MEDIOS DE CULTIVO Y

MTODOS DE SIEMBRA
rea de Bacteriologa. Departamento de Ciencias Microbiolgicas
Facultad de Veterinaria -UdelaR

MEDIO DE CULTIVO

Una sustancia lquida o

slida, de naturaleza definida
o no, natural o sinttica,
simple o compuesta que
permite el desarrollo de
diferentes microorganismos.

Preparacin de medios de cultivo

A.A partir del medio comercial

deshidratado
B. A partir de sus distintos
componentes

Preparacin de medios de cultivo

PROCEDIMIENTO:

1. Pesar la cantidad estimada

2. Hidratarlo con el volumen de agua destilada
correspondiente
3. Calentar agitando lentamente
hasta su disolucin
4. Controlar pH y apariencia
5. Envasar y esterilizar a
121C por 15 min
6. Enfriar y realizar control de esterilidad

CLASIFICACIN
1) SEGN SU ESTADO FSICO
A.
B.
C.
D.

SLIDOS
LQUIDOS
SEMISLIDOS
SEMILQUIDOS

3) SEGN SU USO
A. Nutrientes (slidos y
lquidos)
B. Selectivos (slidos)
C. Diferenciales
D. De enriquecimiento
(lquidos)

2) SEGN SU USO
Medios nutrientes
Pueden ser slidos o lquidos
Son aquellos que presentan los nutrientes mnimos para el
crecimiento de los microorganismos que no necesitan requerimientos
especiales

Medios selectivos
Favorecen el crecimiento de un determinado grupo de bacterias
La selectividad se consigue normalmente con un producto qumico
agente, tinta o antibitico.
Son slidos

2) SEGN SU USO
Medios diferenciales
Slidos o lquidos
Permite diferenciar un microorganismo de otro segn determinadas
propiedades de crecimiento en dichos medios
Presentan algn indicador
Ej: TSIA, Citrato, etc (T-P de pruebas bioqumicas)
Medios de enriquecimiento
Son medios que tienen aditivos adicionales para favorecer el
crecimiento de determinados microorganismos
Son lquidos

Medios de cultivo MS COMUNES

Agar Nutritivo (AN)

Tryptic Soy Agar (TSA)
Agar Sangre (AS)
Agar Muller-Hinton (MH
Caldo Nutriente (CN)

Medios de cultivo MS COMUNES

Agar McConkey (McC)
Xilosa-Lisina-Tergitol 4 Agar (XLT4)
Salmonella-Shigella Agar (SSAgar)
MSA ( Manitol Sal Agar):

MEDIOS DE CULTIVO MS COMUNES

LOEWENSTEIN
Cooked meat

Qu significa sembrar?
Transferir una muestra
microbiolgica de un
ambiente determinado a
un medio de cultivo con
fines cuantitativos o
cualitativos

Tener en cuenta:
Temperatura de
incubacin
Condiciones de oxgeno
Tiempo de incubacin

Promover
intencionalmente el
desarrollo de un
microorganismo en
medios de cultivo y
condiciones de
laboratorio
controladas

Dnde sembramos? y Para qu sembramos?

Sembramos en medios de cultivo

para hacer que las bacterias se
reproduzcan con el objetivo de
aumentar el nmero de
individuos de una poblacin.

Tcnica Asptica
ASPTICO= sin microorganismos

Se refiere a las prcticas que reducen la

posibilidad de que mi cultivo de inters se
contamine con un microorganismos externo a la
muestra.
Tcnica usada para evitar la contaminacin
durante la manipulacin de cultivos y de medios
de cultivos

Principios del cultivo microbiolgico

1. Facilitar el crecimiento y el aislamiento de un
microorganismos presente en una muestra
clnica
2.Tratar de determinar que microorganismo de los
que podemos encontrar en una muestra es ms
probable que sea el causante de la afeccin
3.Obtener un desarrollo de microorganismos
suficiente para poder identificarlos y
caracterizarlos

SIEMBRA: en medio lquido

MEDIO LQUIDO
MEDIO LQUIDO
MEDIO SLIDO
Placa
Tubo

SIEMBRA: en medio lquido

MEDIO LQUIDO

Esterilizacin del
asa

MEDIO LQUIDO

Agitar el tubo
con la muestra
(Homogenizaci
n)

Destapar el tubo y
flambear la boca

SIEMBRA: en medio lquido

Tomar la muestra

Volver a flambear la
boca del tubo

Tapar el
tubo

SIEMBRA: en medio lquido

Destapar el tubo
con el medio a
inocular y flambear
la boca

Sembrar la
muestra

Flambear la boca
del tubo

SIEMBRA: en medio lquido

Tapar el
tubo

Esterilizacin del
asa

INCUBAR

SIEMBRA: en medio lquido

MEDIO SLIDO
Placa
Tubo

MEDIO LQUIDO

INCUBAR

SIEMBRA: en medio semislido

MEDIO SLIDO
Placa
Tubo

MEDIO
SEMISLIDO

INCUBAR

Definicin importante:
COLONIA BACTERIANA
Agrupacin de bacterias originadas a partir
de una bacteria madre que se establecen y
extienden en un medio.

SIEMBRA: en medio slido

Siembra en tubos:
Siembra en placa:
A. Con agar inclinado
1. Por extensin
(Columna y Pico de
2. Por inclusin
flauta)
3. Por estra
B. Con medio slido
horizontal
(Pico de Flauta)

SIEMBRA: en medio slido

1. Siembra en placa: Por extensin
Se extiende el inculo uniformemente con una varilla
acodada estril por la superficie del medio de cultivo
Las clulas diseminadas sobre la superficie formarn
colonias aisladas

2. Siembra en placa: Por inclusin

SIEMBRA: en medio slido

3. Siembra por estra: PARA AISLAMIENTO

Colonias aisladas
Cultivo puro: colonias de
igual morfologa

Cultivo
AXNICO

SIEMBRA: en medio slido

A. Siembra en tubos: En agar inclinado

(Columna y Pico de flauta)

Se siembran por puncin y estra

(con hilo)
B. Siembra en tubos: En medio slido horizontal (Pico de

flauta)

Se siembran por estra en la superficie (con

asa)