RECUENTO DE ERITROCITOS

OBJETIVO
Aprender a realizar un recuento de Eritrocitos por milmetro cbico de sangre, interpretar el resultado, as como adiestrarse
en el manejo de la cmara de Neubauer y la pipeta de Thoma

1.
2.

FUNDAMENTO
Para el conteo de eritrocitos, se usan mtodos sistemticos que son ms rpidos y precisos, y los mtodos manuales.
Todo mtodo manual de recuento celular incluye 3 fases:
Dilucin de la sangre
Muestreo de la sangre diluida en un volumen
Recuento de clulas en ese volumen
Una suspensin celular se caracteriza por presentar un nmero de partculas microscpicas dispersas en un fluido.
Habitualmente ser necesario determinar tanto la densidad de las clulas en la suspensin como el porcentaje de stas que
son viables.
Para determinar la densidad de las clulas se emplean diferentes tcnicas, desde la relativamente simple cmara de
contaje celular de la que existen numerosas variantes, entre ellas la que utiliza la cmara de Neubauer
Para el conteo de eritrocitos, es necesario diluir la sangre con el lquido de Hayem, en una proporcin exacta. Luego se
examina en el microscopio con una cantidad pequea colocada en la cmara de Neubauer, contando el nmero de
elementos que se encuentran en el retculo de la cmara y mediante una operacin se obtiene el nmero total.
Para la realizacin del conteo manual se necesita un lquido de dilucin, una cmara de recuento, una pipeta diluidora y un
microscopio.
MATERIAL
Pipeta de Thoma para glbulos rojos (perla roja)
Equipo para venopuncion (Tubo lila)
Boquilla roja
Tubo de plstico
Tubos de ensayo
Papel parafin
Cmara de Neubauer
Cubrehematimetro
Microscopio
Gasas
SUSTANCIAS
Alcohol al 70%
Sangre venosa
Liquido de Hayem
PROCEDIMIENTO
Una vez seleccionada, se desinfecta la zona con alcohol al 70%, y se practica puncin venosa. La sangre es recogida en un
tubo lila con EDTA
Colocar el tubo de plstico y la boquilla para aspirar en la pipeta

3. Llenar la pipeta de glbulos rojos con sangre hasta la marca 0.5 para realizar una dilucin de 1/200, y si se carga hasta 1, la
dilucin ser 1/100. Limpiar la punta con gasa o papel absorbente. Si la sangre se pasa de la marca, se puede absorber con
gasa el excedente

4. Introducir la pipeta en el tubo o frasquito que contiene el diluyente (Hayem) y llenar de lquido de dilucin hasta la marca de
101

5. Se tapa la punta con papel parafin y se coloca en un rotador automtico o se hace rotar manualmente de 2-3 minutos

6. Destapar la pipeta y descartar 3 a 4 gotas del tallo, luego colocar una gota pequea cerca de un extremo de la cmara para
que por capilaridad se llene exactamente. Dejar 2 minutos que los eritrocitos se sedimenten

7. Colocar en la platina del microscopio y enfocar la cuadricula a 10x. luego con el objetivo de 40x contar sobre el cuadro
grande central de la cmara solo en 5 cuadrados pequeos: uno central y cuatro angulares (80 cuadritos del total)

8. En el recuento se incluyen las clulas que cubren o tocan por dentro o por fuera las lneas limitantes superior e izquierda en
el cuadro pequeo de recuento y no se consideran los que estn en los lmites inferior y derecho.
OBSERVACIONES

Cmara de Neubauer, 10x

El rayado de la cmara de Neubauer cubierta de miles de eritrocitos, que destacan por su forma redonda y gran cantidad.

Cmara de Neubauer, 40x

Enfocando el cuadro central de los cuadros pequeos, se aprecian claramente los 16 cuadritos pequeos donde se tienen
que contar los eritrocitos que hay en ellos.
RESULTADOS
Los recuentos de eritrocitos se expresan como concentraciones, que en este caso seran nmero de clulas por unidad de
volumen de sangre, que es 1mm3
Despus de contar los hemates de los 5 cuadrados pequeos, se suman y con dicha cantidad de hace el siguiente clculo:
N de hemates x mm3 = altura x dilucin x rea

N de hemates x mm3 = 1/10 x 1/200 x 1/5 = 1/10 000

N de hemates x mm3 = hemates contados x 10 000
En el anlisis hecho, el nmero de eritrocitos fue de 491, que al multiplicarse por 10 000 daba como resultado 4 910
000/mm3, lo que indica un ndice normal pues el paciente era una mujer de 11 aos de edad.
VALORES DE REFERENCIA
(Millones de clulas/mm3)
Hombres:..4 500 000-5 500 000
Mujeres:....4 000 000-5 000 000
Nios (4 aos):.........................4 200 000-5 200 000
Lactantes (1-6 meses):.....3 800 000-5 200 000
Recin nacidos:..5 000 000-6 000 000
CONCLUSIN
Los eritrocitos o glbulos rojos son clulas de color amarillento, con la forma de un disco bicncavo, sin ncleo y contienen
un pigmento llamado hemoglobina que les otorga su caracterstico color.
Estos se forman constantemente en la medula sea, en el crneo, las costillas, las vrtebras y el esternn, en un proceso
conocido como eritropoyesis. Viven aproximadamente 120 das y al envejecer son destruidos por las clulas
reticuloendoteliales del hgado, la medula sea y el bazo.
La falta de ncleo le confiere la virtud de acarrear oxigeno sin consumir nada de l.
La pipeta de Thoma para glbulos rojos est constituida por dos porciones capilares y un bulbo central. El tubo capilar
inferior est dividido en 10 partes iguales con marcas de 0.5 y 1.0. En el interior del bulbo existe una perlita de plstico roja
para favorecer la mezcla de sangre con el lquido y en el capilar superior hay una marca de 101.

El lquido de dilucin no solamente debe de diluir los eritrocitos hasta cifras legibles, sino que tambin permita identificarlos
y que destruya otros elementos celulares que no son de inters en este momento. En general se puede usar cualquier
solucin isotnica como diluyente y pueden ser:
Soluciones de Gower
Soluciones de Dace
Solucin salina de NaCl al 0.9%
Liquido de Hayem, el cual est formado de 5g de NaCl, 2.5g de Na2SO4, 2.5g de MgCl2 y agua destilada para un litro. Este
ltimo es el ms usado.
Es muy importante observar que en la cmara de Neubauer las reas de recuento de eritrocitos y linfocitos son diferentes.
Los glbulos rojos se cuentan en las reas coloreadas de rojo, mientras que los glbulos blancos se cuentan en las reas
coloreadas de azul.

Para realizar el conteo se enfoca con el objetivo 40x, y se localiza el cuadro central con el condensador bajo y luz dbil.
Para proceder al recuento, que se lleva a cabo en los cuadrados pequeos del retculo marcado en color rojo, contando las
clulas en cada cuadro, en barrido o fila.

Bibliografa:

Fundamentos y tcnicas de anlisis hematolgicos y citolgicos, articulo web consultado el da 8 de marzo de

2012 en:http://html.rincondelvago.com/fundamentos-y-tecnicas-de-analisis-hematologicos-y-citologicos.html

Cmara de Neubauer, consultado el da 15 de abril de 2011 enhttp://2l2mlaboratoristaclinico.blogspot.com/2009/04/camara-de-neubauer.html

Martnez Fragoso, Vicente. Manual de Biometra Hemtica.CBTis199, Mxico, 2012. Pp. 9-11