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FACULTAD DE INGENIERIA
ESCUELA ACADEMICA PROFESIONAL DE
INGENIERIA AGROINDUSTRIAL
INFORME N003-SPE-CBD-SRK-VGJC-CCJ-2015-EAPIA-UNAMBA
PARA: Ing. Sal moreano carrasco
DE:
I.- RESUMEN
Temas nuevos o de importancia creciente, como son el control de calidad
del medio ambiente, las medidas de seguridad y salud de los personas y las
que aseguran una relacin armnica con el medio ambiente.se realiza con
el objetivo de cuantificar los microorganismos en el aire del medio ambiente
elegido, dado con el mtodo de sedimentacin por gravedad. Y los insumos
utilizados en esta prctica fue dos medios de cultivo como son el caso de
Agar plate count y Agar OGY respectivamente. Como resultado del proceso
de evaluacin y conteo de colonias, la mayor cantidad de poblacin
II.- INTRODUCCIN
El control ambiental es un proceso que permite determinar el grado de
asepsia que tiene un recinto o un laboratorio, el proceso evaluara la
limpieza e indicara si esta deber ser reforzada. En un laboratorio de
microbiologa es imprescindible mantener un ambiente asptico por las
actividades que all se realizan y para ello es necesario llevar un control de
calidad del medio ambiente. En esta prctica se observara los pasos
necesarios para mantener un control de calidad del medio ambiente tambin
se determina el grado asepsia del mismo.
Se puede defender el concepto calidad ambiental como el conjunto de
caractersticas del ambiente, en funcin a la disponibilidad y facilidad de
acceso a los recursos naturales y a la ausencia o presencia de agentes
nocivos. Todo esto necesario para el mantenimiento y crecimiento de la
calidad de vida de los seres humanos.
III.- OBJETIVOS
INSUMOS:
Agua destilada.
Agar pate count
Agar OGY
V.- PROCEDIMIENTO:
Elegir 3 o ms puntos de la muestra en el ambiente de microbiologa.
Abrir las placas de agar Plate Count y OGY y exponer durante 15
minutos
Las placas con agar Plate Count incubar a 35C / 3 das y las placas con
agar OGY 35C / 4 das.
Obtener resultados entre 3 das y 4 das de incubacin y contar las
colonias y expresar como Ufc/ 15 minutos.
1000 ml
40 ml
500 ml
40 ml
Elegir 3 puntos en el
laboratorio de
VI.- RESULTADO:
Cuadro N01 Resultados que se obtuvo en el control de calidad del
medio ambiente
Medio de zona de
muestreo
cultivo
Agar
plate
count
Agar
plate
count
Laboratorio
microbiologa
Laboratorio
qumica.
Agar
OGY
Laboratorio
microbiologa
Agar
OGY
Laboratorio
qumica.
placas
4. 1
2
1
color
periodo de # total de
incubacin colonias
Blanco
cremoso y
blanco
amarillento
3 DIAS
100 ufc/15min
Blanco
cremoso
4 DIAS
81ufc/15min
Blanco
cremoso y
blanco
amarillento
3 DIAS
222 ufc/15min
Blanco
cremoso y
verde
oscuro
4 DIAS
14 ufc/15min
X
1: N = FdVm
Count)
X
2: N = FdVm
X
3: N = FdVm
X
4: N = FdVm
VII.- DISCUSIONES.
Se sabe que la mayor cantidad de colonias presentes en el aire,
est en laboratorio de microbiologa, esto nos indica que estamos
expuestos a contaminarnos. Por tal motivo se requiere el ingreso al
laboratorio con todo el implemento necesario en un laboratorio de
microbiologa, o en otros laboratorios.
En la prctica realiza solo tomo dos puntos de muestreo por motivos
de materiales no estriles ,segn el procedimiento debera tomarse
ms de dos puntos respectivamente,
Entre stas, son las normas previas y simultneas con los procesos
de certificacin de calidad (ISO 9000), medioambiental (ISO 14000) y
con la introduccin de medidas de seguridad y salud laboral, ocupan
un lugar imprescindible.
VIII.- CONCLUSIONES:
Se logr la cuantificacin de microorganismos en el aire, con los
diferentes medios cultivos especialmente para microorganismos
presentes en medio ambiente, para esto se tom dos puntos el
laboratorio de qumica y microbiologa. Llegamos a un resultado de
recuento de colonias y de cada zona de muestra. La ms poblada
de microorganismos fue de laboratorio de microbiologa con un
nmero de 222 ufc/15min y en el otro punto fue de 81 ufc/15min, son
de los medios cultivos con mayor cantidad de colonias que los otros
medios, como se muestra en cuadro N01. En conclusin si se logr
los objetivos de cuantificacin de microorganismos presentes en el
aire.
I.- RESUMEN
Los microorganismos de superficies vivas e inertes relacionado con la funcin de los
riesgos sanitarios, con diferentes etapas de cadena alimentaria, siendo con el
objetivo de Evaluar la cantidad microbiolgica de superficies inertes (tabla de picar).
Y la calidad microbiolgica de manos de manipuladores de alimentos. Sea por
mtodos rpidos o convencionales, se realiza utilizando mtodos normalizados por
organismos internacionales para la estandarizacin ISO ,dado el ms utilizado es el
incorporacin ,utilizando el medio cultivo de Agar Plate Count y peptona, obteniendo
4
un resultado en manos de manipulador de 3.4x 10
104
2
ufc/ 100 cm Respectivamente.
I.- INTRODUCCION
Un alimento puede estar contaminado en su origen o bien puede ser por el
manipulador quien lo contamine durante el procesado. La persona que va a
manipular un alimento tiene una gran carga microbiana en la piel, pero nunca
debern deslizarse de ellas bacterias patgenas. Por lo tanto resulta evidente la
necesidad de que el manipulador mantenga una perfecta condicin de higiene
durante el procesado de los alimentos.
La tcnica de carga microbiana depende de la naturaleza del sitio, grado de
concentracin y de informacin microbiolgica que se pretende obtener.
Existen dos categoras de muestreo que habitualmente se toman del entorno donde
se fabrican alimentos en superficies y ambientes.
Los microorganismos se encuentran presentes en todos los ambientes: en el aire, en
el suelo, superficies de los objetos e incluso sobre muestro piel.
II.- OBJETIVOS
Muestreo de superficies
Debe estar en funcin de los riesgos sanitarios relacionados a las etapas de la
cadena alimentaria.
a) superficies inertes.
Se seleccionan aquellas que estn o tendrn contacto directo con los
alimentos, que no sern sometidos a un proceso trmico y que estn
destinados al consumo directo como: utensilios, vajillas, superficies de corte,
menaje, equipos, etc.
b) Superficies vivas
Se selecciona a los manipuladores de alimentos, con o sin guantes, que estn
en el contacto directo con los alimentos que no sern sometidos a un proceso
trmico o pasterizacin u otro tratamiento que disminuya la carga microbiana.
Cuadro N01 seleccin del mtodo del muestreo
MTODO DE MUESTREO
SUPERFICIES A MUESTREAR
Se utiliza superficies inertes e
irregulares tales como: tabla de picar,
bandejas, mesas de trabajo, utencillos,
cuchillas de equipo, cortadora de
embutidos, cortadora de pan de molde,
fajas transportadoras, mezcladoras,
pisos, paredes y otros.
MTODO DE LA ESPONJA
PARAMETROS PERMISIBLEAS:
Cuadro N02 limites microbiolgicos permisibles
SUPERFICIES
MWETODO DE
ENJUAGUE
ensayo
Coliformes
totales
SUPERFICIES VIVAS
Lmite de
Limite
deteccin
permisible
mtodo
<100
<100
ufc/manos
ufc/manos
Staphylococcu
s aureus
patgenos
SUPERFICIES INERTES
Lmite de
Limite
deteccin
permisible
mtodo
<25 ufc/
<25 ufc/
super.muestra
super.muestr
a
------------
<100
<100
ufc/manos
ufc/manos
Ausencia de
Ausencia de
ausencia
manos
manos
Fuente: direccin general de salud ambiental-DIGESA
ausencia
INSUMOS
Agar Plate Count
Agar agua peptona
V.- METODOLOGIA
a.- para mtodo de hisopo
Colocar la plantilla de 10x10 cm sobre la superficie a muestrear.
Humedecer el hisopo, en la solucin diluyente y presionar ligeramente en la
pared del tubo con un movimiento de rotacin para quitar el exceso de
soluciones.
Con el hisopo inclinado en un ngulo de 30 frotar 4 veces la superficie
determinada por la plantilla.
Para superficies irregulares en el caso de utensilios, se repetir la operacin 3
utensilios ms, en total 4 como mximo.
b.- para mtodo de enjuague para manos de manipuladores.
el mtodo consiste en realizar un enjuague (botellas, frascos, utensilios) o
inmersin (manos, objetos pequeos) en una solucin diluyente.
Vaciar el diluyente del frasco 100 ml en una bolsa plstica de primer uso.
Introducir las manos a muestrear hasta la altura de la mueca.
Solicitar al manipulador que realice un frotado de los dedos y particularmente
alrededor de los uas y la palma de los manos.
Luego retirar las manos se regresa el lquido al frasco o se anuda la bolsa y
este se coloca en otra bolsa para que quede segura.
Clculos realizados:
Para Agar Plate Count (para 6 placas)
17,5 gr-------------------1000 ml
X -------------------- 100 ml
X = 175 gr de Plate Count
Para agua peptonada (para 2 frascos de 90 ml y 4 tubos de 9ml)
1 gr -----------------1000 ml
X------------------ 220 ml
X = 0,22 gr de peptona
1 ml
Diluyente
1 ml
90 ml
H2Op
9 ml
9ml
102
103
101
1 ml
1 ml
1 ml
Inocular 1ml de
Cada dilucin en
1 ml
1ml
1 ml
VI.- RESULTADOS
Cuadro N03 evaluacin microbiolgica de superficies vivas e inertes:
Dilucin
Cuadrantes
Manos de
manipuladores
13
Amarrillo lechoso
4
3.4x 10
10
Superficies (tabla
de picar)
Dilucin
Colonias en
ufc/ml
Dilucin
Color
Sin determinar
1.4x 10
102
x
fdv
13+ 7+6+8
1020.1
= 34000=3.4x 10
100 cm2
Ufc/ml =
x
fdv
ufc/ml
7 +1+ 2+ 4
1020.1
4
= 14000=1.4x 10
ufc/
VII.- DISCUSIONES
4
y de 3.4x 10
2
Ufc/ 100 cm
VIII.- CONCLUCIONES
100 cm2
unidades
unidades
I.- RESUMEN
ufc/ml.
I.- INTRODUCCION
El anlisis de los alimentos est catalogado por diversas tcnicas y mtodos para
determinar microorganismos que se encuentran viables en los alimentos ya sean
slidos como las carnes, verduras y frutas, o lquidos ya sea leche y jugos de frutas;
entre estos mtodos tenemos la numeracin de microorganismos aerobios mesofilos,
la cual nos permite determinar cuntos microorganismos contaminantes presenta un
alimento sobre su superficie o en su interior. Segn La presente norma sanitaria se
establece en el marco del Reglamento sobre Vigilancia y Control Sanitario de
Alimentos y Bebidas (NTS N 071-MINSA/DIGESA-V-01), aprobado por Decreto
Supremo N 007.98 SA, establecen que el nmero de microorganismos aerobios
5
mesofilos y facultativos deben ser hasta un mximo de 500000 = 5x 10
ufc/ml,
para que puedan ser consumidos por la poblacin. Por otro lado las tcnicas para
poder encontrar la numeracin de aerobios mesofilos viables son: el recuento de
colonias en placa por profundidad, superficie o por goteo; otro el Mtodo del nmero
ms probable (MPN) de grmenes como clculo estadstico del nmero de clulas
viables. El recuento total de bacterias en placa es un mtodo til para obtener una
idea del grado de frescura o pronta alteracin de los alimentos, dependiendo dela
cantidad de bacterias presentes. La mayora de los alimentos deben ser
considerados como inadecuados para el consumo cuando contienen un gran nmero
de microorganismos, aun cuando estos microorganismos no sean conocidos como
patgenos y no hayan alterado de forma apreciable los caracteres organolpticos del
alimento. (Thatcher y Clark, 1973)
La presencia de microorganismos aerobios mesofilos en los alimentos puede ser
relacionada directamente con la manipulacin, el estado de frescura o de
descomposicin del producto y la temperatura de conservacin del producto. Un
nmero relativamente bajo de estas bacterias no es sinnimo de buena calidad
bacteriolgica del alimento, ya que puede contener microorganismos que producen
entero toxinas o son patgenos. (Venegas y col., 1990).
II.- OBJETIVOS
Realice el flujo de operaciones para la numeracin de microorganismos
mesofilos aerobios viables.
Realice la tcnica de siembra por incorporacin en el medio Plate Count en la
muestra de alimento.
Realice los clculos y reporte de resultado para rechazar o aceptar el
Producto.
III.- MARCO TEORICO
Los recuentos de microorganismos viables se basan en el nmero de colonias que
se desarrollan en placas previamente inoculadas con una cantidad conocida de
alimento e incubadas en condiciones ambientales determinadas.
Estos recuentos nos pueden considerarse como totales ya que solo se pueden
contar aquellos microorganismos que crecen en condiciones establecidas.
En nuestro caso se incluyen microorganismos mesofilos, que son aquellos que
crecen entre 20 30C, con una temperatura de crecimientos optima entre los 30
40C. Aqu se encuentran todas las bacterias, mohos y levaduras capaces de
desarrollarse a 30C en las condiciones establecidas. En este recuento se estima la
microflora total sin especificar tipos de microorganismos.
Refleja la calidad sanitaria de un alimento, las condiciones de manipulacin, las
condiciones higinicas de la materia prima.
Existen 2 requisitos principales que deben tener los alimentos para ser considerados
de buena calidad:
1. Que estn libres de microorganismos patgenos, o sea que posean buena
calidad sanitaria.
2. Que posean un bajo nmero de microorganismos alterantes, o sea que sean
frescos.
Esterilidad Comercial: Condicin de un alimento procesado trmicamente obtenida
por: (i) Aplicacin de calor que hace que el alimento est libre de: (a)
Microorganismos capaces de reproducirse en el alimento bajo condiciones normales
de almacenamiento y distribucin no refrigeradas; y (b) Microorganismos viables
(incluyendo esporas) de importancia para la salud pblica; o (ii) Control de la
actividad de agua y la aplicacin de calor, que hace que el alimento est libre de
microorganismos capaces de reproducirse en el mismo, bajo condiciones normales
(no refrigeradas) de almacenamiento y distribucin. (Norma sanitaria que establece
los criterios microbiolgicos RM N 615-2003 SA/DM)
10
por ser mayor que 5 permite adicionar 1 unidad al 2 o sea que el recuento seria
4
140.000 = 14x 10 .
Si el recuento fue de 124 por ser el 3er. Digito menor que 5 se anula y se expresa
4
120.000 = 12x 10 .
INSUMOS
Agar Plate Count
Agar peptona
V.- METODOLOGIA
Preparar el medio de cultivo segn las indicaciones del frasco.
Prepara la muestra de 10 gr en 90 ml de agua peptonada y tubos de 9 ml cada
uno.
Siembra por duplicado 1 ml de volumen del inoculo de cada dilucin en el
medio Plate Count
Siembra por incorporacin
Invertir las placas e incubar a 37C por 48 h
Recuento en placas
N=
C
V ( n1 +0,1 n2 ) d
Donde:
sucesivas.
V =es el volumen de inoculo aplicado en cada uno de las placas, en mililitros.
n1 = es el nmero de placas ledas de la primera dilucin.
n2
Tomar 10 gr de hot
dog
Diluir en 90 ml de agua
peptonada estril
101
hasta
103
1 ml
90 ml
H2Op
9 ml
9ml
102
103
10
1 ml
1 ml
1 ml
Inocular 1 ml
De cada dilucin
1 ml
1ml
1 ml
CALCULOS REALIZADOS
Para agar Plate Count (para 6 placas)
17,5 gr -------------------1000 ml
X --------------------- 100 ml
X = 1,75 gr de Plate Count
VI.- RESULTADOS
10
10
Agar
Colonias
contadas
Plate Count
ml
Plate Count
ml
Total
17
13
14
16
13
14
14
53
57
110 colonias
= 11x10 ufc/ml
N=
Calculo
C
V ( n1 +0,1 n2 ) d
VII.-DISCUSIONES
1
2+ 0,1 10
1
53+57
N=
Total de colonias en
UFC/g o ml
2
5,238x 10 ufc/ml
ufc/ g o ml,
dog) es de 5,238x 10
VIII.- CONCLUSIONES
y es
refrigeracin como el caso de hot dog. Este nos indica que si es aceptable su
2
5
consumo del alimento, en un rango permisible 5,238x 10 < 5x 10 ufc/ml
I.- RESUMEN
Bacillus cereus es una bacteria Gram positiva, habitante frecuente de un amplio
nmero de ambientes. Esta bacteria es la responsable del sndrome emtico y del
diarreico, y adems se ha identificado vinculada a otras enfermedades. Identificacin
realizndose la bsqueda e investigacin en aquellos alimentos que por su
naturaleza y por los datos clnicos ante una contaminacin de arroz cocido pudieran
guiar a la posible presencia de este microorganismo. Aislando con un mtodo
practico de diseminacin en placas, con los medios de agar Bacillus cereus +yema
de huevo y las pruebas de coloracin Gram, as dando unos resultados de Bacillus
cereus Gram positivo. Con un crecimientos de colonias de
4.9 x 10 4
ufc/g
II.- OBJETIVOS
Realizar la identificacin y numeracin de Bacillus cereus a partir de alimentos
de panadera.
Conocer los medios de cultivo y la tcnica de aislamiento de Bacillus cereus.
II.- MARCO TEORICO
Bacillus cereus:
Es un bacilo formador de esporas responsable de intoxicaciones alimentarias,
siendo su hbitat natural el suelo, contamina con frecuencia cereales, leche,
budines, cremas pasteurizadas y especias, entre otros alimentos.
La Organizacin Mundial de la Salud (OMS) estima que las enfermedades causadas
por alimentos contaminados constituyen uno de los problemas sanitarios ms
difundidos en la actualidad
Los casos de intoxicaciones o enfermedades por alimentos mal preparados o
contaminados por este microorganismo suelen ser frecuentes a pesar de que son
perfectamente evitables; la primera descripcin de un brote de gastroenteritis data de
principios de 1900
En nuestro pas casos de brotes de ETA denunciados y confirmados, por este tipo
de microorganismos han sido espordicos, 3 brotes en los ltimos 9 aos.
B. cereus puede producir dos enterotoxinas: la toxina diarreica y la toxina emtica.
Los sntomas de la toxiinfeccin tienen dos formas de presentacin con presencia
de diarrea, dolores abdominales y vmitos.
Su perodo de incubacin vara de 4 a 16 horas luego de la ingesta del alimento
contaminado.
Los Laboratorios de Microbiologa Alimentaria de los Municipios con infraestructura
y capacidad analtica han realizado un seguimiento preventivo de este tipo de
microorganismos en los alimentos que por su naturaleza pueden representar un
Intoxicacin alimentaria:
Nos referiremos esencialmente al papel del Bacillus cereus en la intoxicacin
alimentaria dejando de lado las actividades purulenta y necrotizante cutneas que
pueden verse. Bacillus cereus causa intoxicaciones alimentarias a travs de la
ingesta de alimentos contaminados. En general se admite que, debido a la levedad
del cuadro y a que la deteccin microbiolgica de esta bacteria no se realiza
rutinariamente en pacientes diarreicos, la incidencia real puede ser superior a la
estimada. Mas si tenemos en cuenta, que el cuadro clnico se confunde a menudo
y Clostridium perfringens,
Placas Petri
Pipetas
Tubos de ensayo
Matraz
Microscopio a 10x a 100x
Microscopio
Mechero bunsen
INSUMOS
Agar peptona
Agar Bacillus cereus
V.- METODOLOGIA
Procedimiento:
Se prepara el medio cultivo segn la indicaciones del frasco
Preparar las diluciones con 10 g de muestra en 90 ml de agua peptonada y
tubos de 9 ml cada uno. Diluir el alimento hasta 10-3
Sembrar por duplicado 0.1 ml de volumen el inoculo de cada dilucin en el
medio MYP y sembrar por diseminacin con una esptula de drigalsky
Dejar incubar a 48 h por 30C
Seleccionar las colonias sospechosas grandes ,irregulares, rosadas lisas
Escoger de cada placa 5 colonias y realice la prueba bioqumica
Realizar la confirmacin bioqumica, pre calculo y reporte en ufc/g de alimento.
Cristal violeta
Lugol
Alcohol acetona
Safranina
1 ml
90 ml
H2Op
9 ml
9ml
10
10
101
Inocular 0.1 ml
De cada dilucin
VI.- RESULTADOS
Cuadro N01 resultados obtenidos de Bacillus cereus en muestra de arroz
cocido
medios
Diluciones recuento
Tincin Gram
102
4 .9 x 104
Agar Bacillus
cereus
2 x 103
3
10
ufc/g
ufc/g
Gram positivo
Caractersticas
2
10
No hubo cambio
LIA
3
10
10
Cambio a color
amarillo: hay
degradacin de
glucosa
Cambio a amarillo
claro
TSI
10
Cambio a amarillo
claro
102
No cambio nada
103
No cambio nada
Simons
De color
violeta
(caracterstico
de Bacillus
cereus)
VII.-DISCUSIONES
VIII.- CONCLUSIONES
en la primera practica no se logr realizar una buena siembra ,dando a esto,
a hacer otro practica y obteniendo buenos resultados y de una carga
microbiana en el arroz cocido o cocinado,
logrando una carga microbiana de
4.9 x 10 4
102
FACULTAD DE INGENIERIA
ESCUELA ACADEMICO PROFESIONAL DE
INGENIERIA AGROINDUSTRIAL
I.- RESUMEN
Staphylococcus aureus es un especie bacteriana integrada por formas cocaceas .es
una especie muy sensibles a la accin del calor y de los desinfectante. En esta
prctica se realiz con una finalidad de determinar la numeracin de S.aureus en
alimentos y las caractersticas de colonias representativas. Aisladas en un medio de
cultivo agar Baird Parker ms yema de huevo como emulsionante, efectuando con un
mtodo de diseminacin en placas. Dando que en las pruebas de confirm se dio
negativo en el acidez del manitol, mientras en las otras pruebas no se logr la
confirmacin, por motivos de inoperatividad del microscopio ptico o falta de un
mantenimiento de limpieza en su lente ptico respectivamente.
I.
INTRODUCCIN
II.
OBJETIVOS:
Determinar la numeracin de staphylococcus aureus en alimentos.
Evala las caractersticas de las colonias y las clulas bacterianas al
microscopio ptico.
III.
MARCO TEORICO
DESCRIPCIN DE LA BACTERIA:
Staphylococcus es un gnero de bacterias anaerobias Gram-positivas productoras de
enterotoxinas termoestables ampliamente distribuida en el medio ambiente y presente en
las mucosas de los animales y personas, transmitindose al ser humano a travs de
alimentos contaminados, generndole una toxiinfeccin alimentaria.
LAS TRES CONDICIONES NECESARIAS PARA SU PTIMO DESARROLLO SON:
o PH cercano a la neutralidad
o Temperatura alrededor de 30C
o Ausencia de microorganismos competitivos.
Este ltimo punto es importante, ya que Staphylococcus aureus no es competitivo en
presencia de otros microorganismos.
Condiciones de crecimiento de las toxinas producidas por Staphylococcus aureus
Mnimo
ptimo
Temperatura
10
40-45
48
pH
7-8
9,6
0,85
0,98
0,99
Actividad
agua
del
Mximo
Estos ltimos, los animales y las personas son los principales reservorios de estos
microorganismos.
En los humanos, las cepas de Staphylococcus habitan en forma especfica en el tracto
nasofarngeo, cabello y piel del 50% o ms de los individuos, sin causar dao aparente
(portadores asintomticos), pudiendo transferirse de los dedos y manos a los alimentos y
desarrollarse con rapidez en ellos. La especie aureus, es la considerada patgena dentro
del gnero Staphylococcus y est comnmente asociado a casos de artritis, osteomielitis,
meningitis, neumona y en algunos casos puede llegar a ocasionar prdida del
conocimiento. Las cepas de este microorganismo que producen enzimas extracelulares y
toxinas, son las ms importantes por ser causante de intoxicaciones alimentarias.
COMO SE PRODUCE LA CONTAMINACION EN LOS ALIMENTOS:
o los alimentos son susceptibles a una contaminacin post proceso con tipos
enterotoxignicos de Staphylococcus aureus, por ejemplo, si son sometidos a un
inadecuado manejo o bien a temperaturas de conservacin inapropiadas; este
problema se acenta por la ausencia de flora competitiva, que normalmente
restringe el desarrollo de este microorganismo
o El crecimiento de Staphylococcus aureus en alimentos, tiene gran importancia por
tratarse de un microorganismo capaz de producir una poderosa enterotoxina, que
al ingerirse causa intoxicaciones severas al hombre.
Como se mencion con anterioridad son 5 enterotoxinas: A, B, C, D y E, siendo la A la
ms nociva La cantidad de Staphylococcus aureus necesaria para producir suficiente
toxina (1.0 microgramo), para causar intoxicacin, es de 100 UFC/g de alimento, de
acuerdo con la Norma
o perceptible en cuanto a su apariencia, sabor y olor, por lo que no se distinguen de
los alimentos que no estn contaminados con este microorganismo, por esta razn
el peligro de ingerir alimentos contaminados con Staphylococcus aureus sin darse
cuenta es alto.
o Los alimentos sometidos a intensa manipulacin durante su preparacin y que se
mantienen a temperaturas de riesgo (por encima de 7.2 C y por debajo de 60
Enterotoxinas de S. aureus
Enterotoxina
Concepto
Enterotoxina A Asociada a la mayora de las intoxicaciones alimentarias.
Enterotoxina B Produce colitis pseudo-membranosa y se encuentra con
COAGULASA-POSITIVO:
El trmino Staphylococcus coagulasa-positivo se utiliza para describir aquellas cepas que
secretan una enzima que provoca coagulacin del fibringeno sanguneo, utilizando el
microorganismo esta capacidad contra la fagocitosis y otros mecanismos de defensa del
husped.
Cultivo
Los estafilococos crecen rpidamente en casi todos los medios bacteriolgicos bajo
condiciones aerobias o microaeroflicas.
Tiempo de cultivo en Sal-manitol
24 h
24-48 h
72 h
Lavar bien las frutas y hortalizas con agua corriente cuando vayan a ser
consumidos en crudo.
Mantener la cadena de fro durante el transporte de los alimentos crudos
susceptibles de ser contaminados con S. aureus.
Mantener los alimentos elaborados con huevo crudo como mayonesa, salsas,
helados, cremas, masas de pastelera a temperaturas seguras (calientes por encima
de 60C o refrigerados en la nevera) hasta su consumo.
Cuadro N01 lmites permisibles
Alimento
Quesos a base de
leche cruda
Leche en polvo y
Fase en la que se
aplica el criterio
Accin en caso
de resultados
insatisfactorios
En el momento del
proceso de
fabricacin en el
que se prevea que
el nmero de
estafilococos ser
el mximo
Mejoras en la
higiene de la
produccin y
seleccin de las
materias primas. Si
se detectan valores
> 105ufc/g, el lote
de queso deber
ser sometido a
pruebas para
enterotoxinas
estafiloccicas
Mejoras en la
higiene de la
produccin. Si se
detectan valores >
105ufc/g, el lote de
queso deber ser
sometido a
pruebas para
enterotoxinas
estafiloccicas
Mejoras en la
higiene de la
produccin. Si se
detectan valores >
10 100 ufc/g
de fabricacin
105ufc/g, el lote de
queso deber ser
sometido a
pruebas para
enterotoxinas
estafiloccicas
MATERIALES E INSUMOS
Queso fresco
Balanza digital
Placas preti
Pipetas
Frasco tapa rosca
Contador de colonias
Esptula de drigalski
Varilla de vidrio
INSUMOS
Agar Baird Parker
Agar manitol sado
Emulsin de yema de huevo
REACTIVOS Y COLORANTES
Reactivo para la catalasa (perxido de hidrogeno)
Kit para la coloracin Gram
Cepas o patrones de referencia}
V.
PROCESDIMIENTO
PARA EL DA 1 Y 2
DIA 3
CALCULOS REALIZADOS:
Para agar Baird Parker
63 gr-------------------950ml
111gr------------------1000 ml
X-------------------92ml
X--------------------35 ml
X= 3.9 gr
MICROBIOLOGIA AGROINDUSTRIAL
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Cristal violeta
Lugol
Alcohol acetona
Safranina
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RESULTADOS
Factor de
dilucin (ml)
Agar Baird
Parker +
yema de
huevo
Color de
colonias
101
Amarillento
cremoso
102
Amarillento
cremoso
Por
cuadrantes
49
37
26
25
13
10
24
Ufc/ml
1.37 x 104
5.1 x 10
103
translucidos
cremosos
1
5
0
3
9 x 10
N
VxFd
Acidez del
manitol
Prueba de catalasa
Se realiz la
coloracin Gram
respectivamente
con dos
portaobjetos. No
se logr divisar
En el agar
manitol dio un
viraje de color
rojo, esto nos
indica que es
negativo (-).
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cocos en
racimos en el
microscopio
ptico.
VII.
DISCUSIONES
Este microrganismo Staphylococcus aureus es reconocido como
patgeno humano siendo el agente de un amplio aspecto de intoxicacin
de origen comunitario y hospitalario.
1.04105 x 10
1.37 x 104
ufc/g dando en un
de
coagulasa positiva, encontrando una prueba negativa en la prueba
confirmativa de acidez del manitol, mientras en la coloracin y de la
catalasa no se observ bien las caractersticas de S.aureus. Por factores
de problema del microscopio ptico y un reactivo que no se encontr en
laboratorio de microbiologa.
VIII.
CONCLUSIONES
Pudimos ver: cmo podemos mostrar en los resultados con una carga
microbiana fue de
1.37 x 10
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Siendo