UNIVERSIDAD NACIONAL

PEDRO RUIZ GALLO

FACULTAD DE CIENCIAS BIOLGICAS
DEPARTAMENTO DE MICROBIOLOGA Y PARASITOLOGA

PROYECTO DE INVESTIGACIN

EFECTO DE DOSIS ELEVADAS DE CLORANFENICOL EN LA

POBLACIN LEUCOCITARIA DE Cavia porcellus, EN EL PERIODO
SEPTIEMBRE (2015) - DICIEMBRE (2015)

Autor:

TARRILLO DVILA MIGUEL NGEL

Asesor:

ESPINOZA VALERA, CARLOS A.

Lambayeque, Septiembre del 2015

1. Ttulo del Proyecto

EFECTO

DE

DOSIS

ELEVADAS

DE

CLORANFENICOL

EN

LA

POBLACIN LEUCOCITARIA DE Cavia porcellus

2. Personal Investigador
2.1. Autor:
Tarrillo Dvila Miguel ngel
2.2. Asesor:
Espinoza Valera, Carlos A.
3. Carrera profesional/Especialidad
Escuela Profesional de Biologa con mencin en el rea Microbiologa
Parasitologa.
4. Rgimen de Investigacin:
Orientada - Experimental
5. Local o institucin donde se desarrollara el proyecto
Laboratorio de la especialidad de Microbiologa - Parasitologa de la Facultad
de Ciencias Biolgicas de la Universidad Nacional Pedro Ruiz Gallo,
Provincia de Lambayeque, Departamento de Lambayeque.
6. Duracin del proyecto: 10 semanas
7. Fecha de Inicio: 29 de Septiembre del 2015
8. Fecha de Trmino: 24 de Noviembre del 2015

9. Cronograma de Actividades

ACTIVIDADES / TIEMPO semanas

2014-2015
SEPTIEMBRE
OCTUBRE
1 2 3 4 1 2 3 4

FASE DE PLANEAMIENTO
Revisin bibliogrfica.
Elaboracin del proyecto.
Presentacin del proyecto.
FASE DE EJECUCION
Recoleccin de muestra.
Procesamiento de muestra.
Registro de datos
FASE DE COMUNICACIN
Anlisis e interpretacin.
Elaboracin del informe.
Presentacin del informe.

NOVIEMBRE
1 2 3 4

X
X
X
X
X
X

X
X

10. Recursos disponibles

10.1 Personal
Este proyecto contar con el apoyo del personal tcnico del rea de
Microbiologa y Parasitologa de la Facultad de Ciencias Biolgicas en
la Universidad Nacional Pedro Ruiz Gallo.

11. Presupuesto y Financiamiento

11.1. Presupuesto
A.- Bienes
Material de escritorio
Papel bond...S/ 5.00
Folders.....S/3.00
Impresiones..S/11.00
Material de laboratorio
Tubos de ensayo....S/3.00
Laminas portaobjetos.....S/3.00
Alcohol..S/7.00

X
X
X
X
X

 Algodn....S/6.00
Guantes...S/5.00
Pabilo...S/3.00
Jeringas de 1mL y 5 mL...S/8.00
Material Biolgico
1 cobayo.S/20.00
Cloranfenicol......S/10.00
B.- Servicios
Pasajes...S/40.00
TOTAL..... S/124.00

12. Financiamiento
El presente proyecto ser financiado por el responsable, con ayuda de
materiales y equipo del rea de Microbiologa y Parasitologa de la
Facultad de Ciencias Biolgicas en la Universidad Nacional Pedro Ruiz
Gallo.

EFECTO DE DOSIS ELEVADAS DE CLORANFENICOL EN LA POBLACION

LEUCOCITARIA DE Cavia porcellus

1. INTRODUCCIN
El consumo inadecuado y excesivo de ciertos medicamentos viene acarreando
en la actualidad diversos problemas en la salud. Se sabe que los antibiticos, al
ser consumidos en dosis elevadas y de manera continua acarrean efectos
secundarios sobre la mdula sea roja, el sistema linfoide, eritroide y dems
clulas del organismo. Uno de esos problemas es la disminucin en la
poblacin plaquetaria en sangre, conocida como Trombocitopenia, definida
como la disminucin del nmero normal de plaquetas (< 150,000 plaq./mm3)
en la sangre circulante. Existen diversos tipos de trombocitopenia, siendo la

ms comn en la actualidad la Trombocitopenia Inducida por Frmacos

(TIF).En el presente trabajo se estudiara el efecto sobre la poblacin
plaquetaria de dosis elevadas de un antibitico (cloranfenicol) en cobayos
hembras de mediana edad
Los productos biolgicos han sido desde su aparicin de gran ayuda para la
prevencin (vacunas), tratamiento (antibiticos) y cura (sueros, antisueros,
anticuerpos monoclonales) de diferentes enfermedades que aquejan a la
humanidad. Desde entonces se not que el uso excesivo (dosis elevadas) y el
tratamiento prolongado con dichos productos traan consigo efectos adversos
no deseados, esto por la toxicidad inherente a dichos medicamentos o por la
idiosincrasia de cada individuo (Cuellar, 2003; Fernndez, 2006; Flores et.
al.1992). Se sabe que el consumo excesivo de antibiticos trae consigo efectos
secundarios
en
el
plasma
y
clulas
sanguneas
(trombocitopenia,agranulocitosis, lupus, alergias entre otros); las vacunas
aunque en su mayora son usadas para la inmunizacin, algunas presentan
afectos adversos de hipersensibilidad (respuestas inmunitarias exageradas
como vmitos, dolor de cabeza, fiebre) (Hardman y Limbird, 1996; Goodman y
Snyper, 2005, Lpez et.al. 2005).Se sabe adems de una gran mayora de
productos biolgicos que producen efectos parecidos. El tratamiento
quimioteraputico produce daos en la medula sea que a su vez produce una
disminucin en la hematopoyesis, tambin se han reportado casos de
productos tan comunes como el Naproxeno y el Paracetamol que pueden llegar
a producir una disminucin en la poblacin plaquetaria total. En nuestro caso a
estudiar sabemos que la mayora de los antibiticos pueden llegar a producir
trombocitopenia y otros transtornos sanguneos (Lahita, 2003; Krauss,
2003;Page et. al. 1998).

2. ASPECTOS DE LA INVESTIGACIN
2.1 REALIDAD PROBLEMTICA
El efecto adverso ms serio del Cloranfenicol es la depresin medular.
Las discrasis sanguneas graves y fatales (anemia aplsica, anemia
hipoplsica, trombocitopenia y granulocitopenia) pueden ocurrir luego de
la administracin del Cloranfenicol. La agranulocitosis inducida por este
medicamento puede resultar de la lesin de alguno de los pasos de la
secuencia de la hemopoyesis o de la lesin de los granulocitos en la
sangre perifrica.
3. FORMULACIN DEL PROBLEMA

Inoculando cloranfenicol en Cavia porcellus habr variacin en la

poblacin leucocitaria?
4. OBJETIVOS:
1.
2.
3.
4.

Determinar la poblacin leucocitaria basal en Cavia Porcellus.

Determinar la dosis y volumen del cloranfenicol.
Determinar la va de inoculacin del cloranfenicol.
Determinar la poblacin leucocitaria post-inoculaciones de cloranfenicol
en cobayos.

5. JUSTIFICACIN:
El desarrollo de este trabajo es importante porque el Cloranfenicol es un
medicamento de uso comn en las personas, por lo tanto, observando sus
efectos en la poblacin leucocitaria de Cavia porcellus Cobayos
(mamferos) es posible tener una idea ms cercana a su efecto en personas.
Adems de alertar a la poblacin de que el consumo de cloranfenicol en
niveles elevados puede causar una intoxicacin.
6. ANTECEDENTES BIBLIOGRFICOS

Rosenback (1960), reporto efectos no usuales en M.O. en dos pacientes

que recibieron Cloranfenicol, en ambos casos haba arresto de la
maduracin, con prominente vacuolizacin citoplasmtica de clulas
eritroides de M.O. Despus de descontinuar la droga estos cambios
desaparecieron y los pacientes se recuperaron.
Cooper (1983), Las primeras publicaciones que describan casos de
agranulocitosis incriminaron la aminofenazona (amidopirina), otras
pirazolonas, fenotiacinas, sulfamidas, antitiroideos, cloranfenicol,
antihistamnicos como la tenalidina y butilpirazolidinas (butazonas).
Herbert (1934), La agranulocitosis inducida por medicamentos puede
resultar de la lesin de alguno de los pasos de la secuencia de la
hematopoyesis o de la lesin de los granulocitos en la sangre perifrica.
Cuellar y Rodrguez (2003) afirman que la trombocitopenia inducida por
medicamentos es un tipo de hipersensibilidad de tipo II y que muchos
pacientes presentan anticuerpos dirigidos contra dos de los receptores
plaquetarios principales gpIb y IIb/IIIa.
Solal-Cligny Ph.(1999), El efecto adverso ms serio del Cloranfenicol
es la depresin medular. Las discrasis sanguneas graves y fatales
(anemia
aplsica,
anemia
hipoplsica,
trombocitopenia
y
granulocitopenia) pueden ocurrir luego de la administracin del
Cloranfenicol

7. VARIABLES DE ESTUDIO

7.1 VARIABLE INDEPENDIENTE:

Cloranfenicol
7.2 VARIABLE DEPENDIENTE:
Leucocitosis
7.3 POBLACIN Y MUESTRA:
En este presente trabajo experimental, la poblacin que ser estudiada
es de un animal de experimentacin, Cavia porcellus, en la cual se le
administrar dosis y volumen de Cloranfenicol.
La muestra extraa del animal de experimentacin ser sangre para
procesarla y conocer su nmero de clulas leucocitarias; antes, durante
y despus de la administracin del medicamento problema.

8.2 MTODOS
8.2.1 PREPARACIN DEL INOCULO
Primero se determinar tanto la concentracin como el volumen del
inoculo (cloranfenicol) que ser inoculado en el cobayo. Para esto
utilizaremos clculos simples, basndonos en las concentraciones
de Cloranfenicol administrado en humanos, y utilizando tambin
como dato el peso del cobayo.

8.2.2 DETERMINACIN DE LA DOSIS DE INOCULACIN

Para determinar la dosis de inoculo que se administrara al cobayo,
tambin se tomara como referencia la dosis de administracin de
Cloranfenicol en humanos.
8.2.3 VA DE INOCULACIN EN EL COBAYO
La va

apropiada

para las inoculaciones de Cloranfenicol en el

Cobayo ser la va intramuscular, debido a que otra va

de

inoculacin podra acarrear complicaciones iniciales en el cobayo.

8.2.4 EXTRACCIN DE SANGRE DEL COBAYO
Para la determinacin de

la poblacin leucocitaria basal y post

inoculaciones, se le extraer sangre de la mano al cobayo y luego

ser puesto en una laminilla porta objeto para su posterior fijacin y
posterior tincin de Wright.
8.2.5 TINCIN DE WRIGHT
Es una tincin de tipo Romanowsky. Es extremadamente importante
en el laboratorio de hematologa este tipo de tincin, ya que puede
obtenerse una cantidad abundante de informacin a partir del
examen de un frotis de sangre perifrica bien teido Una tincin de

Romanowsky consiste en azul de metileno y sus productos de

oxidacin, as como eosina Y o eosina B.
La accin combinada de estos colorantes produce el efecto
Romanowsky y da una coloracin prpura a los ncleos de los
leucocitos y a los grnulos neutroflicos y de color rosado a los
eritrocitos. Los componentes de este efecto son el azul B y la eosina
Y. Las propiedades de tincin de Romanowsky dependen del enlace
de los colorantes a las estructuras qumicas y de las interacciones
del azul B y la eosina Y. Los agrupamientos de cidos nucleicos, las
protenas de los ncleos celulares y el citoplasma inmaduro reactivo,
fijan el azul B, colorante bsico.
La eosina Y, colorante cido, se fija a los agrupamientos bsicos de
las molculas de hemoglobina y a las protenas bsicas.
Material:
-

Frotis sanguneo

Agua destilada

Eosina B

Eosina Y

Azul de metileno

Alcohol metlico

Procedimiento:
1.- Hacer un frotis sanguneo, ni demasiado delgado, ni que llegue al
extremo del portaobjetos.
2.- Fijar el frotis y dejar secar.
3.- colocar el colorante Wright.
4.- luego colocar agua destilada y dejar reposar por 10 minutos
hasta que tome un color plateado.

5.- enseguida lavar con agua destilada y dejar secar al ambiente.

6.- Observar al microscopio.
9. Referencias Bibliogrficas

Solal-Cligny Ph. Neutropenia e agranulocitose. In: Farmacovigilancia.

So Paulo: Andrei, 1999.

Agranulocitosis por medicamentos. Butllet Groc. Fundaci Institut Catal

de Farmacologa. Num 10. Enero-febrero 1987.

Shapiro S. La agranulocitosis y las pirazolonas. Lancet 1984; 1: 451-2.

Curmutte JT. Disorders of granulocyte function and granulopoiesis. Drug

induced neutropenia. In: Nathan D, Oski F. Hematology of infancy and
childhood. 4 ed. Philadelphia: WB Saunders, 1993; 948-9.

Beta-lactam-induced neutropenia. An old forgotten companion. Galo

Peralta, Mara Blanca Snchez-Santiago. Servicio de Medicina Interna.
Hospital Sierrallana. Torrelavega. Servicio de Farmacologa Clnica.
Hospital Universitario Marqus de Valdecilla. Santander. Espaa.

Linkografia

http://www.eugenomic.com/es/home/mas_informacion_inomic/Links/neut
ropenia

http://www.sedolor.es/2001ponencia.php?id=105

http://www.boletinfarmacos.org/?p=37903

http://scielo.isciii.es/scielo.php?
pid=S021271992002000600002&script=sci_arttext