Академический Документы
Профессиональный Документы
Культура Документы
1. En el desarrollo de un proceso para la obtencin de una enzima a partir de E. coli, se sabe que
esta tiene un 80% de humedad y que el 60% de su peso seco es protena. El proceso de
purificacin de la enzima consta de 4 pasos. En la tabla siguiente se presenta la cantidad de
enzima y de protena total al final de cada paso. Se desea obtener el factor de purificacin de la
enzima en cada paso, el rendimiento por paso y el rendimiento global.
Paso
Protena (g)
Enzima (g)
Fraccin de enzima
x10-3 (g/g)
12.0
0.08
6.667
Precipitacin
1.8
0.06
33.33
Intercambio inico
0.24
0.048
200
Cromatografa en gel
0.036
0.036
1000
Ruptura celular
Vol
(m
L)
Prot.
(mg/m
L)
Pr
ot.
(m
g)
Act.
Enz.
(U/m
L)
Extra
cto
50
0
14
1er.
paso
50
10
60
Act
.
En
z.
(U)
Act.
Esp.
(U/m
g)
Ren
d.
Eta
pa
(%)
Ren
d.
Tota
l
(%)
Fa
ct.
Pur
if
Respuesta:
Mater
ial
Vol
(m
L)
Prot.
(mg/
mL)
Pro
t.
(m
g)
Act.
Enz.
(U/m
L)
Act.
Enz
.
(U)
Act.
Esp.
(U/m
g)
Ren
d.
Eta
pa
(%)
Ren
d.
Tota
l
(%)
Fa
ct.
Pur
if
Extra
cto
50
0
14
70
00
350
0
0.5
100
100
1er.
paso
50
10
50
0
60
300
0
86
86
12
Respuesta: 0.6%
Si debido a la desnaturalizacin del producto el rendimiento por etapa desciende a 30% cual es el
rendimiento global.
Respuesta: 0.0006%
ROMPIMIENTO CELULAR
1. En el rompimiento intermitente para la obtencin de una enzima de S. cerevisiae se utiliz un
molino de perlas de alta velocidad de 4 L obtenindose los siguientes datos:
Tiempo (s)
Enzima x 102
(mol/min-Kg)
15
1.025
0.625
30
2.15
1.15
45
2.525
1.675
60
3.425
2.15
Max
10
6.7
%protena liberada
Ln Rm/(Rm-R)
63
0.994
79
1.56
88
2.12
96
3.219
10
99.9
6.908
75 000 da
2%
Lpidos
550 da
1%
Azcares
200 da
1%
63 da
2%
3. Se quiere conocer la viscosidad de un lquido que tiene una densidad de 1045 Kg/m 3; para ello
se deja caer una partcula con densidad y tamao de 1200 Kg/m 3 y 0.08 mm respectivamente,
obtenindose una velocidad terminal libre de sedimentacin de 9.5mm/s. Considere que se
encuentra en la regin de Stokes.
R. 5.685 x 10-5 Kg/m seg
CENTRIFUGACIN
V (m3)
0.1
0.0025
0.4
0.009
0.7
0.015
0.02
0.052
0.09
10
0.13
3. Se llev a cabo una prueba de filtracin a una caida de presin constante (340 kPa) en un filtro
prensa de laboratorio. Las masas colectadas fueron las siguientes:
El rea de filtracin del filtro de laboratorio fue de 0.186 m 2. Si se desea utilizar un filtro de escala
industrial para filtrar una suspensin que contiene el mismo material, pero a una concentracin
50% superior que la utilizada para el filtro prensa de laboratorio, y a una caida de presin de 270
kPa, estimar la cantidad de filtrado que se obtendr en una hora si el rea del filtro es de 9.3 m 2.
Masa de filtrado
(Kg)
20
40
60
80
26
54.5
93
Tiempo (min)
4. Se filtra una sal a temperatura ambiente, de un medio con una viscosidad de 0.001Kg/ms, con
densidad de 0.003g/L y con un P de 3.3atm, en un filtro prensa de 100cm 2. Para obtener la
resistencia especfica se realiz la filtracin en el laboratorio y arroj los siguientes datos:
Calcule el tiempo para filtrar 4000L en un filtro de 15 marcos que tienen un rea de 0.15m 2y el
tiempo de lavado.
t (s)
V (cm3)
80
10
140
15
195
20
243
25
290
30
330
40
390
50
450
60
515
CRISTALIZACIN
1. Se disuelven 10 Kg de cido adpico en 13.1 Kg de agua y se calientan a 90C para solubilizar el
cido. Posteriormente, la solucin se filtra para eliminar impurezas. Durante el calentamiento y la
filtracin se evapora 10 % de agua. La solucin es enfriada a 35C y filtrada. La solubilidad del
cido adpico es de 0.05 kg/Kg de agua a 35C. Determine el peso de cristales recuperados
despus de la filtracin a 35C.
2. Explique cuantos gramos de sal y agua se debe mezclar para prepara 400 cm 3 de una disolucin
con una concentracin de sal 150 g/L de agua. Si tomamos 50 cm 3 de esta disolucin y
evaporamos el agua. Obtenga los gramos de sal que cristalizar y el volumen de disolucin que se
debe tomar, para que al evaporar el agua, queden 20 g de sal.
3. Para recuperar el cido ctrico (PM=192) producido por cultivo sumergido con Aspergillus
niger se siguen las siguientes etapas: a)el medio de fermentacin es filtrado para remover la
biomasa, b) el cido ctrico es precipitado como citrato de calcio al agregar CaO (PM=56), c) el
precipitado es separado por filtracin, d) el precipitado es disuelto con cido sulfrico (PM=98), e)
finalmente el cido ctrico es cristalizado por evaporacin. En el ltimo lote de produccin se
obtuvieron 25 m3 de medio de cultivo con 140 g/l de cido ctrico.
Si se quiere precipitar el cido ctrico con CaO y la solubilidad del citrato de calcio (PM=378)es de
1 parte por 1000 partes de medio de cultivo.
a) Cuantos kilogramos de CaO se necesitan?
b) cuantos kilogramos de citrato de calcio se producen?
c) en el tercer paso la filtracin retiene el 95% de citrato de calcio, ste es disuelto en 2% de
exceso de cido sulfrico, cuanto cido sulfrico es necesario?
4. Se mezclan 15 kg de sacarosa con 20 L de agua y se calientan a 90 C hasta que la sacarosa se
solubiliza. Con el fin de remover impurezas solubles, la sol. se filtra. Durante ambos procesos
(calentamiento y filtracin), 8% del agua se pierde en forma de vapor. La solucin clarificada se
enfra a 25 C y se filtra. La solubilidad a 25 C es de 200 g por 100 mL de agua. Determinar el
peso de cristales recuperados.
PRECIPITACIN
1. En un experimento de precipitacin de la enzima piruvato quinasa con sulfato de amonio a pH 7,
se obtuvieron los siguientes resultados:
a) Determinar los parmetros de la ecuacin de solubilidad A y m.
b) Calcular la solubilidad de la enzima para una concentracin 2.34 M de sulfato de amonio
Solubilidad
Conc. SA
(mg/mL)
(M)
0.079
2.6
0.316
2.5
1.258
2.37
3.162
2.24
2. La cintica de desnaturalizacin de una protena tiene una energa de activacin de 400,000
J/mol. Cuando esta protena se mantiene a 50C por un lapso de 10 min se desnaturaliza en una
50%.
a) Calcular la constante de la velocidad especfica de desnaturalizacin
b) Calcular la temperatura a la cual la protena solo se desnaturaliza el 10% en 10 min.
3. 100 L de una solucin de 10 g/L de seroalbmina bovina y 5 g/L de otra proteina desconocida
sern tratadas con (NH4)2SO4. El objetivo es recuperar 90% de la albumina en el precipitado. Las
constantes de precipitacin para las dos protenas son:
Proteina
A
m
Seroalbmina bovina
21.6
7.65
Desconocida
20.0
7.00
Asumiendo que estas propiedades son independientes de la presencia de la otra protena, Calcule
la concentracin en el precipitado de la otra proteina e indique cual es la pureza de la seroalbumina
en el precipitado
4. Si la solubilidad de la seroalbmina bovina es de 1.2 y 0.26 g/L en (NH 4)2SO4 2.8 y 3.0 M
respectivamente. Cual es la solubilidad de la proteina en (NH 4)2SO4 3.5 M.