes y de paredes gruesas
que se encargan de transportar
el agua y las sales minerales.

Parnquima (Tejido parenquimtico).


) Es el tejido
j
fundamental donde
se
encuentran
los
elementos
conductores. Est formado por
numerosas capas de clulas vivas ms
grandes y de paredes delgadas.

37

CORTE TRANSVERSAL DE UN TALLO PRIMARIO DE UNA


MONOCOTILEDNEA

Epidermis (Tejido protector).


Es la capa ms externa, formada
por clulas vivas pequeas y
paredes delgadas.

Esclernquima (tejido
mecnico) Est formado
mecnico).
por
clulas
muertas
pequeas con paredes muy
gruesas.

Floema (Tejido conductor).


E t formado
Est
f
d por clulas
l l vivas
i

Colnquima
(tejido
mecnico). Est formado
por varias capas de clulas
vivas pequeas y con las
paredes algo ms gruesa que
en la epidermis.

pequeas de paredes delgadas


que se encarga de transportar
las sustancias elaboradas en la
fotosntesis.

Xilema (Tejido
Xil
(T jid conductor).
d t )
Est formado por clulas
muertas ms grandes y de
paredes gruesas que se
encargan de transportar el
agua y las sales minerales.

Parnquima (Tejido parenquimtico). Es el tejido donde se


encuentran
los
elementos
conductores. Est formado por
numerosas capas de clulas vivas
ms grandes y de paredes
delgadas.

38

Muestra 7: Observa al microscopio el corte transversal de un tallo con crecimiento


primario. Identifica los tejidos que la forman con ayuda del esquema anterior y
fotografa Indica si se trata del tallo de una
selalos en la siguiente fotografa.
monocotilednea o de una eudicotilednea.

Muestra 8: Observa al microscopio el corte transversal de un tallo con crecimiento


primario. Identifica los tejidos que la forman con ayuda del esquema anterior y
selalos en la siguiente fotografa. Indica si se trata del tallo de una
monocotilednea o de una eudicotilednea.

39

Indica las diferencias entre el corte transversal del tallo primario de una
monocotilednea y el de una dicotilednea.

4. LA HOJA (MESA 3)
Las hojas son rganos laminares, generalmente especializados en la funcin
fotosinttica y en la respiracin.
4.1. MORFOLOGA

PICE

BASE

La cara superior de la hoja es el haz y la inferior es el envs. El limbo es la parte


laminar de la hoja, y el eje que lo une al tallo es el pecolo. A veces, en la base del
pecolo aparecen unas pequeas piezas que se denominan estpulas. Las hojas que
tienen pecolos son hojas pecioladas, pero si carecen de l, son hojas ssiles o
sentadas.

Hoja peciolada

Hoja sentada

40

Disposicin de las hojas en el tallo

Muestra 9 (A-E): Indica en cada caso la disposicin de las hojas en cada uno de
los tallos.

9A:
9B:
9C:
9D:
9D
9E:
Las hojas son simples, cuando constan de una sola lmina foliar, o compuestas,
cuando
d la
l lmina
l i foliar
f li se divide
di id en varias
i subunidades
b id d llamadas
ll
d fololos
f l l (todos
( d los
l
fololos estn en el mismo plano).

Fololos

Hojas simples

Hojas compuestas
41

Existen muchos tipos de hojas simples atendiendo a su forma, margen, pice,


base, etc.

42

Los caracteres dados anteriormente para las hojas simples se pueden aplicar a los
fololos de las hojas compuestas.

Tipos de hojas compuestas

Nerviacin de la hoja
Los nervios que atraviesan las hojas, adems de proporcionar cierta rigidez, se
encargan de conducir el agua y las sustancias nutritivas. A continuacin se
indican algunos tipos de hojas atendiendo a la disposicin de sus nervios.

43

ACTIVIDAD 1. A continuacin se pueden observar diferentes tipos de hojas.


Completa los siguientes recuadros. Si la hoja es compuesta especifica el tipo.

Forma
Tipo de hoja
Margen

pice

pice

Base

Apice

Base
44

Nerviacin

Nerviacin

Tipo de hoja

Tipo de hoja
Forma de los foliolos de la base

Forma de la hoja
pice
Margen

45

ACTIVIDAD 2. Identificacin mediante una clave dicotmica


de las muestras 10A-
A continuacin se aplicarn los conocimientos adquiridos sobre la morfologa de
la hoja identificando distintos tipos de hojas mediante una clave dicotmica.

CLAVE
1.- Hoja peciolada 2
1.- Hoja
j sentada 10
2.- Hoja simple3
2.- Hoja compuesta 13
Muestra
3.- Hoja palmatinervia
M
3.- Hoja pinnatinervia 4
Muestra
4.- Hoja con estpula F
4.- Hoja sin estpula 5

5.- Margen de la hoja entero 6


5.- Margen de la hoja de otra forma7
Muestra

6.- Hoja falcadaI


6.- Hoja hastada
E
Muestra
Muestra
7.- Margen de la hoja lobulado
C
7.- Margen de la hoja de otra forma8
Muestra
8.- Hoja deltoide
8.- Hoja de otra forma9
Muestra

9.- Base de la hoja cordada A


9.- Base de la hoja de otra forma N
Muestra
Muestra
10.- Hojas escuamiformesD
10.- Hojas de otra forma 11
Muestra
11.- Hoja acicularH
11.- Hoja de otra forma12
Muestra

12.- Hoja con nerviacin paralela, margen entero K


12.- Hoja con nerviacin pinnada, margen dentado
L
Muestra
Muestra
13.- Hoja digitada
J
13 Hoja
13.H j pinnada14
i d
14
Muestra

14.- Con estpula, margen de los fololos serrados B


Muestra
14.- Sin estpula, margen de los fololos enteroG

46

4.2. ANATOMA

Al igual que en la la raz y el tallo, al dar un corte transversal a una hoja


tpica se pueden observar los tejidos que la forman.
Epidermis superior (Tejido
protector). Es la capa ms
externa, formada por clulas vivas
pequeas y paredes delgadas.

Cutcula

capa delgada que est


compuesta de una sustancia denominada
cutina segregada por las clulas de la
epidermis.

Parnquima en empalizada
(Tejido parenquimtico). Capa de
clulas vivas alargadas con muchos
cloroplastos y que se disponen muy
juntas.

Parnquima esponjoso (Tejido


parenquimtico). Varias capa de
clulas vivas poligonales
mucho espacio entre ellas.

con

Epidermis inferior (Tejido


protector)
Xilema (Tejido conductor).
Clulas oclusivas. Pareja
de clulas vivas que forman
el estoma

Formado por clulas muertas


ms grandes y de paredes
gruesas que se encargan de
transportar el agua y las sales
minerales.

Floema (Tejido conductor).


) Formado por clulas
vivas pequeas de paredes
delgadas que se encarga de
transportar las sustancias
elaboradas en la fotosntesis.

M
Muestra
11 Observa
11:
Ob
all microscopio
i
i ell corte transversall de
d una hoja
h j tpica
i
d
de
Eudicotilednea. Identifica los tejidos que la forman con ayuda del esquema anterior y
rotula la siguiente fotografa.

47

Muestra 12:

Estomas en la epidermis de

Carpobrotus.

Ostolo

Para ver los estomas separa una lmina de la


epidermis de Carpobrotus, y colcala sobre el
portaobjeto con una gota de agua destilada, con la
cara interna de la epidermis hacia arriba.
Ahora coloca encima un cubreobjeto y reconoce
p usando el objetivo
j
los estomas en el microscopio
de x10 y x40. Realiza un esquema localizando las
clulas oclusivas y el ostolo.

Clulas
oclusivas

5. ADAPTACIONES DEL CORMO (MESA 4)


Las distintas
L
di ti t partes
t del
d l cormo (raz,
( tallo
t ll y hojas)
h j ) pueden
d presentar
t diversas
di
modificaciones para adaptarse al lugar en el que viven o bien a unas
determinadas condiciones ambientales.
5.1. ADAPTACIONES DE LA RAZ
q lo normal es qque la raz sea un rgano
g
subterrneo con la morfologa
g
Aunque
observada en las muestras 1 o 2, a veces puede presentar otro aspecto debido a que
la planta necesite adaptarse a una determinada situacin.
5.1.1. Races que acumulan sustancias de reserva para pasar una poca
desfavorable.
* Races napiformes
Son races principales engrosadas,
aunque es frecuente que tambin
forme parte la zona inferior del tallo.
* Races tuberosas

Son races subterrneas engrosadas que se


pparecen a los tubrculos caulinares.

48

5.1.2. Races que ayudan a la planta a disponer de mayor cantidad de


luz para la fotosntesis.
*R
Races

adhesivas
dh i
Son races areas que se pegan a un soporte vertical
para alcanzar zonas mejor iluminadas.

5.1.3. Races con funcin de sostn.


* Races flcreas
Son races gruesas que se forman en los nudos
basales y penetran en el suelo donde cumplen una
doble funcin: sostn y absorcin.
5.2. ADAPTACIONES DEL TALLO
Aunque las funciones del tallo son sostener las ramas, hojas, flores y frutos, as
como conducir la savia bruta y elaborada, en ocasiones se adapta para favorecer
la fotosntesis, acta como rgano de reserva acumulando sustancias elaboradas
o simplemente agua, o puede actuar como rgano de multiplicacin. A veces
realizan ms de una funcin a la vez.
5.2.1. Tallos subterrneos reducidos a un pequeo disco
del que salen races
Estos tallos estn rodeados de hojas no
fotosintticas que acumulan sustancias de
reservas.
5.2.2. Tallos subterrneos que acumulan sustancias de reserva para
sobrevivir en condiciones ambientales desfavorables, y adems sirven para
la multiplicacin.
multiplicacin
* Rizomas
Son tallos subterrneos, ricos en sustancias
de reserva, que crecen de forma indefinida
paralelos al sustrato. Al poseer yemas
pueden producir nuevas plantas.
plantas

49

* Tubrculos caulinares
Son tallos subterrneos, ricos en sustancias
de reserva y generalmente ms grueso que
los rizomas, pero de crecimiento limitado.
En su superficie tambin tienen yemas de las
que podrn brotar nuevas plantas.
p
exclusivamente a la multiplicacin.
p
5.2.3. Tallos adaptados
* Estolones
Son brotes laterales que nace en la base del tallo
que crecen horizontalmente al sustrato, y que son
capaces de enraizar para originar un nuevo
individuo .
5.2.4. Tallos que acumulan agua
* Tallos carnosos, crasos o suculentos
Son tallo areos de aspecto carnoso que
muestran algunas plantas al almacenar
agua en su tejido parenquimtico.
A veces el agua se almacena en la base
del tallo.

5.2.5. Tallos o ramas que ayudan al la planta a disponer de mayor


cantidad de luz para la fotosntesis.
* Zarcillos caulinares
Son tallos que se hacen delgados, a modo de
hilos, capaces de rodear cualquier soporte para
alcanzar zonas mejor iluminadas.

* Tallos o ramas volubles


Son tallos flexibles que se enrollan en algn soporte .

50

* Tallos o ramas aplanados


Son tpicos de plantas con hojas muy reducidas
(escamas o espinas) que aplastan sus tallos, dndoles
incluso aspecto de hojas, con el fin de aumentar la
superficie por donde realizar la fotosntesis.
5.3. ADAPTACIONES DE LAS HOJAS
5.3.1. Hojas que acumulan agua o minimizan su prdida
* Hojas carnosas, crasas o suculentas
Son hojas de aspecto carnoso que muestran algunas plantas
al almacenar agua en el tejido parenquimtico de las hojas.
* Hojas reducidas a espinas
Las espinas son formaciones rgidas, ricas en tejidos de
sostn, que disminuyen la prdida de agua, e incluso pueden
ayudar a la absorcin del roco y de la niebla como en el caso
de los cactus.

No hay que confundir estas espinas con las que


desarrollan otras plantas para defenderse de los
herbvoros.

Espinas

5.3.2. Hojas que acumulan sustancias de reserva para pasar una poca
desfavorable.
*Bulbo
Son yemas subterrneas con hojas o bases de hojas
ricas en materia de reserva y tallo reducido a un
pequeo disco situado en la base. En las axilas de las
hojas se producen nuevas yemas, originando nuevos
bulbos, por lo que los bulbos tambin sirven para la
multiplicacin de la planta.
5.3.3. Hojas que contribuyen a disponer de mayor cantidad de luz para la
fotosntesis.
* Zarcillos foliares
Son hojas o partes de stas que se hacen delgadas,
delgadas a
modo de hilos, capaces de rodear cualquier soporte para
alcanzar zonas mejor iluminadas.

Zarcillo
51

5.3.4. Hojas adaptadas a condiciones anormales de nutricin


* Hojas trampas
Son tpicas
S
t i
d plantas
de
l t que viven
i
en lugares
l
pobres
b
en
nitrgeno. Para compensar esta carencia suelen transforman
sus hojas en trampas para capturar pequeos insectos que
utilizarn como fuente suplementaria de nitrgeno.

ACTIVIDAD 3.
3 Indica en cada muestra el tipo de adaptacin y para
que sirve. Fjate que en algunas plantas se modifica ms de un rgano.
Indcalo cuando ocurra.
Muestra 13
Muestra 14
Muestra 15
Muestra 16
Muestra 17
Muestra 18
Muestra 19
Muestra 20
Muestra 21
Muestra 22
Muestra 23
Muestra 24
Muestra 25
Muestra 26
Muestra 27
Muestra 28
Muestra 29

52