SEALIZACION Y

COMUNICACIN CELULAR

Biologa Celular
Diana Carolina Clavijo B. MSc. PhD(c)

Introduccin
A que se refiere la
Comunicacin Celular?

COMUNICACIN MEDIADA POR

SEALES QUMICAS
(LIGANDOS) PROVOCANDO EN LAS

DIANA UNA
RESPUESTA ESPECFICA
CLULAS

Introduccin

Introduccin
Que procesos celulares pueden ser mediados
Por Sealizacin?
IMPLICADOS EN LA REGULACIN DEL
METABOLISMO
PROLIFERACIN CELULAR
DIFERENCIACIN
APOPTOSIS
CICLO CELULAR
FUNCIONES ESPECFICAS:
SINAPSIS
EXITACIN - CONTRACCIN

Tipos de Sealizacin clula-clula

Tejido!
Molec. Liberadas por una
clula acta localmente
sobre clulas vecinas

Organo!
Algunas clulas responde frente a
seales o a una molcula seal que
producen ellas mismas.

Molec Sealizadora: Hormonas!

Se transportan a travs del sistema
circulatorio y actan sobre clulas
alejadas

La comunicacin intracelular puede ser: !

Antergrada o Retrgrada

Los mecanismos de coordinacin

desde los
organelos al ncleo
incluyen seales

(sealizacin retrgrada) y desde

el ncleo a los organelos

(sealizacin antergrada). !

!
La sealizacin antergrada
coordina la expresin de genes en los
organelos en respuesta a estmulos
endgenos o ambientales detectados
por el ncleo, mientras que la

sealizacin retrgrada
transmite seales originadas en los
organelos para regular la expresin
de genes nucleares

Pasos para la Sealizacin o

Comunicacin Celular
Sntesis o Liberacin de la
molcula mensajera!
!

Transporte de la molcula
mensajera a la clula Diana!
!

Interaccin ReceptorLigando (molcula mensajera)!

!

Respuesta Especfica!
!

Eliminacin de la Seal

Tipos de Receptores
de Membrana

De Membrana
Plasmtica

Grandes glucoprotenas transmembrana

Reconocen sustancias exgenas o endgenas

Citoplasmticos

Nucleares
ESPECIFICIDAD: Discriminar seales

!
SATURABLES: Nmero de receptores es finito y cuantificable
!
ALTA AFINIDAD: Formacin Complejo L-R

Tipos de Receptores
IONOTRPICOS: Se activan
cuando un mensajero
interacta con l, cambia la
conformacin del receptor y
abre canales inicos: R.
Acetilcolina - Nicotinicos NMDA

METABOTRPICOS: Se
activan cuando un mensajero
interacta causando una
cascada de Rxs que generan
Segundos mensajeros ...
Fosforilacin-defosforilacin

Tipos de Receptores

TIPOS DE
RECEPTORES:
MECANISMO

SIN ACTIVIDAD EFECTORA

INTRINSECA:
ACOPLADOS A PROTENAS
G
CON ACTIVIDAD EFECTORA
INTRINSECA:
GRF (TIR QUINASA)
SER/THR QUINASA
TIR FOSFATASA

Protenas o
Pptidos
Factores de !
Crecimiento

Hormonas Esteroideas
!

xido Ntrico

Tipos Molculas !
Sealizadoras!
(Ligandos)

Monxido de carbono
!

Neurotransmisores
!

Hormonas Peptdicas
!

Sustancias
Tipo Esterol
Pequeas !
Molculas

Factores de Crecimiento
!

Eicosanoides
!

Hormonas Vegetales

Hormonas Esteroideas
Son sintetizadas a partir de colesterol
- Testosterona, estrgeno, progesterona
(esteroides sexuales: gnadas)
- Corticosteroides
glucocorticoides (estimulan produccin
de Glucosa)
mineralcorticoides (rion: equilibrio
salino e hdrico)

Hormona Tiroidea

(Sintetizada a partir
de tirosina, es importante en el desarrollo y
regulacin del metabolismo),

D3

Vitamina

(Regula metabolismo del Ca y

crecimiento oseo) y cido retinoico

( S i n t e t i z a d a a p a r t i r d e Vi t a m i n a - A ,
importante en desarrollo de vertebrados)

No son hormonas esteroides pero comparten

mecanismos de accin

Hormonas Esteroideas
!

Presentan caracter hidrofbico

(penentran a la clula por difusin a
travs de la membrana)
Se unen a receptores intracelulares
Superfamilia Receptores
Esteroides

Receptores Esteroides:
Son Factores de Transcripcin con
dominios similares para la unin al
ligando (DNA) para su activacin
transcripcional.
La unin al ligando regula su funcin
como activadores o represores
gnicos (reguladores de la expresin
gnica)

Oxido Ntrico y Monxido de carbono

Molcula sealizadora paracrina
Fundamental en sistemas nervioso,

inmune y circulatorio.
Difunde a travs de la membrana.
Altera la actividad de enzimas DIANA
intracelulares.
Sintetizado por la Oxido Nitrico Sintasa.
Efectos locales por su inestabilidad.
Estimula la Gunilato ciclasa.
Asociado a la produccin de GMPc.

Molcula sealizadora del sistema nervioso

Est directamente relacionado con el NO.
Actua tanto como neurotransmisor y como
mediador de la vasodilatacin.
Estimula la Guanilato ciclasas que parece
ser su principal blanco fisiolgico.

Neurotransmisores

Seales entre las neuronas o desde las neuronas

Son Molculas Pequeas
Difunde a travs del espacio sinptico
Se unen a receptores de superficie
Son hidrfilicas (no difunden por la membrana)
Muchos de sus receptores son canales inicos
regulados por ligando
Otros receptores de neurotransmisores estn
acoplados a Protenas-G
Las protena-G actan regulando indirectamente
la actividad de los canales inicos

Neurotransmisor!
Y Hormona!
Producida por la glndula !
Suprarrenal para activar!
La hidrlisis de!
glucgeno

Hormonas Peptdicas y !
Factores de Crecimiento
No difunden por membrana!
Unin a receptores de superficie!
Son fuente de patologas como cancer

Producidas por la glndula!

Pituitaria
Neurotransmisores y!
Neurohormonas
Controlan el crecimiento
y diferenciacin de clulas
animales
Pertenece a la familia de polipptidos Neurotrofinas
Durante desarrollo embrionario y organismos adultos
Cicatrizacin de heridas
Citoquinas
Fcatores de Crecimiento anclados a la membrana:
Permanencen asociados a la membrana, no son
secretados. Actan en las interacciones clula-clula

Los pptidos en animales son

las molculas sealizadoras
ms diversas: Hormonas
Peptdicas, neuropptidos y
Factores de Crecimiento

Eicosanoides: !

Lpidos como molculas Sealizadoras

Ciclooxigenasa

Prostaglandinas
Leucotrienos
Troboxanos
Prostaciclinas

Actan mediante la unin a receptores de superficie!

Se hidrolizan facilmente!
Actan localmente en vas paracrinas y autocrinas!
Estimulan agregacin plaquetaria, inflamacin y
contraccion del msculo liso!
Son sintetizados a partir del cido araquidnico
20:4c 5,8,11,14

Blanco de la
aspirina y otros
antinflamatorios

Etileno

Hormonas Vegetales

Giberelinas
cido Abcsico

Auxinas

Citoquininas

Inducir la elongacin de la clula

vegetal mediante debilitamiento de
la pared celular. Divisin y
diferenciacin celular!

Inducir elongacin del tallo!

Maduracin del fruto!

Divisin celular!

Inhibicin de la germinacin

 Receptores Asociados a
Protena G
!

Receptores de!
Superficie

Receptores ProtenaTirosina Quinasa

!

Receptores de Citoquinas y
Protena-Tirosina no
receptoras
!

Receptores Asociados a
otras Actividades
Enzimticas

Receptores Acoplados a
Protena G

Receptores de
superficie celular
Protenas integrales
de membrana
7 hlices alfa
transmembranales
Asas cortas de unin
entre dominios
transmembranales
Sitio extracelular
interaccin con el
ligando

Receptores Acoplados a
Protena G
!

Interaccin con protena

G trimrica
Protenas con union a
GTP
Receptores de
neuropeptidos,
neurotransmisores y
hormonas peptdicas

Receptores Acoplados a Protena G !

y Segundos Mensajeros

Receptor
transmembranal
Seal protica
Stio de unin a
protena G
Generacin de
segundos
mensajeros

Receptor

Efector

Transductor:!
Protenas G
Segundos!
mensajeros

Mecanismo de Accin

Interaccin del ligando con el

receptor (dominio extracelular)

Induccin cambio

conformacional (dominio
citoslico union P-G unida
membrana interna)

Protena G trimerica unida a GDP

Liberacin del GDP (subunidad

alfa)

Activacin de protena G por el

GTP

Protena G activa, interacta

con efectores especficos
Transduccin de seales
(Segundos Mensajeros)
Respuesta celular

Activacin o inhibicin enzimtica a travs de segundos mensajeros

Aumento selectivo en la captacin de metabolitos: Canales inicos

Estimulacin en la sntesis de determinadas protenas por activacin

de genes: Activacn de la Transcripcin

Mecanismo de Accin

Mecanismo !
de Accin

Activacin o inhibicin

Estimulacin en la

Aumento selectivo en

enzimtica a travs de
segundos mensajeros

sntesis de determinadas
protenas por activacin
de genes: Transcripcin
la captacin de
metabolitos: Canales
inicos

Disociacin De Las Protenas G Ante El Estmulo

Reposo

Activa

Protena G

RECEPTOR

Adenilato Ciclasa

TRANSDUCTOR

EFECTOR

SEGUNDOS
MENSAJEROS

Segundos Mensajeros

AMPc
GMPc

Molculas producidas dentro de la clula como resultado

de la interaccin de un primer mensajero con un
receptor expresado en la membrana plasmtica
!

Activan procesos de transduccin de seales que provocan

respuestas celulares: CASCADAS DE

SEALIZACIN

Ca++

InsP3

DAG

AMPc
Efector: ADENILILCICLASA
CATALIZA LA CONVERSIN
DE ATP EN AMPc
PKA (Protein Kinase A)
SUSTRATOS ESPECIFICOS

GMPc
Efector:GUANILATO CICLASA
CATALIZA LA CONVERSIN
DE GTP EN GMPc
PKG (Protein Kinase G)
SUSTRATOS ESPECIFICOS

Receptores !
Protena-Tirosina Quinasa

Unin al ligando activa

dominio quinasa citoslico,
fosforilando al propio receptor
y a las protenas blanco
intracelulares

Receptores de superficie celular

acoplados a enzimas

intracelulares
Fosforilan las protenas sustrato

en los residuos de tirosina

Receptores para la mayora de

factores de crecimiento

polipeptdicos
Control del crecimiento y
diferenciacin de clulas animales
Aproximadamente el genoma
codifica para 58 receptores de este
tipo

Dominio N-terminal extracelular

de unin a ligando

1 -helice transmembranal

Dominio C-terminal

citoslico
con actividad protena-tirosina
quinasa

Un Polipptido

Dimeros

Mecanismo de Accin

Dimerizacin del receptor

Fosforilacin
Cruzada

Asociacin molculas seal

intracelulares con los receptores
se lleva a cabo por un dominio de
la protena que se une a peptidos
con fosfotirosina

Dominios SH2

- PTB

inducida por ligando

Conduce a la autofosforilacin del
receptor. Fosforilacin Cruzada
Funciones de la autofosforilacin:
Fosforilacin de residuos de
tirosina del sitio cataltico, es un
mecanismo de regulacin que
aumenta la actividad quinasa del
receptor. Fosforilacin del resto de
tirosinas supone sitios de unin
para otras protenas que
transmiten la seal al interior de la
clula.

Receptores de Citoquinas y!
Protena-Tirosina Quinasas no Receptores

Receptores que no tienen actividad tirosin-quinasa, actan estimulando a tirosinquinasas a las que no estn unidos
Incluyen receptores de la mayora de citoquinas y de algunas hormonas polipeptdicas
Dominio N-terminal extracelular de unin a ligando
1 -helice transmembranal
Dominio C-terminal citoslico SIN actividad preotena-tirosina quinasa
Actan en asociacin con Proteinas-Tirosina Quinasa NO receptoras, que se activan por la
unin del ligando al receptor.

Mecanismo de Accin
Dimerizacin del receptor inducida por ligando

Conduce a la autofosforilacin del receptor. Fosforilacin

Cruzada

Las quinasas activadas fosforilan al receptor generando sitios

de unin fosfotirosina para molculas seal intracelulares con
dominios SH2
Las protenas asociadas con receptores de citoquinas son de la
familia Quinasas Janus (JACK)
JACK juega un papel importante en el acoplamiento de estos
receptores a la fosforilacin en tirosinas de blancos intracelulares
Protenas-tirosina quinasa no receptoras adicionales pertenecen a

la familia Src

Src juegan un papele importante en la sealizacin

descencadenada por los receptores protena-tirosin quinasa
desde los receptores de antigeno en los linfocitos B y T, y desde
las integrinas en los puntos de adhesin celular a la matriz
extracelular

Fosforilacin
Cruzada

Receptores Asociados a otras Actividades

Protena-tirosina Fosfatasas
Enzimticas
Guanilato Ciclasa
Protenas-serina/treonina Quinasa

Eliminan grupos fosfato de residuos de fosfotirosinas (Opuesto a tirosin-quinasas)

En muchos casos actan como reguladores negativos de las VSC ya que interrumpen las seales
activadas a partir de las fosforilacin de las protenas-tirosina
Algunos son Receptores de Superficie cuya actividad anzimtica es un mecanismo de regulacin
positiva en la Sealizacin Celular (e.j. CD45)

Fosforilan residuos de serina o treonina de sus protenas sustrato (e.j. TGF-b)

La unin del ligando al receptor provoca la asociacin de 2 cadenas polipeptdicas distintas, dando
lugar a heterodmeros en los que los receptores con actividad quinasa se fosforilan mutuamente por
fosforilacin cruzada.
Los receptores activados fosforilan miembros de de una familia de factores de transcripcin
(SMADs) los cuales se translocan al ncleo y activan la expresin de genes en las clulas blanco

Algunos ligandos peptdicos se unen a receptores cuyos dominios citoslicos

tienen actividad Guanilato Ciclasa (formacin cGMP)
Presentan un dominio extracelular de unin a ligando, una -helice transmembranal y un dominio
citoslico con actividad cataltica

Vas de Transduccin!
Intracelular de Seales
Receptores de Superficie!
Activan Enzimas blanco
intracelulares!
Unidas a receptores o asociadas a!
Protenas G!
!
Elementos que transmiten la seal!
Dentro de la clula, propagando y !
Amplificando la seal iniciada por la!
Unin del ligando al receptor.!
!
Cascada de reaccines transmiten
la seal!
!
Los blancos de estas vas de
sealizacion!
Por lo general son Factores de
Transcripcin

Molculas
sealizadoras
Membrana
plasmtica

Receptores de
superficie
Protenas G
Enzimas

cAMP

Intermediarios
intracelulares

Ca2+

Protena blanco

Va del cAMP

Va del IP3

 Va del AMPc:
Segundos mensajeros y
Fosforilacin de Protenas
!

Vas de Transduccin!
Intracelular de Seales

Va del GMPc
!

Va de Fosfolpidos y
Ca2+
!

Ras, Raf y Va de las

MAP Quinasas
!

Va JACK/STAT

!
EXTERIOR CELULAR

MEMBRANA

INTERIOR
MEMBRANA

MECANISMOS DE ACCIN
Oxido
ntrico

Seales
hormonales

Receptores
1

2
G

G
Otros
efectos

Protena G
AMP cclico

GMP cclico

4
G
Inositol
trifosfato

Ca2+

Segundos
mensajeros

Diacilglicerol

Actividad tirosina
quinasa protica

Sustratos
protecos
Protena
quinasas

PK-A

PK-G

Sustratos proticos

Calmodulina

Quinasas
multifuncionales

Quinasas
dedicadas

PK-C

Ser/Thr quinasas proticas

Sustratos proticos

Otras
fosfolipasas
Sustratos proticos

Sustratos proticos:
actividad regulada
mediante fosforilacin

Va del AMPc: Segundos mensajeros y Fosforilacin de Protenas

Accin de la epinefrina es mediada por un aumento en la concentracin de AMPc

Cascada del AMPc

Proten Quinasa -A
disociada bajo
la activacin por el
AMPc

Subunidad reguladora

Subunidad cataltica
Enzimticamente activa

Como sealiza el AMPc la degradacin del glucgeno?

Efecto del glucagon sobre la glucogenlisis
Glucagon
enzima

enzima

enzima

GTP

GDP
GTP

GDP

cAMP

Proteina quinasa
activa

Fosforilasa quinasa
activa

Glucosa-1P

Glucgeno
Glucgeno Sintetasa

Glucosa-6P

Glucosa

Proteina quinasa
inactiva

Fosforilasa quinasa
inactiva

Glucgeno fosforilasa
inactiva

Glucgeno fosforilasa
activa

ATP

PKA

Cascada del AMPc

Incremento concentracin de AMPc!
Y la activacin de PKA bloquea la glucogenognesis

Cascada del AMPc

Incremento concentracin de AMPc!

Activa la transcripcin de genes especficos que !
contienen una secuencia reguladora!
Elemento de Respuesta a AMPc CREB

Seal desde el citoplasma

Control de la proliferacin,!
La supervivencia y diferenciacin celular

Exteri

Citos

Ncle

Adenyly
CBP/

Hasta el ncleo

Receptor
acoplado
a
Mquina basal

Factor de Transcripcin!
CREB
Activacin de genes!
Inducidos por AMPc

Las Fosfatasas Revierten Las Fosforilaciones

De Las Protenas Rpidamente

Protein quinasa A

Inactiva

Activa

Protena fosfatasa 1

Algunas son Receptores de

membrana

Otras son enzimas

citoslicas que actan
eliminando grupos fosfato!
De restos fosforilados de
Tirosina o Serina/Treonina
de sus protenas sustrato

Funcin es finalizar la respuesta iniciada !

Por la activacin de las protein-quinasas!
Mediadas por receptor

Va del GMPc
Accin de la epinefrina es mediada
por un aumento en la
concentracin de AMPc

Sntesis

Degradacin

Va del GMPc

Va de Fosfolpidos y

2+
Ca

Va de sealizacin intracelular ms generalizada

se basa en la utilizacin de segundos mensajeros
derivados del PIP2

Activa vas Sealizacin

Protein-quinasa C

Componente !
Minoritario!
Mem. Plasmtica

Varias hormonas y
Factores de Crecimiento
inducen la hidrlisis de la
PLC

Activa vas Sealizacin

Movilizacin de Ca2+

Hidrlisis PIP2 y DAG

Queda Asociado
a la Membrana

Es activada posteriormente a los

receptores acoplados a protenas-G y a
las Protein-Tirosin quinasas

La isoforma PLC- de la PLC es activada

por Protenas-G
La isoforma PLC- que contiene
dominios SH2 responsables de su
asociacin con receptores ProteinTirosina quinasa activados. Localizando
a la PLC- cerca de la membrana y
fosforilando sus tirosinas, lo que
aumenta su actividad cataltica

Es liberado al
citosol

Conduciendo a la fosforilacin de
factores de transcripcin,
variaciones en la expresin gnica y
estimulacin de la proliferacin
celular
Activa proteinas-Serin/treonin
quinasas (de la familia de la PK-C)

Inducen el
desarrollo de
tumores en
animales

Ej. Papel de la PK-C lo proporciona

la accin de los steres de forbol
que actan como anlogos del
DAG

As la PK-C activa otros blancos

intracelulares en los que se incluye
Una cascada = Va de las MAP
quinasas

Hidrlisis PIP2 e IP3

Receptores de IP3 son

canales de Ca2+ regulados
por ligando

Ca2+
CITOSOL

RETCULO
ENDOPLASMTICO
Reservorio
Intracelualr de Ca2+

Aumento de niveles intracelulares de Ca2+

afectando la actividad de protenas como las
quinasas y fosfatasas

Ca2+

Efectos del Ca2+: Mediados

por Calmodulina

148 aa

Calmodulina se activa por unin a Ca2+

cuando la concentracin citoslica de ste
aumenta (0,5M)

Efectos del Ca2+: Mediados

por Calmodulina

PIP2 y Fosfatidilinositido (PI) 3-quinasa:!

Otra va de segundos mensajeros

Ras, Raf y Va MAP Quinasas

Protena de Unin a
GTP

MAP Quinasa/ERK
quinasa

Especificidad doble, activa ERK

fosforilando residuos de treonina y
tirosina separados por un aa

II

III

Protena Serina/
Treonina Quinasa

Quinasas Reguladas por

Seales Extracelulares

MAP quinasas mejor !

caracterizadas en mamiferos

Regulacin Protenas Ras

Activacin Protenas Ras

Complejo Activo!
Ras-GTP

Autofosforilacin!
Receptores proteintirosinquinasas

Factor de
intercambio de
nucletidos de
Guanina

Induccin
intercambio de
nucletidos de
Guanina

Interacta con varias

protenas efectoras
como Raf

Raf pasa de estar en el citosol a la

membrana donde se activa por
fosforilacin por las protein-tirosin y
protein-serin/treonin quinasas

Activacin de ERK

Funcin de ERK

Factor de Respuesta al
Suero

Factores de
Transcripcin

Genes Tempranos
Inmediatos

Secuencia Reguladora!
Respuesta al Suero

Va JACK / STAT
Protena-TirosinQuinasa no receptoras

Transductores de
Seal y Activadores de
transcripcin
Dominios SH2!
Localizadas en el
citoplasma

EJEMPLOS DE PROCESOS
FISIOLGICOS
ESTMULO

RECEPTOR

EFECTOR

RESPUESTA

EPINEFRINA

-ADRENRGICO

ADENILIL-CICLASA

GLUCGENOLISIS

SEROTONINA

R. SEROTONINA

ADENILIL-CICLASA

SENSIBILIZACIN Y
APRENDIZAJE

LUZ

RODOPSINA

FOSFODIESTERASA
GMPc

EXCITACIN VISUAL

ACETILCOLINA

MUSCARNICO

CANAL DE POTASIO

NEUROMUSCULAR


Sistemas de Sealizacin
Bacteriana
1. OCSs
2. TCSs
3. ThCSs
Segundos Mensajeros!
1. AMPc
2. di-GMPc!
3. ppGpp / pppGpp!
4. Molec. Pequeas

Algunos fenmenos
regulados por
sealizacin bacteriana!
1. Q.S.!
2. Quimiotaxis!
3. PTSs y regulacion
Metabolica de azicares

Otros!
1. Operones y Regulacin
metablica!
2. Sistemas de Secrecin

Sistemas de
Sealizacin Bacteriana


Sistemas de Sealizacin Bacteriana


Sistemas de Un componente OCSs

Una nica protena que contiene un dominio de entrada (sensor N- terminal) y uno de salida (regulador de
respuesta C-terminal) !
Es un receptor interno citoslico (tiene un dominio HTH de unin a DNA)!
No tiene dominios histidin quinasa en el receptor!
Entradas: Molculas pequeas!
Desventaja: detectan estmulos casi exclusivamente en el citosol (luz, gases y molec pequeas) !
Casi en un 80% actan en la regulacin de la expresin gnica por medio de los dominios de unin a DNA (HTH)!
Evolutivamente son los precursores de los sistemas de dos componentes, al parecer fueron los primeros!
Representan la estrategia de sealizacin ms abundante en bacterias patgenas y de vida libre!
Su modo intracelular o citosolico ha servido para caracterizar los procariotas !
Otra desventaja es no incluye componentes de la membrana dentro de las funciones de sealizacin


Sistemas de Dos componente TCSs
! Compuestos por dos protenas: Protena Sensora quinasa (seal
de deteccin de histidin quinasa se autofosforila) y una Protena
Transductora ( regulador de la respuesta) que por lo general actua
como un factor de transcripcin!

! La Transferencia de grupos fosforilo media la respuesta, siendo el

resultado ms comn la transcripcin de un numero de genes
asociados especficamente con las seales externas!

! El dominio sensor N-terminal (por lo general anclado en la

membrana o transmembranal) detecta un cambio ambiental y
autofosforila un residuo de histidina conservado en el dominio Cterminal llamado dominio transmisor. De esta manera se activa la
primera protena o protena sensora!

! La protena sensora activada fosforila un residuo de aspartato

conservado en el dominio receptor de la protena reguladora de la
respuesta (en el N-terminal), la cual por medio de su dominio Cterminal o dominio de salida se une a regin especifica del promotor
causando la transcripcin (mejorndola o reprimiendola) por medio
del dominio de unin a DNA HTH

! Este es uno de los sistemas de transduccin de seales en bacterias ms importantes ya que estas necesitan
adaptarse rpidamente a cambios en su entorno, como disponibilidad de nutrientes .!

!
! Median la respuesta a una alta variedad de seales medioambientales (N2, O2, acumulacin de PO$, C, Fe, Cu,
pH, osmolaridad, luzenerga metablica, virulencia, qurum, esporulacin, swarming formacin de biofilms,
diferenciacin celular)!

!
! Estos sitemas se encuentran no solo en procariotas y en archeas, sino tambin en en eucariotas como plantas,
hongos, levaduras y algunos animales!

!
! El numero de TCSs en los organismos varia: Streptomyces coelicolor has 53 TCSs, cyanobacterium Synechocystis
has 38, and Chlamidia has only one TCS!

!
!

One of the highest figures corresponds to Pseudomonas aeruginosa, with 63 histidine kinase and 64 response

Sistemas de Dos Componentes


Sistemas de Tres componente ThCSs
Poseen un receptor independiente y adicional a los dos
contemplados en la TCS, el cual se emplea para activar la histidin
quinasa.!

!
! Es un sistema ms complejo pero al mismo tiempo es ms
funcional. Por ejemplo E. Coli y otras bacterias inicialmente perciben
algunos estmulos externos de iones como una variacin de la
concentracin de otros compuestos y lo hacen por medio de estos
receptores independientes.!

! Ej: la limitacin de N2 (sistemaNR) externo se percibe dentro del

sistema como una disminucin en la concentracin interna de
glutamina por la activacin del receptor PII, que desempea un papel
importante en la regulacin de la asimilacin del N2 en respuesta a las
seales intracelulares de N2 y estados del C.!

! El trmino de sistemas ThCS apareci hace poco y ha sido

utilizado por pocos autores. Esta categora se aplica sobre la va NR.!

! En la vas ThCs, por modulacin de la transduccin de la seal a

nivel de receptor, se pueden integrar mltiples seales de entradas, sin
la necesidad de una fosforilacin cruzada entre los sensores y
reguladores

! Para muchos microorganismos que contienen sensores quinasa hurfanos este mecanismo de ThCS
proporciona un medio sencillo para controlar la expresin de genes que responden a mltiples seales!

! Los receptores adicionales en los sistemas ThCS de quimiotaxis se convierten en un punto de relacin con
aumentos en la sensibilidad y capacidad de adaptacin con respecto a los convencionales TCS!

! En quimiotaxis los receptores adicionales no son solo transmembranales sino tambin de superficie celular
formando un parche sensorial. (nariz para las bacterias) C/receptor individual puede ser metilado en 8 posiciones
distintasy puede adoptar por lo menos dos estados conformacionales. Dentro de un grupo sensorial (miles de
receptores), distintos receptores interactan entre si en grupos de a tres (trmeros receptores) con diferentes
respuestas a multiples influencias medioambientales!

Metiltransferasas y metilesterasas son las enzimas que deben estar en equilibrio

Histidin Quinasas (HPK)

En general hay tres mecanismos para percibir el estimulo:!

1.Estmulos Extracelulares (1. dominio periplsmico o extracelular y

dos hlices transmembranales y 2. un dominio citoplasmtico) El
domino de entrada 1 y el dominio transmisor 2. son localizados en
dos compartimentos diferentes separados por la membrana por lo
cual requiere una transduccin de seales transmembranal!

2.Estmulos de la interfaz de la membrana por medio de las hlices

transmembranales (espacio transmembranal) o por combinacin
entre las hlices transmembranales y el dominio citoplasmtico Nterminal (13 helices). Son capaces de percibir estmulos de la
interfaz membranal o del citoplasma!

3.Estmulos citoplasmticos (intracelular): constituido por protenas

sensoras citoplasmticas que pueden estar ancladas a membrana o
pueden ser solubles

PERCEPCION DE ESTIMULOS Y SEALIZACIN POR HISTIDIN

QUINASAS!

!
Seales Qumicas: El grupo de His-quinasas transmembranales es
muy amplio. Muchos tienen un dominio sensor periplasmico/
extracelular con pliegues especficos:!
! PAS: Per/Arnt/Sim!
! CHASE: cyclase/histidine kinase-associated sensing
extracelular!
! 4HB: has de 4 helices!
! NIT: sensor de nitrato y nitrito!

!
Seales Fsicas: Para las bacterias es ms difcil sensar estas seales,
sin embargo existen his-quinasas que detectan alteraciones de
osmolaridad, , luz temperatura o turgencia!
Osmolaridad: EnvZ/OmpR E. coli!
Luz: LovK/LovR Caulobacter crescentus (Luz,O2 yVoltage)!
Temperatura: CorS/CorR Pseudomonas syringae

Histidin Quinasas (HPK)

MECANISMO: !

! Cuando el estimulo es censado la histidina

quinasa es activada por medio de una
autofosforilacin (por ATP) en una histidina
altamente conservada!

! Las histidin quinasas son homodimeros y la

fosforilacin ocurre de forma Trans lo que significa
que un monmero se une al ATP y fosforila el
residuo de Histidina del otro monmero!

! Rpidamente el grupo fosforilo es transferido a

un aspartato altamente conservado del dominio
receptor del regulador de respuesta, lo que genera
la activacin del dominio de salida!

! En muchos casos las histidina quinasas se

desfosforilan por unas fosfatasas lo que conlleva a la
terminacin de la cascada de sealizacin

ESTRUCTURA DE LAS HISTIDIN-QUINASAS!

! Todos los histidina quinasas comparten nicos
motivos de secuencia en sus dominios transmisores,
designados como: H, N, G1, F y G2.!

! Dominio Cataltico: H-box: Contiene dominio

DHp dimerizacin y Histidin fosfotransferasa y el
dominio cataltico de HATPasa_c

Histidin Quinasas (HPK)

Segn esto se han clasificado tambin en dos clases:!

1.Clase I: Alli el dominio DHp est conectado por

un enlazador mas o menos flexible con el dominio
Catalitico. Las de clase uno son las ms conocidas!

2.Clase II: la H-box est localizada en el dominio

HPt (histidin fosfotransferasa) el cual est separado
del dominio cataltico por el dominio de entrada y el
de dimerizacin

Histidin Quinasas (HPK)

Adicional al sistema clsico de histidin-quinasa/
regulador de respuesta, existe las phosphorelay que
catalizan reacciones de fosfotransferencia
(His:Asp:His:Asp). Histidin-quinasas hibridas. Donde
el dominio transmisor esta fusionado con el
dominio receptor y el grupo fosforilo es transferido
de una His a un Asp dentro de una nica protena.!

Los phosphorelays ms complejas tienen mltiples

puntos de regulacin y podra facilitar los sistemas
de fosforilacin ortodoxos.

Comparacin HPK Con Serin/Treonin/Tirosin Quinasas

!

! H-quinasa predominan en bacterias para la regulacin gnica, tambin presentes en arqueas y

eucariotas!

Eucariotas predomina Ser-Thr-Tyr quinasas, tambin presentes en procariotas!

! Mayor diferencia es que en un sistema la fosforilacin His-Asp es inestable, con una vida media
de unos segundo o pocos minutos. Primero acta una quinasa, luego una fosfotransferasa!

! His-Asp la fosforilacion de la His por el ATP catalizada por la quinasas y la fosfotransferencia al

Asp son reacciones reversibles !

! Las His-quinasas son enzimas bifuncionales: actividad autoquinasa y fosfatasa para el regulador
de respuesta.!

! Las vas HIs-Asp son ms especficas permitiendo una coordinacin entre las entradas y las
salidas de seal.!

La fosforilacin de Ser-Thr o Tyr son extremadamente estables!

! Requieren de una fosfatasa adicional que elimine la fosforilacin y se apague la cascada de

sealizacin!

! Es as como una quinasa puede fosforilar corriente arriba o corriente abajo un gran numero de
quinasas para amplificar la seal de forma exponencial

Serin/Treonin Quinasas (STPKs)

Sistemas de dos componentes que consisten en una
histidina quinasa (tambin llamado sensor quinasa) y
un regulador de respuesta !
Son considerados como los sistemas de
transduccin de seales de mayor distribucin en las
bacterias, las STPKs tambin juegan un importante
papel en transduccin de seales bacterianas

Foforilacion Serin/treonin Vs Fosforilacion Histidin/

aspartato!
! La mayor diferencia es la estabilidad de los
residuos fosforilados. !
! La alta energa de los residuos de
fosfohistidina y fosfoaspartato son mucho ms lbil
(poco estables) que los fosfomonosteres!
! A pH neutro, el residuo phosphoaspartate de
los reguladores de respuesta tiene una vida media
de segundos a varios minutos, dependiendo de la
protena individual, mientras que fosfoserina,
fosfotreonina, y los residuos de fosfotirosina en las
protenas son estables durante semanas!
! fosforilacin de la serina, treonina y tirosina
permite la produccin de seales de largo plazo

Serin/Treonin Quinasas (STPKs)

Arquitectura de los dominios STPKs!
! Caracterstica comn es el dominio cataltico (+/-300aa), adicionalmente las
bacterias contienen otros dominios en la regin C-terminal, estos son mas variables!
! Hay varios ejemplos que muestran que los STPKs estn asociados con los dominios
caractersticos de histidina quinasas y de reguladores de respuesta, lo cual indica que
estos dos tipos de sistemas de transduccin de seales se pueden combinar!
! Otros dominios que se encuentran en STPKs son los dominios de segundo
mensajero de sealizacin como la guanilato ciclasa y dominio cataltico cylase o el
dominio GGDEF que posee actividad ciclasa diguanilato o dominios de interaccin
protena-protena, como los dominios FHA fosfotreonina vinculantes (forkheadasociado)!
! Otra gran variacin es la presencia o ausencia de hlices transmembranales en los
STPKs. Muchas bacterias poseen STPKs con una sola hlice transmembrana, protenas
integrales de membrana, su porcin C-terminal est en el espacio extracitoplasmatico!
! Los receptores con hlices transmembrana son capaces de sensar estmulos
extracelulares o periplsmicos y transmitirlos al citoplasma!
! Uno de los dominios extracitoplasmicos el el PASTA (penicillin-binding protein and
serine/threonine kinase-associated dominio B3Alfa)

Serin/Treonin Quinasas (STPKs)

Estudio Estructural de STPKs!
! El dominio cataltico de los STPKs esta compuesto de 12 subdominios. Parte de los aa de estas regiones son
prcticamente invariables (conservados) y se sabe que juegan un papel importante en la unin y catlisis de sus
sustratos!
! El N-terminal contiene de los subdominios I a IV predominantemente tiene B-hojas involucrado en el anclaje y
orientacin de nucletidos!
! El C-terminal tiene los subdominios VI-XI, predominan las alfa-helices, esta regin es responsable para la unin de
la protena sustrato y la iniciacin de la fosfotransferencia!
! Los SPTKs pueden adoptar dos conformaciones estructurales estables open o closed, este ultimo
corresponde al estado activo. Muestra la autofosforilacion del residuo de treonina
! la mayora de STPKs catalizan la
autofosforilacin como parte de la cascada de
transduccin de seales!
! la autofosforilacin puede tener dos
funciones: 1. activacin de la actividad
enzimtica mediante la induccin de cambios
conformacionales en la protena y 2. la
provisin de un sitio de acoplamiento para
protenas de sustrato, tales como dominios de
la FHA.!
! En eucariotas por lo general se forman
dimeros del receptor que juega un papel en la
regulacin

Serin/Treonin Quinasas (STPKs)

TRANDUCCION DE SEALES POR STPKS!
Una comprensin de la funcin fisiolgica de los STPKs individual requiere el conocimiento de (i)
los estmulos reconocidos, (ii) la influencia de los estmulos en la actividad de la quinasa y / o la
unin de protenas diana a la quinasa, (iii) la identidad de los las protenas diana que se vuelven
fosforilada, (iv) la funcin de las protenas diana, y (v) la influencia de la fosforilacin en la funcin de
las protenas diana.!

Control directo de las actividades enzimticas por STPKs!

La actividad de las enzimas est influenciada por la fosforilacion dependiente de STPKs!
Se autofosforilan los STPKs en residuos de serina y transfieren el grupo fosfato a residuos de
treoinina, por ejemplo en enzimas que involucran la sntesis de lpidos, sntesis de pptidoglicano!

!
!

CONCLUSIONES!
Mientras que el sistema regulador de respuesta histidin/quinasa en la gran mayora de los casos
REGULA la expresin gnica mediante la activacin o la represin de la transcripcin, STPKs
actUAN en muchos ms variables formas, ya que muchos tipos diferentes de protenas pueden ser
modulados en su actividad por la fosforilacin.!
la fosforilacin de serina y treonina es mucho ms fcil de analizar en comparacin a la fosforilacin
en aspartato o histidina

Segundos Mensajeros
en Sealizacin
Bacteriana

Sealizacin por cAMP

! La sealizacin por AMPc juega un papel importante en
Carbon Catabolite Repression *CCR (carbn Catabolite
Represion)!
! Para E. coli la concentracin citoplasmtica de AMPc varia
durante el crecimiento con diferentes fuentes de carbono!
! AMPc es un segundo mensajero, el cual es un coactivador y
modula la actividad de CRP (cAMP Protein Receptor)!
! Las buenas condiciones de crecimiento (por ejemplo, durante
el crecimiento en presencia de glucosa) corresponden a bajos
niveles de cAMP y por la fuerte represin catablica, mientras
que las condiciones de hambruna conducen a altas
concentraciones de cAMP y un alivio de la represin

Regulacin de los niveles de AMPc intracelular: sensores PTS y sistema de transduccin de

seal que modula la actividad de la Adenilato Ciclasa *AC!

! Adenilato Ciclasa AC es codificada por el gen cya. Este gen se activa fuertemente cuando
las clulas crecen bajo condiciones de glucosa reprimidas y cuando hay un exceso de
carbohidartos en la clula se desactiva la AC!
! Por lo tanto, cuando la primera fuente de carbono (por ejemplo, glucosa) se agota, las
bacterias pueden producir al instante cantidades crecientes de AMPc y por lo tanto adaptarse
rpidamente a la utilizacin de una nueva fuente de carbono, ya que altas concentraciones de
AMPc facilitan la activacin transcripcional de prcticamente todos los operones catablicos de
carbono de que se trate con el inicio de la utilizacin de carbono exgeno.

Sealizacin por cAMP

CASCADA DE FOSFORILACION DE PTS!
1.! El primer paso es catalizado por la EI (protein quinasa
dependiente de PEP) que se fosforila por el PEP, esta EI se
autofosforila solo en su estado dimerico. Despus de la
fosforilacin los dimeros se disocian y posteriormente
transfieren los grupos fosfato al HPr!
2.! El grupo fosfato es transferido a HPr!
3.! HPr-P transfiere el grupo fosfato a EII-A (subunidad
soluble o citoslica)!
4.! EII-A-P transfiere el grupo fosfato a E-II-B y EII-C
responsables de la captacin y fosforilacin del azcar!
! Todas las fosforilaciones entre PEP y los dominios EIIB son reversibles, solo el paso final de la fosforilacin del
azcar es irreversible!
! Un paso de limitacin de la cascada de fosforilacin es
la autofosforilacin de EI, debido a que la tasas de
asociacin/ disociacin es muy lenta en comparacin a
otras protein quinasas!
! En el caso de la sealizacin por cAMP en bacterias
entricas, toda la evidencia indica que cuando EII-Agluc-P
se une a Cya, estimula la sntesis de cAMP!
! Si hay altas concentraciones de EII-A-P y bajas tasas de
transporte de PTS y altas concentraciones de PEP-Piruvato,
desencadenan la unin de EII-A a Cya y un aumento en la
sntesis de cAMP!
! Por el contrario si EII-A-P es defosforilada hay una
disminucin en la concentracin de cAMP

Otra extensin del modelo simple: la represin catablica por sustratos

No-PTS: El PEP: piruvato es un nodo clave en carbono y el metabolismo
energtico:!
!
Las enzimas agrupados alrededor del nodo de piruvato se regulan de
una manera muy sofisticada de acuerdo con las necesidades del organismo y
el PEP: por lo tanto, piruvato refleja fielmente el flujo variable de sus
metabolitos.!
!
Por lo tanto, una protena PEP-dependiente kinasa EI, en lugar de las
quinasas dependientes de ATP habituales, ha sido mejorado para medir
permanentemente el PEP: piruvato intracelular para sealar la informacin
global para redes de comportamiento y regulacin!
!
En consecuencia, este mecanismo permite a las clulas regular el
metabolismo de los carbohidratos por represin catablica, incluso por los
hidratos de carbono que no son transportados por la PTS. Ejemplos de
tales hidratos de carbono no PTS que causan represin catablica en E. coli
son gluconato, lactosa y glucosa-6-fosfato.!
!
Por lo tanto, un bajo PEP: piruvato provoca una actividad
autophosphorylacin baja de la IE, que a su vez conduce a una disminucin
de la fosforilacin EIIAGlc y, por lo tanto, a una disminucin en la
concentracin de AMPc

Sealizacin por cAMP

EXCRECION DE AMPc Y ACTIVIDAD FOSFODIESTERASA!

! La concentracin intracelular de AMPc es controlada principalmente por los
niveles de sntesis!
! En principio las clulas pueden presentar cambios en las cantidades
intracelulares de AMPc por control de la excrecin o degradacin dada por la
fosfodiesterasa AMPc intracelular!
! Por lo menos la degradacin no parece desempear un papel importante - la
cAMP fosfodiesterasa E. coli (gen cpd) tiene una baja afinidad por el cAMP (Km
aproximadamente entre 0,5 y 0,8 mM), lo que hace que sea muy poco probable
que esta enzima tenga alguna influencia en la concentracin de AMPc.

FUNCION DEL COMPLEJO AMPc/CRP (cAMP Protein Receptor)!

1.! Regulacion transcripcional del gen crp!
! El complejo AMPc/CRP juega un papel importante en la regulacin de la transcripcin de crp, donde este complejo acta como un
elemento de control positivo y negativo para la expresin del gen crp dependiendo de las condiciones fisiolgica!
! Bajas concentraciones de AMPc conllevan a la unin del complejo AMPc/CRP a la regin promotora de crp que promueve la sntesis de
un ARN antisentido de un promotor divergente. Este RNA inhibe la transcripcin de crp, mediante la formacin de una estructura de bucle en
horquilla de terminacin de la transcripcin!
! Altas concentraciones de AMPc, aparentemente conducen a un aumento en los niveles celulares de la CRP, presumiblemente por un
aumento de expresin del gen crp!
! Presencia de glucosa = bajas concentraciones de AMPc = niveles de CRP decrece!
! Ausencia de glucosa = altas concentraciones de AMPc = niveles de CRP aumentan!
! Por otro lado, el aumento de los niveles de CRP bajo condiciones de hambre mejorar el potencial de la clula para provocar formacin
de AMPc-CRP-mediada por la activacin de operones catablicos, si las fuentes de carbono alternativas estn disponibles.!

2.! Propiedades de CRP!

! Constituida por dos unidades idnticas, c/una se puede unir a una molcula de AMPc!
! Cada subunidad tiene dos dominios distintos: dominio N-terminal responsable de la dimerizacin y formacin del bolsillo de unin para
AMPc y el dominio C-terminal forma la estructura de unin a DNA!
! La unin de AMPc conlleva a un cambio conformacional en la estructura 3D e induce el de la secuencia especifica de reconocimiento de
DNA!

3.!
!

Complejo AMPc/CRP dependiente de la activacin o represin del promotor!

Este complejo cAMP-CRP activa la transcripcin de varios promotores y reprime la de otros

Sealizacin por c-di-GMP

DiGuanilatoCiclasas: DGCs = dominio GGDEF!
Fosfodiesterasas: PDEs = Dominio EAL!
di-GMPc: segundo mensajero en las bactaerias, funciones: promocin
de las funciones asociadas con la formacin de biopelculas bacterianas
y sessility, y como un regulador negativo de la motilidad y la virulencia.

Sealizacin por c-di-GMP

DOMINIOS PROTEICOS INVOLUCRADOS EN LA
SEALIZACION POR di-GMP-c!
!
! Diguanilato ciclasa y Fosfodiesterasas tienen
secuencias de motivos conservados en los dominios
GGDEF y EAL!
! El dominio GGDEF es capaz de convertir GTP en
di-GMP-c!
! Para formar un complejo enzima-sustrato
catalticamente activo dos GTP son llevados a los
dominios GGDEF para dimerizar los GTP!
! La degradacin del di-GMPc es mediada por el
dominio EAL, rompe por hidrlisis la unin cclica y lo
deja en su forma lineal 5pGpG (asignada como una
ctividad de PDE) que es posteriormente degrada muy
lentamente a GMP!
! No es necesaria la dimerizacin de dominios EAL
para la generacin del mecanismo cataltico de
hidrlisis de di-GMPc!
! Otro domino que participa con menos frecuencia
en el rompimiento del di-GMPc es el HD-GYP!
! Las protenas solo muestran ya sea actividad PDE
o DGC.!

! La unin de di-GMPc a sus efectores (protenas

como PilZ- motilidad en PAO) es un paso escencial en
regulacin de la motilidad, sntesis de polisacridos
extracelulares formacin de biofilm y virulencia en
muchos organismos

Sealizacin por c-di-GMP

ESPECIFICIDAD DE LA SEALIZACION POR di-GMPc!
E. coli.!
! El di-GMPc juega un papel crucial durante la
transicin de la fase postexponencial a la estacionaria en
E.coli!
! Posee 29 genes GGDEF/EAL que codifican para 12
proteinas con dominio GGDEF y 10 proteinas con
dominio EAL y 7 proteinas con ambos dominios

ESPECIFICIDAD DE LA SEALIZACION POR di-GMPc!

V. cholerae!
La sealizacin mediada por di-GMPc juega un papel
importante en la regulacin de la formacin del biofilm
como en la regulacin de factores de virulencia,
contribuyendo tanto a la persistencia del patgeno en
ambientes acuticos y a la infeccin del huspedv

CONCLUSIONES!
! di-GMPc es un factor importante en la regulacin de
importantes fenotipos bacterianos incluyendo la
formacin de biofilms, motilidad y patogenicidad (factores
de virulencia)!
! juega un papel importante en la regulacin de las
transisiciones de estilo de vida bacteriana (ej: transisicion
entre clulas mviles y sedentarias o ssiles E. coli) o la
transicin entre el hospedero y el medio ambiente en
bacterias patognicas como V. cholerae

Sealizacin por ppGpp

! ppGpp (guanosine 5,3-(bis)diphosphate) and pppGpp
(guanosine 5-triphosphate, 3-diphosphate), Son conocidad
como molculas efectoras (hormone-like) denomindas a
menudo como alarmonas responsables de una
respuesta global bacteriana a la privacin nutricional y al
estrs.!

! La concentracin de la molcula efectora (p)ppGpp

ha sido reconocida como una respuesta central, que une
los diferentes tipos de reacciones de estrs cruciales para
la adaptacin y el ajuste del crecimiento celular en
respuesta a las condiciones alteradas.!

! Los niveles de (p)ppGpp estn involucrados en el

control de crecimiento en estado estacionario. Hay una
correlacion inversa casi lineal entre las tasas de
crecimiento bacteriano y la concentracin celular basal
de ppGpp!

! En general la sealizacin por (p)ppGpp promueve la

supervivencia en condiciones desfavorables

Sealizacin por ppGpp

Induction of the Effector (p)ppGpp Through Synthesis and
Degradation!
! Despus de la induccin, la acumulacin de (p)ppGpp
a niveles de estado estacionario se lleva a cabo por las
enzimas que sintetizan y degradan molculas efectoras en
respuesta a los cambios metablicos o ambientales (figura
22.1).!
* Las enzimas responsables de la sntesis y la rotacin de
(p)ppGpp en todos los organismos hoy se denominan
RSHs (Rel Spo homlogos), basadas en las enzimas RelA
(sintetasa I) y SpoT (II sintetasa), que son responsables de
esta reaccin en E . coli y muchas otras bacterias Gramnegativas de la subdivisin beta y gamma proteobacterias.!

!
!
! RelA(protena asociada a ribosomas) la cual sintetiza
(p)ppGpp de GTP o GDP por transferencia del grupo
fosfato del ATP a la posicin 3-OH de la respectiva
ribosa. !

!
! SpoT. Esta enzima tiene una funcin importante en
(p)ppGpp la degradacin, pero muestra una
independiente actividad sintetizadora, que es inducida por
deprivacin de fuentes de carbono, hierro, fosfato, cidos
grasos, o el estrs en general condiciones. Responsable
de mantener y ajustar los niveles basales de (p)ppGpp
responsable del mantenimiento o cambios en el
crecimiento celular.

Sealizacin por ppGpp

ppGpp A Bona Fide Global Regulator!
ppGpp a menudo se entiende como el inductor estricto de control,
que se caracteriza por una rpida disminucin en la sntesis de ARN
estable y detencin del crecimiento. Se debe destacar, sin embargo,
que la sealizacin de ppGpp es mucho ms general y en realidad
constituye un sistema de control global, lo que interfiere con la
mayora de las reacciones biosintticas, tales como la replicacin, la
transcripcin y la traduccin, que son bsicas para la expresin
gnica, el crecimiento celular, o mantenimiento (figura 22.2). Por otra
parte, las vas centrales para el mantenimiento y la supervivencia,
tales como seales del ciclo celular, la adaptacin al estrs fsico, la
induccin de la virulencia, la frecuencia de mutacin alterada, la
muerte programada de las clulas bacterianas, desarrollo fago o
quorum sensing (QS), estn integrados en la red de sealizacin
ppGpp.!

!
1.! Perfil Transcripcional en diferentes cepas:!
2.! Lack of (p)ppGpp Signaling in Obligate Intracellular Bacterial
Pathogens and Archaea: la respuesta de ppGpp es muy similar en
diferentes bacterias!
3.! ppGpp en plantas: si hay evolutivamente es factible por los
cloroplastos!
4.! (p) ppGpp como un mediador de la Conducta Social bacteriana
y los mecanismos de sealizacin clula-Clula: Una conexin entre
QS y la deteccin del estrs y el hambre es un mecanismo (p)ppGpp
evidente. De hecho, QS y la formacin de biopelculas se han
demostrado para ser acoplado a la va de sealizacin ppGpp!
5.! Sealizacion por (p)ppGpp en virulencia e interaccion
patgeno hospedero!
6.(p) ppGpp como un regulador de Sistemas toxina-antitoxina en
muerte celular programada Bacteriana: Sealizacin ppGpp se
considera que desempean un papel en mdulos suicidas inducidos
por el estrs.

!
Efectos en la Sintesis Macromolecular!
1.! Papel del ppGpp como inhibidor de la replicacin!
2.! Inhibicion de la traduccin: efecto en el factor de
iniciacin 2!

Regulacion de la Transcripcin: RNA polimerasa!

la inhibicin de la transcripcin de ARN estable es el
efecto ms importante de Regulacin dependiente de
(p)ppGpp

Algunos Fenmenos
Regulados por
Sealizacin Bacteriana

Quimiotaxis (parte de los TCSs)

! Muchas bacterias son capaces de migrar hacia donde
encuentran altas concentraciones de compuestos qumicos, que
por lo general son nutrientes o molculas de sealizacin.Y al
mismo tiempo pueden evitar o huir de sustancias qumicas
dainas.!
! Las bacterias han desarrollado la estrategia de quimiotaxis.
El modelo de estudio ha sido E. Coli!
! La respuesta quimiotactica es mediadad por un sitema de
sealizacin por fosforilacion de la protena!
! La via quiomiotaxis es conservada en bacterias y archeas:!
! Dos protenas de sealizacin histidin quinasas CheA y un
regulador de respuesta CheY!
! CheA (2proteinas) no tiene un dominio sensor pero tiene
un adaptador CheW (1Proteina) que tiene un receptor
quimiosensor asociado a la membrana!
! La formacin del complejo ternario (2CheA y1 CheW)
CheA se autofosforila y permite que los receptores modulen la
actividad de CheA tras la unin al quimioefector

! Este complejo ternario se ubica en los polos de la clula y a

lo largo del cuerpo de la misma!
! El grupo PO4 de CheA es transferido a CheY que puede
difundir a travs del citoplasma y transmitir la seal a los
motores flagelares por ejemplo. Al unirse CheY fosforilado a los
motores aumenta la probabilidad de movimiento en sentido de
las manecillas del reloj tumbles!
! CheR metiltransferasa: media la adaptacin a estimulacin
(preferiblemente metila para inactivar el receptor)!
! CheB metilesterasa: (demetila para activar el receptor)
sintoniza la capacidad de los receptores para activar CheA
ajustando el nivel de metilacin en residuos especficos de
glutamil, con lo que se aumenta la actividad de CheA por
modificacin del receptor y disminuye la sensibilidad de
atrayentes!
! CheA, CheW, CheR y CheB son conservadas en todas la
vas!
! E. Coli tiene adicionalmente CheZ que garantiza una rpida
rotacin de ChY-P para reajustar rpidamente el
comportamiento natatorio de la bacteria

Quimiotaxis (parte de los TCSs)

ESTRUCTURA Y FUNCION DE LOS
QUIMIORECEPTORES!

! Complejo receptor CheW-CheA: nucleo para sensar

y procesar el estimulo!
! Muchas bacterias tienen multiples tipos de
receptores que definen la especificidad de la quimiotaxis,
donde un simple receptor puede mediar la respueta de
multiples qumicos.!
! Los receptores son homodimeros estables que
tpicamente atraviesan la membrana, que forman un haz
de 4 helices transmembranales!
! Receptores contienen tres modulos operacionales: !
1. Sensor transmembranal: formado por dos dominios
sensores N-terminal ligando especficos, la unin del
ligando se da en el bolsillo formado por los dos
monmeros, induciendo un desplazamiento de las hlices
transmembranales para transmitir la seal a travs de la
membrana!
2. Conversin de la seal: sufre un cambio
conformacional dado por la seal. Un dominio
HistidinquinasaAdenilatociclasaMetilaceptorasPosfatasas
(HAMP) que se encarga de la rotacin de la hlice!
3. Control quinasa: la metilacin del receptor puede
revertir los cambios conformacionales

Quorum Sensing Q.S.

Quorum Sensing Q.S. en Bacterias Gram-Positivas

Quorum Sensing Q.S. en Bacterias Gram-Negativas

Pseudomonas aeruginosa !

1. LasR/LasI: dado por la N-(3oxododecanoil)-L-homoserin-lactona

(odDHL), sintetizada por LasI y detectadas
por LasR.!
2. RhlR/RhII: dado por la N-butanoil-Lhomoserin-lactona (BHL), sintetizada por RhII
y detectada por RhIR!
3. QscR .

Gracias
@dcclavijob