1. Qu es un antibitico?

Preparacin medicinal que contiene una cantidad importante de una

sustancia qumica que es producida por un microorganismo, o
artificialmente por sntesis, y que tiene la capacidad de inhibir o destruir
microorganismos en solucin diluda.
4. Menciona pruebas de CC para antibiticos
Potencia microbiana por mtodo de placa-cilindro y mtodo turbidimtrico
7. A quin se le puede realizar esta prueb?
A las sustancias antibiticas
10. Cmo se relaciona la ley de Fick para la prueba por cilindro en placa
Esta prueba se basa en la medicin del dimetro de zonas de inhibicin
de crecimiento bacteriano que rodea a cilindros que contienen distitntas
diluciones del compuesto de prueba, las cuales se colocan sobre la
superficie de un medio nutritivo slido inoculado previamente con un cultivo
de microorganismo adecuado. La inhibicin producida por el compuesto de
ensayo se compara con la producida por concentraciones conocidas de un
estndar de referencia. ley de Fick relaciona matemticamente a los
factores que influyen sobre la velocidad de difusin simple a travs de una
membrana
13.Esquematice y explique el desarrollo de crecimiento microbiolgico
La fase de latencia es un periodo de ajuste fisiolgico y puesta a
punto, cuando la clula sintetiza enzimas nuevas, cofactores e
intermediarios metablicos esenciales, y los depsitos intracelulares de
nutrientes estn estabilizados. Durante la fase de crecimiento
progresivo, el crecimiento celular comienza mientras las velocidades de
las reacciones enzimticas se aproximan a las velocidades del estado
estacionario. Durante la fase de crecimiento exponencial o logartmico,
el crecimiento y la divisin celulares ocurren a sus velocidades mximas.
Esta velocidad est influida por la temperatura, el tipo de fuente de
carbono que se ha usado, las concentraciones limitantes de varios
nutrientes esenciales, los tipos de nutrientes disponibles y la tensin de
oxgeno o el potencial
de oxidorreduccin. Durante la fase de
crecimiento menguante, el crecimiento por ltimo cesa a causa de la
carencia de nutrientes esenciales del medio o de la acumulacin de
sustancias que son inhibitorias o txicas. Durante la fase estacionario,
el nmero de clulas viables ha alcanzado una meseta y el nmero de
microorganismos nuevos producidos es igual al nmero de clulas que
mueren por causa de falta de nutrientes. Durante la fase de muerte
celular, las clulas comienzan a lisarse y a morir.

16.Cmo se realiza el diseo del mtodo 2+2

Bibliografa
1. Remington
2. Koneman E. Koneman Diagnstico microbiolgico, texto y atlas en color
6 ed. Editorial Mdica Panamericana. Buenos Aires, 2008.

3.- Cuales son las diferentes formas farmacuticas que tienen los antibiticos
Oral (grageas, cpsulas, Tableta, suspensin, solucin oral, granulado,
implante, trociscos), parenteral (solucin inyectable endovenosa, e
intramuscular)
http://www.sumedico.com/documentos/54_documento.pdf
6.- Que es potencia microbiolgica
La potencia o actividad de los antibiticas se calcula comparando el grado de
inhibicin de microrganismos sensibles y especficos, producida por
concentraciones conocidas del antibitico analizado y una sustancia de
referencia. Las sustancias de referencia empleadas en los ensayos, son
sustancias cuya actividad se ha definido por un organismo internacional.
En los antibiticos puede haber ligeros cambios qumicos que se traducen en
perdida de actividad antimicrobiana que no pueden demostrarse por mtodos
qumicos, por esta razn, en caso de duda respecto a la actividad de un
antibitico, los mtodos de valoracin microbiolgica prevalecen sobre los
mtodos qumicos.
Sustancias que se pueden cuantificar a travs del ensayo microbiolgico son
los antibiticos y vitaminas.

9.-Describa por medio de un diagrama de flujo como se desarrollan estos

mtodos
TURBIDIMETRCIO
Procedimiento - Inocular un volumen de medio de cultivo preferentemente
conservado a una temperatura de 2 a 8 C, con un volumen determinado de
suspensin original estandarizada del microorganismo apropiado y emplearlo
inmediatamente.
Para preparar las soluciones de la Sustancia de referencia y las soluciones del
antibitico a ensayar en concentraciones que se consideren iguales, emplear los
solventes y las soluciones reguladoras indicadas en la Tabla 1.
En tubos de ensayo estriles e idnticos, transferir volmenes iguales de cada
solucin y agregar el mismo volumen de medio de cultivo inoculado a cada uno de
ellos (como por ej., 1 mI de solucin y 9 ml de medio).
Preparar simultneamente dos tubos control que contengan cada uno 9 ml de medio
de cultivo inoculado y 1 ml de solvente empleado (sin antibitico). Agregar
inmediatamente a uno de ellos 0,5 ml de formaldehdo diluido. Este tubo ser
empleado como blanco y sirve para calibrar el espectrofotmetro. El tubo restante,
constituye el testigo de crecimiento que se emplea para determinar la finalizacin de
la incubacin.
Para asegurar la validez de la valoracin, emplear por lo menos tres concentraciones
diferentes de la Sustancia de referencia y tres concentraciones del antibitico a
ensayar que presumiblemente tengan la misma actividad que las soluciones de la
Sustancia de referencia. Se deben emplear series de concentraciones en progresin
geomtrica para aplicar el mtodo estadstico (ver Clculos).
Ubicar todos los tubos, distribuidos al azar, en cuadrado latino o en bloques
aleatorios, en un bao de agua a 37C (28C para Candicidina). Tomar precauciones
para asegurar una distribucin homognea del calor e idntico tiempo de incubacin,
generalmente de 2 a 4 horas.
Luego de la incubacin, detener la multiplicacin de los microorganismos por adicin
al azar de 0,5 ml de formaldehdo diluido a cada tubo, excepto a los tubos rotulados
como blanco. Medir la turbidez del contenido de cada tubo con un espectrofotmetro
apropiado, a 530 nm. Calcular la actividad empleando los mtodo estadsticos
apropiados (ver Clculos).
En cada ensayo, emplear el nmero de rplicas por concentracin de antibitico (no
menor de cuatro tubos) para asegurar la precisin estadstica.
[NOTA: el procedimiento para ambos mtodos, debe realizarse en condiciones
aspticas].

DIFUSION EN AGAR
Procedimiento - De acuerdo con el antibitico a valorar, fundir una cantidad suficiente
de medio de cultivo estril segn se indica en la Tabla 3, enfriar a temperatura
apropiada (por ej., entre 45 y 50C para las formas vegetativas), inocular el medio y
agitar por rotacin hasta lograr una suspensin homognea.
Emplear placas de Petri o bandejas rectangulares de fondo plano y, trabajando sobre
una superficie plana y horizontal, verter en las placas un volumen determinado de
medio inoculado para formar una capa uniforme de 2 a 5 mm de espesor.
Alternativamente, el medio puede estar formado por dos capas, aunque slo se
inocule la superior.
Para algunos microorganismos de ensayo, el procedimiento puede mejorarse si las
placas inoculadas se dejan secar durante 30 minutos antes de ser empleadas o si se
refrigeran a 4C durante varias horas.
Los reservorios empleados generalmente son cilindros estriles de porcelana, de
acero inoxidable o de cualquier otro material apropiado, discos estriles de papel o
pocillos excavados en el agar. El volumen que se carga en los reservorios debe ser
uniforme y con una tolerancia mxima de 5%.
Emplear los solventes y las soluciones reguladoras indicadas en la Tabla 1 para
preparar las soluciones de la Sustancia de referencia y las del antibitico a ensayar.
Para asegurar la validez de la valoracin, emplear por lo menos tres concentraciones
diferentes de la Sustancia de referencia y tres concentraciones del antibitico a
ensayar que presumiblemente tengan la misma actividadque las soluciones de la
Sustancia de referencia. Se deben emplear series de concentraciones en progresin
geomtrica para aplicar el mtodo estadstico (ver Clculos).
Distribuir las diluciones en cada placa de Petri en cada placa rectangular, segn un
plan estadsticamente apropiado. En el caso de placas pequeas que no pueden
contener ms de seis diluciones, alternar las diluciones del antibitico y las diluciones
de la Sustancia de referencia, con el fin de evitar cualquier interaccin entre las
diluciones de mayor concentracin.
Las placas de Petri deben incubarse sin invertirla temperatura indicada 0,5C
durante 18 horas aproximadamente. Es aconsejable un perodo de predifusin antes
de la incubacin, que puede oscilar de 30 minutos a 4 horas, a temperatura ambiente
o prxima a 4C, segn el caso, esto tiene por finalidad reducir los efectos de
desfasaje de tiempo entre la aplicacin de las diferentes soluciones sobre las placas y
as mejorar la recta de regresin o bien obtener halos mayores y ms ntidos.
Empleando un instrumento de medicin apropiado, medir el dimetro de cada halo
con una precisin de hasta la dcima de mm. Calcular la actividad empleando
mtodos estadsticos apropiados (ver Clculos). Emplear el suficiente nmero de
replicas por concentracin de antibitico en cada ensayo (no menos de cuatro placas)
para asegurar la precisin estadstica.

http://infoleg.mecon.gov.ar/infolegInternet/anexos/85000-89999/86181/dto2022003-84.htm
12.-Cuales son los factores que afectan al halo de inhibicin
la carga del antibitico en los discos, la difusin del antibitico en el medio de
cultivo, el tamao del inculo bacteriano, la composicin y grosor del medio de
cultivo, la velocidad del crecimiento bacteriano y el tiempo de incubacin.
http://www.unavarra.es/genmic/microclinica/practicas.pdf
15.- Cual es la diferencia de sanitizar y esterilizar
Un desinfectante es un qumico que destruye completamente todos los organismos
listados en su etiqueta. Los organismos que matan son bacterias que causan
enfermedades y patgenos, y podran o podran no matar virus y hongos. Desde un
punto de vista legal (segn la EPA), los desinfectantes deben reducir el nivel de
bacterias patgenas en un 99.999 por ciento durante un lapso de tiempo superior a 5
minutos pero que no exceda a 10 minutos.
Un sanitizante es un qumico que reduce el nmero de microorganismos a un nivel
seguro. No necesita eliminar el 100 por ciento de todos los organismos para ser
efectivo. Los sanitizantes no matan virus y hongos, en una situacin de preparacin de
alimentos, el sanitizante debe reducir la cuenta de bacterias en un 99.999 por ciento.
Los sanitizantes requieren matar el 99.999 por ciento de los organismos presentes en
30 segundos.

18.-Como se disea una curva dosis respuesta

Si se obtiene una respuesta de una magnitud definida para cada dosis, dentro de un rango de dosis,
se dice que la respuesta es "gradual". Es decir que a diferentes dosis, D1, D2,...Di, se observan los
efectos, E1, E2,...Ei, que varan en forma continua y tienen un valor nico para cada dosis (dentro de
la variabilidad normal que siempre se observa cuando se hacen bioensayos).
La curva dosis-efecto se construye graficando en las ordenadas los Efectos (E) causados en el
organismo expuesto a una substancia qumica y en las absisas las Dosis (D) a las que fue expuesto.
Si la experimentacin se hizo con el tejido blanco aislado expuesto directamente a la substancia, la
respuesta observada normalmente es una funcin hiperblica de la dosis de una forma similar a la
ecuacin Michaelis-Menten para expresar la velocidad inicial de una reaccin enzimtica. La curva
pasa por el origen del sistema de coordenadas cartesianas y la pendiente mxima se presenta en el
origen. La pendiente permanece aproximadamente constante durante un rango amplio de la dosis
(cintica de primer orden), despus la pendiente disminuye con la dosis hasta que se vuelve cero
(cintica de orden cero) y la respuesta adquiere su valor mximo. A este valor mximo se le
denomina efecto mximo (Emax) y es una medida de la eficacia del txico.
En algunas ocasiones, la relacin dosis-efecto no es tan definida y dentro de una poblacin se
observa una distribucin de respuestas para cada dosis. En este caso el efecto que se mide no es la

magnitud, se mide el porcentaje de la poblacin en estudio que presenta una determinada respuesta
para cada dosis suministrada. Este tipo de efecto se le denomina cuantal. En estos casos se
acostumbra graficar, en la ordenada, el por ciento de la poblacin que presenta un determinado
valor de la respuesta y en la absisa, el logaritmo de la dosis suministrada. Esta curva tiene forma
sigmoidal.

Figura 2.5.1.A.- Curva Dosis-Respuesta.

0 a 1.-Regin NOAEL; 2.-LOAEL; 3.-Regin Lineal; y 4.-Respuesta Mxima.
La curva pasa por el origen (cuando la dosis es cero, la respuesta es cero) y a valores muy bajos de la
dosis, la curva es horizontal con un valor del efecto igual a cero (la curva va sobre el eje de las dosis).
La respuesta empieza a tener un valor mayor que cero cuando la dosis llega al nivel lmite. De all
en adelante la pendiente de la curva crece con la dosis, hasta que se llega a una pendiente mxima.
Esta pendiente se mantiene por un amplio rango de dosis en el que la respuesta es directamente
proporcional a la dosis (lnea recta). A dosis mayores la pendiente empieza a decrecer hasta que la
curva se vuelve asinttica a un valor mximo de la respuesta (Emax).

2. Qu es un antibitico?
Preparacin medicinal que contiene una cantidad importante de una
sustancia qumica que es producida por un microorganismo, o
artificialmente por sntesis, y que tiene la capacidad de inhibir o destruir
microorganismos en solucin diluda.
4. Menciona pruebas de CC para antibiticos
Potencia microbiana por mtodo de placa-cilindro y mtodo turbidimtrico
8. A quin se le puede realizar esta prueb?
A las sustancias antibiticas
10. Cmo se relaciona la ley de Fick para la prueba por cilindro en placa

Esta prueba se basa en la medicin del dimetro de zonas de inhibicin

de crecimiento bacteriano que rodea a cilindros que contienen distitntas
diluciones del compuesto de prueba, las cuales se colocan sobre la
superficie de un medio nutritivo slido inoculado previamente con un cultivo
de microorganismo adecuado. La inhibicin producida por el compuesto de
ensayo se compara con la producida por concentraciones conocidas de un
estndar de referencia. ley de Fick relaciona matemticamente a los
factores que influyen sobre la velocidad de difusin simple a travs de una
membrana
14.Esquematice y explique el desarrollo de crecimiento microbiolgico
La fase de latencia es un periodo de ajuste fisiolgico y puesta a
punto, cuando la clula sintetiza enzimas nuevas, cofactores e
intermediarios metablicos esenciales, y los depsitos intracelulares de
nutrientes estn estabilizados. Durante la fase de crecimiento
progresivo, el crecimiento celular comienza mientras las velocidades de
las reacciones enzimticas se aproximan a las velocidades del estado
estacionario. Durante la fase de crecimiento exponencial o logartmico,
el crecimiento y la divisin celulares ocurren a sus velocidades mximas.
Esta velocidad est influida por la temperatura, el tipo de fuente de
carbono que se ha usado, las concentraciones limitantes de varios
nutrientes esenciales, los tipos de nutrientes disponibles y la tensin de
oxgeno o el potencial
de oxidorreduccin. Durante la fase de
crecimiento menguante, el crecimiento por ltimo cesa a causa de la
carencia de nutrientes esenciales del medio o de la acumulacin de
sustancias que son inhibitorias o txicas. Durante la fase estacionario,
el nmero de clulas viables ha alcanzado una meseta y el nmero de
microorganismos nuevos producidos es igual al nmero de clulas que
mueren por causa de falta de nutrientes. Durante la fase de muerte
celular, las clulas comienzan a lisarse y a morir.

17.Cmo se realiza el diseo del mtodo 2+2

Bibliografa
3. Remington
4. Koneman E. Koneman Diagnstico microbiolgico, texto y atlas en color
6 ed. Editorial Mdica Panamericana. Buenos Aires, 2008.

2.- utilidad de los anitbioticos:

Los antibiticos atacan especficamente a las bacterias, interfiriendo algn
paso del metabolismo.

5.-que es la potencia de un medicamento.

La potencia o actividad de un antbiotico se obtiene comparando el grado de
inhibicin de microorganismos especficos, producidos por concentraciones
conocidos de un antibitico analizado y una sustancia de referencia.

8.- mtodos para potencia microbiolgica

Metodo turbidimetrico: se basa en medir espectrofotomtricamente el
crecimiento del micrrganismo de prueba en un medio de cultivo liquido que

permite su rapdo crecimiento de forma proporcional a la concentracin

adicionada
Metod de cilindro en placa o difucion en agar: se basa en la difusin del
antibitico desde un cilindro vertical, a travs de una superficie con agar
inoculado con el microrganismo de prueba. La difusin origina zonas de
inhibicin del microrganismo cuyo tamao o diametr esta en relacin con la
concentracin de antibiotico

11.-q es halo de inhibicin

Es la zona alrededor de un disco de antibitico en un antibiograma en el que no
se produce crecimiento bacteriano en una placa de agar inoculada con la
bacteria. Es una medida de la potencia del antibitico frente a la bacteria
14.-metodos y condiciones de estrerilizacion y sanitizacion usados en el
laboratorio
Calor hmedo. Utilizando una autoclave a 121.5 C y una presin de 15 lb/in2, por un
periodo de entre 15 y 30 minutos.
Calor seco de flama directa: cuando se esterilizan las asas de inoculacin en la flama de un
mechero, se debe calentar el alambre hasta el rojo vivo.
Sanitizacion. Utilizacin de alcohol al 70% y lmpara de luz UV e cabinas de flujo lminar.

17.-como se disea el mtodo 3+3