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FACULTAD DE BIOLOGA
TESIS
TRABAJO DE EXPERIENCIA RECEPCIONAL
QUE PRESENTA:
DIRECTOR:
Biol. S. Augusto Hernndez Rivera
XALAPA, VER.
2009
CONTENIDO
RESUMEN
I.- INTRODUCCIN Y ANTECEDENTES... 4
1.1.- La contaminacin.4
1.2.- El problema de la contaminacin en los cuerpos de agua ......5
1.3.- Contaminacin bacteriana en el agua subterrnea......6
1.4.- Microorganismos patgenos: Indicadores de contaminacin ... 9
1.5.- Bacterias de importancia clnica en el agua de consumo . 11
II.- OBJETIVOS. 14
III.- MATERIALES Y MTODOS... 15
3.1.- rea de estudio........................ 15
3.2.- Determinacin de los manantiales muestreados.............. 18
3.3.- Material biolgico............ 19
3.4.- Determinacin de coliformes totales y fecales.................... 20
3.5.- Obtencin, aislamiento y purificacin de bacterias......... 21
3.6.- Determinacin de gneros bacterianos........ 21
3.7.- Pruebas diferenciales para la familia Enterobacteriaceae........ 22
3.8.- Pruebas diferenciales para el gnero Vibrio spp. 24
3.9.- Pruebas diferenciales para el gnero Pseudomona spp.. 25
IV.- RESULTADOS... 26
4.1.- Palenquillo....... 26
4.2.- Ocotita..... 28
RESUMEN
La contaminacin del agua se ha vuelto un problema a nivel mundial, ya que en las ltimas
dcadas se ha observado el incremento de contaminantes en los mares, ro, lagos y acuferos.
El presente trabajo tuvo como objetivos evaluar la calidad bacteriolgica, aislar y obtener cepas
bacterianas, as como la determinacin de bacterias patgenas en loas principales manantiales
del municipio de Banderilla, Veracruz.
El trabajo se realiz en los meses de Enero, Marzo, Abril, Mayo y Junio del ao 2008. Se
analizaron 34 muestras de agua de los principales manantiales del municipio de Banderilla,
Veracruz. De estas muestras se aislaron los gneros pertenecientes a la familia de las
Enterobacteriaceae, entre los que destacan Salmonella spp., Escherichia spp., Enterobacter spp.,
Citrobacter spp. y Serratia spp., as como el gnero Pseudomona spp. Tambin se encontraron
Klebsiella spp., Proteus spp., Providencia spp., Aeromona spp. y Vibrio spp. En conclusin, se
encontraron coliformes totales y fecales en la mayora de los manantiales as como gneros
bacterianos patgenos, por lo cual la calidad del agua se considera deficiente. El manantial La
fragua se encontr libre de coliformes, sin embargo, se logr aislar el gnero Pseudomona spp.,
conocido como patgenos oportunistas, el cual puede causar un efecto daino en las personas
que llegasen a ingerirlas por medio del agua.
1.1.- La contaminacin
Actualmente el problema de la contaminacin es uno de los principales temas de atencin y
discusin, sin embargo, esta se presenta en mayor magnitud en las grandes ciudades, debido a
que las concentraciones poblacionales hacen que los desechos que generan las actividades
sociales y productivas se manifiesten con mayor incidencia y peligrosidad en el medio ambiente
(Rivera et al., 2006).
La contaminacin, en trminos generales, es la introduccin de un contaminante en el medio,
puede ser un agente fsico, qumico o biolgico en lugares, formas y concentraciones que pueden
ser perjudiciales para la salud o reducen la capacidad de las reas afectadas para mantener la vida.
Si bien es cierto que el suelo y el aire presentan niveles de contaminacin; el agua, ya sea esta en
corrientes subterrneas o a cielo abierto en nacimientos y ros, por estar sometida de manera
constante a la accin de las actividades antropognicas y disminuyendo de manera significativa
su calidad, cobra mayor importancia (Fernndez y Fernndez, 2007).
La contaminacin del agua puede observarse desde dos puntos de vista: la contaminacin
antropognica y contaminacin natural. La contaminacin antropognica puede ser dividida en
tres tipos: bacteriolgica, inorgnica, y orgnica. La contaminacin natural esta relacionada
principalmente con reas donde se encuentran elementos o compuestos naturales que son txicos
como el plomo o arsnico (Marn, 2004).
(Aurazo, 2004). De acuerdo a la Organizacin Mundial de la Salud (OMS) el agua debe ser
adecuada para el consumo humano y para todo uso domstico habitual, en el caso de
microorganismos patgenos y oportunistas no deben estar presentes en el agua potable destinada
al consumo, preparacin de alimentos, bebidas e higiene personal (Soto et al., 2006).
Serratia y Escherichia, presentndose con mayor frecuencia los gneros Escherichia, Serratia y
Enterobacter, los cuales son responsables de algunos cuadros clnicos de gastroenteritis. Debido
al uso y consumo de esta agua sin ningn tratamiento los habitantes han presentado problemas de
salud.
En Chiapas, a pesar de la cantidad de recursos hidrolgicos con los que cuenta el estado, se sufre
de la disponibilidad de agua de ptima calidad; en cuanto a enfermedades infecciosas y
parasitarias, es uno de los estados con mayor incidencia en el pas, causando mortalidad y estando
asociadas algunas al consumo de agua (Snchez et al., 2000). Por otra parte, anlisis realizados
por Isaac et al. (1994) en la ciudad de Campeche, se enfocaron en conocer la calidad de las
fuentes de abastecimiento de agua, obteniendo que ms del 50% de los suministros de agua de la
ciudad de Campeche, presentan niveles de organismos coliformes no permisibles en aguas para
consumo humano, demostrando la deficiente calidad de los suministros y su entorno, poniendo en
riesgo la salud de la poblacin.
De manera similar, Mazari et al. (1997) realizaron estudios en la ciudad de Mxico enfocados a
determinar la calidad del agua de consumo en 5 pozos que se encuentran en la zona metropolitana
de la ciudad, mostrando contaminacin por la presencia de coliformes fecales y totales en la
mayora de los pozos.
En la parte norte del pas, tambin se han efectuado estudios para observar la calidad del agua de
consumo, por ejemplo, en el estado de Sonora, Sols et al. (2005) realizaron una evaluacin de la
calidad del agua subterrnea en los pozos de abastecimiento de agua de consumo en dos pocas
del ao en diferentes poblados, detectando coliformes fecales y totales en concentraciones no
aptas para su consumo de acuerdo a la NOM-127-SSA1-1994.
En Sinaloa, especficamente Culiacn y Navolato, Soto et al. (2006) determinaron la presencia
de coliformes totales y fecales, logrando aislar tambin patgenos oportunistas como
Pseudomona aeruginosa y Aeromona que tienden a pasar desapercibidos debido a que su
presencia no se detecta por los mtodos comnmente usados para la determinacin de la calidad
del agua, por lo que el agua no es apta para su consumo.
El estado de Veracruz se caracteriza por disponer de una gran cantidad de recursos hdricos, en
comparacin con otras entidades del pas. La precipitacin media anual representa casi el doble
de la media nacional y por sus cauces fluye un tercio del escurrimiento total del pas. En cuanto a
los mantos acuferos, Veracruz tambin dispone, aunque no en la misma forma ni en toda su
extensin,
de
abundantes
recursos
subterrneos,
en
condiciones
ptimas
para
su
Los estudios existentes en materia de calidad del agua de los principales ros del estado, revelan
que en los 14 ros ms importantes se registran niveles importantes de contaminacin, en cuanto a
los acuferos, se realizan mediciones del nivel del agua subterrnea con cierta periodicidad, sin
embargo, la actualizacin de los estudios de stas no se realiza con frecuencia, al igual que los
censos de aprovechamiento (CSVA, 2005).
El municipio de Banderilla posee una gran diversidad de manantiales que proveen de agua en
tiempo de escasez o falta total del servicio de agua potable para consumo humano y los diversos
usos para los que es destinada, por ello es indispensable mantenerlos en buenas condiciones
(Landa, 2006). Estudios previos realizados a los manantiales mostraron concentraciones mnimas
o nulas de coliformes totales y fecales, pero no as de bacterias patgenas, las cuales representan
un serio riesgo para la salud pblica y es prioritario eliminarlas del agua de consumo humano,
debido a que su ingestin podra traer consecuencias para la salud de la poblacin .
de
Estas bacterias pueden producir una variedad de infecciones que ingresan por la piel, las
membranas mucosas de los ojos, odos y la nariz, por va oral e inhalacin y tienen resistencia
entre leve y moderada al cloro (Aurazo., 2004). Algunas de las especies ms importantes son: P.
aeruginosa, P. fluorescens, P. putida, P. maltophila y P stutzeri (Arcos et al., 2005, Marchand,
2002).
Lo antes mencionado, permite tener un panorama amplio de la importancia que resguarda el
cuidado del medio ambiente y que asegure la no contaminacin de las fuentes de abastecimiento
del agua, ya que al verse alterada la calidad de la misma, el impacto que suele tener en la salud de
las poblaciones que las consumen puede verse afectada de manera considerable. Por ello, con el
fin de evitar algn dao posterior a la poblacin, es importante la determinacin de cepas
bacterianas patgenas presentes en los principales manantiales del municipio de Banderilla, ya
que una nica exposicin a un agente patgeno puede bastar para provocar una enfermedad.
ll.- OBJETIVOS:
General:
Caracterizacin de cepas bacterianas patgenas
coordenadas 19 35 latitud norte y 95 56 longitud oeste, a una altura de 1600 metros sobre el
nivel del mar. Limita al norte y noreste con Jilotepec, al este y sur con Xalapa, al suroeste y oeste
con Rafael Lucio. Tiene una superficie de 22.21 km2, cifra que representa un 0.03 % del total del
Estado (Fig 1).
Fig.1.- Mapa de Veracruz donde se observa la ubicacin del municipio de Banderilla (INEGI,
2008).
Orografa
El Municipio se encuentra ubicado en la zona central del Estado en el eje neovolcnico, en las
estribaciones ltimas del Cofre de Perote, por lo que su topografa es irregular, pero sin
accidentes de importancia. El cerro de mayor consideracin es el de La Martinica.
Hidrografa
Al municipio lo riegan pequeos ros tributarios del ro Sedeo, que a su vez es tributario del ro
Actopan.
Clima
Su clima es fro-hmedo con una temperatura promedio de 18 C; su precipitacin pluvial media
anual es de 1 500 mm.
Principales Ecosistemas
Los ecosistemas que coexisten en el municipio son el de bosque mesfilo, un ejemplo es el rea
protegida la Martinca, en el cual se puede observar flora y fauna nativa del lugar, en donde las
trepadoras leosas son abundantes y las especies caractersticas del estrato arbreo son: Carpinus
caroliniana (pipinque), Clethra mexicana (marangola), Liquidambar styraciflua (liquidmbar),
Calocedrus decurrens (cedro blanco), Manilkara zapota (zapotillo) y Ulmus minor
(olmo), as
como helechos arborescentes del gnero Cyathea en peligro de extincin. Esta rea es la nica del
pas en la que se pueden observar ms de 140 especies de helechos. La fauna esta compuesta por
poblaciones de Meles meles (tejon), Didelphis virginiana (Tlacuache), Mephitis mephitis
(zorrillo), Oryctolagus cuniculus (conejo), Dasypus novemcinctus (armadillo) y Eutamias
sibiricus (ardilla).
Recursos Naturales
Su riqueza esta representada por minerales como el gilsonita, cales y bauxita.
El boquern 2
Ocotita
La mistela
lamos
1
Poza Verde
La fragua
Palenquillo
Fig. 2.- Localizacin de los manantiales en el municipio de Banderilla, Veracruz (INEGI, 2008).
Ubicacin
1M
Palenquillo
2M
Ocotita
Prolongacin 20 de Mayo
3M
lamos 1
4M
La fragua
5M
La mistela
6M
Poza verde
Calle Palenque
7M
Boquern 2
enterobacterias se les realiz pruebas diferenciales para determinar el gnero de las mismas. Las
pruebas diferenciales realizadas fueron:
Indol.- Algunos gneros bacterianos tienen triptfano, el cual puede ser hidrolizado por la enzima
triptofanasa si esta presente y producir indol. Esta prueba se basa en la reaccin producida por el
agregado del reactivo de Kovacs a un cultivo puro de 24 hrs. en caldo de triptona y la formacin
de un anillo rojo o fucsia como resultado del mismo. NOTA: Para esta prueba tambin se puede
utilizar el medio MIO y observar esta reaccin despus de observar la descarboxilacin de la
Ornitina y la movilidad.
Rojo de Metilo.- Una de las caractersticas taxonmicas que se utilizan para identificar los
diferentes gneros de enterobacterias lo constituyen el tipo y la proporcin de productos de
fermentacin que se originan por la fermentacin de la glucosa. El rojo de metilo es un indicador
de pH con un intervalo de viraje entre 6,0 (amarillo) y 4,4 (rojo), que se utiliza para visualizar la
produccin de cidos por la va de fermentacin cido mixta. Las bacterias que dieron positivo a
esta prueba tomaron un color rojo, aquellas que conservaron un color anaranjado o amarillento,
se tomaron como negativas.
Voges- Proskauer.- El acetil-metil-carbinol (o acetona) es un producto intermediario en la
produccin de butanodiol. En medio alcalino y en presencia de oxgeno la acetona es oxidada a
diacetilo. Este se revela en presencia de alfa-naftol dando un color rojo-fucsia. Para realizar esta
prueba, se requiri de un cultivo puro de 24 hr, se le agregaron los reactivos A y B, dejando
reposar por 15 minutos a 4 hrs, se tom como positiva la prueba cuando se present un color rojo
en el medio de cultivo, los tubos que no presentaron este color se tomaron como negativos.
Utilizacin del citrato.- Algunas enterobacterias pueden utilizar el citrato como nica fuente de
carbono. Por estriado, se sembr un cultivo fresco en cajas de agar citrato de Simmons, el
crecimiento o cambio de color en el medio indic que el microorganismo utilizaba el citrato y por
lo tanto daba positivo a esta prueba.
Ureasa.- La ureasa es una enzima que poseen muchas especies de microorganismos que pueden
hidrolizar urea con liberacin de amonaco y dixido de carbono. Se sembr por estriado
superficial una pequea porcin de la cepa a identificar en agar urea de Christensen y se incub.
lV.- RESULTADOS
De los cuatro muestreos llevados a cabo, se obtuvieron34 muestras en total de las cuales 28
resultaron positivas para coliformes totales y 20 para coliformes fecales. A continuacin, se
muestran los resultados obtenidos en cada manantial:
4.1.-Palenquillo
Determinacin de coliformes totales y fecales.
Los coliformes totales se determinaron en los meses de Marzo, Abril, Mayo y Junio. Solo en los
meses de Marzo y Junio se observ la presencia de coliformes fecales (tabla 2).
Tabla 2.- Presencia de coliformes totales y fecales en el manantial Palenquillo de Banderilla, Veracruz.
Organismos
Enero
Marzo
Coliformes totales
Abril
Mayo
Junio
15
El aislamiento de las cepas bacterianas por medio de agares selectivos ayudo a una mejor
diferenciacin por la forma y el color que tomaron las colonias y a lograr una mejor purificacin
(fig. 3). De acuerdo a las pruebas que se les realiz a las cepas, algunas daban positivo para el
gnero Salmonella, por lo que se sembr en agar Sulfito y bismuto, en donde las colonias de este
gnero toman un color y forma caracterstico (fig.4).
Enero
Marzo
No se
Escherichia
Enterobacter
Enterobacter
spp.
spp.
spp.
Escherichia
Citrobacter spp.
Proteus spp.
Eschericha coli
Aeromona spp.
Citrobacter spp.
obtuvieron
Abril
Mayo
Junio
Enterobacter spp.
Gneros bacterianos
cepas
coli
Salmonella spp.
Pseudomona spp.
4.2.- Ocotita
Determinacin de coliformes totales y fecales
En este manantial se observ la presencia de coliformes totales en todos los meses y
coliformes fecales solo en los meses de Abril, Mayo y Junio, sin embargo, las
cantidades son mnimas (Tabla 4).
Tabla 4.- Presencia de coliformes totales y fecales en el manantial Ocotita de Banderilla,
Veracruz.
Organismos
Coliformes totales
Enero
Marzo
Abril
Mayo
Junio
11
11
+
)
Gneros bacterianos
Enero
Marzo
Enterobacter
Enterobacter
spp.
spp.
Abril
Salmonella spp.
Mayo
Proteus spp.
Junio
Enterobacter
spp.
Pseudomona
Pseudomona
Pseudomona
Pseudomona
spp.
spp.
spp.
spp.
Escherichia spp.
Escherichia coli
Providencia
Eschericha coli
spp.
Citrobacter spp.
Citrobacter spp.
Providencia spp.
Aeromona spp.
Serratia spp.
Aeromona spp.
4.3.- lamos 1
Determinacin de coliformes totales y fecales
Este manantial es uno de los ms usados por los habitantes y se encuentra en una zona
de fcil acceso, sin embargo, en todos los meses se observa la presencia de coliformes
totales y en los meses de Marzo, Mayo y Junio se encontraron coliformes fecales,
presentndose en mayor cantidad el ltimo mes (Tabla 6).
Tabla 6.- Presencia de coliformes totales y fecales en el manantial lamos 1 de Banderilla,
Veracruz.
Organismos
Coliformes
totales
Enero
Marzo
Abril
Mayo
Junio
11
93
23
Una de las primeras pruebas diferenciales que se realiz para la identificacin de las
enterobacterias fue sembrar las cepas en agar de hierro y triple azcar (TSI) debido a los
cambios de color que producen en este medio. La especie Escherichia coli produce un
viraje de color del medio a amarillo y produccin de gas (fig. 10),
especies
Enero
Marzo
Escherichia
spp.
Escherichia
coli.
Citrobacter spp.
Escherichia coli
Eschercichia coli
Enterobacter
spp.
Enterobacter
spp.
Enterobacter spp.
Enterobacter spp.
Serratia spp.
Serratia spp.
Aeromona spp.
Aeromona spp.
Gneros bacterianos
Escherichia spp.
Abril
Mayo
Junio
Providencia spp.
Pseudomona spp
Edwarsiella spp..
Vibrio spp.
Salmonella spp
4.4.- La fragua
Determinacin de coliformes totales y fecales
Este manantial es el ms usado por los habitantes del municipio y su aspecto refleja el
cuidado que se le tiene. Fue el nico manantial que no present coliformes totales o
fecales en ningn mes (Tabla 8).
Tabla 8.- Presencia de coliformes totales y fecales en el manantial La fragua de Banderilla,
Veracruz.
Organismos
Enero
Marzo
Abril
Mayo
Junio
Coliformes totales
(NMP/ 100 ml)
Coliformes fecales
(NMP/ 100 ml)
El gnero Pseudomona es uno de los gneros que no suele ser exigente ante las
condiciones ambientales que le rodean por lo que tiene una amplia distribucin. Cuando
se sembr en agar TSI se distingui por darle un color rojo a todo el tubo, caracterstico
de las no fermentadoras (fig. 13), el crecimiento en agar PIA (fig. 14) as como la
movilidad (fig. 15) y la reduccin de nitratos a nitritos y la desnitrificacin (fig. 16),
indicaba que corresponda al gnero Pseudomona, adems de ser capaz de utilizar el
citrato como nica fuente de carbono (fig. 17).
bacterianos
Gneros
Enero
Marzo
Abril
Pseudomona
Pseudomona
Pseudomona
spp.
spp.
spp.
Mayo
Junio
4.5.- La mistela
Determinacin de coliformes totales y fecales
Este manantial presenta condiciones deplorables, ya que no esta cubierto y se encuentra
en el suelo sin que algo lo proteja, adems de que una corriente de aguas domsticas
pasa a su lado. Por ello, es evidente la presencia de coliformes totales y fecales en la
mayora de los muestreos, a excepcin del mes de Enero donde no se encontraron
coliformes fecales (Tabla 10).
Tabla 10.- Presencia de coliformes totales y fecales en el manantial La mistela, municipio de
Banderilla, Veracruz.
Organismos
Coliformes totales
Enero
Marzo
Abril
Mayo
Junio
14
15
23
15
Gneros bacterianos
Enero
Marzo
Abril
Mayo
Junio
Enterobacter
spp.
Enterobacter
spp.
Enterobacter
spp.
Salmonella spp.
Enterobacter spp.
Escherichia spp.
Escherichia coli
Escherichia
spp.
Escherichia coli
Escherichia coli
Aeromona spp.
Aeromona spp.
Aeromona spp.
Providencia spp.
Edwarsiella
spp.
Citrobacter spp.
Serratia spp.
Vibrio spp.
Pseudomona spp
Pseudomona spp.
Proteus spp.
Proteus spp.
Vibrio spp.
Organismos
Enero
Marzo
Abril
Mayo
Junio
Coliformes totales
--------
21
--------
Existen gneros, como Proteus, que poseen caractersticas relevantes que ayudaron
mucho a su identificacin. Este gnero posee una gran movilidad (fig. 20) adems de ser
uno de los gneros que posee la enzima ureasa (fig. 21) y la degrada con rapidez. Otras
pruebas para su identificacin es la negatividad para la prueba de Voges- Proskauer (fig.
22) y la utilizacin del citrato (fig. 23).
Gneros bacterianos
Enero
Marzo
Abril
Mayo
Junio
Enterobacter
spp.
Enterobacter
spp.
Proteus spp.
Citrobacter
spp.
Escherichia spp.
Escherichia
spp
Escherichia
spp.
Escherichia coli
Escherichia
coli
Escherichia
coli
Pseudomona
spp.
Pseudomona
spp.
Pseudomona
spp.
Aeromona spp.
Aeromona spp.
Providencia
spp.
Edwarsiella
spp.
Vibrio spp.
Serratia spp.
No hubo
agua en el
manantial.
Enterobacter
spp.
Salmonella
spp.
4.7.- Boquern 2
Determinacin de coliformes fecales y totales
El manantial Boquern 2 present en todos los muestreos coliformes fecales y totales,
en diferentes cantidades (Tabla 14), sin embargo, esto es predecible debido a que se
encuentra a la orilla de la carretera que lleva a Jilotepec, y esta a cielo abierto. Algunas
personas que consuman el agua dejaron de hacerlo por las enfermedades que les
ocasiono, sin embargo, no dejan de utilizarla para otras actividades.
Tabla 14.- Presencia de coliformes totales y fecales en el manantial Boquern 2 de Banderilla,
Veracruz.
Organismos
Coliformes totales
Enero
Marzo
Abril
Mayo
Junio
15
28
32
93
14
22
28
Las pruebas realizadas a las cepas que probablemente pertenecan al gnero Vibrio,
fueron basadas en que no fermentan la lactosa (fig.24) y que crecen en concentraciones
no muy elevadas de sal (fig. 25).
Para la determinacin del gnero Salmonella se realizaron las cuatro pruebas bsicas
para los gneros pertenecientes a la familia Enterobacteriaceae, la utilizacin del citrato
(fig. 26), la positividad al rojo de metilo (fig. 27), la negatividad al indol (fig. 28) y la
movilidad (fig. 29). El agar Sulfito y Bismuto sirvi como complemento a los resultados
arrojados por las pruebas, ya que las cepas que de acuerdo a las pruebas pertenecan al
gnero Salmonella, fueron sembradas en este medio, confirmando el resultado y
observando un medio negruzco por la produccin de cido sulfhdrico (fig. 30).
con
Gneros bacterianos
Enero
Marzo
Abril
Mayo
Junio
Enterobacter spp.
Enterobacter spp.
Enterobacter spp.
Enterobacter spp.
Enterobacter spp.
Escherichia coli
Escherichia coli
Escherichia coli
.
Escherichia coli
Escherichia coli
Escherichia spp.
Providencia spp.
Escherichia spp
Citrobacter spp
Escherichia spp.
Pseudomona spp.
Pseudomona spp.
Pseudomona spp.
Pseudomona spp.
Pseudomona spp.
Aeromona spp.
Aeromona spp.
Aeromona spp.
Aeromona spp.
Citrobacter spp.
Klebsiella spp.
Klebsiella spp.
.
Providencia spp.
Providencia spp
Salmonella spp.
Salmonella spp.
Vibrio spp.
Vibrio spp.
Tabla 16.- Concentrado de los gneros presentes en los manantiales de Banderilla, Ver.
Meses
Enero
Manantiales
1M
No se
obtuvieron
bacterias
Marzo
Abril
Mayo
Junio
2M
3M
4M
No se
obtuvieron
bacterias
No se
obtuvieron
bacterias
5M
6M
No hubo
muestra de
agua
Gneros
bacterianos
7M
Enterobacter
spp.
Escherichia
spp
Escherichia
coli.
Citrobacter
spp.
Proteus
spp.
Aeromona
spp.
Salmonella
spp.
Pseudomona
spp.
Providencia
spp.
Serratia
spp.
Vibrio spp.
Edwarsiella
spp.
Klebsiella
spp.
Hongo
V.- DISCUSIN
De acuerdo a los estudios realizados a travs de anlisis bacteriolgicos a los
manantiales Palenquillo, Ocotita, lamos 1, La fragua, La mistela, Poza verde y El
boquern 2, del municipio de Banderilla, Veracruz y siguiendo los lineamientos
establecidos por la Norma Oficial Mexicana NOM -127-SSA1-1994, el agua de los
manantiales no cumple con los mismos, por lo que debe considerarse que su calidad en
la mayora de los casos no es apta para consumo humano. Lo anterior es coincidente con
lo reportado por Ramrez (2004) quien llev a cabo anlisis en estos cuerpos de agua y
reporta para los mismos, la presencia de coliformes totales y fecales a niveles mayores a
los permitidos. De igual manera, Landa (2006) seala en su estudio realizado en la
misma zona, la presencia de coliformes totales en todos los manantiales en los
diferentes muestreos y coliformes fecales, como en el caso de La mistela y lamos, a
niveles no aceptables en el agua y por lo mismo, no es apta para consumo humano, lo
cual reafirma los resultados que se reportan a la fecha en nuestros anlisis realizados,
sumndose a ello el reporte de la presencia de bacterias patgenas oportunistas como es
el caso de los gneros Klebsiella spp., Proteus spp., Providencia spp., Enterobacter
spp., Serratia spp., Citrobacter spp., Pseudomona spp y Aeromona spp., no reportados
en ningn trabajo realizado para el mismo, y que pueden ser causantes de daos a la
salud de quienes las consuman, lo que denota la importancia de poder reportar estos
gneros.
Lo anterior guarda coincidencia con trabajos realizados por investigadores en otros
pases, quienes llevaron acabo estudios sobre calidad del agua, como los presentados
por Powell et al. (2003) en acuferos del Reino Unido y Close y Dann (2005) en aguas
subterrneas en zonas de Nueva Zelanda y en nuestro pas por Isaac et al. (1994) en
suministros de agua para consumo humano en Campeche y de igual manera Mazari et
al. (1997) en la zona geohidrolgica del sur de la ciudad de Mxico, los cuales muestran
concentraciones elevadas de coliformes tanto totales como fecales, que ponen en riesgo
la salud de quien las consume, lo que tiene similitud con los resultados que se reportan
en este trabajo.
En la mayora de las muestras tomadas en nuestros estudios a los 7 manantiales, se
observ la presencia de bacterias pertenecientes a los gneros Enterobacter spp.,
Escherichia spp., Providencia spp., Citrobacter spp., Serratia spp., Pseudomona spp. y
Aeromona spp., as como la especie Escherichia coli, situacin similar a lo reportado
por Lamka et al. (1980) en su estudio a agua de consumo humano en una zona rural
cercana a Oregn, donde no solo encontr coliformes totales y fecales, tambin
determin la existencia de diversas especies, entre las que destacan Citrobacter freundii,
Klebsiella pneumonie y Escherichia coli, adems de otros gneros bacterianos como
Pseudomona spp, Aeromona spp, Sthaphylococcus y Moraxella spp, entre otros;
resultados similares presenta Pacheco et al. (1999) en aguas subterrneas de Yucatn,
mostrando la presencia de coliformes totales y fecales que sobrepasaban los lmites
permisibles para una buena calidad del agua, as como los gneros bacterianos
Citrobacter spp., Enterobacter spp., Serratia spp., Klebsiella spp. y Escherichia spp.,
considerados dentro de los coliformes totales y que son considerados microorganismos
oportunistas demostrando que daan la salud de quienes consumen estas aguas
provocando gastroenteritis, septicemias y diversas infecciones. Por otro lado, Pac Sa et
al. (1998) en su estudio sobre un brote de gastroenteritis aguda en una zona rural de
Castelln, Espaa, el cual se asoci al consumo de agua de una acequia; mostr, por
medio de anlisis qumicos y bacteriolgicos, la presencia de contaminacin fecal y se
evidenci la presencia de especies pertenecientes al gnero Salmonella, cuyos
resultados confirman nuestro estudio, ya que tambin se logr aislar cepas
pertenecientes al gnero Salmonella spp. en los manantiales Palenquillo, lamos 1, La
mistela, Poza verde y El boquern.
En los manantiales, objeto de estudio, los anlisis permitieron identificar cepas
pertenecientes al gnero Pseudomona, lo cual es semejante a lo reportado por Vendrell
et al. (1998) en los estudios realizados a manantiales de aguas termales en OTinteiro en
Oruense, Espaa, que muestran la existencia de contaminacin por coliformes totales y
fecales, as como por Pseudomona spp. y Enterococcus, en ms de un punto
muestreado; as tambin Soto et al. (2006) en estudios realizados en nuestro pas a
aguas subterrneas que surten a travs de pozos a zonas de Navolato y Culiacn,
Sinaloa, observaron la presencia de coliformes totales y fecales que sobrepasan de
manera negativa su presencia en esta agua, las cuales por estos motivos, no son aptas
para consumo humano, del mismo modo, obtuvieron los gneros Pseudomona spp. y
Aeromona spp., considerados como patgenos oportunistas, causantes de diversas
infecciones en nios, adultos mayores y personas enfermas. De manera similar, el
estudio realizado por Garca et al. (2006) a aguas subterrneas en pozos tubulares
(extrada por bombas manuales) y con reservorio en las localidades de Santa y Coishco
en la Costa Central del Per, muestra la presencia de especies como Vibrio cholerae No
01, Aeromona caviae y Aeromona hidrophyla en ms de un pozo, estas ltimas en
mayor cantidad, lo que coincide con el presente trabajo, ya que tambin se lograron
identificar los gneros a los que pertenecen estas especies en los manantiales analizados.
Finalmente, Marchand (2002) concluye en su estudio en Lima, Per con la importancia
de la determinacin del gnero Pseudomona spp. y los Estreptococos fecales, como
indicadores complementarios de la calidad del agua para consumo humano debido a los
daos en la salud que pueden causar, especficamente Pseudomona, ya que el no
detectar coliformes totales o fecales, no indica totalmente la buena calidad del agua, lo
cual reafirma el resultado obtenido en nuestro estudio del manantial La fragua, ya que
en ningn muestreo se observ la presencia de coliformes totales o fecales, sin embargo,
se obtuvieron cepas pertenecientes al gnero Pseudomona spp. en los meses de Marzo,
abril y Junio.
Como lo muestran nuestros resultados, la ubicacin en la que se encuentran las tomas
de agua de los manantiales se ve reflejada en la calidad del agua, ya que se observa una
mayor cantidad de coliformes totales y fecales as como diversidad de gneros en
aquellos donde la proteccin es deficiente, como La mistela y El boquern 2, en este
ltimo, logrndose aislar el gnero Klebsiella, el cual no se registro en otro manantial y
los cuales se encuentran protegidos y limpios sus alrededores. Las temporadas
estacionales tambin influyen en los resultados, ya que a pesar de la seguridad en la que
se encuentra el manantial lamos 1, en el mes de mayo se disminuyo la cantidad de
agua regularizndose en el mes de junio, en el cual se observ un aumento considerable
de organismos coliformes, lo que hace pensar que posibles bacterias se adhieren a las
tuberas y crecen al presentarse condiciones adecuadas, al incrementarse el nivel del
agua del manantial las bacterias son arrastradas, reflejndose en los resultados
obtenidos. Por otro lado, las temperaturas registradas en el agua de los manantiales
representa una variante de importancia, ya que se observa que a menor temperatura,
menor cantidad de gneros presentes as como menores concentraciones de organismos
coliformes, por otro lado, el pH registrado en el agua de los manantiales no muestra
gran variacin durante las estaciones muestreadas, por lo que no marca influencia
alguna para la presencia o no de los gneros reportados.
Vl.- CONCLUSIONES
1. Los resultados obtenidos de los anlisis bacteriolgicos realizados en los
manantiales Palenquillo, Ocotita, lamos 1, La fragua, La mistela, Poza verde y
El boquern 2, permiten determinar que ms del 85% de los mismos, se
encuentran contaminados con la presencia de coliformes totales y fecales.
2. Conforme a los resultados obtenidos y de acuerdo a lo establecido por la Norma
oficial mexicana NOM-127-SSA1-1994, la calidad bacteriolgica del agua es
deficiente en los manantiales Palenquillo, Ocotita, lamos 1, La mistela, Poza
verde y El boquern 2, del municipio de Banderilla, Ver., debido a la presencia
de coliformes totales y fecales, los cuales deben estar ausentes en cada 100 ml.
de agua para consumo humano.
3. El manantial La fragua no present en ningn muestreo coliformes totales o
fecales, sin embargo, cultivos realizados de las muestras de aguas de este
manantial permitieron obtener cepas pertenecientes al gnero Pseudomona spp.
en los meses de Marzo, Abril y Junio. El gnero Pseudomona, esta compuesto
por diversas especies que son consideradas patgenos oportunistas, por lo que se
concluye que su presencia en las aguas de este manantial, por ser consumido por
poblacin asentada en sus cercanas, representa un riesgo para su salud.
4. An cuando el grupo de los coliformes totales no tiene una importancia clnica
relevante comparado con otros gneros, los gneros reportados en este trabajo
como Citrobacter spp., Klebsiella spp., Enterobacter spp. Proteus spp.,
Providencia spp. y Serratia spp., (considerados patgenos oportunistas) pueden
ocasionar bacteriemia o septicemia, diarreas, gastroenteritis, infecciones en
heridas, piel y principalmente en vas urinarias, siendo los ms susceptibles a
adquirir estas enfermedades nios, adultos mayores y personas enfermas.
5. Los gneros reportados como Salmonella spp., Vibrio spp., y la especie
Escherichia coli, fueron identificados en ms de la mitad de las muestras motivo
de anlisis, mismos que son considerados como patgenos causantes de diversas
enfermedades como diarreas que van de leves a moderadas, gastroenteritis,
infecciones en piel, en el tracto respiratorio y urinario, bacteriemia, etc., por lo
tanto, dichas aguas no son aptas para consumo humano.
VII.- ANEXOS
Agar Eosina y azul de metileno (EMB)
En un medio que se utiliza para el aislamiento y diferenciacin de coliformes de otras
enterobacterias de inters mdico y sanitario.
Agar de Soya y Tripticasena (TSA)
Es un medio slido muy rico en nutrientes. Permite la multiplicacin abundante y
satisfactoria de grmenes de desarrollo difcil y exigentes.
Agar de Hierro y Triple Azcar (TSI)
Este medio diferencial es utilizado para la diferenciacin
e identificacin de
Caldo de triptona
Se utiliza para observar la presencia de indol. La prueba requiere que se le agregue el
reactivo de Kovacs.
Agar Citrato de Simmons.
Se
Agar TECH
Es similar al agar PIA, ya que solo vara en la cantidad de glicerol que se agrega, sin
embargo, tienen el mismo fin y sirve para observar fluorescencia.
23.3
1M
2M
3M
4M
5M
6M
7M
Temperatura C
20
17
15
10
5
0
Enero
Marzo
Abril
Mayo
Junio
Meses
10
9.27
8
7
pH
1M
6.3
2M
4M
5M
6M
7M
1
0
Enero
Marzo
Abril
Meses
Mayo
Junio
VIII.-REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS
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